JPH05508079A - 哺乳類ホスホジエステラーゼをコードするdna - Google Patents
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Abstract
Description
Claims (38)
- 1.哺乳類Ca2+/カルモジュリン刺激性サイクリックヌクレオチドホスホジ ェステラーゼポリペプチドをコードするポリヌクレオチド配列から必須的に構成 される、精製および単離したポリヌクレオチド配列。
- 2.哺乳類サイクリックGMP刺激性サイクリックヌクレオチドホスホジエステ ラーゼポリペプチドをコードするポリヌクレオチド配列から必須的に構成される 、精製および単離したポリヌクレオチド配列。
- 3.ヒトホスホジエステラーゼポリペプチドをコードする請求の範囲第1項ある いは第2項に記載のポリヌクレオチド配列。
- 4.ベクターpGSPDE6.1(A.T.C.C.68583)、pGSPD E7.1(A.T.C.C.68585)、pGSPDE9.2(A.t.C. C.68584)、λCaM H6a(A.T.C.C.75000)、pca mH3EF(A.T.C.C.68964)、pcam61−6N−7(A.T .C.C.68963)、pcamHella(A.t.C.C.68965) 、およびpHcgs6n(A.T.C.C.68962)に存在するヒトDNA 挿入体からなるグループから選択される請求の範囲第3項に記載のポリヌクレオ チド配列。
- 5.ウシホスホジエステラーゼポリペプチドをコードする請求の範囲第1項ある いは第2項に記載のポリヌクレオチド配列。
- 6.ウシ脳61kDaCa2+/カルモジュリンホスホジエステラーゼポリペプ チドをコードする請求の範囲第5項に記載のポリヌクレオチド配列。
- 7.ウシ脳63kaCa2+/カルモジュリンホスホジエステラーゼポリペプチ ドをコードする請求の範囲第5項に記載のポリヌクレオチド配列。
- 8.ウシ心臓59kDaCa2+/カルモジュリンホスホジエステラーゼポリペ プチドをコードする請求の範囲第5項に記載のポリヌクレオチド配列。
- 9.配列番号:16の配列である請求の範囲第8項に記載のDNA配列。
- 10.ベクターp12.3A(A.T.C.C.68577)、pCaM−40 (A.T.C.C.68576)、pBBCGS PDE−5(A.T.C.C .685T8)、pBBCGS PDE−7(A.T.C.C.68580)、 およびP3CGS−5(A.T.C.C.68579)に存在するウシDNA挿 入体からなるグループから選択される請求の範囲第5項に記載のDNA配列。
- 11.請求の範囲第1項もしくは第2項に記載のcNA配列。
- 12.請求の範囲第1項もしくは第2項に記載のゲノミックDNA配列。
- 13.請求の範囲第1項もしくは第2項に記載のDNA配列が挿入されたDNA ベクター。
- 14.請求の範囲第1項もしくは第2項に記載のポリヌクレオチド配列で安定し て形質転換した原核あるいは真核宿主細胞。
- 15.請求の範囲第14項に記載の酵母宿主細胞。
- 16.請求の範囲第1項もしくは第2項に記載のポリヌクレオチド配列で形質転 換した原核あるいは真核宿主細胞での発現によるポリペプチド生成物。
- 17.酵母宿主細胞にて発現した請求の範囲第16項に記載のポリペプチド生成 物。
- 18.哺乳類Ca2+/カルモジュリン刺激性サイクリックヌクレオチドホスホ ジエステラーゼの酵素活性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド 配列から必須的に構成される、精製および単離したポリヌクレオチド配列であっ て、(a)ベクターpCAM−40(A.T.C.C.68576)、p12. 3(A.T.C.C.68577)、およびpHcam61−6N−7(A.T .C.C.68963)にある哺乳類DNA挿入体; (b)ベクターpCAM−40(A.T.C.C.68576)、p12.3A (A.T.C.C.68577)、λCAM H6a(A.T.C.C.750 00)、pHcam61−6N−7(A.T.C.C.68963)、pcam H3EF(A.T.C.C.68964)、およびpcamHella(A.T .C.C.68965)にある哺乳類DNA挿入体から選択されたDNA配列と 、厳密なハイブリダイゼーション条件下で、ハイブリダイズするポリヌクレオチ ド配列:(c)配列番号:16に記載した配列と、厳密なハイブリダイゼーショ ン条件下で、ハイブリダイズするポリヌクレオチド配列;(d)変性コドンによ って上記(a)、(b)および(c)のポリヌクレオチド配列と同じポリペプチ ドをコードするポリヌクレオチド配列; からなるグループから選択される。
- 19.請求の範囲第18項に記載のポリヌクレオチド配列で、形質転換あるいは 形質変換した原核あるいは真核宿主細胞での発現によるポリペプチド生成物。
- 20.酵母宿主細胞にて発現した、請求の範囲第19項に記載のポリペプチド生 成物。
- 21.哺乳類サイクリックGMP刺激性ヌクレオチドホスホジエステラーゼの酵 素活性を有したポリペプチドをコードするポリヌクレオチド配列から必須的に構 成される、精製および単離したポリヌクレオチド配列であって、 (a)ベクターp3CGS−5(A.T.C.C.68579)、およびpHc gs6n(A.T.C.C.68962)にある哺乳類DNA挿入体;(b)ベ クターp3CGS−5(A.T.C.C.68579)、pHcgs6n(A. T.C.C.68962)、pGSPDE6.1(A.T.C.C.68583 )、pGSPDE7.1(A.T.C.C.68585)、pGSPDE9.2 (A.T.C.C.68584)、pBBCGSPDE−5(A.T.C.C. 68578)、およびpBBCGSPDE−7(A.T.C.C.68580) にある哺乳類DM挿入体と、厳密なハイブリダイゼーション条件下で、ハイブリ ダイズするポリヌクレオチド配列;および(c)変性コドンによって上記(a) および(b)のNA配列と同じポリペプチドをコードするDNA配列;からなる グループから選択される。
- 22.請求の範囲第21項に記載のポリヌクレオチド配列で、形質転換あるいは 形質変換した原核あるいは真核宿主細胞での発現によるポリペプチド生成物。
- 23.酵母宿主細胞にて発現した、請求の範囲第22項に記載のポリペプチド生 成物。
- 24.請求の範囲第16項、第19項あるいは第22項に記載のポリペプチド生 成物と特異的な免疫反応性を示す抗体物質。
- 25.哺乳類Ca2+/カルモジュリン刺激性サイクリックヌクレオチドホスホ ジエステラーゼの酵素活性を有するポリペプチドを製造する方法であって、前記 方法は、(a)請求の範囲第1項あるいは第18項に記載のポリヌクレオチド配 列で、原核あるいは真核宿主細胞を、安定して形質転換あるいは形質変換し;お よび (b)前記宿主細胞にて前記DNA配列の発現を許容する条件下の栄養培地で、 工程(a)で形成した宿主細胞を生育すること、を含む。
- 26.前記宿主細胞での前記ポリヌクレオチド配列の発現によるポリペプチド生 成物を単離する工程をさらに含む、請求の範囲第25項に記載の方法。
- 27.前記宿主細胞が、酵母宿主細胞である請求の範囲第25項に記載の方法。
- 28.サイクリックGMP刺激性サイクリックヌクレオチドホスホジエステラー ゼの酵素活性を有するポリペプチドを製造する方法であって、前記方法は、 (a)請求の範囲第2項あるいは第21項に記載のポリヌクレオチド配列で、原 核あるいは真核宿主細胞を、安定して形質転換あるいは形質変換し:および (b)前記宿主細胞にて前記DNA配列の発現を許容する条件下の栄養培地で、 工程(a)で形成した宿主細胞を生育すること、を含む。
- 29.前記宿主細胞での前記ポリヌクレオチド配列の発現によるポリペプチド生 成物を単離する工程をさらに含む、請求の範囲第28項に記載の方法。
- 30.前記宿主細胞が、酵母宿主細胞である請求の範囲第28項に記載の方法。
- 31.哺乳類Ca2+/カルモジュリン刺激柱サイクリックヌクレオチドホスホ ジエステラーゼの酵素活性を修飾する化学薬品を同定するための分析方法であっ て、前記方法は、(a)請求の範囲第1項あるいは第18項に記載のポリヌクレ オチド配列で、前記ポリヌクレオチド配列の発現があり次第、改変感受性になる 表現型特性を有する、原核あるいは真核宿主細胞を、安定して形質転換し; (b)宿主細胞表現型における対応する改変を伴った、前記宿主細胞にて前記ポ リヌクレオチド配列の発現を許容する条件下の栄養培地で、工程(a)で形成し た宿主細胞を生育し;(c)工程(b)で生育した宿主細胞と、分析する化学薬 品を接触させ;および (d)工程(c)にて前記化学薬品と接触した前記宿主細胞の表現型の改変にお けるいかなる修飾をも決定すること、を含む。
- 32.前記宿主細胞が、酵母宿主細胞である請求の範囲第31項に記載の分析方 法。
- 33.哺乳類サイクリックGMP刺激性サイクリックヌクレオチドホスホジエス テラーゼの酵素活性を修飾する化学薬品を同定するための分析方法であって、前 記方法は、(a)請求の範囲第2項あるいは第21項に記載のポリヌクレオチド 配列で、前記ポリヌクレオチド配列の発現が宿主細胞にてあり次第、改変感受性 になる表現型特性を有する、原核あるいは真核宿主細胞を、安定して形質転換し ;(b)宿主細胞表現型における対応する改変を伴った、前記宿主細胞にて前記 ポリヌクレオチド配列の発現を許容する条件下の栄養培地で、工程(a)で形成 した宿主細胞を生育し;(c)工程(b)で生育した宿主細胞と、分析する化学 薬品を接触させ;および (d)工程(c)にて前記化学薬品と接触した前記宿主細胞の表現型の改変にお けるいかなる修飾をも決定すること、を含む。
- 34.前記宿主細胞が、酵母宿主細胞である請求の範囲第33項に記載の分析方 法。
- 35.哺乳類Ca2+/カルモジュリン刺激性サイクリックヌクレオチドホスホ ジエステラーゼの酵素活性を修飾する化学薬品を同定するための分析方法であっ て、前記方法は、(a)請求の範囲第1項あるいは第18項に記載のポリヌクレ オチド配列で、前記ポリヌクレオチF配列の発現があり次第、改変感受性になる 表現型特性を有する、原核あるいは真核宿主細胞を、安定して形質転換し; (b)宿主細胞表現型における対応する改変を伴った、前記宿主細胞にて前記ポ リヌクレオチド配列の発現を許容する条件下の栄養培地で、工程(a)で形成し た宿主細胞を生育し;(c)改変した表現型を有する宿主細胞を同定し;(d) 前記宿主細胞を粉砕し; (e)前記粉砕した宿主細胞から細胞質ゾルを単離し;(f)前記細胞質ゾルと 、前記化学薬品を接触させ;および(g)前記酵素活性が改変されたかどうかを 決定すること、を含む。
- 36.前記宿主細胞が、酵母宿主細胞である請求の範囲第35項に記載の分析方 法。
- 37.哺乳類サイクリックGMP刺激性サイクリックヌクレオチドホスホジエス テラーゼの酵素活性を修飾する化学薬品を同定するための分析方法であって、前 記方法は、(a)請求の範囲第2項あるいは第21項に記載のポリヌクレオチド 配列で、前記ポリヌクレオチド配列の発現が宿主細胞にてあり次第、改変感受性 になる表現型特性を有する、原核あるいは真核宿主細胞を、安定して形質転換し ;(b)前記宿主細胞にて前記ポリヌクレオチド配列の発現を許容する条件下の 栄養培地で、工程(a)で形成した宿主細胞を生育し; (c)改変した表現型を有する宿主細胞を同定し;(d)前記宿主細胞を粉砕し ; (e)前記粉砕した宿主細胞から細胞質ゾルを単離し;(f)前記細胞質ゾルと 、前記化学薬品を接触させ;および(g)前記酵素活性が改変されたかどうかを 決定すること、を含む。
- 38.前記宿主細胞が、酵母宿主細胞である請求の範囲第37項に記載の分析方 法。
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