JPH07134126A - トリオキサン誘導体標識抗体・抗原および免疫測定方法 - Google Patents
トリオキサン誘導体標識抗体・抗原および免疫測定方法Info
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- JPH07134126A JPH07134126A JP17362193A JP17362193A JPH07134126A JP H07134126 A JPH07134126 A JP H07134126A JP 17362193 A JP17362193 A JP 17362193A JP 17362193 A JP17362193 A JP 17362193A JP H07134126 A JPH07134126 A JP H07134126A
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Abstract
(57)【要約】 （修正有）
【目的】 トリオキサン誘導体標識抗体、抗原および免
疫測定方法を提供する。 【構成】 一般式（１）又は一般式（２） （これらの式中Ｘは２価の有機残基を示し、Ｒはカルボ
キシル基などを示し、そしてＲ1 及びＲ2 は同一または
異って、それぞれ置換又は非置換の脂肪族炭化水素基を
示す。また、Ｘ1 とＸ2 とは、それぞれ独立して２価の
有機残基を示し、かつＲ3 及びＲ4 はそれぞれ独立して
カルボキシル基などを示す。Ｒ5 は水素原子、またはハ
ロゲン原子などを示す。）で表わされるトリオキサン誘
導体と、特定の抗体または抗原とが共有結合しているこ
とを特徴とする標識抗体または標識抗原、並びにこれら
を使用する免疫測定方法である。
疫測定方法を提供する。 【構成】 一般式（１）又は一般式（２） （これらの式中Ｘは２価の有機残基を示し、Ｒはカルボ
キシル基などを示し、そしてＲ1 及びＲ2 は同一または
異って、それぞれ置換又は非置換の脂肪族炭化水素基を
示す。また、Ｘ1 とＸ2 とは、それぞれ独立して２価の
有機残基を示し、かつＲ3 及びＲ4 はそれぞれ独立して
カルボキシル基などを示す。Ｒ5 は水素原子、またはハ
ロゲン原子などを示す。）で表わされるトリオキサン誘
導体と、特定の抗体または抗原とが共有結合しているこ
とを特徴とする標識抗体または標識抗原、並びにこれら
を使用する免疫測定方法である。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は新規なトリオキサン誘導
体が標識された抗体、抗原およびそれを用いる免疫測定
方法に関する。本発明の標識抗体および標識抗原は各種
診断薬として利用される。
体が標識された抗体、抗原およびそれを用いる免疫測定
方法に関する。本発明の標識抗体および標識抗原は各種
診断薬として利用される。
【０００２】
【従来の技術】化学発光とは、原子ないし分子が化学反
応によって生ずるエネルギーによって励起されて光を発
する現象をいう。化学発光性化合物として現在までに種
々の骨格を有するものが開発されており、ルミノール、
ルシゲニン、ロフィン、アクリジニウムエステル、シュ
ウ酸エステル、そしてトリオキサン骨格を有する５−
（９−アントリルアミノ）−３−イソプロピル−６,6−
ジメチル−１,2,4−トリオキサンにも化学発光能がある
ことが知られている（「生物発光と化学発光」今井一洋
編、広川書店出版、７５〜１５０ページ、１９８９
年）。
応によって生ずるエネルギーによって励起されて光を発
する現象をいう。化学発光性化合物として現在までに種
々の骨格を有するものが開発されており、ルミノール、
ルシゲニン、ロフィン、アクリジニウムエステル、シュ
ウ酸エステル、そしてトリオキサン骨格を有する５−
（９−アントリルアミノ）−３−イソプロピル−６,6−
ジメチル−１,2,4−トリオキサンにも化学発光能がある
ことが知られている（「生物発光と化学発光」今井一洋
編、広川書店出版、７５〜１５０ページ、１９８９
年）。
【０００３】現在までに化学発光物質が標識された抗体
（または抗原）については、ルミノールを標識するもの
が特開昭６２−１２４４４６、特開平１−１４９７７３
に、アクリジニウムエステルを標識物質として用いる方
法として特開昭６０−１４６１５５、６３−５７５７
２、６３−１１２５６４、特開平１−２６１４６１、１
−１９９９４９、２−９６５６７、２−１３３４６９、
３−５０１７７２に、フェナントリジニウムエステルを
用いる方法として特開昭６１−７６４６４が開示されて
いる。しかしながらルミノールは発光量子収率が一般に
低く、微量物質の検出に用いるのは困難である。またア
クリジニウムエステルやフェナントリジニウムエステル
は発光量子収率は比較的高いが、加水分解を受け易くこ
れによって化学発光能を失うという欠点を有している。
従ってこれらのアクリジニウムエステル類を診断用の標
識物質として使用した場合、徐々に化学発光能の低下が
生じ信頼性に欠ける結果を与える。
（または抗原）については、ルミノールを標識するもの
が特開昭６２−１２４４４６、特開平１−１４９７７３
に、アクリジニウムエステルを標識物質として用いる方
法として特開昭６０−１４６１５５、６３−５７５７
２、６３−１１２５６４、特開平１−２６１４６１、１
−１９９９４９、２−９６５６７、２−１３３４６９、
３−５０１７７２に、フェナントリジニウムエステルを
用いる方法として特開昭６１−７６４６４が開示されて
いる。しかしながらルミノールは発光量子収率が一般に
低く、微量物質の検出に用いるのは困難である。またア
クリジニウムエステルやフェナントリジニウムエステル
は発光量子収率は比較的高いが、加水分解を受け易くこ
れによって化学発光能を失うという欠点を有している。
従ってこれらのアクリジニウムエステル類を診断用の標
識物質として使用した場合、徐々に化学発光能の低下が
生じ信頼性に欠ける結果を与える。
【０００４】従って、高感度でかつ安定であって、しか
も再現性のよい診断薬および免疫測定方法の開発が望ま
れているのが現状である。
も再現性のよい診断薬および免疫測定方法の開発が望ま
れているのが現状である。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】本発明が解決しようと
する課題は、高感度でかつ安定であって、しかも再現性
のよい診断薬および免疫測定方法に用いることができる
標識抗体および標識抗原を提供することである。
する課題は、高感度でかつ安定であって、しかも再現性
のよい診断薬および免疫測定方法に用いることができる
標識抗体および標識抗原を提供することである。
【０００６】本発明が解決しようとする別の課題は、高
感度でかつ安定であって、しかも再現性のよい免疫測定
方法を提供することである。
感度でかつ安定であって、しかも再現性のよい免疫測定
方法を提供することである。
【０００７】
【課題を解決するための手段】本発明は一般式（１）
【０００８】
【化３】
【０００９】（式中Ｘは２価の有機残基を示し、Ｒはカ
ルボキシル基、アミノ基、ヒドロキシル基またはメルカ
プト基を示し、そしてＲ1 及びＲ2 は同一または異っ
て、それぞれ炭素原子１乃至３個の置換又は非置換の脂
肪族炭化水素基を示す）
ルボキシル基、アミノ基、ヒドロキシル基またはメルカ
プト基を示し、そしてＲ1 及びＲ2 は同一または異っ
て、それぞれ炭素原子１乃至３個の置換又は非置換の脂
肪族炭化水素基を示す）
【００１０】で表わされるトリオキサン誘導体と、特定
の抗体または抗原とが共有結合していることを特徴とす
る標識抗体または標識抗原に関する。
の抗体または抗原とが共有結合していることを特徴とす
る標識抗体または標識抗原に関する。
【００１１】また、本発明は一般式（２）
【００１２】
【化４】
【００１３】（式中Ｘ1 とＸ2 とは、それぞれ独立して
２価の有機残基を示し、Ｒ3 及びＲ4はそれぞれ独立し
てカルボキシル基、アミノ基、ヒドロキシル基またはメ
ルカプト基を示す。さらにＸ2 −Ｒ4 は、メチル基、エ
チル基またはプロピル基であってもよい。Ｒ5 は水素原
子、ハロゲン原子、メチル基、エチル基、またはプロピ
ル基を示す）
２価の有機残基を示し、Ｒ3 及びＲ4はそれぞれ独立し
てカルボキシル基、アミノ基、ヒドロキシル基またはメ
ルカプト基を示す。さらにＸ2 −Ｒ4 は、メチル基、エ
チル基またはプロピル基であってもよい。Ｒ5 は水素原
子、ハロゲン原子、メチル基、エチル基、またはプロピ
ル基を示す）
【００１４】で表わされるトリオキサン誘導体と、特定
の抗体または抗原とが共有結合していることを特徴とす
る標識抗体または標識抗原に関する。
の抗体または抗原とが共有結合していることを特徴とす
る標識抗体または標識抗原に関する。
【００１５】さらに本発明によれば前記一般式（１）お
よび（２）で表わされるトリオキサン誘導体を標識した
抗体および抗原を用いる種々の免疫測定方法に関する。
以下（Ａ）〜（Ｈ）に、これらを列挙する。
よび（２）で表わされるトリオキサン誘導体を標識した
抗体および抗原を用いる種々の免疫測定方法に関する。
以下（Ａ）〜（Ｈ）に、これらを列挙する。
【００１６】（Ａ）一般式（１）または一般式（２）に
示される標識抗体または標識抗原と、試料中の測定対象
物、いわゆる被検物との免疫複合体を形成させ、しかる
後、化学発光法により該被検物を定量することを特徴と
する免疫測定方法。
示される標識抗体または標識抗原と、試料中の測定対象
物、いわゆる被検物との免疫複合体を形成させ、しかる
後、化学発光法により該被検物を定量することを特徴と
する免疫測定方法。
【００１７】（Ｂ）特定の抗原（または抗体）を定量す
る免疫測定方法であって、一般式（１）または一般式
（２）に示される標識抗体（または抗原）を用いること
を特徴とする 抗原（または抗体）−標識抗体（または抗原）複合
体、もしくは 抗原（または抗体）−標識抗体（または抗原）複合
体に含まれていない標識抗体（または抗原） の化学発光を測定することにより特定の抗原（または抗
体）を定量する免疫測定方法。
る免疫測定方法であって、一般式（１）または一般式
（２）に示される標識抗体（または抗原）を用いること
を特徴とする 抗原（または抗体）−標識抗体（または抗原）複合
体、もしくは 抗原（または抗体）−標識抗体（または抗原）複合
体に含まれていない標識抗体（または抗原） の化学発光を測定することにより特定の抗原（または抗
体）を定量する免疫測定方法。
【００１８】（Ｃ）特定の抗体（または抗原）を用いて
特定の抗原（または抗体）を定量する免疫測定方法であ
って、一般式（１）または一般式（２）に示される標識
抗体（または抗原）を用いることを特徴とする 抗体（または抗原）−抗原（または抗体）−標識抗
体（または抗原）複合体、もしくは 抗体（または抗原）−抗原（または抗体）−標識抗
体（または抗原）複合体に含まれていない標識抗体（ま
たは抗原） の化学発光を測定することにより特定の抗原（または抗
体）を定量する免疫測定方法。
特定の抗原（または抗体）を定量する免疫測定方法であ
って、一般式（１）または一般式（２）に示される標識
抗体（または抗原）を用いることを特徴とする 抗体（または抗原）−抗原（または抗体）−標識抗
体（または抗原）複合体、もしくは 抗体（または抗原）−抗原（または抗体）−標識抗
体（または抗原）複合体に含まれていない標識抗体（ま
たは抗原） の化学発光を測定することにより特定の抗原（または抗
体）を定量する免疫測定方法。
【００１９】（Ｄ）特定の固相化抗体（または抗原）を
用いて特定の抗原（または抗体）を定量する免疫測定方
法であって、一般式（１）または一般式（２）に示され
る標識抗体（または抗原）を用いることを特徴とする 固相化抗体（または抗原）−抗原（または抗体）−
標識抗体（または抗原）複合体、もしくは 固相化抗体（または抗原）−抗原（または抗体）−
標識抗体（または抗原）複合体に含まれていない標識抗
体（または抗原） の化学発光を測定することにより特定の抗原（または抗
体）を定量する免疫測定方法。
用いて特定の抗原（または抗体）を定量する免疫測定方
法であって、一般式（１）または一般式（２）に示され
る標識抗体（または抗原）を用いることを特徴とする 固相化抗体（または抗原）−抗原（または抗体）−
標識抗体（または抗原）複合体、もしくは 固相化抗体（または抗原）−抗原（または抗体）−
標識抗体（または抗原）複合体に含まれていない標識抗
体（または抗原） の化学発光を測定することにより特定の抗原（または抗
体）を定量する免疫測定方法。
【００２０】（Ｅ）特定の固相化抗体（または抗原）と
特定の抗体（または抗原）を用いて特定の抗原（または
抗体）を定量する免疫測定方法であって、一般式（１）
または一般式（２）に示される標識抗体（または抗原）
を用いることを特徴とする 固相化抗体（または抗原）−抗原（または抗体）−
抗体（または抗原）−標識抗体（または抗原）複合体、
もしくは 固相化抗体（または抗原）−抗原（または抗体）−
抗体（または抗原）−標識抗体（または抗原）複合体に
含まれていない標識抗体（または抗原） の化学発光を測定することにより特定の抗原（または抗
体）を定量する免疫測定方法。
特定の抗体（または抗原）を用いて特定の抗原（または
抗体）を定量する免疫測定方法であって、一般式（１）
または一般式（２）に示される標識抗体（または抗原）
を用いることを特徴とする 固相化抗体（または抗原）−抗原（または抗体）−
抗体（または抗原）−標識抗体（または抗原）複合体、
もしくは 固相化抗体（または抗原）−抗原（または抗体）−
抗体（または抗原）−標識抗体（または抗原）複合体に
含まれていない標識抗体（または抗原） の化学発光を測定することにより特定の抗原（または抗
体）を定量する免疫測定方法。
【００２１】（Ｆ）特定の固相化抗原（または抗体）を
用いて特定の抗原（または抗体）を定量する免疫測定方
法であって、一般式（１）または一般式（２）に示され
る標識抗体（または抗原）を用いることを特徴とする 固相化抗原（または抗体）−標識抗体（または抗
原）複合体、もしくは 固相化抗原（または抗体）−標識抗体（または抗
原）複合体に含まれていない抗原（または抗体）−標識
抗体（または抗原）複合体 の化学発光を測定することにより特定の抗原（または抗
体）を定量する免疫測定方法。
用いて特定の抗原（または抗体）を定量する免疫測定方
法であって、一般式（１）または一般式（２）に示され
る標識抗体（または抗原）を用いることを特徴とする 固相化抗原（または抗体）−標識抗体（または抗
原）複合体、もしくは 固相化抗原（または抗体）−標識抗体（または抗
原）複合体に含まれていない抗原（または抗体）−標識
抗体（または抗原）複合体 の化学発光を測定することにより特定の抗原（または抗
体）を定量する免疫測定方法。
【００２２】（Ｇ）特定の固相化抗原（または抗体）と
特定の抗体（または抗原）を用いて特定の抗原（または
抗体）を定量する免疫測定方法であって、一般式（１）
または一般式（２）に示される標識抗体（または抗原）
を用いることを特徴とする 固相化抗原（または抗体）−抗体（または抗原）−
標識抗体（または抗原）複合体、もしくは 固相化抗原（または抗体）−抗体（または抗原）−
標識抗体（または抗原）複合体に含まれていない標識抗
体（または抗原） の化学発光を測定することにより特定の抗原（または抗
体）を定量する免疫測定方法。
特定の抗体（または抗原）を用いて特定の抗原（または
抗体）を定量する免疫測定方法であって、一般式（１）
または一般式（２）に示される標識抗体（または抗原）
を用いることを特徴とする 固相化抗原（または抗体）−抗体（または抗原）−
標識抗体（または抗原）複合体、もしくは 固相化抗原（または抗体）−抗体（または抗原）−
標識抗体（または抗原）複合体に含まれていない標識抗
体（または抗原） の化学発光を測定することにより特定の抗原（または抗
体）を定量する免疫測定方法。
【００２３】（Ｈ）特定の固相化抗体（または抗原）を
用いて特定の抗原（または抗体）を定量する免疫測定方
法であって、一般式（１）または一般式（２）に示され
る標識抗原（または抗体）を用いることを特徴とする 固相化抗体（または抗原）−標識抗原（または抗
体）複合体、もしくは 固相化抗体（または抗原）−標識抗原（または抗
体）複合体に含まれていない標識抗原（または抗体） の化学発光を測定することにより特定の抗原（または抗
体）を定量する免疫測定方法。
用いて特定の抗原（または抗体）を定量する免疫測定方
法であって、一般式（１）または一般式（２）に示され
る標識抗原（または抗体）を用いることを特徴とする 固相化抗体（または抗原）−標識抗原（または抗
体）複合体、もしくは 固相化抗体（または抗原）−標識抗原（または抗
体）複合体に含まれていない標識抗原（または抗体） の化学発光を測定することにより特定の抗原（または抗
体）を定量する免疫測定方法。
【００２４】以下、本発明を更に詳しく説明する。
【００２５】一般式（１）または一般式（２）に示され
るトリオキサン誘導体、例えば５−（１−ナフチルアミ
ノ）−３−イソプロピル−６,6−ジメチル−１,2,4−ト
リオキサン誘導体、５−（２−ナフチルアミノ）−３−
イソプロピル−６,6−ジメチル−１,2,4−トリオキサン
誘導体、などにおいて、Ｘは２価の有機残基であって、
次のものを列挙することができる。
るトリオキサン誘導体、例えば５−（１−ナフチルアミ
ノ）−３−イソプロピル−６,6−ジメチル−１,2,4−ト
リオキサン誘導体、５−（２−ナフチルアミノ）−３−
イソプロピル−６,6−ジメチル−１,2,4−トリオキサン
誘導体、などにおいて、Ｘは２価の有機残基であって、
次のものを列挙することができる。
【００２６】
【化５】
【００２７】
【化６】
【００２８】
【化７】
【００２９】
【化８】
【００３０】
【化９】
【００３１】
【化１０】
【００３２】
【化１１】
【００３３】
【化１２】
【００３４】
【化１３】
【００３５】
【化１４】
【００３６】
【化１５】
【００３７】
【化１６】
【００３８】
【化１７】
【００３９】
【化１８】
【００４０】これらの式でｍ及びｎは１から１０までの
整数を示し、そしてＹは低級アルキル基、Ｚは低級アル
キレン基を示す。
整数を示し、そしてＹは低級アルキル基、Ｚは低級アル
キレン基を示す。
【００４１】また、一般式（１）において、Ｒはカルボ
キシル基、アミノ基、ヒドロキシル基またはメルカプト
基を示す。したがって、−Ｘ−Ｒとしてはたとえば２−
カルボキシエチル、２−（２−アミノエトキシ）エチ
ル、４−〔Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）カルバモイ
ル〕ブチル、３−メルカプトプロピル等があり得る。
キシル基、アミノ基、ヒドロキシル基またはメルカプト
基を示す。したがって、−Ｘ−Ｒとしてはたとえば２−
カルボキシエチル、２−（２−アミノエトキシ）エチ
ル、４−〔Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）カルバモイ
ル〕ブチル、３−メルカプトプロピル等があり得る。
【００４２】また、一般式（１）において、Ｒ1 及びＲ
2 は、同一または異って、それぞれ炭素原子１乃至３個
を有する置換または非置換の低級脂肪族炭化水素基であ
って、例えば、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基な
ど、及びその置換された基である。
2 は、同一または異って、それぞれ炭素原子１乃至３個
を有する置換または非置換の低級脂肪族炭化水素基であ
って、例えば、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基な
ど、及びその置換された基である。
【００４３】本発明の一般式（２）に示されるトリオキ
サン誘導体、例えば５−(1−ナフチルアミノ）−３−置
換イソプロピル−６,6−ジ置換メチル−１,2,4−トリオ
キサン誘導体、５−(2−ナフチルアミノ）−３−置換イ
ソプロピル−６,6−ジ置換メチル−１，２，４−トリオ
キサン誘導体などにおいて、Ｘ1 、Ｘ2 は２価の有機残
基であって、前記〔化５〕から〔化１５〕と同様であ
る。
サン誘導体、例えば５−(1−ナフチルアミノ）−３−置
換イソプロピル−６,6−ジ置換メチル−１,2,4−トリオ
キサン誘導体、５−(2−ナフチルアミノ）−３−置換イ
ソプロピル−６,6−ジ置換メチル−１，２，４−トリオ
キサン誘導体などにおいて、Ｘ1 、Ｘ2 は２価の有機残
基であって、前記〔化５〕から〔化１５〕と同様であ
る。
【００４４】また、一般式（２）において、Ｒ3 とＲ4
とはそれぞれ独立してカルボキシル基、アミノ基、ヒド
ロキシル基またはメルカプト基を示す。したがって、−
Ｘ1−Ｒ3 、−Ｘ2 −Ｒ4 としてはたとえば５−カルボ
キシペンチル、４−(2−アミノエトキシ）ブチル、４−
〔Ｎ−(2−ヒドロキシエチル）カルバモイル〕ブチル等
があり得る。またＸ2 −Ｒ4 はメチル基、エチル基、又
はプロピル基であってもよい。さらに一般式（２）にお
いて、Ｒ5 は水素原子、塩素原子、臭素原子、沃素原
子、フッ素原子、メチル基、エチル基またはプロピル基
を挙げることができる。
とはそれぞれ独立してカルボキシル基、アミノ基、ヒド
ロキシル基またはメルカプト基を示す。したがって、−
Ｘ1−Ｒ3 、−Ｘ2 −Ｒ4 としてはたとえば５−カルボ
キシペンチル、４−(2−アミノエトキシ）ブチル、４−
〔Ｎ−(2−ヒドロキシエチル）カルバモイル〕ブチル等
があり得る。またＸ2 −Ｒ4 はメチル基、エチル基、又
はプロピル基であってもよい。さらに一般式（２）にお
いて、Ｒ5 は水素原子、塩素原子、臭素原子、沃素原
子、フッ素原子、メチル基、エチル基またはプロピル基
を挙げることができる。
【００４５】本発明の標識抗体または標識抗原は、一般
式（１）また（２）で表わされるトリオキサン誘導体を
様々な結合様式で抗体および抗原に標識することにより
製造される。
式（１）また（２）で表わされるトリオキサン誘導体を
様々な結合様式で抗体および抗原に標識することにより
製造される。
【００４６】本発明において標識抗体とすることができ
る抗体は、各種抗原に対する全ての抗体を使用すること
ができ、たとえば、各種ステロイドホルモンに対する抗
体、各種腫瘍マーカーに対する抗体、各種感染症に対す
る抗体、各種ペプチドホルモンに対する抗体、各種薬剤
に対する抗体、その他各種の抗体などである。
る抗体は、各種抗原に対する全ての抗体を使用すること
ができ、たとえば、各種ステロイドホルモンに対する抗
体、各種腫瘍マーカーに対する抗体、各種感染症に対す
る抗体、各種ペプチドホルモンに対する抗体、各種薬剤
に対する抗体、その他各種の抗体などである。
【００４７】前記において、ステロイドホルモンとして
は、たとえば、Ｔ4 、Ｔ3 、Ｔ3 Ｕ、ＴＳＨ、ＴＢＧ、
ＦＴ4 、ＦＴ3 、サイクログロブリン、コーチゾール、
エストラジオール、エストリオール、プロゲステロン、
テストステロン、１７−ＯＨＰ、エストロゲンなどが挙
げられる。
は、たとえば、Ｔ4 、Ｔ3 、Ｔ3 Ｕ、ＴＳＨ、ＴＢＧ、
ＦＴ4 、ＦＴ3 、サイクログロブリン、コーチゾール、
エストラジオール、エストリオール、プロゲステロン、
テストステロン、１７−ＯＨＰ、エストロゲンなどが挙
げられる。
【００４８】腫瘍マーカーとしては、たとえば、ＣＥ
Ａ、ＡＦＰ、β２−Ｍ、フェリチン、ＳＣＣ、ＰＡＰ、
ＳＰａｎ、γ−Ｓｍ、ＣＡ１９−９、ＣＡ１２５、ＣＡ
５０、ＮＳＥ、ＰＳＡ、ＴＰＡなどが挙げられる。
Ａ、ＡＦＰ、β２−Ｍ、フェリチン、ＳＣＣ、ＰＡＰ、
ＳＰａｎ、γ−Ｓｍ、ＣＡ１９−９、ＣＡ１２５、ＣＡ
５０、ＮＳＥ、ＰＳＡ、ＴＰＡなどが挙げられる。
【００４９】感染症としては、たとえば、ＨＡＡｂ、Ｈ
Ａ（ＩｇＭ）Ａｂ、ＨＢｓＡｂ、ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡ
ｂ、ＨＢｃＡｇ、ＨＢｃＡｂ、ＨＢｃ（ＩｇＭ）Ａｂ、
ＨＤＶＡｂ、ＨＩＶ、ＣＭＶ、ＡＴＬ、ＲＳＶ、風疹、
クラミディアＡｂ、淋菌、梅毒、マイコプラズマなどが
挙げられる。
Ａ（ＩｇＭ）Ａｂ、ＨＢｓＡｂ、ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡ
ｂ、ＨＢｃＡｇ、ＨＢｃＡｂ、ＨＢｃ（ＩｇＭ）Ａｂ、
ＨＤＶＡｂ、ＨＩＶ、ＣＭＶ、ＡＴＬ、ＲＳＶ、風疹、
クラミディアＡｂ、淋菌、梅毒、マイコプラズマなどが
挙げられる。
【００５０】ペプチドホルモンとしては、たとえば、Ｐ
ＴＨ、ＰＲＬ、インスリン、グリカゴン、ガストリン、
ＦＳＨ、ＬＨ、ＨＣＧ、ＰＦ4 、セクレチン、Ｃ−ペプ
チド、レニン、ＰＳＴＩ、カルトシン、ソマトメジン、
ＨＧＨ、ＡＣＴＨ、ＡＤＨなどが挙げられる。
ＴＨ、ＰＲＬ、インスリン、グリカゴン、ガストリン、
ＦＳＨ、ＬＨ、ＨＣＧ、ＰＦ4 、セクレチン、Ｃ−ペプ
チド、レニン、ＰＳＴＩ、カルトシン、ソマトメジン、
ＨＧＨ、ＡＣＴＨ、ＡＤＨなどが挙げられる。
【００５１】薬剤としては、たとえば、フェニトイン、
フェノバルビタール、カルバマゼピン、バルプロ酸、プ
リミドン、エトサクシミド、トブラマイシン、リドカイ
ン、プロカインアミド、ＮＡＰＡ、ゲンタマイシン、カ
ナマイシン、ジベカシン、ストレプトマイシン、ネチル
マイシン、アミカシン、ジゴキシン、ジギトキシン、キ
ニジン、テオフィリン、メソトレキセート、アセトアミ
ノフェン、サリチル酸、シクロスポリンなどが挙げられ
る。
フェノバルビタール、カルバマゼピン、バルプロ酸、プ
リミドン、エトサクシミド、トブラマイシン、リドカイ
ン、プロカインアミド、ＮＡＰＡ、ゲンタマイシン、カ
ナマイシン、ジベカシン、ストレプトマイシン、ネチル
マイシン、アミカシン、ジゴキシン、ジギトキシン、キ
ニジン、テオフィリン、メソトレキセート、アセトアミ
ノフェン、サリチル酸、シクロスポリンなどが挙げられ
る。
【００５２】その他の抗体としては、たとえば、Ｉｇ
Ｅ、アルゲニン特異ＩｇＥ、ＣＫ−ＭＢ、免疫複合体
（Ｃ３ｄ−、Ｃ１ｑ−）、ミオグロビン、ＩｇＧ、Ｉｇ
Ａ、ＩｇＭ、Ｃ３、Ｃ４、抗サイクログロブリン抗体、
抗マイクロソーム抗体、ＲＦ、ＡＮＡ、便潜血、Ｄ−ダ
イマー、ヒスタミンなどが挙げられる。
Ｅ、アルゲニン特異ＩｇＥ、ＣＫ−ＭＢ、免疫複合体
（Ｃ３ｄ−、Ｃ１ｑ−）、ミオグロビン、ＩｇＧ、Ｉｇ
Ａ、ＩｇＭ、Ｃ３、Ｃ４、抗サイクログロブリン抗体、
抗マイクロソーム抗体、ＲＦ、ＡＮＡ、便潜血、Ｄ−ダ
イマー、ヒスタミンなどが挙げられる。
【００５３】本発明において標識抗原とすることができ
る抗原は、たとえば、各種ステロイドホルモン、各種腫
瘍マーカー、各種ペプチドホルモン、その他各種の抗原
などである。
る抗原は、たとえば、各種ステロイドホルモン、各種腫
瘍マーカー、各種ペプチドホルモン、その他各種の抗原
などである。
【００５４】前記において、ステロイドホルモンは、た
とえば、甲状腺刺激ホルモン（ＴＳＨ）などである。
とえば、甲状腺刺激ホルモン（ＴＳＨ）などである。
【００５５】腫瘍マーカーは、たとえば、癌胎児性抗原
（ＣＥＡ）、ＡＦＰ、フェリチン、ＣＡ１９−９などで
ある。
（ＣＥＡ）、ＡＦＰ、フェリチン、ＣＡ１９−９などで
ある。
【００５６】ペプチドホルモンは、たとえば、ヒトプロ
ラクチン（ＰＲＬ）、インスリン（ＩＲＩ）、黄体形成
ホルモン（ＬＨ）、卵胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）などで
ある。
ラクチン（ＰＲＬ）、インスリン（ＩＲＩ）、黄体形成
ホルモン（ＬＨ）、卵胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）などで
ある。
【００５７】薬剤は、たとえば、フェニトイン、フェノ
バルビタール、カルバマゼピン、バルプロ酸、プリミド
ン、エトサクシミド、トラマイシン、リドカイン、プロ
カインアミド、ＮＡＰＡ、ゲンクマイシン、カナマイシ
ン、ジベカシン、ストレプトマイシン、ネチルマイシ
ン、アミカシン、ジゴキシン、ジギトキシン、キニジ
ン、テオフィリン、メソトレキセート、アセトアミノフ
ェン、サリチル酸、シクロスポリンなどである。
バルビタール、カルバマゼピン、バルプロ酸、プリミド
ン、エトサクシミド、トラマイシン、リドカイン、プロ
カインアミド、ＮＡＰＡ、ゲンクマイシン、カナマイシ
ン、ジベカシン、ストレプトマイシン、ネチルマイシ
ン、アミカシン、ジゴキシン、ジギトキシン、キニジ
ン、テオフィリン、メソトレキセート、アセトアミノフ
ェン、サリチル酸、シクロスポリンなどである。
【００５８】その他の抗原としては、たとえば、抗原と
して作用するＩｇＥ、ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ、Ｃ3 、
Ｃ4 などである。
して作用するＩｇＥ、ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ、Ｃ3 、
Ｃ4 などである。
【００５９】一般式（１）または（２）で表わされるト
リオキサン誘導体は、直接もしくはスペーサーを介する
ことにより抗体および抗原に結合することが可能であ
る。なお「酵素免疫測定法、編集石川栄治、河合忠、宮
井潔、医学書院（１９８7)」や「生物化学実験法２７、
酵素標識法、石川栄治著、学会出版センター（１９９
1)」に例示されている結合様式および標識方法を用いて
製造することができる。
リオキサン誘導体は、直接もしくはスペーサーを介する
ことにより抗体および抗原に結合することが可能であ
る。なお「酵素免疫測定法、編集石川栄治、河合忠、宮
井潔、医学書院（１９８7)」や「生物化学実験法２７、
酵素標識法、石川栄治著、学会出版センター（１９９
1)」に例示されている結合様式および標識方法を用いて
製造することができる。
【００６０】前記結合様式を以下具体例を挙げて説明す
る。ただし、本発明はこれらに限定されるものではな
い。
る。ただし、本発明はこれらに限定されるものではな
い。
【００６１】
【化１９】
【００６２】
【化２０】
【００６３】
【化２１】
【００６４】
【化２２】
【００６５】
【化２３】
【００６６】
【化２４】
【００６７】
【化２５】
【００６８】
【化２６】
【００６９】
【化２７】
【００７０】
【化２８】
【００７１】
【化２９】
【００７２】
【化３０】
【００７３】式中、Ａはトリオキサン誘導体、Ｂは抗体
または抗原、Ｒはメチレン、エチレン、プロピレン等の
２価の有機残基を示し、ｍは１から１０までの整数を示
す。
または抗原、Ｒはメチレン、エチレン、プロピレン等の
２価の有機残基を示し、ｍは１から１０までの整数を示
す。
【００７４】本発明の第１（Ａ）の免疫測定方法は、被
分析物である抗原（または抗体）と特異的に結合するこ
とができるトリオキサン誘導体標識抗体（または抗原）
〔以下標識抗体（または抗原）と称す〕を用いるアッセ
イ法であって、抗原（または抗体）と過剰の標識抗体
（または抗原）は、抗原抗体反応を行い抗原（または抗
体）−標識抗体（または抗原）複合体を形成し、また形
成に関与しない標識抗体（または抗原）は残存する。こ
れらを分離した後、抗原（または抗体）−標識抗体（ま
たは抗原）複合体または残存した標識抗体（または抗
原）にそれぞれ特定の塩基を反応させて化学発光を検出
する。
分析物である抗原（または抗体）と特異的に結合するこ
とができるトリオキサン誘導体標識抗体（または抗原）
〔以下標識抗体（または抗原）と称す〕を用いるアッセ
イ法であって、抗原（または抗体）と過剰の標識抗体
（または抗原）は、抗原抗体反応を行い抗原（または抗
体）−標識抗体（または抗原）複合体を形成し、また形
成に関与しない標識抗体（または抗原）は残存する。こ
れらを分離した後、抗原（または抗体）−標識抗体（ま
たは抗原）複合体または残存した標識抗体（または抗
原）にそれぞれ特定の塩基を反応させて化学発光を検出
する。
【００７５】この場合、被分析物中の抗原（または抗
体）の量の増加に伴い抗原（または抗体）−標識抗体
（または抗原）複合体の発光量は増加し、標識抗体（ま
たは抗原）の発光量は減少する。
体）の量の増加に伴い抗原（または抗体）−標識抗体
（または抗原）複合体の発光量は増加し、標識抗体（ま
たは抗原）の発光量は減少する。
【００７６】本発明の第２（Ｂ）の免疫測定方法は、被
分析物である抗原（または抗体）と特異的に結合するこ
とができる特定の抗体（または抗原）及び標識抗体（ま
たは抗原）を用いるアッセイ法であって、まず特定の抗
体（または抗原）と抗原（または抗体）が抗原抗体反応
を行い抗体（または抗原）−抗原（または抗体）複合体
を形成し、さらに抗体（または抗原）−抗原（または抗
体）複合体と過剰の標識抗体（または抗原）は、抗原抗
体反応を行い抗体（または抗原）−抗原（または抗体）
−標識抗体（または抗原）複合体を形成し、また形成に
関与しない標識抗体（または抗原）は残存する。これら
を分離した後、抗原（または抗体）−標識抗体（または
抗原）複合体または残存した標識抗体（または抗原）に
それぞれ特定の塩基を反応させて化学発光を検出する。
分析物である抗原（または抗体）と特異的に結合するこ
とができる特定の抗体（または抗原）及び標識抗体（ま
たは抗原）を用いるアッセイ法であって、まず特定の抗
体（または抗原）と抗原（または抗体）が抗原抗体反応
を行い抗体（または抗原）−抗原（または抗体）複合体
を形成し、さらに抗体（または抗原）−抗原（または抗
体）複合体と過剰の標識抗体（または抗原）は、抗原抗
体反応を行い抗体（または抗原）−抗原（または抗体）
−標識抗体（または抗原）複合体を形成し、また形成に
関与しない標識抗体（または抗原）は残存する。これら
を分離した後、抗原（または抗体）−標識抗体（または
抗原）複合体または残存した標識抗体（または抗原）に
それぞれ特定の塩基を反応させて化学発光を検出する。
【００７７】この場合、抗原（または抗体）の量の増加
に伴い抗体（または抗原）−抗原（または抗体）−標識
抗体（または抗原）複合体の発光量は増加し、標識抗体
（または抗原）の発光量は減少する。
に伴い抗体（または抗原）−抗原（または抗体）−標識
抗体（または抗原）複合体の発光量は増加し、標識抗体
（または抗原）の発光量は減少する。
【００７８】本発明の第３（Ｃ）の免疫測定方法は、被
分析物である抗原（または抗体）と特異的に結合するこ
とができる特定の固相化抗体（または抗原）及び標識抗
体（または抗原）を用いるアッセイ法であって、まず特
定の固相化抗体（または抗原）と抗原（または抗体）が
抗原抗体反応を行い固相化抗体（または抗原）−抗原
（または抗体）複合体を形成し、さらに固相化抗体（ま
たは抗原）−抗原（または抗体）複合体と過剰の標識抗
体（または抗原）は、抗原抗体反応を行い固相化抗体
（または抗原）−抗原（または抗体）−標識抗体（また
は抗原）複合体を形成し、また形成に関与しない標識抗
体（または抗原）は残存する。これらを分離した後、固
相化抗体（または抗原）−抗原（または抗体）−標識抗
体（または抗原）複合体または残存した標識抗体（また
は抗原）にそれぞれ特定の塩基を反応させて化学発光を
検出する。
分析物である抗原（または抗体）と特異的に結合するこ
とができる特定の固相化抗体（または抗原）及び標識抗
体（または抗原）を用いるアッセイ法であって、まず特
定の固相化抗体（または抗原）と抗原（または抗体）が
抗原抗体反応を行い固相化抗体（または抗原）−抗原
（または抗体）複合体を形成し、さらに固相化抗体（ま
たは抗原）−抗原（または抗体）複合体と過剰の標識抗
体（または抗原）は、抗原抗体反応を行い固相化抗体
（または抗原）−抗原（または抗体）−標識抗体（また
は抗原）複合体を形成し、また形成に関与しない標識抗
体（または抗原）は残存する。これらを分離した後、固
相化抗体（または抗原）−抗原（または抗体）−標識抗
体（または抗原）複合体または残存した標識抗体（また
は抗原）にそれぞれ特定の塩基を反応させて化学発光を
検出する。
【００７９】この場合、抗原（または抗体）の量の増加
に伴い固相化抗体（または抗原）−抗原（または抗体）
−標識抗体（または抗原）複合体の発光量は増加し、標
識抗体（または抗原）の発光量は減少する。
に伴い固相化抗体（または抗原）−抗原（または抗体）
−標識抗体（または抗原）複合体の発光量は増加し、標
識抗体（または抗原）の発光量は減少する。
【００８０】本発明の第4(Ｄ）の免疫測定方法は、被分
析物である抗原（または抗体）と特異的に結合すること
ができる特定の固相化抗体（または抗原）及び特定の抗
体（または抗原）を用い、特定の抗体（または抗原）と
特異的に結合することのできる標識抗体（または抗原）
を用いるアッセイ法であって、まず特定の固相化抗体
（または抗原）と抗原（または抗体）が抗原抗体反応を
行い固相化抗体（または抗原）−抗原（または抗体）複
合体を形成し、さらに固相化抗体（または抗原）−抗原
（または抗体）複合体と特定の抗体（または抗原）が抗
原抗体反応を行い固相化抗体（または抗原）−抗原（ま
たは抗体）−抗体（または抗原）複合体を形成する。こ
れに過剰の標識抗体（または抗原）を反応させると、固
相化抗体（または抗原）−抗原（または抗体）−抗体
（または抗原）−標識抗体（または抗原）複合体を形成
し、形成に関与しない標識抗体（または抗原）は残存す
る。これらを分離した後、固相化抗体（または抗原）−
抗原（または抗体）−抗体（または抗原）−標識抗体
（または抗原）複合体または残存した標識抗体（または
抗原）にそれぞれ特定の塩基を反応させて化学発光を検
出する。
析物である抗原（または抗体）と特異的に結合すること
ができる特定の固相化抗体（または抗原）及び特定の抗
体（または抗原）を用い、特定の抗体（または抗原）と
特異的に結合することのできる標識抗体（または抗原）
を用いるアッセイ法であって、まず特定の固相化抗体
（または抗原）と抗原（または抗体）が抗原抗体反応を
行い固相化抗体（または抗原）−抗原（または抗体）複
合体を形成し、さらに固相化抗体（または抗原）−抗原
（または抗体）複合体と特定の抗体（または抗原）が抗
原抗体反応を行い固相化抗体（または抗原）−抗原（ま
たは抗体）−抗体（または抗原）複合体を形成する。こ
れに過剰の標識抗体（または抗原）を反応させると、固
相化抗体（または抗原）−抗原（または抗体）−抗体
（または抗原）−標識抗体（または抗原）複合体を形成
し、形成に関与しない標識抗体（または抗原）は残存す
る。これらを分離した後、固相化抗体（または抗原）−
抗原（または抗体）−抗体（または抗原）−標識抗体
（または抗原）複合体または残存した標識抗体（または
抗原）にそれぞれ特定の塩基を反応させて化学発光を検
出する。
【００８１】この場合、抗原（または抗体）の量の増加
に伴い固相化抗体（または抗原）−抗原（または抗体）
−抗体（または抗原）−標識抗体（または抗原）複合体
の発光量は増加し、標識抗体（または抗原）の発光量は
減少する。
に伴い固相化抗体（または抗原）−抗原（または抗体）
−抗体（または抗原）−標識抗体（または抗原）複合体
の発光量は増加し、標識抗体（または抗原）の発光量は
減少する。
【００８２】本発明の第５（Ｅ）の免疫測定方法は、被
分析物である抗原（または抗体）と特異的に結合するこ
とができる標識抗体（または抗原）、被分析物である抗
原（または抗体）を標識した固相化抗原（または抗体）
を用いるアッセイ法であって、まず抗原（または抗体）
と過剰の標識抗体（または抗原）が抗原抗体反応を行い
抗原（または抗体）−標識抗体（または抗原）複合体を
形成する。これに過剰の固相化抗原（または抗体）を反
応させると、残存する標識抗体（または抗原）が抗原抗
体反応を行い固相化抗原（または抗体）−標識抗体（ま
たは抗原）複合体を形成する。これらを分離した後、固
相化抗原（または抗体）−標識抗体（または抗原）複合
体または抗原（または抗体）−標識抗体（または抗原）
複合体にそれぞれ特定の塩基を反応させて化学発光を検
出する。
分析物である抗原（または抗体）と特異的に結合するこ
とができる標識抗体（または抗原）、被分析物である抗
原（または抗体）を標識した固相化抗原（または抗体）
を用いるアッセイ法であって、まず抗原（または抗体）
と過剰の標識抗体（または抗原）が抗原抗体反応を行い
抗原（または抗体）−標識抗体（または抗原）複合体を
形成する。これに過剰の固相化抗原（または抗体）を反
応させると、残存する標識抗体（または抗原）が抗原抗
体反応を行い固相化抗原（または抗体）−標識抗体（ま
たは抗原）複合体を形成する。これらを分離した後、固
相化抗原（または抗体）−標識抗体（または抗原）複合
体または抗原（または抗体）−標識抗体（または抗原）
複合体にそれぞれ特定の塩基を反応させて化学発光を検
出する。
【００８３】この場合、抗原（または抗体）の量の増加
に伴い固相化抗原（または抗体）−標識抗体（または抗
原）複合体の発光量は減少し、抗原（または抗体）−標
識抗体（または抗原）複合体の発光量は増加する。
に伴い固相化抗原（または抗体）−標識抗体（または抗
原）複合体の発光量は減少し、抗原（または抗体）−標
識抗体（または抗原）複合体の発光量は増加する。
【００８４】本発明の第６（Ｆ）の免疫測定方法は、被
分析物である抗原（または抗体）と特異的に結合するこ
とができる特定の抗体（または抗原）、特定の抗体（ま
たは抗原）と特異的に結合することができる標識抗体
（または抗原）、被分析物である抗原（または抗体）を
標識した固相化抗原（または抗体）を用いるアッセイ法
であって、まず抗原（または抗体）と過剰の特定の抗体
（または抗原）が抗原抗体反応を行い、抗原（または抗
体）−抗体（または抗原）複合体を形成する。これに過
剰の固相化抗原（または抗体）を反応させると、残存す
る特定の抗体（または抗原）が抗原抗体反応を行い固相
化抗原（または抗体）−抗体（または抗原）複合体を形
成する。これらを分離した後、固相化抗原（または抗
体）−抗体（または抗原）複合体に過剰の標識抗体（ま
たは抗原）を反応させると、固相化抗原（または抗体）
−抗体（または抗原）−標識抗体（または抗原）複合体
を形成し、形成に関与しない標識抗体（または抗原）は
残存する。これらを分離した後、固相化抗原（または抗
体）−抗体（または抗原）−標識抗体（または抗原）複
合体または残存した標識抗体（または抗原）にそれぞれ
特定の塩基を反応させて化学発光を検出する。
分析物である抗原（または抗体）と特異的に結合するこ
とができる特定の抗体（または抗原）、特定の抗体（ま
たは抗原）と特異的に結合することができる標識抗体
（または抗原）、被分析物である抗原（または抗体）を
標識した固相化抗原（または抗体）を用いるアッセイ法
であって、まず抗原（または抗体）と過剰の特定の抗体
（または抗原）が抗原抗体反応を行い、抗原（または抗
体）−抗体（または抗原）複合体を形成する。これに過
剰の固相化抗原（または抗体）を反応させると、残存す
る特定の抗体（または抗原）が抗原抗体反応を行い固相
化抗原（または抗体）−抗体（または抗原）複合体を形
成する。これらを分離した後、固相化抗原（または抗
体）−抗体（または抗原）複合体に過剰の標識抗体（ま
たは抗原）を反応させると、固相化抗原（または抗体）
−抗体（または抗原）−標識抗体（または抗原）複合体
を形成し、形成に関与しない標識抗体（または抗原）は
残存する。これらを分離した後、固相化抗原（または抗
体）−抗体（または抗原）−標識抗体（または抗原）複
合体または残存した標識抗体（または抗原）にそれぞれ
特定の塩基を反応させて化学発光を検出する。
【００８５】この場合、抗原（または抗体）の量が増加
するに伴い固相化抗原（または抗体）−抗体（または抗
原）−標識抗体（または抗原）複合体の発光量は減少
し、標識抗体（または抗原）複合体の発光量は増加す
る。
するに伴い固相化抗原（または抗体）−抗体（または抗
原）−標識抗体（または抗原）複合体の発光量は減少
し、標識抗体（または抗原）複合体の発光量は増加す
る。
【００８６】本発明の第７（Ｇ）の免疫測定方法は、被
分析物である抗原（または抗体）と特異的に結合するこ
とができる固相化抗体（または抗原）、被分析物である
抗原（または抗体）にトリオキサン誘導体を標識した標
識抗原（または抗体）〔以下、標識抗原（または抗体）
と称す〕を用いるアッセイ法であって、抗原（または抗
体）と一定量の標識抗原（または抗体）の混合物を固相
化抗体（または抗原）と反応させると、固相化抗体（ま
たは抗原）−標識抗原（または抗体）複合体と固相化抗
体（または抗原）−抗原（または抗体）複合体を形成
し、形成に関与しない標識抗原（または抗体）と抗原
（または抗体）は残存する。固相（前者）と液相（後
者）を分離した後、それぞれに特定の塩基を反応させて
化学発光を検出する。
分析物である抗原（または抗体）と特異的に結合するこ
とができる固相化抗体（または抗原）、被分析物である
抗原（または抗体）にトリオキサン誘導体を標識した標
識抗原（または抗体）〔以下、標識抗原（または抗体）
と称す〕を用いるアッセイ法であって、抗原（または抗
体）と一定量の標識抗原（または抗体）の混合物を固相
化抗体（または抗原）と反応させると、固相化抗体（ま
たは抗原）−標識抗原（または抗体）複合体と固相化抗
体（または抗原）−抗原（または抗体）複合体を形成
し、形成に関与しない標識抗原（または抗体）と抗原
（または抗体）は残存する。固相（前者）と液相（後
者）を分離した後、それぞれに特定の塩基を反応させて
化学発光を検出する。
【００８７】この場合、抗原（または抗体）の量が増加
するに伴い固相（前者）の発光量は減少し、液相（後
者）の発光量は増加する。
するに伴い固相（前者）の発光量は減少し、液相（後
者）の発光量は増加する。
【００８８】本発明の第１（Ａ）ないし第７（Ｇ）の免
疫測定方法において、発光量から被分析物中の抗原（ま
たは抗体）量を定量するためには、予めこれらの方法に
おいて濃度が明確化された抗原（または抗体）を用いて
検量線を作製することが必要である。
疫測定方法において、発光量から被分析物中の抗原（ま
たは抗体）量を定量するためには、予めこれらの方法に
おいて濃度が明確化された抗原（または抗体）を用いて
検量線を作製することが必要である。
【００８９】本発明の第１（Ａ）ないし第７（Ｇ）に記
載の、抗原（または抗体）−標識抗体（または抗原）複
合体、抗原（または抗体）−抗体（または抗原）複合
体、抗原（または抗体）−固相化抗体（または抗原）複
合体、抗原（または抗体）−抗体（または抗原）複合
体、抗体（または抗原）−標識抗体（または抗原）複合
体、固相化抗原（または抗体）−標識抗体（または抗
原）複合体、固相化抗原（または抗体）−抗体（または
抗原）複合体、固相化抗体（または抗原）−標識抗原
（または抗体）複合体の形成において、水溶液中で反応
させることが望ましい。前記反応させる際のｐＨは、一
般にｐＨ４〜１０の範囲が好ましく、抗原抗体反応を阻
害しないｐＨで反応させるのが好ましい。
載の、抗原（または抗体）−標識抗体（または抗原）複
合体、抗原（または抗体）−抗体（または抗原）複合
体、抗原（または抗体）−固相化抗体（または抗原）複
合体、抗原（または抗体）−抗体（または抗原）複合
体、抗体（または抗原）−標識抗体（または抗原）複合
体、固相化抗原（または抗体）−標識抗体（または抗
原）複合体、固相化抗原（または抗体）−抗体（または
抗原）複合体、固相化抗体（または抗原）−標識抗原
（または抗体）複合体の形成において、水溶液中で反応
させることが望ましい。前記反応させる際のｐＨは、一
般にｐＨ４〜１０の範囲が好ましく、抗原抗体反応を阻
害しないｐＨで反応させるのが好ましい。
【００９０】前記反応を行う際のpHの調製は、公知の酸
性からアルカリ性の水溶液、または緩衝液等により行う
ことができる。前記水溶液または緩衝液としては、例え
ば塩酸、炭酸、酢酸、リン酸、ホウ酸等の水溶液、酢酸
ナトリウム緩衝液、トリスヒドロキシアミノメタン緩衝
液、コハク酸緩衝液、２−ヒドロキシ−１,2,4−プロパ
ントリカルボン酸緩衝液、モノフタル酸カリウム緩衝
液、２−（Ｎ−モルホリノ）エタンスルホン酸緩衝液、
リン酸ナトリウム緩衝液、リン酸カリウム緩衝液、炭酸
水素ナトリウム緩衝液、イミダゾール緩衝液等を挙げる
ことができ、使用に際しては単独もしくは混合物として
用いることができる。また反応温度は一般に０〜５０℃
の範囲であることが望ましく、特に４〜４０℃の範囲で
あることが望ましい。前記温度以外では、反応が阻害さ
れる傾向にあるため好ましくない。
性からアルカリ性の水溶液、または緩衝液等により行う
ことができる。前記水溶液または緩衝液としては、例え
ば塩酸、炭酸、酢酸、リン酸、ホウ酸等の水溶液、酢酸
ナトリウム緩衝液、トリスヒドロキシアミノメタン緩衝
液、コハク酸緩衝液、２−ヒドロキシ−１,2,4−プロパ
ントリカルボン酸緩衝液、モノフタル酸カリウム緩衝
液、２−（Ｎ−モルホリノ）エタンスルホン酸緩衝液、
リン酸ナトリウム緩衝液、リン酸カリウム緩衝液、炭酸
水素ナトリウム緩衝液、イミダゾール緩衝液等を挙げる
ことができ、使用に際しては単独もしくは混合物として
用いることができる。また反応温度は一般に０〜５０℃
の範囲であることが望ましく、特に４〜４０℃の範囲で
あることが望ましい。前記温度以外では、反応が阻害さ
れる傾向にあるため好ましくない。
【００９１】本発明のアッセイ法において被分析物と標
識抗体もしくは抗原を含む複合体と複合体の形成に関与
しない標識抗体もしくは抗原は分離させることが望まし
い。分離操作を行わずに化学発光を測定した場合は、被
分析物の量に応じた発光量を得ることが困難である。前
記分離操作は、公知の方法を用いることができ、沈澱
法、ゲル濾過法、各種クロマトグラフィー、電気泳動
法、固相化抗体もしくは固相化抗原を用いる方法等を用
いることができる。
識抗体もしくは抗原を含む複合体と複合体の形成に関与
しない標識抗体もしくは抗原は分離させることが望まし
い。分離操作を行わずに化学発光を測定した場合は、被
分析物の量に応じた発光量を得ることが困難である。前
記分離操作は、公知の方法を用いることができ、沈澱
法、ゲル濾過法、各種クロマトグラフィー、電気泳動
法、固相化抗体もしくは固相化抗原を用いる方法等を用
いることができる。
【００９２】さらに本発明のアッセイ法において用いる
化学発光を測定するためには、公知の化学発光測定装置
「光電子増倍管（フォトマルチプライヤー）」を用いる
ことにより容易に測定することができる。
化学発光を測定するためには、公知の化学発光測定装置
「光電子増倍管（フォトマルチプライヤー）」を用いる
ことにより容易に測定することができる。
【００９３】さらに本発明に用いる固相化抗原もしくは
固相化抗体に使用される固相は、ポリマービーズ、ポリ
マーチューブ、ポリマーシート、ガラスビーズ、ガラス
チューブ、ガラスシート、紙等を挙げることができる
が、これらに限定されない。
固相化抗体に使用される固相は、ポリマービーズ、ポリ
マーチューブ、ポリマーシート、ガラスビーズ、ガラス
チューブ、ガラスシート、紙等を挙げることができる
が、これらに限定されない。
【００９４】本発明の免疫測定方法に用いる化学発光の
検出は、様々なアルカリ条件下で行うことができる。好
ましくはｐＨ１０以上の条件にすることが好ましい。ｐ
Ｈ１０以下ではトリオキサン誘導体の分解が進行し難
く、発光を観測するのが難しい。さらに化学発光検出の
際に用いる溶媒は、水、緩衝液のみならず各種有機溶媒
を用いることが可能である。前記有機溶媒としては極性
溶媒が好ましく、例えばジメチルスルホキシド、ジメチ
ルホルムアミド、ＨＭＰＡ、ジオキサン、アセトニトリ
ル、メチルアルコール、エチルアルコール、ｔ−ブチル
アルコールまたはニトロメタンなどを用いることができ
る。また本発明の検出系に用いる塩基としては、例えば
カリウム−ｔ−ブトキシド、水酸化ナトリウム、水酸化
カリウム、炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナ
トリウム、テトラブチルアンモニウムヒドロキシド等を
用いることができ、さらに前記塩基を含む水溶液もしく
は有機溶媒を用いることができる。
検出は、様々なアルカリ条件下で行うことができる。好
ましくはｐＨ１０以上の条件にすることが好ましい。ｐ
Ｈ１０以下ではトリオキサン誘導体の分解が進行し難
く、発光を観測するのが難しい。さらに化学発光検出の
際に用いる溶媒は、水、緩衝液のみならず各種有機溶媒
を用いることが可能である。前記有機溶媒としては極性
溶媒が好ましく、例えばジメチルスルホキシド、ジメチ
ルホルムアミド、ＨＭＰＡ、ジオキサン、アセトニトリ
ル、メチルアルコール、エチルアルコール、ｔ−ブチル
アルコールまたはニトロメタンなどを用いることができ
る。また本発明の検出系に用いる塩基としては、例えば
カリウム−ｔ−ブトキシド、水酸化ナトリウム、水酸化
カリウム、炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナ
トリウム、テトラブチルアンモニウムヒドロキシド等を
用いることができ、さらに前記塩基を含む水溶液もしく
は有機溶媒を用いることができる。
【００９５】
【発明の効果】本発明のトリオキサン誘導体標識抗体お
よび標識抗原は、抗原抗体反応に基づく免疫測定方法に
用いることが可能である。さらに、本発明の免疫測定方
法により被分析物の検出と定量を高感度に再現性良く行
うことができる。
よび標識抗原は、抗原抗体反応に基づく免疫測定方法に
用いることが可能である。さらに、本発明の免疫測定方
法により被分析物の検出と定量を高感度に再現性良く行
うことができる。
【００９６】
【実施例】以下本発明を実施例及び比較例に基づいて具
体的に説明するが、本発明はこれらに限定されるもので
はない。
体的に説明するが、本発明はこれらに限定されるもので
はない。
【００９７】実施例１ トリオキサン誘導体（Ｉ）標識抗ＴＳＨ−ＩｇＧの調整
【００９８】構造式（Ｉ）
【００９９】
【化３１】
【０１００】で表されるトリオキサン誘導体（Ｉ）１.7
３ｍｇ（５μｍｏｌ）を、ジメチルホルムアミド２０μ
ｌに溶解させた後、ジシクロヘキシルカルボジイミド
１.1ｍｇ（５μｍｏｌ）を含むジメチルホルムアミド溶
液２０μｌと、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド０.6ｍｇ
(5μｍｏｌ）を含むジメチルホルムアミド溶液２０μｌ
とを加え、−２０℃にて２時間、さらに室温にて一晩反
応させた。次に、この反応溶液を、予め抗ＴＳＨ−Ｉｇ
Ｇの８ｍｇ(5０ｎｍｏｌ）を含む１０ｍＭ炭酸バッファ
ー（ｐＨ９.0）１ｍｌ中に添加し、室温で３０分間、そ
して４℃で一晩反応させた。反応終了後、ファルマシア
社製セファデックスＧ−２５カラム〔溶離溶媒１０ｍＭ
炭酸バッファー（ｐＨ９.0）〕を用いてＩｇＧ分画を取
り出した。
３ｍｇ（５μｍｏｌ）を、ジメチルホルムアミド２０μ
ｌに溶解させた後、ジシクロヘキシルカルボジイミド
１.1ｍｇ（５μｍｏｌ）を含むジメチルホルムアミド溶
液２０μｌと、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド０.6ｍｇ
(5μｍｏｌ）を含むジメチルホルムアミド溶液２０μｌ
とを加え、−２０℃にて２時間、さらに室温にて一晩反
応させた。次に、この反応溶液を、予め抗ＴＳＨ−Ｉｇ
Ｇの８ｍｇ(5０ｎｍｏｌ）を含む１０ｍＭ炭酸バッファ
ー（ｐＨ９.0）１ｍｌ中に添加し、室温で３０分間、そ
して４℃で一晩反応させた。反応終了後、ファルマシア
社製セファデックスＧ−２５カラム〔溶離溶媒１０ｍＭ
炭酸バッファー（ｐＨ９.0）〕を用いてＩｇＧ分画を取
り出した。
【０１０１】実施例２ 抗ＴＳＨ−ＩｇＧ固相化試験管の調製
【０１０２】ポリスチレンチューブ（１３×７２ｍｍ）
に抗ＴＳＨ−ＩｇＧの６０μｇを含む１０ｍＭ炭酸バッ
ファー（ｐＨ9.0 ）２００μｌを加え、４℃にて一昼夜
放置させた。内容物を除去した後、0.05％（Ｗ／Ｖ）Ｔ
ｗｅｅｎ２０を含む0.15Ｍ食塩水にて洗浄し、ウサギＩ
ｇＧ ６０μｇを含む１０ｍＭ炭酸バッファー（ｐＨ9.
0 ）３００μｌを加え、４℃にて一昼夜放置させた。内
容物を除去した後、0.1 ｍｏｌ／ｌのＮａＣｌ、１ｇ／
ｌ ウシアルブミン、１ｇ／ｌ ナトリウムアジドを含
む１０ｍＭリン酸バッファー（ｐＨ7.0 ）にて洗浄した
後、４℃にて保存した。
に抗ＴＳＨ−ＩｇＧの６０μｇを含む１０ｍＭ炭酸バッ
ファー（ｐＨ9.0 ）２００μｌを加え、４℃にて一昼夜
放置させた。内容物を除去した後、0.05％（Ｗ／Ｖ）Ｔ
ｗｅｅｎ２０を含む0.15Ｍ食塩水にて洗浄し、ウサギＩ
ｇＧ ６０μｇを含む１０ｍＭ炭酸バッファー（ｐＨ9.
0 ）３００μｌを加え、４℃にて一昼夜放置させた。内
容物を除去した後、0.1 ｍｏｌ／ｌのＮａＣｌ、１ｇ／
ｌ ウシアルブミン、１ｇ／ｌ ナトリウムアジドを含
む１０ｍＭリン酸バッファー（ｐＨ7.0 ）にて洗浄した
後、４℃にて保存した。
【０１０３】実施例３ ＴＳＨの検量線作製
【０１０４】実施例２において調製した抗ＴＳＨ−Ｉｇ
Ｇ固相化試験管に、濃度が明確化されたＴＳＨの標準血
清溶液（予めＴＳＨを除いた血清に特定量のＴＳＨを加
えて調製したもの）２００μｌを加えて、室温にて２時
間軽く振盪させた。次に0.05％（Ｗ／Ｖ）Ｔｗｅｅｎ２
０を含む１０ｍＭリン酸バッファー（ｐＨ7.0 ）２ｍｌ
で３回洗浄し、実施例１にて調製したトリオキサン誘導
体（１）標識抗ＴＳＨ−ＩｇＧの炭酸バッファー溶液
（ｐＨ9.0 ）２００μｌを加え、室温にて２時間反応さ
せた。0.05％（Ｗ／Ｖ）Ｔｗｅｅｎ２０を含む１０ｍＭ
リン酸バッファー（ｐＨ7.0 ）２ｍｌで３回洗浄した
後、固相化試験管にジメチルスルホキシド２００μｌを
加え、続いて １０ｍＭ カリウムｔ−ブトキシドを含
むジメチルスルホキシド溶液 ２００μｌを加え化学発
光させた。この発光を東北電子産業社製 ＣＬＤ−１０
０を用いて測定した。
Ｇ固相化試験管に、濃度が明確化されたＴＳＨの標準血
清溶液（予めＴＳＨを除いた血清に特定量のＴＳＨを加
えて調製したもの）２００μｌを加えて、室温にて２時
間軽く振盪させた。次に0.05％（Ｗ／Ｖ）Ｔｗｅｅｎ２
０を含む１０ｍＭリン酸バッファー（ｐＨ7.0 ）２ｍｌ
で３回洗浄し、実施例１にて調製したトリオキサン誘導
体（１）標識抗ＴＳＨ−ＩｇＧの炭酸バッファー溶液
（ｐＨ9.0 ）２００μｌを加え、室温にて２時間反応さ
せた。0.05％（Ｗ／Ｖ）Ｔｗｅｅｎ２０を含む１０ｍＭ
リン酸バッファー（ｐＨ7.0 ）２ｍｌで３回洗浄した
後、固相化試験管にジメチルスルホキシド２００μｌを
加え、続いて １０ｍＭ カリウムｔ−ブトキシドを含
むジメチルスルホキシド溶液 ２００μｌを加え化学発
光させた。この発光を東北電子産業社製 ＣＬＤ−１０
０を用いて測定した。
【０１０５】各種ＴＳＨの量に対する化学発光量を図１
に示す。
に示す。
【０１０６】実施例４ 血清中に含まれるＴＳＨの定量
【０１０７】ＴＳＨ濃度未定の血清を４サンプル用意し
た。ＴＳＨの標準血清溶液の代わりに血清を用いた以外
は実施例３と同様に反応させ、それぞれのサンプルにつ
いて２回測定を行った。得られた化学発光の結果と実施
例３において作製した検量線から求めたＴＳＨの量を表
１に示す。
た。ＴＳＨの標準血清溶液の代わりに血清を用いた以外
は実施例３と同様に反応させ、それぞれのサンプルにつ
いて２回測定を行った。得られた化学発光の結果と実施
例３において作製した検量線から求めたＴＳＨの量を表
１に示す。
【０１０８】
【表１】
【０１０９】２回測定の値より同時再現性が非常に高い
ことが明らかである。
ことが明らかである。
【０１１０】実施例５ 血清中に含まれるＴＳＨの定量
【０１１１】実施例４と同様の操作を実施例４の測定か
ら１週間後に改めて行った。その結果を表２に示す。
ら１週間後に改めて行った。その結果を表２に示す。
【０１１２】
【表２】
【０１１３】実施例４で得られた結果と非常によく一致
しており、日差再現性に高いことが明らかである。
しており、日差再現性に高いことが明らかである。
【０１１４】（比較例１）４−（２−スクシンイミジロ
キシカルボニルエチル）フェニル−１０−メチルアクリ
ジニウム−９−カルボキシレート フルオロスルホネー
ト（アクリジニウム−Ｉと略称する）（株式会社同仁化
学研究所製）２.9ｍｇ（５μｍｏｌ）のジメチルホルム
アミド６０μｌ溶液を、予め抗ＴＳＨ−ＩｇＧ ８ｍｇ
（５０ｎｍｏｌ）を含む１０ｍＭリン酸バッファー（ｐ
Ｈ７.0）１ｍｌ中に添加し、室温で３０分間、更に４℃
で一昼夜反応させた。反応終了後、ファルマシア社製セ
ファデックスＧ−２５カラム〔溶離溶媒１０ｍＭリン酸
バッファー（ｐＨ７.0）〕を用いてＩｇＧ分画を取り出
した。
キシカルボニルエチル）フェニル−１０−メチルアクリ
ジニウム−９−カルボキシレート フルオロスルホネー
ト（アクリジニウム−Ｉと略称する）（株式会社同仁化
学研究所製）２.9ｍｇ（５μｍｏｌ）のジメチルホルム
アミド６０μｌ溶液を、予め抗ＴＳＨ−ＩｇＧ ８ｍｇ
（５０ｎｍｏｌ）を含む１０ｍＭリン酸バッファー（ｐ
Ｈ７.0）１ｍｌ中に添加し、室温で３０分間、更に４℃
で一昼夜反応させた。反応終了後、ファルマシア社製セ
ファデックスＧ−２５カラム〔溶離溶媒１０ｍＭリン酸
バッファー（ｐＨ７.0）〕を用いてＩｇＧ分画を取り出
した。
【０１１５】（比較例２）検量線の作製
【０１１６】トリオキサン誘導体（１）標識抗ＴＳＨ−
ＩｇＧの１０ｍＭ炭酸バッファー溶液の代わりにアクリ
ジニウム−Ｉ標識抗ＴＳＨ−ＩｇＧの１０ｍＭリン酸バ
ッファーを用いた以外は、実施例４と同様に反応を行い
検量線を作製した。その結果を図１に併せて示す。
ＩｇＧの１０ｍＭ炭酸バッファー溶液の代わりにアクリ
ジニウム−Ｉ標識抗ＴＳＨ−ＩｇＧの１０ｍＭリン酸バ
ッファーを用いた以外は、実施例４と同様に反応を行い
検量線を作製した。その結果を図１に併せて示す。
【０１１７】（比較例３）血清中に含まれているＴＳＨ
の定量
の定量
【０１１８】実施例４に用いた血清を比較例２と同様に
反応させ、それぞれのサンプルについて２回測定を行
い、比較例２において作製した検量線から求めたＴＳＨ
の量を表１に併せて示す。
反応させ、それぞれのサンプルについて２回測定を行
い、比較例２において作製した検量線から求めたＴＳＨ
の量を表１に併せて示す。
【０１１９】同時再現性は比較的高い値を示している。
【０１２０】（比較例４）血清中に含まれているＴＳＨ
の定量
の定量
【０１２１】比較例３と同様の操作を比較例３を実施し
てから１週間後に改めて行った。その結果を表２に併せ
て示す。
てから１週間後に改めて行った。その結果を表２に併せ
て示す。
【０１２２】前回測定値よりも下回る結果が得られてお
り、日差再現性に乏しいことが分かる。
り、日差再現性に乏しいことが分かる。
【図１】ＴＳＨ検量線を示すグラフ図である。
─────────────────────────────────────────────────────
【手続補正書】
【提出日】平成５年９月１０日
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１１６
【補正方法】変更
【補正内容】
【０１１６】実施例２において調整した抗ＴＳＨ−Ｉｇ
Ｇ固相化試験管に、濃度が明確化されたＴＳＨの標準血
清溶液（予めＴＳＨを除いた血清に特定量のＴＳＨを加
えて調整したもの）２００μｌを加えて、室温にて２時
間軽く振盪させた。次に０．０５％（Ｗ／Ｖ）Ｔｗｅｅ
ｎ２０を含む１０ｍＭリン酸バッファー（ｐＨ７．０）
２ｍｌで３回洗浄し、比較例１アクリジニウム−Ｉ標識
抗ＴＳＨ−ＩｇＧのリン酸バッファー溶液（ｐＨ７．
０）２００μｌを加え、室温にて２時間反応させた。
０．０５％（Ｗ／Ｖ）Ｔｗｅｅｎ２０を含む１０ｍＭリ
ン酸バッファー（ｐＨ７．０）２ｍｌで３回洗浄した
後、固相化試験管に１０ｍＭリン酸２０ｍＭクエン酸バ
ッファー（ｐＨ５．０）２００μｌを加え、続いて
０．３ｗｔ％Ｈ２Ｏ２を含む１Ｍ水酸化ナトリウム水溶
液２００μｌを加え化学発光させた。この発光を東北電
子産業社製 ＣＬＤ−１００を用いて測定し検量線を作
成した。その結果を図１に併せて示す。
Ｇ固相化試験管に、濃度が明確化されたＴＳＨの標準血
清溶液（予めＴＳＨを除いた血清に特定量のＴＳＨを加
えて調整したもの）２００μｌを加えて、室温にて２時
間軽く振盪させた。次に０．０５％（Ｗ／Ｖ）Ｔｗｅｅ
ｎ２０を含む１０ｍＭリン酸バッファー（ｐＨ７．０）
２ｍｌで３回洗浄し、比較例１アクリジニウム−Ｉ標識
抗ＴＳＨ−ＩｇＧのリン酸バッファー溶液（ｐＨ７．
０）２００μｌを加え、室温にて２時間反応させた。
０．０５％（Ｗ／Ｖ）Ｔｗｅｅｎ２０を含む１０ｍＭリ
ン酸バッファー（ｐＨ７．０）２ｍｌで３回洗浄した
後、固相化試験管に１０ｍＭリン酸２０ｍＭクエン酸バ
ッファー（ｐＨ５．０）２００μｌを加え、続いて
０．３ｗｔ％Ｈ２Ｏ２を含む１Ｍ水酸化ナトリウム水溶
液２００μｌを加え化学発光させた。この発光を東北電
子産業社製 ＣＬＤ−１００を用いて測定し検量線を作
成した。その結果を図１に併せて示す。
Claims (10)
- 【請求項１】 下記一般式（１） 【化１】 （式中Ｘは２価の有機残基を示し、Ｒはカルボキシル
基、アミノ基、ヒドロキシル基またはメルカプト基を示
し、そしてＲ1 及びＲ2 は同一または異って、それぞれ
炭素原子１乃至３個の置換又は非置換の脂肪族炭化水素
基を示す）で表わされるトリオキサン誘導体と、特定の
抗体または抗原とが共有結合していることを特徴とする
標識抗体または標識抗原。 - 【請求項２】 下記一般式（２） 【化２】 （式中Ｘ1 とＸ2 とは、それぞれ独立して２価の有機残
基を示し、Ｒ3 及びＲ4はそれぞれ独立してカルボキシ
ル基、アミノ基、ヒドロキシル基またはメルカプト基を
示す。さらにＸ2 −Ｒ4 は、メチル基、エチル基または
プロピル基であってもよい。Ｒ5 は水素原子、ハロゲン
原子、メチル基、エチル基、またはプロピル基を示す）
で表わされるトリオキサン誘導体と、特定の抗体または
抗原とが共有結合していることを特徴とする標識抗体ま
たは標識抗原。 - 【請求項３】 請求項１または２に記載の標識抗体また
は標識抗原と、試料中の測定対象物との免疫複合体を形
成させ、しかる後、化学発光法により試料中の測定対象
物を定量することを特徴とする免疫測定方法。 - 【請求項４】 特定の抗原（または抗体）を定量する免
疫測定方法であって、請求項１または２に記載の標識抗
体（または抗原）を用いることを特徴とする 抗原（または抗体）−標識抗体（または抗原）複合
体、もしくは 抗原（または抗体）−標識抗体（または抗原）複合
体に含まれていない標識抗体（または抗原） の化学発光を測定することにより特定の抗原（または抗
体）を定量する免疫測定方法。 - 【請求項５】 特定の抗体（または抗原）を用いて特定
の抗原（または抗体）を定量する免疫測定方法であっ
て、請求項１または２に記載の標識抗体（または抗原）
を用いることを特徴とする 抗体（または抗原）−抗原（または抗体）−標識抗
体（または抗原）複合体、もしくは 抗体（または抗原）−抗原（または抗体）−標識抗
体（または抗原）複合体に含まれていない標識抗体（ま
たは抗原） の化学発光を測定することにより特定の抗原（または抗
体）を定量する免疫測定方法。 - 【請求項６】 特定の固相化抗体（または抗原）を用い
て特定の抗原（または抗体）を定量する免疫測定方法で
あって、請求項１または２に記載の標識抗体（または抗
原）を用いることを特徴とする 固相化抗体（または抗原）−抗原（または抗体）−
標識抗体（または抗原）複合体、もしくは 固相化抗体（または抗原）−抗原（または抗体）−
標識抗体（または抗原）複合体に含まれていない標識抗
体（または抗原） の化学発光を測定することにより特定の抗原（または抗
体）を定量する免疫測定方法。 - 【請求項７】 特定の固相化抗体（または抗原）と特定
の抗体（または抗原）を用いて特定の抗原（または抗
体）を定量する免疫測定方法であって、請求項１または
２に記載の標識抗体（または抗原）を用いることを特徴
とする 固相化抗体（または抗原）−抗原（または抗体）−
抗体（または抗原）−標識抗体（または抗原）複合体、
もしくは 固相化抗体（または抗原）−抗原（または抗体）−
抗体（または抗原）−標識抗体（または抗原）複合体に
含まれていない標識抗体（または抗原） の化学発光を測定することにより特定の抗原（または抗
体）を定量する免疫測定方法。 - 【請求項８】 特定の固相化抗原（または抗体）を用い
て特定の抗原（または抗体）を定量する免疫測定方法で
あって、請求項１または２に記載の標識抗体（または抗
原）を用いることを特徴とする 固相化抗原（または抗体）−標識抗体（または抗
原）複合体、もしくは 固相化抗原（または抗体）−標識抗体（または抗
原）複合体に含まれていない抗原（または抗体）−標識
抗体（または抗原）複合体 の化学発光を測定することにより特定の抗原（または抗
体）を定量する免疫測定方法。 - 【請求項９】 特定の固相化抗原（または抗体）と特定
の抗体（または抗原）を用いて特定の抗原（または抗
体）を定量する免疫測定方法であって、請求項１または
２に記載の標識抗体（または抗原）を用いることを特徴
とする 固相化抗原（または抗体）−抗体（または抗原）−
標識抗体（または抗原）複合体、もしくは 固相化抗原（または抗体）−抗体（または抗原）−
標識抗体（または抗原）複合体に含まれていない標識抗
体（または抗原） の化学発光を測定することにより特定の抗原（または抗
体）を定量する免疫測定方法。 - 【請求項１０】 特定の固相化抗体（または抗原）を用
いて特定の抗原（または抗体）を定量する免疫測定方法
であって、請求項１記載の標識抗原（または抗体）を用
いることを特徴とする 固相化抗体（または抗原）−標識抗原（または抗
体）複合体、もしくは 固相化抗体（または抗原）−標識抗原（または抗
体）複合体に含まれていない標識抗原（または抗体） の化学発光を測定することにより特定の抗原（または抗
体）を定量する免疫測定方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP17362193A JPH07134126A (ja) | 1993-06-22 | 1993-06-22 | トリオキサン誘導体標識抗体・抗原および免疫測定方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP17362193A JPH07134126A (ja) | 1993-06-22 | 1993-06-22 | トリオキサン誘導体標識抗体・抗原および免疫測定方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH07134126A true JPH07134126A (ja) | 1995-05-23 |
Family
ID=15964013
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP17362193A Pending JPH07134126A (ja) | 1993-06-22 | 1993-06-22 | トリオキサン誘導体標識抗体・抗原および免疫測定方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH07134126A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2009133876A (ja) * | 1999-05-05 | 2009-06-18 | David A Benaron | 光学コントラスト因子を使用して生体内の内部の現場を検出し、位置測定し、及び目標定めする方法及び装置 |
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1993
- 1993-06-22 JP JP17362193A patent/JPH07134126A/ja active Pending
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2009133876A (ja) * | 1999-05-05 | 2009-06-18 | David A Benaron | 光学コントラスト因子を使用して生体内の内部の現場を検出し、位置測定し、及び目標定めする方法及び装置 |
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