JPH073425B2 - 免疫反応用担体の製造方法 - Google Patents
免疫反応用担体の製造方法Info
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- JPH073425B2 JPH073425B2 JP60006690A JP669085A JPH073425B2 JP H073425 B2 JPH073425 B2 JP H073425B2 JP 60006690 A JP60006690 A JP 60006690A JP 669085 A JP669085 A JP 669085A JP H073425 B2 JPH073425 B2 JP H073425B2
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- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
- G01N33/54313—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals the carrier being characterised by its particulate form
- G01N33/54326—Magnetic particles
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Description
【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は、免疫反応用担体の製造方法に関する。更に詳
しくは、免疫反応を利用して人体の体液中の微量物質の
量を定量的かつ選択的に測定するための免疫学的診断用
担体の製造方法に関するものである。
しくは、免疫反応を利用して人体の体液中の微量物質の
量を定量的かつ選択的に測定するための免疫学的診断用
担体の製造方法に関するものである。
（従来の技術） 人体の体液中、特に血清中に含まれる微量物質を検出し
たり、その濃度を測定する方法として免疫測定法が一般
に広く用いられている。免疫測定は、抗原とそれに対す
る抗体とが結合する反応が極めて特異的であり、かつ極
めて低濃度でも起こることを利用して、このような抗原
抗体反応を定量的に検出することによって抗原または抗
体の濃度を測定する方法である。
たり、その濃度を測定する方法として免疫測定法が一般
に広く用いられている。免疫測定は、抗原とそれに対す
る抗体とが結合する反応が極めて特異的であり、かつ極
めて低濃度でも起こることを利用して、このような抗原
抗体反応を定量的に検出することによって抗原または抗
体の濃度を測定する方法である。
抗原抗体反応を定量的に検出するために、数多くの測定
方法が開発され利用されているが、なかでも抗原か抗体
のいずれか一方を何かで標識する方法が広く行われてお
り、標識としては、赤血球，合成ポリマー微粒子，放射
性同位元素，酵素，螢光物質，発光性物質などが用いら
れている。
方法が開発され利用されているが、なかでも抗原か抗体
のいずれか一方を何かで標識する方法が広く行われてお
り、標識としては、赤血球，合成ポリマー微粒子，放射
性同位元素，酵素，螢光物質，発光性物質などが用いら
れている。
例えば、放射性同位元素を標識したラジオイムノアッセ
イでは、抗原を標識し、非標識抗原とこれらに対する抗
体とを反応させ、抗原抗体結合物（Ｂ型）と遊離の抗原
（Ｆ型）とを分離（B/F分離）して、目的抗原の定量を
行う。また、酵素を標識したエンザイムノムノアッセイ
では、抗体を標識して抗原抗体反応を行い、B/F分離を
行った後、Ｂ型を定量的に検出して目的抗原の定量を行
う。
イでは、抗原を標識し、非標識抗原とこれらに対する抗
体とを反応させ、抗原抗体結合物（Ｂ型）と遊離の抗原
（Ｆ型）とを分離（B/F分離）して、目的抗原の定量を
行う。また、酵素を標識したエンザイムノムノアッセイ
では、抗体を標識して抗原抗体反応を行い、B/F分離を
行った後、Ｂ型を定量的に検出して目的抗原の定量を行
う。
しかしながら、これらの測定方法におけるB/F分離の操
作は著しく煩雑であり、迅速かつ精確な免疫測定を大き
く阻害している。
作は著しく煩雑であり、迅速かつ精確な免疫測定を大き
く阻害している。
このため、抗原または抗体を固相に固定化して抗原抗体
反応を行い、Ｂ型を不溶化することによってB/F分離を
簡易化する工夫が種々なされている。しかしながらこの
場合、抗原抗体反応が固液反応となるため、固相上の抗
原または抗体の密度を充分高くすると共に攪拌を充分行
わないと、完全な抗原抗体反応は行えない。更には、固
相の比重もできるだけ反応液のそれに近いほうが反応効
率は良い。
反応を行い、Ｂ型を不溶化することによってB/F分離を
簡易化する工夫が種々なされている。しかしながらこの
場合、抗原抗体反応が固液反応となるため、固相上の抗
原または抗体の密度を充分高くすると共に攪拌を充分行
わないと、完全な抗原抗体反応は行えない。更には、固
相の比重もできるだけ反応液のそれに近いほうが反応効
率は良い。
（発明が解決しようとする問題点） 本発明は上記問題点を解決するためになされたものであ
る。
る。
（発明の作用） 本発明は、（１）熱可塑性樹脂の表面またはその内部
に、磁気感応性粉体を担持させ、次いで抗原，抗体また
は生理活性物質を固定化するため、−OH,−CHO,−SH, の官能基を有する少なくとも一種のモノマーもしくはポ
リマーまたはこれらを主成分とする混合物、（２）該混
合物を架橋剤及び／または表面処理剤で更に、処理する
ことを特徴とする免疫反応用担体の製造方法に関するも
のである。
に、磁気感応性粉体を担持させ、次いで抗原，抗体また
は生理活性物質を固定化するため、−OH,−CHO,−SH, の官能基を有する少なくとも一種のモノマーもしくはポ
リマーまたはこれらを主成分とする混合物、（２）該混
合物を架橋剤及び／または表面処理剤で更に、処理する
ことを特徴とする免疫反応用担体の製造方法に関するも
のである。
以下本発明を詳しく説明する。
熱可塑性樹脂としては、0.1〜20mmの平均粒径をもつポ
リエチレン，ポリプロピレン，エチレン−酢酸ビニル共
重合体，ナイロン，ポリスチレン，スチレン−イソプレ
ン共重合体，スチレン−ブタジエン共重合体，ポリ塩化
ビニル及びこれらを主成分とする共重合体もしくは混合
物の少なくとも一種が使用できる。
リエチレン，ポリプロピレン，エチレン−酢酸ビニル共
重合体，ナイロン，ポリスチレン，スチレン−イソプレ
ン共重合体，スチレン−ブタジエン共重合体，ポリ塩化
ビニル及びこれらを主成分とする共重合体もしくは混合
物の少なくとも一種が使用できる。
磁気感応性粉体としては、鉄，四酸酸化鉄，ニッケル，
鉄−コバルト，珪素鋼及びMFe2O4（Ｍ＝Mn,Zn,Ni,Cd,C
u,Mg,Sr,Ba）で表わされる粒径0.01〜10μｍのソフトフ
ェライトの少なくとも一種が使用できる。
鉄−コバルト，珪素鋼及びMFe2O4（Ｍ＝Mn,Zn,Ni,Cd,C
u,Mg,Sr,Ba）で表わされる粒径0.01〜10μｍのソフトフ
ェライトの少なくとも一種が使用できる。
前記熱可塑性樹脂をその融点の±50℃、好ましくは±20
℃の範囲で磁気感応性粉体と共に加熱し、磁気感応性粉
体を熱可塑性樹脂の表面もしくはその内部に担持させ
る。このように熱可塑性樹脂に磁気感応性粉体を担持さ
せたものを、以下磁性樹脂と呼ぶ。
℃の範囲で磁気感応性粉体と共に加熱し、磁気感応性粉
体を熱可塑性樹脂の表面もしくはその内部に担持させ
る。このように熱可塑性樹脂に磁気感応性粉体を担持さ
せたものを、以下磁性樹脂と呼ぶ。
磁性樹脂の処理は以下の要領で行う。
１）磁性樹脂を−SH基，−OH基などの官能基をもつモノ
マーもしくはポリマーまたはこれらを主成分とする混合
物（以下「官能基をもつモノマーもしくはポリマーまた
はこれらを主成分とする混合物」を「官能基をもつ化合
物」と呼ぶ）で処理する。例えば、メチル−Ｌ−システ
インまたはセルロースなどを磁性樹脂表面で重合させ、
表面にチオール基または水酸基を担持させる。重合条件
は、熱可塑性樹脂の融点と重合温度及び重合の進行度合
を考慮して決める。
マーもしくはポリマーまたはこれらを主成分とする混合
物（以下「官能基をもつモノマーもしくはポリマーまた
はこれらを主成分とする混合物」を「官能基をもつ化合
物」と呼ぶ）で処理する。例えば、メチル−Ｌ−システ
インまたはセルロースなどを磁性樹脂表面で重合させ、
表面にチオール基または水酸基を担持させる。重合条件
は、熱可塑性樹脂の融点と重合温度及び重合の進行度合
を考慮して決める。
２）磁性樹脂を、−CHO基などの官能基をもつ化合物お
よび架橋剤で処理する。例えば、アクロレインと架橋剤
とを混合して磁性樹脂表面に付着させ熱または光をあて
て重合させて表面にアルデヒド基を担持させる。重合条
件は反応の進行度合などを考慮して決める。
よび架橋剤で処理する。例えば、アクロレインと架橋剤
とを混合して磁性樹脂表面に付着させ熱または光をあて
て重合させて表面にアルデヒド基を担持させる。重合条
件は反応の進行度合などを考慮して決める。
３）磁性樹脂を−OH基などの官能基をもつ化合物で処理
し、次いで表面処理剤で処理する。例えばポリビニルア
ルコールを磁性樹脂表面で重合させ、次いで、例えばア
ミノ基をもつシランカップリング剤で処理して、アミノ
基を表面に担持させる。重合条件およびカップリング剤
での処理条件は、反応の進行条件などを考慮して決め
る。
し、次いで表面処理剤で処理する。例えばポリビニルア
ルコールを磁性樹脂表面で重合させ、次いで、例えばア
ミノ基をもつシランカップリング剤で処理して、アミノ
基を表面に担持させる。重合条件およびカップリング剤
での処理条件は、反応の進行条件などを考慮して決め
る。
４）磁性樹脂を などの官能基をもつ化合物で処理し、次いで表面処理剤
で処理し、さらに別の表面処理剤で処理する。例えば、
グリシジルメタクリレートで磁性樹脂を被覆し、加熱し
て重合させる。次いで、例えばアルカリでケン化して水
酸基を表面に担持させ、さらに別の表面処理剤、例えば
アミノ基をもつシランカップリング剤で処理してアミノ
基を表面に担持させる。重合条件は熱可塑性樹脂の融点
および重合温度を考慮して決める。また、表面処理剤で
の処理条件は、反応の進行条件などを考慮して決める。
で処理し、さらに別の表面処理剤で処理する。例えば、
グリシジルメタクリレートで磁性樹脂を被覆し、加熱し
て重合させる。次いで、例えばアルカリでケン化して水
酸基を表面に担持させ、さらに別の表面処理剤、例えば
アミノ基をもつシランカップリング剤で処理してアミノ
基を表面に担持させる。重合条件は熱可塑性樹脂の融点
および重合温度を考慮して決める。また、表面処理剤で
の処理条件は、反応の進行条件などを考慮して決める。
５）磁性樹脂を などの官能基をもつ化合物と架橋剤とで処理し、次いで
表面処理剤で処理する。例えば、グリシジルメタクリレ
ートと架橋剤との混合物で樹脂表面を被覆し加熱して重
合させる。次いで、例えばエチレンジアミンなどのジア
ミン化合物と反応させ、アミノ基を表面に担持させる。
重合条件は重合温度などを考慮して決める。ジアミン化
合物の反応条件は反応の進行条件を考慮して決める。
表面処理剤で処理する。例えば、グリシジルメタクリレ
ートと架橋剤との混合物で樹脂表面を被覆し加熱して重
合させる。次いで、例えばエチレンジアミンなどのジア
ミン化合物と反応させ、アミノ基を表面に担持させる。
重合条件は重合温度などを考慮して決める。ジアミン化
合物の反応条件は反応の進行条件を考慮して決める。
以上のような磁性樹脂の処理によって、担体に抗原，抗
体または生理活性物質を通常の方法で化学結合的に安定
に担持させることができ、また簡単なマグネチックスタ
ーラーなどによって迅速かつ充分なかくはんが行える。
体または生理活性物質を通常の方法で化学結合的に安定
に担持させることができ、また簡単なマグネチックスタ
ーラーなどによって迅速かつ充分なかくはんが行える。
−OH基，−CHO基，−SH基， の官能基をもつモノマーもしくはポリマーとしては、そ
れぞれ、例えばポリビニルアルコールなど、アクロレイ
ンなど、メチル−Ｌ−システインなど、グリシジルメタ
クリレートなどのモノマーもしくはこれらを公知の方法
で重合して得られるポリマーまたはこれらを主成分とす
る混合物の少なくとも一種が使用できる。
れぞれ、例えばポリビニルアルコールなど、アクロレイ
ンなど、メチル−Ｌ−システインなど、グリシジルメタ
クリレートなどのモノマーもしくはこれらを公知の方法
で重合して得られるポリマーまたはこれらを主成分とす
る混合物の少なくとも一種が使用できる。
架橋剤としては、通常の重合反応に用いられるものを使
用することができる。
用することができる。
表面処理剤としては、例えば水酸化ナトリウム，エチレ
ンジアミンなどのジアミン類、シランカップリング剤な
どを必要に応じて用いることができる。処理条件は熱可
塑性樹脂の融点および処理の進行度合を考慮して決めれ
ばよい。
ンジアミンなどのジアミン類、シランカップリング剤な
どを必要に応じて用いることができる。処理条件は熱可
塑性樹脂の融点および処理の進行度合を考慮して決めれ
ばよい。
半径は0.1〜20mmの範囲にあることが望ましい。半径が
0.1mmより小さいとB/F分離の操作性が悪くなる。また20
mmより大きいと通常のかくはん方法で充分かくはんが行
えなくなる。
0.1mmより小さいとB/F分離の操作性が悪くなる。また20
mmより大きいと通常のかくはん方法で充分かくはんが行
えなくなる。
比重は0.95から3.50、好ましくは1.00から1.50の範囲に
あることが望ましい。0.95より小さいと担体が反応液に
浮いてしまい反応性が悪くなる。また3.50より重いと通
常の方法で充分かくはんできなくなる。
あることが望ましい。0.95より小さいと担体が反応液に
浮いてしまい反応性が悪くなる。また3.50より重いと通
常の方法で充分かくはんできなくなる。
（発明の効果） 以上述べてきたように、本発明の免疫反応用担体を用い
ることにより、固相上に抗原，抗体または生理活性物質
を化学的合的に安定に結合すると共にその表面密度を充
分大きくすることができる。さらに簡単なマグネチック
スターラーなどで十分な攪拌が行え、また従来著しく煩
雑であったB/F分離操作を極めて簡略化することができ
るため、抗原−抗体反応を著しく迅速かつ定量的に行う
ことができるようになった。
ることにより、固相上に抗原，抗体または生理活性物質
を化学的合的に安定に結合すると共にその表面密度を充
分大きくすることができる。さらに簡単なマグネチック
スターラーなどで十分な攪拌が行え、また従来著しく煩
雑であったB/F分離操作を極めて簡略化することができ
るため、抗原−抗体反応を著しく迅速かつ定量的に行う
ことができるようになった。
（実施例） 以下、実施例により本発明を説明するが、本発明はこれ
らの実施例のみに限定されるものではない。
らの実施例のみに限定されるものではない。
実施例１ 平均粒径7.8mmのナイロン球100gと平均粒径0.1μｍの四
酸酸化鉄20gとを混合し、220℃で10分間加熱した。反応
物を室温にもどし充分洗浄して乾燥させた後、アクロレ
イン10gとテトラエチレングリコールジメタクリレート
0.1gとを加え100℃で20分間加熱した。こうして得られ
た担体に２％（V/V）グルタルアルデヒド溶液を加え４
℃で16時間振盪した。担体を0.1Mリン酸緩衝液で３回洗
浄した後、0.5mg/mlの125Iラベル化IgG溶液を担体１ケ
当り200μｌ加え、４℃で16時間振盪した。担体を0.1M
リン酸緩衝液で３回洗浄し、γ−カウンターにて放射線
量を測定した。
酸酸化鉄20gとを混合し、220℃で10分間加熱した。反応
物を室温にもどし充分洗浄して乾燥させた後、アクロレ
イン10gとテトラエチレングリコールジメタクリレート
0.1gとを加え100℃で20分間加熱した。こうして得られ
た担体に２％（V/V）グルタルアルデヒド溶液を加え４
℃で16時間振盪した。担体を0.1Mリン酸緩衝液で３回洗
浄した後、0.5mg/mlの125Iラベル化IgG溶液を担体１ケ
当り200μｌ加え、４℃で16時間振盪した。担体を0.1M
リン酸緩衝液で３回洗浄し、γ−カウンターにて放射線
量を測定した。
担体１ケ当り3.1μｇのIgGが結合した。
実施例２ 平均粒径2.2mmのエチレン酢酸ビニル共重合体100gと平
均粒径0.3μｍの（Mn・Zn）Fe2O4で表わせるソフトフェ
ライト15gとを混合し、110℃で20分間加熱した。反応物
を室温にもどし充分洗浄して乾燥させた後、グリシジル
メタクリレート11gを加え90℃で15分間加熱した。次い
で担体を適当な濃度の水酸化ナトリウム溶液中にて40〜
50℃で30分間加熱した後、充分水洗して乾燥させた。担
体に10％（V/V）３−アミノプロピルトリエトキシシラ
ン溶液を加え室温で４時間振盪した後、充分水洗して乾
燥させた。次いで２％（V/V）グルタルアルデヒド溶液
を加え室温で２時間振盪した後、0.1Mリン酸緩衝液で３
回洗浄した。
均粒径0.3μｍの（Mn・Zn）Fe2O4で表わせるソフトフェ
ライト15gとを混合し、110℃で20分間加熱した。反応物
を室温にもどし充分洗浄して乾燥させた後、グリシジル
メタクリレート11gを加え90℃で15分間加熱した。次い
で担体を適当な濃度の水酸化ナトリウム溶液中にて40〜
50℃で30分間加熱した後、充分水洗して乾燥させた。担
体に10％（V/V）３−アミノプロピルトリエトキシシラ
ン溶液を加え室温で４時間振盪した後、充分水洗して乾
燥させた。次いで２％（V/V）グルタルアルデヒド溶液
を加え室温で２時間振盪した後、0.1Mリン酸緩衝液で３
回洗浄した。
このようにして得られた担体を次の３通りの方法で処理
した。
した。
１）0.5mg/mlの125Iラベル化IgG溶液を担体１ケ当り20
μｌ加え４℃で16時間振盪した。0.1Mリン酸緩衝液で担
体を３回洗浄し、γ−カウンターにて担体の放射線量を
測定した。
μｌ加え４℃で16時間振盪した。0.1Mリン酸緩衝液で担
体を３回洗浄し、γ−カウンターにて担体の放射線量を
測定した。
担体１ケ当り1.2μｇのIgGが結合した。
２）所要濃度のIgG溶液を担体１ケ当り100μｌずつ加
え、４℃で16時間振盪した後、0.1Mリン酸緩衝液で３回
洗浄した。次いで、適当な濃度のアルカリフォスファタ
ーゼ標識抗IgG抗体溶液を200μｌずつ加え、マグネチッ
クスターラーを用いて37℃で30分間かくはんした。50mM
2−メチル−２−アミノ−１−プロパノール緩衝液で３
回洗浄した後、1mMのｐ−ニトロフェニルリン酸溶液を2
00μｌ加え37℃で30分間振盪した。1N水酸化ナトリウム
溶液1mlを加えて反応を停止させ、405nmでの吸光度を測
定した。
え、４℃で16時間振盪した後、0.1Mリン酸緩衝液で３回
洗浄した。次いで、適当な濃度のアルカリフォスファタ
ーゼ標識抗IgG抗体溶液を200μｌずつ加え、マグネチッ
クスターラーを用いて37℃で30分間かくはんした。50mM
2−メチル−２−アミノ−１−プロパノール緩衝液で３
回洗浄した後、1mMのｐ−ニトロフェニルリン酸溶液を2
00μｌ加え37℃で30分間振盪した。1N水酸化ナトリウム
溶液1mlを加えて反応を停止させ、405nmでの吸光度を測
定した。
結果を図１に示した。
３）25000IU/mlの抗ヒトIgE溶液を担体１ケ当り500μｌ
加え、４℃で16時間振盪した。担体を0.1Mリン酸緩衝液
で３回洗浄した後、１％牛血清アルブミン溶液を担体１
ケ当り500μｌずつ加え４℃で16時間振盪した。担体を
0.1Mリン酸緩衝液で３回洗浄した後、適当な濃度のヒト
IgE溶液を100μｌ加え、マグネチックスターラーを用い
て37℃で１時間かくはんした。0.1Mリン酸緩衝液で３回
洗浄した後、適当な濃度のβ−Ｄ−ガラクトシダーゼ標
識抗ヒトIgE抗体溶液を担体１ケ当り300μｌ加え、マグ
ネチックスターラーを用いて37℃で１時間かくはんし
た。0.1Mリン酸緩衝液で３回洗浄した後、ｏ−ニトロフ
ェニル−β−Ｄ−ガラクトシド溶液を500μｌ加え、37
℃で１時間振盪した。0.2M炭酸ナトリウム溶液1mlを加
えて反応を停止させ、420nmの吸光度を測定した。
加え、４℃で16時間振盪した。担体を0.1Mリン酸緩衝液
で３回洗浄した後、１％牛血清アルブミン溶液を担体１
ケ当り500μｌずつ加え４℃で16時間振盪した。担体を
0.1Mリン酸緩衝液で３回洗浄した後、適当な濃度のヒト
IgE溶液を100μｌ加え、マグネチックスターラーを用い
て37℃で１時間かくはんした。0.1Mリン酸緩衝液で３回
洗浄した後、適当な濃度のβ−Ｄ−ガラクトシダーゼ標
識抗ヒトIgE抗体溶液を担体１ケ当り300μｌ加え、マグ
ネチックスターラーを用いて37℃で１時間かくはんし
た。0.1Mリン酸緩衝液で３回洗浄した後、ｏ−ニトロフ
ェニル−β−Ｄ−ガラクトシド溶液を500μｌ加え、37
℃で１時間振盪した。0.2M炭酸ナトリウム溶液1mlを加
えて反応を停止させ、420nmの吸光度を測定した。
結果を図２に示した。
実施例３ 平均粒径1.6mmのエチレン酢酸ビニル共重合体100gと平
均粒径0.3μｍの（Mn・Zn）Fe2O4で表わされるフェライ
ト15gとを混合し、110℃で20分間加熱した。反応物を室
温に戻し充分水洗して乾燥した後、グリシジルメタクリ
レート10gとテトラエチレングリコールジメタクリレー
ト0.1gとを加え90℃で15分間加熱した。次いで、担体に
65％（V/V）エチレンジアミン溶液を加え室温で16時間
振盪した後、充分水洗して乾燥させた。こうして得られ
た担体を次の２通りの方法で処理した。
均粒径0.3μｍの（Mn・Zn）Fe2O4で表わされるフェライ
ト15gとを混合し、110℃で20分間加熱した。反応物を室
温に戻し充分水洗して乾燥した後、グリシジルメタクリ
レート10gとテトラエチレングリコールジメタクリレー
ト0.1gとを加え90℃で15分間加熱した。次いで、担体に
65％（V/V）エチレンジアミン溶液を加え室温で16時間
振盪した後、充分水洗して乾燥させた。こうして得られ
た担体を次の２通りの方法で処理した。
１）0.5mg/mlの125Iラベル化IgG溶液を担体１ケ当り200
μｌ加え４℃で16時間振盪した後、0.1Mリン酸緩衝液で
３回洗浄し、γ−カウンターにて担体の放射線量を測定
した。
μｌ加え４℃で16時間振盪した後、0.1Mリン酸緩衝液で
３回洗浄し、γ−カウンターにて担体の放射線量を測定
した。
担体１ケ当り1.5μｇのIgGが結合した。
２）0.5mg/mlの抗フェリチン抗体溶液を担体１ケ当り50
0μｌ加え、４℃で16時間振盪した後、トリス−塩酸緩
衝液で５回洗浄した。所要濃度のフェリチン溶液10μｌ
と適当な濃度のアルカリフォスファターゼ標識抗フェリ
チン抗体溶液75μｌとを加え、マグネチックスターラー
を用いて37℃で20分間かくはんした。トリス−塩酸緩衝
液で３回洗浄した後、1mMの４メチルウンベリフェリル
リン酸溶液を100μｌ加え、37℃で５分間振盪した。次
いで、1MのEDTAを含む0.14Mのリン酸緩衝液を2.9ml加え
て反応を停止させた。励起波長360nm,螢光波長450nmで
螢光強度を測定した。
0μｌ加え、４℃で16時間振盪した後、トリス−塩酸緩
衝液で５回洗浄した。所要濃度のフェリチン溶液10μｌ
と適当な濃度のアルカリフォスファターゼ標識抗フェリ
チン抗体溶液75μｌとを加え、マグネチックスターラー
を用いて37℃で20分間かくはんした。トリス−塩酸緩衝
液で３回洗浄した後、1mMの４メチルウンベリフェリル
リン酸溶液を100μｌ加え、37℃で５分間振盪した。次
いで、1MのEDTAを含む0.14Mのリン酸緩衝液を2.9ml加え
て反応を停止させた。励起波長360nm,螢光波長450nmで
螢光強度を測定した。
結果を図３に示す。
図１ないし図３は本発明で得られた免疫反応用担体を用
いて行った免疫反応の結果を示す図である。
いて行った免疫反応の結果を示す図である。
Claims (2)
- 【請求項１】熱可塑性樹脂の表面もしくは内部に磁気感
応性粉体を担持させ、ついで抗原、抗体または生理活性
物質を固定化するため、−OH基、−CHO基、−SH基また
は の官能基を有する少なくとも一種のモノマーもしくはポ
リマーまたはこれらを主成分とする混合物の重合層で前
記熱可塑性樹脂の表面を覆う、ことを特徴とする免疫反
応用担体の製造方法。 - 【請求項２】該混合物を架橋剤及び／または表面処理剤
で更に処理することを特徴とする特許請求の範囲１項記
載の方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP60006690A JPH073425B2 (ja) | 1985-01-19 | 1985-01-19 | 免疫反応用担体の製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP60006690A JPH073425B2 (ja) | 1985-01-19 | 1985-01-19 | 免疫反応用担体の製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS61167866A JPS61167866A (ja) | 1986-07-29 |
| JPH073425B2 true JPH073425B2 (ja) | 1995-01-18 |
Family
ID=11645344
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP60006690A Expired - Fee Related JPH073425B2 (ja) | 1985-01-19 | 1985-01-19 | 免疫反応用担体の製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH073425B2 (ja) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS62197425A (ja) * | 1986-02-25 | 1987-09-01 | Toyo Soda Mfg Co Ltd | 球状熱可塑性樹脂の製造方法 |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| AU527144B2 (en) * | 1978-02-13 | 1983-02-17 | Technicon Instruments Corportion | Magnetically attractable material |
-
1985
- 1985-01-19 JP JP60006690A patent/JPH073425B2/ja not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS61167866A (ja) | 1986-07-29 |
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| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |