JPH06504037A - エストロゲン活性を有するトリアリールエチレンカルボン酸 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 エストロゲン活性を有する トリアリールエチレンカルボン酸 米国政府は、米国国立衛生研究所からの認可により、本発明において一定の権限 を有する。

本発明は、エストロゲン活性を有するトリアリールエチレンカルボン酸およびそ の使用方法に関する。

ｌ災旦冑ｌ ステロイドホルモンは、体内の器官または腺で合成され、血液によって運搬され 、離れた位置で作用を引き起こす有機分子である。ステロイドホルモンは、ベル ヒドロシクロペンタノフェナントレン部分を有する。エストロゲンは、ヒトの基 本的な性徴の発達および維持を刺激する重要なりラスのステロイドホルモンであ る。ヒトに天然に存在する主要なエストロゲンは、エストラジオールであり、こ のエストラジオールは、アンドロゲン／エストロゲン平衡の制御および維持にお いて重要な役割を果たす。エストロゲンはまた、特定の医学症状および疾病の治 療に有用であることが見い出されている。例えば、卵巣によって生成されるステ ロイドホルモンであるエストラジオールは、骨粗輔症、月経前症候群、閉経に関 連する血管運動症候群、萎縮性膣炎、外陰萎縮症、女性性機能低下、原発性卵巣 機能低下、過剰な体毛増殖、および前立腺癌の治療に有用である。エストロゲン はまた、他の女性ホルモンであるプロゲステロンと組合わせて使用され、これら はゴナドトロピン抑制を促進し、経口避妊薬として作用する。

ジエチルスチルベストロール、複合エストロゲン類、オヨびエチニルエストラジ オールは、薬学投与用のステロイドエストロゲン代用物質として使用されている 。しかし、ステロイドホルモン代用物質の投与は、心筋梗塞、血栓塞栓症、脳血 管疾患、および子宮内膜癌を含む多数の副作用を伴う。事実、エストロゲンおよ びエストロゲン代用物質は現在、骨粗ン症に有効な唯一公知の治療物質であるが 、その使用は、長期にわたるステロイド治療によって起こる副作用のため非常に 制限される。さらに、ジエチルスチルベストロールの投与に関連して見い出され ている、深刻な出産障害のような特定の深刻な副作用のために、過去２０年間、 新規なエストロゲン代用物質は市場に出ることがなかった。

ステロイド療法に関連する問題に関して、有効な非ステロイドエストロゲンおよ び抗エストロゲン化合物を同定するために、非常に多くの研究がなされている。

非ステロイド抗エストロゲンの例としては、タモキンフェン（ＴＡＭ）　（（Ｚ ）　−２−［４−（１，２−ジフェニル−１−ブテニル］フェノキシ］−Ｎ、Ｎ −ジメチルエタンアミン）という、トリフェニルエチレン誘導体カ挙げられる。

タモキシフェンの化学構造は、図１に示される。

タモキシフェンは、乳房および卵子などの主要な標的組織においてエストロゲン の増殖促進効果と効果的に拮抗する。タモキシフェンは、現在、乳癌の治療用と して市場に出ている。

この化合物の売上げは、１９８９年で＄２００．０００．０００に達した。

ヒトおよび種々の動物種において、ＴＡＭは、酸化的生物置換を経て、多数の塩 基性または中性の酸化代謝産物になることが示されている。特に、側鎖改変（Ｎ −ジメチル化、Ｎ、ｓ−シブメチル化およびジメチルアミノ基のヒドロキシル基 への置換）が単独で、または４−ヒドロキシル化を伴って、起こることが示され ている。４−ヒドロキシタモキシフェン（４−ＢＴ）は、主要な代謝産物である 。しかし、ＴＡＭの酸代謝産物は検出されていない。

レセプター競合結合に基づいた研究によると、ＴＡＭの塩基性および中性の代謝 産物は、一般に、エストロゲンレセプター親和性を有し、およびＴＡＭ自身の抗 エストロゲン活性と同等またはそれ以上の活性を有することが示されている。さ らに、研究によると、これらの代謝産物は、ＴＡＭ療法で治療中の患者の腫瘍中 にＴＡＭとともに存在することが示されている。

クロミツエン（２−［４−（２−クロロ−１，２−ジフェニルエチニル）−フェ ノキシ］−Ｎ、Ｎ−ジエチルエタンアミン）は、タモキシフェンに構造的に密接 に関連した薬学化合物である。クロミツエンの調製は、米国特許第２．９１４． ５６３号に記載されている。クロミツエンは、生理的に正常なエストロゲンレベ ルを示す不妊症の女性に排卵を誘発するために処方される、非ステロイド抗エス トロゲンである。視床下部において、クロミツエンは、ゴナドトロピン放出ホル モンの分泌に対するエストラジオール媒介性フィードバック阻害と拮抗する。タ モキシフエンはまた、無排卵女性に排卵を引き起こすために投与されており、副 作用の発生が少ないため、この目的においてはクロミツエンよりも薬学的に好ま しい。

ＹｏｕｎＨの米国特許第４．８９４．３７３号は、閉経および骨粗鰭症の治療に おける、クロミツエン、タモキシフェン、ナフォキシデン、および他の抗エスト ロゲン化合物の使用を記載している。

トレミフェン（２−［４−（２−クロロメチル−１，２−ジフェニルエチニル） −７エノキシ］−Ｎ、Ｎ−ジエチルエタンアミン）は、抗腫瘍活性を有する、タ モキシフェンに構造的に関連するトリフェニルエチＬ／７化合物である。Ｈａｓ ａｎＳＡｎａｌ　ｔ、　Ｌａｔｔｅｒｓ　２３（２）、　３２７−３３４　（１ ９９０）は、トレミフェンがインビボにおいて、ジエチルエタンアミン側鎖がオ キシ酢酸およびオキシ酢酸のメチルエステルで置換される２つの代謝産物を含む 多数の化合物に代謝されることを報告した。これらの代謝産物の生物学的活性は 、報告されていない。

いくつかの非ステロイド抗エストロゲン化合物が開発されているが、非常に少数 の非ステロイドエストロゲン様化合物しか同定されていない。エストロゲン代用 物質による療法、特に閉経療法に用いられる非ステロイドエストロゲン様化合物 に対する需要は高い。全女性の４分の１が、この症状に関する医学的アドバイス または治療をめていることが推測されている。非ステロイドエストロゲン様化合 物はまた、骨粗輔症の治療、子宮出血、思春期の卵巣成長障害、体毛の過剰な発 育の防止、および経口避妊薬にも必要とされる。

従って、本発明の目的は、エストロゲン活性を有する非ステロイド化合物を提供 することである。

図面の簡単な説明 図１は、タモキシフェン酸、４−ヒドロキシタモキシフェン酸（４−ＨＴＡ）、 タモキシフェン（ＴＡＭ）、および４−ヒドロキシタモキシフェン（４−ＨＴ） の化学構造を示す。

図２は、４−ＨＴＡ　（−口−）、エストラジオール（−０−）、およびＴＡ（ −◇−）の濃度（ｎＭ）が増加したときの、未成熟ラットからの子宮細胞質ゾル の［３Ｈ］エストラジオールの結合に対する効果を示すグラフである。〔３旧エ ストラジオールからの特異的に結合した３Ｈは、４−ＨＴＡ、エストラジオール 、またはＴＡの非存在下で、対照インキュページ讐ンにおいて結合したもののパ ーセントでプロットしである。

図３は、様々な濃度（μＭ）の４−ＦＩＴＡ　（−一−）およびＴＡＭ（−＋− ）の、ＭＣＦ　７ヒト乳癌細胞増殖に対する効果を示すグラフである。

図４は、様々な濃度（μＭ）における、４−ＨＴＡ　（−★−）およヒＴＡ　（ −ロー）の、ＭＣＦ？細胞増殖に対するタモキシフェンの効果を逆転させる能力 を示すグラフである。

図５は、様々な濃度（ｌｏｇ１度、μＭ）における、エストラジオール（−■− ）および４−［ＩＴＡ　（−★−）の、ＭＣＦ？細胞増殖に対する刺激能力を示 すグラフである。

図６は、１′Ｃタモキシフエンをラットに投与したときの、酸性尿放射活性（Ｒ ＋対ＤＰＭ　ｘ　１０−’）のラジオクロマトグラフィー分析である。矢印は、 クロマトグラムにおける、標準化合物、４−ＨＴＡ（４−ヒＦロ＋シタ％＋シフ ｚン酸）、ＴＡ　ｇｌｙＯＨ（（Ｚ）　−Ｎ−４−（１，２−ジフェニル−１− ブテニル）フェノキシアセチルグリシン）、およびＴＡ　（タモキシフェン酸） の位置を示す。

免且生Ｉ互 式（１）で示されるトリアリールエチレンカルボン酸であって、 ここで、Ｒは（Ｃ）１２）　、０または（ＣＨ２）。、ｍは１から４の整数、お よびｎは０から４の整数であり；Ｘは水素またはヒドロキシル、Ｙはメチル、エ チル、塩素、または臭素であり；ここで、ＲＣＯＯＨ部分およびＸ部分は、フェ ニルエチレン結合に対してメタまたはバラであり、エストロゲン活性を有する。

好ましい化合物は、４−１：：トＯキンタモキシフェン酸、　（４−ＨＴＡ；　 （Ｅ、Ｚ）　−２−（４−［１−（ｐ−ヒドロキシフェニル）−２−フェニル］ −１−ブテニル）フェノキ／酢酸）である。好ましい実施態様において、Ｘはヒ ドロキシルである。ＴＡおよび４−ＨＴＡと構造的および機能的に高度な類似性 を有する、他のＴＡＭ酸類似体の例としては、それに限定されないが、３−ＨＴ Ａ、　４−　［１−（ｐ−ヒドロキシフェニル）−２−フェニル−１−ブテニル ］安息香酸、および４−　［１−（ｐ−ヒドロキシフェニル）−２−フェニル− １−ブテニルコフェニル酢酸が含まれる。

Ｘが水素であるとき、ＲがＣ［１２０ｓ　およびＹがエチルである（タモキシフ ェン酸）以外の、式（＋）の化合物はまだ報告されていない。タモキシフェン酸 は合成されているが、その化合物の生物学的活性は、報告されていない。

タモキシフェンおよびクロミツエンのような非常に近縁な類似体が、インビボに おいて抗エストロゲン効果を有することが公知である事実に照らすと、このクラ スの化合物が、それと正反対のエストロゲン活性を有しているという発見は全く 予想外であった。

タモ牛’／　７　ｚ　７酸（Ｒ−１ＣＨ２０、Ｘ−水素、およびＹｌｌｃＨ２ｃ Ｈ３）、４−ＨＴＡ　（Ｒ：ＣＨ２０ＳＸＩＩｐ−ヒ）’　ｏキシル、およびＹ ＠ＣＨ２ＣＨ３）、およびタモキシフェンはそれぞれ、エストラジオール（親和 性材００）と比較して、０．０１．２１および１．８のエストロゲンレセプター アフ二二ティーを有している。タモキシフェン酸も４−ＨＴＡも、ＭＣＦ？ヒト 乳癌細胞の増殖を（抗エストロゲン化合物が阻害するように）阻害しないが、こ れらの化合物は両方とも、抗エストロゲン化合物であるＴＡＭの増殖阻害効果を 逆転する。非ステロイドエストロゲン様トリアリールエチレンカルボン酸は、骨 粗羨症、月経前症候群、閉経に関連する血管運動症候群、萎縮性膣炎、外陰萎縮 症、女性性機能低下、原発性卵巣機能低下、過剰な体毛増殖および前立腺癌を含 む、低レベルのエストロゲンに関連する症状を緩和するために、局所、皮下、静 脈または経口投与に適切な薬学キャリヤーと組み合わせて、遊離酸または薬学上 受容される塩として患者に投与される。

トリアリールエチレンカルボン酸は、エストロゲン欠乏症の薬学的治療に有利で ある。なぜなら、トリアリールエチレンカルボン酸は、身体からゆっくりと排出 され、高いエストロゲンレセプターアフィニティーを有するからである。さらに 、トリアリールエチレンカルボン酸は、子宮および卵巣にほんの最少量取り込ま れるのみである。これらの化合物の他の利点は、これらが非ステロイドエストロ ゲン代用物質として使用され得、長期にわたるステロイド療法に伴う望ましくな い副作用を回避することである。

Ｂの！　なり 以下の略語は、明細書全体に使用される：　ＴＡＭ、タモキシフェン、　（Ｚ） 　−２−［４−（１，２−ジフェニル−１−ブテニル）フェノキシ］−Ｎ、Ｎ− ジメチルエタンアミン（図１　’Ｉ　；　４−ＨＴ、　４−ヒドロキシタモキシ フェン；　ＴＡＭ　ビス−フェノール、１．１−ビス−（４−ヒドロキシフェニ ル）−２−フェニル−１−ブテン；　ＴＡ、タモキシフェン酸、　（Ｅ、Ｚ）　 −４−（１，２−ジフェニル−１−ブテニル）フェノキン酢酸；　ＴＡ−ｇｌｙ ＯＨ，（Ｚ）　−Ｎ−４−（１，２−ジフェニル−１−ブテニル）フェノキシア セチルグリシン；　４−１１ＴＡ、　４−ヒドロキシタモキシフェン酸、　（Ｅ 、Ｚ）　−２−（４−［１−（ｐ−ヒドロキシフェニル）−２−フェニル］−１ −ブテニル）フェノキシ酢酸、　ＥＩＭＳ、　を子ｆｆ１ｌｌイオン化質量分析 ；　ＮＭＲ１核磁気共鳴；　ＴＬＣ，薄層クロマトグラフィー；Ｒｆ、遅延因子 。

１、式Ｉの化合物の合成 タモキシフェン酸は、Ｊａｒｍａｎら、−Ｔｈｅ　ｔｌｓｅ　ｏｆ　０ｅｔａｆ ｌｕｏｒ。

ｔｏｌｕｅｎｅ　ａｎｄ　Ｐｅｎｔａｆｌｕｏｒｏｐｙｒｉｄｉｎｅ　ｉｎ　ｔ ｈｅ　５ｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｏｆ　ｐｕｒｅ　Ｚ−ａｎｄ　Ｅ−！ｓｏｍｅｒｓ 　ｏｆ　Ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ　ｏｆ　Ｔａｍｏｘｉｆｅｎｌｌ、２−ｄｉ　 ｐｈｅｎｙ　ｌ−１−［４−（２−ｄ　１ｇ１ｅｔｈｙｌ−ａｍ　１ｎｏｅｔ　 ｈｏｘｙ　）ｐｈ　ｅｎｙ　１　］ｂｕ　ｔ−１−ｅｎ■■ −Ｊ、　Ｃｈｅｗ、　Ｒｅ５ｅａｒｃｈ　Ｍ　、　１３３９−１３８５　（１９ ８５）の方法に従って合成され得る公知の化合物である。

他のトリアリールエチレンカルボン酸は、ＭｃＭｕｒｒｙ反応（ＣＯｅら、Ｊ、 ＣｈｅＩｌ、Ｓｏｃ、Ｐｅｒｋｉｎ　Ｉ　１９８６）、Ｂｒ１ｓｔｏｌ　Ｍｙｅ ｒｓ　Ｃｏｒｐｏｒａｔ　ｔｏｎにより提出されたヨーロッパ特許出願第０１２ １＋４２０号に記載の方法、またはＫａｔｚｚｅｎｅｌｌｅｎｂｏｇｅｎら、Ｊ 、　ｏｆ　Ｌａｂｅｌｅｄ　Ｃｏｗ＋　ｏｕｎｄｓ　ａ　ｄ　Ｒａｄｉｏ　ｈａ ｒｍａｃｅｕｔｉｃａ　ｓ、　Ｖｏｌ、Ｘ■（６）　１１８５　（１９８１）に より記載される反応法を用いて調製され得る。ＭｃＭｕｒｒｙ反応には、置換ベ ンゾフェノンと適切なフェニルアルキルケトンとの、低原子価チタン媒介交差カ ップリングが含まれる。

ＭｃＭｕｒｒｙ反応を用いた４−ヒドロキシタモキシフェン酸の調製は、実施例 １において提供される。Ｙがハロゲンであるトリアリールエチレンカルボン酸は 、適切なベンゾフェノンおよびベンズアルデヒドから調製され得、次いでその産 物は、乾燥クロロホルム中で、Ｎ−クロロまたはＮ−ブロモスクシンイミドを用 いて、４から５時間処理される。

トリアリールエチレンカルボン酸は、２またはＥ立体配置で存在し得る。Ｚ立体 配置では（Ｚは、ドイツ語のＺＬＩＳａｍｌｌｅｎ由来で、「共に」を意味する ）、［より高い優先順位の」基（ＩＵＰＡＣおよびＣａｈｎ−Ｉｎｇｏｌｄ−Ｐ ｒｅｌｏｇ系列規則によると）は、シスである。Ｅ立体配置では（Ｅは、ドイツ 語のｅｎｔｇｅｇｅｎ由来で、「反対」を意味する）、「より高い優先順位の」 基は、トランスである。これらの異性体を溶液中で容易に異性化することは公知 である。また、異性化は酸中で起こり得、その際、アルケニル炭素はプロトン化 され得、前記オレフィン結合周辺でねじれることも公知である。便宜上、式■は 、２立体配置のトリアリールエチレンカルボン酸を示す。しかし、本発明は、式 Ｉの化合物の２およびＥ異性体の両方を含んでいることが理解されなければなら ない。さらに、式Ｉの化合物の合成は立体選択的であり得るが、立体特異的でな いことも理解されなければならない。従って、両翼性体は、この反応法において 得られる。

実施例１　４−ＨＴＡの合成 以下の方法に従って、　（Ｅ、Ｚ）　−２−（４−［１−（＋１−ヒドロキシフ ェニル）−２−フェニルロー１−ブテニル）フェノキシ酢酸（４−ＨＴＡ）を合 成した。

二仕打王造　融点（＋ｅｐ）を、毛管融点装置を用いて測定し、補正しない。ｗ ４製したすべての化合物の元素分析値は、測定された理論値の±０．４％以内で あった。反応の進行および産物の純度を、０．２ｍ＋１のシリカゲルプラスチッ クで裏打ちした層を用いる分析用ＴＬＣによって確認し、２５４ｎｍの波長下で 観察した。

プロトンＮＭＲスペクトルを９ｏ■Ｈｚで得、ＥＩＭＳを直接イオンプローブを 用いて得た。４−（２−ブロモエトキシ）−４−ヒドロキシベンゾフェノンを、 ２−フェノキシエチルプロミドを４−ヒドロキシ安息香酸でアクリル化すること によって調製した：　ｍｐ　１３６−１３８℃。

４−２−ブロモエトキシ　−４−ヒドロキシベンゾフェノンプロビオフェノンと の　・　−１０℃に冷却し、乾燥窒素下に放置した乾燥テトラヒドロフラン２Ｓ ｍＬ中、２．３グラム（３６■ｇ−原子）の亜鉛の攪拌懸濁液に、３．４グラム （１１８ｍｍｏｌｓ）の四塩化チタンを０．２５時間かけて加えた。次いで、こ の混合物を還流下で２時間加熱し、室温に戻した。乾燥テトラヒドロフラン２５ を中１．９３グラム（６ｍｓ＋ｏｌｓ）の４−（２−ブロモエトキシ）−４−ヒ ドロキシベンゾフェノンおよび０．８１グラム（６ｍ＋５ｏｌｓ）のプロピオフ ェノンの溶液を滴下した。この混合物を攪拌し、４時間還流した。冷却した混合 物を水中１０％の炭酸カリウム３ｈＬに注いだ。混合物を、５０■Ｌずつのエー テルで２回に分けて抽出した。

混合したエーテル抽出物を乾燥しく硫酸ナトリウム）および真空下で濃縮し、３ ．３８グラムの粗度物を得た。これを１０■Ｌのクロロホルム−ベンゼン（１： １）に溶解し、ボイド容量を捨てた後、全体で５カラム容量（２５０■Ｌ）の上 記溶媒で、６ｏから２゜Ｏメノシニのシリカゲル１５グラムに通して溶出した。

溶出物を濃縮すると黄色の油となり、これを沸騰へキサン４０ｖＬで抽出した。

８°Ｃで保存すると、０．９４グラム（３８％）の淡黄色の結晶ができた。ヘキ サンから再結晶化すると、■ｐ１２３−１２７℃で、白色針状の純粋な（Ｅ、Ｚ ）　−２−（４−［１−（４−ヒドロキシフェニル）−２−フェニル］−１−ブ テニル）　フェノキシエチルプロミド：ＩＨＮＭＲ（アセトン−ｄ６）　ｄ　０ ．８９　（ｔ、３８．　ＣＨ３）、２．４７　（ｑ、２Ｈ，ＣＨ２Ｃ）Ｉｔ）、 ２．８２　（ｓ、　ＩＨ，ＯＨ）、３．６６および３．７７　（ｔ、　２１合計 、ＣＦ１２Ｂｒ）、４．２１および４．３８　（ｔ、　２Ｈ合計、Ｃ１（２０Ａ ｒ）、６．４２−７．２３　（ｍ、　１３８．　ａｒｏｍ、）が得られた。ピー クの強度比は、４．２１ｐｐｍ／４．３８ｐｐｍ　ＭＯ，２５：　３．６６ｐｐ ｍ７３．７７ｐｐｍＩＩ０．２３である。これに基づくと、産物は、２４％の２ 異性体と７６％のＥ異性体との混合物である。

４−ヒドロキシ　モキンフェン　への・　アセトン１．５ｓＬ中０．１１ｇ　（ ０，２６ｍｍｏｌ）　（’）　（Ｅ、Ｚ）　−２−ｆ４−　［１−（４−Ｌ：ド ロキ’／　７　ｚニル）−２−フェニル］−１−ブテニル）　フェノキシエチル プロミド、０．１３グラム（０，７１％ｍｍｏｌ）のブロモ酢酸エチル、および ０゜１１グラム（０，７８＋１ｓｏｌ）の炭酸カリウムの混合物を攪拌し、乾燥 剤の下で３時間再選流した。次いで、溶媒を真空中で蒸発させた。残留物を１ｓ Ｌのジオキサンに溶解し、０．５＋ｍＬの５％ＮａＯＨを加えた。１５分後、反 応混合物を蒸発させた。固体産物を５ｓＬずつのエーテルおよび１％の水性ＨＣ Ｉと共に攪拌した。水性相を５峠のエーテルでさらに２回抽出した。混合したエ ーテル抽出物を真空下で乾燥し、濃縮して、２０ｈｇのＮａＣＮを含むジメチル ホルムアミド（ＤＭＦ）　ＳｉＬに溶解した粘性油８１ａｇ　（６４％）を得た 。

混合物を室温で４５時間攪拌した。次いで、ＤＭＦを真空下で蒸発し、残留物を 、５■Ｌのエーテルおよび２ｓＬの５％水性重炭酸ナトリウムと共に攪拌した。

水性相をさらに３ｓＬのエーテルで洗浄し、１０％の水性硫酸で酸性にした。混 合物を３ｓＬの塩化メチレンで２回抽出した。有機抽出物を乾燥し、真空下で濃 縮して、約１ｗ１Ｌのアルコールを含まないクロロホルムに溶解した粘性油６８ １Ｉｇを得た。８℃で一夜保存すると、２７Ｂ　（４２％）の結晶の４−１１Ｔ Ａが得られ、これを６０℃／　０．０５ｗ＋ｍ　Ｒｇで一夜乾燥した：　ｍｐ　 ２１５−２１７°Ｃ（分解）；’ＨＮＭＲ（クロロホルム−ｄ）　ｄ　Ｑ、９０ 　（ｔ、　Ｊ＝　７　Ｈｚ、　３０．　ＣＨ３）、２．４５　（ｑ、　Ｊ　＝７ 　Ｈｚ、　２Ｈ，ＣＣＨ２）、４．５０および４．６６（ｓ、それぞれ０．８お よび１．２８ＳＯＣＨ２）、６．５０−７゜２５　（１，１３Ｈ，ＡｒＨ）　； 　ｔｌＭｓ　（７０ｅＶ）　Ｉ／Ｚ　（相対強度）　３７４　（１００、Ｍ＋） 　、　３５９　（２０，Ｍ　−Ｃ１１３）　、　３１５　（７，Ｍ　−ＣＨ２Ｃ ００Ｈ）。

＋＋、式■の化合物のエストロゲン活性式Ｉの非ステロイドトリアリールエチレ ンカルボン酸は、エストロゲン活性を有する。式１の化合物の１つである、４− ヒドロキシタモキシフェン酸は、強力なエストロゲン代用物質であることが発見 されている。この活性は、近縁な類似体であるタモキシフェン、その塩基性およ び中性代謝産物、ならびにクロミツエンで知られている抗エストロゲン活性を考 慮すると、驚くべきことである。

トリアリールエチレンカルボン酸は、未成熟の雌ラットでは代謝的不活性化に耐 性を示し、生殖組織には蓄積されなかった。インビトロにおける研究では、これ らの化合物がエストロゲンレセプターと相互作用し、４−ＨＴＡ、６（、エスト ラジオールに匹敵する活性を有しながらある程度相互作用することが示されてい る。

式１の化合物は、エストロゲンを用いて治療可能な、疾病の症候群および医学症 状を緩和するために使用され得る。このような症状としては、それに限定される ものではないが、骨粗症、月経前症候群、閉経に関連する血管運動症候群、萎縮 性膣炎、外陰萎縮症、女性性機能低下、原発性卵巣機能低下、過剰な体毛増殖、 および前立腺癌が含まれる。さらに、これらのエストロゲン様化合物は、他のホ ルモンと組み合わせると避妊薬として有用であり得る。請求項の化合物の利点は 、身体中の貯留時間が比較的長いため、活性な化合物をそれほど頻繁に投与しな （でもよく、また、費用および治療に伴う患者の不快感が減少されることである 。

実施例２　式Ｉの化合物のエストロゲンレセプターアフィニティーの決定 式Ｉのトリアリールエチレンのエストロゲンレセプターアフィニティーは、Ｒｕ ｅｎｉｔｚら、Ｊ、　Ｍｅｄ、ＣｈｅＩｌ、、２５：１０５６．　（１９ｇ２） の方法に従って測定され得る。

［３Ｈ］　エストラジオール（５８Ｃ４／ｍ＋＊ｏｌ）は、Ａｍｅｒｓｈａｗ＋ 　Ｃｏｒｐから得られ、その放射化学純度は、ＴＬＣによって確認され得る。Ｓ ｐｒａｇｕｅ−Ｄａｙ　ｌｅｙラット（２００−２５０ｇ）の子宮を、１．Ｓｉ ＋ＭのＥＤＴＡおよび３ｍＭのアジ化ナトリウムを含む水冷した１０ｄのトリス 緩衝液（ＴＥＡ緩衝液）中でホモジェナイズ（２ｓＬ当り１個の子宮）する。ホ モジエ不一トを１０００００ｇで、４°Ｃ１１時間遠心分離する。インキュベー ション混合物は、２００−μＬの上清、ジメチルアセトアミド中１．１　ｘ　１ ０−７Ｍの［３Ｈ］エストラジオール溶液１０μＬ、およびジメチルアセトアミ ド中１０μＬの未標職競合体を含んでいなければならない。競合体の１０個の濃 縮物は、１ｘ　１０−９から５　ｘ　１０−５Ｍの範囲で使用する。対照のイン キュベーションは、１０μＬの溶媒のみを含んでいなければならない。非特異的 結合は、１　ｘ　１０−５Ｍのエストラジオールを含む、同様に調製したインキ ュベーションで決定する。インキュベーションは、５−ｍＬのポリプロピレン遠 心分離管で、２−４℃、４時間で３回行われなければならない。次いで、４００ μＬのデキストランでコートした木炭の懸濁液［０，１％のデキストラン（Ｓ　 ｉｇ＋５ａｎｏ、　Ｄ−１３９０）　、ＴＥＡ緩衝液中の１％の酸で洗浄したＮ ｏｒｉｔ　Ａ］を加え、インキュベージコンを２−４°Ｃで１５分間続けた。次 いで、管を１０００ｇで１０分間遠心し、４００−μＬ分を５ｓＬの５ｃｉｎｔ ｉｖｅｎｓｅ　（Ｆｉｓｈｅｒ）に溶解し、結合した［３Ｈ］エストラジオール を液体シンチレーシ１ンスペクトロメトリーで決定する。外部標準法によって、 クエンチ補正を行う。

実施例３４−ヒドロキシタモキシフェン酸のエストロゲンレセプターアフィニテ ィーの決定 ４−ヒドロキシタモキンフェン酸のエストロゲンレセプターアフィニティーを、 実施例２に記載のアッセイに従って測定した。図２は、４−ＨＴＡ　（−ロー） 、エストラジオール（−０−）、およびＴＡ　（−◇−）の濃ｉ（ｎＭ）を増加 させたときの、未成熟ラットの子宮細胞質ゾルにおける［　３Ｈ］エストラジオ ールの結合に対する効果を示すグラフである。［’Ｈ］エストラジオールからの 特異的に結合した３■は、４−ＨＴＡ、エストラジオール４ゴーは穐が存在しな いときの対照イン本ユベーシ讐ンで結合Ｉ、たもののパーセントとしてプロット しである。４−ＨＴＡの非ヒドロキシル化類似体である、エストラジオールおよ びクモ本ジフェンを基準として使用した。このデータは、４−ＦＩＴＡが、エス トラジオ・−ルの２１％のエストロゲンレセブターアフェニティーを有すること を示している。従って、４−ＨＴＡは、エストロゲンレセプターの優れたリガン ドであり、この発見は、４−ＨＴＡのヒドロキシル基の、アフェニティーに対す る貢献度を示している。タモキシフェン酸もまた、エストロゲンレセプターに結 合する。

実施例４　ＭＣＦ？乳癌細胞の増殖に対する式１の化合物の効果乳癌細胞が増殖 するためには、エストロゲンまたはエストロゲン代用物質を必要とする。抗エス トロゲンは、乳癌細胞の増殖を阻害する。式１の非ステロイドトリアリールエチ レン化合物の抗エストロゲン効果は、４−ヒドロキシタモキシフェン酸に関して 以下に記載の方法に従って、これらの化合物の存在下および非存在下で、ＭＣＦ ？乳癌細胞の増殖を比較することによって測定する。

図３に示すように、４−ＨＴＡは、エストロゲンの存在下で増殖したＭＣＦ７ヒ ト乳癌細胞の増殖には影響しなかった。指数関数的増殖期の細胞（１ｘ　１０５ ）を、１０％の胎児ウシ血清および他の添加物を補充したＲＰＭＩ　１６４０培 地５ｍＬを含む２５ｃｍ”の組織培養フラスコにプレートした。細胞数がフラス コ当り２−２．５　ｘ　１０５個に達するとく約７２時間後）、培養培地を交換 （２、種々の濃度の薬物を５ｕＬずつのＤＭＳＯの溶液としで加えた。細胞数は ５日後、薬物を含まない対照中で約４集団が倍加した後に決定した。

示されるデータは、対照フラスコの細胞数のパーセントとして表現され、２個の 異なる実験からの６つの推定値の平均である。公知の抗エストロゲンであるＴＡ Ｍは、細胞増殖の強力な阻害剤であった。対照的に、４−ＨＴＡは、抗エストロ ゲン活性を有さない。

実施例５４−ヒドロキシタモキシフェン酸にょるＴＡＭの抗エストロゲン活性の 逆転 図４に示されるように、１ＨＭのタモキシフェンによるＭＣＦ７乳癌細胞に対す る阻害効果は、４−ＨＴＡによって投与量依存的に逆転し、またＴＡによっても ４−ＨＴＡよりは狭い範囲で逆転された。

ＴＡまたは４−１１ＴＡの濃度を増加させながら、タモキシフェンをＤＭＳＯ（ ５＊Ｌ）中の溶液としてフラスコに加えると、実施例４に要約されているように 細胞は増殖した。た。図４に示されるデータは、薬物を含まないフラスコにおけ る細胞数のパーセントとして表現され、２個の異なる実験からの６つの推定値の 平均である。これらの発見は、４−ヒドロキシタモキシフェン酸カ抗エストロゲ ン活性を有さず、その代わりに、ＴＡＭの抗エストロゲン効果を実質的に逆転さ せ得ることを示している。

このア・７セイはまた、式夏の他の化合物がＴＡＭの抗エストロゲン効果を逆転 させる能力を測定するためにも使用され得る。

実施例６　エストロゲン依存性細胞増殖の刺激式１のトリアリールエチレンカル ボン酸が、エストロゲンを含まない培地中でＭＣＦ７細胞増殖を刺激する能力を 、比較のための基準としてエストラジオールを用いて示す。細胞を実施例２に記 載されるように馴化し、続いてエストロゲン刺激を除去し、木炭を取り除いた胎 児ウシ血清を用いて調製したフェノールレッドを含まない培地と共にインキユベ ートした。

５日後、培地を交換し、４−）！ＴＡまたはエストラジオールを実施例２に記載 のように加えた。９日後、細胞数を決定した。

図５に示されるように、４−）ＩＴＡによる増殖の投与量依存性刺激は、ミクロ モル以下の濃度で見い出された。示されるデータは、薬物を含まないフラスコ中 の細胞数のパーセントとして表現される。各点は、３−６測定値の平均である。

エストラジオールはど強力ではなかったが、４−ＨＴＡで刺激された増殖は、エ ストラジオールと同レベルであり、このレベルは、４−ＨＴＡＩ度がさらに増加 しても減少しなかった。これらの発見は、４−ＨＴＡが、残留エストロゲン拮抗 活性を有さない、純粋なエストロゲンであることを示している。

ＩＩ＋　インビボでのタモキノフェンのＴＡおよび４−ＨＴＡへの変換庄粁友孟 μ方ユニ Ｅ、Ｚ−［”Ｃ］　ＴＡＭ　（特異的活性：　２１．６ｍＣ１／ｍｍｏｌ）を、 Ａｍｅｒｓｈａｍ　Ｃｏｒｐ、、　ＡｒｌｉＡｒｌｌｎ　Ｈｅｉｇｈｔｓ、　Ｉ Ｌ、から得た。放射性標識は側鎖を宵するフェニル環と対になったフェニル環中 に均一に分配した。展開溶媒としてベンゼン／トリエチルアミン（９０：１０． 　ｖ／ｖ）、および外部標準として未標識の２−およびＥ、Ｚ−ＴＡＭを用いる 予備的ＴＬＣ（２０Ｋ　２０ｃｍシリカゲルＧＦ２５Ｊ、厚さ１■層−Ａｎａｌ ｔｅｃｈ、　Ｎｅｖａｒｋ、　ＤＥ）は純粋なＺ異性体を示した。４−ＨＴは、 ＩＣＩ　Ｐｈａｒｍａｅｅｕｔｉｅａｌｓ、Ｍａｃｃｌｅｓｆｉｅｌｄ、Ｅｎｇ ｌａｎｄのＤｒ、Ａ。

Ｈ，Ｔｏｄｄから得た。ＴＡＭビス−フェノールおよびＴＡを、従来技術で公知 の方法に従ってｍ製した。４−ＨＴＡを、上記実施例１に記載の方法に従って調 製した。

４−ＨＴＡは、溶媒１−３（下記）を用いたＴＬＣによって単一なスポットとし て現れ、以下のスペクトル特性を有していた：’ＩＮＭＲ（ＣＤＣｈ）　０．９ ０　（ｔ、　Ｊ　＝　７Ｈｚ、　３８．　ＣＨ２ＣＨ３）、２．４５　（ｄ、　 ＪニアＨｚ、　２Ｈ，ＣＨ２ＣＨ３）　、４．５０および４．６６（ｓ、各ＩＨ ９ＯＣＨ２Ｃ：０）、６．５０−７．２５　（ｍ、　１３　Ｈ，ＡｒＨ）　；　 ＥＩＭＳ　（直接イオンプローブ、７０ｅＶ）　ｍ／ｚ　３７４　（１００，Ｍ ＋）、３５９　（２０，Ｍ　−Ｍｅ）、３１５　（７，Ｍ−ＣＨ２Ｃ００Ｈ）。

従来技術で公知の方法に従い、カルボニルジイミダゾールを用いて、ＴＡとグリ シンエチルエステルとをカップリングし、次いで、得られたアミドエステルをけ ん化することによってＴＡ　ｇｌｙＯＨを得た。この産物は、０．３４のＴＬＣ Ｒ１（溶媒２）　：　’ＨＮＭＲ（ＣＤ３０Ｄ）　４．１６　（Ｓ、　２８．　 Ｎ−ＣＨ２ＣＨ３）を有していた。

クロマトグラフィー　０．２１１＋１のシリカゲルＧＦ２５４　（Ｕｎｉｖｅｒ ｓａＩ　５ｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、　Ａｔ１ａｎｔａ、　ＧＡ）でコートしたプラ スチ、り裏打ちシート（５ｘ　２０ｃｍ）を用いて、ＴＬＣを行った。プレート を、組成：　（９０：１０：０．０．溶媒１；　９０：１０：０．５．溶媒２． ７５：２５：０．５゜溶媒３）のクロロホルム／メタノール／酢酸混合物（ｖ／ ｖ）　’Ｅ：用いて展開した。

ＩＪｓ話授与　各４５−５５グラムの雌Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｖｌｅｙラットを 、通常の実験室用餌で維持し、実験ごとに４から６匹のグループに分けた。各動 物には、２１１ｍｇ　（７５ｎｍｏｌｓ、　１．６２ｍＣ１）の［′’Ｃ］　Ｔ ＡＭを、０．２ｍｌの容量で腹膜内に投与した。この溶液は、Ｎ、Ｎ−ジメチル アセトアミド中１％のクエン酸１０ｍ１に薬物を溶解し、その溶液を０．２ｍｌ の１．１５％の水性ＫＣＩで使用直前に希釈することによりｗ４製した。動物を 、尿と糞とが別々に回収できるようにしたポリカーボネート製代謝檻に入れた。

ｍ・のプロセッシング　投与の２４および４８時間後に、動物を所領によって殺 した。子宮および肝臓を取り出し、その重さを記録した。プールした尿および肝 を１０容量のメタノールでホモジェナイズした。各ホモジェネートを４００　Ｋ 　ｇで１０分間遠心分離した。３組の１．Ｏｍｌずつの上清を８ｍｌのＥｃｏｓ ｃｉｎｔ　（Ｎａｔｉｏｎａｌ　Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ、　Ｓｏｓ＋ｅｒｖｉ ｌｌｅ、　ＮＪ）で放射活性を測定した。回収した尿を凍結乾燥した。残留物を メタノール中で音波処理し、混合物を濾過し、固体残留物をメタノールで洗浄し 、最終容量を最初の尿の容量と等しくした。この手法により、放射活性を失わず に内因性極性物質が除去された。

投与の２４および４８時間後に回収した糞を、１０容量のメタノールでホモジェ ナイズした。ホモジェネートを遠心分離し、上記のように放射活性を分析した。

１匹夫皿−未標識のＴＡおよび４−ＨＴＡ　（各１０１０−２Ｏを、組織、尿お よび糞のメタノール抽出物に、基準として加えた。

３番目の基準である、ＴＡ　ｇｌｙｏｕは尿抽出物にのみ加えた。次いで、各溶 液をＮ２を流して濃縮した。各残留物に０．５鳳りの１％水性Ｎａ０Ｆｌを加え た。得られた混合物（ｐＨ≧１１）を、１．０１ずつのエーテルを用いて連続し て２回抽出した。これらの抽出物に存在する放射活性を測定した。水性相に０． １ｍｌの１０％ＨＣＩを加え、混合物＜ｐＦＩ≦１）を同様に抽出した。これら の抽出物のいくつかにおいて放射活性を測定した。あるいは、これらをＮ２を流 して濃縮した。各残留物を５０■１のアセトン中に溶解し、この溶液をＴＬＣプ レートに入れた。展開プレートを、ガイダンスのために波長２５４ｎｍのＵＶ先 の下で、標準化合物の位置を利用してセグメントした。標準化合物を含むセグメ ント、場合によりてはＴＬＣプレートからのすべてのセグメントについて、放射 活性を測定した。

展開したクロマトグラムから溶出したＴＡおよび４−ＨＴＡの特異的活性を、こ れらの代謝産物を含むセグメントをメタノール中２．８％のアンモニア溶液に１ ２時間浸すことによって決定した。

溶出物の各々の放射活性を決定し、ＴＡおよび４−ＨＴＡの量を、各化合物のｅ ２ｓ３＝１．２　Ｘ　１Ｇ’Ｍ−’ｃｍ−’を用いて、２８３ｒｖ＋で、溶液の 吸光度から推定した。その後の溶出物のブｑモノシングは、従来の技術分野に公 知の方法に従って行った。

！　の口　に・　る　４　の　約３００．０００ｄｐＩｍを含むメタノール尿抽 出物を濃縮した。残留物を１．２ｍｌの０１Ｍリン酸緩衝液、ｐＨ７，４に溶解 し、溶液を３つに等分した。これらの最初の溶液には、１００ユニツトのβグル クロニダーゼを加え、２番目の溶液には、２０ユニツトのβグルコシダーゼおよ び１２ユニツトのアリールスルファターゼを加えた。これらの酵素は、Ｓｉｇｍ ａ　Ｃｈｅｍｉｅａｌ　Ｃｏ、、　Ｓｔ、Ｌｏｕｉｓ、　ＭＯから得た。３番目 の溶液には酵素は加えなかった。２５℃で１８時間後、これらの３つのそれぞれ を抽出し、上記のように分析した。

Ｗ［有］１１１は呵句ｊＪ−月玉９ｊａソームのグルクロン合　洗浄剤で活性化 されたミクロソームにおけるＵＤＰグルクロニルトランスフェラーゼを酵素結合 アッセイを用いて検定した。このような酵素結合アッセイは、当該技術分野にお いて公知である。基質を１（１ｍｌのＮ、Ｎ−ジメチルアセトアミドの溶液とし て、インキュベーション混合物に加えた。各インキュベ−７−ｒン（１，０ｍ１ ）は、ＵＤＰグルクロン酸（１，５ｍＭ）、基質（１０，２０，５０または１０ ０ｍＭ）、およびトリトンＸ−１００（８０ｗ＋ｇ）を含んでいた。インキュベ ーションは、０．２５ｍｇのタンパク質（タンパク質は、当該技術分野に公知の 標準方法で決定した）を含むミクロソームを加えることにより開始し、窒素下で ３７℃、３０分間行った。

う、トにお（る　ＴＡＭｌ　の６ ラノトを、上記のように放射ＩｎしたＴＡＭで処理し、その尿を回収した。図６ は、ＩＴタモキンフェンをラットに投与したときの、酸性放射活性（Ｒｒ対ＤＰ Ｍ　Ｘｌ０−３）の放射クロマトグラフィー分析である。矢印は、クロマトグラ ムにおける、Ｉ準化合Ｌ　４−ＨＴＡ　＜４−ヒドロキシタモキシフェン酸）、 ＴＡｇｌｙＯＨ（（Ｚ）　−Ｎ−４−（１，２−ジフェニル−１−ブテニル）フ ェノキシアセチルグリシン）、およびＴＡ（タモキシフェン酸）の位置を示す。

この放射活性は、３回の連続したＴＬＣ精製後、ＴＡおよび４−ＨＴＡ画分にお いて保持され（表１）、このことは、放射活性が、これらの化合物に組み込まれ たことを示し、ＴＡおよび４−ＨＴＡがＴＡＭ代謝の最終産物であることを証明 した。

表１＝　反復ＴＬＣ分析後の尿４−１１ＴＡおよびＴＡの特異的活性化合物　Ｔ ＬＣ溶媒　Ｒｒ　特異的活性ｎｃｉ／ｗ＋ｍｏ１ １　０．３９　８．２ ＴＡ　２　０．４２　１１．１ ３　０．３３　８．３ １　０．２５　５．３ ４−ＨＴＡ　２　０．３１　５．０ ３　０．２２　５．１ ＴＡＭ　の　゛　の　づ１ ［１′Ｃ］　ＴＡＭの投与の２４時間後、尿中では、かなりの量のＴＡＭ関連酸 性放射活性が失われたが、子宮組繊では、はんのわずかなレベルの酸性放射活性 しか検出されなかった（表２）。

これはまた、投与の８および１６時間後も同様であった。中レベルのＴＡおよび ４−１１ＴＡは肝で見い出され、より高いレベルは、糞の抽出物において見い出 された。これらの結果は、ＴＡＭが酸性代謝産物、すなわちＴＡおよび４−ＨＴ Ａとして尿中に、かなりの程度まで失われたことを示している。このことは、Ｒ ｕｅｎｉｔｚら、−Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ　Ｆａｔｅｓ　ｏｆ　Ｃ１ｏｉ＋１ ｐｈｅｎｅ　ａｎｄ　Ｔａｍｏｘｉｆｅｎ　ｉｎ　ｔｈｅＩｍｍａｔｕｒｅ　Ｆ ｅｍａｌｅ　Ｒａｔ、−Ｄ　ｕ　Ｍｅｔａｂ、Ｄ　ｓ　ｓ、１３：５８２−５８ ６　（１９８５）によって報告されているように、同様の実験条件下でのこれら の組織において見い出された、他の非酸性ＴＡＭ代謝産物とは対照的である。

表２：　［”Ｃ］　ＴＡＭ”の腹膜的投与後のＴＡおよび４−ＨＴＡの分布およ び排出 試料　投与後の時間　総１′Ｃ投与の　存在形態＝（時）　パーセント　ＴＡ　 ４−ＨＴＡ糞　０−２４　３０．４９　０．５０　２．４０糞　２４−４８　１ ６．０５　０．４６　１．４３尿　０−２４　８．７０　１，０２　１．８１肝 　２４　２０．２５　０，０６　０．４１肝　４８　２．８４　ｂ 子宮　２４　０．１２　ｂ ８値は、各部分からの測定値の±５％である。

５クロマトグラフイー前の抽出物に存在する放射活性は、バックグランドと異な らなかった。

カルボン酸を、しばしば、アミノ酸および／または炭水化物抱合を介して、さら に代謝改変する。ラットにおいては、この抱合は、グリシン、および時にはタウ リンおよびグルクロン酸を含み得る。これらの抱合体を開裂する、βグルクロニ ダーゼまたはβグルコシダーゼ／アリールスルファラーゼを用いて尿の抽出物を 処理した結果、エーテルで抽出可能な酸性放射活性の量に変化はなかった。これ に対して、塩基性／中性画分における放射活性の量は、最初の脱抱合酵素によっ て５５％増加した。これらの結果は、ＴＡＭ代謝産物とＵＤＰグルクロニルトラ ンスフェラーゼとの相互作用に関するインヒドロでの研究と一致した（表３）。

従って、ＴＡＭビス−フェノールおよび４−１１７は、これらの酵素の基質であ るが、４−ＨＴＡは、これらの条件下では、基質ではなかった。このことは、Ｔ Ａも４−１１７Ａもこれらの抱合体として、尿中に排出されないことを示してい る。これに対して、４−１１ＴＡのメチルエステルは、この酵素の優れた基質で あった。このことは、４−ＨＴＡの強力な酸性、または重要な基質の特性である 不十分な脂質溶解性が、酵素との相互作用を不要にし得ることを示している。

（以下余白） 表３：選択された化合物によるラット肝ミクロソームのグルクロン酸抱合 基＠　Ｋ、　ＩＭ　ＶＩＩａｘ、　ｎｏ＋ｏｌｓ／ｓｇ−分４−ＨＴ　８３　７ ．４ ４−ＨＴＡ　Ｏ，Ｏ” メチル４−）ＩＴＡ　７３　１６．５ ＴＡＭビスーフェノール　５４　１４．７ＴＡ　Ｏ，０” ｐ−ブロモフェノール　３１２　１５．６各結果は、２から３個の実験の平均値 である。

’　１００ｍＭの基質濃度では、活性は観察されなかった。

これらの発見はともに、成熟した雌う・７トでは、４−ＦＩＴＡが変化せずに尿 中に排出されることを示している。これは、ヒドロキシル基換基を有するエスト ラジオールまたは他のエストロゲン類と対照的なことで、このヒドロキシル基の 存在により、これらの強力なエストロゲン類は代謝抱合を介して迅速に排出され る。これらの発見はさらに、ＴＡＭ酸類似体が身体中に比較的長時間保持される ことを示しており、この構造型の長時間にわたる作用の可能性を示唆している。

また、エストラジオールと全く対照的に、４−ＲＴＡは、この動物種では、子宮 または卵巣組織で検出されなかった。従って、この構造型のエストロゲン効果は 、これらの器官に見い出された以外のエストロゲンレセプターとの相互作用によ るものである。

（以下余白） ＋Ｖ、薬学組成物 式ｌの非ステロイドエストロゲン様トリアリ−ｌレエチレンカルボン酸は、局所 、皮下、静脈、経口、腹腔内、また（±埋め込み可能な長期放出装置を介して投 与され得る。この活性化合物は、遊離酸、あるいはナトリム塩、カリウム塩また ζ±トロメタミン塩を含む薬学上受容される塩として投与され得る。

この化合物は、受容される薬学キャリヤーまたＩｔ希釈物と組み合わせ得る。薬 学上受容されるキャリヤーおよびこのようなキャリヤーを化合物と組み合わせる 方法１ま公知で、当業者に自明である。活性化合物は、ゼラチンカプセル内（こ 封入されるか、錠剤中に圧縮されるか、溶液中に懸濁もしく　１１溶解されるか 、放出制御装置に組み込まれるか、また（ヨ１ノボ゛ノームに封入され得る。経 口治療投与の目的では、活性化合物（よ、賦形剤および薬学上適合する結合剤と 組み合わせられ、および／またはアジュバント物質が、組成物の一部として含ま れ得る。

錠剤、ビル、カプセル、トローチ等は、以下の任意の成分、または同様の特性を 有する化合物を含み得る：微結晶性セル−ロースのような結合剤；　トラガカン トゴムまた１よゼラチン；デンプンまたはラクトースのような賦形剤；アルギン 酸、プリオムゲル（Ｐｒｉｏ膳ｇｅｌ）　、またはコーンスターチのような分解 剤；ステアリン酸マグネシウムまたはステローテス（Ｓｔａｒｏｔｅｓ）のよう な潤滑剤；コロイド状の二酸化ケイ素のようなすべり剤；ショ糖またはす・ツカ リンのような甘味剤；また（！ペハーミント、サリチル酸メチル、もしくはオレ ンジ風味のような風味剤。

投与単位形態が、カプセル、シロップ、エリキシル剤、または懸濁液である場合 には、この形態は、上記のタイプの物質に加えて、脂肪油のような液体キャリヤ ーを含み得る。投与単位形態が懸濁液、溶液、または局所用組成物である場合に は、この形態は、水、生理食塩水、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロ ピレングリコール、および／またはリン酸塩、酢酸塩、およびクエン酸塩などの 様々な緩衝液のような無菌希釈液を含み得る。これらの化合物は、薬学クリーム または軟膏と組み合わせられ得る。静脈内投与される場合には、好ましいキャリ ヤーは、生理食塩水またはリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）である。

活性化合物はまた、放出制御組成物にも組み込まれ得る。

ポリ無水物、エチレン酢酸ビニル、ポリグリコール酸のような生体内分解性で生 体適合性ポリマーは、身体中での活性成分の放出速度を制御するために使用され 得る。

トリアリールエチレンカルボン酸は、リポソームに封入され得る。リポソームは 、例えば、米国特許第４．５２２．１１１１号（その全体は、本願に参考のため に援用している）に記載のように、当業者に公知の方法に従って調製され得る。

活性化合物は、抗生物質、抗真菌剤、抗ウィルス剤、および抗炎症剤を含む、活 性化合物のエストロゲン活性を損なわない他の活性物質とさらに混合され得る。

トリアリールエチレンカルボン酸は、エストロゲンで治療可能な医学症状を緩和 させるために任意の有効量で投与される。好ましくは、化合物は、１日当り１０ １ｇから１０００■ｇの範囲で投与され、さらに好ましくは、１日当り２０１ｇ と４０ｍｇとの間、または１日当り体重１ｋｇ当り０４１５１ｇから１５■ｇ、 および好ましくは、１日当り体重１ｋｇ当り０．２９ｇｍと０．５８ｍｇとの間 で投与される。投与の有効な用量および形態は、治療される患者、治療される症 状、および治療される症状の重篤度によって異なる。特定の医学治療を必要とし ている特定の患者に適切な投与の有効な用量および形態は、当業者により確定さ れ得る。

本発明のエストロゲン活性を有するタモ牛ジフェン酸類似体、その合成方法およ び使用に関する変更および改変は、本発明の上記の詳細な説明から当業者に自明 である。このような変更および改変は、添付の請求の範囲の範囲内にある。

７Ｌ↑ジアジン峠　ＣＨ２Ｃ０２Ｈ’ ４−七ドｏ９”ｚ　７？−Ｔ’ｚ７シン＃！　ＣＨ２Ｃ０２Ｈ０Ｈ７８↑Ｓ／７ ．γ　ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３１２Ｈ今一２１．。〒７９５枠−７，７ＣＨ２Ｃ Ｐ、２Ｎ（ＣＨ３）２　０！（ＦＩＧＵＲＥ　１ ；Ｉ　＾　（ｎＭ） ÷４−ＨＴ＾　÷　工みト→シ゛７−１し　÷　ＴＡＦＩαπＥ２ ｎｚコε　３ ０．０１　０．１　１　１０ ［奮−酎１ ＋　［４−）４ＴＡ］　÷（ＴＡＭ−峠１三二口ミ４ Ｆ：；５ミ５ ＦＩαコミ６ 補正書の写しく翻訳文）提出書（特許法第１８４条の８）

Claims (29)

【特許請求の範囲】
1. １．以下の構造を有するトリアリールエチレンカルボン酸であって、 ▲数式、化学式、表等があります▼ ここで、Ｒが（ＣＨ２）ｍ０または（ＣＨ２）ｎ、ｍが１，２，３または４、お よびｎが０，１，２，３または４であり；Ｘが水素またはヒドロキシル、Ｙがメ チル、エチル、塩素、または臭素であり；ここで、ＲＣＯＯＨ部分およびＸ部分 がフェニルエチレン結合に対してメタまたはパラであり、ならびにＸが水素およ びＲがＣＨ２ＯであるときＹがエチルでない、トリアリールエチレンカルボン酸 。
2. ２．前記Ｙがエチルおよびクロロからなる群から選択される、請求項１に記載の 化合物。
3. ３．前記Ｘがヒドロキシルである、請求項１に記載の化合物。
4. ４．前記ＲがＣＨ２Ｏである、請求項１に記載の化合物。
5. ５．Ｚ立体配置にある、請求項１に記載の化合物。
6. ６．Ｚ異性体およびＥ異性体の混合物である、請求項１に記載の化合物。
7. ７．Ｅ立体配置にある、請求項１に記載の化合物。
8. ８．前記Ｘがパラ位にある、請求項１に記載の化合物。
9. ９．４−ヒドロキシタモキシフェン酸およびタモキシフェン酸からなる群から選 択される、請求項１に記載の化合物。
10. １０．３−ＨＴＡ、４−［１−（ｐ−ヒドロキシフェニル）−２−フエニル−１ −プテニル］安息香酸、および４−［１−（ｐ−ヒドロキシフェニル）−２−フ ェニル−１−プテニル］フェニル酢酸からなる群から選択される、請求項１に記 載の化合物。
11. １１．以下の式の有効な量のトリアリールエチレンカルボン酸を含む薬学組成物 であって、 ▲数式、化学式、表等があります▼ ここで、Ｒが（ＣＨ２）ｍ０または（ＣＨ２）ｎ、ｍが１，２，３または４、お よびｎが０，１，２，３または４であり；Ｘが水素またはヒドロキシル、Ｙがメ チル、エチル、塩素、または臭素であり；ここで、ＲＣＯＯＨ部分およびＸ部分 がフェニルエチレン結合に対してメタまたはパラであり、ならびにＸが水素およ びＲがＣＨ２ＯであるときＹがエチルでない、トリアリールエチレンカルボン酸 、あるいは薬学上受容可能なキャリヤー中に薬学上受容されるその塩を含む、薬 学組成物。
12. １２．局所用キャリヤー、皮下注射可能なキャリヤー、静脈注射可能なキャリヤ ー、経口摂取可能なキャリヤー、および埋め込み可能な長期放出用の生体適合性 および生体内分解性キャリヤーからなる群から選択される薬学上受容されるキャ リヤーを含む、請求項１１に記載の薬学組成物。
13. １３．約１０ｍｇと１０００ｍｇとの間の前記トリアリールエチレンカルボン酸 を含む、請求項１１に記載の薬学組成物。
14. １４．約２０ｍｇと４０ｍｇとの間の前記トリアリールエチレンカルボン酸を含 む、請求項１１に記載の薬学組成物。
15. １５．エストロゲンで治療可能な症状を緩和する方法であって、以下の構造を有 する有効な量の化合物を哺乳類患者に投与する工程を包含し、 ▲数式、化学式、表等があります▼ ここで、Ｒが（ＣＨ２）ｍＯまたは（ＣＨ２）ｎ、ｍが１，２，３または４、お よびｎが０，１，２，３または４であり；Ｘが水素またはヒドロキシル、Ｙがメ チル、エチル、塩素、または臭素であり；ここで、ＲＣＯＯＨ部分およびＸ部分 がフェニルエチレン結合に対してメタもしくはパラである、化合物、あるいは薬 学上受容されるキャリヤー中に薬学上受容されるその塩である、方法。
16. １６．前記Ｙがエチルおよびクロロからなる群から選択される、請求項１５に記 載の方法。
17. １７．前記Ｘがヒドロキシルである、請求項１５に記載の方法。
18. １８．前記ＲがＣＨ２Ｏである、請求項１５に記載の方法。
19. １９．前記トリアリールエチレンカルボン酸がＺ立体配置にある、請求項１５に 記載の方法。
20. ２０．前記トリアリールエチレンカルボン酸がＺ異性体およびＥ異性体の混合物 である、請求項１５に記載の方法。
21. ２１．前記トリアリールエチレンカルボン酸がＥ立体配置にある、請求項１５に 記載の方法。
22. ２２．前記Ｘがパラ位にある、請求項１５に記載の方法。
23. ２３．前記トリアリールエチレンカルボン酸が、４−ヒドロキシタモキシフェン 酸およびタモキシフェン酸からなる群から選択される、請求項１５に記載の方法 。
24. ２４．前記トリアリールエチレンカルボン酸が、３−ＨＴＡ、４−［１−（ｐ− ヒドロキシフェニル）−２−フェニル−１−プテニル］安息香酸、および４−［ １−ｐ−ヒドロキシフェニル］−２−フェニル−１−プテニル］フェニル酢酸か らなる群から選択される、請求項１５に記載の方法。
25. ２５．前記薬学上受容されるキャリヤーが、局所用キャリヤー、皮下注射可能な キャリヤー、静脈注射可能なキャリヤー、経口摂取可能なキャリヤー、および埋 め込み可能な長期放出用の生体適合性および生体内分解性キャリヤーからなる群 から選択される、請求項１５に記載の方法。
26. ２６．前記トリアリールエチレンカルボン酸の投与量が、１日当り１０ｍｇから １０００ｍｇの範囲である、請求項１５に記載の方法。
27. ２７．前記トリアリールエチレンカルボン酸の投与量が、１日当り２０ｍｇから ４０ｍｇの範囲である、請求項１５に記載の方法。
28. ２８．前記トリアリールエチレンカルボン酸の投与量が、１日当り体重１ｋｇに つき０．１５ｍｇから１５ｍｇの範囲である、請求項１５に記載の方法。
29. ２９．前記トリアリールエチレンカルボン酸の投与量が、１日当り体重１ｋｇに っき０．２９ｍｇから０．５８ｍｇの範囲である、請求項１５に記載の方法。