JPH05239089A - 固相法ペプチド合成用クリーベイジ処理装置 - Google Patents

固相法ペプチド合成用クリーベイジ処理装置

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Abstract

(57)【要約】 【構成】 固相法ペプチド合成用クリーベイジ処理装置
２は、固相法ペプチド合成法による保護ペプチドレジン
の合成とクリーベイジ処理とに兼用され得る反応容器５
と、加圧装置６とを備えている。反応容器５は、反応室
と、キャップにより密栓可能なドレン口と、反応室とド
レン口とを区分するためのフィルタとを有しており、加
圧装置４により反応室の内圧を高めると、単離されたペ
プチドの溶解したクリーベイジ試薬のみを外部に排出で
きる。 【効果】 クリーベイジ処理効率を高めることができる
上に、同時に多種の合成ペプチドを処理できる。

Description

【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、クリーベイジ処理装
置、特に、固相法ペプチド合成法において、固相支持体
に結合したペプチドを固相支持体から分離するための固
相法ペプチド合成用クリーベイジ処理装置に関する。
【０００２】
【従来の技術とその課題】固相法によるペプチド合成を
自動的に行うためのペプチドシンセサイザーが知られて
いる。このようなペプチドシンセサイザーによれば、固
相支持体に一端が結合しているペプチド、即ち保護ペプ
チドレジンが自動的に合成できる。前記ペプチドシンセ
サイザーによるペプチドの合成過程では、反応容器内で
自動的に合成できるのが保護ペプチドレジンに止まるた
め、固相支持体からペプチドを単離するためのクリーベ
イジ処理が別に必要となる。クリーベイジ処理は、一般
に手動で行われている。具体的な操作は、反応容器内の
固相支持体を掻き出して別の容器に移し変える。そし
て、固相支持体をクリーベイジ試薬により処理してペプ
チドを分離し、一般的な抽出操作によりペプチドの抽出
液を取り出す。
【０００３】このように、ペプチドシンセサイザーによ
るペプチド合成操作では、クリーベイジ処理で種々の操
作を行うために固相支持体のメカニカルロス等が発生し
易く、ペプチドの収量が低下し易い。また、クリーベイ
ジ処理時にペプチドのコンタミネーションのおそれもあ
る。本発明の目的は、固相法ペプチド合成法において、
クリーベイジ処理の効率を高めることにある。
【０００４】
【課題を解決するための手段】本発明に係る固相法ペプ
チド合成用クリーベイジ処理装置は、固相支持体に結合
したペプチドを固相支持体から分離するための装置であ
る。この装置は、反応容器と、栓部材と、加圧装置とを
備えている。反応容器は、固相法ペプチド合成法を実施
可能な反応室と、ドレン口と、反応室とドレン口とを区
画しかつ固相支持体を支持し得るフィルタとを有してい
る。また、栓部材は反応容器のドレン口を密栓するため
のものであり、加圧装置は反応室内を加圧するための装
置である。
【０００５】
【作用】本発明に係る固相法ペプチド合成用クリーベイ
ジ処理装置によれば、固相法ペプチド合成法により反応
容器の反応室内で合成された保護ペプチドレジンから、
次のような処理によりペプチドを分離できる。まず、ド
レン口を栓部材により密栓して反応室内にクリーベイジ
試薬（固相支持体とペプチドとの分離反応を行うための
試薬）を加えると、保護ペプチドレジンを反応室から他
の容器に移し替えることなくクリーベイジ処理できる。
処理後、ドレン口の栓部材を取り外してから反応室内を
加圧装置により加圧すると、固相支持体から分離したペ
プチドを含むクリーベイジ試薬はフィルタを通ってドレ
ン口から反応容器外に排出される。また、ペプチドの溶
解した抽出液を遠心分離した後に上清をデカンテーショ
ンにより除去すると、ペプチドの沈殿が得られる。この
沈殿は湿った状態であるが、加圧装置を用いると効率良
く乾燥できるので、ロスなく迅速にペプチドを得ること
ができる。
【０００６】
【実施例】図１に、本発明の一実施例が組み合わされた
固相法ペプチド合成装置のシステム構成を示す。この固
相法ペプチド合成装置１は、前記実施例に係るクリーベ
イジ処理装置２と、試薬供給装置３と、ドレン装置４と
から主に構成されている。クリーベイジ処理装置２は、
固相法ペプチド合成法による保護ペプチドレジンの合成
とクリーベイジ処理とに兼用され得る着脱可能な反応容
器５と、加圧装置６とを有している。反応容器５は、概
ね円筒状であり、図２に示すように一端に試料供給口５
ａを有している。試料供給口５ａの周囲には、フランジ
部７が形成されている。また、反応容器５の他端には、
ドレン口８が設けられている。ドレン口８は、反応容器
５から突出しており、テーパ形状に、あるいは外周面に
ねじ溝が形成されている。また、ドレン口８は、内周面
に対応するテーパあるいはねじ溝が形成されたキャップ
９により液密に封止され得る。なお、反応容器５は、後
述する固相支持体と化学反応には関与せず、静電気を起
こしにくい素材、たとえば安価でありかつ生成したペプ
チドとの不特異的吸着が少ないポリプロピレン製であ
る。
【０００７】反応容器５は、内部がドレン口８近傍に配
置されたフィルタ１０により区画されており、これによ
り内部に反応室１１が形成されている。フィルタ１０
は、多孔質体であり、たとえば高分子材料製である。フ
ィルタ１０用の高分子材料としては、たとえばポリアル
キレンが用いられる。ポリアルキレンとしては、ポリプ
ロピレン、ポリエチレン等が例示できる。このうち、特
にポリプロピレンが好ましい。
【０００８】加圧装置６は、図３に示すように、本体１
２とエアガン１３とから主に構成されている。本体１２
は、内部に図示しない調圧弁を有している。この調圧弁
は、本体１２の外部に調節用のつまみ１４を有してい
る。また、調圧弁は、本体１２から突出するインレット
１５及びアウトレット１６を有している。インレット１
５には、図示しない窒素ガスボンベが連結されている。
エアガン１３は、把持部１７と、ノズル部１８とから主
に構成されている。把持部１７には、本体１２のアウト
レット１６とチューブ１９を介して連結された流路（図
示せず）が内部に設けられている。この流路の他端は、
ノズル部１８に接続されている。ノズル部１８は、本体
１２からの加圧ガスを噴出するための部材であり、先端
部に反応容器５の試料供給口５ａを気密に封止するため
のシールゴム２０を有している。なお、ノズル部１８
は、把持部２２に設けられたＯＮ／ＯＦＦレバー２１の
操作によりＯＮまたはＯＦＦに設定される。また、シー
ルゴム２０は、ニードル２０ａと取り替え可能である。
【０００９】試薬供給装置３は、一端が反応容器５の試
料供給口５ａに着脱可能な試薬供給路２２を有してい
る。試薬供給路２２には、固相法ペプチド合成を実施す
るために必要な種々の試薬を供給するための複数の試薬
タンク２３と、洗浄液を供給するための複数の洗浄液タ
ンク２４とを有している。また、試薬供給路２２の他端
は、図示しない窒素ガス供給装置に接続している。
【００１０】ドレン装置４は、反応容器５のドレン口８
に連結可能であり、廃液流路２５とＮ2 ガス供給路２６
とに分岐している。廃液流路２５とＮ2 ガス供給路２６
とは、切り換えバルブ２７によりいずれか一方のみがド
レン口８と通じるように切り換え可能である。次に、前
記実施例の作用・効果に触れつつ前記固相法ペプチド合
成装置１によるペプチド合成操作について説明する。
【００１１】まず、反応容器５内において、保護ペプチ
ドレジンを合成する。保護ペプチドレジンの合成では、
反応容器５のフィルタ１０上に粉末粒状の固相支持体を
配置し、これに試薬供給路２２を通じて試薬タンク２３
からの各種試薬を所定の順に供給して処理する。このよ
うな保護ペプチドレジンの合成時には、ドレン装置４の
切り換えバルブ２７を操作してドレン口８とＮ2 ガス供
給路２６とを接続し、反応容器５にＮ2 ガスを供給す
る。このＮ2 ガスはフィルタ１０を通って反応室１１内
でバブリングし、固相支持体と試薬とを攪拌する。ま
た、試薬タンク２３を切り換えた場合は、洗浄液タンク
２４の洗浄液を試薬供給路２２を通じて反応室１１内に
供給し、不要な試薬を洗い流す。ここでは、切り換えバ
ルブ２７を切り換えてドレン口８と廃液流路２５とを接
続し、廃液流路２５から洗浄液を排出する。
【００１２】保護ペプチドレジンの合成終了後、試薬供
給路２２を通じて反応室１１内にＮ 2 ガスを供給し、乾
燥処理を施す。次に、クリーベイジ処理装置２により、
合成された保護ペプチドレジンのクリーベイジ処理を行
う。まず、反応容器５から試薬供給路２２及びドレン装
置４を取り外し、ドレン口８をキャップ９により密栓す
る。そして、図４に示すように、この反応容器５を遠心
管２８内に挿入してフランジ部７により支持し、この遠
心管２７をスタンド３０により起立させる。なお、スタ
ンド３０は、互いに連結された円盤状の底板３１と支持
板３２とからなり、底板３１及び支持板３２には、それ
ぞれ対応する部位にボール状の凹部３１ａ及び挿入孔３
２ａが設けられている。遠心管２８は、支持板３２の挿
入孔３２ａに挿入され、底部が底板３１の凹部３１ａに
より支持される。
【００１３】次に、反応容器５の試料供給口５ａから反
応室１１内にクリーベイジ試薬を注入し、所定時間静置
する。これにより、反応室１１内の保護ペプチドレジン
は、固相支持体とペプチドとに分離する。クリーベイジ
処理の終了後、反応容器５を遠心管２８から取り出し、
キャップ９を取り外してから再び遠心管２８内に挿入す
る。そして、加圧装置６のエアガン１３に設けられたノ
ズル部１８のシールゴム２０を反応容器５の試料供給口
５ａに気密に圧接し、本体１２の調圧弁により調圧され
たＮ2 ガスをノズル部１８から反応室１１内に注入す
る。これにより、反応室１１が加圧され、固相支持体か
ら分離したペプチドを含むクリーベイジ試薬がフィルタ
１０を通過してドレン口８から遠心管２８内に排出され
る。
【００１４】次に、遠心管２８内に排出されたクリーベ
イジ試薬からペプチドを単離する。単離操作は、たとえ
ば遠心管２８内にエーテルを加えてペプチドを沈殿さ
せ、遠心管２８を遠心機にかけてから上清液をデカンテ
ーションで除去することにより行う。上清液を除去後の
ペプチドの沈殿は、エーテルによりウェットであるが、
加圧装置６を用いて乾燥可能である。ここでは、加圧装
置６のシールゴム２０をニードル２０ａに取り替える。
そして、ニードル２０ａを遠心管２８内に挿入し、沈殿
が吹き飛ばないようにＮ2 ガスを吹き付けると、ペプチ
ドを効率良くしかもロスなく迅速に乾燥できる。
【００１５】上述のように、本実施例のクリーベイジ処
理装置２によれば、反応容器５内で合成された保護ペプ
チドレジンの移し変え操作が不要となり、反応容器５内
の保護ペプチドレジンに対して直接クリーベイジ処理を
施すことができる。したがって、保護ペプチドレジンの
メカニカルロスやペプチドのコンタミネーションが起こ
りにくく、高純度のペプチドが効率良く得られる。
【００１６】
【発明の効果】本発明の固相法ペプチド合成用クリーベ
イジ処理装置によれば、上述のように反応容器内の保護
ペプチドレジンに対して直接クリーベイジ処理を施すこ
とができるので、クリーベイジ処理の効率を高めること
ができる。
【図面の簡単な説明】
【図１】本発明の一実施例が組み合わされた固相法ペプ
チド合成装置のシステム構成図。
【図２】前記実施例に採用された反応容器の縦断面図。
【図３】前記実施例に採用された加圧装置の斜視図。
【図４】前記実施例によるクリーベイジ処理操作の一工
程を示す斜視図。
【符号の説明】
４ 加圧装置 ５ 反応容器 ８ ドレン口 ９ キャップ １０ フィルタ １１ 反応室 ２０ シールゴム

Claims (1)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】固相支持体に結合したペプチドを前記固相
    支持体から分離するためのクリーベイジ処理装置であっ
    て、 前記固相法ペプチド合成法を実施可能な反応室と、ドレ
    ン口と、前記反応室と前記ドレン口とを区画しかつ前記
    固相支持体を支持し得るフィルタとを有する反応容器
    と、 前記ドレン口を密栓するための栓部材と、 前記反応室内を加圧するための加圧装置と、を備えた固
    相法ペプチド合成用クリーベイジ処理装置。
JP4043312A 1992-02-28 1992-02-28 固相法ペプチド合成用クリーベイジ処理装置 Expired - Fee Related JPH0794468B2 (ja)

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