JPH05506019A

JPH05506019A - 共同組成物

Info

Publication number: JPH05506019A
Application number: JP91507241A
Authority: JP
Inventors: ヘンリー，マイケル
Original assignee: スミスクライン・ビーチャム・コーポレイション
Priority date: 1990-03-16
Filing date: 1991-03-13
Publication date: 1993-09-02
Also published as: WO1991013550A1; EP0521080B1; GB9006023D0; AU7573891A; ATE146080T1; CA2076530A1; HK1006542A1; DE69123573T2; AU648551B2; EP0521080A4; DE69123573D1; EP0521080A1

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】共同組成物本発明は、ステロイド５−α−レダクターゼの拮抗阻害剤である、ある種の選択された化合物の１つを、ステロイド５−α−レダクターゼの不拮抗阻害剤（ｕｎｃｏｍｐｅｔｉｔｉｖｅ　１ｎｈｉｂｉｔｏｒ）である、ある種の選択された化合物の１つと組み合わせて含有する組成物からなる。この医薬の新規な組合せを含有する組成物は、血漿ジヒドロテストステロン（ＤＨＴ）の改良された抑制および前立腺および精嚢の改良された重量減少を示す。

ステロイド５−α−レダクターゼは、機構的に、テストステロン（Ｔ）をＤＨＴに変換するＮＡＤＰＨ−依存性酵素である。本請求の範囲に記載した組成物の個々の化合物は、還元過程の特定の段階で特定の酵素種に結合することにより５− α−レダクターゼ阻害活性を生じさせる。還元過程の異なる段階で、興なる酵素種に結合する阻害剤の組合せが、単一の阻害剤が単独でなしえる範囲を越えて、血漿ＤＨＴの濃度を低下させ、前立腺および精嚢の重量を減少させることを見いだした。

発明の背景ステロイド５−α−レダクターゼは、テストステロンをＤＨＴに変換するＮＡＤＰＨ−依存性酵素である。種々の疾患症状における高ＤＨＴ濃度の重要性についての認識が多くの試みを刺激し、この酵素の阻害剤が合成された。

最初に記載された阻害剤は、１９７３年のシアおよびボイド（）（ｓｉａおよびＶｏｉｇｈｔ）による４−アンドロステン−３−オン−１７β−カルボン酸であった。

ジャーナル−オン・インベスティゲイティブ・ダーマトロジ−（Ｊ　、　１　ｎｖｅｓｔ。

Ｄｅｒｍａｔ、）　６２　：　２２４〜２２７゜（４Ｒ）−５，１０−セコ−１９−ノルプレグナ−４，５−ジニンー３．１０．２０−）ジアゾが次に記載された阻害剤であって、さらに５−α−レダクターゼについての親和力標識としての有用性も判明した。ロバイレ・ビー（Ｒｏｂａｉｒｅ、　Ｂ、　）ら、（１９７７）、ジャーナル・オン・ステロイド・バイオケミストリー（Ｊ　、　Ｓ　ｔｅｒｏｉｄ　Ｂ　ｉｏｃｈｅｍ、　）旦＋３０７〜３１０゜（５α、２Ｏ−Ｒ）− ４−ジアゾ−２１−ヒドロキシ−２０−メチルプレグナン−３−オンが、ステロイド５−α−レダクターゼの強力な時間−依存性阻害剤であると報告された。ブロム・ティー・アール（Ｂ　ｌｏｈｍ、　Ｔ、　Ｒ，）ら、（１９８０）。

バイオケミカル・アンド・バイオフィジカル・リサーチ・コミュニケーションズ（ＢｉｏｃｈｅｔＢｉｏｐｈｙｓ、Ｒｅｓ、　Ｃｏａａ＋、）　９５　：　２７３〜２８０　：１９８２年３月２日付けの米国特許第４．３１７．８１７号。１７β−Ｎ、Ｎ−ジエチルカルバモイル−４−メチル−４−アザ−５−α−アントロスタン−３−オンは、１９８３年３月２２日付けの米国特許第４．３７７．５８４号およびリアング・ティー（Ｌｉａｎｇ、Ｔ、）ら、（１９８３）、ジャーナル・オン・ステロイド・バイオケミストリー　１９．３８５〜３９０に記載の、ステロイド５−α−レダクターゼの一部の４−アザ−ステロイド阻害剤の典型例である。１７α−アセトキシ−６−メチレン−ブレダン−４−エン−３，２０ −ジオンもまた、ステロイド５−α−レダクターゼの時間−依存性不活性化剤であることがわかった。ベトロウ・ブイ（ｐ　ｅｔｒｏｖ、　Ｖ　）ら、（１９８１）、ステロイズ（Ｓ　ｔｅｒｏｉｄｓ）　３旦＝１２１〜１４０゜さらに、他のステロイド５−α−レダクターゼ阻害剤も記載されている。１９８６年６月２日付けの米国特許第４．３６１．５７８号は、一連のホモステロイド酵素阻害剤を記載している。米国特許第４．１９１，７５９号は、ステロイド５ −α−レダクターゼ阻害剤として活性な１７β−カルボキノ−４−アンドロステン−３−オンのアミド類を開示している。日本国特許Ｊ６０１４６８５５−．ＡおよびＪ６０１１６６５７−Ａは、５−α−レダクターゼ阻害活性を含む多くの活性を有する種々のアニリン誘導体を開示している。日本国特許ｌ６０１４２９４１−Ａは、５−α−レダクターゼ阻害活性を有するフェニル−置換ケトン類を開示し、欧州特許ＥＰ１７３５１６−Ａは同様の活性を有する種々のフェニル− 置換アミド類を開示している。シセイド（Ｓ　ｈｉｓｅｉｄｏ）は、ステロイド５−α−レダクターゼの活性阻害剤であるテルペン誘導体に言及している。日本国特許Ｊ５９０５３４１７−Ａ。

近年、ニコチンアミド補因子が酵素に結合する最初の基質であって、該酵素から放出される最後の生成物であるとする定序動力学的機構（ｏｒｄｅｒｅｄ　ｋｉｎｅｔｉｃＩＩｌｅｃｈａｎｉｓｍ）において（図１）、ステロイド５−α−レダクターゼが該定序動力学的機構に従うことが明らかにされた（ハウストン（Ｈｏｕｓｔｏｎ）ら、（１９８７）。

ステロイズ　４９，３５５〜３６９：メトカルフ・ビー（Ｍｅｔｃａｌｆ、　Ｂ、　）ら、（１９８９）バイオオーガニック・ケミストリー（Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）　１７゜３７２〜３７６）。定序動力学的機構に従う二基貫酵素のゆきどまり（ｄｅａｄ−ｅｎｄ）阻害剤は、１種以上の存在する酵素種に結合することができる。ステロイド５−α−レダクターゼで、このようなステロイド阻害剤が結合しうる酵素形は、遊離酵素のＥ、および補因子との酵素二元複合体であるＥ−ＮＡＤＰＨおよびＥ−ＮＡＤＰ”を包含する。例えば、Ｎ−ｔ−ブチル−５−α−アンドロスト−１−エン−４−アザ−１７β−カルボキシアミド−３−オン（化合物Ａ）のような４−アザ・ステロイド阻害剤（リアング（Ｌ　ｉａｎｇ）ら、（１９８５）、エンドクリノロジー（Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ）　１１７．　５７１〜５７９）は、酵素−ＮＡＤＰＨ−阻害剤のゆきどまり複合体（Ｅ−ＮＡＤＰＨ−Ｉ、図１）を形成することにより酵素活性を阻害する。

図１図１　拮抗および不拮抗阻害剤によるステロイド５−α−レダクターゼの阻害の動力学的機構図１において、拮抗阻害剤を■と称し、不拮抗阻害剤をＪと称する。

このような関係において、阻害剤のこれらの各酵素形への結合は、アーウィン・ｚ、ｙチ・セゲル（Ｉｒｖｉｎ　Ｈ，Ｓｅｇｅｌ）　、エンザイム・キネティ’ ｙクス（Ｅ　ｎｚｙｍｅＫｉｎｅｔｉｃｓ’）　、ンａン・ウィリー＆サンズ社（Ｊ　ｏｈｎ　Ｗｉｌｅｙ＆　５ｏｎｓ、　Ｉ　ｎｃ、　）　（１９７５）に記載されているように動力学的に別個のものである。Ｅ−ＮＡＤＰＨ複合体に結合する阻害剤の存在下、種々の濃度のテストステロンによるｎ素触媒の応答速度は、式１により示すことができる。この様式は、可変基質、この場合、テストステロンに対する拮抗阻害と称される。同様に、Ｅ−ＮＡＤＰ−複合体に選択的に結合する阻害剤用の様式は式２により示されるコニのような化合物は可変基質に対する不拮抗阻害剤と称される３式１および２において、■は生成物形成の観察速度であり、ｖｌは可変基質（Ａ）の飽和濃度における最大酵素速度であり、■は見かけ阻害定数に、、またはに８．での阻害剤の１度であり、Ｋ１は可変基質の見かけミカエリス定数である。

ｖ＝Ｖ、Ａ／　［Ｋ、（１＋Ｉ／に＋、）＋Ａ］　（１）Ｖ＝Ｖ、Ａ／　［Ｋ、＋Ａ　（１＋Ｉ／Ｌ＋）］　（２）可変濃度の基質（Ａ）および阻害剤（Ｉ）で測定した速度（Ｖ）を、クリ−ランド（Ｃ１ｅｌａｎｄ）　（クリ−ランド・ダブリュ・ダブリｓ　（Ｃ１ｅｌａｎｄ、　Ｗ、　Ｗ、　）、（１９７９）、メソッズ・イン・エンザイモロジ−（Ｍｅｔｈｏｄｓ　ｉｎ　Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ）　６３．１０３〜１３８）に記載されているようなコンピュータープログラムとの非線形の曲線の当て嵌めにより評価し、式１または２に対する最適嵌合を決定する。

これらの分析の結果は、典型的には、１／速度ｖｓ、１／［テストステロン］の二重逆数プロットにて表される。図１のパターンは、定圧動力学的機構における第２の基質に対する拮抗および不拮抗阻害剤の特性を示し、可逆ゆきどまり阻害剤のＥ−ＮＡＤＰＨまたはＥ−ＮＡＤＰ’″の各々への結合を区別するのに用いることができる。同一の不拮抗様式（式２）が定厚酵素の表面に結合する第１の基質の変形したＥ−ＮＡＤＰＨまたはＥ−ＮＡＤＰ″″のいずれかに結合する阻害剤を評するのにも用いられるため、ＮＡＤＰＨを変えるような実験で、これらの２種の機構を区別することはできない：しかしながら、このような実験の結果を用い、遊離酵素（Ｅ）への結合より得られる阻害機構と区別することはできる。

比較条件下、これらの２つの異なる機構で作用する阻害剤の効果が図２に示されており；この例で、各阻害剤の濃度は、その阻害定数（Ｋ、１またはに１．）に等しいようにセットされており、基質のミカエリス定数（Ｋ、）は１濃度単位でセットされている。曲線Ａが阻害されない速度を示すのに対して、曲線ＢおよびＣは、Ｅ−ＮＡＤＰＨおよびＥ−ＮＡＤＰ−複合体に選択的に結合する阻害剤を示す。

曲線ＡおよびＣは平行である（不拮抗パターン）のに、曲線ＡおよびＢは縦軸にて交差する（拮抗パターン）ことに留意すべきである。このプロットから、拮抗阻害剤（Ｅ−ＮＡＤＰＨ−Ｉ）は低基質濃度でより効率がよく、一方、不拮抗阻害剤（Ｅ−ＮＡＤ　Ｉ”−Ｊ　＞は、より高濃度の基質でより効率がよいことがわかる。これらの２つの曲線の交点は、そのに、に等しい基質濃度で生じる。

図２．Ｅ−ＮＡＤＰＨおよびＥ−ＮＡＤＰ”に結合する化合物でのステロイド５ −α−レダクターゼの阻害様式：異なる酵素形に結合する阻害剤の付加的効果Ｅ−ＮＡＤＰＨおよびＥ−ＮＡＤＰ −の両方に等しく結合しつる単一分子は、２つの二重逆数プロットの勾配および切片の付加的効果を示す。これは式３て示され、図２の曲ＷＤで表されている。

ｖ＝Ｖ、、、Ａ／　［Ｋ、（１：　Ｉ／に、、）　−、Ａ　（１、’　Ｉ／に、、）３　（３）このような混合した（非拮抗性）　（ｎｏｎｃｏｍｐｅｔｉｔｉｖｅ）作用様式を示す分子による阻害は、基質Ｓ度の全範囲にわたって単一機構のいずれか嵐独の阻害よりもより効率がよい。この混合した相互作用の様式の記載は、異なる酵素形であるＥ−Ｎ、ＡＤＰＨおよびＥ−ＮＡＤＰ−と独立して相互に作用する２種の異なる分子種の存在下におけるステロイド５−α−レダクターゼの阻害に等しく適用しつる。

したがって、曲線りは、さらに、各々がＥ−ＮＡＤＰＨおよびＥ　−Ｎ　Ａ　Ｄ　Ｐ−複合体のそれぞれの阻害定数に等しい４度での２種の化合物による阻害を記載する。

再度いえば、この結果は、基質の全濃度範囲にわたって、単独の阻害剤の効果よりも優れている。

拮抗阻害剤（Ｎ−ｔ−ブチル−５−α−アンドロスト−１−エン−４−アザ−１７β−カルボキシアミド−３−オン、化合物Ａ）および不拮抗阻害剤（Ｎ、　Ｎ −ジイソプロピル−アンドロスト−３，５−ジエン−１７β−カルボキシアミド −３−カルボン酸、化合物Ｂ）のこのような付加的阻害効果が、イン・ビトロにおけるダブルの阻害実験；別の阻害剤の存在下、一方の阻害剤の濃度増加はより大きな酵素阻害を誘発しく図３）、一方また、相互に相客れない結合を示す阻害実験で証明された。Ｅ−ＮＡＤＰＨ（拮抗性）またはｌニーＮＡＤＰ”　（不拮抗性）に結合する阻害剤の一方が所定の濃度である場合、別の阻害剤をいくらかの量追加することで、観察される酵素阻害はその阻害剤単独におけるよりも増加する。

図３．ラットの肝ステロイド５−α−レダクターゼの阻害：化合物Ａ十化合物Ｂの効果。ラットの肝ステロイド５−α−レダクターゼを、補因子再生系の下、’ ｔ３Ｋ（ＤＴ　（１，ＯａＭ）お、Ｊ’ＦＮＡＤＰＨ（１００，ＣＺＭ）　で検定した。

Ｖ、＝Ｖ、／　「ｌ〒Ｉ／に、＋Ｊ／に、−４−Ｉ　Ｊ／βに、に、］である０（Ｏ）、３（△）、５　（＋Ｌ　９　（ｘ）、１２　（◇）および１５（）ｎＭの存在下、化合物Ａの濃度をＯ〜１０ｎＭと変えた。

比較において、図４は薬剤物質のコンサーベーションの結合様式を示す。ここで、算定した曲線は、その各阻害定数に関連する全薬剤物質に基づいている：全阻害剤＝一定＝Σ（［阻害剤］　／に、、、、、）。曲線Ａは阻害されない速度を示し、曲線ＢおよびＣは、各々、拮抗または不拮抗阻害剤単独の存在を示し、一方、曲線りは半分の拮抗および不拮抗阻害剤からなる阻害剤物質のコンサーベーンヨンを示す。ここで、２つの異なる機構で作用する阻害剤の組合せは、基質濃度がそのに１を超えているならば拮抗阻害剤よりも優れており、Ｋ、以下の低基質濃度で不拮抗阻害剤よりもより効率がよい。動力学様式は共に式２で示されるため、他の基質、ＮＡＤＰＨに対する同様の分析は、阻害効果において何ら違いを示さな図４．Ｅ−ＮＡＤＰＨおよびＥ−ＮＡＤＰ”に結合する化合物を用いるステロイド５−α−レダクターゼの阻害様式。

阻害剤物質のコンサーベーション。

優れた結果を得るに異なる機構型の５−α−レダクターゼ阻害剤を医薬組成物中に組み合わせることは出願人にとって全く知られていない技術である。

発明の記載５−α−レダクターゼの「拮抗」および「不拮抗」阻害剤から選ばれる組合せを、医薬組成物において、テストステロンのＤＨＴへの酵素還元を抑制するのに用いる。本発明の「拮抗ｊ阻害成分は酵素−ＮＡＤＰＨ−阻害剤のゆきどまり複合体を形成する化合物であり、本発明の「不拮抗」阻害成分は、前記のような酵素 −ＮＡＤＰ”−阻害剤のゆきどまり複合体を形成する化合物である。

さらには、イン・ビボにて親代合物を生じさせるか、医薬上許容される付加塩のようなそれ自体有用であるこれらの化合物の誘導体も包含される。塩基性基を有するこれらの化合物の塩は、塩基性化合物の存在下、その分野において公知の方法により有機または無機酸を用いて形成される。例えば、該化合物を、溶媒を除去することにより塩を単離する、エタノールのような水混和性溶媒中、または所望の塩を直接分離するかあるいは溶媒を除去することにより単離する、エチルエーテルあるいはクロロホルムのような酸が可溶性である水非混和性溶媒中、無機または有機酸と反応させる。本発明に含まれる酸付加塩の例は、マレイン酸、フマル酸、乳酸、シュウ酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、酒石酸、クエン酸、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸および硝酸の塩である。酸性基を有する本発明の化合物の医薬上許容される塩基付加塩は、非毒性のアルカリ金属およびアルカリ土類金属を包含する有機または無機塩基、例えば、水酸化カルシウム、ナトリウムおよびカリウム：水酸化アンモニウム、およびトリエチルアミン、ブチルアミン、ピペラジンおよび（トリヒドロキシメチル）メチルアミンのような非毒性有機塩基から公知方法により製造される。プロドラッグ誘導体は、〇−エステル類、特に各アルカノイル基が炭素数２〜８であるトリー〇−低級アルカノイルエステル二〇−メチルエーテル類または硫酸エステル類を包含する。分離したＲおよびＳ立体異性体もまた有用である。

前記のような拮抗ステロイド５−α−レダクターゼ阻害剤であると、色われる化合物は：Ｎ−ｔ−ブチル−５−α−アンドロスト−１−エン−４−アザ−１７β−カルボキシアミド−３−オン、ぐ２０Ｒ）−ヒドロキシメチル−４−メチル−４−アザ−５−α−プレグナン− ３−オン、１７β−Ｎ、Ｎ−ジイソプロピルカルボキシアミド−５−α−８（１４）−アンドロステン−４−メチル−４−アザ−３−オン、および１７β−Ｎ−ｔ−ブチルカルボキシアミド−５−α−８（１４）−アンドロステン−４−メチル−４−アザ−３−オンのような３−オン−４−アザステロイド化合物を包含する。

さらに、１７β−Ｎ、Ｎ−ジイソプロピルカルボキシアミド−３−二トロー５−α−アンドロスト−３−エン、１７β−Ｎ−ｔ−ブチルカルボキシアミド−３−ニトロ−５−α−アンドロスト −３−エン、および１７β−Ｎ、Ｎ−ジイソプロピルカルボキシアミド−３−二トロー５α−アンドロスト−２−エンを包含する３−ニトロステロイド化合物もまた拮抗阻害剤であることが判明した。

前記のような不拮抗ステロイド５−α−レダクターゼ阻害剤であると思われる化合物は・Ｎ−４−ブチル−アンドロスト−３，５−フェン−１フβ−カルボキシアミド− ３−カルボン酸またはその塩、Ｎ、　Ｎ−シイツブコピルーアンドロスト−３，５−ジエン−１７β−カルボキシアミド−３−カルボン酸またはその塩、１７β−（Ｎ、Ｎ−ジイソプロピルカルボキンアミド）−二ストラ−１，３゜５（１０）　ｈジエン−３−カルボン酸またはその塩、１７β−（Ｎ−ｔ−ブチルカルボキシアミド）−エストラ−１，３，５（１０）−トリエンー３−カルボン酸またはその塩、１７β−（Ｎ、Ｎ− ジイソプロピルカルボキシアミド）−エストラ−１，３゜５　（：ＬＯ）−ｈジエン−３−スルホン酸またはその塩、２０−α−（ヒドロキシメチル）−Ａ−ツルー５−α−ブレグンー１−エンー２−カルボン酸またはその塩、１７β−（Ｎ−ｔ−ブチルカルボキシアミド）−二ストラ−１，３，５（１０） −トリエン−３−スルホン酸またはその塩、１７β−（Ｎ、Ｎ−ジイソプロピルカルボキシアミド）エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−ホスホン酸またはその塩、１７β−（Ｎ−ｔ−ブチルカルボキシアミド）−二ストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−ホスホン酸またはその塩、１７β−（Ｎ、Ｎ− ジイソプロピルカルボキンアミド）エストラ−１，３，５（１０）−トリエン− ３−ホスフィン酸またはその塩、１７β−（Ｎ−ｔ−ブチルカルボキシアミド） −エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−ホスフィン酸またはその塩、１７β−Ｎ−ｔ−ブチルカルボキンアミド−アンドロスト−３，５−ジエン−３ −ホスフィン酸またはその塩、１７β−Ｎ、Ｎ−ジイソプロピルカルボキンアミド−アンドロスト−３，５−ノニン−３−ホスフィン酸またはその塩、１７β−Ｎ−ｔ−ブチルカルボキンアミド−アンドロスト−３，５−ジエン−３−ホスホン酸またはその塩、および１７β−Ｎ、Ｎ−ンイソプロビルカルボキシアミドーアンドロストー３．５−ノニン−３−ホスホン酸またはその塩を包含する。

当業者であれば、阻害剤が前記の方法による拮抗または不拮抗型であるかどうかを容易に決定することができる。そのような化合物はすべて、本発明の範囲内に含まれる。

請求の範囲に記載した組合せはステロイド５−α−レダクターゼ活性を阻害するため、該組合せは、ＤＨＴ活性の低下が所望の治療効果をもたらす疾患または症状の治療にて有用性を有する。このような疾患および症状は、尋常性ざ癒、脂漏症、女性型多毛症、良性前立腺肥大のような前立腺疾患および男性型禿頭を包含する。

本発明のある種の組合せを、ステロイド５−α−レダクターゼ活性を阻害するそのイン・ビボ効能について試験した。

雄のラットを去勢し、１力月間処理しなかった場合、腹部の前立腺はその原細胞数全体の約１０％まで退縮する。テストステロンの生理学的血清中濃度を再生するのに、外因性テストステロンをこれらの去勢ラットに付与すると、その退縮した腹部前立腺は速やかに増大し、２〜３週間以内にその原細胞数を再生する。

ラットの腹部前立腺の再生を誘発するこのテストステロンを阻害することを用い、「拮抗」阻害剤および「不拮抗」阻害剤を個々に、および組み合わせて一日に２回、経口投与してその効力および効能を比較した。

Ｎ−ｔ−ブチル−５−α−アンドロスト−１−エン−４−アザ−１７β−カルボキンアミド−３−オン（化合物Ａ）が拮抗阻害剤であり、Ｎ−ｔ−ブチル−アンドロスト−３，５−ジエン−１７β−カルボキシアミド−３−カルボン酸（化合物Ｃ）が不拮抗阻害剤である。

これらの実験を実施するに、開始体重が２５０〜３００ｇｍである合計５０匹の雄のスブラギュー・ダウレイ（Ｓｐｒａｇｕｅ　Ｄａｖｌｅｙ）ラット（バーラン・スブラギューーダウレイ社（Ｈａｒｌａｎ　Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｖｌｅｙ、Ｉｎｃ、）より入手）を用いた。

これらのうち４５匹の動物を去勢し、１力月間処理することなく、最大の腹部前立腺および精嚢の退縮を得た。この１力月後、４５匹の去勢動物のうち４０匹を、２．５ｃｍ長のテストステロン充填のシラスティック（ｓｉｌａｓｔｉｃ）類カプセルを横腹に皮下移植した。該５０匹の動物を以下のように１０群に分けた。

群１−ビヒクルを単独で一日に２回付与した去勢されていないラット（非去勢対照）：群２−ビヒクルを一日に２回付与した、テストステロンカプセルを移植していない去勢ラット（去勢対照）：群３−ビヒクルを一日に２回付与した、テストステロンカプセルを移植した去勢ラット（再生対照）；群４−テストステロン移植と不拮抗阻害剤（ＢＩＤ）１２．５ｍｇ／ｋｇを加えた去勢ラット；群５−テストステロン移植と不拮抗阻害剤（ＢＩＤ）２５ｍｇ／ｋｇを加えた去勢ラット：群６−テストステロン移植と不拮抗阻害剤（ＢＩＤ）５０ｍｇ／ｋｇを加えた去勢ラット：群７−テストステロン移植と拮抗阻害剤（ＢＩＤ）１２．５ｍｇ／ｋｇを加えた去勢ラット：群８−テストステロン移植と拮抗阻害剤（ＢＩＤ）２：５ｍｇ／ｋｇを加えた去勢ラット：群９−テストステロン移植と拮抗阻害剤（ＢＩＤ）５０ｍｇ／ｋｇを加えた去勢ラット。

群１０−テストステロン移植と不拮抗阻害剤（ＢＩＤ）５０ｍｇ／ｋｇと拮抗阻害剤（ＢＩＤ）５０ｍｇ／ｋｇを加えた去勢ラットこれらの動物に、−日に２回（ＢＩＤ）、１０日間連続的に５−α−レダクターゼ阻害化合物を投与した。試験化合物をプロピレングリコールに溶かし、標体食塩水に希釈した。治療の最後に、血液を動物から採集し、ついで該動物を殺し、腹部前立腺を摘出し、秤量し、以下の操作にてＤＨＴ濃度を測定した。

前立腺組織を摘出し、余分なものを切り取り、秤量し、細かく切り刻み、リン酸塩緩衝液で洗浄した。ついで、その組織をリン酸塩緩衝液中に均質化し、酢酸エチルを添加することで抽出し、オービタルミキサーで４５分間混合した。該酢酸エチルを蒸発させ、残渣をエタノール中に復元し、０．４５μＭ濾紙を用いる遠心分離濾過に付した。ついで、逆相ＨＰＬＣを用いて成分を分離し、ＤＨＴフラクションを収集した。該フラクションを乾固するまで減少させ、標準の市販ＤＨＴ検定緩衝液中に復元した。ついで、そのＤＨＴ濃度をラジオイムノアッセイのような標準技法を用いて測定した。

増加量の単一の阻害剤で処理したラットにおいて、認められる前立腺重量の減少は、去勢対照モデルにおけるよりも有意に高レベルにて安定水準に達し、一方、組合せ一処理のラットにおいて、前立腺の重量は去勢状態のレベルまで減少した。

拮抗阻害剤である化合物Ａに関する、この安定水準の用量一応答効果は、さらに他の研究においても報告されている。（ストナー（Ｓ　ｔｏｎｅｒ）ら（１９８７）、エンドクリノロジー（Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ）　、１２０　：　７７４）　ｏかくして、請求の範囲に記載した組合せの投与は、単一の阻害剤単独によって得ることができるよりも有意に低い前立腺重量減少レベルをもたらす。

請求の範囲に記載した組合せを、カプセル、錠剤または注射製剤のような通常の投与形に配合する。個体または液体医薬担体を用いる。個体担体は、スターチ、ラクトース、硫酸カルシウムニ水和物、白土、シュークロース、タルク、ゼラチン、寒天、ペクチン、アカンア、ステアリン酸マグネシウムおよびステアリン酸を包含する。液体担体は、シロップ、落花生油、オリーブ油、食塩水および水を包含する。同様に、担体または希釈剤は、例えば、モノステアリン酸グリセリルまたはジステアリン酸グリセリル単独またはワックスと混合した、いずれの遅延放出性物質も包含する。固体担体の量は広範に変化するが、好ましくは、投与単位当たり約２５ｍｇ〜１ｇである。液体担体を用いる場合、その調製物はン口・ノブ、エリキシル、エマルジョン、ソフトゼラチンカプセル、アンプルのような滅菌注射液体、または水性あるいは非水性液体懸濁液の形態である。

医薬調製物は、錠剤形の場合、成分を混合し、顆粒化し、要すれば、打錠するか、または、混合し、充填し、溶解することを包含する製薬における常法に従って製造し、適宜、所望の経口または非経口生成物を得る。

本発明の請求の範囲に記載した各活性成分の薬物動力学的特性は、通常の投与方法で処方する場合を予期しなければならない。その共同効果（ｓｙｎｅｒｇｉｓｔｉｃｅｆｆｅｃｔ）を最大にするために、請求の組合せ体の個々の化合物は、単一の医薬組成物として、または連続的に分離した医薬組成物にて投与することができる。１種以上の成分を、医薬の遅延または徐放性のために、いくつかの用量にて処理した持効性投与単位形に配合することができる。このような投与単位は、徐放性顆粒、ショ糖中心球体または各層において活性成分の有効性が液体またはポリマー物質で被覆することにより調整される多層錠剤からなっていてもよい。

前記のような医薬投与単位における本発明の組合せの用量は、各活性化合物０゜１〜１０００ｍｇ／ｋｇ、好ましくは１〜１００ｍｇ／ｋｇの範囲から選択される効果的な非毒性の量である。選択された用量を、ステロイド５−α−レダクターゼ阻害を必要とするヒト患者に、−日に付き１〜６回、局所的に、経口的に、直腸的に、注射により、または点滴により連続的に投与する。ヒト投与用の経口投与単位は、好ましくは、１〜５００ｍｇの活性化合物を含有する。低用量を用いる非経口投与が好ましい。しかし、経口投与が、患者にとって安全でかつ都合がよい場合、高用量の経口投与もまた用いることができる。

ヒトを包含する哺乳動物におけるステロイド５−α−レダクターゼ活性を阻害する本発明の方法は、拮抗および不拮抗の両方の作用機構を有するステロイド５− α−レダクターゼ阻害化合物の効果的な組合せを、このような阻害を必要とする患者に内用することからなる。

本発明の組合わせ体の試験結果を表Ｉに示す：去勢した雄のラットの退縮した腹部前立腺および精嚢のテストステロン誘発再生に対する、Ｎ−ｔ−ブチル−５− α−アンドロスト−１−エン−４−アザ−１７β−カルボキンアミド−３−オン（化合物Ａ）およびＮ−ｔ−ブチル−アンドロスト−３，５−ジエン−１７β− カルボキンアミド−３−カルボン酸（化合物Ｃ）での種々の治療効果 −一一−−−−−−−−−−−−−−−２辷と一一一一一一−−−−−−−−− −−一群１　無（非去勢対照）６３９±５４　１４４３±１０９　３３２±３８　１０１１１３±６３群２　去勢（去勢対照）２６±３１６５土２１５７±３５０８±７８群５　ＢＩＤ　−２５ｍｇ／ｋｇ　１４３±１７　３８３士２９　１７０±１９　８９０±５８群６　ＢＩＤ　−５０ｍｇ／ｋｇ　１４７±１５　３１６±５２　１５９立２０　８＋５　”−６３群ｇ　ＢＩＤ　−２５ｍｇ／ｋｇ　５５±７２９０±２５１０８±１０　７０８±７２群９　ＢＩＤ　−５０ｍｇ／ｋｇ　６２±７２８４±１９　１０８±　７６９８±３９＊：統計学的に有意前記の表におけるデータは、退縮したラットの腹部前立腺のテストステロン誘発再生を遮断する、「拮抗」および「不拮抗」ステロイド５−α−レダクターゼ阻害剤の組合せの共同効果を示している。加えて、テストステロン濃度は去勢対照を除くすべての群において影響しないことを示すデータが得られた。

以下の実施例は、これらの化合物を含有する請求の範囲に記載した組合せおよび医薬組成物の調製を説明する。該実施例は、前記および以下の請求の範囲に記載の発明の範囲を制限するものではない。

実施例１請求の化合物および組成物を投与する経口投与形は、成分を以下の表ＩＩに示す割合にてスクリーニングし、混合し、ハードカプセルに充填して製造する。

Ｎ−ｔ−ブチル−５−α−アンドロスト−１−エン−１００ｍｇ４−アザ−１７ β−カルボキシアミド−３−オンＮ−ｔ−ブチル−アンドロスト−３，５−ジエン−１００ｍｇ１７β−カルボキシアミド−３−カルボン酸ステアリン酸マグネシウム　２０ｍｇラクトース　３００ｍｇ実施例２以下の表ＩＩＩに示すシュークロース、硫酸カルシウムニ水和物および請求の範囲に記載した化合物および組成物を、表示割合にて１０％ゼラチン溶液と一緒に混合して顆粒化する。その湿式顆粒をスクリーニングし、乾燥させ、スターチ、タルクおよびステアリン酸と混合し、スクリーニングして打錠する。

Ｎ−ｔ−ブチル−５−α−アンドロスト−１−エン−１００ｍｇ４−アザ−１７ β−カルボキシアミド−３−オンＮ−ｔ−ブチル−アンドロスト−３，５−ジエン−１００ｍｇ１７β−カルボキシアミド−３−カルボン酸硫酸カルシウムニ水和物　３００ｍｇステアリン酸　６ｍｇ実施例３Ｎ−ｔ−ブチル−５−α−アンドロスト−１−エン−４−アザ−１７β−カルボキシアミド−３−オン７５ｍｇおよびＮ−ｔ−ブチル−アンドロスト−３，５− ジエン−１７β−カルボキシアミド−３−カルボン酸７５ｍｇを標準食塩水２５ｍ１に分散させ、注射用調製物を製造する。

実施例４以下の化合物（ベース賃量にて表示）をラクトース２５０ｍｇおよびステアリン酸マグネシウム１０ｍｇと一緒に混合し、ついでハードゼラチンカプセルに充填する。これらのカプセルを、−日に１〜６回、ステロイド５−α−レダクターゼ阻害活性を必要とする患者に投与する。

Ａ、Ｎ−ｔ−ブチル−５−α−アンドロスト−１−エン−４−アザ−１７βカルボキシアミド−３−オン、１００ｍｇ＋Ｎ−ｔ−ブチル−アンドロスト−３，５ −ジエン−１７β−カルボキシアミド−３−カルボン酸。

００ｍｇＢ、Ｎ−ｔ−ブチル−５−α−アンドロスト−１−エン−４−アザ−１７β−カルボキシアミド−３−オン、１００ｍｇ：１７β−（Ｎ−ｔ−ブチルカルボキシアミド）エステル−１，３，５（１０）−トリエン−３−カルボン酸、１００ｍｇＣ９１７β−Ｎ−ｔ−ブチルカルボキシアミド−３−ニトロ−５−α−アンドロスト−３−エン、１００ｍｇ：Ｎ−ｔ−ブチル−アンドロスト−３゜５−ジエン −１７β−カルボキシアミド−３−カルボン酸、１００ｍｇＤ、　１７β−Ｎ− ｔ−ブチルカルボキシアミド−３−ニトロ−５−α−アンドロスト−３−エン、１００ｍｇ；１７β−（Ｎ−ｔ−ブチルカルボキシアミド）エステル−１，３，５（１０）　−ｈリエンー３−カルボン酸。

００ｍｇ本発明の好ましい具体例を上記により説明するが、本発明は、ここに開示されている教示そのものに限定されるものではなく、以下の請求の範囲の範囲内にあるすべての修飾に対する権利を保有していることを認識すべきである。

要約書共同組成物ステロイド５−α−レダクターゼの拮抗および不拮抗阻害剤の組成物、阻害剤の組成物を含有する医薬組成物およびステロイド５−α−レダクターゼを阻害するにこれらの組成物を使用する方法が発明された。

国際調査報告

Claims

【特許請求の範囲】

１．（ａ）ステロイド５−α−レダクタ−ゼの不拮抗阻害剤と、（ｂ）ステロイド５−α−レダクタ−ゼの拮抗阻害剤とからなることを特徴とする組成物。
２．不拮抗阻害剤の量が０．１〜１０００ｍｇ／ｋｇから選択され、拮抗阻害剤の量が０．１〜１０００ｍｇ／ｋｇから選択される請求項１記載の組成物。
３．拮抗阻害剤が；Ｎ−ｔ−ブチル−５−α−アンドロスト−１−エン−４−アザ−１７β−カルボキシアミド−３−オン；１７β−Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルカルボキシアミド−３−ニトロ−５−α−アンドロスト−３−エン；（２０Ｒ）−ヒドロキシメチル−４−メチル−４−アザ−５−α−プレグナン− ３−オン；１７β−Ｎ−ｔ−ブチルカルボキシアミド−３−上トロ−５−α−アンドロスト −３−エン；１７β−Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルカルボキシアミド−３−ニトロ−５−α−アンドロスト−２−エン；１７β−Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルカルボキシアミド−５−α−８（１４）−アンドロステン−４−メチル−４−アザ−３−オン；または１７β−Ｎ−ｔ−ブチルカルボキシアミド−５−α−８（１４）−アンドロステン−４−メチル−４−アザ−３−オンである請求項１記載の組成物。
４．不拮抗阻害剤が；Ｎ−ｔ−ブチル−アンドロスト−３，５−ジエン−１７β−カルボキシアミド− ３−カルボン酸またはその塩；Ｎ，Ｎ−ジイソプロピル−アンドロスト−３，５−ジエン−１７β−カルボキシアミド−３−カルボン酸またはその塩；１７β−（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルカルボキシアミド）−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−カルボン酸またはその塩；１７β−（Ｎ−ｔ−ブチルカルボキシアミド）−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−カルボン酸またはその塩；１７β−（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルカルボキシアミド）−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン− ３−スルホン酸またはその塩；１７β−（Ｎ−ｔ−ブチルカルボキシアミド）− エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−スルホン酸またはその塩；１７ β−（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルカルボキシアミド）エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−ホスホン酸またはその塩；１７β−（Ｎ−ｔ−ブチルカルボキシアミド）−エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−ホスホン酸またはその塩；１７β−（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルカルボキシアミド）エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３−ホスフィン酸またはその塩；２０−α−（ヒドロキシメチル）−Ａ−ノル−５−α−プレグン−１−エン−２−カルボン酸またはその塩；１７β−（Ｎ−ｔ−ブチルカルボキシアミド）−エストラ−１，３，５（１０） −トリエン−３−ホスフィン酸またはその塩；１７β−Ｎ−ｔ−ブチルカルボキシアミド−アンドロスト−３，５−ジエン−３−ホスフィン酸またはその塩；１７β−Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルカルボキシアミド−アンドロスト−３，５−ジエン−３−ホスフィン酸またはその塩；１７β−Ｎ−ｔ−ブチルカルボキシアミド−アンドロスト−３，５−ジエン−３−ホスホン酸またはその塩；または１７β−Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルカルボキシアミド−アンドロスト−３，５−ジエン−３−ホスホン酸またはその塩である請求項１記載の組成物。
５．実施例のいずれか１つにて実質的に記載されている請求項１記載の組成物。
６．請求項１〜５記載のいずれか１つの組成物と医薬上許容される担体とからなる医薬組成物。
７．活性治療物質としての使用の請求項１〜５記載のいずれか１つの組成物。
８．ステロイド５−α−レダクタ−ゼ活性の阻害剤としての請求項１〜５記載のいずれか１つの組成物。
９．ステロイド５−α−レダクタ−ゼ活性の阻害にて用いる医薬の製造における請求項１〜５記載のいずれか１つの組成物の使用。
１０．ステロイド５−α−レダクタ−ゼ活性を阻害する治療を必要とする哺乳動物に、有効量の請求項１〜５記載のいずれか１つの組成物を投与することからなることを特徴とする哺乳動物におけるステロイド５−α−レダクタ−ゼ活性の阻害方法。
１１．ステロイド５−α−レダクタ−ゼの拮抗阻害剤およびステロイド５−α− レダクタ−ゼの不信抗阻害剤の医薬組成物を、連続的に、不可分の医薬組成物にて患者に投与することからなることを特徴とする哺乳動物におけるステロイド５ −α−レダクタ−ゼ活性の阻害方法。