JPH06311827A - はたけしめじ新菌株及び栽培法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【構成】 はたけしめじ新菌株（Ｌｙｏｐｈｙｌｌｕｍ
ｄｅｃａｓｔｅｓ ＧＳ−２１０−２）が提供され
る。 【効果】 本菌株は、天然から分離したものであり、子
実体形成能にすぐれており、従来ほとんど人工栽培でき
なかったはたけしめじを多量に且つ簡単な操作で工業的
に生産することができる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、食用きのことして有用
なはたけしめじ（学名リオフィラム デカステス（Ｌｙ
ｏｐｈｙｌｌｕｍ ｄｅｃａｓｔｅｓ））の新菌株に関
するものであり、更に詳細には、自然界から新たに分離
するのに成功し、人工培地においてもすぐれた子実体形
成能を有する新菌株ＧＳ−２１０−２に関するものであ
り、また、本新菌株を栽培する方法にも関するものであ
る。

【０００２】

【従来の技術】はたけしめじの野生株を天然界より採取
し、これより菌糸体を分離し、これを培養増殖し、得ら
れた種菌を人工培地に接種しても、子実体形成が難し
く、人工培地での栽培は殆ど行われていない。

【０００３】はたけしめじは、きしめじ科、しめじ属に
属し、秋に林内や庭園、畑地、道端などのほか、時には
床下に多数群がって発生するが、食用とすれば極めて美
味である。はたけしめじの株の根本には菌束があり、地
下に埋まった木材などにつながっている（今関六也、本
郷次雄：原色日本新菌類図鑑１ 保育社．１９８７）と
いわれており、これら自然界に発生したものが採取さ
れ、食用に供されているのが実情である。しかし、はた
けしめじは比較的その生育場所が特定個所に限定される
ことなく発生していることにより、その人工栽培方法に
ついて、特開平３−２４４３２０号公報では、組織培養
で得た菌糸体を継代培養により無菌の種菌を得て、これ
をバーク堆肥又はオガクズと米糠を２〜５：１に混合し
た培養基を充填したポリプロピレン栽培瓶に接種し、７
０日前後培養した後、菌掻きを行い、水分を補給後瓶開
口部を黒ボク土により覆土を行って、更に３０日前後栽
培を行うと子実体が形成され、はたけしめじを得ること
が出来るとしている。その場合の収量（対培地当たり）
は約２０％であった。

【０００４】又、特開平３−２９７３２７号公報では、
瓶栽培で吸水と覆土処理により全栽培日数が１００〜１
６０日、収量１５〜２５％（対培地当たり）の栽培結果
が得られた。更に特開平４−２１１３０８号公報では、
子実体形成能の優れた菌株を選択し、瓶栽培で吸水と覆
土処理により全栽培日数約９０日、収量２５〜２９％
（対培地当たり）の栽培結果が得られている。特開平４
−３５６１３３号公報では一度培養を完了した菌床を鉱
物質の第二の菌床に埋没させる事で子実体を得、全栽培
日数８０〜１２０日、収量２０〜２５％（対培地当た
り）の結果を得ているのが現状である。つまり、はたけ
しめじの栽培には長期間を要するだけでなく、その収率
も低い、換言すればはたけしめじの工業的製造は極めて
困難である、というのが当業界の実情である。

【０００５】

【発明が解決しようとする課題】人工培地でのはたけし
めじの栽培は、菌の生育が極めて不安定であるばかり
か、菌糸の蔓延後も子実体形成に確実性がない。又前記
特開平３−２９７３２７号公報、特開平４−２１１３０
８号公報、特開平４−３５６１３３号公報等に示される
ように、菌掻きし、水分を補給した後、瓶開口部に鉱物
質の覆土を行うことや、鉱物質の第二の菌床に埋没させ
ることや、海外で分離した新菌株で栽培することによ
り、子実体発生の安定性を確保し、栽培期間の短縮を行
う方法もあるが、一般のひらたけ、えのきたけ、まいた
け等の人工栽培における全栽培日数や培地量に対する子
実体収量に比べ、その全栽培日数は長く、収量も少な
い。

【０００６】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、従来人工
栽培が難しく殆ど行われておらず、天然界よりの採取の
みに頼っていたはたけしめじについて、これを他の一般
きのこ同様人工培地での栽培を確実にし、栽培日数を短
縮し、収量を増大させる目的で、つまりはたけしめじの
工業的生産システムを確立する目的で、しかも遺伝子操
作や人工的な変異によることなく、天然に存在するすぐ
れた菌株を発見すべく、北海道各地よりはたけしめじ天
然株の採取を行い人工栽培に適する菌株のスクリーニン
グにつき鋭意研究を行ったところ、極めて収量が高く、
栽培日数も短時日で子実体を採取し得るはたけしめじ新
菌株を見出したものである。

【０００７】菌株のスクリーニングは以下のごとく行っ
た。ＡＭ液体培地（組成：グルコース２％、ポリペプト
ン０．５％、マルトエキストラクト０．３％、イースト
エキストラクト０．３％、Ｋ₂ＨＰＯ₄ ０．１％、Ｍｇ
ＳＯ₄・７Ｈ₂Ｏ ０．１％，ｐＨ６．０）１００ｍｌの
入った５００ｍｌ容振とうフラスコ（オートクレーブ滅
菌済）にはたけしめじ各菌株を接種し、２５℃で１０日
間振とう培養し液体種菌とした。調製した各菌株の種菌
は、それぞれカバオガクズ７００ｇ、バーク堆肥１００
ｇ、ふすま７０ｇ、大豆粕７０ｇ、コーン糠７０ｇに水
を加えて水分約６５％の人工培養基を調製し、これを市
販の７，０００ｍｌ容ポリプロピレン製栽培袋に２，０
００ｇを充填し、レンガ状に成型し１２０℃、１８０分
滅菌した培地に５０ｍｌ接種した。種菌は各菌株毎に各
１０袋に接種し、培養室で２５℃、湿度５０〜７０％で
４５〜９０日間培養し、菌糸が蔓延し菌糸膜が培養基を
覆い、原基が形成され始めた後、温度１５〜１９℃、相
対湿度９５〜１００％の発茸室に移し、ポリプロピレン
袋を切り裂いて培養基を取り出して棚に載置した。発茸
室では１００〜３００ルックス１２時間明暗周期の照明
条件で栽培し子実体を形成させた。はたけしめじ各菌株
の子実体収量、全栽培日数を下記の表１に示す。

【０００８】

【表１】

【０００９】上記結果より明らかなように、ＧＳ−２１
０−２株は栽培日数が８５日と短く、収量も約６８０ｇ
と多く、対培地当たりの収量は３４％となり、その子実
体も形状は天然採取物と同等の優れた性状を示した。

【００１０】子実体は群生、傘は３〜７ｃｍ、半球状〜
まんじゅう形で成熟すると平になる。表面は灰褐色で、
成熟すると淡褐色となる。縁部は下方に巻く。肉は白色
〜帯白色で多少の粉臭がある。ヒダは白色で直生〜湾生
で、密。柄は５〜８ｃｍ×５〜１０ｍｍで、上下同大か
下方がややふくらみ、淡褐色。胞子は殆ど球形で平滑で
あり、５〜７×５〜８μｍ。

【００１１】以上の特徴を今関六也、本郷次雄「原色日
本新菌類図鑑１」保育社．（１９８７）の記載と比較す
ると、当菌株ははたけしめじであることが明かである。

【００１２】次に当菌株の菌学的諸性質を以下に示す。

【００１３】（１）麦芽エキス寒天培地における生育状
態（２５℃） １０日目で旺盛な生育、菌そうの直径１５ｍｍ、白色で
密な綿毛状菌糸、培地、裏面とも変化無し。２０日目で
旺盛な生育、菌そうの直径３２ｍｍ、白色〜淡黄色のや
や密な綿毛状菌糸、培地裏面中央部褐変。３０日目で旺
盛な生育、菌そうの直径３８ｍｍ、白色〜淡黄色の密な
綿毛状菌糸。培地裏面中央部褐変。

【００１４】（２）バレイショ・ブドウ糖寒天培地にお
ける生育状態（２５℃） １０日目で旺盛な生育、菌そうの直径１３ｍｍ、白色で
密な綿毛状菌糸、培地、裏面とも変化無し。２０日目で
旺盛な生育、菌そうの直径３３ｍｍ、白色で密な綿毛状
菌糸、培地、裏面とも変化無し。３０日目で旺盛な生
育、菌そうの直径４９ｍｍ、白色で密な綿毛状菌糸、中
央部から周辺部に向け絹糸状菌糸、培地、裏面とも変化
無し。

【００１５】（３）ツアペック寒天培地における生育状
態（２５℃） １０日目で僅かに生育、接種片の周縁部に１〜２ｍｍの
白色で粗の絹糸状菌糸、培地、裏面とも変化無し。２０
日目で中程度の生育、菌そうの直径１６ｍｍ、白色で粗
な絹糸状菌糸、培地、裏面とも変化無し。３０日目で中
程度の生育、菌そうの直径２３ｍｍ、白色で粗な絹糸状
〜膜状菌糸。培地、裏面とも変化無し。

【００１６】（４）サブロー寒天培地における生育状態
（２５℃） １０日目で旺盛な生育、菌そうの直径１７ｍｍ、白色で
やや密な綿毛状菌糸。培地、裏面とも変化無し。２０日
目で旺盛な生育、菌そうの直径３２ｍｍ、白色〜淡黄色
でやや密な綿毛状菌糸、培地裏面やや黄変。３０日目で
旺盛な生育、菌そうの直径３８ｍｍ、白色〜淡黄色で中
央部は密な綿毛状菌糸、周辺部は膜状菌糸、培地裏面中
央部黄褐変。

【００１７】（５）オートミール寒天培地における生育
状態（２５℃） １０日目で中程度の生育、菌そうの直径１７ｍｍ、極薄
い膜状の菌糸、培地、裏面とも変化無し。２０日目で旺
盛な生育、菌そうの直径４０ｍｍ、中央部白色で粗の綿
毛状菌糸、周辺部薄い膜状の菌糸、培地、裏面とも変化
無し。３０日目で旺盛な生育、菌そうの直径７０ｍｍ、
中央部（４５〜５０ｍｍ）白色で粗の綿毛状菌糸、周辺
部薄い膜状の菌糸、培地、裏面とも変化無し。

【００１８】（６）０．１％没食子酸添加バレイショ・
ブドウ糖寒天培地（フェノールオキシダーゼ検定培地）
における生育状態（２５℃） １０日目で接種片上に褐色綿毛状の菌糸僅かに生育、培
地直径２５ｍｍで褐変。２０日目、３０日目とも１０日
目と同様の生育状態。

【００１９】（７）最適生育温度 ＡＭ液体培地１０ｍｌを直径１６．５ｍｍのＬ型試験管
に分注し、１２０℃、２０分滅菌した。冷却後予め液体
培養していた種菌を無菌的に１０，０００ｒｐｍ、１０
秒ホモジナイズし、１ｍｌを接種した。その後、温度勾
配培養装置（東洋科学産業（株）・ＭＯＤＥＬ ＴＮ−
３型）を用い、温度を５〜５０℃に設定し、６０回／分
振とうしながら７日間培養した。集菌後、乾燥してその
生育菌体重量を測定したところ、１４〜３１℃で生育が
認められ、２０〜３０℃で良好な生育を示した。特に２
３〜２９℃で旺盛な生育を示し、最適生育温度は２６〜
２８℃であった。又、３２℃では全く生育が認められな
かった。

【００２０】（８）最適生育ｐＨ 各ｐＨに調整したＡＭ液体培地１００ｍｌを５００ｍｌ
容振とうフラスコに分注し、１２０℃、２０分滅菌し
た。冷却後予め液体培養していた種菌を無菌的に１０，
０００ｒｐｍ、１０秒ホモジナイズし、５ｍｌを接種し
た。その後、２５℃、１３０ｒｐｍで８日間振とう培養
した。集菌後、乾燥してその生育菌体重量を測定したと
ころ、最適生育ｐＨは６．５付近であり、生育範囲はｐ
Ｈ５．５〜８．０であった。ｐＨ５．０以下では全く生
育が認められなかった。

【００２１】（９）糖の資化性 バクトソイトン０．２％、イーストエキストラクト０．
２％、Ｋ₂ＨＰＯ₄ ０．１％、ＭｇＳＯ₄・７Ｈ₂Ｏ
０．１％、ｐＨ６．５の組成の培地９０ｍｌを５００ｍ
ｌ容振とうフラスコに分注し、１２０℃、２０分滅菌し
た後、検定する炭素源の２０％溶液を０．２μのメンブ
ランフィルターで無菌濾過し、その１０ｍｌを添加し、
糖資化性検定培地とした。次に予め液体培養していた種
菌を無菌的に１０，０００ｒｐｍ、１０秒ホモジナイズ
し、５ｍｌを接種し、２５℃、１３０ｒｐｍで１４日間
振とう培養した。集菌後、乾燥してその生育菌体重量を
測定し、各炭素源の資化性を判定した。下記の表２に標
準株３株（ＩＦＯ ３０１６１、ＩＦＯ ３０２６０、
ＩＦＯ ３１１６７）とＧＳ−２１０−２株の各炭素源
の資化性を示した。

【００２２】

【表２】

【００２３】上記結果から明らかなように、ＧＳ−２１
０−２株はマンノース、フラクトース、グルコース、マ
ルトース、デキストリン、澱粉を資化し、ラクトース、
ソルビトール、マンニトールを僅かに資化し、アラビノ
ース、キシロース、ガラクトース、セロビオース、スク
ロース、メリビオース、ラフィノース、グリセリン、α
−メチル−Ｄ−グルコシッドを資化出来なかった。これ
に対しＩＦＯ ３０１６１株はセロビオース、グリセリ
ンを資化出来た。ＩＦＯ ３０２６０株はセロビオー
ス、スクロース、グリセリンを資化出来た。ＩＦＯ ３
１１６７株はアラビノース、スクロース、メリビオー
ス、ラフィノース、グリセリン、α−メチル−Ｄ−グル
コシッドは資化出来た。

【００２４】糖の資化性よりＧＳ−２１０−２株が標準
株３株とは異なる新菌株である事は明白である。

【００２５】更に、はたけしめじＧＳ−２１０−２株と
はたけしめじ標準株３株との異同について、寒天培地上
における対峙培養により確認した。各菌株の保存スラン
トより５ｍｍ×５ｍｍの菌そう切片を掻き取り、それぞ
れをＬＭ寒天培地（グルコース２％、バクトソイトーン
０．１５％、イーストエキストラクト０．１５％、寒天
２％、ｐＨ６．０）の中央部に対峙して約２ｃｍ離して
接種し、２５℃、２０日間培養後、対峙した各菌株の境
界部における帯線形成の有無について判定した。結果を
下記表３に示した。

【００２６】

【表３】

【００２７】上記結果より明らかなように、ＧＳ−２１
０−２株は標準株３株全てと帯線を形成し、標準株３株
とは異なる新菌株である事は明白である。これらの性質
及び前記した各種菌学的性質から、本菌株ははたけしめ
じに属する新菌株と同定した。そして当菌株は、Ｌｙｏ
ｐｈｙｌｌｕｍ ｄｅｃａｓｔｅｓ ＧＳ−２１０−２
と命名され、工業技術院生命工学工業技術研究所に、Ｆ
ＥＲＭ Ｐ−１３５１９として寄託されている。

【００２８】本発明のはたけしめじ新菌株は、通常の菌
床人工栽培法で栽培することが出来、しかも従来一般的
に実施されている菌掻き、浸水、芽出しの工程を省ける
ため、全栽培日数を大幅に短縮することが出来た。

【００２９】以下、実施例を述べる。

【００３０】

【実施例】ＡＭ液体培地（組成：グルコース２％、ポリ
ペプトン０．５％、マルトエキストラクト０．３％、イ
ーストエキストラクト０．３％、Ｋ₂ＨＰＯ₄ ０．１
％、ＭｇＳＯ₄・７Ｈ₂Ｏ ０．１％，ｐＨ６．０）１０
０ｍｌの入った５００ｍｌ容振とうフラスコ（オートク
レーブ滅菌済）にはたけしめじ新菌株ＧＳ−２１０−２
株（ＦＥＲＭ Ｐ−１３５１９）を接種し、２５℃で１
０日間振とう培養し液体種菌を調製した。調製した液体
種菌は滅菌水で３倍に希釈し、カバオガクズ５００ｇ、
ニレオガクズ２００ｇ、バーク堆肥１００ｇ、ふすま７
０ｇ、大豆粕７０ｇ、コーン糠７０ｇに水を加えて水分
約６５％の人工培養基を調製し、これを市販の７，００
０ｍｌ容ポリプロピレン製栽培袋に２，０００ｇを充填
し、レンガ状に成型し１２０℃、１８０分滅菌した培地
に５０ｍｌ接種した。種菌は１０袋に接種し、培養室で
温度２５℃、湿度５０〜７０％で５０〜５５日間培養
し、菌糸が蔓延し菌糸膜が培養基を覆い、原基が形成さ
れ始めた後、温度１５〜１９℃、相対湿度９５〜１００
％の発茸室に移し、ポリプロピレン袋を切り裂いて培養
基を取り出して棚に載置した。発茸室では１００〜３０
０ルックス１２時間明暗周期の照明条件で栽培し子実体
を形成させた。その結果、得られた子実体の１袋当たり
の重量は６０７．３ｇ、全栽培日数は７７．０日間であ
った。又、その形状は天然品と変わらず、食味も非常に
美味であった。

【００３１】

【発明の効果】本発明のはたけしめじ新菌株を使用する
ことにより、従来人工培養基での栽培が難しかったもの
が普通のきのこ人工栽培同様に子実体を得ることを可能
とし、かつその栽培日数を極めて短時日としながら、そ
の収量は培地量に対し通常のきのこに劣らない量以上を
得ることが出来るものである。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁵ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ１２Ｒ 1:645）

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 子実体形成能のすぐれたはたけしめじ
   （Ｌｙｏｐｈｙｌｌｕｍ ｄｅｃａｓｔｅｓ）新菌株
   ＧＳ−２１０−２。
2. 【請求項２】 子実体形成能のすぐれたはたけしめじ
   （Ｌｙｏｐｈｙｌｌｕｍ ｄｅｃａｓｔｅｓ）新菌株Ｇ
   Ｓ−２１０−２を人工培養基に接種して栽培することを
   特徴とするはたけしめじの栽培方法。