JPH0710897A - エピガロカテキンガレート誘導体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 （修正有） 【目的】エピガロカテキンガレートの本来有する優れた
生理活性をそのまま保持し、かつ易溶解性と色沢安定性
を有し、さらに肝斑や雀斑等の原因となるメラニン色素
の生成に関与するチロシナーゼの酵素作用を阻害して優
れた美白効果を発揮する、新規なエピガロカテキンガレ
ート誘導体を提供する。 【構成】下記式 （式中、Ｒ₁〜Ｒ₈の少なくとも１つはＤ−グルコピラノ
ース残基または重合度２〜８のマルトオリゴ糖残基を示
し、他は各々独立にＨ，Ｃｌ，ＣＨ₃，Ｃ₂Ｈ₅，Ｃ
₃Ｈ₇，Ｃ₁₅Ｈ₃₁ＣＯまたはＣ₁₇Ｈ₃₅ＣＯを示す）で表さ
れるエピガロカテキンガレート誘導体。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、エピガロカテキンガレ
ートの本来有する優れた生理活性をそのまま保持し、か
つ易溶解性と色沢安定性を有し、さらに肝斑や雀斑等の
原因となるメラニン色素の生成に関与するチロシナーゼ
の酵素作用を阻害して優れた美白効果を発揮する新規な
エピガロカテキンガレート誘導体に関する。

【０００２】

【従来の技術】従来、リューム リゾーマ（Ｒｈｅｕｍ
ｒｈｉｚｏｍａ）の根からカテキン５−Ｏ−β−Ｄ−
グルコピラノシドを取得する方法、ラフィオレプシス
ウンベラータ（Ｒｈａｐｈｉｏｌｅｐｓｉｓ ｕｍｂｅ
ｌｌａｔａ）の樹皮からカテキン ７−Ｏ−β−Ｄ−グ
ルコピラノシドを取得する方法［Ｇ．Ｎｏｎａｋａ等
著、Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，ｖｏｌ．２２．１
６５９（１９８３）］、シナモマム カシア（Ｃｉｎｎ
ａｍｏｍｕｍ ｃａｓｓｉａ）の樹皮からエピカテキン
３−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシドを取得する方法
［Ｓ．Ｍｏｒｉｍｏｔｏ 等著、Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒ
ｍ．Ｂｕｌｌ．，ｖｏｌ．３４．６３３（１９８６）］
等の天然物から抽出分離して得る方法が知られている。
また、カテキンに澱粉もしくはシクロデキストリンを加
えて、シクロマルトデキストリン−グルカノトランスフ
ェラーゼを反応させ、カテキン誘導体を合成させて、得
る方法が知られている（日本農芸化学会会誌、６５巻、
３号、第５頁、２Ａｐ１４、平成３年３月１５日発行お
よび特開平４−２７３８９０参照）。

【０００３】

【発明が解決する課題】このようにカテキン類誘導体の
製造法はいくつか知られているが、エピガロカテキンガ
レート誘導体の製造法は知られていない。

【０００４】一方、このエピガロカテキンガレートは、
他のカテキン類と同様に食用油脂類に対する抗酸化作
用、食中毒菌等に対する抗菌作用、血中コレステロ
ール濃度上昇抑制作用、アンジオテンシン変換酵素阻
害作用及び血圧上昇抑制作用、α−アミラーゼ阻害作
用及び血糖上昇抑制作用、微生物に於ける抗突然変異
及びマウスあるいはラットに於ける抗腫瘍作用、血小
板凝集抑制作用、抗ウイルス作用そして虫歯抑制作
用など、食品及び医薬産業上重要な物質である。

【０００５】しかしながら、エピガロカテキンガレート
は水に対する溶解度が低く、また光に対する色沢安定性
も非常に悪い欠点を有し、上記食品や、医薬産業におい
て利用の範囲が制約を受ける問題点を有している。また
それ自身、美白作用を有することは知られていない。

【０００６】

【課題を解決するための手段】そこで本発明者等はこの
ような問題点を解消するため、種々検討を重ねた結果、
シュークロースホスホリラーゼの存在下で、エピガロカ
テキンガレートとグルコース−１−リン酸またはシュー
クロースとを反応させることによって、エピガロカテキ
ンガレートの有する優れた生理活性は殆ど損うことな
く、水に対する溶解度が高く、また光に対する色沢安定
性も非常に高いエピガロカテキンガレート誘導体が得ら
れ、また驚くべきことに、肝斑や雀斑等の原因となるメ
ラニン色素の生成に関与するチロシナーゼの酵素作用を
阻害して優れた美白効果を発揮することも合せて知り、
この知見に基いて本発明を完成した。

【０００７】即ち、本発明は、一般式（１）：

【化２】 （式中、Ｒ₁〜Ｒ₈の少なくとも１つはＤ−グルコピラノ
ース残基または重合度２〜８のマルトオリゴ糖残基を示
し、他は各々独立にＨ、Ｃｌ、ＣＨ₃、Ｃ₂Ｈ₅、Ｃ
₃Ｈ₇、Ｃ₁₅Ｈ₃₁ＣＯまたはＣ₁₇Ｈ₃₅ＣＯを示す）で表さ
れるエピガロカテキンガレート誘導体である。

【０００８】以下、本発明を詳細に説明する。先ず、本
発明を実施するためにはエピガロカテキンガレートとグ
ルコース−１−リン酸またはシュークロースとの混合液
に、シュークロースホスホリラーゼを作用させ、反応を
行わせる。

【０００９】このエピガロカテキンガレートは、一般に
水に対する溶解度が非常に低い（高くても２０ｍｇ／ｍ
ｌ）ので、予めメタノール、エタノール等の極性溶媒に
溶解（１００〜５００ｍｇ／ｍｌ）して、できるだけエ
ピガロカテキンガレートの濃度を高くして使用すること
が、効率よくエピガロカテキンガレート誘導体を取得す
る上で好ましい。

【００１０】次に、シュクロースホスホリラーゼは、無
機リンの存在下でシュークロースに作用してグルコース
−１−リン酸とフラクトースを生成する、またはこの逆
反応を触媒する酵素である。

【００１１】そして、その起源としては例えばロイコノ
ストック・メセンテロイデス（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ
ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ）、シュードモナス・サ
ッカロフィラ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓａｃｃｈａ
ｒｏｐｈｉｌａ）、シュードモナス・パトリファシエン
ス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｐｕｔｒｅｆａｃｉｅｎ
ｓ）、クロストリジウム・パステイリアナム（Ｃｌｏｓ
ｔｒｉｄｉｕｍ ｐａｓｔｅｕｒｉａｎｕｍ）、アセト
バクター・キシリナム（Ａｃｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｘｙ
ｌｉｎｕｍ）、プルラリア・プルランス（Ｐｕｌｌｕｌ
ａｒｉａ ｐｕｌｌｕｌａｎｓ）等のものが知られてい
る〔Ｅ．Ｊ．Ｖａｎｄａｍｍｅ等著，Ｂｉｏｔｅｃｈｎ
ｏｌ．Ｂｉｏｅｎｇ．，Ｖｏｌ．２９，８−１５，１９
８７参照〕が、これらに限定されるものではない。

【００１２】次に、本発明を実施するにあたり先ず、グ
ルコース−１−リン酸又はシュークロースと、エピガロ
カテキンガレートとを水に溶解して、混合液を調製す
る。水に対する上記２つの成分の添加量は、全体として
重量％濃度で５〜１００％、更に望ましくは２０〜６０
％である。

【００１３】また、上記混合液に対するシュークロース
ホスホリラーゼの添加量は、グルコース−１−リン酸又
はシュークロースと、エピガロカテキンガレートとの総
重量１グラム当たり１単位以上、望ましくは５０〜２５
０単位である。

【００１４】なお、１単位とは特開平３−４７８５「シ
ュークロースホスホリラーゼの製造法」に記載の方法に
従って求めたものである。

【００１５】また、酵素反応のｐＨは５．０〜８．５、
望ましくは７．０〜８．０であり、また温度は２０〜５
０℃、望ましくは３５〜４５℃であり、また時間は１〜
３０時間、望ましくは８〜２４時間である。

【００１６】このようにして得られた反応液から、目的
とするエピガロカテキンガレート誘導体の分離は、通常
のカテキン類化合物の単離方法を採用すれば良い。即
ち、セファデックスＬＨ−２０等のデキストラン誘導体
を担体とするクロマトグラフィー法［Ｒ．Ｓ．Ｔｏｍｐ
ｓｏｎ 等著、Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｐｅｒｋｉｎ
Ｉ，Ｎｏ．１１，１３８７（１９７２）］、ポリアミド
を担体とするカラムクロマトグラフィー法［Ｊ．Ｐ．Ｖ
ａｎ Ｂｕｒｅｎ 等著、Ｊ．Ｆｏｏｄ Ｓｃｉ．，ｖ
ｏｌ．３１．９６４（１９６６）］、シリカゲルを用い
る液体クロマトグラフィ−法［Ｃ．Ｗｉｌｌｉａｍ Ｇ
ｌｅｎｎｉｅ 等著、Ｊ．Ａｇｒｉｃ．Ｆｏｏｄ Ｃｈ
ｅｍ．，ｖｏｌ．２９．９６５〜９６８（１９８
１）］、水と酢酸エチル間の向流分配による方法［Ａｎ
ｄｒｅｗ Ｇ．Ｈ．Ｌｅａ 著、Ｊ．Ｓｃｉ．Ｆｄ Ａ
ｇｒｉｃ．，ｖｏｌ．２９．４７１〜４７７（１９７
８）］、ポリスチレン系樹脂、例えばダイヤイオン、Ｈ
Ｐ２０、ＨＰ２１、ＳＰ２０６、ＳＰ２０７、ＳＰ８５
０、ＣＨＰ３Ｃ、ＣＨＰ５Ｃ、ＣＨＰ２０Ｐ（以上何れ
も三菱化成工業社製）、アンバーライトＸＡＤ−１、Ｘ
ＡＤ−２、ＸＡＤ−４（以上何れもオルガノ社製）を用
いたクロマトグラフィ−法［特開昭６３−１６２６８
５］、あるいは限外濾過膜や逆浸透膜を用いて分画する
方法［特開昭６３−２６７７７４］が挙げられる。これ
らは単独、または組合わせることにより目的とするエピ
ガロカテキンガレート誘導体を分離することができる。
例えば、濾過樹脂（例えばファルマシア社製、セファデ
ックスＬＨ−２０）を充填したカラムに通液し、次いで
水を通液して未反応の糖、酵素（蛋白質）等を除去し、
次いでエタノールの濃度勾配溶液を通液することによっ
て、未反応のエピガロカテキンガレート及びエピガロカ
テキンガレート誘導体を溶出し、これをシリカゲルを用
いる液体クロマトグラフィー（例えば、資生堂社製、Ｃ
ＡＰＣＥＬＬ ＰＡＫ Ｃ₁₈）に掛け、メタノール溶液
を通液することによって目的とするエピガロカテキンガ
レート誘導体画分を取得する。

【００１７】

【本発明の効果】本発明によれば、グルコース−１−リ
ン酸又はシュークロースと、エピガロカテキンガレート
とを含有する溶液に加リン酸分解酵素シュークロースホ
スホリラーゼを添加作用させるという極めて簡単な操作
によって、エピガロカテキンガレートの本来有する優れ
た生理活性をそのまま保持し、かつ易溶解性と色沢安定
性を有し、さらに肝斑や雀斑等の原因となるメラニン色
素の生成に関与するチロシナーゼの酵素作用を阻害して
優れた美白効果を発揮する新規なエピガロカテキンガレ
ート誘導体を提供することができる。

【００１８】以下、実施例を示して本発明をより具体的
に説明する。

【実施例１】（−）−エピガロカテキンガレート（栗田
工業社販売）２００ｍｇを１ｍｌのメタノールに溶解
し、これを１００ｍＭ ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）緩衝
液に４００ｍｇ／ｍｌの濃度に溶解したシュークロース
溶液１００ｍｌに混合し、これにシュークロースホスホ
リラーゼ（キッコーマン社製）４５００単位を添加し、
４２℃２４時間反応させ、糖化合物生成反応を行い、次
いで、１００℃、５分間加熱処理して酵素反応を停止し
酵素反応終了液を得た。この反応終了液の高速液体クロ
マトグラフィ−（ＨＰＬＣ）分析の結果を図１に示す。

【００１９】図１の結果から、反応終了液には、（−）
−エピガロカテキンガレートと２種類の（−）−エピガ
ロカテキンガレート誘導体１および同誘導体２が含まれ
ていることが確認できる。図１に示したように、先に溶
出される２つのピークの画分は（−）−エピガロカテキ
ンガレート誘導体であり、後に溶出されるピークの画分
は（−）−エピガロカテキンガレートである。

【００２０】図２にＨＰＬＣ分析による酵素反応におけ
る（−）−エピガロカテキンガレート誘導体１（Ｇ−
Ｉ）及び同誘導体２（Ｇ−２）転移率の経時的変化の様
子を示す。図２の縦軸に示される転移率は、反応に用い
た（−）−エピガロカテキンガレートのモル数に対する
生成した（−）−エピガロカテキンガレート誘導体のモ
ル数（ＨＰＬＣのピーク面積より算出した）の％で表し
た。

【００２１】（高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬ
Ｃ）分析の条件） カラム；ＣＡＰＣＥＬＬ ＰＡＫ Ｃ₁₈ ＳＧ１２０、
内径 ４．６ｍｍ、長さ ２５０ｍｍ 流速；１ｍｌ／分 移動相；アセトニトリル：酢酸エチル：０．０５％リン
酸＝１２：２：８６ 検出波長；２８０ｎｍ

【００２２】次に、得られた反応液をセファデックスＬ
Ｈ−２０カラム（内径３センチ、長さ３０センチ）に流
速２ml/minで通液し、水を通液して未反応の糖及び蛋白
質（酵素）を洗い流した後、エタノール４０〜７０％溶
液（各５００ml）を濃度勾配法にて通流させて、２種類
の目的とするエピガロカテキンガレート誘導体を含有す
る溶液を得た。

【００２３】このようにして、２種類の目的とするエピ
ガロカテキンガレート誘導体を含有する溶液は、次いで
逆相系の分配吸着クロマトグラフィ−であるＣＡＰＣＥ
ＬＬＰＡＫ Ｃ₁₈ ＳＧ１２０カラム（内径２センチ、
長さ２５センチ）に供し、メタノ−ル２０％溶液を通流
させて、目的とする２種類の（−）−エピガロカテキン
ガレート誘導体１及び同誘導体２の溶液を得、これをロ
ータリーエバポレーターにより減圧濃縮を行い、次いで
凍結乾燥を行い、２５ｍｇの（−）−エピガロカテキン
ガレート誘導体１粉末、及び５４ｍｇの（−）−エピガ
ロカテキンガレート誘導体２粉末を得た。

【００２４】上記粉末を高速液体クロマトグラフィー
（ＣＡＰＣＥＬＬ ＰＡＫ Ｃ₁₈）による分析を行い、
各々の誘導体の純度を測定したところ、いずれも９５％
以上であった。

【００２５】また、その構造を以下の核磁気共鳴分析、
マススペクトル分析、ＵＶスペクトル分析及びＩＲスペ
クトル分析の各分析方法によって測定したところ、
（−）−エピガロカテキンガレート誘導体１（以下、Ｅ
ＧＣｇＧ−１と略記する）は（−）−エピガロカテキン
ガレート ４′−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシドシドで
あり、（−）−エピガロカテキンガレート誘導体２（以
下、ＥＧＣｇＧ−２と略記する）は（−）−エピガロカ
テキンガレート ４′，４”−Ｏ−α−Ｄ−ジ−グルコ
ピラノシドシドであることが確認された。即ち、上記Ｅ
ＧＣｇＧ−１粉末をアセトンに溶解し、核磁気共鳴分析
により構造の解析をしたところ、構成成分はグルコース
１分子と（−）−エピガロカテキンガレート１分子であ
ることを確認した。そして、グルコースの１位と（−）
−エピガロカテキンガレートの４′位がα結合している
ことが判明した。また、ＥＧＣｇＧ−２粉末をアセトン
に溶解し、核磁気共鳴分析により構造の解析をしたとこ
ろ、構成成分はグルコース２分子と（−）−エピガロカ
テキンガレート１分子であることを確認した。そして、
（−）−エピガロカテキンガレートの４’及び４”位が
それぞれグルコースの１位と結合していることが判明し
た。ＥＧＣｇＧ−１の化学構造式を（化４）として以下
に示す。

【化４】 ＥＧＣｇＧ−２の化学構造式を（化５）として以下に示
す。

【化５】 ＥＧＣｇＧ−１の¹Ｈ−ＮＭＲ（２００ＭＨｚ）のスペ
クトルを図３に、また、¹³Ｃ−ＮＭＲ（５０ＭＨｚ）の
結果を図４に示す。ＥＧＣｇＧ−２の¹Ｈ−ＮＭＲ（２
００ＭＨｚ）のスペクトルを図５に、また、¹³Ｃ−ＮＭ
Ｒ（５０ＭＨｚ）の結果を図６に示す。

【００２６】さらにまた、マススペクトルにより分子量
がＥＧＣｇＧ−１は６２０（図７）、ＥＧＣｇＧ−２は
７８２（図８）であることを確認した。

【００２７】次に本発明の方法で得られた誘導体を常法
に従ってＵＶ及びＩＲスペクトルを調べた結果、ＥＧＣ
ｇＧ−１はそれぞれ図９、図１０が、ＥＧＣｇＧ−２は
それぞれ図１１、図１２が得られた。ＵＶスペクトルは
検体を蒸留水に溶解して測定し、ＩＲスペクトルはＫＢ
ｒ法により測定した。これらの結果からも、ＥＧＣｇＧ
−１は（−）−エピガロカテキンガレート４′−Ｏ−α
−Ｄ−グルコピラノシドシド、ＥＧＣｇＧ−２は（−）
−エピガロカテキンガレート ４′，４”−Ｏ−α−Ｄ
−ジ−グルコピラノシドシドであることが確認された。

【００２８】

【実施例２】（−）−エピガロカテキンガレート２００
ｍｇを１ｍｌのメタノールに溶解し、これを１００ｍＭ
ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）緩衝液に２００ｍｇ／ｍｌ
の濃度に溶解したグルコース−１−リン酸溶液１００ｍ
ｌに混合し、これにシュークロースホスホリラーゼ（盛
進製薬社製）４５００単位を添加し、４２℃１５時間反
応させ、糖化合物生成反応を行い、次いで、１００℃、
５分間加熱処理して酵素反応を停止し酵素反応処理液を
得た。以下、上記実施例１と全く同様にして、（−）−
エピガロカテキンガレート４′−Ｏ−α−Ｄ−グルコピ
ラノシドシド粉末を２２ｍｇ、（−）−エピガロカテキ
ンガレート ４′，４”−Ｏ−α−Ｄ−ジ−グルコピラ
ノシドシド粉末を５１ｍｇ得た。

【００２９】

【応用例１】 （ＥＧＣｇＧ−１，ＥＧＣｇＧ−２の抗光酸化性試験）
純水にリボフラビンを２０ｐｐｍとなるように溶解し、
これを１ｍｌづつ４区分用意し、第１区分に（−）−エ
ピガロカテキンガレート（以下、ＥＧＣｇと略記する）
を、第２区分にＥＧＣｇＧ−１を、第３区分にはＥＧＣ
ｇＧ−２を、各々２５００ｐｐｍの濃度になるように溶
解し、また、第４区分には何も添加せずに、それぞれ蛍
光灯（２７Ｗ）５ｃｍ直下により可視光線１９５００ル
クス、紫外線強度（３１０〜４００ｎｍ）０．２０ｍＷ
／ｃｍ²の条件で照射し、経時的にサンプルの一部を採
取しこれをＨＰＬＣにより非分解のリボフラビンを定量
した。その結果を図１３に示す。

【００３０】（ＨＰＬＣ分析の条件） カラム；ＣＡＰＣＥＬＬ ＰＡＫ Ｃ₁₈ ＳＧ１２０、
内径 ４．６ｍｍ、長さ ２５０ｍｍ 流速；１ｍｌ／分 移動相；メタノール：１０ｍＭＮａＨ₂ＰＯ₄（ｐＨ５．
５）＝３５：６５ 検出波長；２６６ｎｍ

【００３１】図１３の結果から、なにも添加しない区分
４（無添加区）では、リボフラビンが急激に分解消失す
るが、ＥＧＣｇを添加した区分と共にＥＧＣｇＧ−１を
添加した区分及びＥＧＣｇＧ−２を添加した区分３、リ
ボフラビンが殆ど分解されずに安定であることが判る。
即ち、ＥＧＣｇＧ−１及びＥＧＣｇＧ−２は、ＥＧＣｇ
と比べ、抗光酸化性において全く遜色ないことが判る。

【００３２】

【応用例２】 （ＥＧＣｇＧ−１、ＥＧＣｇＧ−２の色沢安定性試験）
純水を３ｍｌづつ３区分用意し、第１区分にＥＧＣｇ
を、第２区分にＥＧＣｇＧ−１を、第３区分にＥＧＣｇ
Ｇ−２をそれぞれ１０００ｐｐｍの濃度になるように溶
解し、上記応用例１と同様な条件で蛍光灯照射を行な
い、経時的にサンプルの一部を採取しこれを４２０ｎｍ
の吸光度の増加により着色の程度を測定した。その結果
を図１４に示す。

【００３３】図１４の結果から、ＥＧＣｇを溶解した区
分は時間の経過と共に茶褐色化し、色の安定性が非常に
悪いが、これに対しＥＧＣｇＧ−１及びＥＧＣｇＧ−２
を溶解した区分では色沢が安定であることが判る。

【００３４】

【応用例３】 （ＥＧＣｇＧ−１，ＥＧＣｇＧ−２の水溶解性試験）Ｅ
ＧＣｇ、ＥＧＣｇＧ−１、及びＥＧＣｇＧ−２をそれぞ
れ図１５、１６の各濃度となるように純水に溶解し、こ
れを０．４５μｍのフィルターを通過した液の量をＨＰ
ＬＣにて定量した。その結果を図１５、１６に示す。

【００３５】図１５、１６の結果から、ＥＧＣｇは２０
ｍｇ／ｍｌ程度しか水に溶解しないのに対し、ＥＧＣｇ
Ｇ−１は５００ｍｇ／ｍｌ、ＥＧＣｇＧ−２は１０００
ｍｇ／ｍｌも溶解し、実用に際して著しく便利となるこ
とが判る。

【００３６】

【応用例４】 （ＥＧＣｇＧ−１及びＥＧＣｇＧ−２のチロシナーゼ活
性阻害効果）上記実施例１で得られたＥＧＣｇＧ−１及
びＥＧＣｇＧ−２の試験管内（インビトロ）でのチロシ
ナーゼ活性阻害効果を調べた。試験方法として、基本的
には特開平４ー４５７９１号公報に準じて行ない、チロ
シナーゼ（シグマ社製、マッシュルーム起源）によるＬ
−チロシン（０．１％（ｗ／ｖ））から生成されるドー
パクロム（最大吸収波長４７５ｎｍ）を５ｍＭ各種ＥＧ
Ｃｇ誘導体存在下で測定した。その結果を図１７に示
す。

【００３７】図１７の結果から、ＥＧＣｇ誘導体を含ま
ないコントロールの区分はチロシナーゼの作用によりＬ
−チロシンが減少して反対にドーパクロム量が増加し時
間の経過と共に吸光度が増大している。一方、本発明の
ＥＧＣｇＧ−１及びＥＧＣｇＧ−２を含む区分は該物質
の存在によって、チロシナーゼの作用が阻害されるの
で、反応生成物であるドーパクロムに由来する吸光度の
増加は低く抑えられ、ＥＧＣｇＧ−１及びＥＧＣｇＧ−
２はチロシナーゼ活性阻害効果を有することが判明し
た。チロシナーゼ溶液添加時より１０分後の吸光度をか
ら、活性阻害率は、ＥＧＣｇＧ−１では９１．８％、Ｅ
ＧＣｇＧ−２では６２．０％と非常に高い値であった。
本発明によって得られるＥＧＣｇＧ−１及びＥＧＣｇＧ
−２はチロシナーゼ活性阻害作用を有し、美白化粧料の
有効な成分として利用できることが判る。

【図面の簡単な説明】

【図１】実施例１で得られたＥＧＣｇ、ＥＧＣｇＧ−１
及びＥＧＣｇＧ−２を含む酵素反応終了液のＨＰＬＣ分
析の結果を示す。

【図２】ＨＰＬＣ分析により求めた、実施例１の酵素反
応における（−）−エピガロカテキンガレ−ト誘導体１
（Ｇ−１）及び同誘導体２（Ｇ−２）の転移率の経時的
変化の結果を示す。

【図３】ＥＧＣｇＧ−１の¹Ｈ−核磁気共鳴スペクトル
（２００ＭＨｚ）（Ａｃｅｔｏｎｅ−ｄ₆）を示す。

【図４】ＥＧＣｇＧ−１の¹³Ｃ−核磁気共鳴スペクトル
（５０ＭＨｚ）（Ａｃｅｔｏｎｅ−ｄ₆）を示す。

【図５】ＥＧＣｇＧ−２の¹Ｈ−核磁気共鳴スペクトル
（２００ＭＨｚ）（Ａｃｅｔｏｎｅ−ｄ₆）を示す。

【図６】ＥＧＣｇＧ−２の¹³Ｃ−核磁気共鳴スペクトル
（５０ＭＨｚ）（Ａｃｅｔｏｎｅ−ｄ₆）を示す。

【図７】ＥＧＣｇＧ−１のマススペクトルを示す。

【図８】ＥＧＣｇＧ−２のマススペクトルを示す。

【図９】ＥＧＣｇＧ−１を蒸留水に溶解した時のＵＶス
ペクトルを示す。

【図１０】ＥＧＣｇＧ−１のＫＢｒ法によるＩＲスペク
トルを示す。

【図１１】ＥＧＣｇＧ−２を蒸留水に溶解した時のＵＶ
スペクトルを示す。

【図１２】ＥＧＣｇＧ−２のＫＢｒ法によるＩＲスペク
トルを示す。

【図１３】ＥＧＣｇ、ＥＧＣｇＧ−１、及びＥＧＣｇＧ
−２の抗光酸化性試験の結果を示す。

【図１４】ＥＧＣｇ、ＥＧＣｇＧ−１、及びＥＧＣｇＧ
−２の水溶液中での経時的色沢安定性を示す。

【図１５】ＥＧＣｇ、ＥＧＣｇＧ−１、及びＥＧＣｇＧ
−２の蒸留水に対する溶解性（０〜３０ｍｇ／ｍｌ）の
結果を示す。

【図１６】ＥＧＣｇ、ＥＧＣｇＧ−１、及びＥＧＣｇＧ
−２の蒸留水に対する溶解性（０〜１６００ｍｇ／ｍ
ｌ）の結果を示す。

【図１７】ＥＧＣｇＧ−１、及びＥＧＣｇＧ−２のチロ
シナーゼ活性阻害に関する経時的変化を示す。

【化３】

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 堀内 達雄 千葉県野田市野田339番地 キッコーマン 株式会社内

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 一般式（１）： 【化１】 （式中、Ｒ₁〜Ｒ₈の少なくとも１つはＤ−グルコピラノ
   ース残基または重合度２〜８のマルトオリゴ糖残基を示
   し、他は各々独立にＨ、Ｃｌ、ＣＨ₃、Ｃ₂Ｈ₅、Ｃ
   ₃Ｈ₇、Ｃ₁₅Ｈ₃₁ＣＯまたはＣ₁₇Ｈ₃₅ＣＯを示す）で表さ
   れるエピガロカテキンガレート誘導体。