JPH05252973A

JPH05252973A - ネオトレハロースの製造方法とその用途

Info

Publication number: JPH05252973A
Application number: JP4093936A
Authority: JP
Inventors: Takashi Shibuya; 孝渋谷; Hiroto Chaen; 博人茶圓; Shuzo Sakai; 修造堺; Toshio Miyake; 俊雄三宅
Original assignee: Hayashibara Biochemical Laboratories Co Ltd
Current assignee: Hayashibara Seibutsu Kagaku Kenkyujo KK
Priority date: 1992-02-25
Filing date: 1992-02-25
Publication date: 1993-10-05
Anticipated expiration: 2016-06-04
Also published as: KR930018035A; KR100257590B1; DE69303302D1; TW336954B; CA2089241A1; US5578469A; EP0558213B1; JP3172925B2; EP0558213A1

Abstract

(57)【要約】【目的】非還元性二糖類で良質の深みのある甘味を有
し、よく代謝利用され、エネルギー源となるネオトレハ
ロースの工業的製造方法とその用途の確立を目的とす
る。【構成】本発明は、澱粉質にα−アミラーゼを作用させ
てネオトレハロースを生成せしめ、これを採取すること
を特徴とするネオトレハロースの製造方法および、その
製造方法で得られたネオトレハロースを含有せしめた組
成物に関するものを構成としている。本発明により得ら
れるネオトレハロースは化学的に安定であるのに加え
て、甘味性、エネルギー賦与性、浸透圧調節性、賦型
性、照り付与性、保湿性、粘性、他糖の晶出防止性、難
発酵性などの諸性質を具備している。これらの諸性質
は、種々の組成物の製造に有利に利用できる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明はネオトレハロースの製造
方法とその用途に関し、詳細には澱粉質にα−アミラー
ゼを作用させて、ネオトレハロースを生成せしめ、これ
を採取することを特徴とするネオトレハロースの製造方
法と、そのネオトレハロースを含有せしめた飲食物、医
薬品などの組成物に関する。

【０００２】

【従来の技術】ネオトレハロースは、式：Ｏ−α−Ｄ−
グルコピラノシルβ−Ｄ−グルコピラノシド、または、
Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシルβ−Ｄ−グルコピラノシ
ド、で示される二糖類で古くから知られている。この糖
質は、深みのある甘味を有し、水に易溶性であり、非還
元性でそれ自体安定であり、各種飲料、加工食品、嗜好
物などに有利に利用しうることが期待される。

【０００３】ネオトレハロースを製造する方法は、例え
ば、ダブリュ・エヌ・ハワース（Ｗ．Ｎ．ＨＡＷＯＲＴ
Ｈ）がジャーナル・オブ・ケミカル・ソサエティ（Ｊｏ
ｕｒｎａｌｏｆＣｈｅｍｉｃａｌＳｏｃｉｅｔ
ｙ）、１９３１年、第２８４７乃至２８５０頁で、ま
た、ブイ・イー・エス・シャープ（Ｖ．Ｅ．Ｓ．ＳＨＡ
ＲＰ）等が同誌１９５１年、第２８５乃至２８８頁で報
告しているように、各種の化学的合成方法が知られてい
るものの、その収率は極めて低く、また、安全性の点で
も化学合成品であるため、利用するまでに解決しなけれ
ばならない多くの課題を残している。

【０００４】一方、より安全性の高い天然物からの調
製、または、生化学的手段による製造方法の提案がなさ
れている。例えば、松田は、日本農芸化学会誌、第３０
巻、第１１９乃至１２３頁（１９５９年）で、ネオトレ
ハロースが麹汁中にイソマルトース、コージビオースな
どとともに少量含まれていることを明らかにしている。
この報告によれば、ネオトレハロースの調製は、麹汁中
に含まれる非発酵性糖類をカーボンカラムクロマトグラ
フィーにかけて二糖類含有画分を採取し、この二糖類を
フェニルヒドラジン処理し、これにより生じた沈殿物を
濾別し、得られる濾液中の糖をアセチル化し、二糖類の
オクタアセテート結晶を得、次いで、この結晶を脱アセ
チル化することにより行われている。また、ゼット・エ
ル・ニコルブ（Ｚ．Ｌ．ＮＩＫＯＬＶ）等がバイオテク
ノロジー・アンド・バイオエンジニアリング（Ｂｉｏｔ
ｅｃｈｎｏｌｏｇｙａｎｄＢｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒ
ｉｎｇ）、第３４巻、第６９４乃至７０４頁（１９８９
年）で、グルコアミラーゼの縮合作用により、グルコー
スからネオトレハロースが０．４３％生成することを明
らかにしている。

【０００５】また、小林等は、特開昭６３−２１６４９
２号公報で澱粉にサイクロデキストリン合成酵素を作用
させることにより、ネオトレハロースをセントースとと
もに製造する方法を開示している。この公報によれば、
澱粉にサイクロデキストリン合成酵素を作用させた反応
液は、高速液体クロマトグラフィー分析でネオトレハロ
ース１８．６％およびセントース２０．０％を含んでお
り、さらに、このネオトレハロース画分には、ペーパー
クロマトグラフィー分析で約２０％のニゲロース、コー
ジビオース、イソマルトースが含まれていることを明ら
かにしている。そして、この反応液からネオトレハロー
スを製造する方法として、熱失活後、グルコアミラーゼ
と同時に酵母を添加し、生成するグルコースを資化させ
て除去し、ついで酵母を除去し、得られる溶液にカセイ
ソーダを加えてオートクレーブし、中和後、カラムクロ
マトグラフィー、溶媒沈殿法のいずれか、または、組み
合わせて行うことを提案している。これら両方法は、精
製工程が極めて煩雑で、その収率も低く、いずれの方法
も今だ工業的実施を見ていない。そこで、本発明者等は
平成２年特許願第３０７０５４号でラクトネオトレハロ
ース（Ｏ−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→４）−
Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシルα−Ｄ−グルコピラノシ
ド）にβ−ガラクトシダーゼを作用させてネオトレハロ
ースを生成せしめ、これを採取することを特徴とするネ
オトレハロースの製造方法とその用途を記載した。この
方法では、原料ラクトネオトレハロースに対し、ネオト
レハロースが高収率で得られるが、原料の調製に問題を
残した。

【０００６】

【発明が解決しようとする課題】ネオトレハロースを利
用する上で、安全で、容易かつ高収率なネオトレハロー
スの製造方法とその用途の確立が強く望まれる。

【０００７】

【課題を解決するための手段】本発明者は、ネオトレハ
ロースの製造方法とその用途の確立を目指し、とりわ
け、澱粉質分解酵素に着目し、鋭意研究を続けてきた。
その結果、澱粉質にα−アミラーゼ（ＥＣ３．２．
１．１）を作用させることにより、ネオトレハロースが
生成することを見い出し、加えて、得られるネオトレハ
ロースを含有せしめた組成物を確立して、本発明を完成
した。

【０００８】本発明に利用する澱粉質としては、澱粉ま
たはその部分分解物であって、通常ＤＥ約７０以下のも
のが適しており、例えば、糊化澱粉、液化澱粉、可溶性
澱粉、澱粉部分分解物、澱粉糖転移物などが適宜使用さ
れる。原料の澱粉としては、馬鈴薯澱粉、タピオカ澱
粉、甘藷澱粉などの地下澱粉、トウモロコシ澱粉、コム
ギ澱粉、コメ澱粉などの地上澱粉が適宜採用される。

【０００９】澱粉分解物としては、アミロース、デキス
トリンなどの高分子物だけでなく、マルトース、マルト
トリオース、マルトテトラオース、マルトペンタオー
ス、マルトヘキサオース、マルトヘプタオース、マルト
オクタオースなどから選ばれる１種または２種以上のマ
ルトオリゴ糖も適宜採用される。

【００１０】α−アミラーゼとしては、澱粉質からネオ
トレハロースを生成するものであれば良く、例えば、バ
チルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）属、アスペルギルス（Ａｓ
ｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）属等の微生物由来の酵素が適宜使
用される。これらのα−アミラーゼのうち、特に糖化型
α−アミラーゼがネオトレハロースの生成に適している
ことを見出だし、例えば、バチルス・ズブチリス（Ｂａ
ｃｉｌｌｕｓＳｕｂｔｉｌｉｓ）の糖化型α−アミラ
ーゼがネオトレハロースの生成率が高く、工業的に極め
て有利であることが判明した。

【００１１】糖化型α−アミラーゼとは二国二郎編「デ
ンプンハンドブック」第１０２乃至１０３頁１９７７年
朝倉書店に記載されているように、α−アミラーゼの澱
粉への作用形式で、糊精化力にくらべて糖化力が著しく
強いα−アミラーゼを示す。

【００１２】酵素反応方法は、ネオトレハロースを生成
する方法であればよく、例えば、バチルス・ズブチリス
の糖化型α−アミラーゼを使用する場合には、澱粉部分
分解物などの澱粉質を含有する水溶液に、酵素を澱粉質
固形分１グラム当たり１乃至１０００単位（糖化力）作
用させて、ネオトレハロースを生成させればよい。この
際、澱粉質の濃度は１乃至８０Ｗ／Ｗ％（以下、本明細
書では、特にことわらない限りＷ／Ｗ％を％で示す。）
望ましくは２０乃至７０％、温度２０乃至８０℃、ｐＨ
３乃至９、反応時間１乃至１００時間から選ばれる条件
で反応させればよい。必要に応じて、酵素を固定化して
繰り返し利用することも随意である。また、このように
して得られたネオトレハロース含有反応液にグルコアミ
ラーゼ、またはβ−アミラーゼ作用させることにより、
ネオトレハロース、α−グリコシルネオトレハロース等
を蓄積させることも出来る。

【００１３】以上述べたような、酵素反応によって生成
されるネオトレハロース含有溶液は、通常、固形物当た
り、ネオトレハロースを５乃至１５％程度含有してお
り、これを濾過、精製して液状で利用することも、ま
た、濃縮してシラップ状で利用することも、更に、乾燥
して固状で利用することも随意である。一般的には、ネ
オトレハロースの特長を生かすために、ネオトレハロー
ス生成溶液を、さらに、分離、精製して、ネオトレハロ
ース高含有物にして利用される。その方法としては、例
えば、酵母発酵法、膜濾過法、分別沈殿法、結晶化法、
カラムクロマトグラフィーなどにより夾雑糖類を分離除
去する方法が適宜採用できる。とりわけ、特開昭５８−
２３７９９号公報、特開昭５８−７２５９８号公報など
に開示されている塩型強酸性カチオン交換樹脂を用いる
カラムクロマトグラフィーにより、夾雑糖類を除去して
ネオトレハロース高含有画分を採取する方法は有利に実
施出来る。この際、固定床方式、移動床方式、擬似移動
床方式のいずれの方式を採用することも随意である。ま
た、このようにして得られるネオトレハロース高含有液
を濃縮して高濃度溶液にし、平成２年度特許願第３０７
０５４号に開示されている方法により結晶ネオトレハロ
ースを製造することも有利に実施できる。

【００１４】本発明のネオトレハロースは、非還元性二
糖類で極めて安定であり、その取扱いが容易であり、良
質で深みのある甘味を有している。また、本発明者等
が、平成３年特許願第２６８６８３号で記載したように
ネオトレハロースは、経口的または非経口的に使用さ
れ、毒性、副作用の懸念もなく、よく代謝利用され、生
体へのエネルギー補給に有利に利用できる。さらに、虫
歯誘発菌などによって、発酵されにくいことより、虫歯
をおこしにくい甘味料としても利用できる。また、安定
な甘味料であることより、プルラン、ヒドロキシエチル
スターチなどの結合剤と併用して、錠剤の糖衣剤として
利用することも有利に実施できる。また、化学的に安定
であるのに加えて、浸透圧調節性、賦形性、照り付与
性、保湿性、粘性、他糖の晶出防止性、難発酵性などの
性質を具備している。

【００１５】これら諸性質は、ネオトレハロースを、例
えば、甘味料、呈味改良剤、品質改良剤、安定剤などと
して、飲食物、嗜好物、飼料、化粧品、医薬品、などの
各種組成物に有利に利用できる。

【００１６】本発明の組成物は、ネオトレハロースを適
量含有し、ネオトレハロースの特長が活かせるものであ
ればよく、一般的には、その効果をより高めるために、
ネオトレハロースを固形物当たり５％以上、望ましくは
１０％以上含有せしめるのが好適である。

【００１７】本発明の組成物は、ネオトレハロース単体
であってもよいが、通常、ネオトレハロースとともに、
目的に応じて他の物質、例えば、蛋白質、アミノ酸、脂
質、ビタミン、ミネラルなどの栄養物質、または抗菌物
質、酵素、ホルモン、サイトカインなどの薬効物質など
から選ばれる一種または二種以上を含有せしめて製造さ
れる。この際、必要ならば他の適宜の物質、例えば、呈
味料、着色料、着香料、安定剤、増量剤、賦形剤などの
一種または二種以上を使用することも随意であり、得ら
れる組成物を目的に応じて適宜の形状にすることも随意
である。このようにして得られる組成物は、経口的また
は非経口的に利用することができる。

【００１８】組成物にネオトレハロースを含有せしめる
方法は、その製品が完成するまでの工程に含有せしめれ
ばよく、例えば、混和、混捏、溶解、融解、浸漬、散
布、塗布、被覆、噴霧、注入、晶出、固化などの公知の
方法が適宜選ばれる。

【００１９】以下、本発明のα−アミラーゼによるネオ
トレハロースの製造方法を実験で述べる。

【００２０】

【実験１】ネオトレハロース生成酵素の検索

【００２１】実験に用いた酵素として、α−アミラーゼ
（ＥＣ３．２．１．１，上田化学工業株式会社製の糖
化型α−アミラーゼ）、β−アミラーゼ（ＥＣ３．
２．１．２，ナガセ生化学工業株式会社製、商品名＃１
５００）、グルコアミラーゼ（ＥＣ３．２．１．３，
ナガセ生化学工業株式会社製、商品名グルコチーム）、
α−グルコシダーゼ（ＥＣ３．２．１．２０，生化学
工業株式会社製、イネ起源）、イソアミラーゼ（ＥＣ
３．２．１．６８，株式会社林原生物化学研究所製）を
用いた。これらの酵素をマルトース（（株）林原生物化
学研究所製、商品名マルトースＨＨＨ）の３３％水溶液
（ｐＨ６．０）にマルトースグラム当たり１０００単位
加え、５５℃で、２４時間作用させた。反応停止は１０
０℃で１０分間の熱処理で行なった。各酵素反応液を２
０ｍＭ酢酸緩衝液（ｐＨ４．５）で濃度約５％に希釈
し、その液にグルコアミラーゼを４０℃でマルトースグ
ラム当たり２０単位２４時間作用させた。このグルコア
ミラーゼ処理液中のネオトレハロースの有無をカラムに
ＰＡ−０３（ワイエムシー製）、溶離液に７０％（Ｖ／
Ｖ）アセトニトリル水溶液を用いた高速液体クロマトグ
ラフィーで調べた。その結果を表１に示した。

【００２２】

【表１】

【００２３】表１に示したように、グルコアミラーゼ、
α−グルコシダーゼ、α−アミラーゼがネオトレハロー
スを生成した。グルコアミラーゼとα−グルコシダーゼ
は従来の報告に見られるように、ネオトレハロースを僅
かに生成した。α−アミラーゼはネオトレハロースを大
量に生成した。この知見は今まで知られておらず、全く
新しい発見である。

【００２４】そこで、ネオトレハロースをより大量に生
成するα−アミラーゼの検索をおこなった。

【００２５】

【実験２】ネオトレハロースを生成するα−アミラーゼの検索

【００２６】実験に用いたα−アミラーゼとして、糖化
型α−アミラーゼ（上田化学工業株式会社製）、マルト
テトラオース生成酵素（株式会社林原製）、タカアミラ
ーゼ（新日本化学工業株式会社製、商品名スミチーム
Ｌ）、高温液化型α−アミラーゼ（ナガセ生化学工業株
式会社製，商品名ネオスピターゼおよびスピターゼＨ
Ｓ）を用いた。実験１と同じ方法でネオトレハロース生
成の有無を調べ、その結果を表２に示した。

【００２７】

【表２】

【００２８】表２に示したようにα−アミラーゼはネオ
トレハロースの生成量に差異は見られるものの、すべて
ネオトレハロースを生成した。この中で糖化型α−アミ
ラーゼがネオトレハロースを著しく多量に生成した。

【００２９】

【実験３】 α−アミラーゼによるネオトレハロースの調製

【００３０】マルトース（株式会社林原生物化学研究所
製、商品名マルトースＨ）５０重量部を水５０重量部に
加熱溶解し、この溶液を６０℃、ｐＨ５．２に調整した
後、バチルス・ズブチリスの糖化型α−アミラーゼ（生
化学工業株式会社製の結晶酵素）をマルトースグラム当
たり１００単位加えて２０時間反応させ、次いで１００
℃に１０分間加熱して、酵素を失活させた。この溶液を
ｐＨ４．５、５５℃に調整して、グルコアミラーゼ（ナ
ガセ生化学工業株式会社製、商品名グルコチーム）を固
形物当たり２０単位加え１６時間反応させ、次いで１０
０℃に１５分間加熱して、酵素を失活させた。この溶液
を実験１の場合と同様に高速液体クロマトグラフィーを
行ないそのクロマトグラムを図１に示した。図１におい
て、縦軸はＲＩ（ＲｅｆｒａｃｔｉｖｅＩｎｄｅｘ）
相対強度を示し、横軸は時間を示す。本溶液には、ネオ
トレハロースを固形物当たり約１２％含有していた。

【００３１】本溶液を活性炭で脱色し、イオン交換樹脂
（Ｈ型およびＯＨ型）にて脱塩して精製し、濃度約４０
％に濃縮して、イオン交換樹脂を用いたカラムクロマト
グラフィーを行ない、ネオトレハロース高含有画分を採
取した。分画用樹脂は、塩型強酸性カチオン交換樹脂
（オルガノ株式会社製、商品名アンバーライトＸＴ−１
０１６Ｎａ型）を使用し、内径５．４ｃｍのジャケット
付ステンレス製カラムに水懸濁状で充填した。この際、
樹脂層長５ｍのカラム４本を連続して樹脂層全長を約２
０ｍになるようにした。カラム内温度を５５℃に維持し
つつ、濃度約４０％の原料糖溶液を樹脂当たり５Ｖ／Ｖ
％加え、次いで５５℃の温水をＳＶ０．３の流速でなが
して分画し、ネオトレハロース高含有画分を採取した。
得られたネオトレハロース高含有液（固形物当たりネオ
トレハロースを約８５％含有）の一部をとり、濃度約７
５％に濃縮し、２０℃に一夜放置したところ、結晶が析
出した。この結晶を前記ネオトレハロース高含有液の約
７２％濃縮液に種晶として加え、ゆっくり撹拌しながら
助晶し、得られるマスキットを分蜜し、結晶に少量の水
をスプレーし、洗浄して高純度の結晶を得、さらに、こ
の結晶を水に溶解し、同様に処理して再結晶化、分蜜
し、純度９９．９％の極めて高純度のネオトレハロース
結晶を採取した。

【００３２】

【実験４】ネオトレハロースの理化学的性質

【００３３】実験３の方法で調製したネオトレハロース
の高純度結晶品を用いて理化学的性質を調べた。その結
果、本発明者等が平成２年特許願第３０７０５４号で示
したネオトレハロースの理化学的性質と同じであった。

【００３４】以下に本発明のネオトレハロースの製造方
法を実施例Ａで、本発明のネオトレハロースを含有せし
めた組成物を実施例Ｂで示す。

【００３５】

【実施例Ａ−１】デキストリン（ＤＥ１８、松谷化学工
業株式会社販売、商品名パインデックス＃４）５重量部
を水５重量部に加熱溶解し、この溶液をｐＨ５．６、６
０℃に調製して、糖化型α−アミラーゼ（上田化学工業
株式会社製）をデキストリングラム当たり１００単位加
えて２０時間反応させ、次いで加熱して酵素を失活させ
た。本溶液を、常法に従って、活性炭にて脱色、イオン
交換樹脂（Ｈ型およびＯＨ型）にて脱塩して精製し、濃
縮して濃度約７５％のシラップを固形物収率約９３％で
得た。本品は固形物当たり約１０％のネオトレハロース
を含有しており、深みのある甘味、適度の粘度、保湿性
を有し、各種組成物に有利に利用できる。

【００３６】

【実施例Ａ−２】（１）酵素の調製バチルス・ズブチリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓｓｕｂｔｉ
ｌｉｓ）ＩＦＯ１４１４０（ＦｕｋｕｍｏｔｏＤ１
１）菌株を下記の液体培地に植菌し、温度２７℃で３日
間培養した。培養ブロスを遠心分離し、その上清に硫安
を加えた。一夜冷室に放置後、遠心分離し沈殿物を回収
した。この沈殿物に０．１Ｍリン酸緩衝液ｐＨ７．０を
少量加え酵素を溶解した。これを酵素標品として用い
た。得られた酵素標品の酵素活性は３４０Ｕ／ｍｌであ
った。

【００３７】液体培地（ｐＨ７．０に調整）可溶性澱粉３．０％リン酸二アンモニウム１．０％ＣＳＬ１．０％酵母エキス０．１％ポリペプトン０．１％

【００３８】本明細書を通じて、活性（糖化力）は、１
％可溶性澱粉（２０ｍＭ酢酸緩衝液ｐＨ５．５）５ｍｌ
に酵素液０．２ｍｌを加え、４０℃で１０分間作用さ
せ、生成した還元糖量をソモジーネルソン（Ｓｏｍｏｇ
ｙｉ−Ｎｅｌｓｏｎ）法で測定する条件で求めた。活性
１単位は４０℃１分間に１μｍｏｌのグルコースに相当
する還元力を遊離する酵素量とした。

【００３９】（２）酵素反応

【００４０】マルトース（株式会社林原生物化学研究所
製、商品名マルトースＨ）５０重量部に水５０重量部加
え加熱溶解した。この基質に上記で調製した酵素標品を
マルトースグラム当たり５０単位、ｐＨ５．５、５５℃
で２４時間作用させた。酵素反応は反応液を沸騰水浴中
１０分保ち、停止させた。この酵素反応液を水で濃度約
５％に希釈し、ｐＨ４．５でグルコアミラーゼをマルト
ースグラムあたり２０単位添加し、４０℃、２４時間反
応させた。このグルコアミラーゼ処理液をガスクロマト
グラフィーで分析した。このガスクロマトグラムを図２
に示す。図２において、縦軸は、ＦＩＤ（Ｆｌａｍｅ
ＩｏｎｉｚａｔｉｏｎＤｅｔｅｃｔｏｒ）検出強度を
示し、横軸は時間を示す。この反応液にはネオトレハロ
ースが７．２％生成していた。本溶液を常法に従って、
活性炭にて脱色、イオン交換樹脂（Ｈ型およびＯＨ型）
にて脱塩して精製し、濃度約４０％に濃縮して、実験１
の方法に従って、カラムクロマトグラフィーを行ない、
ネオトレハロース高含有画分を採取した。本溶液にはネ
オトレハロースを固形物当たり５２％含有していた。本
溶液を濃縮して濃度約７５％のシラップを得た。本品
は、深みのある甘味、適度の粘度、保湿性を有し、各種
組成物に有利に利用できる。

【００４１】

【実施例Ａ−３】マルトース（株式会社林原、登録商標
サンマルト）６０重量部を水４０重量部に加熱溶解し、
この溶液を６０℃、ｐＨ５．２にして、糖化型α−アミ
ラーゼ（上田化学工業株式会社製）をマルトースグラム
当たり２００単位加えて３６時間反応させ、次いで加熱
して酵素を失活させた。本溶液を濃度約２０％まで希釈
し、ｐＨ５．０に調製して、グルコアミラーゼをマルト
ースグラム当たり１０単位加えて４０時間反応させ、次
いで加熱して酵素を失活させた。

【００４２】本溶液を常法に従って、活性炭にて脱色、
イオン交換樹脂（Ｈ型およびＯＨ型）にて脱塩して精製
し、濃度約６０％に濃縮した。分画用樹脂として、塩型
強酸性カチオン交換樹脂（オルガノ株式会社販売、商品
名ＣＧ６０００、Ｎａ型）を用いた以外は、実験１の
方法に従ってカラムクロマトグラフィーを行ない、ネオ
トレハロース高含有画分を採取した。本高含有液は、固
形物当たり約９０％のネオトレハロースを含有してい
た。本溶液を濃度約７６％に濃縮した後、助晶缶にと
り、種晶約２％を加えて徐冷し、晶出率約４５％のマス
キットを得た。本マスキットを乾燥塔上のノズルより１
５０ｋｇ／ｃｍ^２の高圧にて噴霧した。これと同時に８
５℃の熱風を乾燥塔の上部より送風して底部に設けた移
送金網コンベア上に捕集し、コンベアの下より４５℃の
温風を送りつつ、金網コンベア上に捕集した結晶粉末を
乾燥塔外に徐々に移動させ、取り出した。この取り出し
た結晶粉末を熟成塔に充填して温風を送りつつ１０時間
熟成させ、結晶化と乾燥を完了し、含蜜型結晶ネオトレ
ハロース粉末を得た。本品は、実質的に吸湿性を示さ
ず、取扱いが容易であり、甘味料、呈味改良剤、品質改
良剤、安定剤などとして各種組成物に有利に利用でき
る。

【００４３】

【実施例Ａ−４】実施例１で調製した固形物当たり約１
０％のネオトレハロースを含有溶液を、濃度約１０％ま
で希釈し、ｐＨ４．６にして、グルコアミラーゼをデキ
ストリングラム当たり３０単位加えて１６時間反応さ
せ、次いで加熱して酵素を失活させた。本溶液を、常法
に従って、活性炭にて脱色、イオン交換樹脂（Ｈ型およ
びＯＨ型）にて脱塩して精製し、濃度約４５％に濃縮し
た。分画用樹脂として、塩型強酸性カチオン交換樹脂
（ダウケミカル社販売、商品名ダウエックス５０Ｗ×
４、Ｃａ型）を用いた以外は、実験１の方法に従ってカ
ラムクロマトグラフィーを行ない、ネオトレハロース高
含有画分を採取した。本高含有液は、固形物当たり約８
５％のネオトレハロースを含有していた。本溶液を濃度
約８５％に濃縮して助晶缶にとり、２０℃で４日間静置
して晶出、固化させ、次いで切削型粉砕機にて粉砕し、
乾燥して含蜜型結晶ネオトレハロース粉末を得た。本品
は、実質的に吸湿性を示さず、取扱いが容易であり、甘
味料、呈味改良剤、品質改良剤、安定剤などとして各種
組成物に有利に利用できる。

【００４４】

【実施例Ｂ−１】甘味料実施例Ａ−３の方法で得た結晶性ネオトレハロース粉末
１重量部に、α−グリコシルステビオシド（東洋精糖株
式会社販売、商品名α−Ｇスイート）０．０５重量部を
均一に混合し、顆粒成形機にかけて、顆粒状甘味料を得
た。本品は、甘味の質が優れ、蔗糖の約２倍の甘味度を
有し、甘味度当りカロリーは、蔗糖の約１／２に低下し
ている。本甘味料は、低カロリー甘味料として、カロリ
ー摂取を制限している肥満者、糖尿病者などのための低
カロリー飲食物などに対する甘味付に好適である。ま
た、本甘味料は、虫歯誘発菌による酸の生成が少なく、
不溶性グルカンの生成も少ないことより、虫歯を抑制す
る飲食物などに対する甘味付に好適である。

【００４５】

【実施例Ｂ−２】ハードキャンデー濃度５５％蔗糖溶液１００重量部に実施例Ａ−２の方法
で得たネオトレハロース含有シラップ３０重量部を加熱
混合し、次いで減圧下で水分２％未満になるまで加熱濃
縮し、これにクエン酸１重量部および適量のレモン香料
と着色料とを混和し、常法に従って成形し、製品を得
た。本品は、歯切れ、呈味良好で、蔗糖の晶出も起こら
ない高品質のハードキャンデーである。

【００４６】

【実施例Ｂ−３】いちごジャム生いちご１５０重量部、蔗糖６０重量部、マルトース２
０重量部、実施例Ａ−２の方法で得たネオトレハロース
含有シラップ４０重量部、ペクチン５重量部およびクエ
ン酸１重量部をなべで煮詰め、ピン詰めして製品を得
た。本品は、風味、色調とも良好なジャムである。

【００４７】

【実施例Ｂ−４】乳酸飲料脱脂乳１０重量部を８０℃で２０分間加熱殺菌した後、
４０℃に冷却し、これにスターター０．３重量部を加え
て約３７℃で１０時間醗酵させた。次いで、これをホモ
ジナイズした後、実施例Ａ−４の方法で得た結晶性ネオ
トレハロース粉末４重量部、蔗糖１重量部および異性化
糖シラップ２重量部を加えて７０℃に保って殺菌した。
これを冷却し、適量の香料を加え、ピン詰めして製品を
得た。本品は、風味、甘味が酸味とよく調和した高品質
の乳酸飲料である。

【００４８】

【実施例Ｂ−５】加糖練乳原乳１００重量部に実施例Ａ−２の方法で得たネオトレ
ハロース含有シラップ３重量部および蔗糖１重量部を溶
解し、プレートヒーターで加熱殺菌し、次いで濃度約７
０％に濃縮し、無菌状態で缶詰めして製品を得た。本品
は、温和な甘味で、風味もよく、乳幼児食品、フルー
ツ、コーヒー、ココア、紅茶などの調味用に有利に利用
できる。

【００４９】

【実施例Ｂ−６】粉末ジュース噴霧乾燥により製造したオレンジ果汁粉末３３重量部に
対し、実施例Ａ−３の方法で得た結晶性ネオトレハロー
ス粉末５０重量部、蔗糖１０重量部、無水クエン酸０．
６５重量部、リンゴ酸０．１重量部、Ｌ−アスコルビン
酸０．１重量部、クエン酸ソーダ０．１重量部、プルラ
ン０．５重量部、粉末香料適量をよく混合撹拌し、粉砕
し微粉末にしてこれを流動層造粒機に仕込み、排風温度
４０℃、風量毎分１５０ｍ^３とし、これに実施例Ａ−３
の方法で得たネオトレハロース高含有溶液をバインダー
としてスプレーし、３０分間造粒し、計量、包装して製
品をを得た。本品は、果汁含有率約３０％の粉末ジュー
スである。また、本品は異味、異臭がなく、吸湿固結も
起こさず長期に安定であった。

【００５０】

【実施例Ｂ−７】チョコレートカカオペースト４０重量部、カカオバター１０重量部、
実施例Ａ−４の方法で得た結晶性ネオトレハロース粉末
５０重量部を混合してレファイナーに通して粒度を下げ
た後、コンチェに入れて５０℃で２昼夜練り上げる。こ
の間に、レシチン０．５重量部を加え充分に混和分散さ
せた。次いで、温度調節機で３１℃に調節し、バターの
固まる直前に型に流し込み、振動機でアワ抜きを行な
い、１０℃の冷却トンネルを２０分間くぐらせて固化さ
せた。これを型抜きして包装し製品を得た。本品は、吸
湿性がなく、色、光沢共によく、内部組織も良好で、口
中でなめらかに溶け、上品な甘味とまろやかな風味を有
する。

【００５１】

【実施例Ｂ−８】チューインガムガムベース３重量部を柔らかくなる程度に加熱溶融し、
これに蔗糖４重量部および実施例Ａ−３の方法で得た結
晶性ネオトレハロース粉末３重量部とを加え、更に適量
の香料と着色料とを混合し、常法に従って、ロールによ
り練り合わせ、成形、包装して製品を得た。本品は、テ
クスチャー、風味とも良好なチューインガムである。

【００５２】

【実施例Ｂ−９】カスタードクリームコーンスターチ１００重量部、実施例Ａ−２の方法で得
たネオトレハロース含有シラップ１００重量部、マルト
ース８０重量部、蔗糖２０重量部および食塩１重量部を
充分に混合し、鶏卵２８０重量部を加えて撹拌し、これ
に沸騰した牛乳１，０００重量部を徐々に加え、更に、
これを火にかけて撹拌を続け、コーンスターチが完全に
糊化して全体が半透明になった時に火を止め、これを冷
却して適量のバニラ香料を加え、計量、充填、包装して
製品を得た。本品は、なめらかな光沢を有し、温和な甘
味で美味である。

【００５３】

【実施例Ｂ−１０】ういろうの素米粉９０重量部に、コーンスターチ２０重量部、実施例
Ａ−４の方法で得た結晶性ネオトレハロース粉末１２０
重量部、プルラン４重量部を均一に混合してういろうの
素を製造した。ういろうの素と適量の抹茶と水とを混練
し、これを容器に入れて６０分間蒸し上げて抹茶ういろ
うを製造した。本品は、照り、口当りも良好で、風味も
良い。また、澱粉の老化も抑制され、日持ちもよい。

【００５４】

【実施例Ｂ−１１】流動食用固体製剤実験３の方法で得た結晶ネオトレハロース５００重量
部、粉末卵黄２７０重量部、脱脂粉乳２０９重量部、塩
化ナトリウム４．４重量部、塩化カリウム１．８５重量
部、硫酸マグネシウム４重量部、チアミン０．０１重量
部、アスコルビン酸ナトリウム０．１重量部、ビタミン
Ｅアセテート０．６重量部およびニコチン酸アミド０．
０４重量部からなる配合物を調製し、この配合物２５グ
ラムずつ防湿性ラミネート小袋に充填し、ヒートシール
して製品を得た。本品は、１袋分を約１５０乃至３００
ｍｌの水に溶解して流動食とし、経口的、または鼻腔、
胃、腸などへ経管的使用方法により利用される。本品
は、エネルギー補給用組成物として有利に使用できる。

【００５５】

【実施例Ｂ−１２】輸液剤実験３の方法で得た結晶ネオトレハロースを水に濃度約
１０Ｗ／Ｖ％に溶解し、次いで、常法に従って、精密濾
過し、プラスチック製ボトルに無菌的に充填し施栓して
製品を得た。本品は、経日変化もなく安定な輸液剤で、
静脈内、腹腔内などに投与するのに好適である。本品は
濃度１０Ｗ／Ｖ％で血液と等張で、グルコースの場合の
２倍濃度でエネルギー補給できる。

【００５６】

【実施例Ｂ−１３】輸液剤実験３の方法で得た結晶ネオトレハロースと下記の組成
のアミノ酸配合物とがそれぞれ５Ｗ／Ｖ％、３Ｗ／Ｖ％
になるように水に混合溶解し、次いで実施例Ｂ−１２と
同様に精製し、更に、プラスチック製バッグに充填し施
栓して製品を得た。

【００５７】

【００５８】本品は、糖質とアミノ酸との複合輸液剤に
もかかわらず、ネオトレハロースが還元性を示さないた
め、経日変化もなく安定な輸液剤で、静脈内、腹腔内な
どへ投与するのに好適である。本品は、エネルギー補給
用組成物として、エネルギー補給のみならず、アミノ酸
補給のためにも有利に利用できる。

【００５９】

【実施例Ｂ−１４】外傷治療用膏薬実施例Ａ−４の方法で得た結晶性ネオトレハロース粉末
５００重量部に、ヨウ素３重量部を溶解したメタノール
５０重量部を加え混合し、更に１０Ｗ／Ｗ％プルラン水
溶液２００重量部を加えて混合し、適度の延び、付着性
を示す外傷治療用膏薬を得た。本品は、ヨウ素による殺
菌作用のみならず、ネオトレハロースによる細胞へのエ
ネルギー補給用組成物としても作用することから、治癒
期間が短縮され、創面もきれいに治る。

【００６０】

【実施例Ｂ−１５】糖衣錠重量１５０ｍｇの素錠を芯剤とし、これに実験３の方法
で得た結晶ネオトレハロース４０重量部、プルラン（平
均分子量２０万）２重量部、水３０重量部、タルク２５
重量部および酸化チタン３重量部からなる下掛け液を用
いて錠剤重量が約２３０ｍｇになるまで糖衣し、次い
で、同じ結晶ネオトレハロース６５重量部、プルラン１
重量部および水３４重量部からなる上掛け液を用いて糖
衣し、更に、ロウ液で艷出しして光沢のある外観の優れ
た糖衣錠を得た。本品は、糖衣掛け時の作業性が優れて
いるだけでなく、耐衝撃性にも優れており、高品質を長
時間維持する。本品は、エネルギー補給用組成物として
有利に利用できる。

【００６１】

【発明の効果】上記から明らかなように、澱粉質にα−
アミラーゼを作用させて得られるネオトレハロースはそ
の生成率が高く、分離、精製も容易である。このように
して得られるネオトレハロースは非還元性二糖類で、極
めて安定であり、良質で深みのある甘味を有している。
また、経口的または非経口的に使用され、毒性、副作用
の懸念もなく、よく代謝利用され、生体へのエネルギー
補給に有利に利用される。結晶ネオトレハロースは、水
に溶解し易いにもかかわらず、実質的に難吸湿性でその
取扱いが容易である。さらに、ネオトレハロースは化学
的に安定であるのに加えて、浸透圧調節性、賦型性、照
り付与性、保湿性、粘性、他糖の晶出防止性、難発酵性
などの諸性質を具備している。これらの諸性質は、甘味
料、呈味改良剤、品質改良剤、安定剤などとして各種組
成物の製造に有利に利用できる。

【００６２】従って、本発明のネオトレハロースの製造
方法とその用途の確立は、食品、化粧品、医薬品分野な
どへの工業的意義が極めて大きい。

【図面の簡単な説明】

【図１】酵素反応液の高速液体クロマトグラフィーによ
るクロマトグラムを示す図。

【図２】酵素反応液のガスクロマトグラフィーによるク
ロマトグラムを示す。

フロントページの続き (51)Int.Cl.⁵ 識別記号庁内整理番号ＦＩ技術表示箇所Ａ２３Ｇ 3/00 １０１１０５ 3/30 Ａ２３Ｌ 1/06 1/19 1/236 Ａ 8114−4Ｂ 1/307 1/32 Ｚ 8931−4Ｂ 2/00 ＱＡ６１Ｋ 9/28 Ａ 7329−4Ｃ 31/71 ＡＢＹ 8314−4ＣＡＤＡＡＤＤ

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】澱粉質にα−アミラーゼを作用させてネ
オトレハロースを生成せしめ、これを採取することを特
徴とするネオトレハロースの製造方法。
【請求項２】 α−アミラーゼが糖化型α−アミラー
ゼであることを特徴とする請求項１記載のネオトレハロ
ースの製造方法。
【請求項３】澱粉質にα−アミラーゼを作用させ、得ら
れるネオトレハロースを含有する水溶液を塩型強酸性カ
チオン交換樹脂を用いるカラムクロマトグラフィーにか
け、ネオトレハロース高含有画分を採取し、これを濃縮
して、ネオトレハロース高含有シラップを採取すること
を特微とするネオトレハロースの製造方法。
【請求項４】澱粉質に糖化型α−アミラーゼを作用さ
せ、得られるネオトレハロースを含有する水溶液を塩型
強酸性カチオン交換樹脂を用いるカラムクロマトグラフ
ィーにかけ、ネオトレハロース高含有画分を採取し、こ
れを濃縮して、ネオトレハロースを晶出、採取すること
を特微とする結晶ネオトレハロースの製造方法。
【請求項５】澱粉質にＧ−アミラーゼを作用させてネ
オトレハロースを生成せしめ、これを採取して得られる
ネオトレハロースを含有せしめた組成物。