JPS6187539A - 慢性関節リウマチ患者の予後を補助するための方法及びこのような患者の病態活動の評価を補助するための方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、慢性関節リウマチに感染した人の予後を補助
するための方法及びこのような患者の病態活動を評価す
るための方法に関する。

凝集性のリウマトイド因子（ＲＦ）は、慢性関節リウマ
チ（ＲＡ）患者の７５％以−１−に検出されており、細
胞内免疫グロブリンＧ−リウマトイド因子（ＩｇＧ　Ｒ
Ｆ）複合体は、血清陰性の慢性関節リウマチ患者の滑脱
組織に特に多いと報告されている。このように、リウマ
トイド因子は慢性関節リウマチの顕著な免疫学的特徴で
あるとともに、発症に直接関与している可能性もある。

しかしながら、リウマトイド因子と臨床上の病態活動の
間の関係については不明な点が多い。オッテンとベルブ
（「アナルズ拳すウマトイドやディシーズ」第１８巻２
４〜２８ページ、１９５９年）は、凝集性リウマトイド
因子のレベルと病態活動の間に密接な関係はないことを
明らかにしたが、大部分の報告者がこれに同調している
。凝集性のリウマトイド因子は免疫グロブリンＭ（Ｉｇ
Ｍ）アイソタイプが圧倒的に多いが、ＩｇＧ　ＲＦおよ
びＴｇＡ　ＲＦも検出されることが知°られている。最
近ヤは、固体層免疫検定法の進展により、アイソタイプ
に特異的なリウマトイド因子検定法の開発がｎｆ能とな
っている。

慢性関節リウマチは、軽度の症状から全身性合併症によ
り死亡に至る進行性かつ破壊性の症状を示すものまで多
彩である。現在まで、金塩などの「特異的」薬剤を用い
た治療により慢性関節リウマチの経過を好転できること
を示す証拠がかなり存在している。しかしながら、金製
剤あるいはペニシラミンで治療した患者の２０〜４０％
に副作用が生じており、副作用は時に患者の生命を脅か
すこともあるため、症状筋型□い患者゛に対するこれら
の「特異的」な薬剤の使用は留保される傾向にある。「
特異的」な治療は慢性関節リウマチの初期に最も有効で
あることが確認されているため、予後不良の患者な早′
期に識別することが重要である。すでに何人かの研究者
は、初期慢性関節リウマチ患者の展望的研究において、
予後」−重要な特徴を識別することを試みている。初期
慢性関節リウマチの正確な経過予想は困難であるが、一
般的に、リウマトイド因子の凝集テストで、始まりは遅
いが′強い陽性像を示す場合が予後不良を暗示すると考
えられている（「アメリカン・リウマトイド・ディシー
ズ」第２３巻　１９３〜２０４ページ、ＩＨ４年；　「
アナルズ・リウマトイド・ディシーズ」第１８巻２４〜
２８ページ、　１９５９年、；「ブリティッシュ・メデ
ィカル・ジャーナル」第２巻８６〜１００ページ、　１
９７３年；および「アナルズ会すウマトイド・ディシー
ズ」第３５巻３５７〜３６０ページ、　１９７８年）。

ＩｇＭ抗体以外の抗体は、凝集性が弱いので、凝集テス
トでは主としてＩｇＭ抗体が検出される。しかし、１ｇ
Ｍ以外のアイソタイプのリウマトイド因子も存在してお
り、これらのリウマトイド因子は慢性関節リウマチの病
因に重要な係わりを持っている可能性がある。本研究の
主たる目標は、個々のリウマトイド因子アイソタイプを
測定することの初期慢性関節リウマチにおける臨床的価
値を評価すること、ならびに個々のリウマトイド因子ア
イソタイプのレベルの変動と臨床病態活動指数との関係
を一層明確にすることである。結果は、ＩｇＡ　ＲＰの
血清濃度が高いことは、慢性関節リウマチの予後不良の
信頼できる早期標識であることを示すとともに、さらに
、ｊｇＡ　ｌ’ｌＦの血清レベルは、ＩｇＧ　ＲＦやＩ
ｇＭ　ＲＦのレベルに比べて病態活動の変動をより密接
に反映していることを示している。

彬什九丈１ Ａ、ＩｇＡＲＦの予後にの価値 リウマトイド　子のｌＩ″− 血清および滑液中のＩｇＭ　、ＩｇＡおよびＩｇＧの各
アイソタイプのリウマトイド因子を測定するための酵素
結合免疫吸収検定法（ＥＬＩＳＡ）が開発された（ティ
Ｉ・ソン、［リウマチ性疾患に関連した抗グロブリン：
ＥＬｉＳＡの開発ならびに展望的研究および家族研究へ
のその応用」ロンドン大学博士論文、　１８８３年）。

ウェルが平たいマイクロプレート（Ｍ２９ＡＲ，英国ス
テリリン有限会社）を正常型１ｇＭ溶液１０＃Ｌｇｌ−
でコーティングし、１％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）
を加えた。続いて、このプレートを、０．５Ｍ塩化ナト
リウムおよび０．５Ｘトウイーン（Ｔｗｅｅｎ）　２０
を含むリン酸緩衝溶液（ＰＢＳ）で希釈した試ネ１と共
にインキュベーションた。使用した試料の希釈度は、Ｉ
ｇＭ　ＲＦとＩｇＡ　ＲＰニツイテはＩ／１０．１／１
００およびｌ／１０００とした。ｒｇｃ　ＲＦは１．希
釈度が大きいと反応性が低下するので１／１０のみとし
た。

ＩｇＧ　ＲＦの測定では、ワーニックらによって「アン
スリティス・リウマトイド」、第２４巻１５０１〜１５
１１ページ　（１９８１年）に記載されているとおり、
あらかじめ試料をペプシン（カタログナンバーｐ−７０
１２、シグマ・ロンドン）で消化した。

続いて、このプレートをボッ−らによって［ブリト、７
ンＷ）１０Ｊ　第５３巻５５０Ｂ５（１９７Ｂ年）に記
載されているとおり、アルカリホスファターゼ（ＡＰ）
（Ｖｌｌ−Ｓタイプ、シグマロンドン）で標識した抗ヒ
ト免疫グロブリンの希釈液と共にインキュベートした。

この場合、ＩｇＧ　ＲＦの測定では、アフィニティクロ
マトグラフィーで精製した山羊抗ヒト１ｇＭ（コード番
号４１０２．タボインコーホレーテッド。

米国）を使用したが、ＩｇＡ　ＲＰの測定には、兎抗ヒ
１−　ＩｇＡ　ＲＦのＦ（ａｂ’）２画分を使用した。

ＩｇＧ　ＲＦ検定では、試料のインキュベーションに続
き、非標識中クローン性マウス抗ヒトＦａｂガンマ（コ
ード番号８３−０７０　、マイルズラボラトリーズ、リ
ミテッド）と共にインキュベーションを行った。続いて
、このプレートを、山羊抗マウスＩｇＧのＡＰ複合Ｆ、
（ａｂ’）　２両分（コード番号４２５０　。

タボインコーホレーテッド、米国）と共にインキュベー
トした。非標識マウス抗体を使用したのは、ＩｇＭＲＦ
はマウスＩｇＧとの反応性が弱いことが見出されており
、グルタ、ルアルデヒド凝集ｔｇｃ抗体がＩｇＭ　Ｒ，
Ｆとの反応性を増強することを示すためであり、その結
果、ＩｇＭ　ＲＦが存在すると偽陽性の結果が得られる
からである。

最終的に、このプレートを、リン酸ｐ−ニトロフェニル
（ｐ−ｎｉｔｒｏｐｈｅｎｙｌ　ｐｈｏｓｐｈａｔｅ）
溶液１１Ｒｇ／ａ／と反応させ、マイクロプレート用測
定器［チターテック・マルチスキャン］　（フロー・ラ
ボラトリーズ）により４０５ｎｍの波長で測定した。

リ　ウマ　ト　イ　ド　　　−°Ｉｌ″″？　′　　の
　　　　と　　Ｉ：　ヒ各試料希釈液をＩｇＧをコーテ
ィングしない１個のウェルとそれに隣接するＩｇＧをコ
ーティングした３個のウェルでインキュベートした。Ｉ
ｇＡ　ＲＦ測測定よびＩｇＭ　ＲＦ測測定は、各希釈液
について平均純吸光度を、そして３つの希釈液について
は複合純吸光度（ＣＮＡ）を算出した。ＩｇＧ　ＲＦの
平均純吸光度およびＣＮＡの値は、内部標準の希釈曲線
と対照して読み取り、測定結果はｌ−当りのＲＦの単位
数で表現した。内部標準は、それぞれのＲＦ測測定例外
的に強く反応した３つのリウマチ血清とした。

ＩｇＭ　ＲＦ標準は、［慢性関節リウマチ血清の第−芙
国標準」（［ブリトランＷＨＯＪ　第４２巻　３１１〜
３１８ページ、１８７０年）に基づいてギヤリプレージ
ョンを行ったが、　１−当り８７５国際単位（ｒＵ）を
含んでいた、ＩｇＡ　ＲＰ標準およびＩｇＧ　ＲＦ標準
は、いずれも便宜−Ｉ−１００００／ＷＬｌと決めた。

ＩｇＡ　ＲＰ標準をペプシンで消化すると、ＩｇＡ　Ｒ
Ｐのレベルにあまり影響を及ぼすことなくそのＩｇＭ　
ＲＦ活性が失われることがわかった。

個々のリウマトイド因子アイソタイプについて正常な１
−限値を確定するため、健康な　１０２人のコーカサス
人　（年齢７〜８０才）の血清を用いて、ＩｇＭ　ＲＦ
　、　ＩｇＡ　ＲＦおよびｒｇｃ　ＲＦの測定を行った
。

ｒ究の対象とした患者 初対面昨に疾病期間が１年未満の初期炎症性関節痛患者
３３名を２〜４年にわたり追跡調査した。

患者の詳細は後に記すが、これらの患者は、慢性関節リ
ウマチを示唆する周囲滑膜炎を呈していた。追跡調査で
は、３ケ月毎に、早朝のこわばり（ＥＭＳ）　、全体的
な痛４．　（ＰＶＡＳ　（水平アナログ表示［１盛を使
用））、リッチ−関節指数（１’１ＡＩ）　、握力（Ｃ
Ｓ）および赤血球沈降速度（ＥＳＲ）を検査した。これ
ら５つのパラメータを用いて、１回の検査毎に病態活動
の全体的指数（ＩＯＡ）を算出した。

血清と滑液のサンプルを追跡調査期間中に集め、−７０
℃で保存しておき、研究の最後に３つのリウマトイド因
子アイソタイプについて測定を行った。測定が２日以に
にわたると誤差を生じる可能性があるので、各患者の全
サンプルはその日のうちに測定した。

研究開始時とその後１年毎に、手および手首のＸ線検査
を実施した。各患者の一連のＸ線フィルムは、患者の識
別または臨床像に関する知見を考慮することなく評価し
、個々のフィルムについて全体の欠損スコア（浸食数）
を測定した（「アルスリティス・リウマトイド」第１４
巻７０８〜７２０ページ、　１９７１年）。

゛　１北欠圭 臨床像と最終的な浸食カウントとの関係を、スピアマン
の順位相関法を用いて評価した。最初のＲＦレベルが正
常な患者と高い患者の結果の違いは、ウィルコクソンの
２標本検定、イエーツの補正を用いたカイ２乗検定およ
びフィッシャーの直接確率検定法を使用して評価した。

Ｂ、病態活動との関連 Ｉ　しの文・　とじた声 「リウマチ病外来部」を訪れたとき疾病期間１年未満の
慢性関節リウマチを示唆する活動性の周囲滑膜炎をｖし
ていた患者を研究の対象とした。

金製剤やペニシラミン、副腎ステロイド剤あるいは細胞
毒を使用した治療を受けたことのある者、ならびに通風
、強直性を椎炎、ライチル病、乾解性関節炎もしくは大
腸炎性関節症（ｃｏｌｉｔｉｃａｒｔｈｒｏｐａｔｈｙ
）を示す証拠を有する者は除外した。

゛自″；　、合価；録表 患者の追跡調査は、研究の全期間を通じて１日の同じ時
間帯に開いた特別な外来用診療室で行った。評価は、記
録表に従って３ケ月毎に実施したが、治療のため必要な
場合は患者を見る回数を増やした。臨床評価はすべて同
じ医師が実施した。

最低２年の追跡調査後において患者が無症候性であった
場合は、時に評価の間隔を６ケ月に延長した。

記録表の内容は次のとおりである。

（ａ）　　早朝のこわばり（ＥＭＳ）の時間（分）（ｂ
）　　１０ｃｍ長の水平アナログ表示目盛で記録した患
者の全体的な痛み （Ｃ）　　リッチ−らの方法を用いリッチ−関節指数（
ＲＡＩ）として表現した全体の関節の圧痛（「キュー・
ジェイ・メデイ」第３７巻３９３〜４０６ページ、１９
６８年） （ｄ）　　特別な作りの握力測定用バッグで測定した握
力（ＧＳ）　（プロシーディング・ロイヤル・ソサイエ
ティ・メディシン」第５９巻　（補遺）８５〜８８ペー
ジ、　　１９８８年） （ｅ）　　普通の凝集テス）　（ＲＡＨＡ　（関節リウ
マチへモアグルチニン法）とラテックス漿果反応）およ
びアイソタイプ特異的ＥＬ　ＩＳＡの両方を用いて赤血
球沈降速度およびＲＦのレベルを測定するため各評価時
に採血を行った。血清が少なくとも１回ＲＡ）ＩＡ陽性
（力価≧１／４０）となった患者は、血清陽性に関する
ＡＲＡ（米国リウマチ協会）の第８基準を満すとみなし
た（ブリトウンφリウマＩ・イド−ディシーズ」第９＠
１７５〜１７６ページ、　１８５８年）。

Ｌ二久次ｊ 患者の来院４ηに、病態活動の全体的な指数（ＩＯＡ）
を５１算した。？朝ノコｈｌｆす（ＥＭＳ）　、　全体
的な痛み（ＰＶＡＳ）、リッチ−関節指数、握力および
赤血球沈降速度は、マリアとメイス　（［リウマトロジ
ー・リハビリテーション」第２０巻１４１７ページ、　
１９８１年）の表に従いグレードｌからグレード４の４
段階に分けた。グレードｌは正常な状態を示し、グレー
ド４は疾患による極度の傷害を示す。これら５つのパラ
メータのグレードの平均を病態活動の全体的指数（（Ｉ
ＯＡ）　（１，０−４，０））　トした。

ＩｇＭ　ＲＦ、ＩｇＡ　ＲＦオヨびＴｇＧ　ＲＦニ対す
ルＥＬＩＳＡ　（７）結果は、１−記のように単位（Ｕ
）／−で表した。各患者の臨床および血清に関する追跡
調査は、スピアマンの順位相関法を用いて別々に分析し
た。パラメータ間の相関係数（γＳ）は、ＢＭＤＰ統計
パッケージ（カリフォルニア大学、米国ロサンゼルス）
を使用して８１算した。続いて、各係数をその近似標準
偏差１／「１−７丁（ｎは個々の患者の臨床評価数）で
除して係数の分布の正規化を行った。そして、どの２つ
のパラメータについてもγｓ「１−＝１の平均値はゼロ
になるという仮説を検証することにより、３３人の患者
集団における個々のパラメータ間の関連を判定した。こ
の判定では、スチューデントのＥ検定を用いた。

Ｉｇｌｌｌ　ＲＦのＥＬＩＳＡ　とＲＡＨＡ羊細胞凝集
テスト　（［メゾ・ラボ・チクノロＪ　第３Ｉ＠　３２
３〜３２６ページ、１８７４年）を比較すると、単一の
希釈液の純吸光度より、１／１Ｏ１Ｉ／１００および１
／１０００の右釈液の複合純吸光度の方がＲＡＨＡとの
相関が強いことがわかった。従って、定量をより正確な
ものとするため、ＩｇＭ　ＲＦ（７）測定では試料を汎
用的ｊｌ／１０、Ｉ／１００およびＩ／１０００に希釈
した。ＩｇＡ　ＲＰの場合も同様である。

第１図に、１０２の正常な血清におけるリウマトイド因
ｆ−のレベルを示す。８５％レベルを正常−１−限と定
め、ＩｇＭ　ＲＦは２０１０／−を越えた場合を、ｒｇ
ｔ　ＲＦは＋００／ｒａｌ以−にを、ｒｇｃ　ＲＦは８
．ＯＵ　／　ａＪ以−にを、それぞれ１１常上限を越え
たレベルとみなした。

臨１ｊ１」」“像と干　よび手−の　食との第１図に、
研究対象患者３３名の最初の来院時におけるＲＦレベル
を示す。症状が始まってからこの時までの経過期間は４
．７±３．０ケ月（平均±１標準偏差）である。ＲＦの
レベルが正常−に限を越えている患者数は、ＩｇＭ　Ｒ
Ｆが１０人、ＩｇＡ　ＲＦが７人、そしてＩｇＧ　ＲＦ
が４人であった。

表１に、患者３３人の手および手首の最終的な侵食カウ
ントと初診時の臨床像との関連を示す。最初の来院時に
おける握力、赤血球沈降速度および病態活動指数は、侵
食カウントとの相関が著しかった（　ｐ　＜　ｏ、ｏ＋
）。

ｌ　患者３３名における手および手首の最終的侵食カウ
ントと臨床像（初来院時および最終来院時）との関連 γＳ＊ｐ 年令（初診時）　　　　　　　　０．３５０　　０．０
５早朝、のこわばり（初診時）　　　０．３８４　　０
．０５全体的な痛み（初診時）　　　　０．０２１　　
特定されずリッチ−関節指数（初診時）　　０．４１２
　　０．０２握力（初診時）　　　　　　　−（１，５
４？　　　０．０１赤血球沈降速度（初診時）’０．４
７２　　０．０１病態活動指数（初診時）　　　　０．
４８７　　０．０１リッチ−関節指数（終了時＞　　ｏ
、４ｅ２ｏ、ｏｔ握力（終了時）　　　　　　　、−０
，８８４０，００１１γＳニスピアマンの順位相関係数 第２図に、初診時におけるＸ線診断の結果とＲＦレベル
の関連を示す。ＩｇＡ　ＲＰのレベルが正常」二限を越
えていた７人は、全員侵食性疾患を発現しており、また
集団としてみた場合、他の２６人の集団より侵食数が著
しく大きかった（侵食カウントのメジアンは、それぞれ
、１１およびＯ、ウィルコクソンの２標本検定でｐ　＜
　ｏ、ｏｌ）。古典的な慢性関節リウマチおよび確実な
慢性関節リウマチのＡＲＡ判定基準を全く満さない５人
の患者のＴｇＡ　ＲＦレベルは、全員正常−■〕限以下
であった。これら５人の患者を分析対象から除外しても
、侵食カウント番ヒは依然として著しい差があった（ウ
ィルコクソンの２標本検定でｐ＜０．０２）。これに対
し、血清ＩｇＭ　ＲＦのレベルが正常上限を越えた１０
人の患者は、残りの２３人に比べて侵食数が大きくなか
った（侵食カウントのメジアンは、それぞれ、０．５お
よび１）。ＩｇＧ　ＲＦのレベルが正常上限を越えたの
は４人であるが、これらの患者の場合も、ＩｇＭ　ＲＦ
が正常な患者と侵食の度合にあまり差はなかった（侵食
カウントのメジアンは、それぞれ２および１）。

ＩｇＡ　ＲＰが正常」−眼を越えた患者のうちの５人は
、血清１ｇＮ　ＲＦのレベルも正常」二限を上回ってい
た。しかしながら、表２に示すように、　ＩｇＭ　ＲＦ
のみ正常−上限を越えた５人の患者には手および手首の
侵食はなく、これは、ＩｇＡ　ＲＰが正常上限を越えた
７人が、ＩｇＭ　ＲＦレベルの正常非正常に関係なく全
員侵食性疾患におかされていたことと著しい対照をなし
ている。両者の差は、統計的に著しかった（フィッシャ
ーの直接確率法でｐ＝０．００１３）。

友」　初診時における手首の侵食性疾患とＩｇＡ　ＲＰ
の正常上限超過ならびにＩｇＭ　ＲＦのみの正常］二限
超過との関連 手および手首の疾患（患者数） 侵食　非侵食　ｐ＊ ＊ｐ：フィッシャーの直接確率法 し　　、−のＲＦレベルと、　時の重態゛　の「　−Ｉ
ｇＡ　ＲＰのレベルが正常上限を上回った７人の患者は
、研究の終了時点では、他の患者の集団に比べて赤血球
沈降速度がかなり速く、握力はかなり弱かった（表３）
。しかしながら、初診時に正常」−限を超過したｒｇに
ＲＦもしくはＩｇＧ　ＲＦと来院終了時の病態活動との
間には、このような関係はみられなかった。

表４　初診時におけるＩｇＡ　ＲＰレベルと来院終了時
における赤血球沈降速度および握力との関係 ８ウイルコクソンの２標本検定 力吟゛のＲＦレベルとその　の°　　との　１２８人の
慢性関節リウマチ患者のうちｌグループとなりそうな１
４人を、追跡調査期間中、金（アウロチオマレイン酸ナ
トリウム）、ペニシラミンもしくは経ロプレドニンロン
を使用して治療を行った。表４に初診時のｒｇｃ　ＲＦ
レベルとその後の金、ペニシラミンまたはプレドニソロ
ンによる治療の必要性との関係を示す。これら３種の薬
剤のいずれも各患者に使用できるものとしたので、患者
がｎ人の場合、治療機会数は３ｎとなる。ＩｇＡ　ＲＰ
のレベルが正常上限を越えた７人の患者は、残りの２８
人に比べて薬剤の必要度が著しく高く（イエーツの補正
を用いたカイ２乗検定でＰ＜０．００１．ｘ２＝１７．
０）　、これら２集団の差は、非慢性関節リウマチ患者
５人を除外してもなお著しかった（ｐ＜０．００１．ｘ
　２＝　１２．１）。

１　初診時のＩｇＡ　ＲＦレベルとその後の金、ペニシ
ラミン、ステロイド剤による治療の必要性との関係 ＜　１００／ｍ！２８　　　１４　　８４　　ｐ　＜　
０．００１８１人の患者に金、ペニシラミンもしくはプ
レドニソロンのうちの２つないし全部の薬剤を投与した
場合もある。

■イエーツの補ＩＦを用いたカイ２乗検定ｒ　、の文・
　とじた川−、ｈ＝−Ｈ’−４６人の患者が研究の対象
となったが、うち３３人について、発症から少くとも２
４ケ月の間追跡調査を行った。二重間の追跡調査を完了
できなかった１３人のうち、２人は死亡（１人は肺ガン
、他は心筋梗塞）、３人は英国外に移住し、残る８人は
追跡調査を受けなくなった。この８人のうちの６人は、
最後の検査時において関節症状が全く存在しなかった。

特に記載のない限り、以下の分析は２年間以ｌ−追跡調
査を行った３３人の患者のみに基礎をおくものである。

表５にこの集団の年齢および男女の別を示す。

この３３人の患者集団は、女性２１人に対し男性１２人
で１女性が男性の１．８倍であった。年齢の範囲は２２
歳から８０歳、発症時の平均年齢は５２．８歳である。

２８人の患者は、追跡調査中にいずれかの段階で、慢性
関節リウマチ（ＲＡ）のＡＲＡ判定基準の５２ないしそ
れ以１−を満した。これらの患者は、（古典的なまたは
確実な）慢性関節リウマチに分類し、他の５人は非ＲＡ
に分類した（表５）。

２８人のＲＡ患者のうちの１７人（６１％）は、追跡調
査期間中に手および手首の侵食性疾患を発現した（表５
）。発症時から最後のＸ線撮影までの期間は２４〜２８
ケ月にわたったが、疾病期間と侵食カウントの間には著
しい相関は存在しなかった（ピアソンの積率相関法でｐ
、＞　０．０５．　　ｒ　＝　０．３７）。

８人のＲＡ患者は金（アウロチオマレイン酸すトリウム
）による治療を必要としたが、表５に示すように、その
うちの６人はペニシラミンも、そして１人はアザチオプ
リンも必要とした。これら８人の患者全員と他の６人の
ＲＡ患者（ＲＡグループの５ｏｚ）は、追跡調査のいず
れかの段階で、ステロイド剤（少量のプレドニソロン）
の経口投与により治療を行った。「特異的」な薬剤また
はステロイド剤による治療の決定は、非ステロイド抗炎
症剤を使用して十分な治療を施しても滑膜炎が持続し身
体障害の症状がある場合や、Ｘ線検査で骨の侵食が進行
している場合など普通の基準に従って行った。

と」　少なくとも２年以上の追跡調査を実施した３３人
の患者の臨床像と薬剤治療の実施状況患者総数　　　　
　　　　２８５ 女性／男性　　　　　　　１９／９　　　　２／３初診
時の年齢範囲　　　２２〜８０歳　　　２６〜５２歳侵
食性疾ｆｆ１（手ト手首）　　１７（８１％）　　　０
ステロイド剤（Ｓ）を使用　１’４（５０％）　　　　
０金（Ｇ）を使用　　　　　　８　（２９％）　　　０
ペニシラミン（Ｐ）を使用　６（２１駕）　　　Ｏアザ
チオプリン（Ａ）を　　１　（４％）　　　　０使用 Ｇ／Ｐ／Ａを使用　　　　　　８　（２９％）　　　　
Ｏ５／Ｇ／Ｐ／Ａ　ｔｒ−使用＋４（５０％）　　　０
３３人の患者グループのうちの１３人（３５％）は、リ
ウマトイド因子のＲＡＨＡ凝集テストで１度ないし数度
、血清陽性（力価≧１／４０）となり（［メゾ中ラボ・
チクノロ」第３１巻３２３〜３２６ページ、　１９７４
年）、従って、血清陽性に関するＡＲＡの第８基準を満
した。この１３人の患者は全色古典的または確実な慢性
関節リウマチを発現しており、ＲＡ患者グループにおけ
る血清陽性の発現度数は４６％であった。

患者からは血清および滑液の試料を合計８５１個採取し
、既に述べたように、酵素結合吸収検定法（ＥＬＩＳＡ
）を用いてＩｇＭ　ＲＦ、　ＩｇＡ　ＲＦおよびＩｇＧ
　ＲＦの測定を行った。測定結果は純吸光度で表したが
、ＩｇＡ　ＲＰのレベルは、全体でＩｇＭ　ＲＦとのか
なり著しい相関を示した（ピアソンの積率相関法でｒ−
０、Ｂ？Ｂ、Ｎ　＝　Ｅ１５１．　ｐ　＜　０．００１
）。さらに、ＩｇＭ　ＲＦのしベルは、全体でＩｇＧ　
ＲＦと著しい相関を示した（ピアソンの積車相関法Ｙ：
　ｒ　＝　０．４０７．Ｎ　＝　Ｅｔ４３．　ｐ　＜０
．００１’）。

３３人の患者のうち１９人（５８％）が、いずれかの段
階において、ＩｇＭ　ＲＦ、　ＩｇＡ　ＲＦまたはＩｇ
Ｇ　ＲＦのレベルが正常上限を越えた。５人の非ＲＡ患
者を除外すると、リウマトイド因子が正常」−限を越え
た患者は、２８人中１８人（８４％）　テｌル。表６に
発症後４．７±３．０ケ月（平均±１標準偏差）の初来
院詩にＥｌ、ＩＳＡで測定した個々のＲＦアイソタイプ
の正常−１−限超過度数を示す。ＩｇＡ　ＲＦおよびＩ
ｇ、Ｍ　ＲＦは、それぞれ、７人（２１％）および１０
人（３［Ｈ）が正常上限を−に回った。その後の期間に
ＲＦのレベルが正常］二限を越えたのは、ＩｇＡ　ＲＦ
の場合がわずかに２人、ＩｇＭ　ＲＦの場合も３人であ
った。

この３３人の患者グループには、関節性症状の発現はほ
とんどみられなかった。ＩｇＡ　ＲＦの血清レベルが継
続して高かった１人の婦人は、フェルティ症候群を発現
した。リウマチ結節がみられたのは１人のみで、この患
者は、ＩｇＭ　ＲＦおよびＩｇＡ　ＲＦのレベルが正常
上限を越え、ＩｇＧ　ＲＦは正常であった。血清陰性の
１人の患者は、ショーグレン症候群を発現した。

と」　初診時および追跡調査中の３３人の患者のリウマ
トイド因子正常」−限超過度数 ＩｇＡ　ＲＰ　　＜　１００／ｍ／　　　７　（２１％
）　　　９　（２Ｂ）ＩｇＭ　ＲＦ　　＜　２０１０／
　−／　　ＩＱ（３０Ｘ）　　　１３（３９Ｘ）ＩｇＧ
　ＲＦ　　＜　８００／ｍ／　　　４　（１２％）　　
　　８　（２４％）＊１０２の正常血清の８５％レベル
を正常−１−限とした。ＩｇＡ　ＲＦ、　ＩｇＭ　ＲＦ
およびＩｇＧ　ＲＦは、それぞれ、≧１００／＋ａ／　
、　＞　２０ＩＵ／ａ／　、　≧８００／ａ／（７）　
トキ正常−に限を越えたとみなした。

住ハラメータと血　パラメータの　ＩＪ　、３３人の患
者の各々について、追跡調査で得たＶ朝のこわばり（Ｅ
ＭＳ）　、全体的な痛み（ＰＶＡＳ）、握力（ＣＳ）、
赤血球沈降速度（ＥＳＲ）　、病態活動指数（ＩＩＩＡ
）　、　ＩｇＭ　ＲＦ、　ＩｇＡ　ＲＦおよびＴｇＧ　
ＲＦのプロフィルの相関関係を、スピアマンの準位相関
法を用いて検定した。分析の基礎である患者の評価の回
数は、５〜１２回におよび、平均７．６回であった。−
例として、第３図に古典的な慢性関節リウマチを発現し
た患者Ｇ、Ｗ、の病態活動指数、ＩｇＭＲＦ。

ＩｇＡ　ＲＦ、およびＩｇＧ　ＲＦの追跡調査プロフィ
ルを示す。ＲＦアイソタイプと病態活動指数の関連に対
する順位相関係数（γＳ）は第１図にも示しである。病
態活動指数の変動とＩｇＡ　ＲＰの相関は統計的に顕著
であった（γｓ　＝　０．’６？”、’　ｐ　＜　０．
０５）。

第４図に３３人の患者グループにおける病態活動指数と
ＩｇＡ　ＲＦ、　ＩｇＭ　’ＲＦおよびＩｇＧ　ＲＦと
の関連に対する正規化したスピア萼ンの順位相関係数（
γｓ　「１−：Ｔ）の分布を示す。相当ばらついている
ものの、病態活動指数とＩｇＡ　ＲＰの関連に対するγ
Ｓ辷Ｔて］平均値は、これらの相関をかなりはっきり示
しており、〔平均値０．４９７（標−偏差１．０．？３
）、スチューデントのｔ検定でｐ”＜０．０閃〕、この
ことはグループ全゛体で追跡調査中にＩｇＡ　ＲＦ’と
病態活動の変゛動間にポジティブな関連があったことを
示唆している。しかし、病態活動指数とＩｇＭ　ＲＦお
よびＩｇＧ　ＲＦの変動間には、全体としてこのような
顕著な関連は存在しなかった（第４図）。

表７に、３３人の患者グループ内におけるＥＭＳ　。

ＰＶＡ５．　ＲＡＩ、　ＧＳ、　ＥＳＲ，ＩｇＡ　ＲＦ
、　　ＩｇＧ　ＲＦ、　　ｒｇＭ　ＲＦ（７）各臨床パ
ラメータおよび血清パラメータの変動の関連に関する分
析結果をまとめて示す。表には、γｓ「丁τゴの平均±
１標準偏差とγＳ「Ｔ−１の平均のゼロからの偏差の有
意性を示す。各患者の臨床パラメータの変動は密接に関
連しており、たとえば、全体的な痛み（ＰＶＡＳ）とリ
ッチ−関節指数（ＲＡＩ）の相互関係は、γＳ「１−ニ
ー１の平均±ＩＳＯが０．８６±１．００（ｔ＝　５．
１８．　　Ｐ　＜　０．００１）であり、握力（ｃｓ、
）の変動もリッチ−関節指数（ＲＡＩ）および全体的な
痛み（ＰＶＡＳ）の変動と密接に関連していた（　ｐ　
＜　０．００１）、また、赤血球沈降速度（ＥＳ、Ｒ）
と握力（ＣＳ）の変動間にも密接な関連があり（γＳ「
丁）１の平均±ＩＳＯ＝　−０，８７±１．１１゜ｐ＜
０．００１）、赤血球沈降速度（ＥＳＲ）の変動は、リ
ンチー関節指ａ（ＲＡＩ）のそれとも顕著な相関を示し
た（０．５５±１．０７．　ｐ　＜　０．０５）。しか
し、赤血球沈降速度（ＥＳＲ）と全体的な痛み（ＰＶＡ
Ｓ）あるいは早朝のこわばり（ＥＭＳ）には、顕著な関
連はなかった。

リウマトイド因子アイソタイプの変動は、様々な興味深
い特徴を示した。まず、ＩｇＡ　ＲＰと赤血球沈降速度
（ＥＳＲ）の変動の間には密接な相関が存在した（０．
５７±０．９８．　Ｐ　＜　０．０１）。ＩｇＡ　ＲＰ
と握力（ＣＳ）の間にも顕著な相関があり（−０，４１
±１．０２゜ｐ＜０．０５）　、握力（ＧＳ）の低下に
つれてＩｇＡ　ＲＰのレベルは１−Ａシ、握力が増大す
るとＩｇＡ　ＲＰのレベルは低Ｆすることが示された。

ＩｇＧ　ＲＦの変動と赤血球沈降速度（ＥＳＲ）　ＣＰ
　＜０．０２）および握力（ＧＳ）　ＣＰ　＜　０．０
５）の変動の間にも顕著な相関が存在したが、ＩｇＧ　
ＲＦとＩｇＡ　ＲＦの変動間には顕著な関連は存在しな
かった。

一方、ＩｇＭ　ＲＦ（７）変動はＩｇＡ　ＲＦ（０，Ｂ
Ｏ＝ｔ：　１．２２゜ｐ　＜　０．０１）および赤血球
沈降速度（ＥＳＲ）　　ＣＰ　＜０．０５）の変動と著
しく相関していたが、臨床パラメータの変動との間には
顕著な相関はなかった（表７）。

表７の患者数の欄は、はとんど３３人未満となっている
が、これはパラメータが観察・測定期間を通じてほぼ一
定であれば相関係数を計算できないからである。たとえ
ば、４人の患者は、追跡調査中、早朝のこわばりを１度
も示すことがなかったので、「早朝のこわばりＪの欄の
患者数はすべて２８Å以下となっている。

パラメータＸ対パラメータＹの相関係数（γＳ）とＸお
よびＹの絶対値との関連は、スピアマンの順位相関法を
用いた多次元相関分析によって調べた。一般的にこの関
連の強さは、パラメータの最初の値や平均値あるいは最
大値とは関係しておらず、たとえば、ＩｇＡ　ＲＦと病
態活動指数（ＩＯＡ）の関連を表すγｓ「１−１ＴとＩ
ｇＡ　ＲＰの最初の値との間には著しい相関関係は存在
しなかった。

”スピアマンの順位相関係数（γＳ）を計算できた患者
の数（≦３３） ■正規化した順位相関係数（γｓＦ丁τ丁）の平均と標
準偏差（’ＳＤ） ＊＊８スチユーデントのｔ検定で評価したゼロからのＸ
の偏差の有意性 引−遺 追跡調査を行った患者グループの本研究終了時における
病態活動（リッチ−関節指数（ＲＡＩ）、握力（Ｏ３）
または病態活動指数として表現）は、手および手首の最
後のＸ線検査に基づく侵食数と著しく相関しており、一
方、慢性関節リウマチ（ＲＡ）における侵食の発現は、
予後不良の強力な指標であることが立証されている（［
アメリカン争すウマトイドΦディシーズＪ第３８巻　２
７４〜２７５ページ。

１９７７年）゛。従って、リウマトイド因子の予後の面
における価値を評価する場合は、侵食カウントを評価結
果の客観的証拠として使用するのが有効であると思われ
る。

我々のデータは、慢性関節リウマチの経過の早期に血清
Ｉｇｉ　ＲＦが上肩することが、早期に侵食の発現を伴
う重篤な病態を強く予示するものであることを示してい
る（第２図）。我々のグループが最近発表した予備的論
文（「初期慢性関節リウマチにおけるリウマトイド因子
：展望的研究」−１９８３年９月２２０〜２３日のＢＡ
ＲＲ、ヘバーデン協会。

ＲＡＲのＲ３ＭセクションおよびＲ＆Ｒアイルランド協
会の合同会合、リーズ大学抄録第１θ号）はさておき、
ＩｇＡ　ＲＰと予後との関連の問題は、反応性関節炎の
発現に関連させられてきた（「ジャーナル・インフェク
シャス・ディシーズ」第６７巻８７〜１１４ページ、　
＋！１１８２年）。症状の重い慢性関節リウマチにおけ
るＩｇＡ　ＲＰの存在は、発病過程にＴ細胞が比較的活
動的に関与していることの反映である可能性がある。何
故なら、ＩｇＡ抗体の産出は、ＩｇＭ抗体の産出より、
そしておそら＜　ＩｇＧ抗体の産出よりも、Ｔ細胞の補
助に依存しているからである（［イミューノロジー・レ
ビューＪ１ｅ７巻ｓ７〜１１４　ヘージ＋’　１９８２
年）。この仮説は、１９７２球・マクロファージの免疫
調節機構の失調とヘルパーＴ細胞の影響が比較的優勢で
あることを慢性関節リウマチの特徴とするジャノッシー
らの見解（「ランセット」第２巻８３８〜８４２ページ
、　１９８１年）とも符合する。従ってｒｇＡＲＰは、
重症の慢性関節リウマチの病因であるというより、むし
ろヘルパーＴＭＢ胞の活動性の昂進を示す標識であるか
もしれない。

我々は、ＩｇＡ　ＲＰは慢性関節リウマチの予後不良を
示す特異的な標識である可能性があり、従ってＩｇＡ　
ＲＰの存在が、おそらく特異的な薬物による早期治療を
正当化するものであるということを提案するものである
。

慢性関節リウマチの自然な経過は、確実な慢性関節リウ
マチの普通の診断基準をかろうじて満す短期間の滑膜炎
から過酷に進行する重症の破壊的な疾患まで、極めて多
彩である。従って、長期の追跡調査を継続できるのは、
症状が重い方の患者であると推測することができる。実
際、追跡調査が中断された８人のうちの何人かは、おそ
らく、症状のない状態が続いたので来院しなくなったの
である。　− リッチ−関節指数等の評価における観測者間のばらつき
は、大きすぎて許容しえないことが明らかにされている
。木研究では、臨床測定および実験による測定の再現性
が優れていることが何よりも重要であるので、各患者の
血清および滑液の全試料のＥＬ　ＩＳＡによるリウマト
イド因子検定を１日で実施した。さらに、診療室は常に
１日の同じ時間帯に開き、このようにして、測定日が変
わることによるばらつきをなくした。

我々の慢性関節リウマチ患者の６１％（２８人中１７人
）は、追跡調査期間中に手および手首の侵食性疾患を発
現した。これは、「診断上の」手の侵食を２年後に４３
％（９４人中４０人）に見出したプルツクおよびコルベ
−／　トの報告（「アナルズ・リウマトイド・ディシー
ズ」第３６巻７１〜７３ページ、　１９７７年）に大体
符合している。追跡調査期間が比較的短かかった（２４
〜２８ケ月）ので、我々は手および手首の侵食カウント
を結果の評価、基準として変更を加えることなく使用す
ることが正当化されると考えた。

羊細胞凝集テストで判定した慢性関節リウマチにおける
血清陽性の度数は、少なくとも７５％であるといわれる
ことが多い。従って、我々の患者グループのＲＡＨＡに
よる血清陽性度数（全体の３９％および慢性関節リウマ
チ患者の４６ｚ）は、かなり低いと思えるかもしれない
。しかしながら、他にも、初期慢性関節リウマチの長期
的研究において、血清陽性の度数が低かったという報告
がある。マシら（「セミナ・アルスリティス・リウマト
イド」第５４２９９〜３２６ページ、　１９７６年）は
、古典的または確実な慢性関節リウマチを発現した３８
人を含む５０人の若い成人の慢性関節リウマチ患者を対
象に研究しているが、常に血清陽性であったのは４４％
（５０人中２２人）にすぎない。我々の研究では、追跡
調査中にリウマトイド因子のレベル（ＥＬＩＳＡ）が−
に昇した患者は極めて少なかったが、マシらの場合も、
研究開始時以降に血清陽性となった患者は、５０人中２
人にすぎない。

免疫複合物およびリウマトイド因子の血清レベルを臨床
像と相関させることも試みられている（「アルスリティ
ス・リウマトイド」第２６巻５８３〜５９８〆−ジ、　
１９８３年；　［ジャーナル・リウマトロシー」第１（
ｌｓ４１１〜４１７ページ＋、　１９８３年；「アルス
リティス・リウマトロジー」第２６巻（１９８３年４月
補遺）５５０ページ、　１９８３年）。しかし、これら
の試みでは、パラメータ（たとえば握力）のべ＝スライ
ンにある個々の差異を考慮に入れることのできないクロ
スセクション分析をその計算の大部分の基礎としている
。患者のパラメータ相互の関係を長期的に研究する場合
は、従って、たとえばＲＦのレベルと病態活動の臨床指
数の関係を評価するといった方向が適切であるように思
われる。

３つのＲＦアイソタイプの中で、ＩｇＡ　ＲＰが病態活
動の変動と最も密接に関連していたという我々の研究結
果は、意外に思えるかもしれない。表７のデータは、Ｉ
ｇＡ　ＲＰが急性期反応物質のように振舞っている可能
性を示唆している。しかしながら、ｒｇｃ　ＲＦの変動
も、赤血球沈降速度（ＥＳＲ＞ならびに握力（ＣＳ）と
の著しい相関を示した。リウマトイド因子のレベルが正
常な患者の場合でさえ、リウマトイド因子の変動と臨床
パラメータの変動の間に時に顕著な関連が示されたのは
興味深かった。初期慢性関節リウマチでＩｇＡ　ＲＰの
レベルが正常−１−限より高いことは、侵食性疾患が後
に発現することと著しく関連しており、ＩｇＭ　ＲＦや
ＩｇＧ　ＲＦの場合は、このような関連は存在しないこ
とを我々は明らかにしているので、上記の観察は、慢性
関節リウマチではＩｇＡ　ＲＰの測定が重要な情報を提
供してくれるだろうという我々の研究結果をさらに補強
するものである。

慢性関節リウマチの病態活動および症状の程度とＩｇＡ
　ＲＰとの関連については、あまり注意が払われてこな
かった。これはおそらく、ＩｇＡが補体および喰細胞を
活性化する働きが弱く、従って慢性関節リウマチの発症
に直接関与していることはなさそうに思えるからであろ
う。マーコロンゴら（「アナルズ・リウマトイドＯディ
シーズ」第２６巻４１２〜４１８ページ、　ｌ９６７年
）は、大部分の慢性関節リウマチ患者の総血清ＩｇＡ濃
度がｌ二＋ｉシていたが、総血清ＩｇＧ濃度の−にＲは
、血清陽性の慢性関節リウマチのみに見出されたと報告
している。

しかし、マーコロンコらは、免疫グロブリンのレベルと
疾患の経過あるいは疾病期間との間にはいかなる関係も
見出していない。一方、金またはペニシラミンによる慢
性関節リウマチの治療は、その機序は明らかでないが、
ＩｇＡの欠乏を生じさせることがある（［アナルズφリ
ウマＩ・イド・ディシーズ」第３７巻　２８８ページ、
　１９７８年）。

最近、ＨＬＡ−Ｂ２？が関連した関節症とＩｇＡとの興
味深い関係が報告されている。ニブリンガ−（［ブリテ
ィッシュ・ジャーナル拳すウマトロジー］第２２巻（補
遺２）５３〜６６ページ、　１９８３年）は、強直性を
椎炎患者　１２２人の血清ＩｇＡ　８度が赤血球沈降速
度と著しく相関していることを示し、ライトら（「ブリ
ティッシュ・ジャーナル・リウマトロジー」第２２巻（
補遺２）２８〜３２ページ。

１８８３年）は、強直性を椎炎思渚においてＩｇＡが急
性期反応物質のように振舞っていることを示唆している
。また、グランフォールら（ジャーナル・インフェクシ
ャスｅディシーズＪ　第１４１巻４２４〜４２９ページ
、　ＩＨ（１年）は、ＩｇＡ抗エルシニア抗体の存続は
、エルシニア感染に引き続く関節炎の発現に直接関連し
ていることを明らかにし、そしてペナイ（「プリティッ
シュ争ジャーナルφリウマトロジー」第２２巻（補遺２
）　　１１９〜１２１ページ。

１９８３年）は、抗りレブシェラＩｇＡ抗体の血清濃度
が、非活動性の強直性を椎炎患者や乾廚性関節炎患者あ
るいは慢性関節リウマチ患者より活動性の強直性を椎炎
患者の方で著しく高いことを報告している。

一方、レサードら（「ジャーナル・リウマトロジーＪ第
１０巻４１１〜４１？ページ、　１９８３年）は、Ｉｇ
Ｇ　ＲＦのレベルは、関節指数の経時的変化および１段
階の関節指数の双方と相関があったが、ＩｇＡ　ＲＦに
はこのような相関はみられなかったと報告している。し
かしこの研究は、患者に関する測定データが少ない状態
でクロスセクション分析を行っており、期間も比較的短
い（平均８．５ケ月）。

ＩｇＡ　ＲＰが他のＲＦアイソタイプに比べて病態活動
の変動との関連がより密接である理由は明らかでないが
、おそらく、慢性関節リウマチの発生には通常複数のＲ
Ｆアイソタイプの産生が伴い、ｒｇｃ　ＲＦとＩｇＭ　
ＲＦは、補体および喰細胞を活性化することにより炎症
性反応に寄与していると考えられる。

このため、関節のｔｇｃ　ＲＦとＩｇＭ　ＲＦは、クリ
アランスと交替が速かに行われ、末梢循環には少ししか
流出しない。一方、ＩｇＡ　ＲＰは、補体および喰細胞
の活性化に役立たないので、体内に長く存続し、慢性関
節リウマチの病態活動を示す検出されやすい標識の役割
を果すのだと考えられる。

【図面の簡単な説明】

第１図は、正常なヒトおよび研究対象患者の血清におけ
るリウマトイド因子のレベルを示す図、第２図は初診時
におけるＸ線診断の結果とＲＦレベルの関連を示す図、
第３図は研究対象患者における古典的な関節リウマチを
発現した患者の病態活動指数、ｒｇＭ　ＲＦ　、　Ｉｇ
Ａ　ＲＦおよびＩｇＧ　ＲＦの追跡調査プロフィルを示
す図、第４図は研究対象患者における病態活動指数とＴ
ｇＡ　ＲＦ、　ＩｇＭ　ＲＦおよびＩｇＧ　ＲＦとの関
連についての正規化したスピアマンの順位相関係数の分
布を示す図である。 西　４　（年）

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、慢性関節リウマチに感染した人の予後を補助するた
   めの方法であって、 （ａ）慢性関節リウマチ患者の血液中に存在するリウマ
   トイド因子（ＲＦ）のＩｇＡアイソタイプのレベルを測
   定し、 （ｂ）この測定したＩｇＡ　ＲＦレベルを正常なヒトの
   ＩｇＡレベルと比較し、それによって、前記被験者のＩ
   ｇＡ　ＲＦレベルが実質的に正常なＩｇＡ　ＲＦレベル
   よりも高ければ、その病態が重症であって骨の侵食が発
   現する程まで進行する可能性があることを教示すること
   を特徴とする方法。 ２、前記ＩｇＡレベルを免疫検定方法、好ましくは、酵
   素結合免疫吸収検定法により測定する特許請求の範囲第
   １項記載の方法。 ３、前記検定法が、被験者の血液から得られる血清試料
   を不溶化した正常な兎のＩｇＧを含有する固体相に接触
   させ、次いで所定のインキュベーションを行なった後、
   前記固体層を酵素で標識した抗ヒト性ＩｇＡのＦ（ａｂ
   ′）＿２画分と接触させ、然る後、２度目の所定のイン
   キュベーションを行ない、前記固体層を、検出可能な光
   学的な応答を発生させる前記酵素に対する基質に接触さ
   せる各工程からなる特許請求の範囲第２項記載の方法。 ４、慢性関節リウマチに感染した人の予後を補助するた
   めの方法であって、 （ａ）慢性関節リウマチ患者の血液中に存在するリウマ
   トイド因子（ＲＦ）のＩｇＭアイソタイプのレベルを測
   定し、 （ｂ）この測定したＩｇＭ　ＲＦレベルを正常なヒトの
   ＩｇＭ　ＲＦレベルと比較し、それによって、前記被験
   者のＩｇＭ　ＲＦレベルが実質的に正常なＩｇＭ　ＲＦ
   レベルより高ければ、その病態が重症となるほどに進行
   しない可能性があることを教示することを特徴とする方
   法。 ５、前記ＩｇＭ　ＲＦレベルを免疫検定法、好ましくは
   、酵素結合免疫吸収検定法により測定する特許請求の範
   囲第４項記載の方法。 ８、前記検定法が、被験者の血液から得られる血清試料
   を不溶化した正常な兎のＩｇＧを含有する固体層に接触
   させ、次いで所定のインキュベーションを行なった後、
   前記固体層を酵素で標識した抗ヒト性ＩｇＭと接触させ
   、然る後、２度目の所定のインキュベーションを行ない
   、前記固体層を、検出可能な光学的な応答を発生させる
   前記酵素に対する基質に接触させる各工程ならなる特許
   請求の範囲第５項記載の方法。 ７、慢性関節リウマチ疾患に感染した人の病態活動の評
   価を補助するための方法であって、（ｄ）慢性関節リウ
   マチ患者の血液中に存在するリウマイド因子（ＲＦ）の
   ＩｇＡアイソタイプのレベルを測定し、 （ｂ）この測定したＩｇＡ　ＲＦレベルをそれ以前に測
   定したＩｇＡ　ＲＦと比較し、それによって、以前に測
   定したＩｇＡ　ＲＦレベルに関してこの測定したＩｇＡ
   　ＲＦレベルが著しく高かったり、低かったりすれば、
   それに伴なって病態活動がそれぞれ増減したことを教示
   することを特徴とする方法。 ８、前記ＩｇＡ　ＲＦレベルを免疫検定法、好ましくは
   、酵素結合免疫吸収検定法によって測定する特許請求の
   範囲第７項記載の方法。