JPH0513200U - 嫌気性細菌簡易培養装置 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【目的】 本考案は、臨床検査材料からの嫌気性細菌の
検出、あるいは薬剤耐性試験などの嫌気性細菌培養試験
に適した、角型培養容器による嫌気性細菌簡易培養装置
を提供する。 【構成】 互いに４辺で会合する板状周縁２３を有する
蓋２１と本体２２とからなり、板状周縁２３の間にシー
ル材２５を挟み込んだ４辺の板状周縁２３を留め具２６
で締め付けることにより密封された透明プラスチック角
型気密性容器２に嫌氣性細菌を接種した培養プレート３
と共に炭酸ガス発生型脱酸素剤４の封入された嫌気性細
菌簡易培養装置１。 【効果】 本考案の嫌気性細菌簡易培養装置によれば、
嫌気性細菌培養試験が簡便で、かつ、廉価に行うことが
できる。該培養装置は殊に、培養容器が角型であるた
め、角型シャーレの使用に適し、かつ、複数の培養装置
を積み重ねることができて場所をとらないなどの利点が
ある。

Description

【考案の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】

本考案は、臨床検査材料からの嫌気性細菌の検出、あるいは嫌気性細菌の薬剤 耐性試験などの嫌気性細菌培養試験に適し、操作が簡便で、かつ、廉価に行うこ とのできる嫌気性細菌簡易培養装置を提供する。

【０００２】

【従来の技術】

臨床検査施設における検査材料からの嫌気性細菌の検出、あるいは検出した嫌 気性細菌を感受性ディスクを用いて薬剤耐性試験を行ったりする、いわゆる嫌気 性培養には、嫌気ジャ−が用いられる。通常、嫌気ジャ−には特殊な耐圧容器が 用いられが、これは培養雰囲気調整のためのガス置換やガス組成調整装置を備え 、高価でもあり、操作も煩わしい。近年、炭酸ガス発生型脱酸素剤が開発され、 比較的簡便な気密容器の嫌気ジャ−も市販されるようになったが、嫌気ジャ−は 構造的に丸型容器の方が蓋の密封が容易なことから全て筒状をした丸型であり、 このため、嫌気性細菌の培養は通常丸型容器の嫌気ジャ−で行われてきた。

【０００３】

【考案が解決しようとする課題】

従来の丸型容器の嫌気ジャ−を使って嫌気性細菌培養を実際に行って見ると、 色々不便なことが多い。例えば、丸型容器には、薬剤感受性試験に使われるよ うな角型シャーレが納まり難い、丸型容器は積み重ねづらい、恒温槽に入れ ると無駄なスペースをとる、といったような問題が多々ある。しかし、これらの 問題は、培養容器が角型のものであれば一挙に解決できる。 しかしながら、培養容器には培養プレ−トの出し入れに大きな開口部が必要で あり、角型容器の場合、丸型容器に比べ、開口部の蓋は構造的に均一に締め付け 難く、４隅の気密が悪くなりがちである。また、気密性を良くしようとすれば、 頑丈なものとなって使いづらく、また値段も高くなるため、従来から丸型容器が 使用されてきたのである。 本考案者らは、臨床検査材料からの嫌気性細菌の検出、あるいは薬剤感受性試 験には嫌気性雰囲気を少なくとも４８時間以上保持できれば、その目的を達せる ことに着目し検討を重ねた結果、角型容器であっても一定以上の気密性のもので あれば培養試験ができることを見いだし、本考案の角型容器による嫌気性細菌簡 易培養装置を完成するに到った。

【０００４】

【課題を解決するための手段】

本考案は、透明プラスチック角型気密性容器、該容器に封入される嫌気性細菌 を接種した培養プレ−トおよび炭酸ガス発生型脱酸素剤よりなる嫌気性細菌簡易 培養装置であって、該容器が互いに４辺で会合する板状周縁を有する角型の本体 と蓋からなり、４辺の間にシ−ル材の挟み込まれた板状周縁を留め具で締め付け ることにより該容器は密封され、かつ、密封された該容器の気密性が酸素侵入量 １日当たり容器内容積の５％未満である嫌気性細菌簡易培養装置に関する。

【０００５】 本考案の嫌気性細菌簡易培養装置における培養用容器は、実質的に非通気性の 透明プラスチック製角型気密性容器である。該容器は互いに４辺で会合する板状 周縁を有する角型の本体と蓋からなり、４辺の間にシ−ル材の挟み込まれた板状 周縁を留め具で締め付けることにより密封される。該容器は、密封された状態で 容器への酸素侵入量が１日当たり容器内容積の５％未満の気密性を有し、より好 ましくは３％未満の気密性を有する。さらに、長期にわたり嫌気性雰囲気が保持 できるためには、気密性が２％以下でであることが最も好ましい。 本考案の嫌気性細菌簡易培養装置では、上記容器に嫌気性細菌を接種した培養 プレートと共に密封した該容器内の酸素量の１．２倍以上の酸素を吸収する能力 を持つ炭酸ガス発生型脱酸素剤によって、嫌気性細菌培養に適した酸素および炭 酸ガス濃度の気相雰囲気がつくりだされ、少なくとも４８〜７２時間以上保持さ れる。容器の気密性を高めることにより７日以上保持することも可能である。

【０００６】 さらに詳しく本考案の装置を図面により説明するが、本考案は必ずしもこれら の図面に限定されるものではなく、本考案の構成を充すものであればよい。 図１は、嫌気性細菌簡易培養装置１の上から見た平面図を示す。該培養装置の 培養容器である透明プラスチック製角型容器２の蓋２１と本体２２とは互いに４ 辺で会合する板状周縁２３を有する。そして、該容器２は、間にシール材２５を 挟み込んだ４辺の板状周縁２３を留め具２６で締め付けることによって密封され る構造を有する。留め具２６による４辺の締付けは、板状周縁２３の一部を締め 付けることにより容器を十分密封することができれば、必ずしも全周縁にわたり 締め付けなくともよい。また、留め具２６の数も２個以上で、少なくとも相対す る２辺にあって前記一定以上の気密性がもたせられればよい。該容器２の内部に は嫌気性菌を接種した培養プレート３および炭酸ガス発生型脱酸素剤４が密閉さ れる。

【０００７】 また、該容器２は、図２（側部断面図）の示すように、蓋側のリング溝２４に シール材２５が装着され、この蓋２１と本体２２の板状周縁２３を留め具２６で 締め付けることにより密封される。リング溝２４は必ずしも必須のものではない が、シール材２５の固定と容器の密封性の点から蓋および本体の両方あるいは何 れかの板状周縁２３に設けることが好ましく、蓋側の板状周縁２３に設けるのが より好ましい。また、リング溝２４は４辺の角部では折れ曲がることなく適宜ア −ルをとることが好ましい。 該容器の留め具２６は、図４（部分拡大図）の示すように、蓋の板状周縁２３ に固定された回転軸を中心に回転させ、本体の板状周縁２３の一部を挟み込んで 締め付けることにより、容器２を密封する役割を果たす。なお、留め具２６の一 つを蝶番に代え、蓋を本体に固定することもできる。

【０００８】 培養容器の大きさは、その内部に培養プレート３と炭酸ガス発生型脱酸素剤４ が十分収容できる大きさであればよく、市販のマイクロテストプレートや角１号 シャ−レと呼ばれる角型培養プレートが収容できる大きさが好ましい。具体的に は、マイクロテストプレートが２列４段積みの８個程度収容できる形状と容積を もつものであり、約１４（タテ）×２０（ヨコ）×６．５（深さ）cm以上の大き さが望ましい。

【０００９】 蓋２１および本体２２の材質は、実質的にガスバリアー性で、透明、かつ、加 工性のよい合成樹脂がよい。例えば、ポリエステル樹脂、ポリアクリル系樹脂、 ポリカーボネート樹脂などガスバリヤー性樹脂に限らず、目的に応じて実質的に ガスバリヤー性であれば、塩化ビニール、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリ スチレンなどの樹脂も選ぶことができる。 シール材２５は、弾力性があり継目のないリング状ものが望ましい。材料とし て、例えば、ソリッドタイプのシリコンゴムである。 まお、培養容器として市販のランチボックスのようなものも、密閉可能で気密 性があれば、適宜使用できる。

【００１０】 本考案において細菌の接種に用いられる培養プレートは、培養用容器に収まれ ばその形状と大きさは必ずしも限定されない。好ましくは角型のプレートまたは シャーレが用いられ、特に、マイクロテストプレート、マルチウエルプレートあ るいは角１号シャ−レと呼ばれる角型培養プレートが好適に用いられる。 培養される菌は、嫌気性細菌に限られることなく、炭酸ガスを必要とする好気 性細菌であっても微好気性細菌あってもよい。

【００１１】 本考案に用いられる炭酸ガス発生型脱酸素剤は、酸素を吸収すると共に炭酸ガ スの発生作用を有する組成物からなり、該組成物が通気性包材に包装されたもの である。炭酸ガス発生型脱酸素剤は、酸素吸収組成物、炭酸ガス発生組成物およ び酸素吸収・炭酸ガス発生組成物のいずれかの組合せでも構成できるが、酸素吸 収・炭酸ガス発生組成物の１剤タイプで構成することが好ましい。 炭酸ガス発生型脱酸素剤は、菌を接種した培地と共に培養容器内に密封した場 合に、急速に容器内の酸素を吸収すると共に炭酸ガスを発生し、嫌気性菌あるい は微好気性菌に応じた所望の酸素濃度および炭酸ガス濃度の気体雰囲気を作りだ すものである。嫌気性菌または微好気性菌の培養に応じ、好ましくは５時間以内 に、より好ましくは２時間以内に、嫌気性菌では酸素濃度０．１％以下、炭酸ガ ス濃度５〜２５％、また、微好気性菌では酸素濃度５〜１５％、炭酸ガス濃度３ 〜１５％の範囲に適宜調節することができるものである。

【００１２】 そして、炭酸ガス発生型脱酸素剤の酸素吸収能は、培養容器内の酸素量の１． ２倍以上の酸素を吸収するものであって、かつ、培養容器内の酸素を５時間以内 に、好ましくは２時間以内に吸収する能力を有する。その上、構造上比較的４隅 からの空気の侵入が避け難い角型密封培養容器を嫌気状態に保つために、該培養 容器の気密性に基づく酸素の侵入速度より吸収速度が早く、かつ、所定期間内に 侵入する酸素量を全て吸収する能力を有するものである。加うるに、容器の強度 、蓋の密閉性と開閉などの点から、容器内の酸素の吸収量に対し炭酸ガスの発生 量が過剰あるいは過少になって、容器が過度に加圧になったり、減圧になったり しないように、脱酸素剤の組成と量が適宜調節できるものが望ましい。

【００１３】 用いられる炭酸ガス発生型脱酸素剤組成物として、 (1) 還元性有機物質−炭酸塩−水からなる組成物 (2) 鉄を主剤とする脱酸素剤−炭酸水素塩−酸性物質−水からなる組成物 (3) 亜二チオン酸塩−炭酸水素塩−炭酸塩−水からなる組成物 などが例示される。 中でも、(1) の組成物が好ましく、還元性物質として具体的には、カテコール 、アスコルビン酸および／またはその塩、あるいはエリソルビン酸および／また はその塩等が使用される。特に、酸素吸収量、酸素吸収速度、炭酸ガス発生速度 、炭酸ガス発生量などの調節のし易さおよびこれに基づく酸素濃度、炭酸ガス濃 度の調節のし易さ、取扱い性、製造のし易さなどの点から、アスコルビン酸およ び／またはその塩からなる組成物を用いることがより好ましい。 組成物の量は、密封系内の空気量１００ml当たり構成する組成物が０．０１〜 ０．５ｇからなる。

【００１４】 脱酸素剤の包材は、通気性で酸素と炭酸ガスをよく透過するものであればよく 、好ましくは酸素と二酸化炭素の透気度が３００ml／Hr・m²以上である包材が用 いられる。包材として、合成繊維からなる不織布、合成紙、マイクロポーラスフ ィルムまたは紙等、さらに補強材として開孔ポリエチレン、ワリフ等を貼り合わ せた複合包材が適する。 また、通気性包材に包装された炭酸ガス発生型脱酸素剤は、使用前は非通気性 容器に保管されるか、あるいは非通気性包材に２重包装されている。

【００１５】

【実施例】

次ぎに実施例により本考案を説明する。 試験例 図面に示される透明プラスチック角型気密性容器（１４０×２００×６５mm） で蓋の留め具２６による締め付けが次のごとく異なる３種の容器Ａ、容器Ｂおよ び容器Ｃを準備した。容器Ａは４辺の周縁の相対する長い方の周縁の留め具（長 さ２００mm）２個および短い方の周縁の留め具（長さ１４０mm）２個、計４個の 留め具で締め付け、容器Ｂは長い方の周縁の留め具（長さ２００mm）２個のみで 締め付け、容器Ｃは短い方の周縁の留め具（長さ１４０mm）２個のみで締め付け 、それぞれ、容器を密封した。 これら３種の容器は、あらかじめ容器に装着してあったガス置換用ノズルを用 い容器内の空気を窒素ガスでガス置換した後放置しておき、この間経時的に内部 のガスの酸素濃度をガスクロマトグラフで分析し、各容器の気密性を測定した。 容器の気密性を１日当たりの容器の酸素侵入量を容器内容積に対する比率で示 すと、測定結果は次のとおりであった。 容器Ａ：０．９％、 容器Ｂ：１．６％、 容器Ｃ：５．３％

【００１６】 実施例１〜２、比較例 試験例で気密性を測定した３種の容器Ａ（実施例１）、容器Ｂ（実施例２）お よび容器Ｃ（比較例）を培養容器に用い、次のごとく嫌気性細菌の培養試験を実 施した。 それぞれ上記３種の容器に、それぞれ、角１号シャ−レに分注固化したＧＡＭ 寒天培地に Clostridium botulinum（供試菌Ｎｏ．１と記す）を接種したシャ− レ、同様のＧＡＭ寒天培地に Propionibacterium acnes（供試菌Ｎｏ．２と記す ）を接種したシャ−レおよび炭酸ガス発生型脱酸素剤（三菱瓦斯化学製アネロパ ック）を入れ、容器Ａは４個の留め具（長辺＋短辺）で、容器Ｂは２個の留め具 （長辺のみ）で、容器Ｃは２個の留め具（短辺のみ）で締め付け密封した。各容 器は３７℃に３日間保持して培養した後、開封し寒天平板上に出現したコロニ− の数と径の大きさを測定して増殖の程度を判定した。結果を表１に示す。

【００１７】 参考例 上記実施例と同様に供試菌を接種したＧＡＭ寒天培地平板を水１０mlを加えた ガス発生袋（Becton Dickinson and Co.製ＧａｓＰａｋ（商標））と共にパラジ ウム触媒を装填したＢＢＬ（商標）嫌気ジャ−（丸型密封容器）に封入し、３７ ℃で３日間培養した。この後、嫌気ジャ−を開封し、寒天平板上に出現したコロ ニ−の数と径の大きさを測定した。結果を表１に合わせ示す。

【００１８】 表１に示すように、実施例１〜２の結果は、最も一般的な嫌気性菌培養法であ るＢＢＬガスパック法で行なった参考例の結果に対してなんら遜色なく、本考案 の嫌気性細菌簡易培養装置により容易に嫌気性細菌の培養が行なえることは明ら かである。

【表１】

【００１９】

【考案の効果】

本考案の嫌気性細菌簡易培養装置によれば、臨床検査材料からの嫌気性細菌の 検出、あるいは嫌気性細菌の薬剤耐性試験などの嫌気性細菌培養が、簡便かつ廉 価に行なうことができる。そして何よりも、本考案に基づき一定以上の気密性を 有する特定構造の角型プラスチック容器を選ぶことにより、角型培養容器による 嫌気性細菌培養が可能となるのである。これは、単に培養容器が簡便・廉価であ るばかりでなく、次のような多くの利点を生むのである。 １）培養装置に角型シャーレが一度に多数収容でき、しかも、納まり易い。 このため、多数の培養試験が楽にできる。 ２）培養装置の角型容器は容易に積み重ねることができ、場所をとらない。 ３）しかも、培養装置を恒温槽に入れる場合に無駄なスペースをとらず、一 度に多数収容できる。

【図面の簡単な説明】

【図１】 嫌気性細菌簡易培養装置１の平面図を示す。

【図２】 図１の培養装置１のＡ−Ａ線における側面断
面図を示す。

【図３】 培養装置１の側面図。

【図４】 図２における留め具１６による締め付け部分
の拡大図を示す。

【符号の説明】

１ 嫌気性細菌簡易培養装置 ２ 透明プラスチック角型気密性容器 ２１ 蓋 ２２ 本体 ２３ 板状周縁 ２４ リンク溝 ２５ シール材（シリコンゴムパッキング） ２６ 留め具 ３ 嫌気性細菌を接種した培養プレート（マイクロテス
トプレート） ４ 炭酸ガス発生型脱酸素剤

Claims (1)

【実用新案登録請求の範囲】
1. 【請求項１】 透明プラスチック角型気密性容器、該容
   器に封入された嫌気性細菌を接種した培養プレ−トおよ
   び炭酸ガス発生型脱酸素剤よりなる嫌気性細菌簡易培養
   装置であって、該容器が互いに４辺で会合する板状周縁
   を有する角型の本体と蓋からなり、４辺の間にシ−ル材
   の挟み込まれた板状周縁を留め具で締め付けることによ
   り密封され、かつ、密封された該容器の気密性が酸素侵
   入量１日当たり容器内容積の５％未満である嫌気性細菌
   簡易培養装置。