JPH07179497A - モノクローナル抗体 - Google Patents
モノクローナル抗体Info
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- JPH07179497A JPH07179497A JP29486893A JP29486893A JPH07179497A JP H07179497 A JPH07179497 A JP H07179497A JP 29486893 A JP29486893 A JP 29486893A JP 29486893 A JP29486893 A JP 29486893A JP H07179497 A JPH07179497 A JP H07179497A
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Abstract
(57)【要約】
【目的】 デ−Ｎ−アセチルシアル酸を含むガングリオ
シドに対するモノクローナル抗体を作製する。 【構成】 デ−Ｎ−アセチルシアル酸を含むガングリオ
シドであるデ−Ｎ−アセチルＧM2を化学的に合成し（特
願平４−１７３１４８号）、この合成されたデ−Ｎ−ア
セチルＧM2でマウスを免疫し、免疫されたマウスの脾臓
細胞を取り出し、これをミエローマと融合させてハイブ
リドーマを作製した。そして、作製されたハイブリドー
マをクローニングし、ハイブリドーマＤＭ２−１を樹立
した（生命研受託番号FERM P-13960）。そして、このハ
イブリドーマＤＭ２−１を用いてモノクローナル抗体を
作製する。
シドに対するモノクローナル抗体を作製する。 【構成】 デ−Ｎ−アセチルシアル酸を含むガングリオ
シドであるデ−Ｎ−アセチルＧM2を化学的に合成し（特
願平４−１７３１４８号）、この合成されたデ−Ｎ−ア
セチルＧM2でマウスを免疫し、免疫されたマウスの脾臓
細胞を取り出し、これをミエローマと融合させてハイブ
リドーマを作製した。そして、作製されたハイブリドー
マをクローニングし、ハイブリドーマＤＭ２−１を樹立
した（生命研受託番号FERM P-13960）。そして、このハ
イブリドーマＤＭ２−１を用いてモノクローナル抗体を
作製する。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明はモノクローナル抗体、特
にシアル酸をエピトープとするモノクローナル抗体に関
する。
にシアル酸をエピトープとするモノクローナル抗体に関
する。
【０００２】
【従来の技術】ガングリオシドはシアル酸を含むスフィ
ンゴ糖脂質であり、細胞膜表面に存在し、当該細胞表面
の陰性電荷に寄与することが知られている。このような
ガングリオシドは、細胞の相互識別、免疫機能もしくは
ある種のウイルスに対する受容体機能を有する生体膜機
能分子としても注目されている。
ンゴ糖脂質であり、細胞膜表面に存在し、当該細胞表面
の陰性電荷に寄与することが知られている。このような
ガングリオシドは、細胞の相互識別、免疫機能もしくは
ある種のウイルスに対する受容体機能を有する生体膜機
能分子としても注目されている。
【０００３】また最近、ガングリオシドが細胞の増殖、
分化、ガン化等に関わりがあることが判明したため、こ
れを腫瘍マーカとして用いる試みもなされている。ガン
グリオシドの抗原性は一般に弱いが、細胞のガン化にお
ける腫瘍マーカとして実用化されているものもある。
分化、ガン化等に関わりがあることが判明したため、こ
れを腫瘍マーカとして用いる試みもなされている。ガン
グリオシドの抗原性は一般に弱いが、細胞のガン化にお
ける腫瘍マーカとして実用化されているものもある。
【０００４】１９８８年、花井らはマウスメラノーマ細
胞Ｂ１６及びヒト扁平上皮ガン細胞Ａ４３１に微量のデ
−Ｎ−アセチルＧM3が存在し、健常ラット脳や線維芽細
胞であるｓｗｉｓｓ３Ｔ３細胞には見い出されなかった
ことを明らかにした。更に彼らは、このデ−Ｎ−アセチ
ルＧM3が、マウスメラノーマ細胞Ｂ１６あるいはヒト扁
平上皮ガン細胞Ａ４３１のＥＧＦレセプターの自己リン
酸化を促進し、細胞の増殖を亢進させることも明らかに
した。
胞Ｂ１６及びヒト扁平上皮ガン細胞Ａ４３１に微量のデ
−Ｎ−アセチルＧM3が存在し、健常ラット脳や線維芽細
胞であるｓｗｉｓｓ３Ｔ３細胞には見い出されなかった
ことを明らかにした。更に彼らは、このデ−Ｎ−アセチ
ルＧM3が、マウスメラノーマ細胞Ｂ１６あるいはヒト扁
平上皮ガン細胞Ａ４３１のＥＧＦレセプターの自己リン
酸化を促進し、細胞の増殖を亢進させることも明らかに
した。
【０００５】このような花井らの研究により、今までに
知られていないデ−Ｎ−アセチルシアル酸（デ−Ｎ−ア
セチルＮＡＮＡ）を含むガングリオシドがガン細胞に存
在し、細胞の増殖に関与していることが示された。従っ
て、これらのガングリオシドに対するモノクローナル抗
体は、ガンの診断に応用できる可能性があり、また、こ
れらのガングリオシドが細胞増殖に関わることから、抗
体治療への応用が期待される。
知られていないデ−Ｎ−アセチルシアル酸（デ−Ｎ−ア
セチルＮＡＮＡ）を含むガングリオシドがガン細胞に存
在し、細胞の増殖に関与していることが示された。従っ
て、これらのガングリオシドに対するモノクローナル抗
体は、ガンの診断に応用できる可能性があり、また、こ
れらのガングリオシドが細胞増殖に関わることから、抗
体治療への応用が期待される。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】しかしながら、デ−Ｎ
−アセチルシアル酸を含むガングリオシドのモノクロー
ナル抗体を作製しようとしても、このようなガングリオ
シドはガン組織中に比較的微量しか存在しないため、こ
れに対するモノクローナル抗体を作製するのは困難であ
った。
−アセチルシアル酸を含むガングリオシドのモノクロー
ナル抗体を作製しようとしても、このようなガングリオ
シドはガン組織中に比較的微量しか存在しないため、こ
れに対するモノクローナル抗体を作製するのは困難であ
った。
【０００７】本発明は以上のような問題に鑑みてなされ
たものであり、その目的は、デ−Ｎ−アセチルシアル酸
を含むガングリオシドに対するモノクローナル抗体を作
製することにある。
たものであり、その目的は、デ−Ｎ−アセチルシアル酸
を含むガングリオシドに対するモノクローナル抗体を作
製することにある。
【０００８】
【課題を解決するための手段】以上のような課題を解決
するために、本発明においては、デ−Ｎ−アセチルシア
ル酸を含むガングリオシドであるデ−Ｎ−アセチルＧM2
を化学的に合成し（特願平４−１７３１４８号）、これ
を用いてモノクローナル抗体を作製したことを特徴とす
る。
するために、本発明においては、デ−Ｎ−アセチルシア
ル酸を含むガングリオシドであるデ−Ｎ−アセチルＧM2
を化学的に合成し（特願平４−１７３１４８号）、これ
を用いてモノクローナル抗体を作製したことを特徴とす
る。
【０００９】即ち、本発明においては、合成されたデ−
Ｎ−アセチルＧM2でマウスを免疫し、免疫されたマウス
の脾臓細胞を取り出し、これをミエローマと融合させて
ハイブリドーマを作製した。そして、作製されたハイブ
リドーマをクローニングし、ハイブリドーマＤＭ２−１
を樹立した（生命研受託番号FERM P-13960）。
Ｎ−アセチルＧM2でマウスを免疫し、免疫されたマウス
の脾臓細胞を取り出し、これをミエローマと融合させて
ハイブリドーマを作製した。そして、作製されたハイブ
リドーマをクローニングし、ハイブリドーマＤＭ２−１
を樹立した（生命研受託番号FERM P-13960）。
【００１０】ハイブリドーマの作製手法は、抗原の調
整、免疫、細胞融合、抗体産生ハイブリドーマの
選択、モノクローン化の５工程からなる。
整、免疫、細胞融合、抗体産生ハイブリドーマの
選択、モノクローン化の５工程からなる。
【００１１】免疫動物としては、一般的にマウスやラッ
トが多く用いられる。マウスの中でも、免疫グロブリン
を産生しない腫瘍細胞株の確立されているＢａｌｂ／ｃ
が好適である。
トが多く用いられる。マウスの中でも、免疫グロブリン
を産生しない腫瘍細胞株の確立されているＢａｌｂ／ｃ
が好適である。
【００１２】抗原溶液は、生理食塩水若しくは緩衡溶液
等に溶解し、または、当該溶液のエマルジョンとして、
マウス若しくはラット１匹あたり１回に１０〜２０μｇ
程度投与するのが好ましい。免疫は数回に分けて行う
が、初回免疫はアジュバントと共に行うのが一般的であ
る。抗原溶液は、腹腔内或いは静脈内に投与するのが普
通である。そして、最終免疫後２〜４日後に、リンパ節
あるいは脾臓を摘出し、得られるリンパ球を細胞融合に
供する。
等に溶解し、または、当該溶液のエマルジョンとして、
マウス若しくはラット１匹あたり１回に１０〜２０μｇ
程度投与するのが好ましい。免疫は数回に分けて行う
が、初回免疫はアジュバントと共に行うのが一般的であ
る。抗原溶液は、腹腔内或いは静脈内に投与するのが普
通である。そして、最終免疫後２〜４日後に、リンパ節
あるいは脾臓を摘出し、得られるリンパ球を細胞融合に
供する。
【００１３】細胞融合時には、リンパ球をミエローマ細
胞の５〜２０倍量多く用いる。ミエローマ細胞には、Ｐ
３−Ｘ６３−Ａｇ８等が使用される。細胞融合は、ＨＶ
Ｊ（センダイウイルス）やポリエチレングリコールを用
いて行うことができる。また、電気パルスを用いる電気
融合法を採用することも可能である。
胞の５〜２０倍量多く用いる。ミエローマ細胞には、Ｐ
３−Ｘ６３−Ａｇ８等が使用される。細胞融合は、ＨＶ
Ｊ（センダイウイルス）やポリエチレングリコールを用
いて行うことができる。また、電気パルスを用いる電気
融合法を採用することも可能である。
【００１４】抗体産生ハイブリドーマの選択は、細胞融
合後数週間後にＥＬＩＳＡなどにより培養液中の抗体の
スクリーニング行い、これを選択する。スクリーニング
後に行われるクローニングは、一般によく用いられる限
界希釈法などにより行うことができる。クローニング
は、この他にも、ＦＡＣＳ（ＦｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔＡ
ｃｔｉｖａｔｅｄ Ｃｅｌｌ Ｓｏｒｔｅｒ）を用いた
りすることもできるが、いずれの方法を用いた場合でも
クローニングは２回以上繰り返し、完全に単一クローン
とする。
合後数週間後にＥＬＩＳＡなどにより培養液中の抗体の
スクリーニング行い、これを選択する。スクリーニング
後に行われるクローニングは、一般によく用いられる限
界希釈法などにより行うことができる。クローニング
は、この他にも、ＦＡＣＳ（ＦｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔＡ
ｃｔｉｖａｔｅｄ Ｃｅｌｌ Ｓｏｒｔｅｒ）を用いた
りすることもできるが、いずれの方法を用いた場合でも
クローニングは２回以上繰り返し、完全に単一クローン
とする。
【００１５】このような工程を経て得られたハイブリド
ーマを用いて本発明に係るモノクローナル抗体を作製す
る方法としては、ｉｎ ｖｉｔｒｏ法、ｉｎ ｖｉｖｏ
法のいずれでもよいが、ｉｎ ｖｉｖｏ法の方が抗体価
が高いので望ましい。
ーマを用いて本発明に係るモノクローナル抗体を作製す
る方法としては、ｉｎ ｖｉｔｒｏ法、ｉｎ ｖｉｖｏ
法のいずれでもよいが、ｉｎ ｖｉｖｏ法の方が抗体価
が高いので望ましい。
【００１６】
【作用】本発明に係るモノクローナル抗体は、デ−Ｎ−
アセチルＮＡＮＡシアル酸が存在する糖、糖タンパク質
若しくは糖脂質と特異的に結合し、当該末端のシアル酸
の結合様式を抗原決定基として認識する。即ち、本発明
に係るモノクローナル抗体は、末端にシアル酸を有する
化合物の結合様式（デ−Ｎ−アセチルＮＡＮＡα２−３
Ｇａｌ）を特異的に認識して抗原抗体結合をする。従っ
て、ＥＬＩＳＡ法等を併用することにより、容易に当該
化合物の検出をすることができる。
アセチルＮＡＮＡシアル酸が存在する糖、糖タンパク質
若しくは糖脂質と特異的に結合し、当該末端のシアル酸
の結合様式を抗原決定基として認識する。即ち、本発明
に係るモノクローナル抗体は、末端にシアル酸を有する
化合物の結合様式（デ−Ｎ−アセチルＮＡＮＡα２−３
Ｇａｌ）を特異的に認識して抗原抗体結合をする。従っ
て、ＥＬＩＳＡ法等を併用することにより、容易に当該
化合物の検出をすることができる。
【００１７】ここで、人体に腫瘍が生じると、デ−Ｎ−
アセチルＮＡＮＡシアル酸を含むガングリオシドがヒト
血清中で増加する。この場合に、本発明に係るモノクロ
ーナル抗体は、シアル酸の結合様式まで検出するため、
このシアル酸の結合様式により、ガンのタイプや病巣の
種類をある程度性格づけることが可能である。
アセチルＮＡＮＡシアル酸を含むガングリオシドがヒト
血清中で増加する。この場合に、本発明に係るモノクロ
ーナル抗体は、シアル酸の結合様式まで検出するため、
このシアル酸の結合様式により、ガンのタイプや病巣の
種類をある程度性格づけることが可能である。
【００１８】また、本発明のモノクローナル抗体と他の
モノクローナル抗体を２種以上組み合わせて腫瘍検出剤
を構成し、この腫瘍検出剤と検査対象との反応パターン
を検出することにより、ガンのタイプや病巣の種類の検
出を行うことが可能となる。従って、このような複数の
抗体を含む腫瘍検出剤により、人体中に発生した腫瘍の
種類、場所及び進行の程度等を検出することが可能とな
る。
モノクローナル抗体を２種以上組み合わせて腫瘍検出剤
を構成し、この腫瘍検出剤と検査対象との反応パターン
を検出することにより、ガンのタイプや病巣の種類の検
出を行うことが可能となる。従って、このような複数の
抗体を含む腫瘍検出剤により、人体中に発生した腫瘍の
種類、場所及び進行の程度等を検出することが可能とな
る。
【００１９】
【実施例】以下、本発明の好適な実施例について説明す
る。
る。
【００２０】［抗原］デ−Ｎ−アセチルシアル酸を含む
ガングリオシドであるデ−Ｎ−アセチルＧM2（図１）
は、特願平４−１７３１４８の記載に従い化学的に合成
した。
ガングリオシドであるデ−Ｎ−アセチルＧM2（図１）
は、特願平４−１７３１４８の記載に従い化学的に合成
した。
【００２１】［モノクローナル抗体の作製］５週令ＢＡ
ＬＢ／ｃマウス（メス）にＲｉｂｉアジュバントシステ
ム（商品名；（株）フナコシ）を用いて次のようなスケ
ジュールでデ−Ｎ−アセチルＧM2を免疫した。
ＬＢ／ｃマウス（メス）にＲｉｂｉアジュバントシステ
ム（商品名；（株）フナコシ）を用いて次のようなスケ
ジュールでデ−Ｎ−アセチルＧM2を免疫した。
【００２２】 １日目 １０μｇ／マウス ７日目 １０μｇ／マウス １４日目 １５μｇ／マウス ２１日目 １５μｇ／マウス ２８日目 ２０μｇ／マウス ６０日目 ２０μｇ／マウス 本実施例においては、６０日目を最終免疫とし、６３日
目に細胞融合を行った。ポリエチレングリコールを用い
てミエローマ細胞（Ｐ３−Ｘ６３−Ａｇ８）と免疫した
マウスの脾細胞とを融合した。９６穴マイクロプレート
を用いて培養し、ＨＡＴ培地により融合細胞のみを選択
した。抗原としてデ−Ｎ−アセチルＧM2を用いたＥＬＩ
ＳＡ法により培養上清の抗体価を測定し、強い反応を示
すクローンについては２回の限界希釈によるクローニン
グを行い、ハイブリドーマＤＭ２−１を樹立した（生命
研受託番号FERM P-13960）。
目に細胞融合を行った。ポリエチレングリコールを用い
てミエローマ細胞（Ｐ３−Ｘ６３−Ａｇ８）と免疫した
マウスの脾細胞とを融合した。９６穴マイクロプレート
を用いて培養し、ＨＡＴ培地により融合細胞のみを選択
した。抗原としてデ−Ｎ−アセチルＧM2を用いたＥＬＩ
ＳＡ法により培養上清の抗体価を測定し、強い反応を示
すクローンについては２回の限界希釈によるクローニン
グを行い、ハイブリドーマＤＭ２−１を樹立した（生命
研受託番号FERM P-13960）。
【００２３】［ＤＭ２−１により産生される抗体の特異
性］ （１）抗体のクラス アマシャム社製のアイソタイピングキットを用いて調べ
たところ、樹立されたＤＭ２−１抗体のサブクラスはＩ
ｇＭであった。
性］ （１）抗体のクラス アマシャム社製のアイソタイピングキットを用いて調べ
たところ、樹立されたＤＭ２−１抗体のサブクラスはＩ
ｇＭであった。
【００２４】（２）分析 ・ＥＬＩＳＡ法による分析 エタノールに溶解した抗原を９６穴マイクロプレートに
添加後、乾燥させて抗原を固定した。そこにハイブリド
ーマの培養上清を加え、３７℃で１時間反応させた。洗
浄後、１５００倍希釈したペルシオキシダーゼ標識ヤギ
抗マウスＩｇＧ−ＩｇＡ−ＩｇＭ抗体（商品名；（株）
ザイメット社）を加え、３７℃で１時間反応させた。洗
浄後、基質であるオルトフェニレンジアミン（４００μ
ｇ／ｍｌ）と０．０１％過酸化水素水を含む０．１Ｍク
エン酸バッファー、ｐＨ５．０を１００μｌ加え、室温
で１５分間反応させた。反応は８Ｎ硫酸３０μｌを加え
て停止させ、４９０ｎｍの吸光度を測定した。なお、抗
原としては、ＧM2、デ−Ｎ−アセチルＧM2、デ−Ｎ−ア
セチルＧM3を採用した。
添加後、乾燥させて抗原を固定した。そこにハイブリド
ーマの培養上清を加え、３７℃で１時間反応させた。洗
浄後、１５００倍希釈したペルシオキシダーゼ標識ヤギ
抗マウスＩｇＧ−ＩｇＡ−ＩｇＭ抗体（商品名；（株）
ザイメット社）を加え、３７℃で１時間反応させた。洗
浄後、基質であるオルトフェニレンジアミン（４００μ
ｇ／ｍｌ）と０．０１％過酸化水素水を含む０．１Ｍク
エン酸バッファー、ｐＨ５．０を１００μｌ加え、室温
で１５分間反応させた。反応は８Ｎ硫酸３０μｌを加え
て停止させ、４９０ｎｍの吸光度を測定した。なお、抗
原としては、ＧM2、デ−Ｎ−アセチルＧM2、デ−Ｎ−ア
セチルＧM3を採用した。
【００２５】抗体を希釈して各抗原との反応性を検討し
た結果を図２に示す。この図２に示されているように、
ＤＭ２−１により産生されるモノクローナル抗体はデ−
Ｎ−アセチルＧM2及びデ−Ｎ−アセチルＧM3と強く反応
したが、ＧM2とは反応しなかった。
た結果を図２に示す。この図２に示されているように、
ＤＭ２−１により産生されるモノクローナル抗体はデ−
Ｎ−アセチルＧM2及びデ−Ｎ−アセチルＧM3と強く反応
したが、ＧM2とは反応しなかった。
【００２６】・ＴＬＣ−immunostaining法による分析 ＴＬＣプレート（ベーカー社製）に抗原をスポットし、
クロロフォルム／メタノール／０．２％ＣａＣｌ2 水溶
液＝５０／４０／１０（ｖ／ｖ／ｖ）の展開溶媒で同様
に作製した２枚の内、１枚はＴＬＣ−immunostainingに
供し、他の１枚はレゾルシノール塩酸法により発色さ
せ、展開された抗原の確認に用いた。
クロロフォルム／メタノール／０．２％ＣａＣｌ2 水溶
液＝５０／４０／１０（ｖ／ｖ／ｖ）の展開溶媒で同様
に作製した２枚の内、１枚はＴＬＣ−immunostainingに
供し、他の１枚はレゾルシノール塩酸法により発色さ
せ、展開された抗原の確認に用いた。
【００２７】ＴＬＣ−immunostainingを行うプレート
は、５％ＢＳＡ−ＰＢＳ中に浸し、プロッキングを行っ
た後、ハイブリドーマ培養上清に浸し、３７℃で２時間
反応を行った。洗浄後、１０００倍希釈した２次抗体
（ＥＬＩＳＡと同じ）に浸し、３７℃で１時間反応させ
た。再び洗浄を行った後、基質である４−クロロ−１−
ナフトール（８００μｇ／ｍｌ）と０．０１％過酸化水
素水を含むＴＢＳバッファー（ｐＨ７．４）を加え、３
０分間室温で反応させた。現れたバンドをレゾルシノー
ル塩酸法で発色させたプレートと対比し、反応した抗体
を同定した。なお、抗原は、デ−Ｎ−アセチルＧM2、Ｇ
M2、デ−Ｎ−アセチルＧM3、ＧM3、デ−Ｎ−アセチルＧ
M4、ＧM4、デ−Ｎ−アセチルＮＡＮＡ−ＡＧＥ、ＮＡＮ
Ａ−ＡＧＥをそれぞれ用いた。
は、５％ＢＳＡ−ＰＢＳ中に浸し、プロッキングを行っ
た後、ハイブリドーマ培養上清に浸し、３７℃で２時間
反応を行った。洗浄後、１０００倍希釈した２次抗体
（ＥＬＩＳＡと同じ）に浸し、３７℃で１時間反応させ
た。再び洗浄を行った後、基質である４−クロロ−１−
ナフトール（８００μｇ／ｍｌ）と０．０１％過酸化水
素水を含むＴＢＳバッファー（ｐＨ７．４）を加え、３
０分間室温で反応させた。現れたバンドをレゾルシノー
ル塩酸法で発色させたプレートと対比し、反応した抗体
を同定した。なお、抗原は、デ−Ｎ−アセチルＧM2、Ｇ
M2、デ−Ｎ−アセチルＧM3、ＧM3、デ−Ｎ−アセチルＧ
M4、ＧM4、デ−Ｎ−アセチルＮＡＮＡ−ＡＧＥ、ＮＡＮ
Ａ−ＡＧＥをそれぞれ用いた。
【００２８】この結果を図３に示す。この図３に示され
ているように、ＤＭ２−１により産生されるモノクロー
ナル抗体は、デ−Ｎ−アセチルＧM2、デ−Ｎ−アセチル
ＧM3、及びデ−Ｎ−アセチルＧM4と反応した。
ているように、ＤＭ２−１により産生されるモノクロー
ナル抗体は、デ−Ｎ−アセチルＧM2、デ−Ｎ−アセチル
ＧM3、及びデ−Ｎ−アセチルＧM4と反応した。
【００２９】［結論］以上のようなＥＬＩＳＡおよびＴ
ＬＣ−ｉｍｍｕｎｏｓｔａｉｎｉｎｇ法の結果から、Ｄ
Ｍ２−１により産生されるモノクローナル抗体は、デ−
Ｎ−アセチルＧM2、ＧM3、ＧM4に共通するデ−Ｎ−アセ
チルＮＡＮＡα２−３Ｇａｌの構造を特異的に認識する
モノクローナル抗体といえる。
ＬＣ−ｉｍｍｕｎｏｓｔａｉｎｉｎｇ法の結果から、Ｄ
Ｍ２−１により産生されるモノクローナル抗体は、デ−
Ｎ−アセチルＧM2、ＧM3、ＧM4に共通するデ−Ｎ−アセ
チルＮＡＮＡα２−３Ｇａｌの構造を特異的に認識する
モノクローナル抗体といえる。
【００３０】［検出試薬］本実施例に係るモノクローナ
ル抗体は、デ−Ｎ−アセチルＮＡＮＡα２−３Ｇａｌを
特異的に認識するために、これを含む検出試薬は、ガン
のタイプや病巣の種類をある程度性格づけながら、ガン
の診断、治療効果の測定あるいは再発の早期発見などを
行うことができる。ノイラミン酸の結合様式は、ガンの
タイプや病巣の種類により異なると考えられるからであ
る。
ル抗体は、デ−Ｎ−アセチルＮＡＮＡα２−３Ｇａｌを
特異的に認識するために、これを含む検出試薬は、ガン
のタイプや病巣の種類をある程度性格づけながら、ガン
の診断、治療効果の測定あるいは再発の早期発見などを
行うことができる。ノイラミン酸の結合様式は、ガンの
タイプや病巣の種類により異なると考えられるからであ
る。
【００３１】また、本実施例のモノクローナル抗体と他
のモノクローナル抗体を２種以上組み合わせて複数の抗
体を含む腫瘍検出剤を構成し、この腫瘍検出剤と検査対
象との反応パターンを検出することにより、ガンのタイ
プや病巣の種類の検出がより適確に行え、人体中に発生
した腫瘍の種類、場所及び進行の程度等を適確に検出す
ることが可能となる。
のモノクローナル抗体を２種以上組み合わせて複数の抗
体を含む腫瘍検出剤を構成し、この腫瘍検出剤と検査対
象との反応パターンを検出することにより、ガンのタイ
プや病巣の種類の検出がより適確に行え、人体中に発生
した腫瘍の種類、場所及び進行の程度等を適確に検出す
ることが可能となる。
【００３２】
【発明の効果】以上説明したように、本発明に係るモノ
クローナル抗体によれば、デ−Ｎ−アセチルＮＡＮＡα
２−３Ｇａｌの構造を有するガングリオシドを検出する
ことにより、ガンのタイプや病巣の種類をある程度性格
づけながら、ガンの診断、治療効果の測定あるいは再発
の早期発見などを行うことができる。
クローナル抗体によれば、デ−Ｎ−アセチルＮＡＮＡα
２−３Ｇａｌの構造を有するガングリオシドを検出する
ことにより、ガンのタイプや病巣の種類をある程度性格
づけながら、ガンの診断、治療効果の測定あるいは再発
の早期発見などを行うことができる。
【図１】デ−Ｎ−アセチルＧM2の構造を示す図である。
【図２】ＥＬＩＳＡ法による測定結果を示す図である。
【図３】ＴＬＣ−免疫染色法（ＴＬＣ−ｉｍｍｕｎｏｓ
ｔａｉｎｉｎｇ法）による測定結果を示す図である。
ｔａｉｎｉｎｇ法）による測定結果を示す図である。
フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｇ０１Ｎ 33/577 Ｂ // Ｃ１２Ｎ 15/02 (Ｃ１２Ｐ 21/08 Ｃ１２Ｒ 1:91）
Claims (2)
- 【請求項１】 デ−Ｎ−アセチルＮＡＮＡα２−３Ｇａ
ｌ部分を認識するモノクローナル抗体。 - 【請求項２】 請求項１記載のモノクローナル抗体を含
む検出試薬。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP29486893A JPH07179497A (ja) | 1993-11-25 | 1993-11-25 | モノクローナル抗体 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP29486893A JPH07179497A (ja) | 1993-11-25 | 1993-11-25 | モノクローナル抗体 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH07179497A true JPH07179497A (ja) | 1995-07-18 |
Family
ID=17813293
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP29486893A Pending JPH07179497A (ja) | 1993-11-25 | 1993-11-25 | モノクローナル抗体 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH07179497A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2005517901A (ja) * | 2001-12-21 | 2005-06-16 | ビスカム・アーゲー | ヤドリギレクチンに対する個体の応答性を判定する方法 |
-
1993
- 1993-11-25 JP JP29486893A patent/JPH07179497A/ja active Pending
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2005517901A (ja) * | 2001-12-21 | 2005-06-16 | ビスカム・アーゲー | ヤドリギレクチンに対する個体の応答性を判定する方法 |
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