JPH0582412B2 - - Google Patents
Info
- Publication number
- JPH0582412B2 JPH0582412B2 JP59119116A JP11911684A JPH0582412B2 JP H0582412 B2 JPH0582412 B2 JP H0582412B2 JP 59119116 A JP59119116 A JP 59119116A JP 11911684 A JP11911684 A JP 11911684A JP H0582412 B2 JPH0582412 B2 JP H0582412B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- hydrolyzate
- whey protein
- water
- solution
- protease
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
- 108010046377 Whey Proteins Proteins 0.000 claims description 34
- 102000007544 Whey Proteins Human genes 0.000 claims description 33
- 235000021119 whey protein Nutrition 0.000 claims description 33
- 239000004365 Protease Substances 0.000 claims description 18
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 claims description 17
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 claims description 17
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 15
- 241000228212 Aspergillus Species 0.000 claims description 13
- 239000003531 protein hydrolysate Substances 0.000 claims description 13
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 claims description 12
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 10
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 10
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims description 10
- 108090000145 Bacillolysin Proteins 0.000 claims description 8
- 102000035092 Neutral proteases Human genes 0.000 claims description 8
- 108091005507 Neutral proteases Proteins 0.000 claims description 8
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 5
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 2
- 239000012460 protein solution Substances 0.000 claims description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 18
- 235000019419 proteases Nutrition 0.000 description 16
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 15
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 15
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 15
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 14
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 9
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 7
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 7
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 7
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 7
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 7
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 5
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 4
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 4
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 4
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 4
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 4
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 4
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 4
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 4
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010019160 Pancreatin Proteins 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 3
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 229940055695 pancreatin Drugs 0.000 description 3
- 244000063299 Bacillus subtilis Species 0.000 description 2
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004407 Lactalbumin Human genes 0.000 description 2
- 108090000942 Lactalbumin Proteins 0.000 description 2
- 102000008192 Lactoglobulins Human genes 0.000 description 2
- 108010060630 Lactoglobulins Proteins 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 2
- AXCZMVOFGPJBDE-UHFFFAOYSA-L calcium dihydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[Ca+2] AXCZMVOFGPJBDE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000000920 calcium hydroxide Substances 0.000 description 2
- 229910001861 calcium hydroxide Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 2
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 description 2
- 239000000084 colloidal system Substances 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 2
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 2
- 230000007071 enzymatic hydrolysis Effects 0.000 description 2
- 238000006047 enzymatic hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- 235000020776 essential amino acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000003797 essential amino acid Substances 0.000 description 2
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 2
- 238000010979 pH adjustment Methods 0.000 description 2
- 210000001819 pancreatic juice Anatomy 0.000 description 2
- WXHLLJAMBQLULT-UHFFFAOYSA-N 2-[[6-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]-2-methylpyrimidin-4-yl]amino]-n-(2-methyl-6-sulfanylphenyl)-1,3-thiazole-5-carboxamide;hydrate Chemical compound O.C=1C(N2CCN(CCO)CC2)=NC(C)=NC=1NC(S1)=NC=C1C(=O)NC1=C(C)C=CC=C1S WXHLLJAMBQLULT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 1
- 235000019750 Crude protein Nutrition 0.000 description 1
- 102000004157 Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- 108090000604 Hydrolases Proteins 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 108090000526 Papain Proteins 0.000 description 1
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 1
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 1
- 239000005862 Whey Substances 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000005054 agglomeration Methods 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 1
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 1
- 230000001079 digestive effect Effects 0.000 description 1
- 201000006549 dyspepsia Diseases 0.000 description 1
- 230000001804 emulsifying effect Effects 0.000 description 1
- 239000003337 fertilizer Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 229960000789 guanidine hydrochloride Drugs 0.000 description 1
- PJJJBBJSCAKJQF-UHFFFAOYSA-N guanidinium chloride Chemical compound [Cl-].NC(N)=[NH2+] PJJJBBJSCAKJQF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 description 1
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 229940055729 papain Drugs 0.000 description 1
- 235000019834 papain Nutrition 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Peptides Or Proteins (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】
発明の背景
技術分野
本発明は、乳漿蛋白質の酵素水解物から未分解
蛋白質および水解物中の高分子部分を除去すると
同時に、低分子水解物の凝集等による不溶化およ
び沈殿形成をおさえ、高収率で乳漿蛋白質の水溶
性の水解物を製造するための改良された方法に関
する。 乳漿蛋白質は、ラクトグロブリン、ラクトアル
ブミンを主に含有する蛋白質であり、必須アミノ
酸としてフエニルアラニンの含量はやや低いが、
他の必須アミノ酸はバランス良く含まれており栄
養的価値は高い。 乳漿蛋白質はチーズ等乳製品の製造工程におい
て牛乳からカゼインを回収した残渣として得ら
れ、主に家畜飼料、牧草用肥料として用いられて
いる。 また、最近では乳漿蛋白質の水解物を経管栄養
剤や一般栄養剤に利用する試みもなされ、種種の
加水分解法が報告されている(特開昭55−
124458、同57−194753)。 先行技術 乳漿蛋白質の水解物を経管栄養剤あるいは消化
吸収不全時の栄養補給食として利用する場合に
は、アミノ酸、あるいはそれらが2〜3個結合し
たジ−またはトリペプチドまで加水分解された容
易に吸収される完全消化態の蛋白である方が有利
である。そこで、このような低分子水解物を得る
べく加水分解度を適当にコントロールすることが
行なわれるが、この操作のみでは未分解の蛋白質
や水解物中の高分子部分が相当量含まれる。これ
らの高分子物質の除去は、従来酵素水解混合物を
そのまま加熱し、変性させ生成する沈殿を除くこ
とによつて行なわれていた。しかしながら、乳漿
蛋白の場合には、従来法では精製液中に高分子部
分や不溶性蛋白質がコロイドを形成し、完全に除
去することができないばかりか、目的とする低分
子水解物の一部が加熱に際して凝集等の変性をお
こし不溶化、沈殿形成するため回収率が低下する
現象がみられる。 発明の目的 本発明は、乳漿蛋白質酵素水解物から高分子蛋
白質を簡単な操作で効率よく除去する一方、低分
子水解物の凝集等による不溶化あるいは沈殿形成
をおさえ高収率で、水溶性乳漿蛋白質水解物を製
造する方法を提供することを目的とする。 発明の具体的な説明 本発明は、乳漿蛋白質水溶液を中性プロテアー
ゼを用いてPH5〜11で加水分解し、得られた水解
物水溶液に酸を加えてPH2〜4に調製し該溶液を
加熱し、生成した沈殿を除去することを特徴とす
る水溶性乳漿蛋白質水解物の製造方法を提供する
ものである。 本発明は、また上記中性プロテアーゼがアスペ
ルギルス属の真菌性プロテアーゼである水溶性乳
漿蛋白質水解物の製造方法を提供する。 さらに本発明は、水溶性乳漿蛋白質水解物がジ
−およびトリペプタイドを少なくとも50%含有す
る低分子水解物である水溶性乳漿蛋白質水解物の
製造方法を提供する。 本発明の方法において原料として使用される乳
漿蛋白質は、チーズ等乳製品の製造工程において
牛乳からカゼインを取り去つた後のいわゆるミル
クホエーと呼ばれる画分を濃縮、乾燥したもので
あり、ラクトアルブミン、ラクトグロブリンを主
要成分として含有する粗蛋白粉末である。このも
のの水溶液は、淡黄白色のコロイドで乳化性が極
めて高く、クロロホルム、メタノール溶液による
脂質抽出やTCA、スルホサリチル酸による蛋白
の分離は困難である。 本発明の方法においては乳漿蛋白質をPH5〜11
の条件下で酵素的に加水分解することが必要であ
り、従つて加水分解酵素としてはこのPH域で活性
を有する中性プロテアーゼが使用される。中性プ
ロテアーゼとしてはアスペルギルス属の真菌性プ
ロテアーゼが最も好ましいが、パンクレアチン、
パパイン等の動物もしくは植物由来の酵素も使用
可能である。酵素による加水分解は、それ自体公
知の方法によつて実施される。 例えば、乳漿蛋白質水溶液に、乳漿蛋白質当り
酵素2〜8%を加えPH5〜11、40〜60℃で約1〜
10時間反応を行なわしめる。水解終了後、反応液
に酸を加えPH2〜4に調整した後、80〜100℃で
1分〜1時間加熱する。PH調整に使用する酸とし
てはリン酸、塩酸、硫酸等が適当であるが、反応
後の中和に際して、水酸化カルシウム等で不溶性
の塩をつくることによつて脱塩できる点から、リ
ン酸、硫酸等を使用することが有利である。上記
の加熱によつて酵素が失括するとともに未分解の
蛋白質や水解物中の高分子部分が沈殿する。また
前述の加熱では加水分解により生じた低分子水解
物の凝集等による不溶化、沈殿形成をおさえるこ
とができる。加熱終了後水溶液に水酸化カルシウ
ム、硫酸、水酸化ナトリウム等の塩基を加えてPH
を中性に調整するのが望ましい。ここまでに生じ
た沈殿を例えば遠心分離またはろ過によつて除去
する。さらにここで得られた水溶液中から常法に
より例えば濃縮乾燥によつて水溶性蛋白質を得
る。かくして得られる蛋白質はジ−およびトリペ
プチドの含量の高い完全消化態の水溶性乳漿蛋白
質低分子水解物であり腸内からの消化吸収性にす
ぐれている。本発明において「水溶性」または
「水溶液」なる用語は真の溶液およびコロイド溶
液の両方を含む。 次に実施例を示して本発明の方法をさらに具体
的に説明する。 実施例 1 乳漿蛋白質キタミンA(和光堂社製)5gを水
80mlに溶解し、アマノA(アスペルギルス属真菌
性プロテアーゼ、天野製薬社製)0.3gを水20ml
に溶解した溶液を加えて50℃で3時間インキユベ
ーシヨンした。氷冷しながらリン酸でPH3に調製
した。沸騰湯浴中で1時間加熱した後室温まで放
冷した。この溶液を水酸化カルシウムでPH7に中
和し3000r.p.m.で15分間遠心分離し、澄明な上清
液を得た。 この上清液の濁度(660nmの吸光)は5倍希
釈で0.14であつた。またこの上清液中の水解物の
平均分子量は207で回収率は92.7%であつた。 したがつて、上記操作により得た遠心上清液は
水溶性乳漿蛋白質低分子水解物溶液であることが
わかつた。 実施例 2 プロテアーゼとして実施例1で用いたアマノA
(アスペルギルス属真菌性プロテアーゼ、天野製
薬社製)のかわりに、オリエンターゼ10N(バチ
ルススブチルス由来、上田化学工業社製)0.05g
を用い、実施例1と同様の操作を行つた。その結
果得られた遠心上清の濁度(660nmの吸光)は、
5倍希釈で0.17であつた。またこの上清液中の水
解物の平均分子量は983で回収率は93.0%であつ
た。 実施例 3 プロテアーゼとして、実施例1で用いたアマノ
A(アスペルギルス属真菌性プロテアーゼ、天野
製薬社製)のかわりにパンクレアチン(ブタ膵
液、和光純薬社製)0.5gを用い、実施例1と同
様の操作を行つた。その結果得られた遠心上清の
濁度(660nm)の吸光)は、5倍希釈で0.08であ
つた。また、この上清液中の水解物の平均分子量
は350で回収率は71.9%であつた。 実施例 4 プロテアーゼとして、実施例1で用いたアマノ
A(アスペルギルス属真菌性プロテアーゼ、天野
製薬社製)のかわりに、プロレザー(アスペルギ
ルス属真菌性プロテアーゼ、天野製薬社製)0.5
gを用い、実施例1と同様の操作を行つた。その
結果得られた遠心上清の濁度(660nmの吸光度)
は5倍希釈で、0.16であつた。また、この上清液
中の水解物の平均分子量は529で回収率は88.1%
であつた。 比較例 乳漿蛋白キタミンA(和光堂社製)25gを水1
に溶解後、250mlに4等分し、それぞれに蛋白
質当り800単位のアマノA(アスペルギルス属真菌
性プロテアーゼ、天野製薬製)、オリエンターゼ
10N(バチルスサブチルス由来プロテアーゼ、上
田化学工業製)、プロレザー(アスペルギルス属
真菌性プロテアーゼ、天野製薬製)、パンクレア
チン(ブタ膵液由来、和光純薬製)を加え50℃で
3時間インキユベーシヨンした。それぞれの反応
液を氷冷しながら反応液を10mlずつ分注し、リン
酸でPH2、3、4および6(無調整)に調整した。
沸騰湯浴中で20分間加熱した後、3000r.p.mで15
分遠心分離し、上清液について濁度(660nmの
吸光)の測定を行つた。酵素の種類により多少の
差異は認められるものの、PH2〜4で加熱するこ
とにより不溶性コロイド様物質が除去された。ま
た、表1に各酵素で濁度が最低値を示すPH、上清
液中の水解分の平均分子量、回収率を示す。表1
に示すごとくアマノA(アスペルギルス属真菌性
プロテアーゼ、天野製薬社製)で最も低い平均分
子量が得られ、さらにこの時の回収率も高かつ
た。
蛋白質および水解物中の高分子部分を除去すると
同時に、低分子水解物の凝集等による不溶化およ
び沈殿形成をおさえ、高収率で乳漿蛋白質の水溶
性の水解物を製造するための改良された方法に関
する。 乳漿蛋白質は、ラクトグロブリン、ラクトアル
ブミンを主に含有する蛋白質であり、必須アミノ
酸としてフエニルアラニンの含量はやや低いが、
他の必須アミノ酸はバランス良く含まれており栄
養的価値は高い。 乳漿蛋白質はチーズ等乳製品の製造工程におい
て牛乳からカゼインを回収した残渣として得ら
れ、主に家畜飼料、牧草用肥料として用いられて
いる。 また、最近では乳漿蛋白質の水解物を経管栄養
剤や一般栄養剤に利用する試みもなされ、種種の
加水分解法が報告されている(特開昭55−
124458、同57−194753)。 先行技術 乳漿蛋白質の水解物を経管栄養剤あるいは消化
吸収不全時の栄養補給食として利用する場合に
は、アミノ酸、あるいはそれらが2〜3個結合し
たジ−またはトリペプチドまで加水分解された容
易に吸収される完全消化態の蛋白である方が有利
である。そこで、このような低分子水解物を得る
べく加水分解度を適当にコントロールすることが
行なわれるが、この操作のみでは未分解の蛋白質
や水解物中の高分子部分が相当量含まれる。これ
らの高分子物質の除去は、従来酵素水解混合物を
そのまま加熱し、変性させ生成する沈殿を除くこ
とによつて行なわれていた。しかしながら、乳漿
蛋白の場合には、従来法では精製液中に高分子部
分や不溶性蛋白質がコロイドを形成し、完全に除
去することができないばかりか、目的とする低分
子水解物の一部が加熱に際して凝集等の変性をお
こし不溶化、沈殿形成するため回収率が低下する
現象がみられる。 発明の目的 本発明は、乳漿蛋白質酵素水解物から高分子蛋
白質を簡単な操作で効率よく除去する一方、低分
子水解物の凝集等による不溶化あるいは沈殿形成
をおさえ高収率で、水溶性乳漿蛋白質水解物を製
造する方法を提供することを目的とする。 発明の具体的な説明 本発明は、乳漿蛋白質水溶液を中性プロテアー
ゼを用いてPH5〜11で加水分解し、得られた水解
物水溶液に酸を加えてPH2〜4に調製し該溶液を
加熱し、生成した沈殿を除去することを特徴とす
る水溶性乳漿蛋白質水解物の製造方法を提供する
ものである。 本発明は、また上記中性プロテアーゼがアスペ
ルギルス属の真菌性プロテアーゼである水溶性乳
漿蛋白質水解物の製造方法を提供する。 さらに本発明は、水溶性乳漿蛋白質水解物がジ
−およびトリペプタイドを少なくとも50%含有す
る低分子水解物である水溶性乳漿蛋白質水解物の
製造方法を提供する。 本発明の方法において原料として使用される乳
漿蛋白質は、チーズ等乳製品の製造工程において
牛乳からカゼインを取り去つた後のいわゆるミル
クホエーと呼ばれる画分を濃縮、乾燥したもので
あり、ラクトアルブミン、ラクトグロブリンを主
要成分として含有する粗蛋白粉末である。このも
のの水溶液は、淡黄白色のコロイドで乳化性が極
めて高く、クロロホルム、メタノール溶液による
脂質抽出やTCA、スルホサリチル酸による蛋白
の分離は困難である。 本発明の方法においては乳漿蛋白質をPH5〜11
の条件下で酵素的に加水分解することが必要であ
り、従つて加水分解酵素としてはこのPH域で活性
を有する中性プロテアーゼが使用される。中性プ
ロテアーゼとしてはアスペルギルス属の真菌性プ
ロテアーゼが最も好ましいが、パンクレアチン、
パパイン等の動物もしくは植物由来の酵素も使用
可能である。酵素による加水分解は、それ自体公
知の方法によつて実施される。 例えば、乳漿蛋白質水溶液に、乳漿蛋白質当り
酵素2〜8%を加えPH5〜11、40〜60℃で約1〜
10時間反応を行なわしめる。水解終了後、反応液
に酸を加えPH2〜4に調整した後、80〜100℃で
1分〜1時間加熱する。PH調整に使用する酸とし
てはリン酸、塩酸、硫酸等が適当であるが、反応
後の中和に際して、水酸化カルシウム等で不溶性
の塩をつくることによつて脱塩できる点から、リ
ン酸、硫酸等を使用することが有利である。上記
の加熱によつて酵素が失括するとともに未分解の
蛋白質や水解物中の高分子部分が沈殿する。また
前述の加熱では加水分解により生じた低分子水解
物の凝集等による不溶化、沈殿形成をおさえるこ
とができる。加熱終了後水溶液に水酸化カルシウ
ム、硫酸、水酸化ナトリウム等の塩基を加えてPH
を中性に調整するのが望ましい。ここまでに生じ
た沈殿を例えば遠心分離またはろ過によつて除去
する。さらにここで得られた水溶液中から常法に
より例えば濃縮乾燥によつて水溶性蛋白質を得
る。かくして得られる蛋白質はジ−およびトリペ
プチドの含量の高い完全消化態の水溶性乳漿蛋白
質低分子水解物であり腸内からの消化吸収性にす
ぐれている。本発明において「水溶性」または
「水溶液」なる用語は真の溶液およびコロイド溶
液の両方を含む。 次に実施例を示して本発明の方法をさらに具体
的に説明する。 実施例 1 乳漿蛋白質キタミンA(和光堂社製)5gを水
80mlに溶解し、アマノA(アスペルギルス属真菌
性プロテアーゼ、天野製薬社製)0.3gを水20ml
に溶解した溶液を加えて50℃で3時間インキユベ
ーシヨンした。氷冷しながらリン酸でPH3に調製
した。沸騰湯浴中で1時間加熱した後室温まで放
冷した。この溶液を水酸化カルシウムでPH7に中
和し3000r.p.m.で15分間遠心分離し、澄明な上清
液を得た。 この上清液の濁度(660nmの吸光)は5倍希
釈で0.14であつた。またこの上清液中の水解物の
平均分子量は207で回収率は92.7%であつた。 したがつて、上記操作により得た遠心上清液は
水溶性乳漿蛋白質低分子水解物溶液であることが
わかつた。 実施例 2 プロテアーゼとして実施例1で用いたアマノA
(アスペルギルス属真菌性プロテアーゼ、天野製
薬社製)のかわりに、オリエンターゼ10N(バチ
ルススブチルス由来、上田化学工業社製)0.05g
を用い、実施例1と同様の操作を行つた。その結
果得られた遠心上清の濁度(660nmの吸光)は、
5倍希釈で0.17であつた。またこの上清液中の水
解物の平均分子量は983で回収率は93.0%であつ
た。 実施例 3 プロテアーゼとして、実施例1で用いたアマノ
A(アスペルギルス属真菌性プロテアーゼ、天野
製薬社製)のかわりにパンクレアチン(ブタ膵
液、和光純薬社製)0.5gを用い、実施例1と同
様の操作を行つた。その結果得られた遠心上清の
濁度(660nm)の吸光)は、5倍希釈で0.08であ
つた。また、この上清液中の水解物の平均分子量
は350で回収率は71.9%であつた。 実施例 4 プロテアーゼとして、実施例1で用いたアマノ
A(アスペルギルス属真菌性プロテアーゼ、天野
製薬社製)のかわりに、プロレザー(アスペルギ
ルス属真菌性プロテアーゼ、天野製薬社製)0.5
gを用い、実施例1と同様の操作を行つた。その
結果得られた遠心上清の濁度(660nmの吸光度)
は5倍希釈で、0.16であつた。また、この上清液
中の水解物の平均分子量は529で回収率は88.1%
であつた。 比較例 乳漿蛋白キタミンA(和光堂社製)25gを水1
に溶解後、250mlに4等分し、それぞれに蛋白
質当り800単位のアマノA(アスペルギルス属真菌
性プロテアーゼ、天野製薬製)、オリエンターゼ
10N(バチルスサブチルス由来プロテアーゼ、上
田化学工業製)、プロレザー(アスペルギルス属
真菌性プロテアーゼ、天野製薬製)、パンクレア
チン(ブタ膵液由来、和光純薬製)を加え50℃で
3時間インキユベーシヨンした。それぞれの反応
液を氷冷しながら反応液を10mlずつ分注し、リン
酸でPH2、3、4および6(無調整)に調整した。
沸騰湯浴中で20分間加熱した後、3000r.p.mで15
分遠心分離し、上清液について濁度(660nmの
吸光)の測定を行つた。酵素の種類により多少の
差異は認められるものの、PH2〜4で加熱するこ
とにより不溶性コロイド様物質が除去された。ま
た、表1に各酵素で濁度が最低値を示すPH、上清
液中の水解分の平均分子量、回収率を示す。表1
に示すごとくアマノA(アスペルギルス属真菌性
プロテアーゼ、天野製薬社製)で最も低い平均分
子量が得られ、さらにこの時の回収率も高かつ
た。
【表】
アマノA(アスペルギルス属真菌性プロテアー
ゼ、天野製薬社製)で加水分解を行つた際、PH3
で熱処理を行つた後の遠心上清液と、PHを調整せ
ず熱処理を行つた後の遠心上清液を、6M塩酸グ
アニジンで平衡化したセフアデツクスG−25カラ
ムでゲルろ過を行つた際の280nmにおける吸光
パターンを図に示す。図に示すごとく、PHを調製
せず熱処理を行つて得た遠心上清に比して、PH3
で熱処理を行つて得た遠心上清では著明な高分子
量画分の減少と低分子量画分の増加が認められ
た。 発明の効果 以上、詳述した如く本発明の方法によれば、乳
漿蛋白質酵素水解物から簡単な操作で、効率よく
高分子量蛋白質およびそれらの不溶性コロイド様
物質を除去することができる一方、低分子水解物
の凝集等による不溶化、沈殿形成を阻止し回収す
ることができ、高収率で、水溶性乳漿蛋白質水解
物を得ることができる。即ち、乳漿蛋白質水溶液
を中性プロテアーゼを用いてPH5〜11で加水分解
し得られた水解物水溶液に酸を加えてPH2〜4に
調整し、該溶液を加熱し、生成した沈殿を除去す
ることにより、未分解蛋白質や高分子量ペプチド
の含有量の極めて少ない水溶性乳漿蛋白質水解物
を高収率で得ることができる。 さらに、本発明において中性プロテアーゼとし
てアスペルギルス属の真菌性プロテアーゼを使用
すると遊離アミノ酸もしくはジ−、トリペプチド
の含有量が極めて多い水溶性乳漿蛋白質水解物を
得ることができる。 従つて、本発明の方法によつて得られる水溶性
乳漿蛋白質低分子水解物は、腸管からの吸収が良
く経管栄養剤や消化吸収不全時の栄養補助剤とし
て優れている。
ゼ、天野製薬社製)で加水分解を行つた際、PH3
で熱処理を行つた後の遠心上清液と、PHを調整せ
ず熱処理を行つた後の遠心上清液を、6M塩酸グ
アニジンで平衡化したセフアデツクスG−25カラ
ムでゲルろ過を行つた際の280nmにおける吸光
パターンを図に示す。図に示すごとく、PHを調製
せず熱処理を行つて得た遠心上清に比して、PH3
で熱処理を行つて得た遠心上清では著明な高分子
量画分の減少と低分子量画分の増加が認められ
た。 発明の効果 以上、詳述した如く本発明の方法によれば、乳
漿蛋白質酵素水解物から簡単な操作で、効率よく
高分子量蛋白質およびそれらの不溶性コロイド様
物質を除去することができる一方、低分子水解物
の凝集等による不溶化、沈殿形成を阻止し回収す
ることができ、高収率で、水溶性乳漿蛋白質水解
物を得ることができる。即ち、乳漿蛋白質水溶液
を中性プロテアーゼを用いてPH5〜11で加水分解
し得られた水解物水溶液に酸を加えてPH2〜4に
調整し、該溶液を加熱し、生成した沈殿を除去す
ることにより、未分解蛋白質や高分子量ペプチド
の含有量の極めて少ない水溶性乳漿蛋白質水解物
を高収率で得ることができる。 さらに、本発明において中性プロテアーゼとし
てアスペルギルス属の真菌性プロテアーゼを使用
すると遊離アミノ酸もしくはジ−、トリペプチド
の含有量が極めて多い水溶性乳漿蛋白質水解物を
得ることができる。 従つて、本発明の方法によつて得られる水溶性
乳漿蛋白質低分子水解物は、腸管からの吸収が良
く経管栄養剤や消化吸収不全時の栄養補助剤とし
て優れている。
図は水解物水溶液の遠心上清のゲルろ過パター
ンを示す。図において実線はPHで、点線はPH無調
整で水解物水溶液を加熱処理し、遠心して得られ
た上清液のゲルろ過パターンをそれぞれに示す。
ンを示す。図において実線はPHで、点線はPH無調
整で水解物水溶液を加熱処理し、遠心して得られ
た上清液のゲルろ過パターンをそれぞれに示す。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 1 乳漿蛋白質水溶液を中性プロテアーゼを用い
てPH5〜11で加水分解し、得られた水解物水溶液
に酸を加えてPH2〜4に調整し、該溶液を加熱し
生成した沈殿を除去することを特徴とする水溶性
乳漿蛋白質水解物の製造方法。 2 中性プロテアーゼがアスペルギルス属の真菌
性プロテアーゼである特許請求の範囲第1項記載
の水溶性乳漿蛋白質水解物の製造方法。 3 水溶性乳漿蛋白質水解物が、ジ−およびトリ
ペプタイドを少なくとも50%含有する低分子水解
物である特許請求の範囲第1項記載の水溶性乳漿
蛋白質水解物の製造方法。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP11911684A JPS61233A (ja) | 1984-06-12 | 1984-06-12 | 水溶性乳漿蛋白質水解物の製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP11911684A JPS61233A (ja) | 1984-06-12 | 1984-06-12 | 水溶性乳漿蛋白質水解物の製造方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPS61233A JPS61233A (ja) | 1986-01-06 |
JPH0582412B2 true JPH0582412B2 (ja) | 1993-11-18 |
Family
ID=14753323
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP11911684A Granted JPS61233A (ja) | 1984-06-12 | 1984-06-12 | 水溶性乳漿蛋白質水解物の製造方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JPS61233A (ja) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2009521955A (ja) * | 2006-01-04 | 2009-06-11 | レプリノ フーズ カンパニー | タンパク質加水分解産物およびそれを作製する方法 |
Families Citing this family (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2794305B2 (ja) * | 1988-07-20 | 1998-09-03 | 明治乳業株式会社 | 牛乳乳清蛋白質中のβ―ラクトログロブリンの選択的酵素分解方法 |
JP2683492B2 (ja) * | 1993-09-07 | 1997-11-26 | 雪印乳業株式会社 | ミセル状ホエー蛋白質、その溶液、その粉末およびミセル状ホエー蛋白質の製造法 |
RU2558365C2 (ru) | 2009-03-06 | 2015-08-10 | Байополимер Текнолоджиз, Лтд. | Эмульсии и клеи, содержащие белок, их получение и применение |
CA2753896C (en) * | 2009-03-06 | 2018-08-28 | Biopolymer Technologies, Ltd. | Protein-containing foams, manufacture and use thereof |
EP2576661B1 (en) | 2010-06-07 | 2016-12-14 | Evertree | Protein-containing adhesives, and manufacture and use thereof |
BR112014005502A2 (pt) | 2011-09-09 | 2017-04-04 | Biopolymer Tech Ltd | adesivos contendo proteínas, e fabricação e uso dos mesmos |
DK2753633T3 (en) | 2011-09-09 | 2017-03-20 | Evertree | PROTEIN-CONTAINING ADHESIVES, THEIR PREPARATION AND APPLICATION THEREOF |
EP3666845A1 (en) | 2012-07-30 | 2020-06-17 | Evertree | Protein adhesives containing an anhydride, carboxylic acid, and/or carboxylate salt compound and their use |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS5854786A (ja) * | 1981-09-28 | 1983-03-31 | Fujitsu Ltd | 映像信号を伝送する無線通信システム |
-
1984
- 1984-06-12 JP JP11911684A patent/JPS61233A/ja active Granted
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS5854786A (ja) * | 1981-09-28 | 1983-03-31 | Fujitsu Ltd | 映像信号を伝送する無線通信システム |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2009521955A (ja) * | 2006-01-04 | 2009-06-11 | レプリノ フーズ カンパニー | タンパク質加水分解産物およびそれを作製する方法 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JPS61233A (ja) | 1986-01-06 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US4482574A (en) | Process for the preparation of protein for hydrolysis | |
US6221423B1 (en) | Short-chained peptide material | |
JP4491698B2 (ja) | 大豆蛋白加水分解物の製造方法 | |
JP5125514B2 (ja) | 大豆ペプチド混合物の製造法 | |
EP0087247B2 (en) | Process for the preparation of protein hydrolysates | |
JP2011521629A (ja) | トウモロコシグルテン加水分解物の製造方法及びこれにより製造されたトウモロコシグルテン加水分解物 | |
US20120107868A1 (en) | Processes for making protein hydrolysates from animal peptone and for preserving mucosa | |
JPH0582412B2 (ja) | ||
EP0495391B1 (en) | A process for the production of hydrolyzed vegetable proteins using gaseous hydrochloric acid and the product therefrom | |
US4636388A (en) | Preparing protein for hydrolysis and product | |
JP2626700B2 (ja) | 低アレルゲン化したホエータンパク加水分解物及びその製造法 | |
EP0087246B1 (en) | Process for the preparation of protein for hydrolysis | |
JPH022392A (ja) | タンパク質水解物の製法 | |
JP2925028B2 (ja) | 加水分解された植物タンパク質の製造方法及びこれから得られた生成物 | |
JPH0414941B2 (ja) | ||
JPH04126039A (ja) | 脱苦味された機能性ペプチドの製造法 | |
KR100242500B1 (ko) | 가수분해된 단백질의 제조방법 | |
JPH05209000A (ja) | 低アレルゲン化ペプチド組成物 | |
EP0087245B1 (en) | Process for the preparation of protein for hydrolysis | |
JPS60164496A (ja) | 低分子ペプチドの製造方法 | |
JP4548339B2 (ja) | 高グルタミン・グルタミン酸含有ポリペプチド混合物及びその製造法 | |
JPH0622446B2 (ja) | 不快味のない易溶性乳蛋白加水分解物の製造方法 | |
JPH08308507A (ja) | 蛋白質加水分解物の製造法 | |
JPS6251953A (ja) | 非ゲル化大豆蛋白の製造法 | |
JPH0579302B2 (ja) |