JPH06256261A - エンドセリン−１拮抗物質 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 （修正有） 【構成】 式Ｉを有するナオコール−Ａなど、またはイソナオコー
ル−Ｄ¹ など。（ナオコール−ＡはＸが水酸基、Ｗがカ
ルボニル基、Ｒ¹ ，Ｒ² は共に水素原子、Ｙは基（II）
を示す。） （イソナオコール−Ｄ¹ はＸが水酸基、Ｗが基＝ＣＨ−
ＯＨ、Ｒ¹ ，Ｒ² が一緒に結合して単結合を示し、Ｙが
基（III）を示す。） 【効果】ナオコール類などはエンドセリン−１拮抗活性
を示し、例えば高血圧、狭心症、心筋梗塞、くも膜下出
血、腎不全など、あるいは気管支喘息等の予防薬および
治療薬として有用である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明はエンドセリン−１拮抗物
質であるナオコール類およびイソナオコール類ならびに
これらの製造法に関する。

【０００２】

【従来の技術】エンドセリン−１（ＥＴ−１）は、柳沢
らにより豚大動脈内皮細胞の培養上清により単離された
２１個のアミノ酸からなる血管収縮因子である（M.Yana
gisawaら、 Nature、 332巻、 411 頁；M.Yanagisawaら、
Proc.Natl.Acad.Sci.USA、86巻、2863頁 (1989年) ）。
エンドセリン−１は既知の血管収縮因子の中で最も強
く、且つ持続作用を有している。そして、重篤な血管瀲
縮に関し、本態性高血圧、冠瀲縮性狭心症、急性心筋梗
塞、くも膜下出血、腎不全などの症例では有意な血中エ
ンドセリン−１濃度の上昇が認められている。またエン
ドセリン−１は、血管系以外の平滑筋にも作用し（Anne
-Charlotteら、Life Sci. 、 45 巻、 1499頁 (1989年
)； Maggi ら、 Eur.J.Pharmacology 、 154巻、 277
頁 (1989年)）、特に気道平滑筋に対する作用が、気管
支喘息等の閉塞性気道疾患との関連から注目されてい
る。従って、エンドセリン−１受容体を選択的に阻害す
れば、上記疾患の予防剤および治療剤となり得る。

【０００３】そして、現在までエンドセリン−１拮抗物
質として知られている化合物としては例えば次のような
化合物があげられる。天然由来のペプチド性化合物とし
て、例えば微生物ストレプトミセス ミサキエンシス
（Streptomyces misakiensis）ＢＡ１８２５７より産生
されるＢＥ１８２５７ＡおよびＢ（K.Kojiriら、 J.Anti
biotics、 44 巻、 1342頁(1991 年) ；M.Ihara ら、Bioc
hem.Biophy.Res.Comm.、178 巻、 132 頁(1991 年) ）、
ストレプトマイセス エスピー(Streptomyces sp.) Ｎ
ｏ．７３３８より産生されるＷＳ−７３３８Ａ、Ｂ、Ｃ
およびＤ（S.Miyataら、J.Antibiotics、 45 巻、 74頁(1
992 年) ）、またはミクロビスポラ エスピー（Microb
ispora sp.）ＡＴＣＣ５５１４０より産生されるコチン
ミシン(cochinmicin) Ｉ、ＩＩおよびＩＩＩ(Y.K.Tony
Lam ら、J.Antibiotics、 45 巻、 1709頁(1992 年) ； D
eborah Zink ら、J.Antibiotics、 45 巻、 1717頁(1992
年))などがある。

【０００４】更に、化学合成で得られるペプチド性化合
物として、ＷＳ−７３３８の構造（S.Miyataら、J.Anti
biotics、 45 巻、 74頁(1992 年) ）を基にして、化学合
成誘導体ＢＱ１２３およびＢＱ１５３（M.Ihara ら、 L
ife Sci.、 50巻、 247 頁(1992 年) ； K.Ishikawa ら、
J.Med.Chem.、 35 巻、 2139頁(1992 年）) 、環状ペンタ
ペプチド（特開平４−２６１１９８号）などもエンドセ
リン−１拮抗物質として知られている。

【０００５】また、天然由来の非ペプチド性化合物とし
て微生物ストレプトマイセス エスピー(Streptomyces
sp.) Ｎｏ．８９００９より産生されるＷＳ００９Ａお
よびＢ（S.Miyataら、J.Antibiotics、 45 巻、 1029頁(1
992 年) ；ibid.、 45 巻、 1041頁(1992 年) ）、または
微生物ペニシリウム シトリナム(Penicillium citrinu
m)ＦＬ−８５５６より産生されるＴＡＮ−１４１５Ａお
よびＢ並びにその化学合成誘導体（特開平４−１３４０
４８号）がエンドセリン−１拮抗物質として知られてい
る。

【０００６】一方、海洋生物から数多くの生理活性物質
が得られているが、エンドセリン−１拮抗物質としては
ナオコール類、イソナオコール類が初めてである。ま
た、イソナオコール類は海洋生物、特に海藻類から得ら
れるプレニルハイドロキノン類に属するが（D.J.Faulkn
er、Natural Product Reports 、 323頁(1992 年) ）、
ナオコール類はその前駆体と考えられるフェニルエーテ
ル誘導体に属し、今まで知られていない構造上また生合
成上、興味ある化合物である。

【０００７】

【発明が解決しようとする課題】本発明者らはエンドセ
リン−１拮抗物質を海洋資源に求め研究を行った結果、
島根県隠岐ノ島で採集した褐藻植物ホンダワラ科ホンダ
ワラ属アキヨレモク（Sargassum autumnale ）の脂溶性
エキスに強いエンドセリン−１受容体結合阻害活性を有
するナオコール類およびイソナオコール類を見出し、本
発明を完成した。

【０００８】

【課題を解決するための手段】本発明は式

【０００９】

【化４】

【００１０】を有するナオコール−Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ¹ ま
たはＤ² あるいはイソナオコール−Ｄ¹ またはＤ² に関
する。

【００１１】但し式中、ナオコール−ＡはＸが水酸基を
示し、Ｗがカルボニル基を示し、Ｒ¹ およびＲ²が共に
水素原子を示し、Ｙが下記の基（ＩＩ）を示す。

【００１２】ナオコール−ＢはＸが水素原子を示し、Ｗ
がカルボニル基を示し、Ｒ¹ およびＲ² が共に水素原子
を示し、Ｙが下記の基（ＩＩ）を示す。

【００１３】ナオコール−ＣはＸが水酸基を示し、Ｗが
基＝ＣＨ−ＯＨを示し、Ｒ¹ およびＲ² が共に水素原子
を示し、Ｙが下記の基（ＩＩ）を示す。

【００１４】ナオコール−Ｄ¹ はＸが水酸基を示し、Ｗ
が基＝ＣＨ−ＯＨを示し、Ｒ¹ およびＲ² が一緒に結合
して単結合を示し、Ｙが下記の基（ＩＩ）を示す。

【００１５】ナオコール−Ｄ² はＸが水酸基を示し、Ｗ
が基＝ＣＨ−ＯＨを示し、Ｒ¹ およびＲ² が一緒に結合
して単結合を示し、Ｙが下記の基（ＩＩ）を示す。

【００１６】イソナオコール−Ｄ¹ はＸが水酸基を示
し、Ｗが基＝ＣＨ−ＯＨを示し、Ｒ¹ およびＲ² が一緒
に結合して単結合を示し、Ｙが下記の基（ＩＩＩ）を示
す。

【００１７】イソナオコール−Ｄ² はＸが水酸基を示
し、Ｗが基＝ＣＨ−ＯＨを示し、Ｒ¹ およびＲ² が一緒
に結合して単結合を示し、Ｙが下記の基（ＩＩＩ）を示
す。

【００１８】ここに、基（ＩＩ）は

【００１９】

【化５】

【００２０】であり、基（ＩＩＩ）は

【００２１】

【化６】

【００２２】である。

【００２３】ここに、ナオコール−Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ¹ ま
たはＤ² あるいはイソナオコール−Ｄ¹ またはＤ² は、
以下の理化学的性質を有する。

【００２４】（１）ナオコール−Ａ １）構造式

【００２５】

【化７】

【００２６】２）物質の性状：無色中性脂溶性油状物質 ３）比旋光度：［α］_D ²⁵ −168.7 °（ C 0.99、クロ
ロホルム） ４）マススペクトル（m /z）：486、 454、 436、 369、 35
3、 163、 135、 83 ５）分子量：486.65（高分解能マススペクトル） ６）分子式：C₂₉ H₄₂ O₆（高分解能マススペクトル）。

【００２７】７）紫外線吸収スペクトル：λ_max nm
（ε） エタノール中で測定した紫外線吸収スペクトルは、次に
示す通りである。 225(6600) 、292.9(2200) 。

【００２８】８）赤外線吸収スペクトル：ν_max cm^-1 クロロホルム中で測定した赤外線吸収スペクトルは、次
に示す通りである。 3450、 1730、 1705、 1610、 1590、 1495、 1460、 1410、 13
80、 1360、 1220、 1200、 1165、 1100、 920 。

【００２９】９）¹H- 核磁気共鳴スペクトル：重クロロ
ホルム中、内部基準にテトラメチルシランを使用して測
定した核磁気共鳴スペクトル（400 MHz ）は、次に示す
通りである。 1.05(3H、d)、 1.32(3H、m)、 1.36(3H、s)、 1.55(3H、s)、 1.
58(1H、m)、 1.72(2H、m)、 1.80(3H、s)、 1.86(3H、s)、 1.94(2H、m)、 2.
07(2H、m)、 3.58(2H、q)、 3.68(3H、s)、 4.86(1H、d)、 4.98(1H、d)、 5.
09(1H、t)、 5.17(1H、d)、 5.18(1H、d)、 6.04(1H、dd)、 6.57(1H、dd)、 6.68(1H、d)、 6.91(1H、d)。

【００３０】１０）¹³C-核磁気共鳴スペクトル：重クロ
ロホルム中、内部基準にテトラメチルシランを使用して
測定した核磁気共鳴スペクトル（100 MHz ）は、次に示
す通りである。 15.7(q)、 16.1(q)、 18.6(q)、 22.3(t)、 22.5(q)、 25.3
(t)、 25.9(q)、 33.6(t)、 36.4(t)、 39.4(t)、 41.3(d)、 42.0
(t)、 51.8(q)、 74.3(d)、 81.7(s)、 114.1(d)、 114.2(t)、 11
7.7(d)、 119.7(d)、 121.1(d)、 124.6(d)、 127.2(s)、 134.6(s)、
139.9(s)、 143.6(d)、 148.0(s)、 149.8(s)、 172.3(s)、 214.6(s)。

【００３１】１１）溶解性：メタノール、エタノール、
アセトン、クロロホルム、酢酸エチルに可溶、ヘキサン
に難溶、水に不溶。

【００３２】（２）ナオコール−Ｂ １）構造式

【００３３】

【化８】

【００３４】２）物質の性状：無色中性脂溶性油状物質 ３）比旋光度：［α］_D ²⁵ −9.7 °（ C 0.96、クロロ
ホルム） ４）マススペクトル（m /z）：470、 438、 369、 219、 18
2、 150、 139 ５）分子量：470.65（高分解能マススペクトル） ６）分子式：C₂₉ H₄₂ O₅（高分解能マススペクトル）。

【００３５】７）紫外線吸収スペクトル：λ_max nm
（ε） エタノール中で測定した紫外線吸収スペクトルは、次に
示す通りである。 227.8(8200) 、292.7(2600) 。

【００３６】８）赤外線吸収スペクトル：ν_max cm^-1 クロロホルム中で測定した赤外線吸収スペクトルは、次
に示す通りである。 3600、 3350、 1730、 1705、 1600、 1495、 1435、 1410、 13
75、 1340、 1165、 1095、 990 。

【００３７】９）¹H- 核磁気共鳴スペクトル：重クロロ
ホルム中、内部基準にテトラメチルシランを使用して測
定した核磁気共鳴スペクトル（400 MHz ）は、次に示す
通りである。 1.06(3H、d)、 1.31(1H、m)、 1.36(3H、s)、 1.36(2H、m)、 1.
55(3H、s)、 1.62(3H、s)、 1.64(1H、m)、 1.75(2H、m)、 1.75(3H、s)、 1.
94(2H、m)、 2.10(2H、m)、 2.57(1H、m)、 3.14(2H、d)、 3.58(2H、q)、 3.
68(3H、s)、 5.10(1H、t)、 5.17(1H、d)、 5.18(1H、d)、 5.29(1H、t)、 6.
04(1H、dd)、 6.58(1H、dd)、 6.68(1H、d)、 6.91(1H、d) 。

【００３８】１０）¹³C-核磁気共鳴スペクトル：重クロ
ロホルム中、内部基準にテトラメチルシランを使用して
測定した核磁気共鳴スペクトル（100 MHz ）は、次に示
す通りである。 15.7(q)、 16.4(q)、 18.0(q)、 22.4(t)、 22.5(q)、 25.5
(t)、 25.7(q)、 32.6(t)、 36.3(t)、 39.6(t)、 41.0(t)、 42.1
(t)、 45.7(d)、 51.8(q)、 81.6(s)、 114.1(d)、 114.2(t)、 11
6.0(d)、 117.8(d)、 119.7(d)、 124.3(d)、 126.9(s)、 134.9(s)、
135.5(s)、 143.7(d)、 147.6(s)、 150.3(s)、 172.7(s)、 213.8(s)。

【００３９】１１）溶解性：メタノール、エタノール、
アセトン、クロロホルム、酢酸エチルに可溶、ヘキサン
に難溶、水に不溶。

【００４０】（３）ナオコール−Ｃ １）構造式

【００４１】

【化９】

【００４２】２）物質の性状：無色中性脂溶性油状物質 ３）比旋光度：［α］_D ²⁵ ＋6.3 °（ C 0.71、クロロ
ホルム） ４）マススペクトル（m /z）：４７０、 ４３８、 ４
０４、 １８３、 １８２、 １５１、 １２３ ５）分子量：４８８．６６（高分解能マススペクトル） ６）分子式：C₂₉ H₄₄ O₆（高分解能マススペクトル）。

【００４３】７）紫外線吸収スペクトル：λ_max nm
（ε） エタノール中で測定した紫外線吸収スペクトルは、次に
示す通りである。 228.7(5600) 、292.5(2100) 。

【００４４】８）赤外線吸収スペクトル：ν_max cm^-1 クロロホルム中で測定した赤外線吸収スペクトルは、次
に示す通りである。 3600、 3350、 1730、 1600、 1495、 1435、 1410、 1370、 13
40、 1165 1100、 890 。

【００４５】９）¹H- 核磁気共鳴スペクトル：重クロロ
ホルム中、内部基準にテトラメチルシランを使用して測
定した核磁気共鳴スペクトル（400 MHz ）は、次に示す
通りである。 0.96(3H、d)、 1.19(1H、m)、 1.31(1H、m)、 1.35(1H、m)、 1.
37(3H、s)、 1,46(1H、m)、 1.56(3H、s)、 1.65(1H、m)、 1.73(3H、s)、 1.
75(2H、m)、 1.77(3H、s)、 1.96(2H、m)、 2.07(2H、m)、 3.45(1H、d)、 3.
58(2H、q)、 3.68(3H、s)、 4.39(1H、dd)、 5.09(1H、t)、 5.17(1H、d)、
5.18(1H、d)、 5.34(1H、d)、 6.04(1H、dd)、 6.57(1H、dd)、 6.68(1H、d)、
6.91(1H、d)。

【００４６】１０）¹³C-核磁気共鳴スペクトル：重クロ
ロホルム中、内部基準にテトラメチルシランを使用して
測定した核磁気共鳴スペクトル（100 MHz ）は、次に示
す通りである。 14.3(q)、 15.8(q)、 18.5(q)、 22.3(t)、 22.6(q)、 25.1
(t)、 26.0(q)、 32.9(t)、 34.2(d)、 36.3(t)、 39.8(t)、 41.9
(t)、 51.9(q)、 69.5(d)、 77.1(d)、 81.7(s)、 114.1(d)、 114.
2(t)、 117.7(d)、 119.7(d)、 123.3(d)、 124.0(d)、 127.7(s)、
135.3(s)、 138.5(s)、 143.7(d)、 148.0(s)、 149.9(s)、 172.4(s)。

【００４７】１１）溶解性：メタノール、エタノール、
アセトン、クロロホルム、酢酸エチルに可溶、ヘキサン
に難溶、水に不溶。

【００４８】（４）ナオコール−Ｄ¹ １）構造式

【００４９】

【化１０】

【００５０】２）物質の性状：無色中性脂溶性油状物質 ３）比旋光度：［α］_D ²⁵ ＋2.6 °（ C 0.76、クロロ
ホルム） ４）マススペクトル（m /z）：468、 450、 369、 311、 18
9、 163 ５）分子量：486.65（高分解能マススペクトル） ６）分子式：C₂₉ H₄₂ O₆（高分解能マススペクトル）。

【００５１】７）紫外線吸収スペクトル：λ_max nm
（ε） エタノール中で測定した紫外線吸収スペクトルは、次に
示す通りである。 228.0(8700) 、292.6(3200) 。

【００５２】８）赤外線吸収スペクトル：ν_max cm^-1 クロロホルム中で測定した赤外線吸収スペクトルは、次
に示す通りである。 3600、 3350、 1730、 1610、 1590、 1495、 1440、 1170、 11
00、 1010。

【００５３】９）¹H- 核磁気共鳴スペクトル：重クロロ
ホルム中、内部基準にテトラメチルシランを使用して測
定した核磁気共鳴スペクトル（400 MHz ）は、次に示す
通りである。 1.36(3H、s)、 1.58(3H、s)、 1.66(3H、s)、 1.69(2H、m)、 1.
73(3H、s)、 1.78(3H、s)、 2.00(2H、m)、 2.09(2H、m)、 2.15(2H、m)、 3.
58(2H、q)、 3.68(3H、s)、 3.87(1H、d)、 4.31(1H、dd)、 5.11(1H、t)、
5.16(1H、d)、 5.17(1H、d)、 5.19(1H、d)、 5.47(1H、t)、 6.04(1H、dd)、
6.57(1H、dd)、 6.67(1H、d)、 6.91(1H、d)。

【００５４】１０）¹³C-核磁気共鳴スペクトル：重クロ
ロホルム中、内部基準にテトラメチルシランを使用して
測定した核磁気共鳴スペクトル（100 MHz ）は、次に示
す通りである。 11.9(q)、 15.8(q)、 18.6(q)、 22.3(t)、 22.5(q)、 26.0
(q)、 26.0(t)、 36.3(t)、 39.1(t)、 41.9(t)、 51.8(q)、 69.3(d)、 80.2
(d)、 81.7(s)、 114.1(d)、 114.2(t)、 117.7(d)、 119.7(d)、 1
23.5(d)、 124.6(d)、 127.2(s)、 129.4(d)、 133.7(s)、 134.8(s)、
139.0(s)、 143.6(d)、 148.0(s)、 149.9(s)、 172.4(s)。

【００５５】１１）溶解性：メタノール、エタノール、
アセトン、クロロホルム、酢酸エチルに可溶、ヘキサン
に難溶、水に不溶。

【００５６】（５）ナオコール−Ｄ² １）構造式

【００５７】

【化１１】

【００５８】２）物質の性状：無色中性脂溶性油状物質 ３）比旋光度：［α］_D ²⁵ ＋4.5 °（ C 0.95、クロロ
ホルム） ４）マススペクトル（m /z）：468、 450、 369、 351、 31
1、 189、 163 ５）分子量：486.65（高分解能マススペクトル） ６）分子式：C₂₉ H₄₂ O₆（高分解能マススペクトル）。

【００５９】７）紫外線吸収スペクトル：λ_max nm
（ε） エタノール中で測定した紫外線吸収スペクトルは、次に
示す通りである。 229.0(7200) 、292.1(2600) 。

【００６０】８）赤外線吸収スペクトル：ν_max cm^-1 クロロホルム中で測定した赤外線吸収スペクトルは、次
に示す通りである。 3600、 3350、 1730、 1610、 1590、 1495、 1440、 1170、 11
00、 1010。

【００６１】９）¹H- 核磁気共鳴スペクトル：重クロロ
ホルム中、内部基準にテトラメチルシランを使用して測
定した核磁気共鳴スペクトル（400 MHz ）は、次に示す
通りである。 1.37(3H、s)、 1.57(3H、s)、 1.60(3H、s)、 1.68(3H、s)、 1.
70(2H、m)、 1.71(3H、s)、 1.99(2H、m)、 2.07(2H、m)、 2.11(2H、m)、 3.
58(2H、q)、 3.68(3H、s)、 3.81(1H、d)、 4.29(1H、dd)、 5.11(1H、t)、
5.13(1H、d)、 5.16(1H、d)、 5.18(1H、d)、 6.04(1H、dd)、 6.58(1H、dd)、 6.68(1H、d)、 6.91(1H、d)。

【００６２】１０）¹³C-核磁気共鳴スペクトル：重クロ
ロホルム中、内部基準にテトラメチルシランを使用して
測定した核磁気共鳴スペクトル（100 MHz ）は、次に示
す通りである。 12.4(q)、 15.8(q)、 18.5(q)、 22.4(t)、 22.6(q)、 25.9
(q)、 26.0(t)、 36.4(t)、 39.1(t)、 41.9(t)、 51.9(q)、 70.2(d)、 81.0
(d)、 81.7(s)、 114.1(d)、 114.2(t)、 117.8(d)、 119.7(d)、 1
23.6(d)、 124.4(d)、 127.1(s)、 128.7(d)、 133.7(s)、 134.8(s)、
137.7(s)、 143.6(d)、 148.0(s)、 149.9(s)、 172.5(s)。

【００６３】１１）溶解性：メタノール、エタノール、
アセトン、クロロホルム、酢酸エチルに可溶、ヘキサン
に難溶、水に不溶。

【００６４】（６）イソナオコール−Ｄ¹ １）構造式

【００６５】

【化１２】

【００６６】２）物質の性状：無色中性脂溶性油状物質 ３）比旋光度：［α］_D ²⁵ ＋8.4 °（ C 0.83、クロロ
ホルム） ４）マススペクトル（m /z）：468、 436、 369、 203、 18
9、 177、 135、 85 ５）分子量：486.65（高分解能マススペクトル） ６）分子式：C₂₉ H₄₂ O₆（高分解能マススペクトル）。

【００６７】７）紫外線吸収スペクトル：λ_max nm
（ε） エタノール中で測定した紫外線吸収スペクトルは、次に
示す通りである。 293.0(3400) 。

【００６８】８）赤外線吸収スペクトル：ν_max cm^-1 クロロホルム中で測定した赤外線吸収スペクトルは、次
に示す通りである。 3600、 3350、 1710、 1600、 1460、 1435、 1375、 1220、 11
40、 1010。

【００６９】９）¹H- 核磁気共鳴スペクトル：重クロロ
ホルム中、内部基準にテトラメチルシランを使用して測
定した核磁気共鳴スペクトル（400 MHz ）は、次に示す
通りである。 1.60(3H、s)、 1.66(3H、s)、 1.73(3H、s)、 1.74(3H、s)、 1.
77(3H、s)、 2.05(2H、m)、 2.13(2H、m)、 2.17(2H、m)、 2.20(2H、m)、 3.
32(2H、d)、 3.59(2H、s)、 3.73(3H、s)、 3.86(1H、d)、 4.31(1H、dd)、
5.12(1H、t)、 5.19(1H、d)、 5.34(1H、t)、 5.46(1H、t)、 6.46(1H、d)、 6.
56(1H、d)。

【００７０】１０）¹³C-核磁気共鳴スペクトル：重クロ
ロホルム中、内部基準にテトラメチルシランを使用して
測定した核磁気共鳴スペクトル（100 MHz ）は、次に示
す通りである。 11.8(q)、 15.8(q)、 18.6(q)、 23.4(q)、 25.7(t)、 26.1
(q)、 26.2(t)、 28.9(t)、 31.8(t)、 37.4(t)、 39.0(t)、 52.6
(q)、 69.3(d)、 80.4(d)、 115.1(d)、 116.0(d)、 121.7(s)、 12
2.6(d)、 123.4(d)、 124.6(d)、 129.9(d)、 131.0(s)、 133.5(s)、
134.8(s)、 137.4(s)、 139.5(s)、 146.6(s)、 149.3(s)、 174.0(s)。

【００７１】１１）溶解性：メタノール、エタノール、
アセトン、クロロホルム、酢酸エチルに可溶、ヘキサン
に難溶、水に不溶。

【００７２】（７）イソナオコール−Ｄ² １）構造式

【００７３】

【化１３】

【００７４】２）物質の性状：無色中性脂溶性油状物質 ３）比旋光度：［α］_D ²⁵ ＋8.6 °（ C 2.89、クロロ
ホルム） ４）マススペクトル（m /z）：468、 436、 369、 235、 18
9、 163、 135、 85 ５）分子量：486.65（高分解能マススペクトル） ６）分子式：C₂₉ H₄₂ O₆（高分解能マススペクトル）。

【００７５】７）紫外線吸収スペクトル：λ_max nm
（ε） エタノール中で測定した紫外線吸収スペクトルは、次に
示す通りである。 293.9(3100) 。

【００７６】８）赤外線吸収スペクトル：ν_ｍａｘ ｃ
ｍ^−１ クロロホルム中で測定した赤外線吸収スペクトルは、次
に示す通りである。 ３６００、 ３３５０、 １７１０、 １６００、 １
４６０、 １４３５、 １３７５、 １３４０、 １２
２０、 １１４０、 １１００、 １０１０。

【００７７】９）¹H- 核磁気共鳴スペクトル：重クロロ
ホルム中、内部基準にテトラメチルシランを使用して測
定した核磁気共鳴スペクトル（400 MHz ）は、次に示す
通りである。 1.59(3H、s)、 1.65(3H、s)、 1.74(3H、s)、 1.77(3H、s)、 1.
78(3H、s)、 2.01(2H、m)、 2.12(2H、m)、 2.15(2H、m)、 2.17(2H、m)、 3.
33(2H、d)、 3.60(2H、s)、 3.73(3H、s)、 3.85(1H、d)、 4.30(1H、dd)、
5.10(1H、t)、 5.20(1H、d)、 5.29(1H、t)、 5.46(1H、t)、 6.46(1H、d)、 6.
56(1H、d)。

【００７８】１０）¹³C-核磁気共鳴スペクトル：重クロ
ロホルム中、内部基準にテトラメチルシランを使用して
測定した核磁気共鳴スペクトル（100 MHz ）は、次に示
す通りである。 11.8(q)、 15.9(q)、 18.6(q)、 23.4(q)、 26.1(q)、 26.1
(t)、 26.2(t)、 29.1(t)、 37.3(t)、 39.1(t)、 39.5(t)、 52.6
(q)、 69.3(d)、 80.4(d)、 115.1(d)、 116.0(d)、 121.7(s)、 12
2.1(d)、 123.5(d)、 124.4(d)、 130.0(d)、 130.7(s)、 133.5(s)、
134.8(s)、 137.2(s)、 139.4(s)、 146.7(s)、 149.3(s)、 174.0(s)。

【００７９】１１）溶解性：メタノール、エタノール、
アセトン、クロロホルム、酢酸エチルに可溶、ヘキサン
に難溶、水に不溶。

【００８０】本発明の前記一般式 (Ｉ) を有する化合物
は薬理上許容される無毒性の塩の形で使用することもで
きる。そのような塩としては、例えばナトリウム、カリ
ウムのようなアルカリ金属；カルシウムのようなアルカ
リ土類金属；リジン、アルギニンのような塩基性アミノ
酸；との塩をあげることができる。

【００８１】なお、本発明の前記一般式 (Ｉ) を有する
ナオコール類およびイソナオコール類は種々の立体異性
体を有する。前記一般式 (Ｉ) においては、これらの異
性体およびこれらの異性体の混合物が全て単一の式で示
されている。従って、本発明においてはこれらの異性体
及びこれらの異性体の混合物をも全て含むものである。

【００８２】本発明のナオコール類およびイソナオコー
ル類は褐藻植物ホンダワラ科ホンダワラ属アキヨレモク
を抽出することによって得られる。抽出は一般動植物で
行われている方法に準じて行われる。即ち、採集したア
キヨレモクを水洗、乾燥、粉砕した後、メタノール、エ
タノールのようなアルコール類、酢酸エチルのようなエ
ステル類、メチレンクロリド、クロロホルムのようなハ
ロゲン化炭化水素類、トルエンのような芳香族炭化水素
類などの有機溶剤を単独またはそれらの組み合わせを用
いて、抽出を行うことによりナオコール類およびイソナ
オコール類を含む抽出液を得ることができる。

【００８３】得られた抽出液よりナオコール類およびイ
ソナオコール類を分離、精製するには、例えばシリカゲ
ル、フロリジル（半井化学（株）社製）のような担体を
用いる吸着クロマトグラフィー；オクタデシル化または
オクチル化されたシリカゲルのような担体に用いる逆相
クロマトグラフィー；アビセル（旭化成工業（株）社
製）のようなセルロースやセファデックスLH-20 、セフ
ァデックスHP-20 （ファルマシア社製）のような担体を
用いる分配クロマトグラフィー；あるいはナオコール類
およびイソナオコール類と混在する不純物との溶媒に対
する分配率の差を利用した抽出法；などがあげられる。

【００８４】以上の分離、精製法を単独または適宜組み
合わせて反復して行うことより、目的のナオコール類お
よびイソナオコール類の純品を得ることができる。

【００８５】本発明のナオコール類およびイソナオコー
ル類は、エンドセリン−１拮抗作用を有し、血圧降下剤
としての使用はもとより、狭心症、心筋梗塞、腎不全、
気管支喘息等の予防薬または治療薬として用いられる。

【００８６】本発明の前記一般式(I) を有する化合物は
種々の形態で投与される。その投与形態としては例えば
錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、シロップ剤等による
経口投与または注射剤（静脈内、筋肉内、皮下）、点滴
剤、坐剤等による非経口投与をあげることができる。こ
れらの各種製剤は、常法に従って主薬に賦形剤、結合
剤、崩壊剤、滑沢剤、矯味矯臭剤、溶解補助剤、懸濁
剤、コーティング剤等の医薬の製剤技術分野において通
常使用しうる既知の補助剤を用いて製剤化することがで
きる。その使用量は症状、年令、体重、投与方法および
剤型等によって異なるが通常は成人に対して 1 日 1 m
g 乃至 1000mg を投与することができる。

【００８７】

【実施例】以下に実施例および試験例をあげて本発明を
更に具体的に説明する。

【００８８】実施例１．島根県隠岐ノ島で採集した褐藻
植物ホンダワラ科ホンダワラ属アキヨレモクを水洗、風
乾、粉砕して得られた粉末 3.5 kg をメタノール 30
リットルを用いて３回抽出操作を行った。得られた抽
出液より減圧下メタノールを留去して得られた残渣を酢
酸エチル 5 リットルに溶解した。これを水洗、乾燥
後、減圧下で酢酸エチルを留去して得られたエキス 17
3 g をｎ−ヘキサン 2 リットルおよび 90 ％含水メ
タノール 5 リットルを用いて分配した。ｎ−ヘキサン
可溶部は水洗、乾燥後、減圧下でｎ−ヘキサンを留去し
て暗緑色油状物質 132 g が得られた。 90 ％含水メ
タノール可溶部は減圧下で溶剤を留去することにより黒
褐色油状物質 140 g が得られた。得られた画分につ
いては、宮田らの方法(J.Antibiotics, 45巻、 74頁(199
2 年))に従いエンドセリン−１のリセプターへの結合に
対する阻害作用を測定した結果、ｎ−ヘキサン画分には
活性が認められず、 90 ％含水メタノール画分にの
み、活性が認められた。この分画について、上記結合阻
害作用を指標にして更に分画、精製を続けた。

【００８９】即ち、90 ％含水メタノール画分 120 g
をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（シリカゲル＝
Art.9893、メルク社製、230 〜 400 メッシュ、1.2 k
g）において、ｎ−ヘキサン、酢酸エチル、メタノール
の混合溶媒を用いて分画した。即ち、フラクション番号
１．の 20 ％酢酸エチル／ｎ−ヘキサン分画 32.87
g、フラクション番号２．の 30 ％酢酸エチル／ｎ−ヘ
キサン分画 9.94 g 、フラクション番号３．の 30 〜
40 ％酢酸エチル／ｎ−ヘキサン分画 15.01 g 、フラ
クション番号４．の 40 〜 50 ％酢酸エチル／ｎ−ヘキ
サン分画 30.90 g、フラクション番号５．の 50 〜 60
％酢酸エチル／ｎ−ヘキサン分画 11.30g 、フラクシ
ョン番号６．の 60 〜 100％酢酸エチル／ｎ−ヘキサン
分画 26.55 g 、フラクション番号７．の 酢酸エチル
分画 7.51 g、フラクション番号８．の 10 〜 30 ％酢
酸エチル／ｎ−ヘキサン分画 12.14 g の８分画に分
けた。

【００９０】これらの分画において、比活性の一番高い
フラクション番号４．の一部 1.093g を逆相ローバーカ
ラムクロマトグラフィー（カラム＝RP−18、B サイズ、
メルク社製：溶出液＝ 80 ％含水メタノール）で精製
し、更に高速液体カラムクロマトグラフィー（カラム＝
SENSHU PAK Si-5251-S、20φ× 250mm、センシュウ科学
社製：溶出液＝4 ％イソプロピルアルコール／ｎ−ヘキ
サン：流速＝ 20 ml／分）で保持時間 20 〜21分の分画
を分取するとナオコール−Ａ 35.3 mgが得られた。

【００９１】次に、フラクション番号２．で得られた
9.94 g をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（シリ
カゲル＝Art.9893、メルク社製、230 〜 400 メッシ
ュ）に付して 25 ％酢酸エチル／ｎ−ヘキサン、クロロ
ホルム、 25 ％アセトン／ｎ−ヘキサンを用いて 3 回
分画した後、逆相ローバーカラムクロマトグラフィー
（カラム＝RP−18、B サイズ、メルク社製：溶出液＝ 8
5 ％含水メタノール）で精製するとナオコール−Ｂ 19
3.6 mg が得られた。

【００９２】次に、フラクション番号６．で得られた
24.25 g をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（シ
リカゲル＝Art.9893、メルク社製、230 〜 400 メッシ
ュ、800 g ：溶出液＝ 2.5％メタノール／クロロホル
ム）を用いて分画し、極性の低い順にイソナオコール−
Ｄ¹ およびＤ² を含む分画 1.32 g 、ナオコール−Ｃ
を含む分画 19.36 g 、ナオコール−Ｄ² を含む分画
1.02 g が得られた。ナオコール−Ｃを含む分画は更に
高速液体カラムクロマトグラフィー（カラム＝DELTA PA
K C-18、ウォータース社製：溶出液＝50 ％含水アセト
ニトリル：流速＝100 ml ／分）で保持時間 30 〜36
分の分画を分取した。次いで、これを更に逆相ローバー
カラムクロマトグラフィー（カラム＝RP−18、C サイ
ズ、メルク社製：溶出液＝ 60 〜70％含水アセトニトリ
ル）で精製するとナオコール−Ｃ80.5 mg が得られ
た。

【００９３】次に、フラクション番号６．で得られた
1.82 g を逆相ローバーカラムクロマトグラフィー（カ
ラム＝RP−18、C サイズ、メルク社製：溶出液＝ 75 ％
含水メタノール）、シリカゲルカラムクロマトグラフィ
ー（シリカゲル＝Art.9893、メルク社製、230 〜 400
メッシュ、20 g：溶出液＝ 15 ％イソプロピルアルコー
ル／ｎ−ヘキサン）、次いで更に逆相ローバーカラムク
ロマトグラフィー（カラム＝RP−18、B サイズ、メルク
社製：溶出液＝ 50 ％含水アセトニトリル）で精製する
とナオコール−Ｄ¹ 151.6 mg が得られた。

【００９４】イソナオコール−Ｄ¹ およびＤ² を含む分
画 1.32 g は逆相ローバーカラムクロマトグラフィー
（カラム＝RP−18、C サイズ、メルク社製：溶出液＝ 5
0 ％含水アセトニトリル）、次いで高速液体カラムクロ
マトグラフィー（カラム＝SENSHU PAK NO2-5251-N 、20
φ× 250mm、センシュウ科学社製：溶出液＝10 ％イソ
プロピルアルコール／ｎ−ヘキサン：流速＝ 20 ml／
分）で保持時間 40 〜41分の分画を分取するとイソナオ
コール−Ｄ¹ 36.0 mg が得られた。同様に、保持時間
42 〜44 分の分画を分取するとイソナオコール−Ｄ²
40.0 mgが得られた。

【００９５】ナオコール−Ｄ² を含む分画 1.02 g は
シリカゲルカラムクロマトグラフィー（シリカゲル＝Ar
t.9893、メルク社製、230 〜 400 メッシュ、30 g：溶
出液＝ 2 ％メタノール／クロロホルム）、次いで逆相
ローバーカラムクロマトグラフィー（カラム＝RP−18、
B サイズ、メルク社製：溶出液＝ 55 ％含水アセトニト
リル）で精製するとナオコール−Ｄ² 175 mg が得られ
た。

【００９６】試験例１．エンドセリン−１拮抗活性 エンドセリン−１拮抗活性は S.Miyata らの方法（J.An
tibiotics、 45 巻、 74頁（ 1992 年））に準じて測定し
た。即ち、¹²⁵ Ｉ−エンドセリン−１をリガンドとした
受容体結合反応によりナオコール類およびイソナオコー
ル類の阻害活性を測定した。

【００９７】１）ウシ大動脈由来の受容体の調製法 ウシ大動脈由来の受容体は S.Miyata らの方法（J.Anti
biotics、 45 巻、 74頁（ 1992 年））に準じて調製し
た。

【００９８】即ち、ウシ大動脈 100 g より脂肪を除
き、細かくした後、0.25 M ショ糖、10mMTris-HCl、0.
1 mM MEDTAを含む緩衝液（200 ml、pH 7.5）を加えて、
ポリトロンホモジナイザー（PT10/35 、Kinematica社
製）を用いて 30 秒で 3 回ホモジナイズした。ホモジ
ネートを 4 ℃、10、000 G にて 20 分間遠心した。
上清を再度同じ条件で遠心した。この上清を 4 ℃、10
0、000 G で 60 分間更に遠心した。得られた沈殿物を
結合反応用緩衝液 50 ml（50 mM Tris-HCl、 100 mM Na
Cl、5 mM MgCl₂、 0.01 ％ PMSF 、1 ％バシトラミン、
0.1％ロイペプチン、 0.05 ％キモスタチン、 0.1 ％
ウシ血清アルブミン）中に懸濁した。これをリセプター
を含む膜画分として、使用時まで −100 ℃ で凍結保
存した。

【００９９】２）ブタ肺由来の受容体の調製法 ブタ肺膜画分は、米国のアマシャム社より市販品（エン
ドセリンリセプターSPA システム、NK−8783）を購入し
た。

【０１００】３）受容体結合反応 受容体結合反応は S.Miyata らの方法（J.Antibiotics、
45 巻、 74頁（ 1992 年））に準じて行った。

【０１０１】即ち、ラジオリガンドとして¹²⁵ Ｉ−エン
ドセリン−１（81.4 TBq/mM 、Dupont社製）370 Bq を
各膜画分（20 μl ）および各検体を上記結合反応用緩
衝液（最終体積 150 μl ）に加え、25 ℃ にて 18
0 分間攪拌した。セルハーベスター（PHD 、 Cambridge
Technology 社製）を用いてガラス繊維ろ紙（CF/C、Wh
atman 社製）でろ過して反応を止めた。沈殿物を 10 m
M Tris-HCl 緩衝液400 μl (pH 7.5 ）で 6 回洗浄
し、フィルター上に残存するアイソトープ量をガンマー
カウンター（Crystal Pachard 社製）にて測定した。な
お、非特異的結合量は 1 μM の非放射性エンドセリ
ン−１を添加することにより測定した。

【０１０２】このようにして測定したナオコール類およ
びイソナオコール類のエンドセリン−１拮抗活性を表１
に示す。

【０１０３】

【表１】拮抗活性（ＩＣ₅₀、μＭ） ─────────────────────────────────── ウシ大動脈由来の受容体 ブタ肺由来の受容体 ─────────────────────────────────── ナオコール−Ａ ７６．１ ２１．６ ナオコール−Ｂ ８９．３ ２３．４ ナオコール−Ｃ ８２．３ ２７．１ ナオコール−Ｄ¹ １００．８ ２９．４ ナオコール−Ｄ² ７８．１ ２７．７ イソナオコール−Ｄ¹ １１２．７ １８．５ イソナオコール−Ｄ² １００．０ １９．１ ─────────────────────────────────── 表１から明らかの如く、ナオコール−Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ¹
およびＤ² 並びにイソナオコール−Ｄ¹ およびＤ² は優
れたエンドセリン−１拮抗活性を示した。

【０１０４】

【発明の効果】本発明のナオコール類およびイソナオコ
ール類は優れたエンドセリン−１拮抗作用を示した。

【０１０５】従って、本発明のナオコール類およびイソ
ナオコール類は重篤な血管障害に関する症状、例えば高
血圧、狭心症、心筋梗塞、くも膜下出血、腎不全など、
あるいは気管支喘息等の予防薬および治療薬として有用
である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁵ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ０７Ｃ 69/732 Ｚ 9279−4Ｈ (72)発明者 春山 英幸 東京都品川区広町１丁目２番58号 三共株 式会社内

Claims (3)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】式（Ｉ） 【化１】 を有するナオコール−Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ¹ またはＤ² ある
   いはイソナオコール−Ｄ¹ またはＤ² 。但し式中、ナオ
   コール−ＡはＸが水酸基を示し、Ｗがカルボニル基を示
   し、Ｒ¹ およびＲ²が共に水素原子を示し、Ｙが下記の
   基（ＩＩ）を示す。ナオコール−ＢはＸが水素原子を示
   し、Ｗがカルボニル基を示し、Ｒ¹ およびＲ² が共に水
   素原子を示し、Ｙが下記の基（ＩＩ）を示す。ナオコー
   ル−ＣはＸが水酸基を示し、Ｗが基＝ＣＨ−ＯＨを示
   し、Ｒ¹ およびＲ² が共に水素原子を示し、Ｙが下記の
   基（ＩＩ）を示す。ナオコール−Ｄ¹ はＸが水酸基を示
   し、Ｗが基＝ＣＨ−ＯＨを示し、Ｒ¹ およびＲ² が一緒
   に結合して単結合を示し、Ｙが下記の基（ＩＩ）を示
   す。ナオコール−Ｄ² はＸが水酸基を示し、Ｗが基＝Ｃ
   Ｈ−ＯＨを示し、Ｒ¹ およびＲ² が一緒に結合して単結
   合を示し、Ｙが下記の基（ＩＩ）を示す。イソナオコー
   ル−Ｄ¹ はＸが水酸基を示し、Ｗが基＝ＣＨ−ＯＨを示
   し、Ｒ¹ およびＲ² が一緒に結合して単結合を示し、Ｙ
   が下記の基（ＩＩＩ）を示す。イソナオコール−Ｄ² は
   Ｘが水酸基を示し、Ｗが基＝ＣＨ−ＯＨを示し、Ｒ¹ お
   よびＲ² が一緒に結合して単結合を示し、Ｙが下記の基
   （ＩＩＩ）を示す。ここに、基（ＩＩ）は 【化２】 であり、基（ＩＩＩ）は 【化３】 である。
2. 【請求項２】褐藻植物ホンダワラ科ホンダワラ属に属す
   る藻類から［請求項１］記載のナオコール類および／ま
   たはイソナオコール類を単離することからなるナオコー
   ル類および／またはイソナオコール類の製造法。
3. 【請求項３】褐藻植物ホンダワラ科ホンダワラ属に属す
   る藻類がアキヨレモクである［請求項１］記載の製造
   法。