JPH0748343A

JPH0748343A - ビタミンｄ−２２−フェニルスルホン誘導体

Info

Publication number: JPH0748343A
Application number: JP6131616A
Authority: JP
Inventors: Hector F Deluca; ヘクター・エフ・デルカ; Heinrich K Schnoes; ハインリッヒ・カー・シュノーズ; Kato L Perlman; カトー・エル・パールマン; Andrzej Kutner; アンヂジェイ・クトネル
Original assignee: Wisconsin Alumni Research Foundation
Current assignee: Wisconsin Alumni Research Foundation
Priority date: 1988-04-29
Filing date: 1994-06-14
Publication date: 1995-02-21
Anticipated expiration: 2011-06-12
Also published as: HUT52475A; IE67868B1; JPH02504154A; KR930011151B1; KR900700449A; IL90066A0; NL8920414A; DK89091D0; HU206083B; WO1989010353A1; HU892989D0; AU3573089A; IN170659B; JPH0725730B2; DK666589D0; DK89091A; FR2630740A1; IL90066A; US4927815A; US5061699A

Abstract

(57)【要約】【目的】腫瘍疾患の治療に有効な１α−ヒドキシビタ
ミンＤ側鎖同族体の合成中間体。【構成】式【化１】〔式中、ＸおよびＹは、アルキルシリル基であり、Ｐh
はフェニル又はアルキル置換フェニルであり、Ｒはアル
キルおよびアルキルシリルオキシアルキルから選ばれる
基を意味する。〕で示されるビタミンＤ−２２−フェニ
ルスルホン誘導体。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、保健福祉省の認可およ
び補助金により支持された実験の過程でなされたもので
ある。政府は本発明に対し、ある種の権利を有する。本
発明は新規ビタミンＤ化合物に関する。特に、本発明
は、悪性細胞の分化において特異的で予期せぬほどの活
性を示し、腫瘍疾患の治療に有効な１α−ヒドロキシビ
タミンＤ側鎖同族体の合成中間体として有用なビタミン
Ｄ−２２−フェニルスルホン誘導体に関する。

【０００２】

【従来の技術】ビタミンＤ系の化合物は、動物やヒトの
カルシウム恒常性の制御に必須な薬剤としてよく知られ
ている。また、カルシウム代謝の調整には、ビタミンＤ
自体ではなく、動物や人体において該ビタミンＤから形
成された代謝物が有効であることも知られている。これ
に関連し、最も重要なビタミンＤ代謝物は１α−２５−
ジヒドロキシビタミンＤ₃(１,２５−(ＯＨ)₂Ｄ₃)であ
る。この化合物、並びにある種の構造類似体、例えば１
α−ヒドロキシビタミンＤ₃(１α−ＯＨ−Ｄ₃)、１α−
ヒドロキシビタミンＤ₂(１α−ＯＨ−Ｄ₂)またはある種
のフッ素置換１,２５−(ＯＨ)₂Ｄ₃誘導体は、腸のカル
シウム吸収や骨からのカルシウムの再吸収(骨移送)に対
し、非常に有効である。このため、これらの化合物は、
腎性骨ジストロフィ、上皮小体機能低下症、ビタミンＤ
耐性くる病やオステオポローシスなどの種々のカルシウ
ム代謝障害を治療するための医薬として、現在使用され
ているかまたはその使用が提案されている。

【０００３】近年の研究によれば、１,２５−(ＯＨ)₂Ｄ
₃は、イン・ビボでのカルシウム恒常性の制御における
その役割に加え、他の生物学的機能を示すことが確証さ
れている。特に、１,２５−(ＯＨ)₂Ｄ₃およびその関連
化合物(例えば、１α−ＯＨ−Ｄ₃、１,２５−(ＯＨ)₂Ｄ
₃のフルオロ類似体)は、細胞分化の誘発に対し、非常に
有効であることが証明されている。最も重要なこととし
て、１,２５−(ＯＨ)₂Ｄ₃は、悪性細胞(とくに、白血病
細胞)の増殖を抑制し、培養中の分化を正常な単核細胞
に変換させることが判明している〔アベら、プロシーデ
ィング・オブ・ナショナル・アカデミィ・オブ・サイエ
ンス(Ａbe et al.,Ｐroc.Ｎatl.Ａcad.Ｓci)、ＵＳＡ７
８巻、４９９０頁(１９８１年)；ホンマら、イビッド
(Ｈonma et al.,ibid)、８０巻、２０１頁(１９８３
年)〕。この著しい活性により、１,２５−(ＯＨ)₂Ｄ₃お
よび関連化合物は、抗ガン剤、とくに抗白血病剤として
提案されている〔スダら(Ｓuda et al.)、米国特許第４
３９１８０２号〕。しかしながら、これら化合物は、培
養株中の悪性細胞の分化において非常に有効であること
が事実だとしても、カルシウム代謝に作用する薬剤とし
て同等の非常に高い活性を示すので、分化治療における
抗ガン剤としての実際的な用途は、大きく制限されてい
る。抗白血症剤として、イン・ビボで有効な使用に必要
なレベルでは、当該化合物は、その固有なカルセミック
(calcemic)活性により、血液中のカルシウムを著しく高
くかつ非常に危険なレベルに誘発しうる。このカルセミ
ック活性のため、これらの公知のビタミンＤ化合物は悪
性疾患の治療に用いることが妨げられたり、制限されて
おり、したがって作用の特異性および選択性がより大き
い化合物が必要である。

【０００４】本明細書において、「カルセミック活性」ま
たは「カルセミック作用」なる語は、腸のカルシウム吸収
(Ｃa輸送)および骨からの再吸収(骨移送)に対するビタ
ミンＤ化合物の刺激によって血中カルシウムのレベルを
増加させるような、該ビタミンＤ化合物のよく知られた
能力に関する短縮語である。「分化活性」なる語は、その
正常細胞への分化を含め、近年発見されたある種のビタ
ミンＤ化合物の、悪性細胞の増殖阻止活性を意味する。

【０００５】先行実験によれば、向上した分化活性を有
する数種の化合物が製造されている。すなわち、米国特
許第４７１７７２１号ならびに他の刊行物〔オストレム
およびデルカ、ステロイド(Ｏstrem ＆ＤeＬuca,Ｓter
oids)、４９巻、７３〜１０２頁(１９８８年)；オスト
レムら、ジャーナル・オブ・バイオロジィカル・ケミス
トリィ(Ｏstrem et al.,Ｊ.Ｂiol.Ｃhem．)、２６２巻、
１４１６４頁(１９８７年)〕は、側鎖が炭素１つだけ長
い１,２５−(ＯＨ)₂Ｄ類似体が１,２５−(ＯＨ)₂Ｄ₃自
体よりも約１０倍の白血病細胞の分化活性を示す旨開示
する。しかしながら、かかる化合物は、カルシウム吸収
の刺激および血しょうカルシウムレベルの上昇について
は、１,２５−(ＯＨ)₂Ｄ₃とほぼ同等の効力のままであ
り、したがって前記したような、望ましくない強力な
「カルセミック作用」の問題は解決されていない。した
がって、かかる化合物は、分化：カルセミック活性の比
率改善を示すものの、カルセミック活性が親化合物(１,
２５−(ＯＨ)₂Ｄ₃)と同程度に高い点で、選択性でな
い。選択的分化活性を示すと言われている他のビタミン
Ｄ−関連化合物が報告されている〔オストレムら(Ｏstr
em et al.)、前掲；クボデラら、ケム・ファルム・ブル
(Ｋubodera et al.,Ｃhem.Ｐharm.Ｂull.)、３４巻、２
２８６〜８９頁(１９８６年)；イケカワら、ケム・ファ
ルム・ブル(Ｉkekawa et al.，Ｃhem.Ｐharm.Ｂull.)、
３５巻、４３６２頁(１９８７年)〕。しかし、これらの
化合物は、本発明が意図している化合物と比較すると、
構造上明確な差異を有する。

【０００６】

【発明が解決しようとする課題および課題を解決するた
めの手段】本発明は、悪性細胞の分化誘発において１,
２５−(ＯＨ)₂Ｄ₃と比較して非常に高い活性を示す一
方、カルシウム代謝に対し示す効果が１,２５−(ＯＨ)₂
Ｄ₃よりも非常に低いことで、特徴付けられる化合物の
合成中間体に関する。すなわち、本発明の化合物から得
られるビタミンＤ関連化合物は、非常に特異的な分化剤
であり、その活性パターンにより、悪性細胞の分化治療
に使用することができる。非常に高い分化活性を、著し
く減少または抑制したカルシウム代謝と組み合わせるこ
とにより、イン・ビボにおいて、これらの化合物を、血
中カルシウムレベルを過剰に誘発することなく悪性疾患
の処置のために投与することができる。これらの特性の
ため、かかる化合物は、上記目的の好ましい薬剤とな
る。

【０００７】構造上、望ましい生物学的寄与を示す該化
合物の重要な特徴は、側鎖が、２または３つのメチレン
単位を該側鎖に導入することによって延長されている
１,２５−(ＯＨ)₂Ｄ₃の側鎖同族体である。すなわち、
このタイプの化合物は、以下の式で示される構造を特徴
とする。

【化２】式中、Ｘ、ＹおよびＺは、同一または異なって、水素ま
たはヒドロキシ保護基、およびｎは３または４の整数を
意味する。

【０００８】２４−ジホモ−１,２５−(ＯＨ)₂Ｄ₃およ
びヒドロキシ保護誘導体、即ちｎが３である上記構造を
有する化合物、および２４−トリホモ−１,２５−(Ｏ
Ｈ)₂Ｄ₃およびそのヒドロキシ保護誘導体、即ちnが４で
ある上記構造を有する化合物は、上記式で示される化合
物の、好ましい例である。これらの化合物は、米国特許
第４７１７７２１号の２４−ホモ−ビタミンＤ化合物に
関連するものではあるが、しかしながら、該化合物は、
構造上および生物学的特性の両方の点で、特徴付けられ
るものである。構造的には、該化合物は、重要な特徴と
して該側鎖が、２または３つのメチレン単位を該炭素鎖
に導入することによって延長されている新規なビタミン
Ｄ同族体であり、生物学的には、該化合物は、１,２５
−(ＯＨ)₂Ｄ₃と比較して、悪性細胞の増殖抑制および分
化誘発において少なくとも類似の効力を有するかまたは
それ以上の効力を有する一方、カルシウム活性が全くな
いかまたは著しく減少した、高い選択性を示す細胞分化
剤である。

【０００９】したがって本発明は、悪性細胞の分化促進
や腫瘍疾患の治療に特に有用な新規な化合物の合成中間
体を提供するものである。本発明の化合物は、前記した
新規な化合物、並びに公知のビタミンＤ代謝物または他
の同族体または他の側鎖修飾ビタミンＤ誘導体の合成に
使用することができる。

【００１０】本発明の化合物は、以下の構造式を有する
セコステロール誘導体とフェニルスルホン化合物を反応
させることにより得られる。

【化３】式中、ＸおよびＹは、アルキルシリル基、およびＬは、
ハライドのような脱離基、トシロキシもしくはメシロキ
シ、または同様な置換可能な官能基を意味する。このタ
イプの好ましい誘導体は、ヒドロキシ保護Ｄ−２２−ト
シロキシ化合物である。又、フェニルスルホン化合物
は、以下の構造を有する。ＰhＳＯ₂−ＣＨ₂−Ｒ式中、Ｐhはフェニルまたはアルキル置換フェニル、お
よびＲは、アルキル、およびアルキルシリルオキシアル
キルからなる群から選ばれる基を意味する。前記したビ
タミンＤ−２２−トシレートと、適切なフェニルスルホ
ン単位の結合は、スルホン化学の確立された原理に基づ
く〔例えば、ピイ・デイ・マグナス、テトラヘドロン
(Ｐ.Ｄ.Ｍagnus，Ｔetrahedron)、３３巻、2019頁(1977
年)；トロストら、テトラヘドロン・レターズ(Ｔtrost
et al.，Ｔetrahedron Ｌetters)、3477頁(1976年)参
照〕。強塩基を媒介とする該反応により、以下の構造式
を有する本発明の化合物を生成しうる。

【化４】式中、Ｒ、ＸおよびＹは前記と同じ。

【００１１】上記の中間体付加物は、新規化合物である
が、これは金属アマルガム(例えばナトリウムアマルガ
ム、アルミニウムアマルガム)含有媒体中で還元させ
て、以下の構造式で示される所望のビタミンＤ化合物を
製造しうる。

【化５】

【００１２】還元性脱スルホン化は、例えば金属／アル
キルアミンまたは金属／ＮＨ₃混合物を用いる、溶解性
金属による還元のような他の手段によっても達成するこ
とができる。次いで、アルキルシリル基を常法で除去し
て、対応する遊離ヒドロキシ化合物を生成することがで
きる。

【００１３】上記の側鎖結合過程に用いられる、前記ビ
タミンＤ−２２−トシレートは、公知の方法で調製する
ことができる公知物質である〔例えば、アンドリュース
ら、ジャーナル・オブ・オーガニック・ケミストリイ
(Ａndrews et al.，Ｊ.Ｏrg．Ｃhem.)、５１巻、4819頁
(1986年)〕。また、該トシレートは、ヒドリド還元し次
いでビタミンＤ−２２−エステルをトシル化することで
調製することができる〔クトーネルら、テトラヘドロン
・レターズ（Ｋutner et al.，Ｔet．Ｌetters）、２８
巻、6129〜6132頁(1987年）参照〕。該エステルは以下
の構造式で示される。

【化６】式中、ＸおよびＹはアルキルシリル基、Ａはアルキルま
たはアリール基を意味する。

【００１４】明白ではあるが、ビタミン核としてビタミ
ンＤ−２２−−トシレートを用い側鎖残基としてフェニ
ルスルホンを使用する前記方法は、選択されたアルキル
またはアルキルシリルオキシアルキル基Ｒに応じ、最終
目的とする多数の１α−ヒドロキシビタミンＤ側鎖類似
体の調製に使用することができる。好ましいフェニルア
ルキルスルホン単位は、Ｒがアルキルまたはヒドロキシ
アルキル基の化合物であり、以下の構造式で示される。

【化７】式中、Ｕは、水素、アルキルシリルオキシおよび炭素数
１〜４の炭化水素残基からなる群から選ばれる基、l、m
およびnは、独立して１〜５の整数、Ｚはアルキルシリ
ルオキシ基を意味する。所望の生物学的活性(すなわ
ち、高い分化活性と全くないかまたは低いカルセミック
活性)を有する新規化合物の製造に特に好ましいもの
は、nが３または４の前記したスルホン単位である。

【００１５】本明細書および請求の範囲において用いら
れる「アルキル」なる語は、その全ての異性体形の炭素
数１〜１０の直鎖または分枝鎖アルキルを意味する。好
ましいアルキルシリル基は、トリメチルシリル、トリエ
チルシリル、t−ブチルジメチルシリルおよび類似のア
ルキル化シリル残基である。

【００１６】つぎに、実施例および参考例を挙げて本発
明をさらに詳しく説明するが、これらに限定されるもの
ではなく、単に製造法および該方法によって得られる新
規化合物を示すものである。これらの実施例および参考
例において、アラビア数字により特定した化合物(例え
ば、化合物１、２、３など)は、その処理工程図におい
て番号を付した構造と対応するものである。さらに、参
考例では、該新規化合物の特徴的な生物学的特性、例え
ば細胞分化剤および抗癌剤としてのこれら化合物の適用
において基材として役立つような特性を説明する。

【００１７】化合物の製造一般的な方法赤外スペクトル(ＩＲ)は、ニコレット(Ｎicolet）ＭＸ
−１ＦＴ−ＩＲスペクトロメーターにより、正味の油
状物質からなる膜を用いて得た。紫外線(ＵＶ)吸収スペ
クトルは、ヒタチ・モデル６０−１００−ＵＶ−ＶＩＳ
スペクトロメーターで記録した。核磁気共鳴(ＮＭＲ)ス
ペクトルは、２７０または４００ＭＨzにおいて、ブル
ッカーＷＨ−２７０またはＡＭ−４００ＦＴスペクトロ
メーターにより、挙げた溶媒中で記録した。化学シフト
(δ)は内部対照ＭeＳi(δ：０.００)またはＣＨＣl
₃(δ：７.２４)から低磁場方向へのものとして記した。
低または高分解能マススペクトルは、特に断らなければ
７０eＶにおいて、クラトスＤＳ−５５データ・システ
ムを備えたクラトスＭＳ−５０ＴＣインストルメントで
記録した。高分解データは、ピーク・マッチングにより
得た。試料は、１２０〜２５０℃に維持したイオン源内
に、ダイレクト−インサーション・プローブにより導入
した。カラムクロマトグラフィには、シリカゲル６０
(メルク、７０〜２３０〜４００メッシュ)を用いた。薄
層クロマトグラフィ(ＴＬＣ)は、予めコーチングしたア
ルミナ・シリカゲル・シートを用い、ＥＭサイエンス
(ギブストーン、ＮＪ)のＵＶインジケーターにより、行
った。用いた溶媒系はつぎの通りである：Ａ；クロロホ
ルム−エタノール＝８５：１５(v／v)、Ｂ；ヘキサン−
酢酸エチル＝１：１およびＣ；ヘキサン−酢酸エチル＝
３：１。高圧液体クロマトグラフィ(ＨＰＬＣ)は、モデ
ル６０００Ａソルベント・デリバリイ・システム、モデ
ル６ＵＫユニバーサル・インジェクターおよびモデル４
５０可変波長デイテクターを備えたウオーターズ・アソ
シアエート液体クロマトグラフィを用いて行った。ゾル
バックス−シリカ(フェノメネックス)カラム(６.２mm×
25cmおよび10mm×25cm)を用いた。溶媒系：Ａ；ヘキサ
ン中、３％２−プロパノール、Ｂ；ヘキサン中、２％２
−プロパノール、Ｃ；ヘキサン中、６％２−プロパノー
ル、Ｄ；ヘキサン中、１０％２−プロパノール、Ｅ；ヘ
キサン中、２０％２−プロパノール、Ｆ；ヘキサン中、
２％酢酸エチル。ＨＰＬＣ試料の精製には、シリカゲル
Ｓep−Ｐak(ウオーターズ・アソシアエート)カートリッ
ジを用いた。３β−アセトキシ−２２,２３−ビスノル
−５−コレニック・アシッド(cholenic acid)は、ステ
ラロイド(ウイルトン、ＮＨ)から購入した。テトラヒド
ロフラン(ＴＨＦ)は、ナトリウム・ベンゾフェノン・ケ
チルから蒸留した。他の溶媒は常法で精製した。ヘキサ
ン中n−ブチルリチウム(アルドリッチ)は、n−プロパノ
ールにより、ＴＨＦ中１,１０−フェナトリンの存在下
に、アルゴン中で滴定した。ビタミンＤ化合物を伴う反
応は、窒素またはアルゴン雰囲気下にマグネチック・ス
ターラーで撹拌しながら行った。溶液および液体の添加
は、ゴム膜を介しシリンジで行った。

【００１８】参考例１１α−ヒドロキシビタミンＣ−２２エステル（化合物
１０）およびヒドロキシ保護誘導体（化合物８、１１）
の合成（処理工程Ｉ) (a)ステロイドエステル(１)および(２)の調製３β−アセトキシ−２２,２３−ビスノル−５−コレニ
ック・アシッド１０gをメタノール中５％ＫＯＨ４２０m
lに溶解し、溶液を室温で１５分間撹拌して該アセテー
トを加水分解させた。この溶液に、メタノール中１０％
Ｈ₂ＳＯ₄１６０mlを撹拌しながら添加し、得られた懸濁
液をメタノール中１％Ｈ₂ＳＯ₄４００mlで希釈した。混
合物を４８時間加熱還流して、エステル化を完了させた
(ＴＬＣにより、溶媒系Ａで確認)。生成物、メチルエス
テル(１)(９.０g、８８％)を常法で単離し、かかる物質
４.４g(１２mmol)を乾燥ジメチルホルムアミド(ＤＭＦ)
１３５mlに溶解し、イミダゾール３.６g(５２.８mmol)
を加え、次いでtert−ブチルジメチルシリル・クロライ
ド４.０g(２６.４mmol)を加えた。溶液を、かさ高い沈
澱物が形成するまで室温で５分間撹拌し、次いで撹拌を
付加的に１５分間続けた。反応混合物をヘキサン４００
mlで抽出し、水、飽和ＮaＣl溶液で洗浄し、ＭgＳＯ₄で
乾燥した。溶媒を蒸発させ、ＴＬＣ（溶媒系b）で生成
してシリル化エステル(２)(５.３g)を無色の油として
得、これを付加的に精製することなく次の工程に用い
た。分析用の試料は、フラッシュ・カラムクロマトグラ
フィにより、ヘキサン中２％酢酸エチルを用いて得た。ＩＲ(膜)：１７３７.９９、１６０４.８９cm^-1

【００１９】(b)５,７−ジエン(３)の調製化合物(２)１.０g(２.１mmol)、ジブロモマンチン０.４
２g(１.５mmol)および無水重炭酸ナトリウム０.９１g
(１０mmol)の、ヘキサン２０ml中混合物を、窒素雰囲気
中、３０分間、出発エステル２が検出されなくなるまで
(ＴＬＣ、溶媒系Ｃ)加熱還流した。沈澱物をろ過し、溶
液を減圧下に乾燥した。残渣を無水ＴＨＦ５mlに再び溶
解し、テトラブチルアンモニウム・ブロマイド０.０６g
(０.１９mmol)を添加し、混合物を室温で３０分間、窒
素雰囲気下で撹拌した。テトラブチルアンモニウム・フ
ルオライド１０ml（ＴＨＦ中１Ｍ）の溶液を添加し、次
いでs−コリジン０.７mlを加え、混合物を窒素雰囲気下
に室温で１時間撹拌した。別に、テトラブチルアンモニ
ウム・フルオライド５mlを添加し、３時間撹拌を続け
た。エーテル５０mlを添加し、有機層を水、冷１Ｎ塩
酸、次いで１０％ＮaＨＣＯ₃で洗浄し、無水ＭgＳＯ₄で
乾燥した。生成物をベンゼンに溶解し、シリカゲル(７
０〜２３０メッシュ)３０gを用いてクロマトグラフィに
付した。エステル(３)０.４４g(５８％)をヘキサン中酢
酸エチルを用いて溶離させた。分析用の試料は、ＨＰＬ
Ｃ(溶媒系Ａ、Ｒv７７ml)で得た。ＵＶ(ヘキサン中３％２−プロパノール)、λmax＝２６
２nm(ε７０００)、λmax＝２７２nm(ε９８００)、λm
ax＝２８２nm(ε１０５００)、λmax＝２９３(ε６００
０)；¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣl₃)δ、０.５４(s,３Ｈ,１８−
ＣＨ₃)、０.９４(s,３Ｈ,１９−ＣＨ₃)、１.２２(d,２
Ｈ,Ｊ＝６Ｈz,２１−ＣＨ₃)、３.６(m,１Ｈ,３−Ｈ)、
３.６８(s,３Ｈ,ＣＯ₂ＣＨ₃)、５.４２(m,１Ｈ,６−
Ｈ)、５.５８(m,１Ｈ,７−Ｈ)；ＭＳ、m／z(相対的強
度)Ｍ⁺３５８(６１)、３４０(１２)、３２５(１００)、
２９９(６８)、２７１(７)、２５３(１７)、２３７(２
６)、２１１(２７)、１４３(７２)、１１９(３５)

【００２０】(c)ビタミンエステル(４)の調製ベンゼン−エチルエーテル(１：４、v／v)３５０ml中ジ
エン(３)(８３０mg、２.３mmol)の溶液を、撹拌しなが
ら、窒素雰囲気下にて、窒素バブラーおよびビッカー・
フィルターを備えた水冷石英浸漬ウエル中で、ハノヴィ
ヤ(Ｈnovia)６０８Ａ３６中圧ＵＶランプを用い、４０
分間(４×１０分)照射した。反応を、ＨＰＬＣにより、
ヘキサン中２％２−プロパノールを用い、２６５nmで
モニターした。溶液を減圧下で乾燥し、乾燥エタノール
１００mlに再度溶解し、窒素雰囲気下に３時間加熱還流
した。次いで溶液を濃縮し、ヘキサン中１０％酢酸エチ
ルに再度溶解し、シリカゲル(７０〜２３０メッシュ)３
０g上でクロマトグラフィに付した。ビタミンエステル
(４)(２９８mg、３６％)を、ヘキサン中１５％酢酸エチ
ルの混合物を用いて溶離した。分析用の試料は、ＨＰＬ
Ｃ(溶媒系Ｂ、Ｒv９４ml)で得た。ＩＲ(膜)１７３８.９５cm^-1 ＵＶ、λmax＝２６４nm¹ ＨＮＭＲ(ＣＤＣl₃)δ、０.５６(３Ｈ,s,１８−Ｃ
Ｈ₃)、１.２０(３Ｈ,d,Ｊ＝７Ｈz,２１−ＣＨ₃)、３.６
６(３Ｈ,s,ＣＯ₂ＣＨ₃)、３.９５(１Ｈ,m,３−Ｈ)、４.
８０(１Ｈ,d,Ｊ＝１.２Ｈz,１９Ｚ−Ｈ)、５.０５(１
Ｈ,d,Ｊ＝１.２Ｈz,１９−Ｅ−Ｈ)、６.０３(１Ｈ,d,Ｊ
＝１１Ｈz,７−Ｈ)、６.２３(１Ｈ,d,Ｊ＝１１Ｈz,６−
Ｈ)；ＭＳ、m／z(相対的強度)、Ｍ⁺３５８(４５)、３４
０(９)、３２５(４５)、２９９(２２)、２５３(１９)、
２３７(１８)、１３６(６０)、１１８(１００)

【００２１】(d)３,５−シクロビタミン・エステル(６)
の調製エステル(４)をトシレート(５)に、常法により、ピリジ
ン中p−トルエンスルホニルクロライドを用い、４℃で
２０時間を要して変換させた。粗製トシレート(５)(１
０２mg、０.２mmol)を無水ジクロロメタン２mlに溶解
し、これを、撹拌しながら無水重炭酸カリウム２５０mg
含有メタノール溶液１５mlに５５℃で添加した。混合物
を窒素雰囲気下に５５℃で２４時間撹拌した。次いで溶
媒を減圧除去し、残留物をエーテルで抽出した。有機層
を水洗し、無水ＭgＳＯ₄で乾燥した。生成物、シクロビ
タミンエステル(６)を、シリカゲルクロマトグラフィに
より、ヘキサン中２０％酢酸エチルを用いて精製した
(５０mg、６８％)。¹ ＨＮＭＲ(ＣＤＣl₃)、δ０.５４(３Ｈ，s，１８−ＣＨ
₃)、０.７４(m，３Ｈ)、０.９１(m，４−Ｈ)、１.２０
(３Ｈ，d，Ｊ＝７Ｈz，２１−ＣＨ₃)、３.２５(３Ｅ，
s，６Ｒ−ＯＣＨ₃)、３.６５(３Ｈ，s，２２−ＣＯ₂Ｃ
Ｈ₃)、４.１５(１Ｈ，d，Ｊ＝９Ｈz，６−Ｈ)、４.８８
(１Ｈ，１９Ｅ−Ｈ)、５.００(１Ｈ，d，Ｊ＝９Ｈz，７
−Ｈ)、５.０２(１Ｈ,１９Ｅ−Ｈ)；ＭＳ，m／z(相対的
強度)３７２(Ｍ⁺，１７)、３４０(１００)、２５３(４
８)、２２１(４０)、１３５(７２)．

【００２２】(e)５,６−シス１α−ヒドロキシビタミン
・エステル(８)およびトランス異性体(９)の調製 tert−ブチル・ヒドロペルオキシド１１２μl(トルエン
中３.０Ｍ溶液、０.３４mmol)を、乾燥塩化メチレン２m
l中二酸化セレン９mg(０.８mmol)の懸濁液に添加した。
混合物を室温にて窒素雰囲気下に、透明な溶液がえられ
るまで撹拌した。無水ピリジン１２μl(０.１５mmol)を
添加し、次いで無水ジクロロメタン２ml中に溶解したエ
ステル(６)(５０mg)を添加した。混合物を窒素雰囲気下
に３０分間撹拌した。冷１０％重炭酸ナトリウム２mlを
添加し、混合物をエーテルで抽出した。有機層を冷１０
％重炭酸ナトリウム、氷水で洗浄し、次いで無水ＭgＳ
Ｏ₄で乾燥した。シリカゲルクロマトグラフィ(ヘキサン
中１０〜２０％酢酸エチル)により、１α−ヒドロキシ
化合物(７)１２.５mgを得た。この生成物を直ちに氷酢
酸０.５mlに溶解し、溶液を５５℃で窒素雰囲気下にて
撹拌下に１５分間加熱した。反応混合物を氷上に注ぎ、
エーテルで抽出し、氷冷飽和重炭酸ナトリウムで洗浄し
た。合したエーテル抽出物を水洗し、ＭgＳＯ₄上で乾燥
した。エステル(８)を、デルカら記載の方法(ＤeＬuca
et al.米国特許第4554106号)により、単離した(６mg、
(５)から生成した全量の２０％)。(５Ｚ,７Ｅ)および
(５Ｅ,７Ｅ)異性体、(８)および(９)の分析試料は、各
々、分取ＨＰＬＣにより、比率２.５：１で得た。

【００２３】化合物(８) ＨＰＬＣ，溶媒系Ｃ，Ｒv６８ml；ＵＶ(ＥtＯＨ)λmax
２６４nm，λmin２２７nm，Ａ２６４／Ａ２２７＝２.０
７；¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣl₃)δ,０.５６(３Ｈ，s,１８−
ＣＨ₃)，１.２０(３Ｈ，d，Ｊ＝６.５Ｈz,２１−Ｃ
Ｈ₃)，２.０４(３Ｈ，s，３β−アセチル)，３.６６(３
Ｈ，s，２２−ＣＯ₂ＣＨ₃)，４.４(１Ｈ，m，１−Ｈ)，
５.２(１Ｈ，m，３−Ｈ)，５.０１(１９Ｅ−Ｈ)，５.３
４(１９Ｚ−Ｈ)，６.０１(１Ｈ，d，Ｊ＝１０Ｈz，７−
Ｈ)，６.３３(１Ｈ，d，Ｊ＝１０Ｈz，６−Ｈ)，ＭＳ，
m／z(相対的強度)，４１６(Ｍ⁺，４)，３５６(１０
０)，３３８(２１)，２５１(１３)，１３４(９５)。

【００２４】化合物(９) ＨＰＬＣ，溶媒系Ｃ，Ｒv７８ml；ＵＶ(ＥtＯＨ)，λma
x２６７nm，λmin２２７nm，Ａ２６７／Ａ２２７＝３.
５１；¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣl₃)δ，０.５６(３Ｈ，s，１
８−ＣＨ₃)，１.２０(３Ｈ，d，Ｊ＝６.５Ｈz，２１−
ＣＨ₃)，２.０４(３Ｈ，s，３β−ＯＡc)，３.６６(３
Ｈ，s，２２−ＣＯ₂ＣＨ₃)，４.５(１Ｈ，m，１−Ｈ)，
５.３(１Ｈ，m，３−Ｈ)，４.９９(１９Ｅ−Ｈ)，５.１
３(１９Ｚ−Ｈ)，５.８１(１Ｈ，d，Ｊ＝１０Ｈz，７−
Ｈ)，６.５６(１Ｈ，d，Ｊ＝１０Ｈz，６−Ｈ)。

【００２５】(f)１α−ヒドロキシエステル(１０)およ
びジシリルエステル(１１)の調製メタノール１０ml中０.１ＮＫＯＨ溶液を、エチルエー
テル１０ml中酢酸エステル(８)(１００mg、０.２４mmo
l)の撹拌溶液に添加した。得られた溶液を室温にて９０
分間、出発物質がＴＬＣ（溶媒系Ｂ）により検出されな
くなるまで、撹拌した。ジヒドロキシエステル(１０)を
標準的抽出法（酢酸エチル、飽和ＮaＣｌ、無水ＭｇＳ
Ｏ₄)で単離した。イミダゾール(２５０mg、３.６mmol)
およびtert−ブチルジメチルシリル・クロライド(２５
０mg、１.６mmol)のＤＭＦ２ml中混合物を、エステル
(１０)(８６.２mg、０.２３mmol)のＤＭＦ４ml中撹拌溶
液に添加した。得られた均一混合物を１５分間、５５℃
にて、ＴＬＣ(溶媒系Ｂ)により出発物質が検出されなく
なるまで撹拌した。生成物をヘキサンで単離し、次いで
有機層を塩水で洗浄し、無水ＭgＳＯ₄上で乾燥した。粗
製生成物のヘキサン溶液をシリカゲルＳep−Ｐakカート
リッジによりろ過して、ジシリル化エステル(１１)(136
mg、９８％)を得た。ＵＶ(ヘキサン)，λmax２６４nm，λmin２２７nm，Ａ２
６４／Ａ２２７＝１.９１；¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣl₃)，δ
０.０７[１２Ｈ，s，Ｓi(ＣＨ₃)₂]，０.５５(３Ｈ，s，
１８−ＣＨ₃)，０.８６[１８Ｈ，s，Ｃ(ＣＨ₃)₃]，１.
２０(３Ｈ，d，Ｊ＝６.８Ｈz，２１−ＣＨ₃)，３.６５
(３Ｈ，s，Ｏ−ＣＨ₃)，４.１８(１Ｈ，m，３−Ｈ)，
４.３６(１Ｈ，m，１−Ｈ)，４.８３(１Ｈ，d，Ｊ＝１.
２Ｈz，１９Ｚ−Ｈ)，５.１６(１Ｈ，d，Ｊ＝１.２Ｈ
z，１９Ｅ−Ｈ)，５.９６(１Ｈ，d，Ｊ＝１１.２Ｈz，
７−Ｈ)，６.１９(１Ｈ，d，Ｊ＝１１.２Ｈz，６−
Ｈ)；ＭＳ，m／z(m／e２４８に対し標準化した強度)，
６０２(Ｍ⁺,１０)，４７０(５９)，４１３(７)，３３８
(１０)，２４８(１００)。

【００２６】参考例２Ｃ−２２−アルコール(１２)およびＣ−２２−トシル誘
導体(１３)の合成(処理工程II) (a)Ｃ−２２−アルコール(１２)の調製水素化アルミニウムリチウム２５mg（０.６５mmol）を
シリルエステル(１１)１３６.２mg（０.２３mmol）の無
水ＴＨＦ５ml中撹拌溶液に、アルゴン雰囲気下に０℃で
添加した。懸濁液を１５分間０℃で撹拌し、過剰のＬi
ＡlＨ₄を、ＴＨＦ中１０％水中への滴下により分解させ
た。懸濁液をＴＨＦ１０mlで希釈し、撹拌を室温でさら
に１５分間続けた。生成物を標準的抽出法により、酢酸
エチルおよびシリカゲルＳep−Ｐakろ過（ヘキサン中１
０％酢酸エチル）を用いて単離した。ジシリルアルコー
ル(１２)を無色の油として得た（１１８.４mg、収率９
１％）。ＵＶ(ＥtＯＨ)，λmax２６４,λmin２２７，Ａ２６４／
Ａ２２７＝１.５７；¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣl₃)δ０.００
(１２Ｈ，s，Ｓi−ＣＨ₃)０.５３(３Ｈ，s，１８−ＣＨ
₃)，０.８５[１８Ｈ，s，Ｓi−Ｃ(ＣＨ₃)₃]，１.０４
(３Ｈ，d，Ｊ＝６.４Ｈz，２１−ＣＨ₃)，３.３７およ
び３.６３(１Ｈおよび１Ｈ，各々m，２２−ＣＨ₂)，４.
１７(１Ｈ，m，３−Ｈ)，４.３５(１Ｈ，m，１−Ｈ)，
４.８４(１Ｈ，brs，１９Ｚ−Ｈ)，５.１６(１Ｈ，br
s，１９Ｅ−Ｈ)，６.０(１Ｈ，d，Ｊ＝１２.２Ｈz，７
−Ｈ)，６.２１(１Ｈ，d，Ｊ＝１２.２Ｈz，６−Ｈ)；
ＭＳ，m／z(m／e ２４８に対し標準化した強度)，５７
４(Ｍ⁺,１７)，４４２(６７)３８３(１１)，３０８(１
７），２４８(１００)。

【００２７】(b)２２−アルコール−トシレート(１３)
の調製 p−トルエンスルホニルクロライド４２.７mg(０.２２mm
ol)の乾燥ピリジン５０μl中氷冷溶液を、アルコール１
２の撹拌溶液に０℃にて窒素雰囲気下で添加した。混合
物を５℃で２２時間、出発物質がＴＬＣ（溶媒系Ｃ）に
より検出されなくなるまで撹拌した。反応混合物を氷冷
飽和水性ＮaＨＣＯ₃上に注ぎ、撹拌をさらに３０分間続
けた。生成物を酢酸エチル−ヘキサン１：１(v／v)で抽
出した。有機層を飽和ＮaＣlで洗浄し、ＭgＳＯ₄で乾燥
した。溶媒を減圧除去し、ピリジンを窒素気流中で除去
した。粗製生成物をシリカゲルＳep−Ｐakろ過(ヘキサ
ン中５％酢酸エチル)で精製して、純粋なトシレート(１
３)(５４mg、９８％)を得た。ＩＲ(膜)３５００，２９５０，１５８０，１３６７，１
２６７，１１８９，１１７８，１０９９，１０８５，８
３５cm^-1；ＵＶ(ヘキサン)λmax２６３nm，λmin２３６
nm；¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣl₃)δ０.００(１２Ｈ，s，Ｓi−
ＣＨ₃)，０.４３(３Ｈ，s，１８−ＣＨ₃)，０.８１[１
８Ｈ，s，Ｓi−Ｃ(ＣＨ₃)₃]，０.９３(３Ｈ，d，Ｊ＝
６.８Ｈz，２１−ＣＨ₃)，２.４０(３Ｈ，s，Ａr−ＣＨ
₃)，３.６４および３.９１(１Ｈおよび１Ｈ，各々m，２
２−ＣＨ₂)，４.１３(１Ｈ，m，３−Ｈ)，４.31(１Ｈ，
m，１−Ｈ)，４.７９(１Ｈ，brs，１９Ｚ−Ｈ)，５.１
３(１Ｈ，brs，１９Ｅ−Ｈ)，５.９４(１Ｈ，d，Ｊ＝１
２.８Ｈz，７−Ｈ)，６.１７(１Ｈ，d，Ｊ＝１２.８Ｈ
z，６−Ｈ)，７.４３および７.８４(２Ｈおよび２Ｈ，
各々m，Ａr−Ｈ)；ＭＳ m／z(m／z２４８に対し標準化
した強度)，７２８(６),５９６(３０)，５５６(７)，４
６４(７)，４２４(４４)，３６７(１９)，２９２(２
３)，２４８(１００)；式量(Ｃ₄₁Ｈ₆₈Ｏ₅Ｓi₂Ｓとし
て)、計算値：７２８.４３３８、実験値：７２８.４３
２６。

【００２８】参考例３フェニルスルホン側鎖単位の合成(処理工程III) (a)フェニルスルホン側鎖残基(１８)の調製４−クロロバレリルクロライド(１４)(アルドリッチ：
３g、１９.２mmol)の無水ＴＨＦ２５ml中溶液を、激し
い撹拌下に３０分間を要し、アルゴン雰囲気下、メチル
マグネシウムブロマイド(エーテル中３Ｍ溶液１２.９m
l)の乾燥ＴＨＦ２５ml中溶液に、−１０℃で添加した。
反応混合物を２時間以内に室温まで暖め、水でクエンチ
ングし、希塩酸で中和した。混合物をエーテルで抽出
し、合した有機層を水洗し、硫酸ナトリウムで乾燥し
た。溶媒の除去後、残渣を真空蒸留して、クロロアルコ
ール(１５)を無色の液体として得た(２.１g、７０％)。
無水ジメチルホルムアミド５ml中の生成物(１５)(１.５
g、１０mmol)を、チオフェノール１.３２g(１２mmol)お
よびカリウムt−ブトキシド１.３２g(１１.３mmol)の無
水ジメチルホルムアミド２５ml中撹拌溶液に添加した。
反応混合物を室温にて一夜撹拌し、溶液をジクロロメタ
ンと水の間に、分離させた。有機層を水性炭酸ナトリウ
ム、水で洗浄し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥した。溶
媒を真空蒸留して、粗油をシリカゲルフラッシュクロマ
トグラフィにより、ヘキサン−酢酸エチルで精製した。
スルフィド(１６)(２.２g、９８％)を無色の液体として
得た。スルフィド(１６)(１.０１g、４.５mmol)を乾燥
ジクロロメタン４０mlに溶解し、３−クロロ過安息香酸
２.５g(１１.６mmol、アルドリッチ８０〜８５％)を、
撹拌下、時々冷却しながら滴下した。反応混合物を２時
間撹拌し、次いで１０％重炭酸ナトリウムでクエンチン
グした。合した有機層を水性硫酸ナトリウムおよび塩水
で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥した。溶媒を真空
蒸留して粗製の油をシリカゲルフラッシュクロマトグラ
フィにより、ヘキサン−酢酸エチル混合物を用いて精製
し、スルホン(１７)(１.１g、９７％)を無色の液体とし
て得た。スルホン(１７)(１.３g、５.１mmol)およびイ
ミダゾール１.５g(２２.７mmol)の乾燥ジメチルホルム
アミド５０ml中撹拌溶液に、トリエチルシリル・クロラ
イド１.１５g(７.７mmol)を添加した。反応混合物を室
温で２時間維持し、次いでジクロロメタンで希釈した。
混合物を水性塩化アンモニウム溶液および水で洗浄し
た。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥し、溶媒を真空下
で除去した。残渣をシリカゲルフラッシュクロマトグラ
フィで精製した。ヘキサエチルジシロキサンをまずヘキ
サンで溶離した。トリエチルシリル−保護スルホン(１
８)(１.８g、９７％)をヘキサン−酢酸エチル９：１で
無色の液体として溶離した。ＩＲ(正味)：３０４５,２９４０,１４４０,１３６０,１
１３０,１０２０cm^-1；¹ＨＮＭＲ(４００ＭＨz,ＣＤＣ
l₃)δ０.５１８(６Ｈ,q,Ｊ＝６.２Ｈz,Ｓi−ＣＨ₂),０.
８９９(９Ｈ,t,Ｊ＝６.２Ｈz,Ｓi−Ｃ−ＣＨ₃),１.１４
２(６Ｈ,s,ＣＨ₃),１.３０７−１.４６２(４Ｈ,m),１.
６５５−１.７３８(２Ｈ,m,Ｈ−４),３.０８０−３.１
２２(２Ｈ,m,Ｈ−２),７.５６７(２Ｈ,t,Ｊ＝６.８Ｈz,
Ｈ−アリールメタ),７.６４８(１Ｈ,t,Ｊ＝６.８Ｈz,
Ｈ−アリールパラ),７.９１６(２Ｈ,d,Ｊ＝６.８３Ｈ
z,Ｈ−アリールオルソ)；ＭＳ(ＥＩ,７ eＶ)：m／z
(相対的強度)３７２(Ｍ⁺,２),３４１(１００),２２９
(２),２２７(１８),１７３(２４),１０３(２２),７５
(４５),５５(３３)。処理工程IIIにおいて示したよう
に、他のフェニルスルホン単位も、前記した一般的方法
または文献記載の類似の方法により調整することができ
る。例えば、以下のとおりである。

【００２９】(b)フェニルスルホン(１９)の調製前記参考例３(a)記載の方法に従い、ジクロロ化合物１
４を処理した。ただし、メチルマグネシウムブロマイド
に代えて、エチルマグネシウムブロマイドを第１反応工
程に用いて、構造式

【化８】（式中、Ｚ＝Ｅt₃Ｓi）のフェニルスルホン同族体を得
た。

【００３０】(c)フェニルスルホン(２３)の調製６−ブロモヘキサノイルクロライド(２０)(３.８g、２.
８ml、１８mmol)の無水ＴＨＦ１０ml中溶液を、激しい
撹拌下に１５〜２０分間を要し、アルゴン雰囲気下に、
メチルマグネシウムブロマイド(エーテル中３Ｍ溶液１
４ml)の無水ＴＨＦ１５ml中溶液に、−１０℃で添加し
た。反応混合物を２時間、室温で撹拌し、０℃に冷却
し、慎重に１：１希塩酸で分解させた。混合物をエーテ
ルで抽出し、合した有機層を水洗し、無水硫酸ナトリウ
ムで乾燥し、蒸発させて、ブロモアルコール(２１)を無
色の油として得た(３.６g、９４％)。ブロモアルコール
３.４g(１６mmol)を、無水ジメチルホルムアミド中ベン
センスルフィン酸ナトリウム塩３.３g(２０mmol)で、７
０℃にて４.５時間処理した。混合物を氷上に注ぎ、ジ
クロロメタンで抽出し、１Ｎ塩酸、水、１０％重炭酸ナ
トリウム溶液で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥
し、ろ過し、蒸発させて、スルホン(２２)を得、これ
を、フラッシュクロマトグラフィにより、シリカゲン上
で精製し、ヘキサン中４０〜５０％酢酸エチルで溶離さ
せて、少量の対応するスルフィネートエステルを含むス
ルホン(４,１８g、９８％)を得た。ＭＳ、m／z(２７０(Ｍ⁺),２５５(Ｍ⁺−１５),７７,５
９) スルホン(２２)(４g、１４mmol)およびイミダゾール３.
８g(５５mmol)の乾燥ジメチルホルムアミド１３ml中撹
拌溶液に、トリエチルシリル・クロライド４.６g(５.１
ml、３０mmol)を添加した。反応混合物を室温で２時間
撹拌し、氷水に注ぎ、エーテルで抽出し、無水硫酸マグ
ネシウムで乾燥し、ろ過し、蒸発させた。残渣をフラッ
シュクロマトグラフィで精製した。ヘキサエチルジシロ
キサンをまずヘキサンで溶離し、ヘキサン中３％酢酸エ
チルで少量のスルホンを含む保護スルフィネートエステ
ルを溶離し、次いでヘキサン中１０％酢酸エチルで保護
精製スルホン(２３)を溶離した(３.４g、６０％)。元素分析値(Ｃ₂₀Ｈ₃₆Ｏ₃ＳＳi) 計算値(％)：Ｃ：６２.４５、Ｈ：９.４３、Ｓ：３８.
３４実験値(％)：Ｃ：６１.９７、Ｈ：９.４５、Ｓ：３８.
３３ＭＳ、m／z(相対的強度) ３５５(１００)(Ｍ⁺−２９)、
２２７(１５)、１７３(３５)、１０３(４３)、７５(９
５)、５５(２３)、ＮＭＲ(４００ＭＨz,ＣＤＣl₃)、０.
５４(６Ｈ,q,Ｊ＝７Ｈz,Ｓi−ＣＨ₂)、０.９４(９Ｈ,t,
Ｊ＝８Ｈz)、Ｓi−Ｃ−ＣＨ₃)、１.１５(６Ｈ,s,Ｃ
Ｈ₃)、１.３１−１.３６(４Ｅ,m)、３.０８−３.１２
(２Ｈ,m,Ｈ−２)、７.５７(２Ｈ,t,Ｊ＝６.８Ｈz,Ｈ−
アリール−メタ)、７.６６(１Ｈ,t)、Ｈ−アリール−パ
ラ)、７.９２(２Ｈ,d,Ｊ＝６.８Ｈz,Ｈ−アリール−オ
ルソ)．

【００３１】(d)フェニルスルホン(２６)の調製市販の３−フェニルスルホニルプロピオン酸(２４)を酸
性メタノールで、標準的エステル化条件下に処理して、
対応するメチルエステルを得、これを、グリニャー反応
に、メチルマグネシウムブロマイドを用いて付して、フ
ェニルスルホン誘導体(２５)を得た。(２５)をトリエチ
ルシリル・クロライドと、実施例３(a)の条件下に反応
させて、ヒドロキシ保護スルホン(２６)を得た。

【００３２】(e)スルホン単位(２６)の調製参考例３(d)記載の方法を酸(２４)に適用した。ただ
し、メチルマグネシウムブロマイドに代えて、エチルマ
グネシウムブロマイドを、グリニャー反応工程に用い
て、保護スルホン同族体(２８)を得た。前記したよう
に、フェニルスルホン単位は、適切に調製され、その後
ヒドロキシ保護誘導体として使用される。トリエチルシ
リル保護基に加え、他の好ましいヒドロキシ保護基は、
t−ブチルジメチルシリル、テトラヒドロフラニル、お
よびテトラヒドロピラニルである。

【００３３】実施例１側鎖結合反応(処理工程図IV) ビタミンスルホン(２９)および(３０)の調製１,１０−フェナトリン(インジケーターとして使用)の
無水ＴＨＦ溶液をアルゴン雰囲気下に、n−ＢuＬiのヘ
キサン中１.３５Ｍ溶液(４８μl、６４μmol)に添加し
て、暗赤色の混合物を得た。溶液をアセトン−ドライア
イス浴に入れ、ジイソプロピルアミン(９μl、６４μmo
l)を加えた。得られた溶液をアルゴン雰囲気下に３０分
間、−７７℃で撹拌した。次いで、スルホン(１８)(２
９mg、８０μmol)のＴＨＦ１００μl中溶液を添加し、
次いで別のＴＨＦ１００μlを用いて洗浄した。得られ
た褐色の混合物を−７５℃でアルゴン雰囲気下に３０分
間撹拌し、冷却浴をＣＣl₄ドライアイス浴に置き換え
た。−２１℃での１５分間の撹拌後、トシレート１３
(１１.６mg、１６μmol)の溶液を加えると、反応混合物
が黒色から赤色に変わった。溶液を−２０℃〜−３０℃
で３.５時間撹拌し、飽和塩化ナトリウム１mlを−１０
℃で添加した。混合物をヘキサンで抽出し、有機層を飽
和ＮaＣlで洗浄した。有機抽出物をシリカゲルＳep−Ｐ
akカートリッジでろ過し、次いでヘキサン中１０％酢酸
エチル２０mlでろ過した。プレパラテイブＨＰＬＣ(カ
ラム６.２×２５cm)(溶媒系Ｆ)により、Ｒv３７mlで未
反応トシレート(１３)(３.０mg)を得た。次いで、スル
ホン(２９)(２.１mg、１９％)をＲv５５mlで溶離させ
た。ＩＲ(膜)３５００、２９５６、１４４０、１３０１、１
２５８、１１４７、１０８６、１０７２、１０６４c
m^-1；ＵＶ(ヘキサン)λmax２６４nm、λmin２３０nm、
Ａ２６４／Ａ２３０＝１.９６；¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣl₃)δ
０.４１(３Ｈ,s,１８−ＣＨ₃)、０.５１(６Ｈ,q,Ｊ＝
５.７Ｈz,Ｓi−ＣＨ₂−)、０.８６および０.８８[９Ｈ
および９Ｈ、各々、s,Ｓi−Ｃ(ＣＨ₃)₃]、０.９０(９
Ｈ,t,Ｊ＝８Ｈz,ＳiＣＨ₂−ＣＨ₃)、１.１３(３Ｈ,d,Ｊ
＝５.８Ｈz,２１−ＣＨ₃)、１.２３(６Ｈ,s,２６,２７
−ＣＨ₃)、４.１７(１Ｈ,m,３−Ｈ,４.３７(１Ｈ,m,１
−Ｈ)、４.８５(１Ｈ,brs,１９Ｚ−Ｈ)、５.１７(１Ｈ,
brs,１９Ｅ−Ｈ)、５.９９(１Ｈ,d,Ｊ＝１１.０Ｈz,７
−Ｈ)、６.２１(１Ｈ,d,Ｊ＝１０.８Ｈz,６−Ｈ)、７.
５４(２Ｈ,t,Ｊ＝７.３Ｈz,Ａr−Ｈ,メタ)、７.６１(１
Ｈ,t,Ｊ＝７.３Ｈz,Ａr−Ｈ,パラ)、７.３３(２Ｈ,d,Ｊ
＝７.３Ｈz,Ａr−Ｈ,オルソ)；ＭＳ、m／Ｚ(相対的強
度)、９２６(Ｍ⁺,１６)、７９４(１００)、７３７
(９)、５３０(９)、５２１(６)、３８９(１３)、３０１
(８)。スルホン(３０)(３.８mg、３５％)(炭素２３位に
おける(２９)のエピマー)をＲv８７mlで溶離した。ＩＲ
(膜)３５００、２９５５、１４４０、１３０４、１２５
７、１１４８、１０８６、１０７２、１０６４cm^-1；Ｕ
Ｖ(ヘキサン)λmax２６４nm、λmin２２９nm、Ａ２６４
／Ａ２２９＝２.０６；¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣl₃)δ０.４９
(３Ｈ,s,１８−ＣＨ₃)、０.５１(６Ｈ,q,Ｊ＝５.７Ｈz,
Ｓi−ＣＨ₂−)、０.８５[１８Ｈ,s,Ｓi−Ｃ(ＣＨ₃)₃]、
０.９０(９Ｈ,t,Ｊ＝７.９Ｈz,Ｓi−ＣＨ₂−ＣＨ₃)、
１.１３(３Ｈ,d,Ｊ＝６.２Ｈz,２１−ＣＨ₃)、１.２３
(６Ｈ,s,２６,２７−ＣＨ₃)、４.１６(１Ｈ,m,３−
Ｈ)、４.３５(１Ｈ,m,１−Ｈ)、４.８３(１Ｈ,brs,１９
Ｚ−Ｈ)、５.１６(１Ｈ,brs,１９Ｅ−Ｈ)、５.９８(１
Ｈ,d,Ｊ＝Ｈz,７−Ｈ)、６.２０(１Ｈ,d,Ｊ＝１１.３Ｈ
z,６−Ｈ)、７.５４(２Ｈ,t,Ｊ＝７Ｈz,Ａr−メタ)、
７.６１(１Ｈ,t,Ｊ＝７Ｈz,Ａr−Ｈ,パラ)、７.８６(２
Ｈ,d,Ｊ＝７Ｅz,Ａr−Ｈ,オルソ)；ＭＳ m／z(相対的
強度)、９２６(１９)、７９４(１００)、７３７(１
１)、５３０(２８)、５２１(１４)、３８９(３３)、３
０１(１４)．

【００３４】参考例４ (a)２４−ジホモ−１,２５−ジヒドロキシビタミンＤ
₃(３２) メタノール０.５ml中Ｎa₂ＨＰＯ₄の飽和溶液を、スルホ
ン(２９)(１.８０mg)の無水ＴＨＦ０.５ml中撹拌溶液に
加え、次いで粉末無水Ｎa₂ＨＰＯ₄(８０mg)を添加し
た。混合物をアルゴン雰囲気下に３０分間撹拌し、０℃
に冷却した。新鮮な５％ナトリウムアマルガム(約２０
０mg)を添加し、混合物を３時間、５℃でＴＬＣ(溶媒系
Ｃ)により出発物質が検出されなくなるまで、撹拌し
た。混合物をヘキサン３mlで希釈し、撹拌を１５分間続
けた。溶媒をデカンテーションし、固体物質をヘキサン
(３×２ml)で洗浄した。氷および飽和塩化ナトリウム２
mlを合した有機溶液に加えた。有機層を飽和塩化ナトリ
ウムで洗浄し、シリカゲルＳep−Ｐakカートリッジでろ
過して、ヒドロキシ保護２４−ジホモ−１α−２５−ジ
ヒドロキシビタミンＤ₃化合物(３１)を無色の油として
得た（１.１９mg、１.５μmol、７８％）。同様な方法
に従い、スルホン(３０)のナトリウムアマルガム還元に
より、化合物３１を得た。すなわち、実施例で得られた
ような、スルホン(２９)および(３０)は、ナトリウムア
マルガム還元前に、分離する必要はない。両混合物は、
効果的に還元して所望のビタミンＤ誘導体(３１)を得る
ことができる。

【００３５】化合物(３１)(１.１mg)を無水ＴＨＦ０.５
mlに溶解し、この溶液に、ＴＨＦ中テトラブチルアンモ
ニウム・フルオライド(２０μl、１Ｍ溶液)を添加し
た。混合物をアルゴン雰囲気下に、５０分間５０℃で撹
拌した。次いでエーテル３mlを添加し、有機層を飽和塩
化ナトリウムで洗浄した。溶媒を除去し、残渣をヘキサ
ン中１０％２−プロパノールに溶解し、シリカゲルＳep
−Ｐakでろ過した。プレパラテイブＨＰＬＣ(溶媒系
Ｄ、カラム６.２mm×２５cm、Ｒv６２ml)により、所望
のビタミンＤ同族体(３２)を得た(４６５μg、７６
％)。ＩＲ(膜)３３６０、２９２７、１６０２、１４４７、１
３７６、１２９７、１１４６、１１０６、１０８６、１
０６４cm^-1；ＵＶ(ヘキサン中１０％２−プロパノール)
λmax２６４nm、λmin２２８nm、Ａ２６４／Ａ２２８＝
１.９１；¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣl₃)δ０.５２(３Ｈ,s,１８
−ＣＨ₃)、０.９０(３Ｈ,d,Ｊ＝６.４Ｈz,２１−Ｃ
Ｈ₃)、１.１９(６Ｈ,s,２６,２７−ＣＨ₃)、４.２２(１
Ｈ,m,３−Ｈ),４.４２(１Ｈ,m,１−Ｈ)、４.９９(１Ｈ,
brs,１９Ｚ−Ｈ)、５.３１(１Ｈ,brs,１９Ｅ−Ｈ)、６.
００(１Ｈ,d,Ｊ＝１１.１Ｈz,７−Ｈ)、６.３６(１Ｈ,
d,Ｊ＝１１.２Ｈz,６−Ｈ)；ＭＳ、m／z(相対的強度)４
４４(Ｍ⁺,１.４)、４２６(４１)、３９３(１０)、２５
１(２６)、２０９(１７)、１９７(２０)、１５７(２
９)、１５５(３７)、１３４(５８)、１０５(５４)、５
９(１００)；式量Ｃ₂₉Ｈ₄₈Ｏ₃として、計算値：４４４.
３６０３、実験値：４４４.３６０９

【００３６】(b)フェニルスルホン(２３)を用いた側鎖
の結合ビタミン・トシレート(１３)をフェニルスルホン単位
(２３)と、前記実施例１記載の条件下に反応させて、対
応するビタミンスルホン付加物を得た。これら付加物
を、前記参考例４(a)の一般的な条件を用いてＮa／Ｈg
還元したのち、次いで参考例４(a)記載のヒドロキシ保
護基を除去して、所望の生成物、２４−トリホモ−１,
２５−ジヒドロキシビタミンＤ₃を得た。これは、以下
の構造で示される。

【化９】

【００３７】２４−ジホモ−１,２５−ジヒドロキシビ
タミンＤ₃(化合物３２)の生物学的活性参考例５ＨＬ−６０細胞の分化測定(第１表) ＨＬ−６０細胞(ヒト白血病細胞)の分化測定は、デルカ
ら(米国特許第４７１７７２１号)記載の一般的な方法に
従い行った。該特許記載の方法に加え、非特異的酸エス
テラーゼ活性を、市販のキット(シグマ・ケミカル・コ
ーポレイション、セントルイス、ミズリイ)に記載のよ
うに測定した。第１表に示すように、分化の程度は、３
つの異なる方法(ＮＢＴ還元、食作用、およびエステラ
ーゼ活性)で決定し、結果を、種々の濃度のビタミンＤ
化合物での処置に応じて生成した分化細胞の割合として
示す。

【００３８】

【表１】

【００３９】これら３つの分析結果を第１表に示した。
明らかなように、新規同族体２４−ジホモ−１,２５−
(ＯＨ)₂Ｄ₃(化合物３２)は、１,２５−(ＯＨ)₂Ｄ₃自体
よりも、培養株におけるＨＬ−６０細胞の分化誘発の点
で、活性が高い(第１表)。すなわち、天然のホルモンで
ある１,２５−(ＯＨ)₂Ｄ₃は、濃度１×１０^-8モルで約
５０〜６０％の細胞の分化を誘発するのに対し、新規な
２４−ジホモ同族体(化合物３２)は、５倍も低い濃度
(５×１０^-9Ｍ)で、６０％以上の分化が得られた。同様
に、１,２５−(ＯＨ)₂Ｄ₃では、約８０％の分化細胞の
生成のために、濃度１×１０^-7モルが必要であるのに対
し、ジホモ同族体では、５×１０^-8Ｍ(例えば５倍も低
い)で９０％よりも良好な分化が得られる。これらの結
果は、２４−ジホモ−１,２５−(ＯＨ)₂Ｄ₃が、培養株
におけるＨＬ−６０細胞の分化誘発の点で、５〜１０倍
も活性が高いことを、強く支持するものである。

【００４０】参考例６ラットにおけるカルセミック活性の分析 (a)腸のカルシウム輸送活性およびくる病ラット骨の無
機質化(第２表) 乳離れしたばかりの雄性ラットを、ハルラーン・スプラ
ーグ・ドウーリー・カンパニイ(マジソン、ウイスコン
シン)から入手し、高カルシウム・低リン分のくる病誘
発性食物〔スダら、ジェイ・ニュトル(Ｓuda et.al.,J.N
utr)、100巻、1049〜1052頁、1970年〕をラットに与え
た。かかるラットに、この餌を自由に合計４週間与え
た。３週の終わりに、動物を各群ラット６匹に分けた。
１つの群に、毎日、腹こう内に、ビヒクル(ポリエチレ
ングリコール９５％＋エタノール５％)０.１mlを与え
た。のこりの群は、以下の用量を含む同じ量のビヒクル
を与えた：１,２５−(ＯＨ)₂Ｄ₃＝１２.５ng、１,２５
−(ＯＨ)₂Ｄ₃＝２５ng、２４−ジホモ−１,２５−(Ｏ
Ｈ)₂Ｄ₃＝１２.５ngまたは２４−ジホモ−１,２５−(Ｏ
Ｈ)₂Ｄ₃＝２５ng。最後の投与後２４時間ののち、動物
を殺し、腸を摘出し、十二指腸セグメントを用いて、腸
カルシウム輸送をハロランおよびデルカ〔アーチ・バイ
オケム・バイオフィズ(Ａrch.Ｂiochem.Ｂiophys.)、20
8巻、477〜486頁、1981年〕記載のように測定した。カ
ルシウム輸送活性は、第２表に、カルシウム輸送比率と
して示し、これは、Ｉ／Ｏ表示によって記した〔しょう
膜媒体中のカルシウム濃度(Ｉ)：粘膜媒体中のカルシウ
ム濃度(Ｏ)〕。テスト化合物による骨無機質化を分析す
るために、全ての動物の大腿骨を摘出し、ソックスレッ
ト抽出器により９５％エタノールで２４時間抽出し、ソ
ックスレット抽出器によりクロロホルムで２４時間抽出
した。これらを恒量まで乾燥し、その全量および大腿骨
中の灰分割合を、６００°Ｆ×２４時間の焼却後に測定
した。カルシウム輸送比率は、Ｉ／Ｏで示した〔しょう
膜媒体中のカルシウム濃度(Ｉ)：粘膜媒体中のカルシウ
ム濃度(Ｏ)〕。灰分含量は、灰分／大腿骨の合計ミリグ
ラム数または脱脂乾燥骨重量に基づく灰分割合で、決定
した。

【００４１】

【表２】

【００４２】(b)腸カルシウム輸送および骨カルシウム
代謝の測定(第３表および第４表) 乳離れしたばかりの雄性ラットを、ハルラーン・スプラ
ーグ・ドウーリー・カンパニイから入手し、低カルシウ
ム・ビタミンＤ欠乏食物〔スダら、ジェイ・ニュトル
(Ｓuda et.al.,J.Ｎutr)、100巻、1049〜1052頁、1970
年〕をラットに４週間与えた。３週の終わりに、動物
に、第３表および第４表に示した用量(ポリエチレング
リコール９５％＋エタノール５％に溶解)を与えた。各
群の動物に、毎日、７日間、腹こう内に、示した用量を
含む溶媒ビヒクル０.１mlを与えた。対照群は、溶媒の
み与えた。腸カルシウム輸送は、ハロランおよびデルカ
〔アーチ・バイオケム・バイオフィズ(Ａrch.Ｂiochem.
Ｂiophys.)、208巻、477〜４８６頁、１９８１年〕記載
のように測定し、血しょうカルシウムは、原子吸収スペ
クトロホトメーターを用いて測定した(米国特許第４７
１７７２１号)。

【００４３】

【表３】

【００４４】

【表４】

【００４５】第２表および第３表に示した結果によれ
ば、２４−ジホモ−１,２５−(ＯＨ)₂Ｄ₃(化合物３２)
は、１,２５−(ＯＨ)₂Ｄ₃よりも、腸カルシウム輸送刺
激において、活性が著しく低い。１,２５−(ＯＨ)₂Ｄ₃
は、１日当たり、１２.５〜２５ngで最大カルシウム輸
送を達成するのに対し、２４−ジホモ−１,２５−(Ｏ
Ｈ)₂Ｄ₃は、これらの用量ではいかなる場合も、活性を
示さず(第２表)、１日当たりのレベル１２５ngでのみ、
実質的な応答をなしたにすぎない(第３表)。この応答で
さえ、１,２５−(ＯＨ)₂Ｄ₃(１２.５ng／日)により得ら
れる活性よりも低い。これらの結果は、該ジホモ同族体
が腸カルシウム輸送刺激において１,２５−(ＯＨ)₂Ｄ₃
の活性の１０分の１またはそれ以下であることを、証明
するものである(第２表および第３表)。

【００４６】骨無機質化の場合(第２表)、スケルトンに
よる２４−ジホモ−１,２５−(ＯＨ)₂Ｄ₃の無機質化の
効果と、同様な欠如が観察された。第２表における大腿
骨灰分および大腿骨灰分％の数値に示されているよう
に、用量１２.５ngおよび２５ngのジホモ化合物(３２)
は、対照と比較して実質的な変化を生み出していないの
に対し、１,２５−(ＯＨ)₂Ｄ₃は、これらと同じ投与レ
ベルで実質的な無機質化を誘発している。

【００４７】骨カルシウム代謝(血しょうカルシウムレ
ベル)の測定によれば、１,２５−(ＯＨ)₂Ｄ₃は、骨の損
失による血しょうカルシウムの上昇を、用量１２.５〜
２５ng／日で生じさせることが明白である(第３表およ
び第４表)。これに対し、２４−ジホモ−１,２５−(Ｏ
Ｈ)₂Ｄ₃は、投与レベル２５ng／日で実質的な応答を誘
発させず、第１実験の１２５ng／日でも全く誘発させず
(第３表)、第２実験においてレベル１２５〜２５０ngで
投与した場合に、血しょうカルシウムをごく穏やかに上
昇させたにすぎない(第４表)。同様に、注目すべきは、
第４表の観察によれば、１２５ng／日から２５０ng／日
に用量を増加させても、血中のカルシウムレベルは増加
しない。これらの結果によれば、２４,２４−ジホモ−
１,２５−(ＯＨ)₂Ｄ₃は、骨の消費による血しょうカル
シウムの増加に関し、１,２５−(ＯＨ)₂Ｄ₃と比較し
て、１０分の１以下の活性である。これらの結果は、骨
カルシウム代謝を測定する第３の実験により確認でき、
この実験では、ジホモ化合物３２は、１０００ng／日ま
での投与範囲にわたり、応答を誘発させない。

【００４８】すなわち、新規なビタミンＤ同族体(化合
物３２)は、細胞分化において予期できないほどの好適
な活性を示す一方、カルシウム輸送および代謝に対しほ
とんど作用しないことが判明した。これは、抗癌剤とし
て使用されるビタミンＤ化合物にとって望ましいタイプ
の活性である。１,２５−(ＯＨ)₂Ｄ₃と比較して非常に
低いカルシウム作用により、新規なジホモ−１,２５−
(ＯＨ)₂Ｄ₃同族体は、望ましくない過剰カルシウム化応
答を患者に誘発させることなく、投与することができる
一方、悪性細胞の増殖抑制および細胞分化の誘発におい
て、１,２５−(ＯＨ)₂Ｄ₃よりも、高い効力を示す。同
じタイプの活性パターン、すなわち明白な分化活性と、
非常に低いかまたは全くないカルセミック活性との組み
合わせは、本発明の２４−トリホモ同族体に対し予想で
き、この化合物も著しく向上した有利な分化／カルセミ
ック活性の比率を示すことができる。先行技術（ＵＳ
Ｐ.Ｎo.4717721）の２４−ホモ−ビタミンＤと構造的に
は関連するが、これらの側鎖ホモビタミンＤ化合物は、
本質的に変化した活性特性：ほぼなくなったカルセミッ
ク活性と結合した高い細胞分化活性を示すものである。
さらに、分化活性は、ヒト白血病細胞(ＨＬ−６０細胞)
の場合にも示すので、これらの新規なビタミン同族体
は、ヒトの悪性細胞、とくに白血病の治療に使用するこ
とができる。

【００４９】治療目的には、これらの化合物は、通常の
溶媒中の溶液、または通常の適した溶媒または担体中の
エマルジョン、懸濁液または分散液として、またはピ
ル、錠剤またはカプセルとして、常法により処方するこ
とができる。かかる組成物は、また、他の医薬上許容す
ることができる非毒性賦形剤、例えば安定剤、抗酸化
剤、バインダー、着色剤、乳化剤、または香味剤を含有
することができる。該化合物は、有利には注入または適
した滅菌溶液の経静脈注入により、または食物管を介す
る経口投与の形態で投与する。ヒト白血病の治療には、
本発明のホモビタミンＤ化合物は、白血病細胞のマクロ
ファージへの分化誘発に充分な投与量で患者に投与す
る。好ましい投与量は、０.５μg〜５０μg／日で、か
かる投与量は、当業者に明らかなように、疾患の激しさ
や患者の応答や状態に応じ、高い用量レベルまで調節す
ることができる。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者ハインリッヒ・カー・シュノーズアメリカ合衆国ウィスコンシン53705マジソン、サミット・アベニュー、1806番 (72)発明者カトー・エル・パールマンアメリカ合衆国ウィスコンシン53711、マジソン、チッペワ・コート１番 (72)発明者アンヂジェイ・クトネルポーランド国ワルシャワ01−793、ルイドイギエラ８番インスティテュート・オブ・ファーマシューテイカル・インダストリーズ

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】式: 【化１】〔式中、ＸおよびＹは、アルキルシリル基であり、Ｐh
はフェニル又はアルキル置換フェニルであり、Ｒはアル
キルおよびアルキルシリルオキシアルキルから選ばれる
基を意味する。〕で示されるビタミンＤ−２２−フェニ
ルスルホン誘導体。