JPH05316992A - イソパノースを含む甘味料の製造方法 - Google Patents
イソパノースを含む甘味料の製造方法Info
- Publication number
- JPH05316992A JPH05316992A JP3258575A JP25857591A JPH05316992A JP H05316992 A JPH05316992 A JP H05316992A JP 3258575 A JP3258575 A JP 3258575A JP 25857591 A JP25857591 A JP 25857591A JP H05316992 A JPH05316992 A JP H05316992A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- neopullulanase
- reaction
- isopanose
- maltosyl
- alpha
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Landscapes
- Seasonings (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【目的】 ビフィズス菌の増殖因子であるイソパノース
（６−０−α−マルトシル−グルコース）及び６2 −０
−αマルトシル−マルトースを含む甘味料を製造する。 【構成】 澱粉、プルラン、デキストリン、水飴、各種
マルトオリゴ糖などの基質に、ネオプルラナーゼ（たと
えばＢｕｃｉｌｌｕｓ ｓｔｅａｒｏｔｈｅｒｍｏｐｈ
ｉｌｕｓ ＴＲＳ４０由来のネオプルラナーゼ）を常法
により作用させ、目的物を生成させる。 上記構成において基質濃度を５％以上にする。 上記構成においてα−アミラーゼとネオプルラナー
ゼを併用する。
（６−０−α−マルトシル−グルコース）及び６2 −０
−αマルトシル−マルトースを含む甘味料を製造する。 【構成】 澱粉、プルラン、デキストリン、水飴、各種
マルトオリゴ糖などの基質に、ネオプルラナーゼ（たと
えばＢｕｃｉｌｌｕｓ ｓｔｅａｒｏｔｈｅｒｍｏｐｈ
ｉｌｕｓ ＴＲＳ４０由来のネオプルラナーゼ）を常法
により作用させ、目的物を生成させる。 上記構成において基質濃度を５％以上にする。 上記構成においてα−アミラーゼとネオプルラナー
ゼを併用する。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明はイソパノース（６−０−
α−マルトシル−グルコース）や６2 −０−α−マルト
シル−マルトースで代表される分岐マルトトリオース及
び分岐マルトテトラオースを含む甘味料の製造方法に関
するものである。
α−マルトシル−グルコース）や６2 −０−α−マルト
シル−マルトースで代表される分岐マルトトリオース及
び分岐マルトテトラオースを含む甘味料の製造方法に関
するものである。
【０００２】
【従来の技術と本発明が解決しようとする課題】近年マ
ルトオリゴ糖のうちα−１，６−グルコシド結合を含む
イソマルトース、パノース、イソパノース、イソマルト
トリオース、および６2 −０−α−マルトシル−マルト
ースなど、いわゆる分岐オリゴ糖は、腸内有用細菌であ
るビフィズス菌の増殖因子であることが認められ、これ
らのいくつかを含む糖混合物が甘味料として使用されて
いる。
ルトオリゴ糖のうちα−１，６−グルコシド結合を含む
イソマルトース、パノース、イソパノース、イソマルト
トリオース、および６2 −０−α−マルトシル−マルト
ースなど、いわゆる分岐オリゴ糖は、腸内有用細菌であ
るビフィズス菌の増殖因子であることが認められ、これ
らのいくつかを含む糖混合物が甘味料として使用されて
いる。
【０００３】この製造方法としては、主として澱粉より
マルトースを多量に含む水飴をまず製造し、つづいてＡ
ｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒなどのかび類の生産
するα−グルコシダーゼを作用させ、本酵素によるα−
１，６−グルコシル基転移反応により分岐オリゴ糖を生
成させるのが一般的である。この場合反応の初期にはパ
ノースが、後期ではイソマルトースおよびイソマルトト
リオースが集積する。しかし反応の性質上多量のグルコ
ースが副産物として生成し、目的とするイソマルトース
およびパノースの合計含量は４０％程度にすぎない。一
方イソパノースは分岐オリゴ３糖であり、６2 −０−α
−マルトシル−マルトースは分岐オリゴ４糖であるが、
これらもまた腸内でビフィズス菌の増殖を示す糖質であ
ることが知られている。しかしイソパノースの製造は、
これまでせいぜい高価な多糖類プルランをイソプルラナ
ーゼで加水分解する以外に手段はなく、また６2 −０−
α−マルトシル−マルトースにしてもプルランを酸加水
分解した後、分画して得る他なく、とうてい食品用素材
として製造できなかった。
マルトースを多量に含む水飴をまず製造し、つづいてＡ
ｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒなどのかび類の生産
するα−グルコシダーゼを作用させ、本酵素によるα−
１，６−グルコシル基転移反応により分岐オリゴ糖を生
成させるのが一般的である。この場合反応の初期にはパ
ノースが、後期ではイソマルトースおよびイソマルトト
リオースが集積する。しかし反応の性質上多量のグルコ
ースが副産物として生成し、目的とするイソマルトース
およびパノースの合計含量は４０％程度にすぎない。一
方イソパノースは分岐オリゴ３糖であり、６2 −０−α
−マルトシル−マルトースは分岐オリゴ４糖であるが、
これらもまた腸内でビフィズス菌の増殖を示す糖質であ
ることが知られている。しかしイソパノースの製造は、
これまでせいぜい高価な多糖類プルランをイソプルラナ
ーゼで加水分解する以外に手段はなく、また６2 −０−
α−マルトシル−マルトースにしてもプルランを酸加水
分解した後、分画して得る他なく、とうてい食品用素材
として製造できなかった。
【０００４】
【課題を解決するための手段】使用できる酵素はプルラ
ンに作用しそのα−１，４−グルコシド結合のみをある
いはそのα−１，４−及びα−１，６−グルコシド結合
の両方を切断し主としてパノースを生成する、いわゆる
ネオプルラナーゼに属するものならばどれでも良い。た
とえば、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｔｅａｒｏｔｈｅｒｍｏ
ｐｈｉｌｕｓＴＲＳ４０（微工研菌寄託第９６０９号）
由来のネオプルラナーゼ（Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂａ
ｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ第１７０巻、第１５５４頁、１９
８８年刊行に記載あり）、Ｔｈｅｒｍｏａｃｔｉｎｏｍ
ｙｃｅｓ ｖｕｌｇａｌｉｓ由来のα−アミラーゼ（Ａ
ｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ ａｎｄ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａ
ｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、第４２巻、第１６８１頁、１
９７８年刊行に記載あり）、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｔｅ
ａｒｏｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ ＫＰ１０６４のプル
ラン加水分解酵素（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｍｉｃｒｏｂｉｏ
ｌｏｇｙ ａｎｄＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、第２１
巻、第２０頁、１９８５年刊行に記載あり）、及びＢａ
ｃｔｅｒｏｉｄｅｓ ｔｈｅｔａｉｏｔａｏｍｉｃｒｏ
ｎ ９５−１のネオプルラナーゼ（Ｊｏｕｒｎａｌ ｏ
ｆ Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ、第１７３巻、第２９６
２頁、１９９１年刊行に記載あり）、などもこれに当た
る。
ンに作用しそのα−１，４−グルコシド結合のみをある
いはそのα−１，４−及びα−１，６−グルコシド結合
の両方を切断し主としてパノースを生成する、いわゆる
ネオプルラナーゼに属するものならばどれでも良い。た
とえば、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｔｅａｒｏｔｈｅｒｍｏ
ｐｈｉｌｕｓＴＲＳ４０（微工研菌寄託第９６０９号）
由来のネオプルラナーゼ（Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂａ
ｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ第１７０巻、第１５５４頁、１９
８８年刊行に記載あり）、Ｔｈｅｒｍｏａｃｔｉｎｏｍ
ｙｃｅｓ ｖｕｌｇａｌｉｓ由来のα−アミラーゼ（Ａ
ｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ ａｎｄ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａ
ｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、第４２巻、第１６８１頁、１
９７８年刊行に記載あり）、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｔｅ
ａｒｏｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ ＫＰ１０６４のプル
ラン加水分解酵素（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｍｉｃｒｏｂｉｏ
ｌｏｇｙ ａｎｄＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、第２１
巻、第２０頁、１９８５年刊行に記載あり）、及びＢａ
ｃｔｅｒｏｉｄｅｓ ｔｈｅｔａｉｏｔａｏｍｉｃｒｏ
ｎ ９５−１のネオプルラナーゼ（Ｊｏｕｒｎａｌ ｏ
ｆ Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ、第１７３巻、第２９６
２頁、１９９１年刊行に記載あり）、などもこれに当た
る。
【０００５】基質としては澱粉、プルラン、デキストリ
ン、水飴、各種マルトオリゴ糖などα−１，４−のみあ
るいはα−１，４−およびα−１，６−グルコシド結合
を含む糖類であればいずれも使用できる。それ故澱粉を
細菌液化型α−アミラーゼで液化したもの、さらにこれ
に細菌糖化型（以下、ＢＳＡという）またはかび類のα
−アミラーゼで分解を行ったデキストリンも有効な基質
である。
ン、水飴、各種マルトオリゴ糖などα−１，４−のみあ
るいはα−１，４−およびα−１，６−グルコシド結合
を含む糖類であればいずれも使用できる。それ故澱粉を
細菌液化型α−アミラーゼで液化したもの、さらにこれ
に細菌糖化型（以下、ＢＳＡという）またはかび類のα
−アミラーゼで分解を行ったデキストリンも有効な基質
である。
【０００６】本反応は転移反応と縮合反応を主体とする
ので高濃度の方が反応が進行する。表１に基質濃度を変
化させたときのイソパノースの生成割合を示した。この
ように濃度５重量％（本願においては、重量％を％と表
記する）以上、望ましくは２０％以上の基質濃度で反応
させるのがよい。反応の条件であるｐＨ、温度などは酵
素の作用範囲であれば良い。また本反応はオリゴ糖に対
する転移作用であるので、酵素を固定化しても不都合な
く進行する。このためキトサンなど各種固定化担体を使
用し固定化酵素を作成し作用させても効率よく使用でき
る。このようにして得られた糖化液は、必要に応じ活性
炭による脱色、イオン交換樹脂による精製を行って製品
とすることが出来る。
ので高濃度の方が反応が進行する。表１に基質濃度を変
化させたときのイソパノースの生成割合を示した。この
ように濃度５重量％（本願においては、重量％を％と表
記する）以上、望ましくは２０％以上の基質濃度で反応
させるのがよい。反応の条件であるｐＨ、温度などは酵
素の作用範囲であれば良い。また本反応はオリゴ糖に対
する転移作用であるので、酵素を固定化しても不都合な
く進行する。このためキトサンなど各種固定化担体を使
用し固定化酵素を作成し作用させても効率よく使用でき
る。このようにして得られた糖化液は、必要に応じ活性
炭による脱色、イオン交換樹脂による精製を行って製品
とすることが出来る。
【０００７】 表１ 基質濃度とイソパノースの生成割合 ────────────────────────────────── 基質濃度（％） １ ５ １０ ２０ ３０ ────────────────────────────────── 生成オリゴ糖中の イソパノースの割合（％）＜２ １２．２ １７．２ ２１．３ ２２．４ ────────────────────────────────── 基質：コーンスターチ液化液（Ｄ．Ｅ．１０） 糖化条件：５８℃、ｐＨ６．０、４０時間、ネオプルラ
ナーゼ１０ｕ／ｇ基質
ナーゼ１０ｕ／ｇ基質
【０００８】
【作用】本発明者らは、近年好熱菌Ｂａｃｉｌｌｕｓ
ｓｔｅａｒｏｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ ＴＲＳ４０の
生産するネオプルラナーゼについて研究し、本酵素がプ
ルランを分解して主としてパノースを生成することとマ
ルトトリオース、マルトテトラオース、マルトペンタオ
ースなど各種マルトオリゴ糖、各種デキストリンのほか
澱粉にも作用する性質があることを明らかにした。更に
研究の結果、本酵素は高濃度の基質に作用させると著し
いα−１，４−およびα−１，６−糖転移作用と縮合作
用を示すことを発見した。
ｓｔｅａｒｏｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ ＴＲＳ４０の
生産するネオプルラナーゼについて研究し、本酵素がプ
ルランを分解して主としてパノースを生成することとマ
ルトトリオース、マルトテトラオース、マルトペンタオ
ースなど各種マルトオリゴ糖、各種デキストリンのほか
澱粉にも作用する性質があることを明らかにした。更に
研究の結果、本酵素は高濃度の基質に作用させると著し
いα−１，４−およびα−１，６−糖転移作用と縮合作
用を示すことを発見した。
【０００９】一般にα−アミラーゼは高濃度基質に作用
させるとα−１，４−糖転移反応することが知られてい
る。またα−グルコシダーゼはα−１，４−およびα−
１，６−糖転移反応をすることが知られている。しかし
ながら、ネオプルラナーゼの糖転移反応および縮合反応
については全く知られておらず、その反応特異性は、こ
れらの酵素と全く異なっている。即ち、ネオプルラナー
ゼはα−１，６−糖転移反応をする点でα−アミラーゼ
の転移反応と異なる。また、ネオプルラナーゼの糖転移
反応が主にマルトシル基転移であるのに対し、α−グル
コシダーゼのそれはグルコシル基転移である点で明瞭に
異なる。以上の理由から、ネオプルラナーゼの糖転移反
応はきわめて新規なものと言える。
させるとα−１，４−糖転移反応することが知られてい
る。またα−グルコシダーゼはα−１，４−およびα−
１，６−糖転移反応をすることが知られている。しかし
ながら、ネオプルラナーゼの糖転移反応および縮合反応
については全く知られておらず、その反応特異性は、こ
れらの酵素と全く異なっている。即ち、ネオプルラナー
ゼはα−１，６−糖転移反応をする点でα−アミラーゼ
の転移反応と異なる。また、ネオプルラナーゼの糖転移
反応が主にマルトシル基転移であるのに対し、α−グル
コシダーゼのそれはグルコシル基転移である点で明瞭に
異なる。以上の理由から、ネオプルラナーゼの糖転移反
応はきわめて新規なものと言える。
【００１０】１％程度以下の濃度のマルトトリオースに
ネオプルラナーゼを作用させると、グルコースおよびマ
ルトースのみが生成するのに対して、例えば実験１のご
とく１０％マルトトリオースに微量の14Ｃグルコースを
添加してネオプルラナーゼを反応させると、反応初期に
は還元性末端に放射性を示すマルトトリオース、イソパ
ノース、６−０−α−マルトトリオシル−グルコースを
生じる。このうちマルトトリオースは基質のマルトトリ
オースが分解されそのマルトース部分が放射性グルコー
スにα−１，４−結合で転移したもの（α−１，４−マ
ルトシル基転移）、イソパノースはマルトース部分が放
射性グルコースにα−１，６−結合で転移したものであ
る（α−１，６−マルトシル基転移）。また６−０−α
−マルトトリオシル−グルコースはマルトトリオースが
放射性グルコースとα−１，６−結合で縮合したもので
ある（縮合反応）。すなわち本酵素は単なる加水分解酵
素ではなく、高濃度の基質に作用させると転移反応と縮
合反応を起こす。そして生成糖としてα−１，４−結合
及びα−１，６−結合を含むオリゴ糖を生成する。更に
本酵素はα−１，６−結合よりもα−１，４−結合を切
断する能力が高いので反応の後期でα−１，６−結合を
含む分岐オリゴ糖が集積する。
ネオプルラナーゼを作用させると、グルコースおよびマ
ルトースのみが生成するのに対して、例えば実験１のご
とく１０％マルトトリオースに微量の14Ｃグルコースを
添加してネオプルラナーゼを反応させると、反応初期に
は還元性末端に放射性を示すマルトトリオース、イソパ
ノース、６−０−α−マルトトリオシル−グルコースを
生じる。このうちマルトトリオースは基質のマルトトリ
オースが分解されそのマルトース部分が放射性グルコー
スにα−１，４−結合で転移したもの（α−１，４−マ
ルトシル基転移）、イソパノースはマルトース部分が放
射性グルコースにα−１，６−結合で転移したものであ
る（α−１，６−マルトシル基転移）。また６−０−α
−マルトトリオシル−グルコースはマルトトリオースが
放射性グルコースとα−１，６−結合で縮合したもので
ある（縮合反応）。すなわち本酵素は単なる加水分解酵
素ではなく、高濃度の基質に作用させると転移反応と縮
合反応を起こす。そして生成糖としてα−１，４−結合
及びα−１，６−結合を含むオリゴ糖を生成する。更に
本酵素はα−１，６−結合よりもα−１，４−結合を切
断する能力が高いので反応の後期でα−１，６−結合を
含む分岐オリゴ糖が集積する。
【００１１】実験１ １０％マルトトリオース溶液０．１ｍｌに14Ｃグルコー
ス２．５μｇを溶解した後ネオプルラナーゼ（１Ｕ／ｍ
ｌ）０．１ｍｌを加え４０℃、ｐＨ６．０で反応し経時
的にろ紙にスポットしブタノール／ピリジン／水（６／
４／３）を溶媒として４回展開、Ｘ線フィルムと密着し
てオートラジオグラムを作成すると図１のようになっ
た。生成した放射性オリゴ糖はＲｆ値及び各種酵素の消
化実験により構造を確認した。ネオプルラナーゼの活性
測定法は次のとおりである。２％プルランの２００ｍＭ
リン酸ナトリウム緩衝液に等量の酵素液を加え、５０℃
で３０分間反応させる。生じた還元糖の量をジニトロサ
リチル酸法で定量する。この条件で、１分間に１μｍｏ
ｌのグルコースに相当する還元糖を生じる酵素量を１Ｕ
とした。
ス２．５μｇを溶解した後ネオプルラナーゼ（１Ｕ／ｍ
ｌ）０．１ｍｌを加え４０℃、ｐＨ６．０で反応し経時
的にろ紙にスポットしブタノール／ピリジン／水（６／
４／３）を溶媒として４回展開、Ｘ線フィルムと密着し
てオートラジオグラムを作成すると図１のようになっ
た。生成した放射性オリゴ糖はＲｆ値及び各種酵素の消
化実験により構造を確認した。ネオプルラナーゼの活性
測定法は次のとおりである。２％プルランの２００ｍＭ
リン酸ナトリウム緩衝液に等量の酵素液を加え、５０℃
で３０分間反応させる。生じた還元糖の量をジニトロサ
リチル酸法で定量する。この条件で、１分間に１μｍｏ
ｌのグルコースに相当する還元糖を生じる酵素量を１Ｕ
とした。
【００１２】
【図１】
【００１３】また１０％マルトトリオースにネオプルラ
ナーゼを作用させると生成糖としてマルトペンタオース
のほか、分岐オリゴ糖であるＢ５（以下、分岐糖をＢで
示すこととし、そのペンタオースをＢ５で示す）、おそ
らく６3 −０−α−マルトシル−マルトトリオースが生
成する。さらに反応後期では糖転移反応、総合反応およ
び加水分解を繰り返し最終的にイソパノース（６−０−
α−マルトシル−グルコース）および６2 −０−α−マ
ルトシル−マルトースを主とする分岐オリゴ糖を生成す
る。
ナーゼを作用させると生成糖としてマルトペンタオース
のほか、分岐オリゴ糖であるＢ５（以下、分岐糖をＢで
示すこととし、そのペンタオースをＢ５で示す）、おそ
らく６3 −０−α−マルトシル−マルトトリオースが生
成する。さらに反応後期では糖転移反応、総合反応およ
び加水分解を繰り返し最終的にイソパノース（６−０−
α−マルトシル−グルコース）および６2 −０−α−マ
ルトシル−マルトースを主とする分岐オリゴ糖を生成す
る。
【００１４】このうちイソパノースの構造は、ペーパー
クロマト法によるＲｆ値およびグルコアミラーゼ及びネ
オプルラナーゼによる消化実験、及びメチル化分析によ
り確かめられた。一方６2 −０−α−マルトシル−マル
トースは標準物質とともにプルラナーゼ、グルコアミラ
ーゼによる消化実験を行い、その結果から同定する事が
出来た。
クロマト法によるＲｆ値およびグルコアミラーゼ及びネ
オプルラナーゼによる消化実験、及びメチル化分析によ
り確かめられた。一方６2 −０−α−マルトシル−マル
トースは標準物質とともにプルラナーゼ、グルコアミラ
ーゼによる消化実験を行い、その結果から同定する事が
出来た。
【００１５】
【効果】本願発明ではマルトオリゴ糖やデキストリン、
澱粉などにネオプルラナーゼを作用させることにより、
これまで健康上有効性が期待されながら量産できなかっ
たイソパノース（６−０−α−マルトシル−グルコー
ス）および６2 −０−α−マルトシルマルトースを多量
に含む甘味料を容易に製造できることになった。
澱粉などにネオプルラナーゼを作用させることにより、
これまで健康上有効性が期待されながら量産できなかっ
たイソパノース（６−０−α−マルトシル−グルコー
ス）および６2 −０−α−マルトシルマルトースを多量
に含む甘味料を容易に製造できることになった。
【００１６】
【実施例】 実施例１ コーンスターチの液化液（ＤＥ１０）３０％溶液に、ネ
オプルラナーゼとＢＳＡ（細菌糖化型α−アミラーゼ）
とを加えた系とＢＳＡのみを加えた系を、夫々５８℃、
ｐＨ６．０において４８時間反応させた。反応生成物は
高速液体クロマトグラフィーで分析し、生成物中の各種
オリゴ糖の割合を定量したところ、表２のようになっ
た。このうちＧ１、Ｇ２、Ｇ３、および≧Ｇ４はそれぞ
れグルコース、マルトース、マルトトリオース、および
マルトテトラオース以上の重合度の直鎖オリゴ糖を、Ｂ
２、Ｂ３、およびＢ４はそれぞれイソマルトース、イソ
パノース、および６2 −０−α−マルトシル−マルトー
スを示す。 表２ 反応生成物中の各オリゴ糖の割合（％） ────────────────────────────────── Ｇ１ Ｇ２ Ｇ３ ≧Ｇ４ Ｂ２ Ｂ３ Ｂ４ ────────────────────────────────── ネオプルラナーゼ＋ＢＳＡ 25.7 13.4 0 0 6.7 30.4 23.8 ＢＳＡ 29.8 26.0 14.1 30.1 0 0 0 ────────────────────────────────── すなわちＢＳＡのみを作用させるとＧ１、Ｇ２、Ｇ３、
および重合度４以上の直鎖オリゴ糖が生ずるがこれにネ
オプルラナーゼを共存させるとＧ３の全部およびＧ２と
重合度４以上の直鎖オリゴ糖の一部が消失し目的とする
Ｂ２、Ｂ３、およびＢ４を与える。
オプルラナーゼとＢＳＡ（細菌糖化型α−アミラーゼ）
とを加えた系とＢＳＡのみを加えた系を、夫々５８℃、
ｐＨ６．０において４８時間反応させた。反応生成物は
高速液体クロマトグラフィーで分析し、生成物中の各種
オリゴ糖の割合を定量したところ、表２のようになっ
た。このうちＧ１、Ｇ２、Ｇ３、および≧Ｇ４はそれぞ
れグルコース、マルトース、マルトトリオース、および
マルトテトラオース以上の重合度の直鎖オリゴ糖を、Ｂ
２、Ｂ３、およびＢ４はそれぞれイソマルトース、イソ
パノース、および６2 −０−α−マルトシル−マルトー
スを示す。 表２ 反応生成物中の各オリゴ糖の割合（％） ────────────────────────────────── Ｇ１ Ｇ２ Ｇ３ ≧Ｇ４ Ｂ２ Ｂ３ Ｂ４ ────────────────────────────────── ネオプルラナーゼ＋ＢＳＡ 25.7 13.4 0 0 6.7 30.4 23.8 ＢＳＡ 29.8 26.0 14.1 30.1 0 0 0 ────────────────────────────────── すなわちＢＳＡのみを作用させるとＧ１、Ｇ２、Ｇ３、
および重合度４以上の直鎖オリゴ糖が生ずるがこれにネ
オプルラナーゼを共存させるとＧ３の全部およびＧ２と
重合度４以上の直鎖オリゴ糖の一部が消失し目的とする
Ｂ２、Ｂ３、およびＢ４を与える。
【００１７】実施例２ ３０％デキストリン（パインデックス＃１、松谷化学
（株）製）溶液に、ＢＳＡ（細菌糖化型α−アミラー
ゼ）を加えて、５８℃、ｐＨ６．０において２４時間反
応させた。次に、この系にネオプルラナーゼを加え、同
条件で２４時間さらに反応させた。反応生成物は高速液
体クロマトグラフィーで分析し、生成物中の各種オリゴ
糖の割合を定量すると表３のようになった。 表３ 反応生成物中の各オリゴ糖の割合（％） ────────────────── Ｇ１ Ｇ２ Ｇ３ Ｂ２ Ｂ３ Ｂ４ ────────────────── 24.3 15.0 1.4 15.5 30.3 13.4 ──────────────────
（株）製）溶液に、ＢＳＡ（細菌糖化型α−アミラー
ゼ）を加えて、５８℃、ｐＨ６．０において２４時間反
応させた。次に、この系にネオプルラナーゼを加え、同
条件で２４時間さらに反応させた。反応生成物は高速液
体クロマトグラフィーで分析し、生成物中の各種オリゴ
糖の割合を定量すると表３のようになった。 表３ 反応生成物中の各オリゴ糖の割合（％） ────────────────── Ｇ１ Ｇ２ Ｇ３ Ｂ２ Ｂ３ Ｂ４ ────────────────── 24.3 15.0 1.4 15.5 30.3 13.4 ──────────────────
【００１８】実施例３ ３０％デキストリン（パインデックス＃１、松谷化学
（株）製）溶液１００ｍｌにネオプルラナーゼ７５０Ｕ
を加え、５０℃で２４時間反応を行った。反応生成物中
の各オリゴ糖の割合は表４のようになった。 表４ 反応生成物中の各オリゴ糖の割合（％） ────────────────── Ｇ１ Ｇ２ Ｇ３ Ｂ２ Ｂ３ Ｂ４ ────────────────── 22.0 27.9 2.6 5.6 25.4 16.5 ──────────────────
（株）製）溶液１００ｍｌにネオプルラナーゼ７５０Ｕ
を加え、５０℃で２４時間反応を行った。反応生成物中
の各オリゴ糖の割合は表４のようになった。 表４ 反応生成物中の各オリゴ糖の割合（％） ────────────────── Ｇ１ Ｇ２ Ｇ３ Ｂ２ Ｂ３ Ｂ４ ────────────────── 22.0 27.9 2.6 5.6 25.4 16.5 ──────────────────
【００１９】実施例４ ネオプルラナーゼ（５０Ｕ／ｍｌ）１ｍｌをキトパール
（富士紡績（株）製）１ｇに加え、１．５時間ゆるやか
に攪拌して固定化酵素を作成する。これに１００ｍｌの
マルトトリオースを主とするマルトオリゴ糖溶液（１０
％）を加え、５０℃で１６時間振盪反応後、生成糖を高
速液体クロマトグラフィーで分析すると表５のような糖
組成を示した。 表５ 反応生成物中の各オリゴ糖の割合（％） ────────────────── Ｇ１ Ｇ２ Ｇ３ Ｂ２ Ｂ３ Ｂ４ ────────────────── 21.0 19.8 1.4 9.4 25.8 22.6 ──────────────────
（富士紡績（株）製）１ｇに加え、１．５時間ゆるやか
に攪拌して固定化酵素を作成する。これに１００ｍｌの
マルトトリオースを主とするマルトオリゴ糖溶液（１０
％）を加え、５０℃で１６時間振盪反応後、生成糖を高
速液体クロマトグラフィーで分析すると表５のような糖
組成を示した。 表５ 反応生成物中の各オリゴ糖の割合（％） ────────────────── Ｇ１ Ｇ２ Ｇ３ Ｂ２ Ｂ３ Ｂ４ ────────────────── 21.0 19.8 1.4 9.4 25.8 22.6 ──────────────────
─────────────────────────────────────────────────────
【手続補正書】
【提出日】平成３年１１月６日
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１２
【補正方法】削除 ─────────────────────────────────────────────────────
【手続補正書】
【提出日】平成３年１１月６日
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】図面の簡単な説明
【補正方法】追加
【補正内容】
【図面の簡単な説明】
【図１】 反応生成物のペーパークロマトグラフィーと
オートラジオグラムによる分析の図である。
オートラジオグラムによる分析の図である。
Claims (4)
- 【請求項１】 基質にネオプルラナーゼを作用させるこ
とを特徴とするイソパノースを含む甘味料の製造方法。 - 【請求項２】 糖質濃度５％以上の基質にネオプルラナ
ーゼを作用させることを特徴とするイソパノースを含む
甘味料の製造方法。 - 【請求項３】 基質にα−アミラーゼとネオプルラナー
ゼとを併用して作用させることを特徴とするイソパノー
スを含む甘味料の製造方法。 - 【請求項４】 基質にα−アミラーゼを作用させたのち
ネオプルラナーゼを作用させることを特徴とするイソパ
ノースを含む甘味料の製造方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP03258575A JP3089503B2 (ja) | 1991-09-09 | 1991-09-09 | イソパノースを含む甘味料の製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP03258575A JP3089503B2 (ja) | 1991-09-09 | 1991-09-09 | イソパノースを含む甘味料の製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH05316992A true JPH05316992A (ja) | 1993-12-03 |
| JP3089503B2 JP3089503B2 (ja) | 2000-09-18 |
Family
ID=17322158
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP03258575A Expired - Fee Related JP3089503B2 (ja) | 1991-09-09 | 1991-09-09 | イソパノースを含む甘味料の製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3089503B2 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104120117A (zh) * | 2013-04-23 | 2014-10-29 | 甘肃省商业科技研究所 | 一种新普鲁兰酶的制备和分离方法 |
-
1991
- 1991-09-09 JP JP03258575A patent/JP3089503B2/ja not_active Expired - Fee Related
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104120117A (zh) * | 2013-04-23 | 2014-10-29 | 甘肃省商业科技研究所 | 一种新普鲁兰酶的制备和分离方法 |
| CN104120117B (zh) * | 2013-04-23 | 2016-09-21 | 甘肃省商业科技研究所 | 一种新普鲁兰酶的制备和分离方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP3089503B2 (ja) | 2000-09-18 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP0464095B1 (en) | Novel hyperthermostable alpha - amylase | |
| Bergmann et al. | Selection of microorganisms which produce raw-starch degrading enzymes | |
| KR101647335B1 (ko) | 이소말토올리고사카라이드의 제조 및 이의 용도 | |
| WO1992003565A1 (en) | Oligosaccharide mixture, and procedure for its manufacturing | |
| Kusano et al. | Immobilization of Bacillus acidopullulyticus pullulanase and properties of the immobilized pullulanases | |
| Duong Hong et al. | Synthesis of isomaltooligosaccharides (IMOs) from sweet potato starch by simultaneous saccharification and transglycosylation using Saccharomyces cerevisiae var. diastaticus BE 134 to improve purity of IMOs | |
| JPH0330672A (ja) | 新規耐熱性および耐酸性プルラナーゼ酵素およびその製造方法 | |
| KAINUMA | Starch oligosaccharides: linear, branched, and cyclic | |
| JPH05316992A (ja) | イソパノースを含む甘味料の製造方法 | |
| JP2933960B2 (ja) | 分岐オリゴ糖の製造方法 | |
| JP3064031B2 (ja) | 新規オリゴ糖およびその製造法 | |
| JPH07191A (ja) | 高度分岐オリゴ糖の製造法 | |
| JP2559400B2 (ja) | マルトオリゴ糖生成アミラ−ゼ及びその製造法 | |
| JPH03236787A (ja) | 水飴の製造方法 | |
| JPS5937957B2 (ja) | アミラ−ゼｇ３によるマルトトリオ−スの製造法 | |
| JPH0823990A (ja) | オリゴ糖の製造方法 | |
| Suzuki | Recent advances of starch science and starch technology in Japan | |
| JPH04148693A (ja) | グルコース転移物の製造方法 | |
| Hong et al. | Research Article Synthesis of Isomaltooligosaccharides (IMOs) from Sweet Potato Starch by Simultaneous Saccharification and Transglycosylation Using Saccharomyces cerevisiae Var. diastaticus BE 134 to Improve Purity of IMOs | |
| JPH0231685A (ja) | 酵素法による単糖類の新規製造方法 | |
| JP2004222506A (ja) | α−グルカンからのセロビオ−スの製造法 | |
| JPH062072B2 (ja) | Ｎ−アセチルグルコサミン、グルコサミン、マンノ−ス又はアロ−スを末端に含む少糖類の製造方法 | |
| JPH062071B2 (ja) | 糖類の製造法 | |
| JP3682931B2 (ja) | ガラクトシル−マルトオリゴ糖誘導体の製造方法 | |
| JPH06271596A (ja) | オリゴ糖およびその製造方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |