JPH0794468B2 - 固相法ペプチド合成用クリーベイジ処理装置 - Google Patents

固相法ペプチド合成用クリーベイジ処理装置

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JPH0794468B2 JP4043312A JP4331292A JPH0794468B2 JP H0794468 B2 JPH0794468 B2 JP H0794468B2 JP 4043312 A JP4043312 A JP 4043312A JP 4331292 A JP4331292 A JP 4331292A JP H0794468 B2 JPH0794468 B2 JP H0794468B2
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Description

【発明の詳細な説明】
【0001】
【産業上の利用分野】本発明は、クリーベイジ処理装
置、特に、固相法ペプチド合成法において、固相支持体
に結合したペプチドを固相支持体から分離するための固
相法ペプチド合成用クリーベイジ処理装置に関する。
【0002】
【従来の技術とその課題】固相法によるペプチド合成を
自動的に行うためのペプチドシンセサイザーが知られて
いる。このようなペプチドシンセサイザーによれば、固
相支持体に一端が結合しているペプチド、即ち保護ペプ
チドレジンが自動的に合成できる。前記ペプチドシンセ
サイザーによるペプチドの合成過程では、反応容器内で
自動的に合成できるのが保護ペプチドレジンに止まるた
め、固相支持体からペプチドを単離するためのクリーベ
イジ処理が別に必要となる。クリーベイジ処理は、一般
に手動で行われている。具体的な操作は、反応容器内の
固相支持体を掻き出して別の容器に移し変える。そし
て、固相支持体をクリーベイジ試薬により処理してペプ
チドを分離し、一般的な抽出操作によりペプチドの抽出
液を取り出す。
【0003】このように、ペプチドシンセサイザーによ
るペプチド合成操作では、クリーベイジ処理で種々の操
作を行うために固相支持体のメカニカルロス等が発生し
易く、ペプチドの収量が低下し易い。また、クリーベイ
ジ処理時にペプチドのコンタミネーションのおそれもあ
る。本発明の目的は、固相法ペプチド合成法において、
クリーベイジ処理の効率を高めることにある。
【0004】
【課題を解決するための手段】本発明に係る固相法ペプ
チド合成用クリーベイジ処理装置は、固相支持体に結合
したペプチドを固相支持体から分離するための装置であ
る。この装置は、反応容器と、栓部材と、加圧装置とを
備えている。反応容器は、固相法ペプチド合成法を実施
可能な反応室と、ドレン口と、反応室とドレン口とを区
画しかつ固相支持体を支持し得るフィルタとを有してい
る。また、栓部材は反応容器のドレン口を密栓するため
のものであり、加圧装置は反応室内を加圧するための装
置である。
【0005】
【作用】本発明に係る固相法ペプチド合成用クリーベイ
ジ処理装置によれば、固相法ペプチド合成法により反応
容器の反応室内で合成された保護ペプチドレジンから、
次のような処理によりペプチドを分離できる。まず、ド
レン口を栓部材により密栓して反応室内にクリーベイジ
試薬(固相支持体とペプチドとの分離反応を行うための
試薬)を加えると、保護ペプチドレジンを反応室から他
の容器に移し替えることなくクリーベイジ処理できる。
処理後、ドレン口の栓部材を取り外してから反応室内を
加圧装置により加圧すると、固相支持体から分離したペ
プチドを含むクリーベイジ試薬はフィルタを通ってドレ
ン口から反応容器外に排出される。また、ペプチドの溶
解した抽出液を遠心分離した後に上清をデカンテーショ
ンにより除去すると、ペプチドの沈殿が得られる。この
沈殿は湿った状態であるが、加圧装置を用いると効率良
く乾燥できるので、ロスなく迅速にペプチドを得ること
ができる。
【0006】
【実施例】図1に、本発明の一実施例が組み合わされた
固相法ペプチド合成装置のシステム構成を示す。この固
相法ペプチド合成装置1は、前記実施例に係るクリーベ
イジ処理装置2と、試薬供給装置3と、ドレン装置4と
から主に構成されている。クリーベイジ処理装置2は、
固相法ペプチド合成法による保護ペプチドレジンの合成
とクリーベイジ処理とに兼用され得る着脱可能な反応容
器5と、加圧装置6とを有している。反応容器5は、概
ね円筒状であり、図2に示すように一端に試料供給口5
aを有している。試料供給口5aの周囲には、フランジ
部7が形成されている。また、反応容器5の他端には、
ドレン口8が設けられている。ドレン口8は、反応容器
5から突出しており、テーパ形状に、あるいは外周面に
ねじ溝が形成されている。また、ドレン口8は、内周面
に対応するテーパあるいはねじ溝が形成されたキャップ
9により液密に封止され得る。なお、反応容器5は、後
述する固相支持体と化学反応には関与せず、静電気を起
こしにくい素材、たとえば安価でありかつ生成したペプ
チドとの不特異的吸着が少ないポリプロピレン製であ
る。
【0007】反応容器5は、内部がドレン口8近傍に配
置されたフィルタ10により区画されており、これによ
り内部に反応室11が形成されている。フィルタ10
は、多孔質体であり、たとえば高分子材料製である。フ
ィルタ10用の高分子材料としては、たとえばポリアル
キレンが用いられる。ポリアルキレンとしては、ポリプ
ロピレン、ポリエチレン等が例示できる。このうち、特
にポリプロピレンが好ましい。
【0008】加圧装置6は、図3に示すように、本体1
2とエアガン13とから主に構成されている。本体12
は、内部に図示しない調圧弁を有している。この調圧弁
は、本体12の外部に調節用のつまみ14を有してい
る。また、調圧弁は、本体12から突出するインレット
15及びアウトレット16を有している。インレット1
5には、図示しない窒素ガスボンベが連結されている。
エアガン13は、把持部17と、ノズル部18とから主
に構成されている。把持部17には、本体12のアウト
レット16とチューブ19を介して連結された流路(図
示せず)が内部に設けられている。この流路の他端は、
ノズル部18に接続されている。ノズル部18は、本体
12からの加圧ガスを噴出するための部材であり、先端
部に反応容器5の試料供給口5aを気密に封止するため
のシールゴム20を有している。なお、ノズル部18
は、把持部22に設けられたON/OFFレバー21の
操作によりONまたはOFFに設定される。また、シー
ルゴム20は、ニードル20aと取り替え可能である。
【0009】試薬供給装置3は、一端が反応容器5の試
料供給口5aに着脱可能な試薬供給路22を有してい
る。試薬供給路22には、固相法ペプチド合成を実施す
るために必要な種々の試薬を供給するための複数の試薬
タンク23と、洗浄液を供給するための複数の洗浄液タ
ンク24とを有している。また、試薬供給路22の他端
は、図示しない窒素ガス供給装置に接続している。
【0010】ドレン装置4は、反応容器5のドレン口8
に連結可能であり、廃液流路25とN2 ガス供給路26
とに分岐している。廃液流路25とN2 ガス供給路26
とは、切り換えバルブ27によりいずれか一方のみがド
レン口8と通じるように切り換え可能である。次に、前
記実施例の作用・効果に触れつつ前記固相法ペプチド合
成装置1によるペプチド合成操作について説明する。
【0011】まず、反応容器5内において、保護ペプチ
ドレジンを合成する。保護ペプチドレジンの合成では、
反応容器5のフィルタ10上に粉末粒状の固相支持体を
配置し、これに試薬供給路22を通じて試薬タンク23
からの各種試薬を所定の順に供給して処理する。このよ
うな保護ペプチドレジンの合成時には、ドレン装置4の
切り換えバルブ27を操作してドレン口8とN2 ガス供
給路26とを接続し、反応容器5にN2 ガスを供給す
る。このN2 ガスはフィルタ10を通って反応室11内
でバブリングし、固相支持体と試薬とを攪拌する。ま
た、試薬タンク23を切り換えた場合は、洗浄液タンク
24の洗浄液を試薬供給路22を通じて反応室11内に
供給し、不要な試薬を洗い流す。ここでは、切り換えバ
ルブ27を切り換えてドレン口8と廃液流路25とを接
続し、廃液流路25から洗浄液を排出する。
【0012】保護ペプチドレジンの合成終了後、試薬供
給路22を通じて反応室11内にN 2 ガスを供給し、乾
燥処理を施す。次に、クリーベイジ処理装置2により、
合成された保護ペプチドレジンのクリーベイジ処理を行
う。まず、反応容器5から試薬供給路22及びドレン装
置4を取り外し、ドレン口8をキャップ9により密栓す
る。そして、図4に示すように、この反応容器5を遠心
管28内に挿入してフランジ部7により支持し、この遠
心管27をスタンド30により起立させる。なお、スタ
ンド30は、互いに連結された円盤状の底板31と支持
板32とからなり、底板31及び支持板32には、それ
ぞれ対応する部位にボール状の凹部31a及び挿入孔3
2aが設けられている。遠心管28は、支持板32の挿
入孔32aに挿入され、底部が底板31の凹部31aに
より支持される。
【0013】次に、反応容器5の試料供給口5aから反
応室11内にクリーベイジ試薬を注入し、所定時間静置
する。これにより、反応室11内の保護ペプチドレジン
は、固相支持体とペプチドとに分離する。クリーベイジ
処理の終了後、反応容器5を遠心管28から取り出し、
キャップ9を取り外してから再び遠心管28内に挿入す
る。そして、加圧装置6のエアガン13に設けられたノ
ズル部18のシールゴム20を反応容器5の試料供給口
5aに気密に圧接し、本体12の調圧弁により調圧され
たN2 ガスをノズル部18から反応室11内に注入す
る。これにより、反応室11が加圧され、固相支持体か
ら分離したペプチドを含むクリーベイジ試薬がフィルタ
10を通過してドレン口8から遠心管28内に排出され
る。
【0014】次に、遠心管28内に排出されたクリーベ
イジ試薬からペプチドを単離する。単離操作は、たとえ
ば遠心管28内にエーテルを加えてペプチドを沈殿さ
せ、遠心管28を遠心機にかけてから上清液をデカンテ
ーションで除去することにより行う。上清液を除去後の
ペプチドの沈殿は、エーテルによりウェットであるが、
加圧装置6を用いて乾燥可能である。ここでは、加圧装
置6のシールゴム20をニードル20aに取り替える。
そして、ニードル20aを遠心管28内に挿入し、沈殿
が吹き飛ばないようにN2 ガスを吹き付けると、ペプチ
ドを効率良くしかもロスなく迅速に乾燥できる。
【0015】上述のように、本実施例のクリーベイジ処
理装置2によれば、反応容器5内で合成された保護ペプ
チドレジンの移し変え操作が不要となり、反応容器5内
の保護ペプチドレジンに対して直接クリーベイジ処理を
施すことができる。したがって、保護ペプチドレジンの
メカニカルロスやペプチドのコンタミネーションが起こ
りにくく、高純度のペプチドが効率良く得られる。
【0016】
【発明の効果】本発明の固相法ペプチド合成用クリーベ
イジ処理装置によれば、上述のように反応容器内の保護
ペプチドレジンに対して直接クリーベイジ処理を施すこ
とができるので、クリーベイジ処理の効率を高めること
ができる。
【図面の簡単な説明】
【図1】本発明の一実施例が組み合わされた固相法ペプ
チド合成装置のシステム構成図。
【図2】前記実施例に採用された反応容器の縦断面図。
【図3】前記実施例に採用された加圧装置の斜視図。
【図4】前記実施例によるクリーベイジ処理操作の一工
程を示す斜視図。
【符号の説明】
4 加圧装置 5 反応容器 8 ドレン口 9 キャップ 10 フィルタ 11 反応室 20 シールゴム

Claims (1)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項1】固相支持体に結合したペプチドを前記固相
    支持体から分離するためのクリーベイジ処理装置であっ
    て、 前記固相法ペプチド合成法を実施可能な反応室と、ドレ
    ン口と、前記反応室と前記ドレン口とを区画しかつ前記
    固相支持体を支持し得るフィルタとを有する反応容器
    と、 前記ドレン口を密栓するための栓部材と、 前記反応室内を加圧するための加圧装置と、を備えた固
    相法ペプチド合成用クリーベイジ処理装置。
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