JPH07501331A - 改良された診断用の造影のためのゲル粒子造影剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 発明の名称 改良された診断用の造影のためのゲル粒子造影剤関連する出願への言及 本件出願は、１９９０年４月１０日付で受理された同時継続中の出願一連番号　 ５０７．１２５の部分継続出願である。

ヒトの疾病の診断に使用されている種々の造影技術が存在する。使用された最初 の造影技術の一つはＸ−線である。Ｘ−線においては患者の身体から製造された 影像は身体構造の密度の異なりを反映している。この造影技術の診断用の実用性 を改良するには、造影剤を使用して種々の構造の間の、たとえば消化管とその周 囲の組織との間の密度の差異を増加させる。Ｘ−線消化管研究には、食道、胃、 腸管および直腸を可視化するために、たとえばバリウム造影剤およびヨウ素化造 影剤が広く使用されている。

超音波が他の造影技術である。超音波においては、音波が変成器をを経由して也 者に送られる。音波が体内を進行する際に音波は体内の組織および液体からの妨 害に遭遇し、超音波は反射されるか、または吸収される。音波が界面により反射 される場合には、音波は変成器中の受信器により検出され、加工されて影像を形 成する。体内の組織および液体の音響学的性質が得られる影像に現れるコントラ ストを決定する。標的領域と周辺領域との間の音響学的差異を増加させる造影剤 が探索されてきた。たとえば、重金属が超音波用の造影剤として試験されている 。

磁気共鳴造影（ＭＲＩ　）はＸ−線とは異なり、イオン化放射線を使用しない比 較的新しい造影技術である。コンピューター断層法と同様にＭＲＩ　も身体の断 面影像を作ることができるが、ＭＲＩ　はいかなる走査平面においても（すなわ ち、類推切断方向の、頭頂切断方向の、来状縫合切断方向の、またはオーソゴナ ル（ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ）な平面において）影像を作り得るという付加的な利 点をも有している。不幸なことに、身体の診断様式としてのＭＲＩ　の十分な利 用は効果的な造影剤がないために阻害されている。疾病の検出を改良するために ＭＲＩ　用の造影剤が開発されてきたが、これらの努力の大部分は造影剤として の常磁性金属のキーレート剤を使用する方向を指向してきた。伝統的に使用され るキーレート剤は、キーレートイオンの緩和性が減少してキーレート剤から金属 イオンが逸散し、潜在的な毒性の原因となり得るという欠点を有している。この 種のキーレート剤はさらに、腎臓により急速に除去されて、たとえば肝臓の造影 用の効果的な造影剤としては機能しないという欠点をも有している。より良好な 造影剤を利用し得るならば、造影様式としてのＭＲＩ　の全体的な有用性は改良 されるであろう。

Ｘ−線造影、超音波造影およびＭＲＩ　造影に使用するための新規な、かつ／ま たはより良好な造影剤が要求されている。本発明はこれらの、およびその他の重 要な目的を指向するものである。

発明の概要 本発明は、診断用の造影に有用な造影剤に関するものである。特に一つの態様に おいては、本発明は、好ましくは直径約９０μｍ以下の、少な（とも１種の造影 性金属を捕らえる少なくとも１種の重合体を含むゲル粒子を含む造影剤を指向す るものである。使用する重合体は好ましくは架橋されていない。本発明はまた、 少なくとも１種の重合体と少なくとも１種の造影性の金属とを任意にゲル化剤の 存在下に混和してゲルを形成させ、この混合物を特性化して粒子を形成させるこ とにより製造した造影剤、およびこれを製造する方法に関するものでもある。

本発明はまた、（ｉ）上記の造影剤の１種または２以上を患者に投与し、（ｉｉ ）磁気共鳴造影法、超音波造影法またはＸ−線造影法を用いて患者を走査してそ の領域の可視像を得る各段階を含む、患者の内部領域の影像を与える方法に関す るものでもある。加えて、本発明は（ｉ）上記の造影剤の１種または２種以上を 患者に投与し、（ｉｉ）磁気共鳴造影法、超音波造影法またはＸ−線造影法を用 いて患者を走査して患者の何らかの疾病を有する組織の可視影像を得る各段階を 含む、患者の疾病を有する組織の存在の診断方法をも包含する。

さらに、本発明記載の化合物と通常の診断キット用の諸成分を含むキットも提供 される。

本発明のこれらの態様およびその他の態様は、以下の図面と組み合わせた以下の 詳細な記述から、より明らかになるであろう。

図面の簡単な記述 図１は、本発明記載のゲル粒子の可能な構造構成の図式表示である。

特に、図１ａは“弁箱”模型に従う金属イオンの捕捉による重合体鎖の結合を示 す図式表示である。図１ｂは、その中の酸素原子が二価金属Ｃａ”と配位結合し ていることを示す図１ａ　の箱内領域の詳細である。図ＩＣは、幾つかの重合体 鎖の積層を含むより複雑な構造構成の図式表示である。

１種または２種以上の造影性の金属を捕捉する１種または２種以上の重合体を有 するゲル粒子を含む造影剤が本発明により提供される。

これらの造影剤は熱安定性であり、かつ長期の貯蔵に関して安定であることが示 されており、双方の安定性とも商業的な使用において明らかな利点である。本件 造影剤はまた、ごれまで公知の他の金属含有造影剤のあるものと同等な、または それより良好な影像を得るために必要な造影性金属の全濃度がしばしば低いこと も示されている。しばしばより高価な、かつ潜在的に有毒な金属の使用が減少す るので、金属の量を最小限に抑制することにより毒性および経費を減少させるこ とができる。本発明記載の造影剤は、多くの異なる応用面において有用な高度に 効果的な造影剤であることが見いだされている。

当該技術において公知の広範な生体共存性の重合体のいかなるものも、本発明記 載の造影剤の製造に使用することができる。本件明細書中で重合体の語との関連 で使用する生体共存性の語は１．その通常の意味で、すなわち、組織、体液およ び身体の他の成分と、関連する特定の応用面において不利益な様式では実質的に 相互作用しない重合体を表すものとして使用される。当業者には容易に了解され るであろうように、多くの型のこの種の重合体が入手可能である。たとえば、本 発明に有用な重合体には天然起源のものも、合成起源のものも、半合成起源のも のも可能である。本件明細書中で使用する半合成重合体の語は、何らかの様式で 化学的に改質された天然重合体を表す。好ましくは、本件重合体は天然または半 合成のもの、最も好ましくは天然のものである。さらに、本件明細書中で使用す る重合体の語は、２個またはそれ以上の繰返し単量体単位を、好ましくは３個ま たはそれ以上の繰返し単位を、より好ましくは５個またはそれ以上の繰返し単位 を、最も好ましくは１ｏ個またはそれ以上の繰返し単位を含む化合物を表す。

本発明における使用に適した例示的な天然重合体には、アラビナン、フルクタン 、フカン、ガラクタン、ガラクトロン酸ルルカン、マンナン、キンラン（たとえ ばイヌリン）、レバン、フコイダン、カラギーナン、ガラクトカロローズ、ペク チン、ペクチン酸、アミロース、プルラン、グリコーゲン、アミロペクチン、セ ルローズ、デキストラン、ブスツラン、キチン、アガロース、ケラチン、コンド ロイチン、デルマタン、ヒアルロン酸、アルギン酸、キサンチンガム、澱粉、な らびに他の種々の天然の単独重合体または共重合体、たとえば以下のアルドーズ 、ケトーズ、酸またはアミン　エリトローズ、トレオーズ、リボース、アラビノ ース、キシロース、リキソース、アロース、アルドロース、グルコース、マンノ ース、グロース、イドース、ガラクトース、クロース、エリＩ・ルロース、リブ ロース、キノルロース、プシコース、フルクトース、ソルボース、タガソース、 グルクロン酸、グルコン酸、グルカル酸、ガラクトロン酸、マンヌロン酸、グル コサミン、ガラクトサミンおよびニューラミン酸の１種または２種以上を含有す るもの、ならびにその天然産の誘導体が含まれ得る。例示的な天然重合体にはま た、当業者には容易に了解され得るであろうように、たとえばポリペプチドおよ びポリアルコールも含まれ得る。例示的な半合成重合体には改質天然重合体、た とえばカルボキシルメチルセルローズ、ヒドロキシメチルセルローズ、ヒドロキ シプロピルメチルセルローズ、メチルセルローズおよびメトキノセルローズが含 まれる。本発明における使用に適した例示的な合成重合体にはポリエチレン類（ たとえばポリエチレングリコール、ポリオキシエチレン、ポリオキシエチレング リコールおよびポリエチレンテレフタレート）、ポリプロピレン類（たとえばポ リプロピレングリコール）、ポリウレタン類（たとえばポリウレタン尿素）、プ ルロン酸およびアルコール類、ポリビニル重合体（たとえばポリビニルアルコー ル、ポリ塩化ビニルおよびポリビニルピロリドン）、ナイロン、ポリスチレン、 ポリ乳酸、フッ素化炭化水素、フッ素化炭素（たとえばポリテトラフルオロエチ レン）、ポリアクリル酸エステル類（たとえばポリメタクリル酸メチル）、ポリ アクリル酸類（たとえばポリメタクリル酸）およびポリアクリルアミド、ならび にその誘導体が含まれる。

この種の重合体には、その寸法において、たとえば分子量は約５００ないし約５ ００．０００の範囲が可能である。ある場合には、この重合体の好ましい分子量 は約１００．０００ないし約５００．０００である。他の変量に適合するために は、好ましい分子量は約５００ないし約１００．０００である。

好ましくは、使用する重合体は比較的高い水結合容量を有するもの、すなわち、 その重量の少なくとも約５０％の水と結合し得る重合体である。

消化管領域の造影が望ましい場合には、この重合体は好ましくは消化管領域から 実質的に吸収されないもの、または消化管領域内で実質的に分解しないものから 選択する。

好ましい重合体にはポリカラクツロン酸およびペクチンが含まれる。

当業者は気付くであろうように、ペクチンは一般にはポリカラクツロン酸のメチ ルエステルである。特に好ましいものは低メトキシペクチンである。“低メトキ ン”の語は、メトキノル化が約４０％以下である（すなわち、メチルエステルに 転化しているカルボン酸基が約４０％以下でアル）ペクチンを育味する。当業者 は、ペクチンのメトギシル化度は塩基を用いてペクチンを滴定して測定し得るこ とを認めるであろう。

当業者には公知の本発明における使用に適した多くの造影性の金属には、たとえ ば常磁性金属イオンおよび／または重金属イオンが含まれる。

たとえば磁気共鳴造影に有用な例示的な金属には、常磁性金属イオン、たとえば ガドリニウム、マンガン（Ｍｎ”およびＭｎ”）　、銅、クロミウム、鉄（Ｆｅ ”およびＦｅ”）　、コバルト、エルビウム、ニッケル、ユーロピウム、テクネ チウム、インジウム、サマリウム、ジスプロシウム、ルテニワム、イッテルビウ ム、イツトリウムおよびホルミウムが、最も好ましくはマンガン（Ｍ　ｎ　′″ りが含まれる。たとえば超音波造影またはＸ−線造影に有用な例示的な金属は、 重金属、たとえばハフニウム、ランタン、インテルビウム、ジスプロシウムおよ びガドリニウムである。

これらの、または他の磁気共鳴造影、超音波造影およびＸ−線造影に有用な造影 性金属は、当業者には容易に了解されるであろう。

本発明記載の造影剤を製造するには、最初に重合体と造影剤との間で添加混合物 を形成させる。添加混合物とは、造影性の金属が媒体を含有する重合体に添加さ れているものを意味し、共有結合により重合体分子に化学的に結合しているもの ではない。造影性の金属を捕捉するための重合体の部分的な、または完全なゲル 化は、これらの２種の成分を単に添加混合すれば瞬時に起こり得る。たとえば、 アガロースと高メトキン（約４０％以上）ペクチン重合体とは一般に瞬時にゲル 化し、造影性の金属を単に重合体に添加するのみでこの造影性金属を捕捉する。

本発明の他の具体例においては、添加混合物の部分的な、または完全なゲル化は ゲル化剤の添加の結果として生じ得、またはゲル化剤の添加により容易になり、 ここで重合体による造影性金属の捕捉が起きる原因となる。

本件明細書中で造影性の金属を捕捉する重合体との関連で使用する“捕捉”また はその変形の語は、重合体が金属を物理的に取り囲む、または包み込むことを意 味する。この種の捕捉は、静電的な相互作用、水素結合、ファン・デル・ワール ス力等を通じて起こり得る。

特に、瞬時にはゲル化しない重合体と金属とでゲル化を起こさせるには、または ゲル化を増強するには、ゲル化剤、たとえば多価金属カチオン、糖類およびポリ アルコールを使用することができる。ゲル化剤として有用な例示的な多価金属に は、カルシウム、亜鉛、マンガン、鉄およびマグネシウムが含まれる。有用な糖 には単糖類、たとえばブドウ糖、ガランｉ・−ス、果糖、アラビノース、アロー スおよびアルドロース、三糖類、たとえば麦芽糖、ショ糖、セロビオースおよび 乳糖、ならびに多糖類、たとえば澱粉が含まれる。好ましくは、この糖は単一の 糖、すなわち単糖または三糖である。本発明に有用なポリアルコールゲル化剤に は、たとえばグリシドール、イノシトール、マンニト−ル、ソルビトール、ペン タエリトリ１ヘール、ガラントールおよびポリビニルアルコールが含まれる。最 も好ましくは、本発明に使用するゲル化剤はショ糖および／またはカルシウムで ある。本発明記載の種々の配合剤に使用し得る特定のゲル化剤は、本件開示を一 読すれば当業者には容易に了解されるであろう。たとえばショ糖はポリガラクツ ロン酸とマンガンとのケル化添加混合物に特に有用である。同様に、低メトキソ ベクチンはカルシウムイオンを添加した際に特に急速にゲル化する。重合体およ び造影性金属とゲル化剤との間には若干の重なりがあることに注意すべきである 。

ある種の化学剤は重合体または造影剤として有用であり、かつ付加的に、瞬時に はゲル化しない重合体と造影剤との混合物中でゲル化を起こさせるにも有用であ る。たとえばショ糖は有用な重合体分子であるが、また、たとえばポリガラクツ ロン酸とマンガンとの添加混合物に添加してこの添加混合物のゲル化を起こさせ ることもできる。さらに、鉄は造影剤として、および瞬時にはゲル化しない添加 混合物にゲル化を起こさせるゲル化剤としての双方に効果的である。

いかなる特定の理論にも束縛されることを意図するものではないが、本発明記載 の重合体分子および造影性金属はゲル化工程の間、図１に、およびグランド（Ｇ ｒａｎｔ）ら、ＦＥＢＳ　レター（ＦＥＢＳ　Ｌｅｔｔｅｒｓ）　、　３２巻、 １号、１９５　１９８ベー）（１９７３）に記述されているもののような“弁箱 ”型の構造中に、または、たとえばフオルマート（Ｖｏｌｌｍｅｒｔ）　。

亀釦邦し％　（Ｐｏｌｙｍｅｒ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）　、　１−８ページおよ び５４１−５６１ヘージ、ンユブリンガー出版（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａ ｇ、　Ｎ、Ｙ、、　Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ）　（１９７３）に記述されているものの ような緊密なコイル状の凝集体中に配列していると考えられ、そのそれぞれの開 示の全体が本件明細書中に引用文献として組み入れられている。特に、重合体の 溶液中では重合体は不規則に運動していると考えられるが、造影性金属、および ある場合にはゲル化剤を添加すると、重合体鎖は重合体と造影性金属および／ま たはゲル化剤との相互作用により合一して造影性金属を゛捕捉”し、ここで金属 の周囲に”弁箱゛または緊密な凝集体を形成する。この種の現象は、その開示全 体が本件明細書中に引用文献として組み入れられているアドキンス（Ａｔｋｉｎ ｓ）ら、生物重合体（Ｂｉｏｐｏｌｙｍｅｒｓ）　、１２巻、　＋８７９−１８ ８７ページ（１９７３）に部分的に論じられている。特に、造影性金属および／ または多価金属カチオンゲル化剤は２個またはそれ以上の隣接する重合体の間に 橋を形成し、ゲル化を起こさせると考えられる。糖類またはポリアルコール重合 体および／またはゲル化剤が低エネルギー法曹を与え、これにより重合体および 造影性金属をより効果的にゲル化させるとも考えられる。

当業者は認めるであろうように、重合体、造影性金属、および任意にゲル化剤の 添加混合物は使用した特定の配合剤に応じて異なる堅さのゲルを形成するであろ う。たとえばカルシウムイオンは種々の重合体と比較的堅固なゲルを形成し、マ ンガンイオンおよび鉄（ＩＩ）イオンは比較的脆弱な、若干含水様のゲルを形成 する。本発明の関連ではゲルの語は半固体物質を呼ぶものであり、含水様のゲル も堅固なゲルも包含する。

好ましくは、本件ゲルは堅固なものである。堅固なゲルとは、ゲル中の気泡の上 昇が不可能であることにより示されるような、流動性を失ったゲルである。この 現象は、たとえばオディアン（Ｑｄｉａｎ）　、重合の原理（Ｐｒｉｎｃｉｐｌ ｅ　ｏｆ　ｔ”ｏｌｙｍｅｒｉｚａｔｉｏｎ）　、　１−３９．９６−１１２お よび６１１−６１４ページ、マグロ−・ヒル社（ＭｃＧｒａｗ−ｔｌｉｌｌ　Ｃ ｏ、、　Ｎ、Ｙ、、　Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ）（１９７０）に記載されており、その 開示全体が本件明細書中に引用文献として組み入れられている。たとえば含水様 のゲルは一般にマンガンとポリガラクツロン酸との組合わせにより形成されるで あろうし、堅固なゲルは一般にマンカン、ポリカラクツロン酸およびカルシウム の組合わせにより形成されるであろう。当業者は気付くであろうように、本件開 示を一読すれば、ゲルの堅固さの程度は重合体が造影性金属を保持し得る程度に 関連する。一般には、堅固なゲルは生理的食塩水に対する長期の（２４時間を超 える）透析において少なくとも約５０％の造影性金属を、好ましくは少なくとも 約６０％の造影性金属を、より好ましくは少なくとも約７０％の造影性金属を、 さらに好ましくは少なくとも約８０％の造影性金属を、最も好ましくは少なくと も約９０％の造影性金属を安定に保持することが可能である。

本発明に従えば、得られるゲルを続いて処理してゲル粒子を形成させる。この種 の処理には、当業者には容易に了解されるように、混合機処理、微細乳化、微細 流動化、押出し、超音波崩壊処理、親油化、ボール混合、コロイド混合等のよう な種々の技術のいかなるものも、また、そのいずれかの、および全ての組合わせ も含まれ得る。たとえば混合機処理は幾つかの市販の混合機のいかなるものを用 いても実行することができ、所望ならば、これに続いて規定の寸法の濾過器を有 する市販の押出し装置を用いて押出しすることもてきる。これらの方法およびそ の他の方法は当業者には周知されている。本件明細書中で使用する特性化の語お よびその変形は、上記の、または他の方法のいずれかによる、好ましくは比較的 均一な寸法の微小粒子の形成を呼ぶものである。

上記の方法を使用することにより、マイクロメートルまたはナノメートルの寸法 のゲル粒子を製造することができる。この粉子は、好ましくは約９０　ａｍ以下 の直径を、より好ましくは約５０ｍないし約９０岬の範囲の直径を有する。大き めのゲル粒子、たとえば約１−ないし約９０μｍの範囲のものは腸管外の応用面 に、また消化管の研究において特に有用である。小さめのゲル粒子、たとえば平 均直径約５ｎｍないし約４００　ｎｍの、より好ましくは約１０　ｎｍないし約 　２００　ｎｍの範囲のものは、静脈内注射用の造影剤に、肝臓の造影用に、お よび生体分布の制御用に特に有用である。本発明との関連で使用されるナノゲル およびミクロゲルの語は、約１ｎｍないし＋０００　ｎｍ未満（１μｍ未満）の 範囲の（ナノゲル）、およびｌ　ｔｌｍ　（１０００ｎｍ）ないし約１０００　 ａｍの範囲の（ミクロゲル）ゲル粒子を表す。

本発明に従って製造したゲル粒子は熱および長期の貯蔵に対して安定であり、こ の特徴がこれらの造影剤を診断剤として特に魅力的なものにしている。本発明記 載のゲル粒子は乾燥状態で貯蔵することもでき、これに替えて水性媒体中で貯蔵 することもできる。

広い範囲の量の重合体、造影性金属およびゲル化剤を本発明記載の造影剤中に使 用することができるが、特に重合体は少なくとも約１重量％の、より好ましくは 約５重量％ないし約５０重量％の、一般に最も好ましくは約４０重量％の濃度で 存在する。当業者はもちろん認めるであろうように、これらの変量の中で最適な 重合体濃度が種々の要因、特に使用する重合体、使用する特定の金属、意図する 特定の診断の用途等の影響を受けるであろう。磁気共鳴造影用の常磁性金属の場 合には、造影性金属は好ましくは少なくとも約０．０１重量％の、より好ましく は約０１重量％ないし約５重量％の、最も好ましくは約０５重量％ないし０７重 量％の濃度で存在することができる。超音波造影またはＸ−線造影用の重金属の 好ましい濃度は少なくとも約０１重量％、より好ましくは約０５重量％ないし約 ３０重量％、最も好ましくは約５重量％ないし約２５重量％である。ゲル化剤を 使用する場合には、その好ましい濃度は少なくとも約０５重量％、より好ましく は約０５重量％ないし約２５重量％、最も好ましくは約５重量％ないし約１５重 量％である。

本発明に使用する重合体は、所望ならば、これらのホスホリル化した重合体を造 影性金属またはゲル化剤、たとえば多価金属カチオン（たとえばカル７ウム）と 混合した場合により急速にゲルが形成されるようにホスホリル化することができ る。一般には、重合体のホスホリル化の程度が高いほど、造影性金属をより緊密 に捕捉する堅固なゲルが得られる。

重合体のホスホリル化は、当業者には容ｇに了解されるであろう通常の技術を用 いて実施することができる。特定的には、たとえば１種または２種以上のヒドロ キシル基を含有する脂肪族または脂環状の化合物から出発して、出発物質をクロ ロポルムに懸濁させ、ついで、この懸濁液にリン酸エステル−塩化物を好ましく は滴々添加してホスホリル化を容易に実施することができる。適当なリン酸エス テル−塩化物には、そのＲがｃ（０）ＯＨ３、Ｃ（０）Ｈ，ＣＨ３、Ｃ，Ｈ，、 ｃ３ＨアおよびＣ４Ｈａから選択したものであるＣＩＰ（ＯＸＯＲ）２が含まれ る。ついで、得られるホスホリル化化合物を水で処理して対応するリン酸誘導体 に加水分解することができる。この種の加水分解した誘導体は、本件明細書中の ホスホリル化化合物の語の範囲に含まれる。非結合リンは溶液をアニオン交換体 を充填したカラムにつうじて除去することができる。

ペクチン、ポリガラクツロン酸またはポリビニルアルコールのような重合体も、 対応するホスホリル化誘導体が得られるような手法でホスボリル化することがで きる。

本発明に使用し得るホスホリル化した脂肪族および脂環状の重合体の他の製造方 法においては、尿素により触媒されたリン酸（または亜リン酸）ホスホリル化法 を便宜に使用することができる。この方法においては、脂肪族または脂環状の化 合物を尿素とリン酸（または亜リン酸）との混合物に浸漬し、ついで少なくとも ＋２０’Ｃに加熱する。

加えて、ポリビニルアルコールのような化合物のホスホリル化は、ポリビニルア ルコールを有機溶媒、たとえばピリジン、ジメチルボルムアミド、またはジメチ ルスルホキシドとトリエチルアミンとに溶解させ、ついて、この重合体溶液にン アルコキンリン酸−塩化物（（ＲＯ）２ＰＯＣ１、ここでＲはＣ＋−Ｃ＋Ｏ−ア ルキル基である）を添加する工程により実施することができる。ホスホリル化し たのちに、この重合体に水を添加し、塩酸で酸性化して加水分解することができ る。非結合リンは、溶液をアニオン交換体を充填したカラムに通じて除去するこ とができる。

化合物をホスホリル化して本発明の範囲内にあるホスホリル化重合体を製造する 他の方法は、たとえばサンダー（Ｓａｎｄｅｒ）ら、高分子科学雑誌、高分子化 学評論（Ｊ、　Ｍａｃｒｏｍｏｌ、　Ｓｃｊ、、　Ｒｅｖ、、Ｍａｃｒｏｍｏｌ 、　Ｃｈｅｍ、）　。

２巻、　５７−６２ページ　（＋９６８）　、レオナード（Ｌｅｏｎａｒｄ）ら 、応用重合体科学雑誌（Ｊ、　Ａｐｐ、　Ｐｏｌｙｍｅｒ　Ｓｃｉ、）　、　５ ５巻、　７９９−８１０ペーノ（１９６丁）、ツユレーダー（Ｓｃｈｒｏｅｄｅ ｒ）ら１重合体科学雑誌（Ｊ、　ｏｆ　Ｐｏｌｙｍｅｒ　Ｓｃｉ、）　、　４７ 巻、　４１７−４３３ページ（１，９６０）　、ケネディ−（Ｋｅｎｎｅｄｙ） ら、応用化学雑誌（Ｊ、　Ａｐｐｌ、　Ｃｈｅｍ、）　、　８巻、　４５９−４ ６４ページ（１９５８）、マーベル（Ｍａｒｖｅｌ）ら１重合体科学雑誌（Ｊ、 　ｏｆ　Ｉ’ｏｌｙｍｅｒ　Ｓｃｉ、　）　。

８巻、　４９５−　５０２ペー７、および１９９１年２月１日付で受理された米 国一連番号６４９．４３７に開示されており、そのそれぞれの開示全体が本件明 細書中に引用文献として組み入れられている。

所望ならば、特性化の前に、またはその後に当業者には公知の架橋剤を用いてケ ル粒子に使用する重合体を架橋することができる。架橋は当業者には公知の方法 により実（テすることができる。特に、重合体を結合剤部分により架橋すること ができる。この種の結合剤の構造には、たとえば以下の式 ％式％） 式中、 各Ｒは独立にＨまたはＸであり。

Ｌは置換されている、または置換されていないＣ＋−ｃ　２０−アルキル、ンク ロアルキルまたはアリール基であり；各Ｘ　は独立ｊ：　ＯＨ，ＮＨ２、ＮＨＲ ，Ｃ００Ｈ１ＣＯＯＲＳＳＨ、エポキシドまたはＺであり。

Ｙ　Ｌｔ　ＯＳＳ、ＣＯ，Ｎ　＊たは５ｉＲＲであ’）；ＺはＣ１、Ｂｒまたは 　Ｉ　であり。

各ｎは独立に０−１０であり。

ｍは０−１０．０００であり。

Ｃは０−１．０００　である のちのが可能である。結合剤は、縮合剤、たとえばシンクロへキシルカルボイミ ド（ＤＣＣ）を用いて重合体上のＣ０ＯＨ，ＯＨまたはＮＨ２を有する基と結合 させることができる。たとえば、ホルムアルデヒド、グリオキサル、エピクロル ヒドリン、ジメチルジクロロシラン、ジエポキシブタンおよびβ、β−ジクロロ エチルスルフィドを本発明記載のゲル粒子の架橋に使用することができる。たと えばホルムアルデヒドによる処理が二次的なヒドロキシル基の間の架橋につなが って、主として分子間メチレン橋を形成する。カルボキル基間の架橋は、ジェボ キノブタンおよびβ、β−ンクロロエチルスルフィドのような化学剤により形成 させることができる。所望ならば、硫黄含有架橋結合剤を使用して身体内で容易 に分解するものとすることもできる。この種の架橋結合剤にはノチオヒスー（プ ロピオン酸スクンニミノル）（ＤＳＰ）および３．３−７チオビスー（プロピオ ン酸スルホスク／ニミノル＞　（ＤＴＳＳＰ）が含まれるが、これに曜定される ものではない。本発明記載の重合体を架橋結合させる他の方法は当業者には容易 に了解されるであろうが、これには、たとえばスタロス（Ｓｔａｒｏｓ）　、生 物化学（Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）　、　２１巻、　３９５０−３９５５ペー ジ（１９８２）　（１９７６）　、０７ン（Ｌｏｍａｎｔ）ら３分子生物学雑誌 （］、　Ｍｏ１．　Ｂｉｏｌ、）　、　１０４巻、　２４３−２６１ページ、フ ォルマート（Ｖｏｌｌｍｃｒｔ）　、重合体化学（Ｐｏｌｙｍｅｒ　Ｃｈｅｍｉ ｓｔｒｙ）　、　１−８ページおよび５４１−５６１ページ、ンユブリンガー出 版（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−ｖｅｒｌａｇ。

Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ、　Ｎ、Ｙ、）　（１９７３）　、ならびにオディアン（Ｏｄ ｉａｎ）　、重合の原Ｎ　（Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅ　ｏｆ　Ｐｏｌｙｍｅｒｉｚａ ｔｉｏｎ）　、　１−３９．９６−１１２および６１１−６１４ページ、マグロ −・ヒル社　（ＭｃＧｒａｗ−１１ｉ１１　Ｃｏ６．　Ｎ、Ｙ、、ＮｅｗＹｏｒ ｋ）　（１９７０）に記載されているものが含まれ、そのそれぞれの開示の全体 が引用文献として本件明細書中に組み入れられている。重合体の架橋は任意に使 用され、一般にはゲルの安定性を増加させ、生体内経過時間を延長する目的のた めに実施される。たとえば、この種の架橋結合はたとえば静脈内造影または消化 管内造影における患者の体内てのゲルの循環時間または滞留時間を延長し得るが 、組織の炎症の程度および患者の不快感が架橋結合した重合体の使用により増加 する傾向があることが見いだされているので、この種の架橋結合は好ましくない 。したがって本発明の目的には、もちろん所望ならば架橋結合を使用してもよい が、重合体が架橋結合していないことが、すなわち非架橋結合重合体を本発明に 従って使用することが好ましい。

重合体はまた所望ならば、ゲル化または特性化の前に、またはそれに続いて、た とえばその表面に標的剤を組み入れて、または当業者には容易に了解され得るで あろうその他の方法で改質することができる。たとえば、抗体、タンパク質、炭 水化物およびレクチンのような化学剤をゲル粒子の重合体性表面に組み入れるこ とができる。これらの標的剤は、たとえば標的領域または標的器官へのゲル粒子 の局在化に有用であり得る。たとえば、抗体のＦ　ａｂ”１分画はゲルの表面に 、たとえば抗体のアミン基から重合体（たとえばポリガラクツロン酸）のカルボ ン酸基へのアミド結合を通じて共有結合させることができる。同様に、池の合成 ペプチドまたは天然ペプチドもこのようにして結合させることができる。

これに替えて、タンパク質　（たとえば抗体またはペプチド）のカルボン酸基を ゲルの重合体のアミド基またはチオール基に結合させることができる。ついで、 得られる樟識したゲル粒子を特定の組織の造影に使用することができる。たとえ ば、ゲル造影剤に共有結合した抗白血球抗原抗体の分画は結腸癌からの転移の検 出に使用することができる。当業者は認めるであろうように、本発明を利用すれ ば、標的化部位特異性造影用に主題のゲルを使用することに関する多くの可能性 が存在する。

通常の診断用キｙト成分、たとえば緩衝剤、抗菌剤、安定剤または賦形剤との組 合わせでゲル粒子を含む！＃断断手キット本発明に包含される。

出版社（１９８５）に論じられており、そのそれぞれの開示の全体が本件明細書 中に引用文献として組み入れられている。

本発明は、中音一般の造影において、がっ／または患者の疾病を有する組織の存 在の特定的な診断において有用である。本発明記載の造影法は、本発明記載の造 影剤を患者に投与し、ついで超音波造影、Ｘ−線造影または磁気共鳴造影を用い て患者を走査して患者の内部領域の、および／またはその領域内の何らかの疾病 を有する組織の可視像を得る各段階により実施することができる。患者の領域の 語は、患者の全体または患者の特定の領域もしくは部分を意味する。本発明記載 の造影剤は、肝臓の影像を得るのに特に有用である。主題の造影剤はまた、消化 管領域および脈管構造の造影にも特に好適である。本件明細書中で使用する消化 管の語は、食道、胃、小腸および大腸、ならびに直腸により画定される患者の領 域を包含する。本件明細書中で使用する脈管構造の語は、身体の、または身体の 器官もしくは部分の血管を表す。患者はいかなる型の哺乳動物であってもよいが 、最も好ましくはヒトである。

当業者は認めるであろうように、投与は静脈内、経口的、直腸内等のような種々 の様式で、種々の投与影響を用いて行うことができる。走査すべき領域が消化管 領域である場合には、本発明記載の造影剤の投与は好ましくは経口的に、または 直腸内に行う。これとは異なり、肝臓脈管のよ）な脈管構造を走査する場合に好 ましい投与様式は静脈内投与である。投与すべき有用な投与量および特定の没！ ｊ様式は、年令、体重および特定の哺乳動物およびその走査すべき領域、走査の 型、ならびに使用する特定の本発明記載の造影剤に応じて変化するであろう。典 型的には、投与量は低めのレベルで開始して所望の造影が（）られるまて増加さ せる。

当業者は認めるであろうように、使用する造影様式、哺乳動物の型、造影すべき 領域および所望の特定の診断のような要素に応じて異なる、重合体、造影性金属 およびゲル化剤の種々の組合わせを１吏用することができる。本発明記載の方法 を実施する際に、本件造影剤は単独でも、池の診断用の、治療用の、または付加 的な化学剤との組合わせででも使用することができる。この種の付加的な化学剤 には、賦形剤、たとえば風味剤、着色剤、安定剤、肩化用物實、浸透剤おゆおび 抗菌剤が含まれる。

この種の化学剤は造影剤の試験管内使用、貯蔵中の組成物の安定性、または最適 な有効性を得るために重要な他の諸性質を強調することができる。本発明記載の 造影剤は、所望ならば、たとえばオートクレーブ処理により使用に先立って滅菌 することもできる。

使用する磁気共鳴造影技術は通常のものであり、たとえばキーン（Ｄ。

リアムおよびウイルキンス（Ｗｉｌｌｊａｍ　ａｎｄ　Ｗｉｌｋｉｎｓ、　Ｂａ ｌｔｉｍｏｒｅ＞　１９８６）に記載されており、その開示の全体が本件明細書 中に引用文献として組み入れられている。考えられる磁気共鳴造影技術には核磁 気共鳴（ＮＭＲ）および電子スピン共鳴（ＥＳＲ）が含まれるが、これに限定さ れるものではない。同様に超音波技術も、その開示の全体が本件明細書中にｔｌ 、　Ｇｒｅｅｎ、Ｉｎｃ、、　ＳＬ、Ｌｏｕｊｓ、　ＭＯ）　１９７５）に開示 されているもののような、当業者には公知の通常の方法により実施される。たと えば超音波造影に関しては、この種の造影は７．５メガｌ＼ルツの線形配列変成 器を用いるエキュソン１２８走査器（Ａｃｕｓｏｎ　１２８５ｃａｎｎｅｒ）　 （ミルビタス（Ｍｉｌｐｉｔａｓ、　Ｃ八）　）て達成することができる。後加 工機能は、０に設定し、２で持続した前加工に関して線形であり得る。フレーム 速度を低下させた多重焦点帯域を大部分の影像に使用することができる。Ｘ−線 造影も通常のもノテあり、計算器身体断層写真法（Ｃｏｍｐｕｔｅｄ　Ｂｏｄｙ 　Ｔｏｍｏｇｒａｐｈｙ）　；リー（Ｊ、　Ｋ、　Ｔ、　Ｌｅｅ）　、セイゲル （Ｓ、’　Ｓ、　Ｓａｇｅｌ）およびスタンリー（ＲＪ、　５ｔａｎｌｅｙ）編 、■章、１−７ページ（レイブン出版（Ｒａｖｅｎ　Ｐｒｅｓｓ。

Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ）　１９３３）に記載されている計算器断層写真法（ＣＴ）の ようなＸ−線造影技術が含まれる。これらの、および他の造影技術はまた、スｉ ｄｇｅ、　Ｍ＾）にも記載されており、その開示の全体が本件明細書中に組み入 れられている。種々の造影技術のいかなるものも使用することができるが、好ま しい造影様式は磁気共鳴造影、特に核磁気共鳴造影である。

当業者には了解されるであろうように、磁気共鳴造影の目的に関してはゲル粒子 は使用する重合体の型、重合体の分子量、重合体の濃度、重合体と混合した金属 イオンの型、使用するＭＲｌ　様式の型およびＭＲｌ　造影に使用するパルス連 続の詳細に応じてＴＩ、Ｔ２または陽子密度造影剤として掃作することができ、 この種の操作メカニズムの全ては本発明の範囲内にあると考えられる。

本発明記載のゲル粒子は造影剤として極めて有用であることが示されている。本 発明記載のケル粒子を使用することにより、同一の、または、多くの場合にはよ り良好な程度の造影結果を得るために、造影性金属をより低い全濃度で使用する ことができる。このことは、大量の潜在的に有毒な金属イオンの使用を回避する ことによる毒性の関連においてのみでなく、しばしばより高価な通常の金属イオ ンの使用がより小量であるので、経費の関連においても利点を有している。さら に、重合体基材中に造影性金属が捕捉されるために、潜在的に有毒な金属イオン が解放されて毒性の副効果を示す機会が減少している。これらの、およびその他 の利点は、本件開示を一読すれば当業者には容易に了解されるであろう。

本発明は、以下の実施例においてさらに記述される。この実施例の全てにおいて 、また本件明細書の全体を通じて、全ての分子量は重量平均分子量である。以下 の実施例は添付した請求の範囲の領域を限定するものと考えるべきではない。

実施例１ ポリガラクツロン酸、マンガンおよびカルシウムのゲルの製造ポリガラクツロン 酸、マンガンおよびカルシウムのゲルの造影剤の製造用に、室温で４．４グラム のポリガラクツロン酸（ポリ−Ｇ）（フル力（Ｆｌ、ｕｋａ、　Ｒｏｎｋｏｎｋ ｏｍａ、　Ｎ、Ｙ、）　）を約２００　ｍｌの脱イオン水に添加し、炭酸水素ナ トリウム（３０ｍｌ、１Ｍ炭酸水素ナトリウム）を用いてｐＨを６５に上昇させ た。ついで、このポリ−Ｇを混合器（市販の家庭用混合器）に入れ、その後、２ ４．５ｍｌの０．５　Ｍ　ＭｎＣ１ｚ原料溶液として６８０　ｍｇのＭ　ｎ　” を添加した。透明な、不均一なゲルが形成された。

このゲルを液化設定で３分間混合し、その後、９２ｍ１のＣａＣ１ｘの添加によ り２５０　ｆｆ１ｇのＣａ”を添加した　得られる白色のゲルを液化設定で４分 間、均一に、むしろ希薄になるまで混合した。ついで、この溶液を混合器から取 り出し、体積測定しながら脱イオン水で体積を２５０ｍ１にした。この溶液を混 合器に戻し、液化設定で２分間混合して溶液を均一にした。ついで、この溶液を 押出し装置（リペンクス生体膜（し１ｐｅｘ　Ｂｉｏｍｅｍｂｒａｎｅ、　Ｖａ ｎｃｏｕｖｅｒ、　Ｂ、Ｃ，Ｃａｎａｄａ）で、２０００ナノメートルないし１ ５ナノメートルの微孔寸法を有する濾過器を通して（′ａ通過器寸法を継続的に 減少させて）押出しし、本発明記載のナノゲル造影剤を製造した。

紫色と赤色との低メトキンペクチンを用いて２種の型の造影剤　（１）６０　ｍ ｇのＭｎ＋２と１グラムのペクチン（スプレーダ社（Ｓｐｒｅｄａ　Ｃａｒｐ、 　。

Ｐｒｏｓｐｅｃｔ　ＫＹ）　；ならびに（２）　６０　ｍｇのＭｎ４２と１グラ ムのペクチンおよび１０　ｍｇのＣａ”を製造した。紫色および赤色のペクチン は、スプレーダ社から市販されている異なる型の低メトキシペクチンを表す。

赤色ペクチンは約３５ないし約４０％のメトキシル化（エステル化）を有し、紫 色ペクチンは約３３ないし約３８％のメトキシル化（エステル１グラムの純粋な 赤色ペクチンを１００　ｍｌの脱イオン水に溶解させた。

２．１６　ｍｌの５００　ｍＭ　ＭｎＣｌ２原料溶液として６０　ｍｇのＭｎ’ 　２を添加した。ついで、この溶液を液化設定で３０秒間混合し、２００．１０ ０．５０および３．Ｏｎｍの微孔司法を有する濾過器を通して（濾過器の寸法を 継続的に減少させて）押出しし、本発明記載のナノゲル造影剤を製造した。

１％の赤色ペクチン、０６％のＭｎ“２および０１％のＣａ４２１グラムの純粋 な赤色ペクチンを１００　ｍｌの脱イオン水に溶解させた。

２．１６　ｍｌの５００　ｍＭ　ＭｎＣ］、２原料溶液として６０　ｍｇのＭｎ ’　２を添加した。不均一な懸濁液が得られた。この懸濁液に０．０３６ｇのＣ ａＣｌ２として１０　ｍｇのＣａ”を添加した。このゲルはなお不均一であった 。

ついで、この溶液を液化設定で１分間混合した。濃厚な、均一なゲルが得られた 。この試料を、２００．１００．５０および１５　ｎｍの微孔寸法を有する濾過 器を通して押出しく濾過器の寸法を継続的に減少させて）し、本発明記載のナノ ゲル造影剤を製造した。

１％の紫色ペクチンおよび０．６％のＭｎ”１グラムの純粋な紫色ペクチンを１ ００　ｍｌの脱イオン水に溶解させた。

この溶液に２．１６　ｍｌの５００　ｍＭ　ＭｎＣ１ｚ原料溶液として６０　ｍ ｇのＭｎ”を添加した。ついで、得られたゲルを液化設定で３０秒間混合した。

ａ車な不均一なゲルが形成された。２００．１００．５０および１５　ｎｍの微 孔寸法を有する濾過器を通して（ｆＩ通過器寸法を継続的に減少させて）押出し し、本発明記載のナノゲル造影剤を製造した。

１９６の紫色ペクチン、０．６％のＭｎ”、０１％のＣａ４２１グラムの純粋な 紫色ペクチンを１００耐の水に溶解させた。この溶液に、　２．１６ｍ１の５０ ０ｍＭ　ＭｎＣｌ２原料溶液として６０　ｍｇのＭ　ｎ　”を添加した。得られ たｖ濁液を液化設定で３０秒間混合した。ついで、０．０３６ｇの固体ＣａＣｌ ２として１０　ｍｇのＣａ”を添加した。続イテ、この溶液を液化設定で１分間 混合した。濃厚な黄褐色のゲルが得られた。このゲルを、２００．１００．５０ および１５ｎｍの微孔１法を有する濾過器を通して（濾過器の寸法を継続的に減 少させて）押出しし、本発明記載のナノケル造影剤を製造した。

実施例３ ポリガラクツロン酸および鉄（ＩＩ）のゲルの製造室温で３３ｇのポリカラクツ ロン酸（ポリ−Ｇ）を１５０　ｍｌの脱イオン水に添加し、炭酸水素ナトリウム （３０ｍｌのＩＭ炭酸水素ナトリウム）を用いてｐＨを６０に上昇させて造影剤 を製造した。ついで、このポリ−Ｇを混合器に入れ、その後、２．４９ｇの鉄（ ＩＩ）イオン（固体ＦｅＣ１，として）を添加した。黄色の不均一なゲルが形成 された。ついで、このゲルを液化設定で２分間、得られる黄／緑色のゲルが均一 に、むしろ希薄になるまで混合した。次に、この溶液を体積測定しながら脱イオ ン水で２５０　ｍｌにし、混合器に戻し、液化設定で２分間混合して溶液を均一 にした。ついで、この溶液を押出し装［（リベソクス生体膜）で、平均直径２０ ０．１００．５０．３０および１５ナノメートルの微孔寸法を有する濾過器を通 して（濾過器の寸法を継続的に減少させて）押出しし、本発明記載のナノゲル造 影剤を製造した。

実施例４ ポリガラクツロン酸、マンガンおよびショ糖のゲルの製造１５グラムのポリガラ クツロン酸を１５０　ｍｌの脱イオン水に添加してゲルを製造した。炭酸水素ナ トリウムを添加してｐＨを６０に上昇させた。ついで５０グラムのノヨ糖を添加 し、この溶液を液化設定で２０秒間混合した。ついで、　２４．５ｍｌの０．５ 　Ｍ　Ｍｎ　Ｃ１２原料としてマンガンイオン（Ｍｎ”）　５８０　ｍｇを添加 この溶液を液体設定で混合し、体積測定し７ながら脱イオン水を添加して２５０ 　ｍｌにした。この溶液を混合器に戻し、液化設定で２０秒間混合して溶液を均 一にした。この溶液を押出し装置（リペノクス生体膜）で、２００．１００．５ ０．３０および１５ナノメー１−ル（濾過器の寸法を継続的に減少させて）の微 孔−ｊ法を有する濾過器を通して（濾過器の寸法を継続的に減少させて）押出し し、本発明記載のナノゲル造影剤を製造した。

カチオン濃度の測定 実質的に実施例Ｉないし４に従って製造した試料を、分子量遮断Ｉ００のスペク トラ／ポル上（ＳＰＥＣＴＲ＾／ＰＯＲＣＥ）　（セルローズエステル）膜（ス ペクトル医学工業社（Ｓｐｅｃｔｒｕｍ　１ｉｅｄｉｃａｌ　Ｉｎｄｕｓｔｒｉ ｅｓ　Ｉｎｃ、、　Ｌｏｓ＾ｎｇｅｌｅｓ　Ｃａ１ｉｆｏｒｎｉａ）　）中で、 正常食塩水中の５％プロピレングリコールに対して２４時間透析した。ついで、 透析に続いて、ミルトン・ロイ・スペクトロニック（ｉｌｉｌｔｏｎ　Ｒａｙ　 ５ｐｅｔｒｏｎｉｃ）　２０Ｄ可変波長分光光度計（ロチニスター（Ｒｏｃｈｅ ｓｔｅｒ、　Ｎ、Ｙ、）　）を用いて分光光度法によりこの試料のカチオン（す なわちＭｎ“り濃度を分析した。カチオン濃度は表１に示しである。表１におい て、ＰＧはポリガラクツロン酸（ボ１００／１０／１０　０．２５　ｍＭ　２． ５％４／１１０．５　０．３３２　ｍＭ　１．３２％４／２／１　５．１７５　 ＋ｎＭ２Ｏ，７％４／２／２　６．２２　ｍＭ　２５％ ２０％ショ糖ゲル　８．２２　ｍＭ　２３．５％低メトキシペクチンであるＤ　 ０７５−　Ｘ　リンゴペクチン（スブ！ノーダ社）１０グラムを１００　ｍｌの ５％）−ＩＣＩ中、８５°Ｃの一定温度で５時間加水分解した。ついで、この溶 液を真空ｆＩｌａし、ＨＭ褐色の沈澱さ黄色の溶液とを得た。暗褐色の沈澱（試 料１）を取り分けた。

溶液を取り、この溶液に２グラムの活性炭を添加し、この溶液を８０℃に３０分 間加熱する脱色段階にかけた。ついで溶液を濾過し、透明な無色の液体を得た。

次に、この溶液を乾燥状聾にまで蒸発させて黄褐色の粉末（試料２）を得たが、 これは表２に示す（最後のもの）ように低分子量のポリガラクツロン酸（ポリ− 〇）であった。このポリ−Ｇは、本発明記載のゲル粒子造影剤の製造における使 用に好適である。

分子量分析 ＨＰ　Ｌ　Ｃ分析は全て、二元液体クロマトグラフィーポンプ（ＢｉｎａｒｙＬ ｉｑｕｉｄ　Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ　Ｐｕｍｐ）　、型式番号２５０（ パーキン・エルマー（Ｐｅｒｋｉｎ　Ｅｌｍｅｒ）　、　Ｎｏｒｗａｌｋ、ＣＴ ）で、ダイオード配列検出器（ＤｉｏｄｅＡｒｒａｙ　Ｄｅｔ、ｅｃオＯｒ）、 型式番号１３５（パーキン・エルマー）を用いて行った。データをパーソナル積 分器（１’ｅｒｓｏｎａｌ　Ｉｎｔｅｇｒａｔｏｒ）　、型式番号１０２０（パ ーキン・エルマー）で加工した。検出器の設定はラムダＡ２４５およびラムダＢ ２８０てあった。１　ｍｌ／分の流速で試行時間は２０分であった。全ての試料 をバイオケル・七ツク（Ｂｉｏｇｅｌ　５ｅｃ）　４０　Ｘ　！−型寸法排除ク りマトグラフィーカラム（バイオ・ラッド研究所（Ｂｉｏ　Ｒａｄ　Ｌａｂｏｒ ａオｏｒｉｅｓ）　、　Ｒｉｃｈｍｏｎｄ、　ＣＡ）に通じた。得られたデータ は表２に示しである。

表２ 分子量の高圧液体クロマトグラフィー分析分子量および供給源　ＲＴＩ＋ 市販のポリ−Ｇ（分子量範囲２５．０００−５０．０００）　５．３３市販のモ ノガラクツロン酸く分子量１９４）　９．０４デカガラクツロン酸く分子量約２ ．２００）　８．５０低分子量ポリーＧ２）７．９０ １＋　分て表しだカラムの保持時間を示す：短い保持時間は大きい分子量の重合 体を示す。

２′　ペクチンからの加水分解（上の゛製造”を参照）。

表２に示されるように、２５．０００ないし５０．０［）０の範囲の分子量を有 するポリ−Ｇの重合体の混合物を含むものとして知られている市販のポリ−〇（ フル力）は５３３分のカラム上の保持時間を有する。市販のモノカラクツロン酸 （分子量ｌ９４）は保持時間９０４秒と、最も長い保持時間を有する。デカガラ クツロン酸（以下ラカトス（Ｌａｋａｔｏｓ）特許と呼ぶ、その開示全体が本件 明細書中に引用文献上して組み入れられている、１９８０年９月３０日付で特許 されたラカトスらの米国特許第４．２２５゜５９２号に記載されている方法によ り製造）は約２．２００の分子量を有し、８５０分の保持時間を有することが見 いだされた。保持時間を市販のポリ−Ｇのものと比較すると、市販のガラクツロ ン酸単量体およびラカトス特許に記載されているデカガラクツロン酸は、ペクチ ンからの加水分解により得たポリ−Ｇ（上の゛製造”において記述した試料２） が低分子量のポリ−Ｇであることを示している。特定的には、試料２のポリーＧ は７，９分の保持時間を有し、分子量範囲がデカガラクツロン酸のもの（約２． ２００　ドールトン）に近いことを示している。暗褐色の沈澱（試料１）の評価 は、高分子量のポリ−Ｇのものとほとんど同一の５，５３分の保持時間を示した （データは示されていない）。

実施例７ 種々の重合体とマンガンとの緩和性 実質的に実施例１．２．３．４および５の方法に従って製造した本発明記載の造 影剤を緩和性に関して分析し、他の試料の緩和性と比較した。

試料ＡないしＤは比較の目的のみのために与えたものである。全ての試料を東芝 ０．５Ｔ診療用ＭＲ磁石を用いて緩和性に関して分析した。試料ＥないしＪ　は 本発明の範囲内のゲル粒子造影剤である。試料ＡないしＤは比較の目的のみのた めに与えた。下の表３は種々の試料の緩和性を示している。

Ａ、Ｍｎ−ＥＤＴＡ−ＭＥＡ　３０４　±　０．１５　７．９８　±　０２３Ｂ 、Ｍｎ−ボ１ルＥＤＴＡ−６，４８±０．１　１２．２６±０．０５ＥＯＥＡ− ＤＰ Ｃ，ＭｎＣｌ２　８．３０±０．９０３　３９．４５±０５１５１）、　ＭｎＣ ｌ２、　９０１±０．４１　３７．３６±０．１０ガラクツロン酸 エステル単量体 Ｅ　ペクチンＤ−０７５Ｘ、１６．５３±０．８８　３６．５３±０６９Ｍ口 Ｆ、　ＭｎＣ１，，７／Ｌキン２０．３　＋　１．９４８　４０．２０　＋　０ ．３８Ｇ　ポリ−Ｇ、　Ｍｎ　２８．９９　±０．５６２　５５．３１　±　１ ．１１Ｈ，１，００％デカボ’Ｊ−Ｇ、３５．３３±０．６２３　６１．０２± ０．８８６ｎ １．４０％デフ’７　ホＩＪ　−Ｇ、　４２．６．２±０．２８９　６７、２８ ±０．４５９６０％ノルマルポリ−６１ Ｍｎ Ｊ　加水分解ペクチン、４６１１±０．３４７　６７、９８±１．２５６ｎ データに示されているように、遊離のイオンの塩化マンガンとしてのマンガンイ オン（Ｍ　ｎ　’りは、それぞれミリモル７秒あたり約８および３９のＲ７およ びＲ２を有している（試料Ｃ）。試料Ｃとの比較で、キーレート化合物（試料Ａ およびＢ）の示す緩和性は減少している。特定的には、重合体性キーレート化合 物Ｍｎ−ポリ−ＥＤＴＡ−ＥＯＥＡ−ＤＰはそれぞれ約６および１３のＲ１およ びＲ２を有しており（試料Ｂ）、単純なキーレート化合物Ｍｎ−ＥＤＴＡ−ＭＥ Ａはそれぞれ約３および８のＲ１およＵ−Ｒ２を有している（試料Ａ）。ガラク ツロン酸エステルの単量体は、マンガンの緩和性に対して評価し得る効果を有し ていない（試料Ｄ）が、本発明記載の造影剤はマンガンの緩和性に対して大きな 効果を有している。たとえば、赤色ペクチン（Ｄ−０７５Ｘ、低メトキンペクチ ン、スプレーダ社）（試料Ｅ）およびアルギン（試料Ｆ）はマンガンの緩和性を 評価し得る程度に増加させている。これも表３に示されているように、本発明の 範囲内のポリ−Ｇの種々の配合剤はさらに大きな緩和性を示す。最も効果的なも のは低分子量のポリガラクツロン酸エステルである。たとえば、実施例５に従っ て製造した加水分解ペクチンはそれぞれ４６および６８のＲ５およびＲ２の緩和 性を有している（試料Ｊ）。４０％の実施例５に従って製造したデカポリ−Ｇと ６０％のフル力から得た通常のポリ−Ｇ（分子量２２．０００ないし５０．００ ０）との混合物（試料　■）は純粋なデカポリ−Ｇ（試料Ｈ）より大きな緩和性 を有している。これらのデータは、最適緩和性が添加混合物中のマンガンに関し ては約５．０００以下の分子量のポリ−Ｇで達成されることを示している。実施 例８ポリ−Ｇ１マンガンおよびシボ糖のゲルの安定性分子量遮断１００のスペク トラ／ポル上（セルローズエステル）膜（スペクトラム医学工業社）中でゲル粒 子を種々の溶液に対して２４時間透析して、マンガンの保持におけるゲル粒子の 安定性を試験した。

本発明記載のゲル粒子は長期の透析でマンガンの保持を示すが、これは本発明記 載の化合物の良好な安定性の証拠である。特定的には、表４が示すように、実施 例４に従って製造したゲル粒子に関してはマンガンの２２％ないし５２％が２４ 時間後にも保持される。若干の非結合マンガンが除去される透析の最初の２４時 間ののちには、長期の透析（たとえば７２時間の透析より長い）ののちにも粒子 が残留するマンガンを保持していることが見いだされた（データは示されていな い）。

表４ ポリーＧＭｎンヨ糖ゲルに対する透析の効果０１００％　１００％　１００％ ２４５２％　４２％　２２％ 実施例９ ポリガラクツロン酸ゲル中のマンガンの安定性および緩和性実質的に実施例１． ３および４の方法に従って製造した本発明記載の造影剤を緩和性に関して、およ び透析での安定性に関して分析した。

表５は、本発明に従って製造したゲル粒子によるマンガンの百分率保持および緩 和性を示す。ポリガラクツロン酸くポリ−Ｇ　、ＰＧ）　、マンガンおよびショ 糖を含むゲルは最高の緩和性およびマンガンの保持を示す。

試料　％保持　Ｒ，Ｒ。

ＰＧ／Ｍｎ／Ｃａ比率４／２／Ｉ　２０．７　０．７６０±０．１６１．　１． ４６　±０．０４６ＰＣ／Ｍｎ／Ｃａ比率１０／ｌ／１　２．５　１０．４４　 ±［１，３５６１１，８６±１６５ＰＧ／Ｍｎ／Ｃａ比率４／Ｉ１０．５　１． ３３　３．５７　±０．２３８　１２．３２　±１２９ＰＧ／Ｍｎ／Ｃａ比率４ ／２／２　２４．０　０．１６３±０．０１５　０．４０７±００８３ＰＧ／Ｆ ｅ４２−−　０．１０９±０．００４　０．１３８±００１４実施例１０ 生体内造影データ ２．３３ないし２．５ミクロモル／ｋｇのマンガンおよびボＩＪガラク゛ソロン 酸（ポリ−Ｇ；ＰＧ）またはペクチンのゲル粒子の投与量で静脈内Ｉこ注射し、 ＮＭＲを通して走査した４匹のう・ソトカ１らのＮＭＲ造影データが表６ないし ９に示されている。表６および７（ま、実質的↓こ実施例１に従って製造したゲ ル粒子を含む造影剤の静脈自注Ｉｔ力）らのデータである。表８は実質的に実施 例２４こ従って製造しｔこゲル粒子を含む造影剤の静脈内注射からのデータであ る。表９（ま実質的１こ実施ｐｉ　４　＋こ従って製造したゲル粒子を含む造影 剤の静脈内注射力）らのデータである。

これらのデータにより示されるように、ボＩＪ−Ｇおよびマンガンとカルシウム とのゲル化により製造しこゲル粒子；こよる造影（ま若干の強調を示した。赤色 ペクチンとマンガンとのゲルで；ま、より良も了な強調力（観氾１１された。最 大の強調はポリ−〇およびマンガンとショ糖とのゲルイヒ：こよ１）製造したゲ ル粒子で観測された。

煮」 ＰＧ／Ｍｎ／Ｃａ　４／２／１　２．５　ｕモルＭｎ”／ｋｇ□ 肝臓信号強摩−−浬】リハ郭引荒生却Ｗ造影前　１６９±１１ 造影　５分ｉ＆　１９０±１５　１２．４％造影１５分（＆　１８９±１２　１ １．８％造影２５分後　２０２±　５．３　１９．５９石造影６０分後　１４０ ±１１　！（）私殺−−−−１′　百分率強調＝［（造影後信号強度−造影前信 号強度）／造影前信号強度）］　Ｘ　１００゜ 表７ ＰＧ／Ｍｎ／Ｃａ　４／２／２．２．５　ｐモルＭｎ”／ｋｇ肝臓信号強度　肝 臓の百分率強調１′ 造影前　１６９±１３ 造影　５分後　１６６±１１　変化なし造影１５分後　１７５±１４　３．５％ 造影２５分後　１６９±　８８　変化なし造影６０分後　１５２±１１　変化な し１＋　百分率強調＝［（造影後信号強度−造影前信号強度）／造影前信号強度 ）］　Ｘ　１００゜ 表８ 赤色ペクチン＋Ｍ口　２５μモルＭｎ”／ｋｇ肝臓信号強度　肝臓の百分率強調 １ 造影前　１５７±１４ 造影　５分後　＋６９±１１　７６％ 造影１５分ｉ＆　１６９±１．０　７．６％造影２５分（＆　２０５±ＩＩ　３ ０．６％造影６０分ｉ＆　２１１±１３　３４．４％＋＋　百分率強調＝［（造 影後信号強度−造影前信号強度）／造影前信号強度）］　Ｘ　１００゜ 幻 肝臓信号強度　肝臓の百分率強調Ｉ′ 造影前　１３９±１２ 造影　５分後　２２６±１４　６２．５％造影１５分ｉ＆　２１６±１２　５５ ．４％造影２５分後　２１６±　９　５５４％造影６０分後　２３５±　７　６ ９１％１′　百分率強調−［（造影後信号強度−造影前信号強度）／造影前信号 強度）］　Ｘ　１００゜ 表１０は、３種の検討において実質的に実施例４に従って製造したポリガラクツ ロン酸−マンがシーンヨ糖ゲル粒子を用いる肝臓の造影を表す。データが示すよ うに、強調はゲル粒子の使用により４０ないし５０％増加した。

３μモル／ｋｇ　５１％　４９％ ５ｇモル／ｋｇ　４４９６　３６％ ５μモル／ｋｇ　５１％　４２４％ １′百分率強調＝［（造影後信号強度−造影前信号強度）／造影前信号強度）］ 　Ｘ　１００゜ 実施例１２ 生体内肝臓の腫瘍のコントラスト対雑音表１１は、コントラスト対雑音の３種の 試験のデータを与える。コントラスト対雑音は、実質的に実施例４に従って製造 したポリーＧ−マンガンーショ糖ゲルを用いる試験においてほぼ２倍であった。

コントラスト対雑音は、肝臓の信号強度を測定し、腫瘍の信号強度を差し引き、 これを背景雑音の標準偏差で割って計算した。

３μモル／ｋｇ　４４　８４　４９ ５ｐモル／ｋｇ　６３　１２２　１０２表１２および１３は心臓、腎臓／髄質お よび腎臓／皮質における信号強度の試験のデータを提供する。全ての試験が、実 質的に実施例４にに従って製造したゲル粒子を用いる試験における信号強度の増 加を示している。心臓においては信号強度は若干増加しているに過ぎないが、腎 臓／髄質においてはより有意に増加しており、腎臓／皮質において最も実質的に 増加している。

検討　造影前　造影後　造影２０分後 ２１１モル／ｋｇ　８６±７８７±７　８９±８５ｇモル／ｋｇ　７９±９８４ ±２　８１±６５１１モル／ｋｇ　７５±６８２±６　９３±６検討　造影前　 造影後　造影２０分後 ２１１モル／ｋｇ　６６±６８８±６　７８±９５ｐモル／ｋｇ　７９±８９５ ±６　７８±４５１１モル／ｋｇ　７７±５８４±１２８２±５腎臓／皮實 ３１１モル／ｋｇ　１０２±５１５４±１２　１５９±５５ｐモル／ｋｇ　１２ ６±７１６３±１２　１６４±１０５μモル／ｋｇ　１３０±７１６０±３１６ ３±８本件明細書中で示し、記述したものに加えて、本発明の種々の変更も当業 者には先行する記述から了解されるであろう。この種の変更も添付した請求の範 囲の領域内に入ることを意図されたものである。

フロントページの続き （５１）　Ｉｎｔ、　Ｃ１，’　識別記号　庁内整理番号ＧＯＩＲ３３／２８ Ｉ

Claims (69)

【特許請求の範囲】
1. １．平均直径約９０μｍ以下の、少なくとも１種の造影性の金属を捕らえる少な くとも１種の重合体を含むゲル粒子を含む造影剤。
2. ２．上記のゲル粒子が平均直径約５ｎｍないし約９０μｍであることを特徴とす る請求の範囲１記載の造影剤。
3. ３．上記のゲル粒子が平均直径約１μｍないし約９０μｍであることを特徴とす る請求の範囲２記載の造影剤。
4. ４．上記のゲル粒子が平均直径約５ｎｍないし約４００ｎｍであることを特徴と する請求の範囲２記載の造影剤。
5. ５．上記のゲル粒子が平均直径約１０ｎｍないし約２００ｎｍであることを特徴 とする請求の範囲４記載の造影剤。
6. ６．上記の重合体が合成重合体であることを特徴とする請求の範囲１記載の造影 剤。
7. ７．上記の重合体が天然重合体または半合成重合体であることを特徴とする請求 の範囲１記載の造影剤。
8. ８．上記の重合体がポリエチレン、ポリプロピレン、ポリウレタン、プルロン酸 、プルロンアルコール、ポリビニル重合体、ナイロン、ポリスチレン、ポリ乳酸 、フッ素化炭化水素、フッ素化炭素、ポリアクリル酸エステル、ポリアクリル酸 およびポリアクリルアミドよりなるグループから選択したものであることを特徴 とする請求の範囲６記載の造影剤。
9. ９．上記の重合体が多糖類であることを特徴とする請求の範囲７記載の造影剤。
10. １０．上記の多糖がアラビナン、フルクタン、フカン、ガラクタン、ガラクツロ ナン、グルカン、マンナン、キシラン、レバン、フコイダン、カラギーナン、ガ ラクトカロローズ、ペクチン、ペクチン酸、アミローズ、プルラン、グリコーゲ ン、アミロペクチン、セルローズ、デキストラン、プスツラン、キチン、アガロ ース、ケラチン、コンドロイチン、デルマタン、ヒアルロン酸、アルギン酸、キ サンタンガム、澱粉、カルボキシルメチルセルローズ、ヒドロキシメチルセルロ ーズ、ヒドロキシプロピルメチルセルローズ、メチルセルローズ、メトキシセル ローズ、ならびにエリトロース、トレオース、リポース、アラビノース、キシロ ース、リキソース、アロース、アルトロース、グルコース、マンノース、グロー ス、イドース、ガラクトース、タロース、エリトルロース、リブロース、キシル ロース、プシコース、フルクトース、ソルポース、タガトース、グルクロン酸、 グルコン酸、グルカル酸、ガラクツロン酸、マンロン酸、グルコサミン、ガラク トサミンおよびニューラミン酸よりなるグループから選択したアルドーズ、ケト ース、酸またはアミンの少なくとも１種を含有する多糖よりなるグループから選 択したものであることを特徴とする請求の範囲９記載の造影剤。
11. １１．上記の多糖がペクチンであることを特徴とする請求の範囲１０記載の造影 剤。
12. １２．上記の多糖が約３０％以下のメトキシル化を有する低メトキシペクチンで あるペクチンであることを特徴とする請求の範囲１１記載の造影剤。
13. １３．上記の多糖がポリガラクツロン酸であることを特徴とする請求の範囲１０ 記載の造影剤。
14. １４．上記の重合体がホスホリル化重合体であることを特徴とする請求の範囲１ 記載の造影剤。
15. １５．上記の造影性の金属が常磁性金属および重金属よりなるグループから選択 したものであることを特徴とする請求の範囲１記載の造影剤。
16. １６．上記の造影性の金属が常磁性金属であることを特徴とする請求の範囲１５ 記載の造影剤。
17. １７．上記の常磁性金属がガドリニウム、マンガン、銅、クロミウム、鉄、コバ ルト、エルビウム、ニッケル、ユーロピウム、テクネチウム、インジウム、サマ リウム、ジスプロシウム、ルテニウム、イッテルビウム、イットリウムおよびホ ルミウムよりなるグループから選択したものであることを特徴とする請求の範囲 １６記載の造影剤。
18. １８．上記の常磁性金属がＭｎ＋２であることを特徴とする請求の範囲１７記載 の造影剤。
19. １９．上記の造影性の金属が重金属であることを特徴とする請求の範囲１５記載 の造影剤。
20. ２０．上記の重金属がハフニウム、ランタン、イッテルビウム、ジスプロシウム およびガドリニウムよりなるグループから選択したものであることを特徴とする 請求の範囲１９記載の造影剤。
21. ２１．上記のもの以外にさらに多価金属カチオン、糖類およびポリアルコールよ りなるグループから選択したゲル化剤をも含むことを特徴とする請求の範囲１記 載の造影剤。
22. ２２．上記のゲル化剤がカルシウムカチオンである多価金属カチオンであること を特徴とする請求の範囲２１記載の造影剤。
23. ２３．上記の重合体が架橋重合体であることを特徴とする請求の範囲１記載の造 影剤。
24. ２４．上記の重合体が非架橋重合体であることを特徴とする請求の範囲１記載の 造影剤。
25. ２５．その重合体が造影性の金属を捕らえるものであり、ゲルを平均直径約９０ μｍ以下の粒子を形成させるように特性化することを特徴とする、少なくとも１ 種の重合体と少なくとも１種の造影性の金属とを混和してゲル限形成させる方法 により製造した造影剤。
26. ２６．上記の重合体および上記の造影性金属とともに、さらにゲル化剤をも混和 して含む請求の範囲２５記載の造影剤。
27. ２７．上記のゲル化剤が多価金属カチオン、糖類およびポリアルコールよりなる グループから選択したものであることを特徴とする請求の範囲２６記載の造影剤 。
28. ２８．その重合体が非架橋のものであることを特徴とする、少なくとも１種の造 影性の金属を捕らえる少なくとも１種の重合体を含むゲル粒子を含む造影剤。
29. ２９．上記の重合体が合成重合体であることを特徴とする請求の範囲２８記載の 造影剤。
30. ３０．上記の重合体が天然重合体または半合成重合体であることを特徴とする請 求の範囲２８記載の造影剤。
31. ３１．上記の重合体がポリエチレン、ポリプロピレン、ポリウレタン、プルロン 酸、プルロンアルコール、ポリビニル重合体、ナイロン、ポリスチレン、ポリ乳 酸、フッ素化炭化水素、フッ素化炭素、ポリアクリル酸エステル、ポリアクリル 酸およびポリアクリルアミドよりなるグルーブから選択したものであることを特 徴とする請求の範囲２９記載の造影剤。
32. ３２．上記の重合体が多糖類であることを特徴とする請求の範囲３０記載の造影 剤。
33. ３３．上記の多糖がアラビナン、フルクタン、フカン、ガラクタン、ガラクツロ ナン、グルカン、マンナン、キシラン、レバン、フコイダン、カラギーナン、ガ ラクトカロローズ、ペクチン、ペクチン酸、アミローズ、プルラン、グリコーゲ ン、アミロペクチン、セルローズ、デキストラン、ブスツラン、キチン、アガロ ース、ケラチン、コンドロイチン、デルマタン、ヒアルロン酸、アルギン酸、キ サンタンガム、澱粉、カルボキシルメチルセルローズ、ヒドロキシメチルセルロ ーズ、ヒドロキシプロピルメチルセルローズ、メチルセルローズ、メトキシセル ローズ、ならびにエリトロース、トレオース、リポース、アラビノース、キシロ ース、リキソース、アロース、アルトロース、グルコース、マンノース、グロー ス、イドース、ガラクトース、タロース、エリトルロース、リブロース、キシル ロース、プシコース、フルクトース、ソルポース、タガトース、グルクロン酸、 グルコン酸、グルカル酸、ガラクツロン酸、マンヌロン酸、グルコサミン、ガラ クトサミンおよびニューラミン酸よりなるグループから選択したアルドーズ、ケ トース、酸またはアミンの少なくとも１種を含有する多糖よりなるグループから 選択したものであることを特徴とする請求の範囲３２記載の造影剤。
34. ３４．上記の多糖がペクチンであることを特徴とする請求の範囲３３記載の造影 剤。
35. ３５．上記の多糖が約３０％以下のメトキシル化を有する低メトキシペクチンで あるペクチンであることを特徴とする請求の範囲３４記載の造形剤。
36. ３６．上記の多糖がポリガラクツロン酸であることを特徴とする請求の範囲３３ 記載の造影剤。
37. ３７．上記の重合体がホスホリル化重合体であることを特徴とする請求の範囲２ ８記載の造影剤。
38. ３８．上記の造影性の金属が常磁性金属および重金属よりなるグルーブから選択 したものであることを特徴とする請求の範囲２８記載の造影剤。
39. ３９．上記の造影性の金属が常磁性金属であることを特徴とする請求の範囲３８ 記載の造影剤。
40. ４０．上記の常磁性金属がガドリニウム、マンガン、銅、クロミウム、鉄、コバ ルト、エルビウム、ニッケル、ユーロピウム、テクネチウム、インジウム、サマ リウム、ジスプロシウム、ルテニウム、イッテルビウム、イットリウムおよびホ ルミウムよりなるグループから選択したものであることを特徴とする請求の範囲 ３９記載の造影剤。
41. ４１．上記の常磁性金属がＭｎ＋２であることを特徴とする請求の範囲４０記載 の造影剤。
42. ４２．上記の造影性の金属が重金属であることを特徴とする請求の範囲３８記載 の造影剤。
43. ４３．上記の重金属がハフニウム、ランタン、イッテルビウム、ジスプロシウム およびガドリニウムよりなるグループから選択したものであることを特徴とする 請求の範囲４２記載の造影剤。
44. ４４．上記のゲルが平均直径約９０μｍ以下であることを特徴とする請求の範囲 ２８記載の造影剤。
45. ４５．上記のゲル粒子が平均直径約５ｎｍないし約９０μｍであることを特徴と する請求の範囲４４記載の造影剤。
46. ４６．上記のゲル位子が平均直径約１μｍないし約９０μｍであることを特徴と する請求の範囲４５記載の造影剤。
47. ４７．上記のゲル粒子が平均直径約５ｎｍないし約４００ｎｍであることを特徴 とする請求の範囲４５記載の造影剤。
48. ４８．上記のゲル粒子が平均直径約１０ｎｍないし約２００ｎｍであることを特 徴とする請求の範囲４７記載の造影剤。
49. ４９．その重合体が造影性の金属を捕らえるものであり、ゲルを粒子を形成させ るように特性化し、重合体が非架橋のものであることを特徴とする、少なくとも １種の重合体と少なくとも１種の造影性の金属とを混和してゲルを形成させる方 法により製造した造影剤。
50. ５０．上記の重合体および上記の造影剤とともに、さらにゲル化剤をも混和して 含む請求の範囲４９記載の造影剤。
51. ５１．上記のゲル化剤が多価金属カチオン、糖類およびポリアルコールよりなる グループから選択したものであることを特徴とする請求の範囲５０記載の造影剤 。
52. ５２．（ｉ）請求の範囲１記載の造影剤を患者に投与し、（ｉｉ）磁気共鳴造影 法、超音波造影法またはＸ−線造影法を用いて患者を走査してその領域の可視像 を得る各段階を含む、患者の内部領域の像を与える方法。
53. ５３．（ｉ）請求の範囲１記載の造影剤を患者に投与し、（ｉｉ）磁気共鳴造影 法、超音波造影法またはＸ−線造影法を用いて患者を走査して患者の何らかの疾 病を有する組織の可視像を得る各段階を含む、患者の疾病を有する組織の存在の 診断方法。
54. ５４．（ｉ）請求の範囲２８記載の造影剤を患者に投与し、（ｉｉ）磁気共鳴造 影法、超音波造影法またはＸ−線造影法を用いて患者を走査してその領域の可視 像を得る各段階を含む、患者の内部領域の像を与える方法。
55. ５５．（ｉ）請求の範囲２８記載の造影剤を患者に投与し、（ｉｉ）磁気共鳴造 影法、超音波造影法またはＸ−線造影法を用いて患者を走査して患者の何らかの 疾病を有する組織の可視像を得る各段階を含む、患者の疾病を有する組織の存在 の診断方法。
56. ５６．請求の範囲１記載の造影剤と通常の診断用のキット成分とを含むキット。
57. ５７．上記のキット成分が緩衝剤、抗菌剤および安定剤よりなるグループから選 択したものであることを特徴とする請求の範囲５６記載のキット。
58. ５８．請求の範囲２８記載の造影剤と通常の診断用のキット成分とを含むキット 。
59. ５９．上記のキット成分が緩衝剤、抗菌剤および安定剤よりなるグループから選 択したものであることを特徴とする請求の範囲５８記載のキット。
60. ６０．その重合体が造影性の金属を捕らえるものであり、ゲルを平均直径約９０ μｍ以下の粒子を形成させるように特性化することを特徴とする、少なくとも１ 種の重合体と少なくとも１種の造影性の金属とを混和してゲルを形成させる段階 を含む造影剤の製造方法。
61. ６１．上記の重合体および上記の造影剤とともに、さらにゲル化剤をも混和して 含む請求の範囲６０記載の方法。
62. ６２．上記のゲル化剤が多価金属カチオン、糖類およびポリアルコールよりなる グループから選択したものであることを特徴とする請求の範囲６１記載の方法。
63. ６３．その重合体が造影性の金属を捕らえるものであり、ゲルを粒子を形成させ るように特性化し、上記の重合体が非架橋性のものであることを特徴とする、少 なくとも１種の重合体と少なくとも１種の造影性の金属とを混和してゲルを形成 させる段階を含む造影剤の製造方法。
64. ６４．上記の重合体および上記の造影剤とともに、さらにゲル化剤をも混和して 含む請求の範囲６３記載の方法。
65. ６５．上記のゲル化剤が多価金属カチオン、糖類およびポリアルコールよりなる グルーブから選択したものであることを特徴とする請求の範囲６４記載の方法。
66. ６６．上記の重合体がポリガラクッロン酸であり、上記の造影性の金属が常磁性 金属Ｍｎ＋２であることを特徴とする請求の範囲１記載の造影剤。
67. ６７．上記の重合体がポリガラクツロン酸であり、上記の造影性の金属が常磁性 金属Ｍｎ＋２であることを特徴とする請求の範囲２８記載の造影剤。
68. ６８．上記の重合体がポリガラクツロン酸であり、上記の造影性の金属が常磁性 金属Ｍｎ＋２であることを特徴とする請求の範囲５６記載のキット。
69. ６９．上記の重合体がポリガラクツロン酸であり、上記の造影性の金属が常磁性 金属Ｍｎ＋２であることを特徴とする請求の範囲５８記載のキット。