JPH06341992A - 非洗浄型ディップスティック免疫学的検査装置の改良 - Google Patents

非洗浄型ディップスティック免疫学的検査装置の改良

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JPH06341992A
JPH06341992A JP2412007A JP41200790A JPH06341992A JP H06341992 A JPH06341992 A JP H06341992A JP 2412007 A JP2412007 A JP 2412007A JP 41200790 A JP41200790 A JP 41200790A JP H06341992 A JPH06341992 A JP H06341992A
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zone
immunological
enzyme
test apparatus
substrate
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JP2412007A
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Jemo Kang
ジェモ・カン
John A Colanduoni
ジョン・エイ・コランドゥオーニ
Dong Joon Lee
ドン・ジュン・リー
Byungwoo Youn
ビョンウ・ユン
Chiyoung Ok
チャン・オク
Walter J Kang
ウォーター・ジェイ・カン
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MIYUUON CO Ltd
MYUON CO Ltd
Princeton Biomeditech Corp
Original Assignee
MIYUUON CO Ltd
MYUON CO Ltd
Princeton Biomeditech Corp
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Publication date
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Abstract

(57)【要約】 （修正有） 【目的】 生物学的液体試料中の分析物を検出するため
の試験ゾーンにおける記号および酵素標識抗体の使用を
伴う免疫学的デップステック装置を提供する。 【構成】 基板部材１２と、該基板部材上に画定された
試験ゾーン１０と、表示形成形状１４，１６で該ゾーン
に配置された少なくとも１つの固定された免疫学的成分
とからなり、該免疫学的成分が標的分析物を介して酵素
標識抗体と結合して該ゾーン上でサンドイッチ複合体を
形成するためのものであり、該複合体が酵素の基質との
接触によって該形状と試験ゾーンとの間で肉眼で認識す
ることができる差異を生じ、該ゾーンの全体にわたって
分布された該酵素に対する抑制薬を有することを特徴と
する。

Description

【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、免疫学的検査装置およ
び該免疫学的検査装置を含むキットに関する。
【０００２】
【従来の技術および発明が解決しようとする課題】免疫
化学の使用によって生物学的液体試料中の分析物の存在
を検出する種々の方法が開示されている。いわゆる“サ
ンドイッチ”法では、例えば、抗原のような標的分析物
を、標識抗体(labeled antibody)と固体支持体上に固定
された抗体との間に“挟む"。この検査法は、固定化抗
体に結合した抗原−標識抗体複合体の存在およびその量
を観察することによって行われる。競合免疫学的検査法
では、固体表面に結合した抗体を、未知の量の抗原分析
物を含有する試料および同じタイプの標識抗原(labeled
antigen)と接触させる。次いで、固体表面上に結合し
た標識化抗原の量を測定することによって、試料中の抗
原分析物の量を間接的に測定する。
【０００３】これらの方法および以下に説明する他の方
法は、抗体および抗原の両方を検出することができるの
で、該方法は、一般的に、免疫化学的リガンド−レセプ
ター検査法または単に免疫学的検査法と呼ばれている。
【０００４】サンドイッチまたは競合のいずれかのタイ
プの固相免疫学的検査装置によって、血液または尿のよ
うな生物学的液体試料中の分析物の高感度の検出が行わ
れる。固相免疫学的検査装置は、リガンド−レセプター
対のうちの１つの部材、通常、抗体、抗原またはハプテ
ンを結合している固体支持体と一体化している。初期の
一般的な固体支持体の形態は、放射標識免疫学的検査法
および酵素免疫学的検査法の分野から公知であるポリス
チレン製のプレート、管またはビーズであった。さらに
近年は、ナイロン、ニトロセルロース、酢酸セルロー
ス、ガラス繊維および他の多孔性ポリマーのような多く
の多孔性物質が固体支持体として用いられている。
【０００５】抗原、ハプテンまたは抗体のような免疫化
学的成分の固相担体として多孔性物質を用いる多くの自
蔵式(self-contained)免疫学的検査キットが開示されて
いる。これらのキットは、通常、ディップスティック(d
ipstick)、フロースルー(flow-through)またはマイグレ
ートリィ(migratory)の形態である。
【０００６】トム(Ｔom)らの米国特許第４,３６６,２４
１号およびズク(Ｚuk)の欧州特許公開ＥＰ−Ａ０１４３
５７４号には、検査を行うのに必要な試薬で膜を浸漬す
るマイグレーション型検査法が開示されている。
【０００７】バーンスタイン(Ｂernstein)の米国特許第
４,７７０,８５３号、メイ(Ｍay)らの国際特許公開ＷＯ
８８／０８５３４号およびチン(Ｃhing)らの欧州特許公
開ＥＰ−Ａ０２９９４２８号には、着色された直接標識
に結合した試薬と一体化しており、したがって、さらに
物質を添加せずに検査結果の目視的検出が可能であるマ
イグレーション型検査装置が開示されている。
【０００８】バルカー(Ｖalkir)らの米国特許第４,６３
２,９０１号には、液体試料を添加する多孔性膜または
フィルターに結合している抗体(標的抗原分析物に対し
て特異的)からなるフロースルー型免疫学的検査装置が
開示されている。該液体が膜を介して流れると、標的分
析物が抗体と結合する。試料の添加の後、標識抗体を添
加する。標識抗体の目視的検出によって、試料中の標的
抗原分析物の存在が示される。
【０００９】コロン(Ｋorom)らの欧州特許公開ＥＰ−Ａ
０２９９３５９号には、標識化抗体が試薬運搬系として
作用する膜と一体化しているフロースルー装置の変形が
開示されている。
【００１０】バックスター(Ｂaxter)らの欧州特許公開
ＥＰ−Ａ０１２５１１８号には、抗体のような免疫化学
的成分が固相と結合しているサンドイッチ型ディップス
ティック免疫学的検査法が開示されている。検査装置
を、未知の抗原分析物を含有すると思われる試料中にイ
ンキュベーションのために“浸漬”する。次に、インキ
ュベーションの後またはそれと同時に、酵素標識化抗体
を添加する。次に、該装置を洗浄し、次いで、酵素に対
する基質を含有している第２溶液に挿入する。酵素標識
は、存在する場合は、基質と相互に作用し合い、その結
果、着色された生成物が形成され、固相上に沈殿物とし
て堆積するかまたは基質溶液中で目視可能な色の変化を
生じる。
【００１１】カリ(Ｋali)らの欧州特許出願公開ＥＰ−
Ａ０２８２１９２号には、競合型検査法において使用す
るためのディップスティック装置が開示されている。
【００１２】ロイバーリング(Ｌeuvering)の米国特許第
４,３１３,７３４号には、ディップスティック装置にお
ける直接標識として金ゾル粒子の使用が開示されてい
る。
【００１３】ラウンズ(Ｒounds)らの米国特許第４,７８
６,５８９号には、抗体がホルマザンで標識されている
ディップスティック免疫学的検査装置が開示されてい
る。
【００１４】酵素標識化抗体を用いるディップスティッ
ク免疫学的検査装置による洗浄工程の必要性および酵素
基質インキュベーション時間の拡大によってばらつきが
増大し、したがって、最小限訓練された人およびホーム
ユーザーが誤った検査結果を得る可能性が増大する。
【００１５】
【課題を解決するための手段】本発明は、ディップステ
ィック免疫学的検査装置に関するものである。詳細に
は、本発明は、生物学的液体試料中の分析物を検出する
ための試験ゾーンにおける記号および酵素標識抗体の使
用を伴う免疫学的ディップスティック装置を提供するも
のである。該装置は、ディップスティック型酵素標識抗
体検査に関する中間洗浄工程の必要性を回避する。
【００１６】本発明の特徴は、以下の説明および添付し
た図面から明らかであろう。
【００１７】図１は、バーの形状の検査および制御表示
部を示す本発明の代表的なディップスティック装置の斜
視図である。
【００１８】図２は、プラス(＋)記号の形状の本発明の
ディップスティック装置の他の具体例の斜視図である。
【００１９】図１に関して、試験ゾーン１０は、基板部
材１２上に画定されている。基板部材１２は、水分非透
過性物質の小片によって構築されており、これは、容器
間の移動を流暢にするためにゾーン１０に対して堅固に
支持されている。代表的な基板物質としては、ガラスま
たは幾種類かのプラスチックが挙げられるが、これに限
定されるものではない。ゾーン１０は、種々の素子から
構築されていてもよく、例えば、ナイロン、ニトロセル
ロース、セルロース、酢酸セルロース、繊維ガラス、ポ
リスルホン、ポリ二フッ化ビニリデンおよびポリエステ
ルが挙げられるが、これに限定されるものではない。免
疫学的成分は、ここでは単一のバーで示されている表示
部１４の形状でゾーン１０上に固定されている。免疫学
的成分は、標的分析物を介して酵素標識化抗体と結合す
るのに使用可能であり、それによって、試験ゾーン１０
上に広がっているサンドイッチ型複合体を形成する。第
２免疫学的成分(抗−ＩgＧ)は、バーで示される制御表
示部１６の形状で固定されている。制御表示部１６は、
内部モニターとして作用し、検査の完了を測定すること
ができる。
【００２０】抗体が酵素によって標識化される方法は、
これらの標識が、適当な基質溶液と接触すると、該溶液
から不溶性の着色された生成物を生じ、沈殿させる化学
的性質として、当技術分野において周知である
【００２１】使用する際に、試験ゾーン１０を、酵素標
識抗−分析物抗体を添加した液体試料を含む容器に挿入
する。これを、短時間(例えば、３〜４分間)放置し、こ
の間に、標的分析物が、存在する場合には、表示部１４
に固定された免疫学的成分と結合し、標識抗体が分析物
と結合して表示部１４に沿って試験ゾーン１０上に広が
っている多数の“サンドイッチ型”複合体を形成する。
標的分析物に結合していない標識抗体の部分は制御表示
部１６において固定された抗−免疫グロブリンＧに結合
する。ディップスティックを第１容器から取り出し、酵
素基質を含有する第２容器に挿入する。基質との接触に
よって、試験ゾーン１０上に現在広がっている酵素標識
は、試験ゾーン１０の非表示領域よりも高濃度に表示部
１４および制御表示部１６に沿って堆積している不溶性
着色生成物を遊離するように作用する。これは、(ｉ)分
析物が存在する場合は、表示部１４および制御表示部１
６における目視可能な両着色バンドにおいて、または(i
i)分析物が存在しない場合は、制御表示部１６における
目視可能な着色バンドだけにおいて、得られる。
【００２２】本発明の別の具体例において、制御表示部
１６において固定されている物質の濃度を測定して、試
料中の分析物の濃度を内部的に測定することができる。
例えば、与えられた濃度の物質は表示部１６に固定さ
れ、検査が完了する。表示部１４に現れた色が、制御表
示部１６に現れた色よりも濃い場合、試料は、与えられ
た濃度よりも高い濃度の標的分析物を含有している。
【００２３】他方、図２に示すとおり、垂直な表示部１
１４は、プラス(＋)記号の形状で試験ゾーン１１０上で
制御表示部１１６に対して垂直にかつ重なって配置され
ている。操作的には、該装置は図１の記載と同一の方法
で使用する；着色されたプラス(＋)記号は、標的分析物
の存在下でゾーン１１０上で目視可能となるが、標的分
析物が存在しない場合は、着色されたマイナス(−)記号
が現れる。
【００２４】免疫学的物質は、実用的であるかまたは容
易に識別できる如何なる形状で試験ゾーン上に固定され
てもよい。これらの形状としては、ドット、バー、文
字、数字およびプラス−マイナス記号が挙げられるが、
これに限定されるものではない。抗−分析物抗体または
標的抗体に対して特異的である抗原が抗−免疫グロブリ
ンの水平対照バーに対して垂直に固定されているプラス
−マイナス形状は、プラス(＋)記号が陽性の結果を示
し、マイナス(−)記号が陰性の結果を示すので、ホーム
ユーザーが検査結果を容易に解釈できる。
【００２５】画定された形状で試験ゾーン上で免疫学的
成分をプリントまたはスプレイすることによって、ディ
ップスティック自体の試験ゾーン上で内部色差が得られ
るので、検査結果を解釈するために別の標準色チャート
は必要ではない。また、装置が基質溶液と接触する前に
洗浄する必要はない。生起した着色物質は、試験ゾーン
の非表示領域におけるよりも表示形状に沿って多数堆積
する。したがって、標的分析物を介して試験ゾーンに結
合しなかった酵素標識抗体を除去するための洗浄は必要
ではない。
【００２６】多くの酵素を用いて抗体を標識することが
できる。代表的な酵素としては、アルカリホスファター
ゼ、ホースディッシュ・ペルオキシダーゼ、リゾチー
ム、グルコース−６−リン酸デヒドロゲナーゼ、乳酸デ
ヒドロゲナーゼ、ウレアーゼ、グルコースオキシダー
ゼ、β−ガラクトシダーゼ、およびコレステロールオキ
シダーゼが挙げられるが、これに限定されるものではな
く、アルカリホスファターゼが好ましい。
【００２７】通常、検査が終了した後、試験ゾーン上の
表示領域と非表示領域の間に生じた色差は、試料中の与
えられた分析物の存在または非存在を正確に指示するの
に充分である。しかし、この色差は、試験ゾーン膜の非
表示領域に酵素抑制薬を一体化することによって増強す
ることができる。表示領域上に広がっているこれら酵素
の不要な抑制を回避するために、比較的弱い抑制作用を
呈する基質が好ましい。これらのアルカリホスファター
ゼ標識抗体を使用する装置において、代表的な抑制薬と
しては、システイン、ヒスチジン、Ｌ−フェニルアラニ
ン、β−フェニル−β−アラニン、p−フルオロフェニ
ルアラニンおよびチロシンのようなアミノ酸およびその
誘導体；エチレンジアミン四酢酸のようなキレート化
剤；クエン酸塩、ホウ酸塩、砒酸塩、リン酸塩、オルト
リン酸塩、炭酸塩、ポリリン酸エストラジオール、ピロ
リン酸塩およびポリリン酸フロレチンのような複合体酸
素化アニオン；またはヨード安息香酸塩およびヨードア
セトアミドのようなハロゲン化カルボン酸誘導体；およ
びリン酸p−ニトロフェニルのような色を生じる競合第
２基質が挙げられるが、これに限定されるものではな
い。前記のうちリン酸p−ニトロフェニルが好ましい。
【００２８】非表示領域内に一体化したリン酸p−ニト
ロフェニルを有する試験ゾーン膜をアルカリホスファタ
ーゼ標識化抗体と接触させると、リン酸イオンが開裂し
て、不溶性黄色生成物が得られる。これらは非表示領域
における試験ゾーン上に堆積するが、一方、酵素相互作
用の結果得られる主要な基質を含む不溶性生成物(通
常、青色)は、表示領域に沿って堆積される。非表示領
域上に堆積し得る青色生成物は、黄色によって覆われ
る。
【００２９】他の態様において、第１ポリオールは、非
表示領域における試験ゾーン上で酵素抑制薬と一緒に含
有される。アルカリホスファターゼが酵素標識として用
いられる場合、該ポリオールは、酵素−基質相互作用の
結果として生じるリン酸イオンを受け入れる作用をす
る。この特徴は、２つの機能を果す。
【００３０】第１に、リン酸イオンで膜を塗布すること
によって、ポリオールは、膜表面を親水性にし、したが
って、酵素基質接触の結果として生じる疎水性着色生成
物に対して反発させる。着色された生成物は、膜表面上
にあまり堆積しないと思われるので、表示領域と非表示
領域との間で大きい色差が生じる。
【００３１】第２に、生じたリン酸塩を受け入れるよう
に作用することによって、ポリオールは、アルカリホス
ファターゼとその基質との間の反応速度を増大し、基質
溶液中でディップスティックをインキュベートするのに
必要である時間を減少する。したがって、より早い検査
結果が可能になる。使用し得るポリオールとしては、ポ
リビニルアルコール、ポリエチレングリコール、ソルビ
トール、ポリプロピレングリコール、ならびにデキスト
ラン、メチルセルロース、ミルクおよびコーンスターチ
のような炭水化物が挙げられるが、これに限定されるも
のではない。前記のうち、ポリビニルアルコールが好ま
しい。
【００３２】アルカリホスファターゼが抗体を標識する
のに使用されない場合は、酵素基質反応の副生成物を受
け入れ、これによって、膜表面を不溶性着色生成物の堆
積に対して反発させ、および／または酵素基質インキュ
ベーション時間を減少させる物質を膜表面に一体化させ
ることができる。
【００３３】本発明は、ディップスティック装置と、酵
素標識抗体の溶液、および酵素標識と接触することによ
って不溶性着色生成物を形成するのに使用することがで
きる酵素基質の第２溶液と一緒にしたキットを含むもの
でもある。該基質の性質は、標識として使用される特定
の酵素に依存する。例えば、抗体がアルカリホスファタ
ーゼによって標識された場合、代表的な基質溶液として
は、ナフトール(Ｎaphthol)ＡＳ−ＭＸリン酸塩および
ファスト・ブルー(Ｆast Ｂlue)ＲＲ塩、ナフトールＡ
Ｓ-ＭＸリン酸塩およびファスト・バイオレット(Ｆast
Ｖiolet)Ｂ塩、ナフトールＡＳ−ＧＲリン酸塩および
ファスト・ブルーＲＲ塩、５−ブロモ−４−クロロ−３
−インドキシルリン酸塩(ＢＣＩＰ)、および３−インド
キシルリン酸塩が挙げられるが、これに限定されるもの
ではない。酵素標識としてホースラディッシュ・ペルオ
キシダーゼを使用する場合、代表的な基質溶液として
は、２,２'−アジノ−ジ−３−エチルベンゾチアジジン
・スルホン酸塩、３,３',５,５'−テトラメチルベンジ
ジン、４−クロロ−１−ナフトール、３,３'−ジアミノ
ベンジジン、p−フェニレンジアミンおよびピロカテコ
ール、３−アミノ−９−エチルカルバゾール、およびナ
フトール／ピロニンが挙げられるが、これに限定される
ものではない。乳酸デヒドロゲナーゼに対する代表的な
基質溶液としては、還元されたニコチンアミドアデニン
ジヌクレオチド(ＮＡＤＨ)、およびフェナジン・メト硫
酸塩(methosulphate)およびニトロブルーテトラゾリウ
ムが挙げられるが、これに限定されるものではない。抗
体がリポチーム(lipozyme)で標識される場合、代表的な
基質溶液は、リポソーム内に被包された不溶性着色物質
からなる。β−ガラクトシダーゼ標識化抗体に関する代
表的な基質溶液としては、５−ブロモ−４−クロロ−３
−インドキシル−β−Ｄ−ガラクトピラノシドが挙げら
れるが、これに限定されるものではない。グルコースオ
キシダーゼ標識化抗体に関する代表的な基質溶液として
は、t−ニトロブルーテトラゾリウム・塩化物およびm−
フェナジン・メト硫酸塩が挙げられるが、これに限定さ
れるものではない。
【００３４】酵素基質に加えて、第２溶液は、アルカリ
ホスファターゼと基質の間の接触の結果として生じるリ
ン酸イオンとの結合に使用可能である第２ポリオールを
含むことができる。第２ポリオールは、検査インキュベ
ーション時間を減少するという付加的手段を生じる。基
質溶液に使用される代表的なポリオールとしては、プロ
ピレングリコール、エタングリコール、ブタンジオー
ル、２−アミノ−２−メチル−１,３−プロパンジオー
ル、および２−アミノ−２−メチル−１−プロパノール
が挙げられるが、これに限定されるものではなく、２−
アミノ−２−メチル−１−プロパノールが好ましい。
【００３５】さらに、抗体は直接標識で標識されていて
もよい。酵素標識とは違って直接標識は、化学的相互作
用によってではなく、濃度によって肉眼で認識される信
号を生じるので、試験ゾーンの非表示領域におけるカゼ
インまたはウシ血清アルブミンとの一体化は、一般に、
試験ゾーン上の表示部と非表示部との差を生じるのに必
要である全てである。さらに、該ディップスティックは
基質溶液に２回目のインキュベーションをする必要がな
い。直接標識としては、金属ゾル、非金属ゾル、染料ゾ
ル、ラテックス粒子、炭素ゾルおよび着色体を含有する
リポソームが挙げられるが、これに限定されるものでは
ない。
【００３６】表示形成形状で試験ゾーン上に固定される
成分は、任意のリガンド−レセプター相互作用のいずれ
かの成分を使用することができるが、抗体、抗原、また
はハプテンのいずれかである。初期に使用される抗体
は、モノクローナルまたはポリクローナルであってよ
く、この製造方法は、当技術分野において周知である。
抗原およびハプテンは、天然または合成のいずれであっ
てもよく、市販品から入手可能である。また、免疫学的
成分は、表示部形成領域におけるゾーン上に固定された
架橋試薬を介して試験ゾーンに結合することができる。
代表的な架橋試薬としては、アビジン、ビオチン、抗−
フルオレセイン抗体およびプロテインＡが挙げられる
が、これに限定されるものではない。
【００３７】本発明の検査装置は、抗体、抗原またはハ
プテンの検出に使用される。この装置を使用して検出す
ることができる抗体としては、ライム病、サイトメガロ
ウイルス、エプスタイン−バーウイルス、肝炎、および
後天性免疫不全症候群の抗体が挙げられるが、これに限
定されるものではない。この装置を使用して検出するこ
とができる抗原としては、ヒト絨毛性ゴナドトロピン、
黄体化ホルモンおよびβ−フェトプロテインが挙げられ
るが、これに限定されるものではない。検出することが
できるハプテンとしては、コカイン、テトラヒドロカナ
ビノール、ジゴキシン、テオフィリン、モノホリンおよ
びアンフェタミンが挙げられるが、これに限定されるも
のではない。
【００３８】また、本発明は、固定された相補的配列お
よび標識された核酸プローブによって特異性遺伝子配列
を検出するために一般的なスクリーニングおよび研究に
おいて使用することができる。遺伝子配列検出方法は当
技術分野において公知である。
【００３９】以下に実施例を挙げて、本発明の特徴を示
すが、本発明は、該実施例に限定されるものではなく、
特許請求の範囲によってのみ定義される。
【００４０】
【実施例】
実施例１ Ａ. ディップスティックの調製 基板としての厚さ０.０１インチのプラスチックシート
(１８cm×９cm)に孔径０.４５μmの予め活性化したナイ
ロン膜[ポール・イムノダイン(Ｐall Ｉmmuno-dyne)]の
試料(０.５インチ)を接着することによって、試験ゾー
ンを製造した。該膜を、リノマット(Ｌinomat)ＩＶ[カ
マグ(Ｃamag)]を用いて底部から約７〜８mmの線に沿っ
て、リン酸緩衝溶液(pＨ７.４)中３mg／mlのヒツジ抗−
ヒト絨毛性ゴナドトロピン抗体３６μlでスプレイし
た。該シートを２％粉末ミルク[カーネーション(Ｃarna
tion)]および０.５％ポリビニルアルコール(分子量１
０,０００)を含有するリン酸緩衝溶液(pＨ７.４)中で３
０分間インキュベートした。該シートを、５％スクロー
ス溶液で洗浄し、風乾し、小片(０.４〜０.７cm)に切断
して、一連のディップスティックを製造した。これは室
温でデシケーター中に貯蔵することができる。
【００４１】Ｂ．酵素−抗体コンジュゲート体の調製 １段のグルタルアルデヒド法を用いて、モル比１：１
で、アルカリホスファターゼ(特異活性＞１４００Ｕ／m
g)とモノクローナルマウス抗−ヒト絨毛性ゴナドトロピ
ンとをカップリングした。該コンジュゲート体を、１０
mＭトリス(Ｔris)(pＨ７.４)および５mＭ塩化マグネシ
ウム中、線形勾配液(０〜１Ｍの塩化ナトリウム)を用い
てジエチルアミノエチル セファデックス(Ｓephadex)Ａ
５０(５ml)カラム上で精製した。コンジゲート試料(３.
０ml)を回収し、酵素活性を検査し、１０mＭトリス(pＨ
７.４)、１％ウシ血清アルブミン、１５０mＭ塩化ナト
リウム、および０.１％アジ化ナトリウム中で１ユニッ
ト／mlの濃度に希釈し、４℃で貯蔵した。
【００４２】コンジュゲート体を試験管(１０×７５mm)
中にアリコートし、凍結乾燥した。該試験管に栓をし、
貯蔵した。
【００４３】Ｃ．基質の調製 別の試験管(１０×７５mm)に、５−ブロモ−４−クロロ
−３−インドキシルリン酸塩−ニトロブルーテトラゾリ
ウム基質溶液０.８mlをアリコートした。該試験管を、
室温で、暗所に貯蔵した。
【００４４】Ｄ．検査の実施 コンジュゲート体を含有する管に１００mＩＵ／mlのヒ
ト絨毛性ゴナドトロピンを含有する標準的な尿１.０ml
を添加した。該管の内容物を混合し、ディップスティッ
クを挿入し、４分間放置した。ディップスティックを取
り出し、洗浄せずに、基質溶液を含有する管に挿入し、
該管を振盪した。該管をさらに４分間放置した。該管か
らディップスティックを取り出し、観察した。試験ゾー
ン全体の色がわずかに悪くなり、その表面を横切る認識
可能なブルーの水平線があった。検査感受性を測定した
結果、１２mＩＵ／mlヒト絨毛性ゴナドトロピンであっ
た。
【００４５】実施例２ 実施例１(Ｄ)において、最初にディップスティックを、
尿およびコンジュゲート体だけを含有する、すなわち、
ゴナドトロピンを含有しない管に挿入した以外は、実施
例１(Ａ)、１(Ｂ)、１(Ｃ)および１(Ｄ)と同一の製造方
法に従った。４分後、該ディップスティックを取り出
し、洗浄せずに基質溶液の管に挿入し、さらに４分間イ
ンキュベートし、観察した。試験ゾーン全体の色がわず
かに悪くなり、その表面を横切る認識可能な線はなかっ
た。
【００４６】実施例３ 実施例１(Ａ)において、底から約９〜１１mmの別の線に
沿って抗−マウス免疫グロブリンで膜にスプレイした以
外は、実施例１(Ａ)、１(Ｂ)、１(Ｃ)および１(Ｄ)と同
一の製造方法に従った。
【００４７】試験ゾーン全体の色はわずかに悪くなり、
その表面を横切る２つの認識可能な青い水平線が形成さ
れた。
【００４８】実施例４ 最初に、尿およびコンジュゲート体だけを含有する、す
なわちゴナドトロピンを含有しない管にディップスティ
ックを挿入した以外は、実施例３と同一の方法に従っ
た。
【００４９】試験ゾーン全体の色がわずかに悪くなり、
その表面を横切る認識可能な青い水平線を１つだけ(対
照)形成した。
【００５０】実施例５ プラス(＋)記号の形状を形成するために、抗−マウスＩ
gＧの線に対して垂直でありかつ該線を２等分する縦線
に沿って、ヒツジ抗−ヒト絨毛性ゴナドトロピンで膜に
スプレイした以外は、実施例３と同一の方法に従った。
【００５１】試験ゾーン全体の色がわずかに悪くなり、
その表面を横切る認識可能な青いプラス(＋)記号を形成
した。
【００５２】実施例６ 最初に、尿およびコンジュゲート体だけを含有する管に
ディップスティックを挿入した以外は、実施例５と同一
の方法に従った。
【００５３】試験ゾーン全体の色がわずかに悪くなり、
その表面を横切る認識可能な青いマイナス(−)記号を形
成した。
【００５４】実施例７ 抗−ヒト絨毛性ゴナドトロピンの代わりに、抗−ヒト黄
体化ホルモン(ＬＨ)を使用した以外は、実施例１(Ａ)と
同一の方法によってディップスティックを製造した。
【００５５】実施例１(Ａ)の方法に従って、抗−ヒト黄
体化ホルモンを用いて、４つの膜[ポール・イムノダイ
ン(Ｐall Ｉmuunodyne)]に線形スプレイした。次い
で、与えられた濃度(４０mＩＵ／ml、７０mＩＵ／ml、
１２０mＩＵ／mlおよび２００mＩＵ／ml)のヒト黄体化
ホルモンを含有する尿の管中に各膜を浸漬した。４０m
ＩＵ／mlでは、膜上に僅かに青いバンドが現れ、７０m
ＩＵ／mlでは、中程度の青いバンドが現れ、１２０mＩ
Ｕ／mlでは強い青いバンドが現れ、２００mＩＵ／mlで
は、非常に強い青いバンドが現れた。固体支持体上に色
濃度連続におけるこれらの結果を配列することによって
標準色チャートを製造した。
【００５６】尿の臨床学的試料を含有する管中にディッ
プスティックを挿入し、次いで、洗浄せずに基質溶液の
管に挿入した。試験ゾーンの表面上に中程度の青い線が
現れた。該ディップスティックを色チャートと比較し、
試料が４０〜７０mＩＵ／ml黄体化ホルモンを含有する
ことを測定した。
【００５７】実施例８ Ａ．装置の製造 抗ヒト絨毛性ゴナドトロピンの代わりにポリクローナル
抗−フルオレセインイソチオシアナートで膜の底部から
７〜８mmに線形スプレイをした以外は、実施例１(Ａ)の
方法に従ってディップスティックを製造した。膜の底部
から約９〜１２mmにアビジン溶液で対照線をスプレイし
た。
【００５８】次いで、ディップスティック試験ゾーンを
２％粉末ミルク(カーネーション)および０.５％ポリビ
ニルアセテート(分子量１０,０００)を含有するリン酸
緩衝溶液(pＨ７.４)中に３０分間浸漬することによって
ブロックした。次いで、５％スクロース溶液で洗浄し、
風乾し、室温でデシケーター中に貯蔵した。
【００５９】Ｂ．フルオレセインイソチオシアナート−
アルカリホスファターゼコンジュゲート体(＞１４００
Ｕ／ｍｌ)の調製 ０.１Ｍホウ酸ナトリウム(pＨ９.３)溶液フルオレセイ
ンイソチオシアナート２５μl(３mg／４００μl)を、全
容量０.５mlのホウ酸ナトリウム中アルカリホスファタ
ーゼ５mgに添加した。得られた溶液を室温で３時間放置
した。
【００６０】次いで、該溶液をＧ２５ セファデックス
(Ｓephadex) カラムで分離し、０.１Ｍ炭酸ナトリウム
(pＨ８.５)で溶離した。これに、ジメチルスルホキシド
１.０mlにＮ−ヒドロキシスクシンイミジルビオチン５.
０mgを溶解した溶液１００mlを添加した。得られた溶液
を約１２時間撹拌した。
【００６１】Ｇ２５ セファデックスカラム上でコンジ
ュゲート体を分離し、１０mＭトリス、１％ウシ血清ア
ルブミン、１５０mＭ塩化ナトリウムおよび０.１％アジ
化ナトリウムを含有する緩衝液(pＨ７.４)で溶離するこ
とによって遊離ビオチンを除去した。次いで、該コンジ
ュゲート体を４℃で貯蔵した。
【００６２】コンジュゲート溶液を試験管(１０×７５m
m)中にアリコートし、次いで凍結乾燥した。該管に栓を
し、貯蔵した。
【００６３】Ｃ．基質の調製 別の管(１０×７５mm)に５−ブロモ−４−クロロ−３−
インドキシルリン酸塩−ニトロブルーテトラゾリウム基
質溶液０.８mlをアリコートした。該管を室温で暗所に
貯蔵した。
【００６４】Ｄ．競合検査の実施 コンジュゲート体の管に、フルオレセインイソチオシア
ナート(１１ng／ml)を含有する尿１.０mlを加えた。こ
れを混合し、ディップスティックを挿入し、３分間放置
した。
【００６５】ディップスティックを、基質を含有する管
の中に移し、該管を撹拌して混合した。これを２分間放
置した。対照領域の試験ゾーン上に濃い線が現れ、抗−
フルオレセインイソチオシアナートバンド中に微かな線
が現れた。
【００６６】実施例９ 実施例８(Ｄ)において、ディップスティックを最初に尿
とコンジュゲート体だけを含有する、すなわち、フルオ
レセインイソシアナートを含有しない管に挿入した以外
は、実施例８(Ａ)、８(Ｂ)、８(Ｃ)および８(Ｄ)と同一
の方法を行った。試験ゾーン上に２つの非常に濃い線が
現れた。
【００６７】実施例１０ Ａ．ディップスティックの調製 厚さ０.０１インチのプラスチック製シート(１８cm×９
cm)に孔径０.４５μmの予め活性化されたナイロン膜(ポ
ール・イムノダイン)の試料(０.５インチ)を接着するこ
とによって、試験ゾーンを調製した。底部から約４mmの
線に沿って、リン酸緩衝液中３mg／mlヒツジ抗−ヒト絨
毛性ゴナドトロピン抗体３６μlをエアブラッシ処理す
ることによって膜上にバンドをプリントした。膜の底部
から約７mmに同一の方法でヒツジ抗−マウス抗体の第２
対照バンドをプリントした。次いで、該膜を室温で１５
分間風乾した。
【００６８】Ｂ．膜のブロッキング ５mＭ塩化マグネシウムを含有する２０mＭジエタノール
アミン・塩酸塩緩衝液(pＨ８.５)中、５mＭリン酸p−ニ
トロフェニルおよび０.２％ポリビニルアルコール(分子
量１０,０００)から溶液を調製した。室温で３０分間、
この溶液に膜を浸漬し、５％スクロース溶液で洗浄し、
風乾し、小片(５mm)に切断し、室温でデシケーター中に
貯蔵した。
【００６９】Ｃ．酵素−抗体コンジュゲート体の調製 １段のグルタルアルデヒド法を用いて、アルカリホスフ
ァターゼ(特異活性＞１４００Ｕ／mg)を、モノクローナ
ルマウス抗−ヒト絨毛性ゴナドトロピンをモル比１：１
でカップリングした。該コンジュゲート体を、１０mＭ
トリス(pＨ７.４)および５mＭ塩化マグネシウムに入れ
た線形勾配液(０〜１Ｍ塩化ナトリウム)を用いて、ジエ
チルアミノエチル セファデックス Ａ５０(５ml)で精製
した。コンジュゲート体試料(３.０ml)を回収し；酵素
活性を検査し；１０mＭトリス(pＨ７.４)、１％ウシ血
清アルブミン、１５０mＭ塩化ナトリウム、および０.１
％アジ化ナトリウム中で１ユニット／mlに希釈し；次い
で、４℃で貯蔵した。
【００７０】コンジュゲート体を試験管(１０×７５mm)
中にアリコートし、凍結乾燥した。該管に栓をし、貯蔵
した。
【００７１】Ｄ．基質の調製 別の試験管(１０×７５mm)中に、２−アミノ−２−メチ
ル−１−プロパノール中に５−ブロモ−４−クロロ−３
−インドキシルリン酸塩−ニトロブルーテトラゾリウム
を含有する溶液０.８mlをアリコートした。該管を室温
で暗所に貯蔵した。
【００７２】Ｅ．検査の実施 コンジュゲート体を含有する管に、１００mＩＵ／mlヒ
ト絨毛性ゴナドトロピンを含有する標準的な尿１.０ml
を添加した。該管の内容物を混合し、デイップスティッ
クを挿入し、４分間放置した。該デイップスティックを
取り出し、洗浄せずに基質溶液を含有する管に挿入し、
さらに４分間維持した。約３０秒目に試験ゾーン全体が
わずかに色が悪くなり、試験ゾーン表面上に２つの濃青
色の線が現れ始めた。検査感受性は、１２mＩＵ／mlで
あった。
【００７３】実施例１１ 実施例１０(Ｅ)において、デイップスティックをまず尿
とコンジュゲート体だけを含有する、すなわちゴナドト
ロピンを含有しない管中に挿入した以外は、実施例１０
(Ａ)、１０(Ｂ)、１０(Ｃ)、１０(Ｄ)および１０(Ｅ)と
同一の方法に従った。４分後、デイップスティックを取
り出し、洗浄せずに基質管中に挿入し、さらに４分間イ
ンキュベートし、観察した。３０秒後、試験ゾーン全体
は、わずかに色が悪くなり、試験ゾーン表面上に１つだ
け濃青色線が現れ始めた。
【００７４】実施例１２ 実施例１０(Ｅ)において、以下の試薬混合液中に各膜を
浸漬した以外は、実施例１０(Ａ)および１０(Ｂ)に従っ
て多くのデイップスティック装置を製造した。 １．１５０mＭ塩化ナトリウムおよび０.１％アジ化ナト
リウムの１０mＭリン酸緩衝溶液(pＨ７.５)中ミルク(２
％) ２．１０mＭトリエタノールアミン・塩酸塩緩衝液(pＨ
８.０)中ミルク(２％) ３．１５０mＭ塩化ナトリウムおよび０.１％アジ化ナト
リウムの２０mＭリン酸緩衝溶液(pＨ７.５)中ポリビニ
ルアルコール(０.５％) ４．２０mＭトリス緩衝液(pＨ８.０)中ポリビニルアル
コール(０.５％) ５．２０mＭホウ酸緩衝液(pＨ８.５)中ポリビニルアル
コール(０.５％) ６．２０mＭ炭酸緩衝溶液(pＨ８.０)中ポリビニルアル
コール(０.１％)および０.１％ミルク ７．２０mＭ２−アミノ−２−メチル−１−プロパノー
ル緩衝溶液(pＨ８.５)中ポリビニルアルコール(０.１
％) ８．２０mＭジエタノールアミン・塩酸塩緩衝溶液(pＨ
８.５)中５mＭリン酸p−ニトロフェニルおよび０.２％
ポリビニルアルコール ９．２０mＭジエタノールアミン・塩酸塩緩衝溶液(pＨ
８.０)中５mＭリン酸p−ニトロフェニルおよび０.２％
ポリビニルアルコール １０．トリエタノールアミン(pＨ８.０)中ポリビニルア
ルコール(０.１％)、ミルク(０.１％)、およびフェニル
アラニン(０.５％) １１．２０mＭホウ酸緩衝溶液(pＨ８.５)中ポリビニル
アルコール(０.１％)およびミルク(２％) １２．リン酸緩衝溶液中ポリビニルアルコール(０.１
％)およびエチレングリコール(１％) １３．２０mＭトリエタノールアミン(pＨ８.０)中ソル
ビトール(５％)およびポリビニルアルコール(０.１％) １４．コーンスターチ(５％)および０.１％ポリエチレ
ングリコール(分子量６０００) １５．トリス緩衝液中ウシ血清アルブミン(０.１％) １６．２０mＭトリス緩衝液(pＨ８.０) １７．２０mＭトリス緩衝液(pＨ８.０)中２０mＭグリシ
ン １８．水 １９．リン酸緩衝溶液中カゼイン(０.３％) ２０．非ブロッキング溶液。
【００７５】組成物に関する検査の信号：ノイズ比は、
以下のとおりであった(数字が低いほど、比率が良好)。
【００７６】
【表１】
【００７７】実施例１３ 実施例１０(Ａ)において、プラス(＋)記号形状を形成す
るために、抗−マウスＩgＧの線に対して垂直でありか
つこの線を２当分する垂直な線に沿って、ヒツジ抗−ヒ
ト絨毛性ゴナドトロピンで膜にスプレイした以外は、実
施例１０(Ａ)、１０(Ｂ)、１０(Ｃ)、１０(Ｄ)および１
０(Ｅ)と同一の方法に従った。約３０秒で、試験ゾーン
全体がわずかに色が悪くなり、試験ゾーン表面に濃青色
のプラス(＋)記号が現れ始めた。
【００７８】実施例１４ ディップスティックをまず尿とコンジュゲート体だけを
含有する、すなわちゴナドトロピンを含有しない管に挿
入した以外は、実施例１３と同一の方法に従った。
【００７９】試験ゾーン全体はわずかに色が悪くなり、
その表面を横切って非常に濃い青色のマイナス(−)記号
が形成された。
【００８０】実施例１５ 抗−ヒト絨毛性ゴナドトロピンの代わりに抗−ヒト黄体
化ホルモン(ＬＨ)を用いた以外は、実施例１０(Ａ)と同
一の方法に従って、ディップスティックを調製した。対
照バンドはなかった。
【００８１】実施例１０(Ａ)の方法に従って、抗−ヒト
黄体化ホルモンを用いて、４つの膜(ポール・イムノダ
イン)に線形スプレイした。次いで、与えられた濃度(４
０mＩＵ／ml、７０mＩＵ／ml、１２０mＩＵ／mlおよび
２００mＩＵ／ml)のヒト黄体化ホルモンを含有する尿の
管中に各膜を浸漬した。４０mＩＵ／mlでは、膜上に僅
かであるが明確な青いバンドが現れ、７０mＩＵ／mlで
は、非常に明確な中程度の青いバンドが現れ、１２０m
ＩＵ／mlでは非常に明確な強い青いバンドが現れ、２０
０mＩＵ／mlでは、非常に明確で非常に強い青いバンド
が現れた。固体支持体上に色濃度の順序にこれらの結果
を配列することによって標準色チャートを製造した。
【００８２】尿の臨床学的試料を含有する管中にディッ
プスティックを挿入し、次いで、洗浄せずに基質溶液の
管に挿入した。試験ゾーンの表面上に非常に明確な強い
青い線が現れた。該ディップスティックを色チャートと
比較し、試料が１２０〜２００mＩＵ／ml黄体化ホルモ
ンを含有することを測定した。
【００８３】実施例１６ 抗−ヒト絨毛性ゴナドトロピンの代わりに抗−ヒト黄体
化ホルモン(ＬＨ)を用いた以外は、実施例１０(Ａ)と同
一の方法でディップスティックを調製し、抗−マウス抗
体で、４０mＩＵ／mlの黄体化ホルモンの濃度と等価の
信号濃度の対照バンドをプリントした。
【００８４】ディップスティックを、尿の臨床学的試料
を含有する管に挿入して４分間インキュベートし、取り
出し、次いで、洗浄せずに基質溶液に挿入した。試験ゾ
ーンの表面に２つの明確な青い線が現れた。第２の線
は、対照の線よりも濃く、試料中における４０mＩＵ／m
l以上の黄体化ホルモンの存在が示された。
【００８５】実施例１７ Ａ．装置の製造 抗ヒト絨毛性ゴナドトロピンの代わりにポリクローナル
抗−フルオレセインイソチオシアナートで膜の底部から
７〜８mmに線形スプレイをした以外は、実施例１０(Ａ)
の方法に従ってディップスティックを製造した。膜の底
部から約９〜１２mmにアビジン溶液で対照線をスプレイ
した。
【００８６】Ｂ．フルオレセインイソチオシアナート−
アルカリホスファターゼコンジュゲート体(＞１４００
Ｕ／ml)の調製 ０.１Ｍホウ酸ナトリウム(pＨ９.３)溶液中フルオレセ
インイソチオシアナート２５μl(３mg／４００μl)を、
全容量０.５mlのホウ酸ナトリウム中アルカリホスファ
ターゼ５mgに添加した。得られた溶液を室温で３時間放
置した。
【００８７】次いで、該溶液をＧ２５セファデックスカ
ラムで分離し、０.１Ｍ炭酸ナトリウム(pＨ８.５)で溶
離した。これに、ジメチルスルホキシド１.０mlにＮ−
ヒドロキシスクシンイミジルビオチン５.０mgを溶解し
た溶液１００mlを添加した。得られた溶液を約１２時間
撹拌した。
【００８８】Ｇ２５セファデックスカラム上でコンジュ
ゲート体を分離し、１０mＭトリス、１％ウシ血清アル
ブミン、１５０mＭ塩化ナトリウムおよび０.１％アジ化
ナトリウムを含有する緩衝液(pＨ７.４)で溶離すること
によって遊離ビオチンを除去した。次いで、該コンジュ
ゲート体を４℃で貯蔵した。
【００８９】コンジュゲート溶液を試験管(１０×７５m
m)中にアリコートし、次いで凍結乾燥した。該管に栓を
し、貯蔵した。
【００９０】Ｃ．基質の調製 別の管(１０×７５mm)に５−ブロモ−４−クロロ−３−
インドキシルリン酸塩−ニトロブルーテトラゾリウム基
質溶液０.８mlをアリコートした。該管を室温で暗所に
貯蔵した。
【００９１】Ｄ．競合検査の実施 コンジュゲート体の管に、フルオレセインイソチオシア
ナート(１１ng／ml)を含有する尿１.０mlおよびディッ
プスティックを加えた。これを混合し３分間放置した。
【００９２】次いで、該装置を洗浄せずに基質を含有す
る管の中に移し、該管を撹拌して混合した。これを２分
間放置した。対照領域の試験ゾーン上に濃い線が現れ、
抗−フルオレセインイソチオシアナートバンド中に微か
な線が現れた。
【００９３】実施例１８ ディップスティックをまず尿とコンジュゲート体だけを
含有する、すなわち、フルオレセインを含有しない管に
挿入した以外は、実施例１７と同一の方法に従った。試
験ゾーン上に２つの非常に濃い線が現れた。
【図面の簡単な説明】
【図１】 バーの形状の検査および制御表示部を示す本
発明の代表的なディップスティック装置の斜視図であ
る。
【図２】 プラス(＋)記号の形状の本発明のディップス
ティック装置の他の具体例の斜視図である。
【符号の説明】
１０、１１０・・・試験域、 １２・・・基板部材、 １４、１１４・・・表示部、 １６、１１６・・・制御表示部。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (71)出願人 591008960 ミュウォン・カンパニー・リミテッド ＭＩＷＯＮ ＣＯＭＰＡＮＹ ＬＩＭＩＴ ＥＤ 大韓民国ソウル、ドボン−グ、バンハク− ドン720番 (72)発明者 ジェモ・カン アメリカ合衆国08540ニュージャージー州 プリンストン、ブレイバーン・ドライブ60 番 (72)発明者 ジョン・エイ・コランドゥオーニ アメリカ合衆国08807ニュージャージー州 ブリッジウォーター、ブルーストーン・レ イン843番 (72)発明者 ドン・ジュン・リー 大韓民国ソウル、ソデムン−グ、ナムガシ ャ−ドン353−20番 (72)発明者 ビョンウ・ユン アメリカ合衆国07481ニュージャージー州 ワイコフ、チェストナット・ストリート 545番 (72)発明者 チャン・オク 大韓民国ソウル、ドボン−グ、バンハク− ドン647−26番 (72)発明者 ウォーター・ジェイ・カン アメリカ合衆国08540ニュージャージー州 プリンストン、ブレイバーン・ドライブ60 番

Claims (28)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】 基板部材と；該基板部材上に画定された
    試験ゾーンと；表示形成形状で該ゾーンに配置された少
    なくとも１つの固定された免疫学的成分とからなり；該
    免疫学的成分が標的分析物を介して酵素標識抗体と結合
    して該ゾーン上でサンドイッチ複合体を形成するための
    ものであり、該複合体が酵素の基質との接触によって該
    形状と試験ゾーンとの間で肉眼で認識することができる
    差異を生じ、 該ゾーンの全体にわたって分布された該酵素に対する抑
    制薬を有することを特徴とするディップスティック免疫
    学的検査装置。
  2. 【請求項２】 固定された成分が抗体、抗原またはハプ
    テンである請求項１記載の免疫学的検査装置。
  3. 【請求項３】 固定された成分が抗体である請求項２記
    載の免疫学的検査装置。
  4. 【請求項４】 酵素が、アルカリホスファターゼ、ホー
    スディシュ・ペルオキシダーゼ、リゾチーム、グルコー
    ス−６−リン酸デヒドロゲナーゼ、乳酸デヒドロゲナー
    ゼ、ウレアーゼ、グルコースオキシダーゼ、β−ガラク
    トシダーゼ、またはグルコースオキシダーゼである請求
    項１記載の免疫学的検査装置。
  5. 【請求項５】 酵素がアルカリホスファターゼである請
    求項４記載の免疫学的検査装置。
  6. 【請求項６】 酵素抑制薬がアミノ酸、アミノ酸誘導
    体、金属キレート形成剤、複合酸素化アニオン、または
    ハロゲン化カルボン酸誘導体である請求項１記載の免疫
    学的検査装置。
  7. 【請求項７】 抑制薬がシステイン、ヒスチジン、Ｌ−
    フェニルアラニン、β−フェニル−β−アラニン、p−
    フルオロフェニルアラニン、チロシン、ヨード安息香酸
    塩、ヨードアセトアミド、クエン酸塩、エチレンジアミ
    ン四酢酸、ホウ酸塩、砒酸塩、リン酸塩、オルトリン酸
    塩、炭酸塩、ポリリン酸エストラジオール、ピロリン酸
    塩、ポリリン酸フロレチン、またはリン酸p−ニトロフ
    ェニルである請求項６記載の免疫学的検査装置。
  8. 【請求項８】 抑制薬がリン酸p−ニトロフェニルであ
    る請求項７記載の免疫学的検査装置。
  9. 【請求項９】 標的分析物が抗原、抗体、またはハプテ
    ンである請求項１記載の免疫学的検査装置。
  10. 【請求項１０】 形状がバー、ドット、数字または文字
    である請求項１記載の免疫学的検査装置。
  11. 【請求項１１】 基板部材がプラスチックまたはガラス
    からなる請求項１記載の免疫学的検査装置。
  12. 【請求項１２】 試験ゾーンが、ナイロン、ニトロセル
    ロース、セルロース、繊維ガラス、ポリスルホン、ポリ
    二フッ化ビニリデン、またはポリエステルからなる請求
    項１記載の免疫学的検査装置。
  13. 【請求項１３】 請求項１記載の免疫学的検査装置と、 酵素標識抗体からなる第１溶液と、 該酵素との接触によって不溶性着色生成物を形成するた
    めの基質からなる第２溶液と、からなることを特徴とす
    るキット。
  14. 【請求項１４】 基板部材と；該基板部材上で画定され
    た試験ゾーンと；表示形成形状で該ゾーンに配置された
    少なくとも１つの固定された免疫学的成分とからなり；
    該免疫学的成分が標的分析物を介してアルカリホスファ
    ターゼ−標識抗体と結合して該ゾーン上に広がるサンド
    イッチ複合体を形成するためのものであり、該複合体が
    該酵素の基質との接触によって該形状と試験ゾーンとの
    間で肉眼で認識することができる差異を生じ、 該ゾーンの全体にわたって分布されたアルカリホスファ
    ターゼに対する抑制薬と；該ゾーンの全体にわたって分
    布された第１ポリオールとを有することを特徴とするデ
    ィップスティック免疫学的検査装置。
  15. 【請求項１５】 抑制薬がアミノ酸、アミノ酸誘導体、
    キレート化剤、複合酸素化アニオン、第２競合基質、ま
    たはハロゲン化カルボン酸誘導体である請求項１４記載
    の免疫学的検査装置。
  16. 【請求項１６】 抑制薬がシステイン、ヒスチジン、Ｌ
    −フェニルアラニン、β−フェニル−β−アラニン、p
    −フルオロフェニルアラニン、チロシン、ヨード安息香
    酸塩、ヨードアセトアミド、エチレンジアミン四酢酸、
    クエン酸塩、オルトリン酸塩、砒酸塩、ピロリン酸塩、
    ホウ酸塩、炭酸塩、ポリリン酸エストラジオール、ポリ
    リン酸フロレチン、リン酸p−ニトロフェニルまたはリ
    ン酸塩である請求項１５記載の免疫学的検査装置。
  17. 【請求項１７】 抑制薬がリン酸p−ニトロフェニルで
    ある請求項１６記載の免疫学的検査装置。
  18. 【請求項１８】 標的分析物が抗原、抗体またはハプテ
    ンである請求項１４記載の免疫学的検査装置。
  19. 【請求項１９】 形状がバー、文字、数字またはドット
    である請求項１４記載の免疫学的検査装置。
  20. 【請求項２０】 基板部材がプラスチックまたはガラス
    である請求項１４記載の免疫学的検査装置。
  21. 【請求項２１】 試験ゾーンがナイロン、ニトロセルロ
    ース、セルロース、繊維ガラス、ポリスルホン、ポリ二
    フッ化ビニリデン、またはポリエステルである請求項１
    ４記載の免疫学的検査装置。
  22. 【請求項２２】 第１ポリオールがポリビニルアルコー
    ル、炭水化物、ポリエチレングリコール、ソルビトー
    ル、ポリプロピレングリコール、デキストラン、メチル
    セルロース、ミルクまたはコーンスターチである請求項
    １４記載の免疫学的検査装置。
  23. 【請求項２３】 第１ポリオールがポリビニルアルコー
    ルである請求項２２記載の免疫学的検査装置。
  24. 【請求項２４】 請求項１４記載の検査装置と；アルカ
    リホスファターゼ標識化抗体からなる第１溶液と；およ
    びアルカリホスファターゼとの接触によって不溶性着色
    生成物とリン酸イオンを形成させるための基質、および
    実質的な数のリン酸イオンと結合させるための第２ポリ
    オールからなる第２溶液とからなることを特徴とするキ
    ット。
  25. 【請求項２５】 第２ポリオールがプロピレングリコー
    ル、エタングリコール、２−アミノ−２−メチル−１−
    プロパノール、ブタンジオール、または２−アミノ−２
    −メチル−１,３−プロパンジオールである請求項２４
    記載のキット。
  26. 【請求項２６】 第２ポリオールが２−アミノ−２−メ
    チル−１−プロパノールである請求項２５記載のキッ
    ト。
  27. 【請求項２７】 基板部材と；該基板部材上で画定され
    た試験ゾーンと；表示形成形状で該ゾーンに配置された
    少なくとも１つの固定された免疫学的成分からなり；該
    免疫学的成分が標的補体および酵素標識補体の両方と結
    合するためのものであり、該酵素標識補体が該酵素の基
    質との接触によって該形状と試験ゾーンとの間で肉眼で
    認識することができる差異を生じ；該ゾーンの全体にわ
    たって分布された該酵素に対する抑制薬を有することを
    特徴とするディップスティック免疫学的検査装置。
  28. 【請求項２８】 基板部材と；該基板部材上で画定され
    た試験ゾーンと；表示形成形状で該ゾーンに配置された
    少なくとも１つの固定された免疫学的成分からなり；該
    免疫学的成分が標的分析物を介して直接標識抗体と結合
    して該ゾーン上に広がっているサンドイッチ型複合体を
    形成するためのものであり、該複合体が該形状と試験ゾ
    ーンとの間で肉眼で認識することができる差異を生じる
    ことを特徴とするディップスティック免疫学的検査装
    置。
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2003270244A (ja) * 2002-03-15 2003-09-25 Nisshinbo Ind Inc 生体物質の検出方法、及びこれに用いる検出用ユニット及び検出用デバイス
JP2008501124A (ja) * 2004-06-01 2008-01-17 ウーメディック インコーポレーテッド マクロおよびミクロマトリックスの迅速な検出および定量方法および装置

Families Citing this family (67)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR910014705A (ko) * 1990-01-10 1991-08-31 원본미기재 세척이 필요없은 딥스틱(Dipstick) 형태의 이뮤노어세이(Immunoasssay)장치
US5660790A (en) * 1996-08-13 1997-08-26 Litmus Concepts, Inc. PH and amine test elements
US5846487A (en) * 1996-11-26 1998-12-08 Bennett, Ii; Edward R. Specimen cartridge
US5985675A (en) 1997-12-31 1999-11-16 Charm Sciences, Inc. Test device for detection of an analyte
ES2284210T3 (es) 1997-07-16 2007-11-01 Charm Sciences Inc. Un dispositivo de ensayo y un metodo para detectar la presencia de un analito residual en una muestra.
US6306642B1 (en) * 1997-11-24 2001-10-23 Quidel Corporation Enzyme substrate delivery and product registration in one step enzyme immunoassays
EP0919811A1 (en) * 1997-12-01 1999-06-02 Universiteit Maastricht Immunoassay method and kit
US6663833B1 (en) 1998-03-10 2003-12-16 Strategic Diagnostics Inc. Integrated assay device and methods of production and use
US7640083B2 (en) * 2002-11-22 2009-12-29 Monroe David A Record and playback system for aircraft
AU2958200A (en) * 1998-11-11 2000-05-29 Ronald E. Wheeler Detection of prostatitis
US7297554B2 (en) * 1998-11-18 2007-11-20 Microdiagnostics, Inc. Immunoassay system
US6046058A (en) * 1998-11-20 2000-04-04 Sun; Ming Color-coded test strip
US6344337B1 (en) 1999-02-19 2002-02-05 Board Of Trustees Of Michigan State University Antigen test to detect equine protozoal myeloencephalitis in horse serum and cerebrospinal fluid
US6355246B1 (en) 1999-06-10 2002-03-12 Board Of Trustees Of Michigan State University Feline calicivirus isolated from cat urine and vaccines thereof
US6537762B1 (en) 1999-07-30 2003-03-25 Board Of Trustees Of Michigan State University Peptide mimotope to mycotoxin deoxynivalenol and uses thereof
AU7108700A (en) 1999-09-02 2001-03-26 Michigan State University Vaccine to control equine protozoal myeloencephalitis in horses
US7419668B1 (en) 1999-09-02 2008-09-02 Board Of Trustees Of Michigan State University Vaccine to control equine protozoal myeloencephalitis in horses
US6372516B1 (en) 2000-09-07 2002-04-16 Sun Biomedical Laboratories, Inc. Lateral flow test device
US6767710B2 (en) * 2001-03-30 2004-07-27 Praxsys Biosystems, Llc Prewetting stop flow test strip
US6663831B2 (en) 2001-04-04 2003-12-16 Forefront Diagnostics, Inc. “One-device” system for testing constituents in fluids
US6833111B2 (en) 2001-04-13 2004-12-21 Varian, Inc. Multiple analyte assaying device with a multiple sample introduction system
EP1417491A4 (en) * 2001-07-18 2004-08-11 Siliang Zhou TEST STRIP FOR SIDE FLOW ASSAY OF A SAMPLE CONTAINING WHOLE CELLS
CA2458525A1 (en) * 2001-10-05 2003-04-17 Filtrona Richmond, Inc. Medium for isolating, detecting, separating or purifying chemical and biological substances
US8481334B1 (en) 2001-11-06 2013-07-09 Charm Sciences, Inc. Method of attaching a ligand to a solid support
US20030153094A1 (en) * 2002-02-13 2003-08-14 Board Of Trustees Of Michigan State University Conductimetric biosensor device, method and system
US6703216B2 (en) 2002-03-14 2004-03-09 The Regents Of The University Of California Methods, compositions and apparatuses for detection of gamma-hydroxybutyric acid (GHB)
US7291263B2 (en) 2003-08-21 2007-11-06 Filtrona Richmond, Inc. Polymeric fiber rods for separation applications
US7410808B1 (en) * 2003-12-08 2008-08-12 Charm Sciences, Inc. Method and assay for detection of residues
WO2005069005A1 (en) * 2004-01-13 2005-07-28 Calbatech Device and methods for processing samples and detecting analytes of low concentration
US7290668B2 (en) * 2004-03-01 2007-11-06 Filtrona Richmond, Inc. Bicomponent fiber wick
US20060034886A1 (en) * 2004-07-23 2006-02-16 Ward Bennett C Bonded fiber structures for use in controlling fluid flow
ATE479096T1 (de) * 2004-07-29 2010-09-15 Relia Diagnostic Systems Llc Querstromsystem und assay
EP1880218A2 (en) * 2005-04-29 2008-01-23 Beckman Coulter Fluorescence lateral flow immunoassay
US20070015291A1 (en) * 2005-07-18 2007-01-18 Smith Henry J Rapid test for glycated albumin in blood
ES2357679T3 (es) 2005-07-28 2011-04-28 Pfizer Products Inc. VACUNA CONTRA CALICIVIRUS FELINO (FCV) QUE COMPRENDE UNA PROTEINA DE CAPSIDA DE UN FCV O UNA PROTEINA DE LA CAPSIDA DE UN FCV AISLADA QUE COMPRENDE UNA SECUENCIA PROTEICA SEC ID Nº: 13 O SECUENCIAS PROTEICAS CON, AL MENOS, 95% DE IDENTIDAD CON ELLA.
US20080251599A1 (en) * 2007-04-11 2008-10-16 Ward Bennett C Vapor Emitting Device
US8287810B2 (en) * 2007-06-20 2012-10-16 Board Of Trustees Of Michigan State University Electrically-active ferromagnetic particle conductimetric biosensor test kit
US20090042237A1 (en) * 2007-08-06 2009-02-12 Henry John Smith Aptamer based point-of-care test for glycated albumin
US9739777B1 (en) 2007-09-06 2017-08-22 Abraxis Inc. Rapid analysis for cyanobacterial toxins
WO2009075894A1 (en) * 2007-12-13 2009-06-18 Beckman Coulter, Inc Device and methods for detecting a target cell
JP2011517488A (ja) * 2008-03-28 2011-06-09 デントグノステイツクス・ゲー・エム・ベー・ハー 体液からのタンパク質を吸収するための装置
CA2747244A1 (en) * 2008-12-12 2010-06-17 University Of Florida Research Foundation, Inc. Cell-based detection of apf through its interaction with ckap4 for diagnosis of interstitial cystitis
US9234889B1 (en) 2008-12-18 2016-01-12 Charm Sciences, Inc. Method and test strip for detecting residues
US20100167306A1 (en) * 2008-12-26 2010-07-01 Henry John Smith Rapid test for glycated albumin in saliva
EP3913367A1 (en) 2008-12-30 2021-11-24 Children's Medical Center Corporation Method of predicting acute appendicitis
DE102009010563A1 (de) 2009-02-16 2010-08-26 Matthias W. Engel Vorrichtung zum Nachweis von Analyten in Körperflüssigkeiten
US9347931B2 (en) 2009-04-23 2016-05-24 Dublin City University Lateral flow assay device for coagulation monitoring and method thereof
DK2462449T3 (en) 2009-08-03 2017-01-09 Yeda Res & Dev Urinary biomarkers for cancer diagnosis
ES2945032T3 (es) 2010-05-06 2023-06-28 Charm Sciences Inc Dispositivo de incubadora con lector
US8486717B2 (en) 2011-01-18 2013-07-16 Symbolics, Llc Lateral flow assays using two dimensional features
WO2012160563A2 (en) 2011-05-23 2012-11-29 Yeda Research And Development Co. Ltd. Use of akt phosphorylation as a biomarker for prognosing neurodegenerative diseases and treating same
US8859297B2 (en) 2011-05-23 2014-10-14 Board Of Trustees Of Michigan State University Detection of conductive polymer-labeled analytes
PL2718722T3 (pl) 2011-06-06 2018-04-30 Nationwide Children's Hospital, Inc. Oparty na proteomice diagnostyczny sposób wykrywania przewlekłego zapalenia zatok
US10739337B2 (en) 2011-08-30 2020-08-11 Board Of Trustees Of Michigan State University Extraction and detection of pathogens using carbohydrate-functionalized biosensors
US20150024415A1 (en) * 2012-02-16 2015-01-22 The Board Of Trustees Of The University Of Illinois Detection and quantification of analytes based on signal induced by alkaline phosphate
US9651549B2 (en) 2012-07-13 2017-05-16 Genisphere, Llc Lateral flow assays using DNA dendrimers
US9874556B2 (en) 2012-07-18 2018-01-23 Symbolics, Llc Lateral flow assays using two dimensional features
US20150366944A1 (en) 2013-02-20 2015-12-24 Yeda Research And Development Co. Ltd. Interferon treatment targeting mutant p53 expressing cells
CA2902484C (en) 2013-02-26 2021-05-18 Astute Medical, Inc. Lateral flow assay with test strip retainer
CN108051590B (zh) 2013-09-13 2020-12-11 Symbolics有限责任公司 运用二维试验和对照信号读出模式的侧向层析检测
US10921320B2 (en) 2015-03-30 2021-02-16 Entvantage Diagnostics, Inc. Devices and methods for diagnosis of sinusitis
US11650213B2 (en) 2015-03-30 2023-05-16 Entvantage Diagnostics, Inc. Devices and assays for diagnosis of viral and bacterial infections
SI3075862T1 (en) 2015-03-30 2018-02-28 Entvantage Diagnostics, Inc. Aids and tests for the diagnosis of sinusitis
CN115728482A (zh) 2015-04-06 2023-03-03 Blu诊断有限公司 用于检测唾液样品中的分析物的检测装置及使用方法
US11119102B1 (en) 2016-02-16 2021-09-14 Charm Sciences, Inc. Test device, method, and assembly
EP4073514A4 (en) 2019-12-11 2024-02-28 Ichilov Tech Ltd. NON-INVASIVE TEST TO DIFFERENTIATE FROM BACTERIAL AND VIRAL INFECTIONS
US20230295274A1 (en) 2020-07-27 2023-09-21 Single Cell Technology, Inc. Anti-sars coronavirus-2 spike protein antibodies

Family Cites Families (49)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SE388694B (sv) * 1975-01-27 1976-10-11 Kabi Ab Sett att pavisa ett antigen exv i prov av kroppvetskor, med utnyttjande av till porost berarmaterial bundna eller adsorberande antikroppar
DE2518283C3 (de) * 1975-04-24 1979-02-15 Bayer Ag, 5090 Leverkusen Verfahren zur Herstellung von Eisenoxidschwarzpigmenten
US4038485A (en) * 1976-03-18 1977-07-26 Miles Laboratories, Inc. Test composition, device, and method
US4361537A (en) * 1979-01-12 1982-11-30 Thyroid Diagnostics, Inc. Test device and method for its use
NL8000173A (nl) * 1980-01-11 1981-08-03 Akzo Nv Toepassing van in water dispergeerbare, hydrofobe kleurstoffen als label in immunochemische testen.
US4376110A (en) * 1980-08-04 1983-03-08 Hybritech, Incorporated Immunometric assays using monoclonal antibodies
US4786606A (en) * 1981-01-23 1988-11-22 Baxter Travenol Laboratories, Inc. Solid phase system for ligand assay
AR231590A1 (es) * 1981-04-29 1984-12-28 Ciba Geigy Ag Dispositivo de analisis inmunologico y procedimiento para obtenerlo
JPS5818167A (ja) * 1981-07-24 1983-02-02 Fuji Photo Film Co Ltd 分析フイルム及びこれを用いる分析方法
US4435504A (en) * 1982-07-15 1984-03-06 Syva Company Immunochromatographic assay with support having bound "MIP" and second enzyme
US4496654A (en) * 1983-04-08 1985-01-29 Quidel Detection of HCG with solid phase support having avidin coating
AU2706384A (en) * 1983-05-06 1984-11-08 Monoclonal Antibodies Inc. Colorimetric immunoassay on solid surface
US4594327A (en) * 1983-11-02 1986-06-10 Syntex (U.S.A.) Inc. Assay method for whole blood samples
US4757004A (en) * 1984-03-16 1988-07-12 Syntex (U.S.A.) Inc. Chromatographic devices having modified edges
US4756828A (en) * 1984-04-12 1988-07-12 Syntex (U.S.A.) Inc. Chromatographic strip having non-compressed edges
US4632901A (en) * 1984-05-11 1986-12-30 Hybritech Incorporated Method and apparatus for immunoassays
EP0186100B1 (en) * 1984-12-24 1992-04-01 Abbott Laboratories Analytical device and method for using same
US4740468A (en) * 1985-02-14 1988-04-26 Syntex (U.S.A.) Inc. Concentrating immunochemical test device and method
US4837395A (en) * 1985-05-10 1989-06-06 Syntex (U.S.A.) Inc. Single step heterogeneous assay
TW203120B (ja) * 1985-10-04 1993-04-01 Abbott Lab
US4748115A (en) * 1986-01-08 1988-05-31 Abbott Laboratories Substrate formulation in 2-amino-2-methyl-1-propanol buffer for alkaline phosphatase assays
US4916056A (en) * 1986-02-18 1990-04-10 Abbott Laboratories Solid-phase analytical device and method for using same
US4786594A (en) * 1986-05-14 1988-11-22 Syntex (U.S.A.) Inc. Enzyme immunoassay
AU602694B2 (en) * 1986-06-09 1990-10-25 Ortho Diagnostic Systems Inc. Improved colloidal gold membrane assay
JPH0611870B2 (ja) * 1986-06-27 1994-02-16 徳山曹達株式会社 無機化合物／染料複合体粒子
CA1288690C (en) * 1986-07-14 1991-09-10 Virginia Petro-Roy Apparatus and process for immunoassays
US4786589A (en) * 1986-08-18 1988-11-22 Huntington Medical Research Institute Immunoassay utilizing formazan-prelabeled reactants
US4806470A (en) * 1986-08-25 1989-02-21 Eastman Kodak Company Analytical element and method for theophylline determination having increased alkaline phosphatase isoenzyme
US4790979A (en) * 1986-08-29 1988-12-13 Technimed Corporation Test strip and fixture
US4959307A (en) * 1986-09-05 1990-09-25 Syntex (U.S.A.) Inc. Immunoseparating strip
US5030558A (en) * 1986-11-07 1991-07-09 Syntex (U.S.A.) Inc. Qualitative immunochromatographic method and device
AU592174B2 (en) * 1987-02-17 1990-01-04 Genesis Labs, Inc. Immunoassay test strip
JP2833624B2 (ja) * 1987-02-27 1998-12-09 日本化薬株式会社 診断試薬用ラテックス
EP0282192A1 (en) * 1987-03-09 1988-09-14 Quidel Competitive immunoassay for haptens using protein-hapten coupled solid phase
US4857453A (en) * 1987-04-07 1989-08-15 Syntex (U.S.A.) Inc. Immunoassay device
EP0312565B1 (en) * 1987-04-29 1993-03-03 Celltech Limited Binding assay device
CA1313616C (en) * 1987-06-01 1993-02-16 Robert B. Sargeant Lateral flow, non-bibulous membrane protocols
WO1988009824A1 (en) * 1987-06-05 1988-12-15 National Diagnostic Products (Australia) Pty. Limi Improvements in diagnostic test strips
US4954452A (en) * 1987-07-09 1990-09-04 Abbott Laboratories Non-metal colloidal particle immunoassay
DE3851725T2 (de) * 1987-07-17 1995-05-11 Porex Int Corp Diagnostisches System mit Anwendung eines einheitlichen Substrates für die Immobilisierung von Mikrosphären.
ZA885777B (en) * 1987-08-05 1989-10-25 Calypte Biomedical Self-contained multi-immunoassay diagnostic system
US4981786A (en) * 1987-09-04 1991-01-01 Syntex (U.S.A.) Inc. Multiple port assay device
EP0306772B1 (en) * 1987-09-11 1993-03-10 Abbott Laboratories Lateral flow chromatographic binding assay device
US4853335A (en) * 1987-09-28 1989-08-01 Olsen Duane A Colloidal gold particle concentration immunoassay
US4859612A (en) * 1987-10-07 1989-08-22 Hygeia Sciences, Inc. Metal sol capture immunoassay procedure, kit for use therewith and captured metal containing composite
US5104793A (en) * 1988-02-16 1992-04-14 Boehringer Mannheim Corporation Method for determining an analyte in a liquid sample using a zoned test device and an inhibitor for a label used in said method
US5137804A (en) * 1988-05-10 1992-08-11 E. I. Du Pont De Nemours And Company Assay device and immunoassay
US5252496A (en) * 1989-12-18 1993-10-12 Princeton Biomeditech Corporation Carbon black immunochemical label
KR910014705A (ko) * 1990-01-10 1991-08-31 원본미기재 세척이 필요없은 딥스틱(Dipstick) 형태의 이뮤노어세이(Immunoasssay)장치

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2003270244A (ja) * 2002-03-15 2003-09-25 Nisshinbo Ind Inc 生体物質の検出方法、及びこれに用いる検出用ユニット及び検出用デバイス
JP2008501124A (ja) * 2004-06-01 2008-01-17 ウーメディック インコーポレーテッド マクロおよびミクロマトリックスの迅速な検出および定量方法および装置

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