JPH07502734A - 血液損失を減少する方法および組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 血液損失を減少する方法および組成物 発明の背景 血液損失は、心臓開口および池の主な手術の重大な併発である。

心臓手術の患者は、移入される提供者の血液の著るしい割合をしめる。血液の輸 血は疾患伝達の危険および逆反応の危険を有する。加えて、提供者の血液は高価 でありそしてしばしば供給を超えて要求する。

血液損失を減少する薬学的および他の方法並びに移入に対する必デスモブレスン ン　アセテート（ｄｅｓｍｏｐｒｅｓｓｉｎ　ａｃｅｔａｔｅ）が試験されたが 、デスモブレスンン　アセテートに関する結果は決定的でなく、そしてこれらの 試剤のいずれも術後の輸血に対する必要性を排除することはできなかった。

ウシ　アプロチニンは、術中の血液損失を減少させるのに有効で１９８９）　、 Ｌかし低血圧および潮紅（ボレール等、Ａｎａｅｓｔｈｅｓｉａ　４５　：８５ ３−８５４．１９９０）を含む不都合な作用およびアレルギー反応（ディートリ ンチ等、同上）報告された。それにすてにさらされている患者においてアプロチ ニンの使用は推奨されない（ディートリッチ等、同Ｆ）。血液誘導アプロチニン の使用は、ウィルス性疾患の伝達の危険を除去しない。更に、アプロチニンは米 国において使用が未だ認められていない。

術中および術後、血液の損失を減少するための信頼できかつ広く適用できる方法 および組成物に対する必要性が業界に存する。特に、血液誘導製品に頼らない非 −イムノゲンの方法に対する必要性が存する。また、アプロチニン治療にみられ る不都合な副作用を伴わない方法の必要がある。本発明は手術中の血液損失を減 少するための改善された方法および組成物を提供することによりこの必要性を満 足する。

発明の開示 本発明の範囲内で因子Ｘ１１１が、手術を受ける患者において術中血液損失の減 少のための医薬組成物の製造に対して用いられる。

本発明はまた、手術を受ける患者において術中血液損失を減少する方法を提供し 、この方法において生物学的に適合性ビヒクル中に有効量の因子Ｘｌｌ＋を患者 に投与する。一つの嘘様において、因子Ｘｌｌ＋を患者に注射薬として、典型的 には手術前、１日以内に投与する。他の態様において、因子Ｘ１１１を患者の体 重１ｋｇ当たり０．１−１．０ｍｇ、好ましくは０．１５−０．４　ｋｇの用量 で投与する。他の態様において、アプロチニンも又患者に投与される。

本発明のこれらおよび他の面は次の詳細な記載を参照して明らかになるであろう 。

発明の詳細な記載 本発明は、手術を受ける患者において、特に胸の又は腹の手術又は多量の血液の 損失が起こり得る他の手術を受ける患者において、術中の血液損失を減少させる ための改善された方法および組成物を提供する。これらの方法および組成物は、 全提供者の血液又は血液製品に対する必要性を減少又は排除し、これにより感染 の危険性および他の不都合な副作用並びに手術の費用を減少させる。従って、水 洗は正常な患者、すなわち先天性の又は他の術前の出血疾患、例えば凝固因子の 欠損症又は欠乏症を有しない人における血液損失を減少させるのに有用である。

血液損失における減少は、術中血液損失の減少として、減少せしめられた術後ド レナージとして、又は双方として見られる。

本発明の範囲内において、有効量の因子Ｘ１１１を生物学的に適合性ビヒクルと 組合わせそして患者に投与する。適当なビヒクルには、滅菌した、非−発熱性水 性希釈液、例えば注射用滅菌水、滅菌緩衝溶液又は滅菌食塩水が含まれる。得ら れた組成物は静脈注入により又は輸液により術前および／又は術中に患者に投与 される。好ましい態様において、因子×１１１組成物は、術前１週までにしかし 好ましくは術前１日以内に注射薬として投与される。

因子Ｘ１１１　（また、「フィブリノリガーゼ（ｆｉｂｒｉｎｏｌｉｇａｓｅ） Ｊとして知られる〔ローランド等、Ｐｒｏｇ、ＩＩｅｍｏｓｔ、Ｔｈｒｏｍｂ、 ５　：　２４５−２９０゜１９８０３および「フィブリン安定化因子」としても 知られる〔クルチウスおよびローランド、Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｅｎｚｙｍｏｌ、　 ４５：　１７？−１９１，１９７６］　）は、活性化されるとき、フィブリン分 子の側鎖間および他の基質間の分子内γ−グルタミルーε−リジン架橋結合を形 成するその能力によって特徴づけられる。酵素が２個のａサブユニットおよび２ 個のｂサブユニット（ａ２ｂｚと称す）の四量体酵素前駆体としてプラスマ中に 存在する。これらの酵素前駆体形のいずれも本発明において使用でき、並びにそ の特徴的架橋結合活性を保持する因子Ｘ１ｌｌの遺伝子工学で作成された変異体 も使用できる。

本発明において、因子Ｘ１１１の「有効量」は、術中および術後、血液の損失を 少なくとも１５％だけ減少させるのに十分な量として定義される。投与される因 子ｘ１１１の量は、因子Ｘ１１１の重上のプラスマレベルを与えるのに十分であ ろう。因子Ｘ１１１の有効量は、一般に患者の体重１ｋｇ当たり約０．１〜１． ＯＢの範囲内であり、すなわち７０ｋｇの患者に対し約１０ｍｇ〜約７０ｍｇの 用量である。患者の体重１ｋｇ当たり約０．１５ｍｇ〜約０．４ｍｇの範囲内の 用量は、実際に好ましい。投与される因子Ｘ１１１の実際の量は、手術の性質お よび予じめ存在する因子Ｘ１ｌｌレベルを含めた患者の全体的状態の如き因子に 一部は依存するであろう。術中の過剰の血液損失の場合には、追加の因子Ｘ１１ １が投与できる。

本発明の一つの態様において、因子Ｘ１１１はアプロチニンと組合せて投与され る。アプロチニン（例えば、トラシロール（Ｔｒａｓｙｌｏｌ）、バイエル社、 レーベルキュセン、ドイツ）は、術前および術中そしてオキシゲネータ−（ｏｘ ｙｇｅｎａｔｏｒ）を介し静脈内注入を含めた、当業者に公知の方法に従って投 与される。一般に、約２　Ｘ　１０’　ＫＩＵないし８ＸｌＯ’にＩＵの用量が 、患者の体重および手術の長さ等の因子に応じて用いられるであろう。典型的に は、約２　Ｘ　１０’　ＫＩＵの用量が体外循環のブライミング（ｐｒｉｍｉｎ ｇ）容量中に与えられる。追加の２Ｘ１０’に団が１時間当たり約５００．０Ｏ ＯＫ　１０の連続投与と共に、手術前負荷用量として与えられることができる。

ローストン等、同上、ジートリッヒ、同上およびフレートリッヒ、同上（これら は引用してその内容を本発明に加える）を参照のこと。

本発明において使用するための因子Ｘｌｌ＋は、フックおよびホールれらは引用 してその内容が本発明に加入される）によって開示された如き、公知の方法に従 ってブラスマから調製できる。因子ｘ１１１がらのａ２ダイマーは、米国特許３ ．９０４．７５１　、　３．９３１．３９９　、４．５９７．８９９および４． ２８５．９３３（これらは引用して本発明にその内容が加えられる）に開示され た如き胎盤から調製できる。しかし疾患伝達の危険性を有する血液−又は組織− 誘導製品の使用を避けるため組換え体因子Ｘｌｌ＋を使用することが好ましい。

組換え体因子Ｘｌｌ＋の製造方法は、業界公知である。例えばダビ等、ヨーロッ パ特許２６８．７７２およびブルンドマン等、オーストラリア公開６９８９６／ ９６　（これらは引用してその内容が本発明に加えられる）を参照のこと。好ま しい態様において、因子Ｘ１ｌｌ　ａ、ダイマーは同時米国特許出願０７／７４ １．２６３およびＰＣＴ出願ＵＳ９２１０６６２９（これらは引用してその内容 が本発明に加えられる）に記載される如く、酵母菌サツカロマイセス　セレビシ ェ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ　ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）中て細胞質的に調製 される。細胞を集め次いで溶解させ、そして澄明なライセードを調製した。ライ セードを、誘導アガロース、例えばＤＥＡＥ高速流セファ０−ス（Ｓｅｐｈａ− ｒｏｓｅ）　（登録商標）（ファルマシア）等のカラムを用い、中性ないしわず かにアルカリ性ｐｌ＋でアニオン交換クロマトグラフィーにより分画する。次い で、因子ｘ１１１を、溶出液を濃縮し次いてｐｌ＋を５．２〜５．５に調節する ことにより、例えばコハク酸アンモニウムに対しダイアフィルターにかけること により、カラム溶出液から沈殿させる。次いで沈殿物を溶解させ次いで通常のク ロマトグラフィー法、例えばゲル濾過および疎水性相互作用クロマトグラフィー により更に精製する。

当業者に明らかなように、免疫応答を誘発する危険性を減少させるため患者と同 −遺伝子型の因子Ｘｌｌ＋蛋白質を用いることが好ましい。非−ヒト因子Ｘｌｌ ＋の製造および特徴は、中村等（Ｊ、Ｂｉｏｃｈｅｍ。

７８・＋２４７−１２６６、１９７５）により開示された。本発明は獣医学の手 順においてそのような因子Ｘｌｌ＋蛋白質の使用を包含する。

前記の如く、本発明方法は実質的血液損失が期待される外科的手順に特に適用で きる。これらの手順には胸の手術、例えば心臓開口手術および特にくりかえしの 心臓手術；および腹の手術、例えば結腸切除および肝臓又は膵臓損傷の修復が含 まれる。

次の実施例は本発明を説明するものであるが、本発明を制限するものではない。

例１ 正常な血液凝固因子を有する２０匹の成長雄家兎を、各々１０匹からなる２群に 分ける。実験群に、２５ｍＭのグリシン、０．２５ｍＭのＥＤＴＡおよび５％ス クロース、ｐＨ７，４中の１０ｍｇ／ｍｌの組換え体因子Ｘ１ｌｌ　ａ２ダイマ ー１０ｍｇ　（ブラスマ因子Ｘｌｌ＋レベルを３〜５倍の正常まで上昇させるの に十分）の静脈内注射薬を投与する。対照群にビヒクルのみの同等の注射薬を投 与する。次いで動物を麻酔し次いでそれらの腹を外科的に開く。膵臓を開放しそ して予備駅員したガーゼ三角布上に置く。４回の標準化した裂傷を毎動物の膵臓 において行いそして次の観察を行う： １、出血時間、可視的に推定 ２、血液損失、乾燥および損傷後１５分後の湿ガーゼ重量間の差異として推定。

例２ 心肺のバイパスにより心臓手術を受ける予定の７０ｋｇの成人男性患者を、２５ ｍｇの合計用量に対し、２５＋ｎＭのグリシン、０．２５ｍＭの！！ＤＴＡ、５ ％のスクロース、ｐＨ７，４中の４ｍｌの因子Ｘｌｌ＋の静脈内注射により処理 する。患者を、短時間作用パルピッレートを用い引き続きハロタンおよびパンク ロニウム（ｐａｎｃｕｒｏｎｉｕｍ）で維持する標準法により麻酔する。ヘパリ ンを投与し次いで大動脈および静脈カニユーレを挿入後、バイパスを設けそして 手術を行う。バイパスを除去後、残留ヘパリン化をブロタミンスルフヱートの投 与により変える。心腹および間膜ドレーンを、胸骨切開の閉鎖前に挿入し、次い で吸引を適用する。ドレナージ量を監視する。ドレーン内およびスワブ上の血液 損失、およびヘモグロビンの降下を治療の有効性決定のため測定する。

例３ 心肺のバイパスにより心臓手術を受ける予定の７０ｋｇの成人男性患者を、例２ における如く因子Ｘｌｌ＋を用いて処理する。患者を、標準法により麻酔する。

ヘパリンを投与し次いで大動脈および静脈カニユーレを挿入後、バイパスをブラ イミング（ｐｒｉｍｉｎｇ）容量のアプロチニン（トランロール（Ｔｒａｓｙｌ ｏｌ）　、バイエル）の２　ＸＩＯ’　ＫＩＵと共に設は次いで手術を行う。バ イパスを除去後、残留ヘパリン化をプロタミンスルフェートの投与により変える 。６膜および間膜ドレーンを、胸骨切開の閉鎖前に挿入し、次いで吸引を適用す る。ドレナージ量を監視する。

本発明の幾つかの態様を、説明の目的のため詳しく説明したが、本明細書におい て記載した方法および製剤は、本発明の範囲の精神および範囲を離れることなく 改変され得る。従って、本発明は請求の範囲に限定されるものではない。

国際調査報告 ｌ−１１・〜１−−−−−−−＾−〇１ｔｃｏｌｌｅ＠−４・ＰＣＴ／ＵＳ９２ ／１１２４１ＰＣＴ／ＩＪＳ　９２／１１２４１　９Ａ１ｍ　６１１６７Ｂ

Claims (14)

【特許請求の範囲】
1. １．手術を受ける患者における術中血液損失の減少のための医薬薬組成物の製造 に対する因子ＸＩＩＩの使用。
2. ２．手術を受ける患者における術中血液損失を減少させるための医薬組成物であ って、生物学的に適合性のビヒクル中に因子ＸＩＩＩを含んでなる、前記医薬組 成物。
3. ３．因子ＸＩＩＩが因子ＸＩＩＩａ２ダイマーである、請求の範囲第２項記載の 組成物。
4. ４．因子ＸＩＩＩが組換え体因子ＸＩＩＩである、請求の範囲第２項記載の組成 物。
5. ５．手術を受ける患者における術中血液損失を減少する方法であって、生物学的 に適合性のビヒクル中の有効量の因子ＸＩＩＩを患者に投与することを含んでな る、前記方法。
6. ６．因子ＸＩＩＩを手術前注射薬として投与する、請求の範囲第５項記載の方法 。
7. ７．因子ＸＩＩＩを手術前１日以内に投与する、請求の範囲第６項記載の方法。
8. ８．因子ＸＩＩＩを患者の体重１ｋｇ当たり０．１〜１．０ｍｇの用量で投与す る、請求の範囲第５項記載の方法。
9. ９．因子ＸＩＩＩを患者の体重１ｋｇ当たり０．１５〜０．４ｍｇの用量で投与 する、請求の範囲第５項記載の方法。
10. １０．因子ＸＩＩＩが因子ＸＩＩＩａ２ダイマーである、請求の範囲第５項記載 の方法。
11. １１．因子ＸＩＩＩが組換え体因子ＸＩＩＩである、請求の範囲第５項記載の方 法。
12. １２．更に患者にアプロチニンを投与することを含んでなる、請求の範囲第５項 記載の方法。
13. １３．アプロチニンを、２×１０６ＫＩＵ〜８×１０６ＫＩＵの用量で投与する 、請求の範囲第１２項記載の方法。
14. １４．手術が胸の手術である、請求の範囲第２項記載の方法。