JPH05188054A - アスパラギン結合型糖鎖を有する分泌型ＩｇＡを検出する方法 - Google Patents
アスパラギン結合型糖鎖を有する分泌型ＩｇＡを検出する方法Info
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- JPH05188054A JPH05188054A JP444692A JP444692A JPH05188054A JP H05188054 A JPH05188054 A JP H05188054A JP 444692 A JP444692 A JP 444692A JP 444692 A JP444692 A JP 444692A JP H05188054 A JPH05188054 A JP H05188054A
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Abstract
(57)【要約】
【目的】微生物感染症の発症を検知するために，発症に
際して産生するアスパラギン（Ａｓｎ）結合型糖鎖を有
する分泌型免疫グロブリン（ＩｇＡ）を生体試料から検
出，測定する方法。 【構成】糞便，尿等の各種生体試料を用いて次ぎの２方
法で検出する。 (1) レクチンー抗体サンドウィッチ法 前記ＩｇＡと特異的に結合するレクチンを固相表面に不
溶化して該ＩｇＡを捕捉し，これを酵素標識抗ヒトＩｇ
Ａ抗体と反応させ，呈色法によって検出する。 (2) 生体試料中の前記ＩｇＡとＩｇＭの複合体を抗ヒト
ＩｇＭ抗体で捕捉し，酵素標識抗ヒトＩｇＡ抗体と反応
させて呈色法によって前記ＩｇＡを検出する。
際して産生するアスパラギン（Ａｓｎ）結合型糖鎖を有
する分泌型免疫グロブリン（ＩｇＡ）を生体試料から検
出，測定する方法。 【構成】糞便，尿等の各種生体試料を用いて次ぎの２方
法で検出する。 (1) レクチンー抗体サンドウィッチ法 前記ＩｇＡと特異的に結合するレクチンを固相表面に不
溶化して該ＩｇＡを捕捉し，これを酵素標識抗ヒトＩｇ
Ａ抗体と反応させ，呈色法によって検出する。 (2) 生体試料中の前記ＩｇＡとＩｇＭの複合体を抗ヒト
ＩｇＭ抗体で捕捉し，酵素標識抗ヒトＩｇＡ抗体と反応
させて呈色法によって前記ＩｇＡを検出する。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】この発明は生体試料中のアスパラ
ギン結合型糖鎖（以下Ａｓｎ結合型糖鎖という）を有す
る分泌型免疫グロブリンＡ（Secretory Immunoglobulin
Ａ) （以下分泌型ＩｇＡという）を検出する方法に関
するものであり，さらに詳細には宿主細胞への微生物の
付着侵入に際して宿主の感染防御システムの一環として
分泌されるＡｓｎ結合型糖鎖を有する分泌型ＩｇＡの検
出，測定に関し，この方法によって微生物による感染症
の成立状況を早期に知ることを目的とする。
ギン結合型糖鎖（以下Ａｓｎ結合型糖鎖という）を有す
る分泌型免疫グロブリンＡ（Secretory Immunoglobulin
Ａ) （以下分泌型ＩｇＡという）を検出する方法に関
するものであり，さらに詳細には宿主細胞への微生物の
付着侵入に際して宿主の感染防御システムの一環として
分泌されるＡｓｎ結合型糖鎖を有する分泌型ＩｇＡの検
出，測定に関し，この方法によって微生物による感染症
の成立状況を早期に知ることを目的とする。
【０００２】
【従来の技術】微生物感染症の原因となる病原性微生物
の概念は，例えば皆川知紀氏の「感染性の病態生理と内
在性サイトカイン」（「病態生理」，vol.10, No.3, p.
239 〜249,1991．）にあるように，Robert Koch(1843〜
1910) によって確立された。コッホは病原性微生物であ
るための４原則を提唱した。要約すると病的材料から
の微生物の分離，その微生物の純培養，動物を用い
た感染実験，同じ症状を呈した感染動物からの再分離
である。この４原則は現在も有効であるが，ヒトの感染
症ではそれぞれの項目が技術的，生態学的，且つ人道的
に不可能な場合が少なくない。
の概念は，例えば皆川知紀氏の「感染性の病態生理と内
在性サイトカイン」（「病態生理」，vol.10, No.3, p.
239 〜249,1991．）にあるように，Robert Koch(1843〜
1910) によって確立された。コッホは病原性微生物であ
るための４原則を提唱した。要約すると病的材料から
の微生物の分離，その微生物の純培養，動物を用い
た感染実験，同じ症状を呈した感染動物からの再分離
である。この４原則は現在も有効であるが，ヒトの感染
症ではそれぞれの項目が技術的，生態学的，且つ人道的
に不可能な場合が少なくない。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】前記のコッホの原則を
補う意味で，血清学的診断法に加えて最近では微生物核
酸の相同性からも判断が可能となってきたが，現状では
限られた対象のみに可能であるに過ぎない。
補う意味で，血清学的診断法に加えて最近では微生物核
酸の相同性からも判断が可能となってきたが，現状では
限られた対象のみに可能であるに過ぎない。
【０００４】一方微生物感染の病態生理を内在性サイト
カインの立場から明らかにし，すなわち内在性サイトカ
インが原虫からウィルスまでの微生物感染に際して共通
して血中および局所に検出される生体の反応物質である
ことが明らかにされたことから，これらを検知すること
によって感染症の診断，予防に役立てようとする考え方
も提唱されている。しかしサイトカインは超微量出現す
るだけであり，正確な測定は技術的に困難であった。
カインの立場から明らかにし，すなわち内在性サイトカ
インが原虫からウィルスまでの微生物感染に際して共通
して血中および局所に検出される生体の反応物質である
ことが明らかにされたことから，これらを検知すること
によって感染症の診断，予防に役立てようとする考え方
も提唱されている。しかしサイトカインは超微量出現す
るだけであり，正確な測定は技術的に困難であった。
【０００５】
【課題を解決するための手段】一般に微生物感染症は，
微生物がヒトの上皮，粘膜の細胞（宿主細胞）に対して
付着 (adherence)，細胞内侵入あるいは毒物の生成，炎
症，発症という過程を経て成立する。そして例えば本田
武司氏, 「細菌 下痢性大腸菌」（「臨床と微生物」，
vol.18 , No.3, p.12〜18 , 1991. 5），松浦 徹氏他
１名，「肺胞上皮への細菌付着に関する諸要因とは」
（「Ｍｅｄｉａ」，vol.8 , No. 1, p. 38〜41 , 1991.
1) には微生物の付着は微生物の定着因子（主として微
生物の線毛に存在する）が宿主細胞のレセプターと結合
することによって付着することが示されている。
微生物がヒトの上皮，粘膜の細胞（宿主細胞）に対して
付着 (adherence)，細胞内侵入あるいは毒物の生成，炎
症，発症という過程を経て成立する。そして例えば本田
武司氏, 「細菌 下痢性大腸菌」（「臨床と微生物」，
vol.18 , No.3, p.12〜18 , 1991. 5），松浦 徹氏他
１名，「肺胞上皮への細菌付着に関する諸要因とは」
（「Ｍｅｄｉａ」，vol.8 , No. 1, p. 38〜41 , 1991.
1) には微生物の付着は微生物の定着因子（主として微
生物の線毛に存在する）が宿主細胞のレセプターと結合
することによって付着することが示されている。
【０００６】また小林邦彦氏，「分泌型免疫グロブリ
ン」（「医学の歩み」，vol. 147,No.5, 1988.10.29）
には上皮細胞で産出される分泌液中では（分泌型）Ｉｇ
Ａが主体であり，該ＩｇＡは高い細菌凝集作用を有して
細菌の付着，コロニー化を阻止することが示されてい
る。
ン」（「医学の歩み」，vol. 147,No.5, 1988.10.29）
には上皮細胞で産出される分泌液中では（分泌型）Ｉｇ
Ａが主体であり，該ＩｇＡは高い細菌凝集作用を有して
細菌の付着，コロニー化を阻止することが示されてい
る。
【０００７】本発明者は微生物感染症の発症過程におい
て生体側の宿主細胞の防御システムの重要な役割を担っ
ている分泌型ＩｇＡの性状を詳細に検討していたとこ
ろ，感染症発症に際して特にアスパラギン（Ａｓｎ）結
合型糖鎖を有する分泌型ＩｇＡが出現することを見い出
した。
て生体側の宿主細胞の防御システムの重要な役割を担っ
ている分泌型ＩｇＡの性状を詳細に検討していたとこ
ろ，感染症発症に際して特にアスパラギン（Ａｓｎ）結
合型糖鎖を有する分泌型ＩｇＡが出現することを見い出
した。
【０００８】Agnes E. World氏他の論文「Secretory Im
munoglobulin A Carries Oligosaccharide Recepters f
or Escherichia coli Type 1 Fimbrial Lectin」 (「In
fection and Immunity」, vol.58,No.9, p.3073 〜307
7, 1990）によればアスパラギン（Ａｓｎ）結合型糖鎖
を有する分泌型ＩｇＡは，この糖鎖が微生物の宿主細胞
への定着因子（特に線毛に多い）に対する受容因子（レ
セプター）となるのであって，この種のＩｇＡは微生物
が宿主細胞へ付着（adherence)するのを未然の防ぐ機能
を有する。すなわちＡｓｎ結合型糖鎖を有する分泌型Ｉ
ｇＡが存在すると，その有する糖鎖が微生物の定着因子
と結合し，そこに微生物が凝集して宿主細胞に付着でき
なくなり感染症の発症が防がれることが示されている。
munoglobulin A Carries Oligosaccharide Recepters f
or Escherichia coli Type 1 Fimbrial Lectin」 (「In
fection and Immunity」, vol.58,No.9, p.3073 〜307
7, 1990）によればアスパラギン（Ａｓｎ）結合型糖鎖
を有する分泌型ＩｇＡは，この糖鎖が微生物の宿主細胞
への定着因子（特に線毛に多い）に対する受容因子（レ
セプター）となるのであって，この種のＩｇＡは微生物
が宿主細胞へ付着（adherence)するのを未然の防ぐ機能
を有する。すなわちＡｓｎ結合型糖鎖を有する分泌型Ｉ
ｇＡが存在すると，その有する糖鎖が微生物の定着因子
と結合し，そこに微生物が凝集して宿主細胞に付着でき
なくなり感染症の発症が防がれることが示されている。
【０００９】従って生体の防御機能によって生体試料中
にＡｓｎ結合型糖鎖を有する分泌型ＩｇＡの出現を見る
ことは，その時点で微生物感染により生体の防御機能が
活性化していることを示すものであり，微生物感染成立
の確立が高い状態を示唆するものである。それ故このＡ
ｓｎ結合型糖鎖を有する分泌型ＩｇＡを検出することに
より微生物感染症の発生を検知することができる可能性
が高く，この種のＩｇＡを検出することは有用であると
推定できる。
にＡｓｎ結合型糖鎖を有する分泌型ＩｇＡの出現を見る
ことは，その時点で微生物感染により生体の防御機能が
活性化していることを示すものであり，微生物感染成立
の確立が高い状態を示唆するものである。それ故このＡ
ｓｎ結合型糖鎖を有する分泌型ＩｇＡを検出することに
より微生物感染症の発生を検知することができる可能性
が高く，この種のＩｇＡを検出することは有用であると
推定できる。
【００１０】本発明者は，このＡｓｎ結合型糖鎖を有す
る分泌型ＩｇＡを測定するのに，レクチンとＡｓｎ結合
型糖鎖を有する分泌型ＩｇＡの複合体を形成させて検出
する方法，及びこの種のＩｇＡが多くはＩｇＭとの複合
体を形成して存在することに注目して，この複合体の検
出によりＡｓｎ結合型糖鎖を有する分泌型ＩｇＡを検出
する方法を発明した。
る分泌型ＩｇＡを測定するのに，レクチンとＡｓｎ結合
型糖鎖を有する分泌型ＩｇＡの複合体を形成させて検出
する方法，及びこの種のＩｇＡが多くはＩｇＭとの複合
体を形成して存在することに注目して，この複合体の検
出によりＡｓｎ結合型糖鎖を有する分泌型ＩｇＡを検出
する方法を発明した。
【００１１】すなわち本発明は微生物感染症の発生を検
知するために，生体試料中のＡｓｎ結合型糖鎖を有する
分泌型ＩｇＡを検出する方法である。またＡｓｎ結合型
糖鎖を有する分泌型ＩｇＡは多くの場合分泌型ＩｇＭと
結合して複合体を形成しているので，この複合体を検出
することによってＡｓｎ結合型糖鎖を有する分泌型Ｉｇ
Ａを検出，測定することを含むものである。
知するために，生体試料中のＡｓｎ結合型糖鎖を有する
分泌型ＩｇＡを検出する方法である。またＡｓｎ結合型
糖鎖を有する分泌型ＩｇＡは多くの場合分泌型ＩｇＭと
結合して複合体を形成しているので，この複合体を検出
することによってＡｓｎ結合型糖鎖を有する分泌型Ｉｇ
Ａを検出，測定することを含むものである。
【００１２】本発明に用いる検体（生体試料）としては
糞便，尿，血清，咽頭粘液，乳汁，唾液，鼻汁等を用い
ることができる。
糞便，尿，血清，咽頭粘液，乳汁，唾液，鼻汁等を用い
ることができる。
【００１３】一個の検体からアスパラギン結合型糖鎖を
有する分泌型ＩｇＡを検出するには具体的には次の方法
を用いる。
有する分泌型ＩｇＡを検出するには具体的には次の方法
を用いる。
【００１４】１．レクチンー抗体サンドウィッチ法 本発明者は生体試料中の糖蛋白の糖鎖を特異的に分析，
検出する方法を発明し特願平２ー２５３５９２号として
出願した。この方法は糖蛋白の糖鎖と特異的に結合する
レクチンをプラスチック等の固相の表面に不溶化し，そ
れに生体試料を反応させた後，それに同じ糖鎖と特異的
に結合する標識化したレクチンを加えて糖蛋白分子をレ
クチンーレクチンサンドウィッチとし，基質溶液を加え
て呈色度によって検出する方法である。
検出する方法を発明し特願平２ー２５３５９２号として
出願した。この方法は糖蛋白の糖鎖と特異的に結合する
レクチンをプラスチック等の固相の表面に不溶化し，そ
れに生体試料を反応させた後，それに同じ糖鎖と特異的
に結合する標識化したレクチンを加えて糖蛋白分子をレ
クチンーレクチンサンドウィッチとし，基質溶液を加え
て呈色度によって検出する方法である。
【００１５】本発明の方法の前段では前記特願平２ー２
５３５９２号の前段と同様に，レンズマメレクチン（Ｌ
ＣＡ），タチナタマメレクチン（ＣｏｎＡ），エンドウ
マメレクチン（ＰＳＡ），インゲンマメレクチン（ＰＨ
Ａ），ヨウシュチョウセンアサガオレクチン（ＤＳＡ）
等のアスパラギン（Ａｓｎ）結合型糖鎖と特異的に結合
するレクチンを固体表面に不溶化し，生体試料を接触さ
せて試料中のＡｓｎ結合型糖鎖を有する糖蛋白を結合さ
せて捕捉する。
５３５９２号の前段と同様に，レンズマメレクチン（Ｌ
ＣＡ），タチナタマメレクチン（ＣｏｎＡ），エンドウ
マメレクチン（ＰＳＡ），インゲンマメレクチン（ＰＨ
Ａ），ヨウシュチョウセンアサガオレクチン（ＤＳＡ）
等のアスパラギン（Ａｓｎ）結合型糖鎖と特異的に結合
するレクチンを固体表面に不溶化し，生体試料を接触さ
せて試料中のＡｓｎ結合型糖鎖を有する糖蛋白を結合さ
せて捕捉する。
【００１６】次いでこれに酵素標識抗ヒトＩｇＡ抗体を
反応させることによってＡｓｎ結合型糖鎖を有する分泌
型ＩｇＡのみを選択的に選び出し，標識酵素の基質溶液
を添加して呈色させることによって試料中のＡｓｎ結合
型糖鎖を有するＩｇＡを検出する。
反応させることによってＡｓｎ結合型糖鎖を有する分泌
型ＩｇＡのみを選択的に選び出し，標識酵素の基質溶液
を添加して呈色させることによって試料中のＡｓｎ結合
型糖鎖を有するＩｇＡを検出する。
【００１７】酵素標識（例えば吉武氏らの「日本免疫学
会編，免疫検査実験法ＸＩ」 p. 8497〜8519, 1982 参
照）としてはアルカリホスファターゼ， POD（ベルオキ
シターゼ）酵素標識を用いるとよい。
会編，免疫検査実験法ＸＩ」 p. 8497〜8519, 1982 参
照）としてはアルカリホスファターゼ， POD（ベルオキ
シターゼ）酵素標識を用いるとよい。
【００１８】２．Ａｓｎ結合型糖鎖を有する分泌型Ｉｇ
ＡとＩｇＭの複合体を検出するサンドウィッチ法 先ず抗ヒトＩｇＭ抗体を前記１の方法と同様にプラスチ
ック等の固体表面に不溶化し，生体試料を接触させて試
料中のＩｇＭを結合捕捉させる。そうするとＡｓｎ結合
型糖鎖を有する分泌型ＩｇＡとＩｇＭの複合体も捕捉さ
れる。次いでこれに酵素標識抗ヒトＩｇＡ抗体を反応さ
せることによってＡｓｎ結合型糖鎖を有する分泌型Ｉｇ
ＡとＩｇＭとの複合体を選択的に選び出して検出する。
標識酵素の方法は前記１の場合と同じである。
ＡとＩｇＭの複合体を検出するサンドウィッチ法 先ず抗ヒトＩｇＭ抗体を前記１の方法と同様にプラスチ
ック等の固体表面に不溶化し，生体試料を接触させて試
料中のＩｇＭを結合捕捉させる。そうするとＡｓｎ結合
型糖鎖を有する分泌型ＩｇＡとＩｇＭの複合体も捕捉さ
れる。次いでこれに酵素標識抗ヒトＩｇＡ抗体を反応さ
せることによってＡｓｎ結合型糖鎖を有する分泌型Ｉｇ
ＡとＩｇＭとの複合体を選択的に選び出して検出する。
標識酵素の方法は前記１の場合と同じである。
【００１９】
１．患者の便10〜20mgを脱イオン水１molに混和した便
汁 50 μl （あるいはヘモチェサー用容器の一滴でもよ
い）を便試料とする。レンズマメレクチン（ホーネン生
化学工業社製）３μg/ｍl 溶液（ 0.1 molトリス緩衝液
ｐＨ 8.4）をマイクロプレート（小径のwellを多数もう
けたプラスチックプレート) の各wellに 100μl ずつ分
注して４℃で一夜放置して表面に固相化（不溶化）し
た。マイクロプレートの各wellに２％ＢＳＡ（ 0.1 mol
トリス緩衝液ｐＨ 8.0）を入れ，，前記の便試料を加え
て３７℃，１時間反応させて，試料中の糖蛋白を捕捉さ
せる。
汁 50 μl （あるいはヘモチェサー用容器の一滴でもよ
い）を便試料とする。レンズマメレクチン（ホーネン生
化学工業社製）３μg/ｍl 溶液（ 0.1 molトリス緩衝液
ｐＨ 8.4）をマイクロプレート（小径のwellを多数もう
けたプラスチックプレート) の各wellに 100μl ずつ分
注して４℃で一夜放置して表面に固相化（不溶化）し
た。マイクロプレートの各wellに２％ＢＳＡ（ 0.1 mol
トリス緩衝液ｐＨ 8.0）を入れ，，前記の便試料を加え
て３７℃，１時間反応させて，試料中の糖蛋白を捕捉さ
せる。
【００２０】洗浄した後，アルカリホスファターゼ標識
抗ヒトＩｇＡ抗体使用液（２％ＢＳＡ：0.1 mol トリス
緩衝液ｐＨ 8.0で1000倍希釈したもの）を 100μl 加
え, ３７℃，１時間反応させる。次いで洗浄して基質溶
液（フェニル燐酸） 100μl を加えて３７℃，30分間放
置したのち呈色液を 100μl 加えて呈色させる。この発
色を比色計（三光純薬製オートリーダ）を用いて 510ｎ
ｍと 630nmの２波長で測光した。これにより便試料中の
アスパラギン結合型糖鎖を有する分泌型ＩｇＡを検出す
ることができた。
抗ヒトＩｇＡ抗体使用液（２％ＢＳＡ：0.1 mol トリス
緩衝液ｐＨ 8.0で1000倍希釈したもの）を 100μl 加
え, ３７℃，１時間反応させる。次いで洗浄して基質溶
液（フェニル燐酸） 100μl を加えて３７℃，30分間放
置したのち呈色液を 100μl 加えて呈色させる。この発
色を比色計（三光純薬製オートリーダ）を用いて 510ｎ
ｍと 630nmの２波長で測光した。これにより便試料中の
アスパラギン結合型糖鎖を有する分泌型ＩｇＡを検出す
ることができた。
【００２１】レンズマメレクチンの代わりにタチナタマ
メレクチンを用いた場合も同じ結果が得られた。
メレクチンを用いた場合も同じ結果が得られた。
【００２２】２．血清を50μl , 咽頭を擦過した綿棒を
脱イオン水１mlに混和した溶液を50μl ，尿を50μl を
各試料として実施例１と同じ方法を行ったところ同様に
それぞれの試料中のアスパラギン結合型糖鎖を有する分
泌型ＩｇＡを検出することができた。
脱イオン水１mlに混和した溶液を50μl ，尿を50μl を
各試料として実施例１と同じ方法を行ったところ同様に
それぞれの試料中のアスパラギン結合型糖鎖を有する分
泌型ＩｇＡを検出することができた。
【００２３】３．患者の便10〜20mgを脱イオン水１mol
に混和した便汁 50 μl （あるいはヘモチェサー用容器
の一滴でもよい）を便試料とする。抗ヒトＩｇＭ抗体
（ダコ社製）５μg/ｍl 溶液（ 0.1 molトリス緩衝液ｐ
Ｈ 8.4）をマイクロプレートの各wellに 100μl ずつ分
注して４℃で一夜放置して表面に固相化（不溶化）し
た。マイクロプレートの各wellに１％ＢＳＡ（ 0.1 mol
トリス緩衝液ｐＨ 8.0）を 100μl ずつ入れ，，前記の
便試料 を各50μl加えて３７℃，１時間反応させて，
試料中のＩｇＭをトラッピングさせる。
に混和した便汁 50 μl （あるいはヘモチェサー用容器
の一滴でもよい）を便試料とする。抗ヒトＩｇＭ抗体
（ダコ社製）５μg/ｍl 溶液（ 0.1 molトリス緩衝液ｐ
Ｈ 8.4）をマイクロプレートの各wellに 100μl ずつ分
注して４℃で一夜放置して表面に固相化（不溶化）し
た。マイクロプレートの各wellに１％ＢＳＡ（ 0.1 mol
トリス緩衝液ｐＨ 8.0）を 100μl ずつ入れ，，前記の
便試料 を各50μl加えて３７℃，１時間反応させて，
試料中のＩｇＭをトラッピングさせる。
【００２４】洗浄した後，アルカリホスファターゼ標識
抗ヒトＩｇＡ抗体使用液（１％ＢＳＡ：0.1 mol トリス
緩衝液ｐＨ 8.0で1000倍希釈したもの）を各 100μl 加
え,３７℃，１時間反応させる。次いで洗浄して基質溶
液（フェニル燐酸）を各 100μl を加えて３７℃，30分
間放置したのち呈色液を各 100μl 加えて呈色させる。
この発色を比色計（三光純薬製オートリーダ）を用いて
510ｎｍと 630nmの２波長で測光した。これにより便試
料中のアスパラギン結合型糖鎖を有する分泌型ＩｇＡと
ＩｇＭの複合体を検出することができた。
抗ヒトＩｇＡ抗体使用液（１％ＢＳＡ：0.1 mol トリス
緩衝液ｐＨ 8.0で1000倍希釈したもの）を各 100μl 加
え,３７℃，１時間反応させる。次いで洗浄して基質溶
液（フェニル燐酸）を各 100μl を加えて３７℃，30分
間放置したのち呈色液を各 100μl 加えて呈色させる。
この発色を比色計（三光純薬製オートリーダ）を用いて
510ｎｍと 630nmの２波長で測光した。これにより便試
料中のアスパラギン結合型糖鎖を有する分泌型ＩｇＡと
ＩｇＭの複合体を検出することができた。
【００２５】
【発明の効果】本発明の方法によれば，高価な測定機器
等を使用することなく，しかも直接生体から採取した試
料を用いて容易に微生物感染症成立時に生体が防御シス
テムの一環として産生するアスパラギン結合型糖鎖を有
する分泌型ＩｇＡを検出することができる。この方法に
よると微生物感染症の直接原因となる微生物の特定検出
を行うことなく，人体の感染症発生の準備状態或いは成
立を判定することができ，また宿主側の組織損傷等にと
もなう易感染状態の存在を予知できる可能性があり，極
めて有用，有効な発明である。
等を使用することなく，しかも直接生体から採取した試
料を用いて容易に微生物感染症成立時に生体が防御シス
テムの一環として産生するアスパラギン結合型糖鎖を有
する分泌型ＩｇＡを検出することができる。この方法に
よると微生物感染症の直接原因となる微生物の特定検出
を行うことなく，人体の感染症発生の準備状態或いは成
立を判定することができ，また宿主側の組織損傷等にと
もなう易感染状態の存在を予知できる可能性があり，極
めて有用，有効な発明である。
Claims (6)
- 【請求項１】 生体試料中に含まれたアスパラギン結合
型糖鎖を有する分泌型ＩｇＡを検出する方法において，
アスパラギン結合型糖鎖と結合するレクチンと反応さ
せ，得られたレクチンー分泌型ＩｇＡ複合体を酵素標識
抗ヒトＩｇＡ抗体を用いて検出することを特徴とするア
スパラギン結合型糖鎖を有する分泌型ＩｇＡを検出する
方法 - 【請求項２】 レクチンを固体表面に不溶化して生体試
料と接触させてＩｇＡを捕捉することを特徴とする請求
項１記載のアスパラギン結合型糖鎖を有する分泌型Ｉｇ
Ａを検出する方法 - 【請求項３】 レクチンがレンズマメレクチン，エンド
ウマメレクチン，タチナタマメレクチン，インゲンマメ
レクチンまたはヨウシュチョウセンアサガオレクチンで
あることを特徴とする請求項１もしくは２記載のアスパ
ラギン結合型糖鎖を有する分泌型ＩｇＡを検出する方法 - 【請求項４】 生体試料中に含まれたアスパラギン結合
型糖鎖を有する分泌型ＩｇＡを検出する方法において，
抗ヒトＩｇＭ抗体をアスパラギン結合型糖鎖を有するＩ
ｇＡとＩｇＭの複合体と結合させ，それに酵素標識抗ヒ
トＩｇＡ抗体を反応させて前記複合体を検出することを
特徴とするアスパラギン結合型糖鎖を有する分泌型Ｉｇ
Ａを検出する方法 - 【請求項５】 抗ヒトＩｇＭ抗体を固体表面に不溶化し
て生体試料と接触させてＩｇＡーＩｇＭ複合体を捕捉し
て検出，測定することを特徴とする請求項４記載のアス
パラギン結合型糖鎖を有する分泌型ＩｇＡを検出する方
法 - 【請求項６】 生体試料として糞便，尿，血清，咽頭粘
液，乳汁，唾液，鼻汁を用いることを特徴とする請求項
１〜５記載のアスパラギン結合型糖鎖を有する分泌型Ｉ
ｇＡを検出する方法
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4004446A JPH0769326B2 (ja) | 1992-01-14 | 1992-01-14 | 生体防御機能の活性化状態検出用キット |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4004446A JPH0769326B2 (ja) | 1992-01-14 | 1992-01-14 | 生体防御機能の活性化状態検出用キット |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH05188054A true JPH05188054A (ja) | 1993-07-27 |
| JPH0769326B2 JPH0769326B2 (ja) | 1995-07-26 |
Family
ID=11584413
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP4004446A Expired - Fee Related JPH0769326B2 (ja) | 1992-01-14 | 1992-01-14 | 生体防御機能の活性化状態検出用キット |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0769326B2 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2010060293A (ja) * | 2008-09-01 | 2010-03-18 | Fujirebio Inc | 免疫測定法 |
Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0041426A1 (fr) * | 1980-05-22 | 1981-12-09 | Institut Pasteur | Produit de couplage entre une lectine et un ligand spécifique, obtention et application dans le domaine biologique |
| JPS6120867A (ja) * | 1984-06-29 | 1986-01-29 | オーソ・ダイアグノステイツク・システムズ・インコーポレーテツド | 抗体‐レクチンのサンドイツチ検定 |
| JPS6187539A (ja) * | 1984-09-19 | 1986-05-02 | ヘルギ・ヴアルデイマーソン | 慢性関節リウマチ患者の予後を補助するための方法及びこのような患者の病態活動の評価を補助するための方法 |
| JPS62276465A (ja) * | 1986-02-05 | 1987-12-01 | イミユノゴン アソシエイツ | 淋病および髄膜炎の診断方法および試薬 |
| JPS63238462A (ja) * | 1987-03-27 | 1988-10-04 | Eiken Kagaku Kk | 特異結合分析法 |
| JPH01311275A (ja) * | 1988-06-08 | 1989-12-15 | Nitto Denko Corp | 免疫学的測定法 |
| JPH03502244A (ja) * | 1988-01-13 | 1991-05-23 | ニユコメド・フアルマ・アクシエセルカペト | 試験方法およびそのための試薬キツト |
-
1992
- 1992-01-14 JP JP4004446A patent/JPH0769326B2/ja not_active Expired - Fee Related
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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Cited By (1)
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|---|---|---|---|---|
| JP2010060293A (ja) * | 2008-09-01 | 2010-03-18 | Fujirebio Inc | 免疫測定法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0769326B2 (ja) | 1995-07-26 |
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