JPH04305594A - β−(2−クロロ−4−ニトロフェニル)−マルトペンタオシド - Google Patents
β−(2−クロロ−4−ニトロフェニル)−マルトペンタオシドInfo
- Publication number
- JPH04305594A JPH04305594A JP998691A JP998691A JPH04305594A JP H04305594 A JPH04305594 A JP H04305594A JP 998691 A JP998691 A JP 998691A JP 998691 A JP998691 A JP 998691A JP H04305594 A JPH04305594 A JP H04305594A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- chloro
- reaction
- nitrophenyl
- amylase
- maltopentaoside
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- -1 2-chloro-4-nitrophenyl group Chemical group 0.000 abstract description 18
- 239000004382 Amylase Substances 0.000 abstract description 18
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 18
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 15
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 abstract description 13
- 102000013142 Amylases Human genes 0.000 abstract description 10
- 108010065511 Amylases Proteins 0.000 abstract description 10
- 235000019418 amylase Nutrition 0.000 abstract description 10
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 abstract description 10
- WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N Acetic anhydride Chemical compound CC(=O)OC(C)=O WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 9
- BOFRXDMCQRTGII-UHFFFAOYSA-N 619-08-9 Chemical compound OC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1Cl BOFRXDMCQRTGII-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 8
- FJCUPROCOFFUSR-GMMZZHHDSA-N maltopentaose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O[C@H]([C@H](O)CO)[C@H](O)[C@@H](O)C=O)O[C@H](CO)[C@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O[C@@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)[C@@H](CO)O2)O)[C@@H](CO)O1 FJCUPROCOFFUSR-GMMZZHHDSA-N 0.000 abstract description 8
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 abstract description 8
- FTNIPWXXIGNQQF-UHFFFAOYSA-N UNPD130147 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(CO)OC(OC2C(OC(OC3C(OC(OC4C(OC(O)C(O)C4O)CO)C(O)C3O)CO)C(O)C2O)CO)C(O)C1O FTNIPWXXIGNQQF-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 7
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 abstract description 7
- FJCUPROCOFFUSR-UHFFFAOYSA-N malto-pentaose Natural products OC1C(O)C(OC(C(O)CO)C(O)C(O)C=O)OC(CO)C1OC1C(O)C(O)C(OC2C(C(O)C(OC3C(C(O)C(O)C(CO)O3)O)C(CO)O2)O)C(CO)O1 FJCUPROCOFFUSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 7
- 238000002844 melting Methods 0.000 abstract description 6
- 230000008018 melting Effects 0.000 abstract description 6
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 abstract description 5
- RTAQQCXQSZGOHL-UHFFFAOYSA-N Titanium Chemical compound [Ti] RTAQQCXQSZGOHL-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 4
- 239000010936 titanium Substances 0.000 abstract description 4
- 229910052719 titanium Inorganic materials 0.000 abstract description 4
- 150000004820 halides Chemical class 0.000 abstract description 3
- 238000010992 reflux Methods 0.000 abstract description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 abstract description 3
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 abstract description 2
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 abstract description 2
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 abstract description 2
- 230000031700 light absorption Effects 0.000 abstract 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 38
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 28
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 15
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 12
- 102000004139 alpha-Amylases Human genes 0.000 description 11
- 108090000637 alpha-Amylases Proteins 0.000 description 11
- 229940024171 alpha-amylase Drugs 0.000 description 11
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 9
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 9
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 8
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 8
- 239000000047 product Substances 0.000 description 8
- 102100024295 Maltase-glucoamylase Human genes 0.000 description 7
- 108010028144 alpha-Glucosidases Proteins 0.000 description 7
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 7
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 7
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 7
- ZWEHNKRNPOVVGH-UHFFFAOYSA-N 2-Butanone Chemical compound CCC(C)=O ZWEHNKRNPOVVGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000000034 method Methods 0.000 description 6
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 5
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 5
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 5
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 5
- LCGLNKUTAGEVQW-UHFFFAOYSA-N Dimethyl ether Chemical compound COC LCGLNKUTAGEVQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- WQDUMFSSJAZKTM-UHFFFAOYSA-N Sodium methoxide Chemical compound [Na+].[O-]C WQDUMFSSJAZKTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical class CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000008033 biological extinction Effects 0.000 description 4
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 4
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 4
- 239000005457 ice water Substances 0.000 description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 4
- 150000007530 organic bases Chemical class 0.000 description 4
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 4
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000012265 solid product Substances 0.000 description 4
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- FYGDTMLNYKFZSV-DZOUCCHMSA-N alpha-D-Glcp-(1->4)-alpha-D-Glcp-(1->4)-D-Glcp Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O[C@@H]2[C@H](OC(O)[C@H](O)[C@H]2O)CO)[C@H](O)[C@H]1O FYGDTMLNYKFZSV-DZOUCCHMSA-N 0.000 description 3
- JFDZBHWFFUWGJE-UHFFFAOYSA-N benzonitrile Chemical compound N#CC1=CC=CC=C1 JFDZBHWFFUWGJE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 3
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 3
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 3
- 238000005947 deacylation reaction Methods 0.000 description 3
- 238000000921 elemental analysis Methods 0.000 description 3
- 238000005658 halogenation reaction Methods 0.000 description 3
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 3
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 3
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 3
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 3
- XJDNKRIXUMDJCW-UHFFFAOYSA-J titanium tetrachloride Chemical compound Cl[Ti](Cl)(Cl)Cl XJDNKRIXUMDJCW-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 3
- OISVCGZHLKNMSJ-UHFFFAOYSA-N 2,6-dimethylpyridine Chemical compound CC1=CC=CC(C)=N1 OISVCGZHLKNMSJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RLFWWDJHLFCNIJ-UHFFFAOYSA-N 4-aminoantipyrine Chemical compound CN1C(C)=C(N)C(=O)N1C1=CC=CC=C1 RLFWWDJHLFCNIJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- ATHHXGZTWNVVOU-UHFFFAOYSA-N N-methylformamide Chemical compound CNC=O ATHHXGZTWNVVOU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000005917 acylation reaction Methods 0.000 description 2
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 2
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- VSCWAEJMTAWNJL-UHFFFAOYSA-K aluminium trichloride Chemical compound Cl[Al](Cl)Cl VSCWAEJMTAWNJL-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 239000002585 base Substances 0.000 description 2
- RTEXIPZMMDUXMR-UHFFFAOYSA-N benzene;ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O.C1=CC=CC=C1 RTEXIPZMMDUXMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MDHYEMXUFSJLGV-UHFFFAOYSA-N beta-phenethyl acetate Natural products CC(=O)OCCC1=CC=CC=C1 MDHYEMXUFSJLGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000013060 biological fluid Substances 0.000 description 2
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 2
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 2
- 239000007810 chemical reaction solvent Substances 0.000 description 2
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 2
- 150000002170 ethers Chemical class 0.000 description 2
- 230000026030 halogenation Effects 0.000 description 2
- 150000002576 ketones Chemical class 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 2
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- KPJLHDPHGOCMDS-FCQTXGLASA-N (2r,3r,4s,5s,6r)-2-[(2r,3s,4r,5r,6r)-6-[(2r,3s,4r,5r,6r)-6-[(2r,3s,4r,5r,6r)-6-[(2r,3s,4r,5r,6s)-6-(2-chloro-4-nitrophenoxy)-4,5-dihydroxy-2-(hydroxymethyl)oxan-3-yl]oxy-4,5-dihydroxy-2-(hydroxymethyl)oxan-3-yl]oxy-4,5-dihydroxy-2-(hydroxymethyl)oxan-3-yl Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O[C@@H]2[C@H](O[C@H](O[C@@H]3[C@H](O[C@H](O[C@@H]4[C@H](O[C@@H](OC=5C(=CC(=CC=5)[N+]([O-])=O)Cl)[C@H](O)[C@H]4O)CO)[C@H](O)[C@H]3O)CO)[C@H](O)[C@H]2O)CO)[C@H](O)[C@H]1O KPJLHDPHGOCMDS-FCQTXGLASA-N 0.000 description 1
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RYJXAZXFWIWTOJ-UHFFFAOYSA-N 1-phenyl-2-pyrrolidin-1-ylnonan-1-one Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(=O)C(CCCCCCC)N1CCCC1 RYJXAZXFWIWTOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BSKHPKMHTQYZBB-UHFFFAOYSA-N 2-methylpyridine Chemical class CC1=CC=CC=N1 BSKHPKMHTQYZBB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IQUPABOKLQSFBK-UHFFFAOYSA-N 2-nitrophenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1[N+]([O-])=O IQUPABOKLQSFBK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BTJIUGUIPKRLHP-UHFFFAOYSA-N 4-nitrophenol Chemical group OC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 BTJIUGUIPKRLHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 239000004366 Glucose oxidase Substances 0.000 description 1
- 108010015776 Glucose oxidase Proteins 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- FXHOOIRPVKKKFG-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylacetamide Chemical compound CN(C)C(C)=O FXHOOIRPVKKKFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710132584 Peroxidase 3 Proteins 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M Sodium bicarbonate-14C Chemical compound [Na+].O[14C]([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M 0.000 description 1
- 229910021627 Tin(IV) chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000010933 acylation Effects 0.000 description 1
- PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N aluminium oxide Inorganic materials [O-2].[O-2].[O-2].[Al+3].[Al+3] PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 1
- HOPRXXXSABQWAV-UHFFFAOYSA-N anhydrous collidine Natural products CC1=CC=NC(C)=C1C HOPRXXXSABQWAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940040526 anhydrous sodium acetate Drugs 0.000 description 1
- 150000004945 aromatic hydrocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 150000001555 benzenes Chemical class 0.000 description 1
- 102000006995 beta-Glucosidase Human genes 0.000 description 1
- 108010047754 beta-Glucosidase Proteins 0.000 description 1
- YHASWHZGWUONAO-UHFFFAOYSA-N butanoyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OC(=O)CCC YHASWHZGWUONAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- UTBIMNXEDGNJFE-UHFFFAOYSA-N collidine Natural products CC1=CC=C(C)C(C)=N1 UTBIMNXEDGNJFE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- HPYNZHMRTTWQTB-UHFFFAOYSA-N dimethylpyridine Natural products CC1=CC=CN=C1C HPYNZHMRTTWQTB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 229940116332 glucose oxidase Drugs 0.000 description 1
- 235000019420 glucose oxidase Nutrition 0.000 description 1
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 description 1
- 150000002367 halogens Chemical group 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000012433 hydrogen halide Substances 0.000 description 1
- 229910000039 hydrogen halide Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 238000002329 infrared spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 238000000691 measurement method Methods 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 150000002826 nitrites Chemical class 0.000 description 1
- ZHCAAFJSYLFLPX-UHFFFAOYSA-N nitrocyclohexatriene Chemical group [O-][N+](=O)C1=CC=C=C[CH]1 ZHCAAFJSYLFLPX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000655 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 125000000636 p-nitrophenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C([H])C([H])=C1*)[N+]([O-])=O 0.000 description 1
- 150000002989 phenols Chemical class 0.000 description 1
- UHZYTMXLRWXGPK-UHFFFAOYSA-N phosphorus pentachloride Chemical compound ClP(Cl)(Cl)(Cl)Cl UHZYTMXLRWXGPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002798 polar solvent Substances 0.000 description 1
- RPDAUEIUDPHABB-UHFFFAOYSA-N potassium ethoxide Chemical compound [K+].CC[O-] RPDAUEIUDPHABB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BDAWXSQJJCIFIK-UHFFFAOYSA-N potassium methoxide Chemical compound [K+].[O-]C BDAWXSQJJCIFIK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 159000000001 potassium salts Chemical class 0.000 description 1
- LPNYRYFBWFDTMA-UHFFFAOYSA-N potassium tert-butoxide Chemical compound [K+].CC(C)(C)[O-] LPNYRYFBWFDTMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WYVAMUWZEOHJOQ-UHFFFAOYSA-N propionic anhydride Chemical compound CCC(=O)OC(=O)CC WYVAMUWZEOHJOQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003222 pyridines Chemical class 0.000 description 1
- 125000004076 pyridyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 238000007086 side reaction Methods 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- QDRKDTQENPPHOJ-UHFFFAOYSA-N sodium ethoxide Chemical compound [Na+].CC[O-] QDRKDTQENPPHOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- HDARHUHTZKLJET-UHFFFAOYSA-M sodium;3-(n-ethyl-3,5-dimethoxyanilino)-2-hydroxypropane-1-sulfonate Chemical compound [Na+].[O-]S(=O)(=O)CC(O)CN(CC)C1=CC(OC)=CC(OC)=C1 HDARHUHTZKLJET-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000012089 stop solution Substances 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical class 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- GFYHSKONPJXCDE-UHFFFAOYSA-N sym-collidine Natural products CC1=CN=C(C)C(C)=C1 GFYHSKONPJXCDE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940126585 therapeutic drug Drugs 0.000 description 1
- HPGGPRDJHPYFRM-UHFFFAOYSA-J tin(iv) chloride Chemical compound Cl[Sn](Cl)(Cl)Cl HPGGPRDJHPYFRM-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 1
- UBZYKBZMAMTNKW-UHFFFAOYSA-J titanium tetrabromide Chemical compound Br[Ti](Br)(Br)Br UBZYKBZMAMTNKW-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 1
- NLLZTRMHNHVXJJ-UHFFFAOYSA-J titanium tetraiodide Chemical compound I[Ti](I)(I)I NLLZTRMHNHVXJJ-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 1
- 125000005270 trialkylamine group Chemical group 0.000 description 1
- IMFACGCPASFAPR-UHFFFAOYSA-N tributylamine Chemical class CCCCN(CCCC)CCCC IMFACGCPASFAPR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【0001】本発明は、β−(2−クロロ−4−ニトロ
フェニル)−マルトペンタオシドに関する。
フェニル)−マルトペンタオシドに関する。
【0002】本発明のβ−(2−クロロ−4−ニトロフ
ェニル)−マルトペンタオシドは、血清又は他の生物学
的体液に含まれるα−アミラーゼを測定するためのα−
アミラーゼ測定用試薬として有用である。
ェニル)−マルトペンタオシドは、血清又は他の生物学
的体液に含まれるα−アミラーゼを測定するためのα−
アミラーゼ測定用試薬として有用である。
【0003】これまで知られているα−アミラーゼ測定
用試薬のうちオリゴ糖の配糖体としては、例えばパラニ
トロフェノールがα位に結合したオリゴ糖(特開昭53
−12831、特開昭54−51892)又はハロゲン
化フェニル基の結合したオリゴ糖(特開昭56−359
98)等が知られている。なお特開昭53−12831
号においては、フェニル基がマルトペンタオシドの還元
性末端に置換したものが示されているが、詳細な説明に
よると、フェニル基の結合状態はマルトペンタオシドの
還元性末端におけるα−結合に限られており、置換フェ
ニル基としてはパラニトロフェニル基が示されているに
すぎない。これら公知の基質を用いてα−アミラーゼを
測定すると、前者の基質では、オリゴ糖が4個以下の短
鎖の場合にはα−アミラーゼの作用が緩慢であり、オリ
ゴ糖が5個で置換フェニル基がα配位の基質及びオリゴ
糖6以上のものでは、基質分子中で2か所以上のα−グ
ルコシド結合が切断される。このことは、α−アミラー
ゼと基質との反応により生じた生成物がさらに該酵素の
基質として作用を受けることを意味し、したがって該反
応の化学量論が成立しないことになり、レイトアッセイ
法には好ましい基質といえない。また後者の基質を用い
た場合には、体液中に投与したフェノール誘導体等の治
療薬物により測定値が影響を受けやすく、またレイトア
ッセイも著しく困難となる等の欠点がある。
用試薬のうちオリゴ糖の配糖体としては、例えばパラニ
トロフェノールがα位に結合したオリゴ糖(特開昭53
−12831、特開昭54−51892)又はハロゲン
化フェニル基の結合したオリゴ糖(特開昭56−359
98)等が知られている。なお特開昭53−12831
号においては、フェニル基がマルトペンタオシドの還元
性末端に置換したものが示されているが、詳細な説明に
よると、フェニル基の結合状態はマルトペンタオシドの
還元性末端におけるα−結合に限られており、置換フェ
ニル基としてはパラニトロフェニル基が示されているに
すぎない。これら公知の基質を用いてα−アミラーゼを
測定すると、前者の基質では、オリゴ糖が4個以下の短
鎖の場合にはα−アミラーゼの作用が緩慢であり、オリ
ゴ糖が5個で置換フェニル基がα配位の基質及びオリゴ
糖6以上のものでは、基質分子中で2か所以上のα−グ
ルコシド結合が切断される。このことは、α−アミラー
ゼと基質との反応により生じた生成物がさらに該酵素の
基質として作用を受けることを意味し、したがって該反
応の化学量論が成立しないことになり、レイトアッセイ
法には好ましい基質といえない。また後者の基質を用い
た場合には、体液中に投与したフェノール誘導体等の治
療薬物により測定値が影響を受けやすく、またレイトア
ッセイも著しく困難となる等の欠点がある。
【0004】そこで本発明者らは、上記欠点のないアミ
ラーゼ測定に好適な基質を求めて研究した結果、オリゴ
糖が5個でしかも置換フェニル基の結合状態がβ配位の
基質のみが、α−アミラーゼによって主として1か所の
α−1,4−グルコシド結合が切断されること、さらに
pH7.0付近で安定でしかも極大の分子吸光係数を持
つ2−クロロ−4−ニトロフェニル基を利用すると、特
に優れた測定結果が得られることを見出した。
ラーゼ測定に好適な基質を求めて研究した結果、オリゴ
糖が5個でしかも置換フェニル基の結合状態がβ配位の
基質のみが、α−アミラーゼによって主として1か所の
α−1,4−グルコシド結合が切断されること、さらに
pH7.0付近で安定でしかも極大の分子吸光係数を持
つ2−クロロ−4−ニトロフェニル基を利用すると、特
に優れた測定結果が得られることを見出した。
【0005】本発明は、次式
【化2】
で表わされ、融点198〜201℃、紫外部吸収スペク
トルにおいて295nm付近に吸収極大を有するβ−(
2−クロロ−4−ニトロフェニル)−マルトペンタオシ
ドである。
トルにおいて295nm付近に吸収極大を有するβ−(
2−クロロ−4−ニトロフェニル)−マルトペンタオシ
ドである。
【0006】本発明の化合物は、下記の方法で製造でき
る。次式
る。次式
【化3】
で表わされるマルトペンタオースに、次式(RCO)2
O ( III )(式中Rはアルキル基
を意味する)で表わされる有機酸無水物を作用させ、得
られる次式
O ( III )(式中Rはアルキル基
を意味する)で表わされる有機酸無水物を作用させ、得
られる次式
【化4】
(式中Rは前記の意味を有する)で表わされる化合物(
ヘプタデカアシルマルトペンタオース)を、ハロゲン化
して次式
ヘプタデカアシルマルトペンタオース)を、ハロゲン化
して次式
【化5】
(式中Xはハロゲンを、Rは前記の意味を有する)で表
わされる化合物(1−ハロゲノ1−デオキシヘキサデカ
アシルマルトペンタオース、別名ヘキサデカアシルマル
トペンタオシルハライド)となし、これに次式
わされる化合物(1−ハロゲノ1−デオキシヘキサデカ
アシルマルトペンタオース、別名ヘキサデカアシルマル
トペンタオシルハライド)となし、これに次式
【化6】
で表わされる2−クロロ−4−ニトロフェノールをその
有機塩の形で、又は有機塩基の存在下で作用させ、得ら
れる次式
有機塩の形で、又は有機塩基の存在下で作用させ、得ら
れる次式
【化7】
(式中Rは前記の意味する)で表わされるβ−(2−ク
ロロ−4−ニトロフェニル)−ヘキサデカアシルマルト
ペンタオシドを脱アシル化することにより式(1)の化
合物が得られる。
ロロ−4−ニトロフェニル)−ヘキサデカアシルマルト
ペンタオシドを脱アシル化することにより式(1)の化
合物が得られる。
【0007】特開昭56−35998号公報に示される
マルトオリゴ糖の還元性末端はアノマー性炭素であり、
従来この炭素上の置換基はα,β配位の混合物としての
み得られ、その単離精製はほとんど不可能と考えられて
いた。しかるに本発明の方法を採用することにより、2
−クロロ−4−ニトロフェニル基が還元性末端にβ−結
合したマルトペンタオシドを単離精製することが可能と
なった。
マルトオリゴ糖の還元性末端はアノマー性炭素であり、
従来この炭素上の置換基はα,β配位の混合物としての
み得られ、その単離精製はほとんど不可能と考えられて
いた。しかるに本発明の方法を採用することにより、2
−クロロ−4−ニトロフェニル基が還元性末端にβ−結
合したマルトペンタオシドを単離精製することが可能と
なった。
【0008】本発明の各反応を以下に説明する。
水酸基のアシル化反応:マルトペンタオース(2)のア
シル化は、公知方法、例えば反応物としての有機酸無水
物中で、好ましくは無水有機酸のアルカリ金属塩等の触
媒の存在下に加熱処理することによって実施する。 (RCO)2 Oで表わされる有機酸無水物は、例えば
無水酢酸、無水プロピオン酸、無水酪酸等である。触媒
としては、無水有機酸のナトリウム塩、カリウム塩等の
アルカリ金属塩、ピリジン、コリジン等が用いられる。 反応の調節又は反応後の目的物の精製を容易にするため
、反応溶液に非水溶媒例えばクロロホルム、ジクロロメ
タン等を添加することもできる。上記反応に使用される
有機酸無水物の量は、マルトペンタオースの重量の5〜
50倍、好ましくは7〜15倍であり、また触媒として
無水有機酸のアルカリ金属塩を使用する場合は、その量
はマルトペンタオースの重量の0.5〜3倍好ましくは
0.5〜1.5倍である。
シル化は、公知方法、例えば反応物としての有機酸無水
物中で、好ましくは無水有機酸のアルカリ金属塩等の触
媒の存在下に加熱処理することによって実施する。 (RCO)2 Oで表わされる有機酸無水物は、例えば
無水酢酸、無水プロピオン酸、無水酪酸等である。触媒
としては、無水有機酸のナトリウム塩、カリウム塩等の
アルカリ金属塩、ピリジン、コリジン等が用いられる。 反応の調節又は反応後の目的物の精製を容易にするため
、反応溶液に非水溶媒例えばクロロホルム、ジクロロメ
タン等を添加することもできる。上記反応に使用される
有機酸無水物の量は、マルトペンタオースの重量の5〜
50倍、好ましくは7〜15倍であり、また触媒として
無水有機酸のアルカリ金属塩を使用する場合は、その量
はマルトペンタオースの重量の0.5〜3倍好ましくは
0.5〜1.5倍である。
【0009】反応温度は普通は約90〜140℃、好ま
しくは100〜110℃である。反応時間は反応温度に
影響されるが、好ましい反応温度条件では約2ないし4
時間である。反応混合物を常法により0〜5℃に冷却し
、析出する固形物を分別し、水洗したのち乾燥する。 得られた固体生成物(ヘプタデカアシルマルトペンタオ
ースIV)は、エタノール、メタノール等のアルコール
類、メチルエチルケトン、アセトン等のケトン類、ジメ
チルエーテル、ジエチルエーテル等のエーテル類等の溶
媒を単独でもしくは組み合わせて使用して再結晶するこ
とができるが、該固体生成物を十分乾燥してそのまま次
の反応に使用することもできる。
しくは100〜110℃である。反応時間は反応温度に
影響されるが、好ましい反応温度条件では約2ないし4
時間である。反応混合物を常法により0〜5℃に冷却し
、析出する固形物を分別し、水洗したのち乾燥する。 得られた固体生成物(ヘプタデカアシルマルトペンタオ
ースIV)は、エタノール、メタノール等のアルコール
類、メチルエチルケトン、アセトン等のケトン類、ジメ
チルエーテル、ジエチルエーテル等のエーテル類等の溶
媒を単独でもしくは組み合わせて使用して再結晶するこ
とができるが、該固体生成物を十分乾燥してそのまま次
の反応に使用することもできる。
【0010】末端のハロゲン化:ヘプタデカアシルマル
トペンタオース(IV)のハロゲン化は、無水ハロゲン
化水素、塩化アルミニウムと五塩化リン、又は四塩化チ
タン、塩化第二スズ等で行われるが、生成物の収率とこ
れに関連する副反応の抑制および目的物の精製の容易さ
から、例えばクロロホルム、ジクロロメタン等の低極性
非水溶媒中で、無水4ハロゲン化チタンを用いて処理す
る方法が特に好ましい。なお無水4ハロゲン化チタンと
しては、4塩化チタン、4臭化チタン、4ヨウ化チタン
等を用いることがてき、ヘプタデカアシルマルトペンタ
オースに対する無水4ハロゲン化チタンの量は、通常は
1〜20倍モルでよく、3〜8倍モルが好ましい。
トペンタオース(IV)のハロゲン化は、無水ハロゲン
化水素、塩化アルミニウムと五塩化リン、又は四塩化チ
タン、塩化第二スズ等で行われるが、生成物の収率とこ
れに関連する副反応の抑制および目的物の精製の容易さ
から、例えばクロロホルム、ジクロロメタン等の低極性
非水溶媒中で、無水4ハロゲン化チタンを用いて処理す
る方法が特に好ましい。なお無水4ハロゲン化チタンと
しては、4塩化チタン、4臭化チタン、4ヨウ化チタン
等を用いることがてき、ヘプタデカアシルマルトペンタ
オースに対する無水4ハロゲン化チタンの量は、通常は
1〜20倍モルでよく、3〜8倍モルが好ましい。
【0011】このハロゲン化反応は、常圧で室温と使用
する溶媒の沸点との間で行われるが、溶媒の沸点で還流
しながら実施することが特に好ましい。反応時間は反応
温度に影響されるが、溶媒の沸点付近で反応させる場合
、通常は30分ないし1.0時間程度である。反応混合
物を常法により冷却し、これに有機溶媒例えばクロロホ
ルム、ジクロロメタン、酢酸エチル等を加え、有機溶媒
層を分取し、水、飽和重炭酸ソーダ水溶液等で数回洗浄
したのち乾燥し乾固する。
する溶媒の沸点との間で行われるが、溶媒の沸点で還流
しながら実施することが特に好ましい。反応時間は反応
温度に影響されるが、溶媒の沸点付近で反応させる場合
、通常は30分ないし1.0時間程度である。反応混合
物を常法により冷却し、これに有機溶媒例えばクロロホ
ルム、ジクロロメタン、酢酸エチル等を加え、有機溶媒
層を分取し、水、飽和重炭酸ソーダ水溶液等で数回洗浄
したのち乾燥し乾固する。
【0012】得られた固体生成物(V)は、シリカゲル
クロマトグラフィー等の常法により分離精製したのち、
エタノール、メタノール等のアルコール類、メチルエチ
ルケトン、アセトン等のケトン類、ジメチルエーテル、
ジエチルエーテル等のエーテル類等の溶媒を単独でもし
くは組み合わせて使用して再結晶することができるが、
乾固物のまま十分乾燥して次の反応に使用することがで
きる。
クロマトグラフィー等の常法により分離精製したのち、
エタノール、メタノール等のアルコール類、メチルエチ
ルケトン、アセトン等のケトン類、ジメチルエーテル、
ジエチルエーテル等のエーテル類等の溶媒を単独でもし
くは組み合わせて使用して再結晶することができるが、
乾固物のまま十分乾燥して次の反応に使用することがで
きる。
【0013】置換反応:前記の1−ハロゲンノ−1−デ
オキシヘキサデカアシルマルトペンタオース(V)のア
ノマー性ハロゲン基を、2−クロロ−4−ニトロフェノ
キシ基で置換して、β−(2−クロロ−4−ニトロフェ
ニル)−ヘキサデカアシルマルトペンタオシド(VI)
を得る。本反応に使用する2−クロロ−4−ニトロフェ
ノールの量は、1〜20倍モル好ましくは1.2〜6.
0倍モルである。
オキシヘキサデカアシルマルトペンタオース(V)のア
ノマー性ハロゲン基を、2−クロロ−4−ニトロフェノ
キシ基で置換して、β−(2−クロロ−4−ニトロフェ
ニル)−ヘキサデカアシルマルトペンタオシド(VI)
を得る。本反応に使用する2−クロロ−4−ニトロフェ
ノールの量は、1〜20倍モル好ましくは1.2〜6.
0倍モルである。
【0014】2−クロロ−4−ニトロフェノールは、本
反応を促進させるために反応溶媒中で塩となって解離し
ている必要があり、このため2−クロロ−4−ニトロフ
ェノールの有機塩、例えばトリエチルアミン塩、トリブ
チルアミン塩、ピリジン塩、ピコリン塩等が用いられる
。2種以上のこれらの塩を併用することもでき、また前
もって2−クロロ−4−ニトロフェノール塩を調製せず
に、反応溶液中に有機塩基を添加するか、又は有機塩基
を直接反応溶媒としてもよい。塩基の添加量は、反応が
終了するまで液性を中性ないしアルカリ性に保持するの
に必要な量が好ましい。
反応を促進させるために反応溶媒中で塩となって解離し
ている必要があり、このため2−クロロ−4−ニトロフ
ェノールの有機塩、例えばトリエチルアミン塩、トリブ
チルアミン塩、ピリジン塩、ピコリン塩等が用いられる
。2種以上のこれらの塩を併用することもでき、また前
もって2−クロロ−4−ニトロフェノール塩を調製せず
に、反応溶液中に有機塩基を添加するか、又は有機塩基
を直接反応溶媒としてもよい。塩基の添加量は、反応が
終了するまで液性を中性ないしアルカリ性に保持するの
に必要な量が好ましい。
【0015】本反応は、通常は溶媒の存在下に行うこと
が好ましい。溶媒としては、本反応に関与しないもので
あれば特に限定されないがヘキサデカアシルマルトペン
タオシルハライド及び2−クロロ−4−ニトロフェノー
ル又はその塩の溶解度が大きく、かつその反応性を高め
る溶媒が好ましく、例えば下記の溶媒が用いられる。ア
ミド例えばメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミド
等、ニトリル例えばアセトニトリル、ベンゾニトリル等
、ジメチルスルホキシド、有機塩基例えばトリアルキル
アミン、ピリジル、ルチジン等、芳香族炭化水素例えば
ベンゼン、トルエン等、ならびにこれらの2種以上の混
合液。
が好ましい。溶媒としては、本反応に関与しないもので
あれば特に限定されないがヘキサデカアシルマルトペン
タオシルハライド及び2−クロロ−4−ニトロフェノー
ル又はその塩の溶解度が大きく、かつその反応性を高め
る溶媒が好ましく、例えば下記の溶媒が用いられる。ア
ミド例えばメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミド
等、ニトリル例えばアセトニトリル、ベンゾニトリル等
、ジメチルスルホキシド、有機塩基例えばトリアルキル
アミン、ピリジル、ルチジン等、芳香族炭化水素例えば
ベンゼン、トルエン等、ならびにこれらの2種以上の混
合液。
【0016】本反応は一般に−5〜100℃程度で進行
するが、通常は10〜50℃の反応温度が好ましい。反
応時間は、反応助剤である塩基の種類ならびに反応温度
によって異なるが、通常は5〜20時間である。反応終
了後、反応混合物を氷水中に投入して析出する固形物を
濾取するか、又は適当な有機溶媒で目的物を抽出し、乾
燥後に乾固することにより、固形物を得る。化合物VI
が固形物として得られる。これを常法により、例えばア
ルミナ、シリカゲル等を用いるカラムクロマトグラフィ
、有機溶媒を用いる結晶化法などを適宜組合わせて施す
ことにより、精製できる。
するが、通常は10〜50℃の反応温度が好ましい。反
応時間は、反応助剤である塩基の種類ならびに反応温度
によって異なるが、通常は5〜20時間である。反応終
了後、反応混合物を氷水中に投入して析出する固形物を
濾取するか、又は適当な有機溶媒で目的物を抽出し、乾
燥後に乾固することにより、固形物を得る。化合物VI
が固形物として得られる。これを常法により、例えばア
ルミナ、シリカゲル等を用いるカラムクロマトグラフィ
、有機溶媒を用いる結晶化法などを適宜組合わせて施す
ことにより、精製できる。
【0017】脱アシル化反応:化合物VIからのアシル
基の除去は、公知方法例えば脱水したメタノール中のア
ルカリ金属アルコキシド又は無水アンモニアのメタノー
ル溶液等の触媒の存在下で実施することができる。アル
カリ金属アルコキシドとしては、例えばナトリウムメト
キシド、カリウムメトキシド、ナトリウムエトキシド、
カリウムエトキシド、カリウム−t−ブトキシド等を用
いることができる。
基の除去は、公知方法例えば脱水したメタノール中のア
ルカリ金属アルコキシド又は無水アンモニアのメタノー
ル溶液等の触媒の存在下で実施することができる。アル
カリ金属アルコキシドとしては、例えばナトリウムメト
キシド、カリウムメトキシド、ナトリウムエトキシド、
カリウムエトキシド、カリウム−t−ブトキシド等を用
いることができる。
【0018】反応終了後の目的物の精製を容易にするた
め、脱水メタノールにクロロホルム、ジクロロメタン等
の低極性非水溶媒を添加して反応することは好ましい。 添加する低極性非水溶液は、脱アシル化反応を阻害せず
、生成した2−クロロ−4−ニトロフェニル−マルトペ
ンタオシドが反応系から析出することが必要であるため
、その量は溶媒によって異なるが、使用する脱水メタノ
ールの量の0.5〜2倍が好ましい。
め、脱水メタノールにクロロホルム、ジクロロメタン等
の低極性非水溶媒を添加して反応することは好ましい。 添加する低極性非水溶液は、脱アシル化反応を阻害せず
、生成した2−クロロ−4−ニトロフェニル−マルトペ
ンタオシドが反応系から析出することが必要であるため
、その量は溶媒によって異なるが、使用する脱水メタノ
ールの量の0.5〜2倍が好ましい。
【0019】脱アシル化反応は、0〜30℃の温度で6
〜24時間以内で終了する。脱水メタノール単独溶媒の
反応系では、反応終了後に減圧下でメタノールを留去し
、得られる固形物を酸性のイオン交換樹脂又は無機酸を
用いて混在する塩基性物質を中和処理したのち、薄層ク
ロマトグラフィ、カラムクロマトグラフィ等により化合
物Iを精製する。低極性溶媒を添加した反応系の場合は
、目的物が反応液中から析出するので、これを濾取し、
分離精製工程にかけることができる。
〜24時間以内で終了する。脱水メタノール単独溶媒の
反応系では、反応終了後に減圧下でメタノールを留去し
、得られる固形物を酸性のイオン交換樹脂又は無機酸を
用いて混在する塩基性物質を中和処理したのち、薄層ク
ロマトグラフィ、カラムクロマトグラフィ等により化合
物Iを精製する。低極性溶媒を添加した反応系の場合は
、目的物が反応液中から析出するので、これを濾取し、
分離精製工程にかけることができる。
【0020】以上のようにして得た当該基質を使用し、
α−アミラーゼ活性を測定する場合、次の様な利点を有
する。 (1)当該基質はオリゴ糖が5個であり、置換フェニル
基である2−クロロ−4−ニトロフェニル基の結合状態
がβ配位であるため、当該基質分子中でα−アミラーゼ
により切断されるα−1,4−グルコシド結合は、1箇
所のみであり、かつこの切断箇所はヒト体液中αアミラ
ーゼの大部分を占める膵アミラーゼおよび唾液アミラー
ゼで同一であるため、α−アミラーゼ反応を化学量論的
に検出することができる。この基質を使用してα−アミ
ラーゼを測定すると、理論値と測定値が一致し、従来法
と比べて測定系の信頼性は格段に向上する。
α−アミラーゼ活性を測定する場合、次の様な利点を有
する。 (1)当該基質はオリゴ糖が5個であり、置換フェニル
基である2−クロロ−4−ニトロフェニル基の結合状態
がβ配位であるため、当該基質分子中でα−アミラーゼ
により切断されるα−1,4−グルコシド結合は、1箇
所のみであり、かつこの切断箇所はヒト体液中αアミラ
ーゼの大部分を占める膵アミラーゼおよび唾液アミラー
ゼで同一であるため、α−アミラーゼ反応を化学量論的
に検出することができる。この基質を使用してα−アミ
ラーゼを測定すると、理論値と測定値が一致し、従来法
と比べて測定系の信頼性は格段に向上する。
【0021】(2)当該基質は至適条件下で、α−アミ
ラーゼの作用により特異的かつ迅速な反応速度で加水分
解される。また比色定量される発色団2−クロロ−4−
ニトロフェノールは吸収ピークにおける分子吸光係数が
大きく極めて感度よく測定できる。
ラーゼの作用により特異的かつ迅速な反応速度で加水分
解される。また比色定量される発色団2−クロロ−4−
ニトロフェノールは吸収ピークにおける分子吸光係数が
大きく極めて感度よく測定できる。
【0022】本発明のβ−(2−クロロ−4−ニトロフ
ェニル)−マルトペンタオシドは、血清又は他の生物学
的体液に含まれるα−アミラーゼの測定用試薬として極
めて有用である。
ェニル)−マルトペンタオシドは、血清又は他の生物学
的体液に含まれるα−アミラーゼの測定用試薬として極
めて有用である。
【0023】
【実施例1】(A)ヘプタデカアセチルマルトペンタオ
ースの製造 マルトペンタオース20g(24mモル)、無水酢酸2
62ml及び無水酢酸ナトリウム19.8gの混合物を
103℃で4時間撹拌し、さらに氷水中に注入して一夜
撹拌したのち、粘着物を氷水中ですりつぶし、濾取する
。 得られた結晶をエタノールから再結晶し、32.6gの
ヘプタデカアセチルマルトペンタオースが得られる(2
1mモル、87.5%)。
ースの製造 マルトペンタオース20g(24mモル)、無水酢酸2
62ml及び無水酢酸ナトリウム19.8gの混合物を
103℃で4時間撹拌し、さらに氷水中に注入して一夜
撹拌したのち、粘着物を氷水中ですりつぶし、濾取する
。 得られた結晶をエタノールから再結晶し、32.6gの
ヘプタデカアセチルマルトペンタオースが得られる(2
1mモル、87.5%)。
【0024】融点:125〜130℃
赤外線スペクトルcm−1:1740、1370、12
30、1030 薄層クロマトグラフィ(シリカゲル、展開溶媒:ベンゼ
ン/酢酸エチル=2: 3):Rf=0.47 元素分析値:C64H86O43として
30、1030 薄層クロマトグラフィ(シリカゲル、展開溶媒:ベンゼ
ン/酢酸エチル=2: 3):Rf=0.47 元素分析値:C64H86O43として
【0025】(
B)ヘキサデカアセチルマルトペンタオシルクロリドの
製造 (A)で得られたヘプタデカアセチルマルトペンタオー
ス5g(3.2mモル)、クロロホルム25mlおよび
四塩化チタンの混合物を、1時間還流撹拌し、反応液に
クロロホルム300mlを加え、水100mlで3回洗
浄したのちクロロホルム層に無水硫酸ナトリウムを加え
、脱水したのち濃縮乾固する。得られた粗生成物4.8
gをシリカゲルカラムクロマトグラフィにより精製し、
ベンゼン−酢酸エチル混液(容量比4:3)で溶出した
区分をメタノールから再結晶すると、3.2gのヘキサ
デカアセチルマルトペンタオシルクロリドが得られる(
2.1mモル、65%)。
B)ヘキサデカアセチルマルトペンタオシルクロリドの
製造 (A)で得られたヘプタデカアセチルマルトペンタオー
ス5g(3.2mモル)、クロロホルム25mlおよび
四塩化チタンの混合物を、1時間還流撹拌し、反応液に
クロロホルム300mlを加え、水100mlで3回洗
浄したのちクロロホルム層に無水硫酸ナトリウムを加え
、脱水したのち濃縮乾固する。得られた粗生成物4.8
gをシリカゲルカラムクロマトグラフィにより精製し、
ベンゼン−酢酸エチル混液(容量比4:3)で溶出した
区分をメタノールから再結晶すると、3.2gのヘキサ
デカアセチルマルトペンタオシルクロリドが得られる(
2.1mモル、65%)。
【0026】融点:175〜132℃
赤外線吸収スペクトルcm−1:1750、1370、
1250、1040、760 薄層クロマトグラフィ(シリカゲル、展開溶媒:ベンゼ
ン/酢酸エチル=2:3):Rf=0.50元素分析値
:C62H83O41Clとして
1250、1040、760 薄層クロマトグラフィ(シリカゲル、展開溶媒:ベンゼ
ン/酢酸エチル=2:3):Rf=0.50元素分析値
:C62H83O41Clとして
【0027】(C)β
−(2−クロロ−4−ニトロフェニル)−ヘキサデカア
セチルマルトペンタオシドの製造(B)で得られた化合
物3g(2mモル)、2−クロロ−4−ニトロフェノー
ル1.8g(10mモル)を脱水ベンゼン30mlに溶
解し、トリエチルアミン2.5mlを添加し、2時間撹
拌しながら還流加熱する。次いで混合物を約100ml
の氷水中に注ぎ、200mlの酢酸エチルで抽出する。 抽出液を飽和重炭酸ナトリウム水溶液及び水で洗浄し、
有機溶媒層を無水硫酸ナトリウムで脱水したのち、減圧
下に乾固すると3.1gの粗生成物が得られる。この生
成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィにより精製し
、ベンゼン−酢酸エチル混液(容量比4:3)で溶出し
た分画区分をメタノールから再結晶すると、β−(2−
クロロ−4−ニトロフェニル)−ヘキサデカアセチルマ
ルトペンタオシド1.4g(0.8mモル、40%)が
得られる。
−(2−クロロ−4−ニトロフェニル)−ヘキサデカア
セチルマルトペンタオシドの製造(B)で得られた化合
物3g(2mモル)、2−クロロ−4−ニトロフェノー
ル1.8g(10mモル)を脱水ベンゼン30mlに溶
解し、トリエチルアミン2.5mlを添加し、2時間撹
拌しながら還流加熱する。次いで混合物を約100ml
の氷水中に注ぎ、200mlの酢酸エチルで抽出する。 抽出液を飽和重炭酸ナトリウム水溶液及び水で洗浄し、
有機溶媒層を無水硫酸ナトリウムで脱水したのち、減圧
下に乾固すると3.1gの粗生成物が得られる。この生
成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィにより精製し
、ベンゼン−酢酸エチル混液(容量比4:3)で溶出し
た分画区分をメタノールから再結晶すると、β−(2−
クロロ−4−ニトロフェニル)−ヘキサデカアセチルマ
ルトペンタオシド1.4g(0.8mモル、40%)が
得られる。
【0028】融点:123〜128℃
紫外部吸収スペクトル:吸収極大波長〔λmax 〕=
283nm 分子吸光係数(ε)=8900(CHCl3 )赤外線
吸収スペクトルcm−1:1740、1580、152
0、1480、1360、1200、1020薄層クロ
マトグラフィ(シリカゲル、展開溶媒:ベンゼン/酢酸
エチル=2:3):Rf=0.50元素分析値:C68
H86O44NClとして
283nm 分子吸光係数(ε)=8900(CHCl3 )赤外線
吸収スペクトルcm−1:1740、1580、152
0、1480、1360、1200、1020薄層クロ
マトグラフィ(シリカゲル、展開溶媒:ベンゼン/酢酸
エチル=2:3):Rf=0.50元素分析値:C68
H86O44NClとして
【0029】(D)β−(2
−クロロ−4−ニトロフェニル)−マルトペンタオシド
の製造方法(C)で得られた化合物1g(0.6mモル
)を脱水メタノール7ml及びジクロロメタン7mlの
混液に溶解し、室温で撹拌しながら0.5Nナトリウム
メトキサイド1.0mlを添加し、16時間反応させる
。反応終了後、析出した沈殿を濾取し、脱水メタノール
−ジクロロメタン混液(1:1)で洗浄したのち、減圧
下に乾固すると、粗β−(2−クロロ−4−ニトロフェ
ニル)−マルトペンタオシド0.55gが得られる(0
.56mモル、93%)この粗生成物0.55gを水を
用いたバイオゲルP2のカラムクロマトグラフィにより
精製し、中央留分より次の理化学的性質を有するβ−(
2−クロロ−4−ニトロフェニル)−マルトペンタオシ
ドが0.41g得られる(0.42mモル、70%)。
−クロロ−4−ニトロフェニル)−マルトペンタオシド
の製造方法(C)で得られた化合物1g(0.6mモル
)を脱水メタノール7ml及びジクロロメタン7mlの
混液に溶解し、室温で撹拌しながら0.5Nナトリウム
メトキサイド1.0mlを添加し、16時間反応させる
。反応終了後、析出した沈殿を濾取し、脱水メタノール
−ジクロロメタン混液(1:1)で洗浄したのち、減圧
下に乾固すると、粗β−(2−クロロ−4−ニトロフェ
ニル)−マルトペンタオシド0.55gが得られる(0
.56mモル、93%)この粗生成物0.55gを水を
用いたバイオゲルP2のカラムクロマトグラフィにより
精製し、中央留分より次の理化学的性質を有するβ−(
2−クロロ−4−ニトロフェニル)−マルトペンタオシ
ドが0.41g得られる(0.42mモル、70%)。
【0030】融点:198〜201℃
紫外部吸収スペクトル:吸収極大波長〔λmax 〕=
295nm 分子吸光係数(ε)=8100(H2 O)赤外線吸収
スペクトルcm−1:3400、2920、1580、
1520、1480、1350、1270、1020 核磁気共鳴スペクトル(250MHz)ppm8.31
(d,J,=3Hz,1H) 8.18(dd,J=3Hz,J=9Hz,1H)7.
43(d,J=9Hz,1H) 5.34〜5.57(m,9H) 3.92〜3.03(m,26H) 本物質の2−クロロ−4−ニトロフェニル基の配位がβ
位であることは、α−グルコシダーゼ及びβ−グルコシ
ダーゼの両酵素を用いて確認した。
295nm 分子吸光係数(ε)=8100(H2 O)赤外線吸収
スペクトルcm−1:3400、2920、1580、
1520、1480、1350、1270、1020 核磁気共鳴スペクトル(250MHz)ppm8.31
(d,J,=3Hz,1H) 8.18(dd,J=3Hz,J=9Hz,1H)7.
43(d,J=9Hz,1H) 5.34〜5.57(m,9H) 3.92〜3.03(m,26H) 本物質の2−クロロ−4−ニトロフェニル基の配位がβ
位であることは、α−グルコシダーゼ及びβ−グルコシ
ダーゼの両酵素を用いて確認した。
【0031】
【実験例1】下記の試薬を用い、ヒト膵臓アミラーゼ(
以下P−アミラーゼと呼ぶ)の反応性を測定した。 試薬A(基質液):β−(2−クロロ−4−ニトロフェ
ニル)−マルトペンタオシド(以下G5β−CNPと呼
ぶ)及びα−(4−ニトロフェニル)−マルトペンタオ
シド(以下G5α−PNPと呼ぶ)の各基質を0.1M
リン酸緩衝液(pH7.0)にて、それぞれ6mMとな
るように調製する。 試薬B(反応停止液):1Mリン酸及びアセトニトリル
試料:P−アミラーゼを500IU/lに調製する。 HPLC測定条件 移動相:10%アセトニトリル カラム:TSK−ゲルNH2 −60(東ソー社製)流
速:0.7ml/分 検出:UV計
以下P−アミラーゼと呼ぶ)の反応性を測定した。 試薬A(基質液):β−(2−クロロ−4−ニトロフェ
ニル)−マルトペンタオシド(以下G5β−CNPと呼
ぶ)及びα−(4−ニトロフェニル)−マルトペンタオ
シド(以下G5α−PNPと呼ぶ)の各基質を0.1M
リン酸緩衝液(pH7.0)にて、それぞれ6mMとな
るように調製する。 試薬B(反応停止液):1Mリン酸及びアセトニトリル
試料:P−アミラーゼを500IU/lに調製する。 HPLC測定条件 移動相:10%アセトニトリル カラム:TSK−ゲルNH2 −60(東ソー社製)流
速:0.7ml/分 検出:UV計
【0032】測定操作:試薬A0.6mlを37℃で5
分間予備加温する。次いでP−アミラーゼ0.02ml
を加え、60分経過後に1Mリン酸0.1ml及びアセ
トリニトリル0.6mlを加え反応を停止させる。この
反応液15μlを試料としてアミラーゼの反応性をHP
LCにより測定した。残存基質量、生成するG2α−P
NP、G3α−PNP、G2β−CNP及びG3β−C
NPの量を下記表に示す。
分間予備加温する。次いでP−アミラーゼ0.02ml
を加え、60分経過後に1Mリン酸0.1ml及びアセ
トリニトリル0.6mlを加え反応を停止させる。この
反応液15μlを試料としてアミラーゼの反応性をHP
LCにより測定した。残存基質量、生成するG2α−P
NP、G3α−PNP、G2β−CNP及びG3β−C
NPの量を下記表に示す。
【0033】本発明のG5β−CNP及び比較例のG5
α−PNPに対するP−アミラーゼの作用部位を比較す
ると、P−アミラーゼはG5β−CNPでは、還元末端
から2番目のグルコシド結合(G2−G3間)に対して
特異的に作用する。一方、P−アミラーゼはG5α−P
NPでは、G2−G3間への特異性が低く、これより糖
鎖の長いG3−G4間に対する反応性が高い。
α−PNPに対するP−アミラーゼの作用部位を比較す
ると、P−アミラーゼはG5β−CNPでは、還元末端
から2番目のグルコシド結合(G2−G3間)に対して
特異的に作用する。一方、P−アミラーゼはG5α−P
NPでは、G2−G3間への特異性が低く、これより糖
鎖の長いG3−G4間に対する反応性が高い。
【0034】
【表1】
【0035】
【実験例2】下記の試薬を用い、α−グルコシダーゼの
反応性を測定した。 試薬A:0.1Mリン酸緩衝液(pH7.0)にグルコ
ースオキシダーゼ50U/ml、N−エチル−N−(2
−ヒドロキシ−3−プロピル)−3,5−ジメトキシア
ニリンナトリウム(DAOS)1mM、4−アミノアン
チピリンmM、パーオキシダーゼ3U/mlを加えて調
製する。 試薬B(基質):p−ニトロフェニル−α・D・G1〜
G5又はG2〜G5各20mMを0.1Mリン酸緩衝液
(pH7.0)に溶解する(G:グルコース単位)。 試薬C:0.5Mくえん酸 試料:α−グルコシダーゼ0.01〜2U/ml
反応性を測定した。 試薬A:0.1Mリン酸緩衝液(pH7.0)にグルコ
ースオキシダーゼ50U/ml、N−エチル−N−(2
−ヒドロキシ−3−プロピル)−3,5−ジメトキシア
ニリンナトリウム(DAOS)1mM、4−アミノアン
チピリンmM、パーオキシダーゼ3U/mlを加えて調
製する。 試薬B(基質):p−ニトロフェニル−α・D・G1〜
G5又はG2〜G5各20mMを0.1Mリン酸緩衝液
(pH7.0)に溶解する(G:グルコース単位)。 試薬C:0.5Mくえん酸 試料:α−グルコシダーゼ0.01〜2U/ml
【00
36】測定法:試料A1.0mlと試薬B0.5mlを
混合し、87℃で5分間予備加温する。次いで試料0.
5mlを加え、15分経過後、試薬C2.0mlを加え
て反応を停止させ、590nmにおける吸光度を測定し
、G2(マルトース)で得られた値を100%として、
各マルトオリゴ糖及びp−ニトロフェニルマルトオリゴ
等の値を算出した。
36】測定法:試料A1.0mlと試薬B0.5mlを
混合し、87℃で5分間予備加温する。次いで試料0.
5mlを加え、15分経過後、試薬C2.0mlを加え
て反応を停止させ、590nmにおける吸光度を測定し
、G2(マルトース)で得られた値を100%として、
各マルトオリゴ糖及びp−ニトロフェニルマルトオリゴ
等の値を算出した。
【0037】その結果を図1に示す。図1はα−グルコ
シダーゼの種々の基質に対する反応性と基質重合度との
関係を示すグラフであって、図中の実線は4−ニトロフ
ェニルマルトオリゴ糖、点線はマルトオリゴ糖を基質と
した場合である。
シダーゼの種々の基質に対する反応性と基質重合度との
関係を示すグラフであって、図中の実線は4−ニトロフ
ェニルマルトオリゴ糖、点線はマルトオリゴ糖を基質と
した場合である。
【0038】アミラーゼ測定基質の重要な条件の1つと
して、アミラーゼの作用部位が1カ所であること、また
もし作用部位が2カ所以上であったとしても、生成した
反応生成物のいずれに対しても共役酵素(α−グルコシ
ダーゼ)が同一の反応性を示し、完全に測定系に導ける
ことが必要である(第2回臨床化学夏期セミナープログ
ラム資料集)。本願発明の基質はアミラーゼによる反応
生成物がほとんどG2β−CNP単一であるのに対して
、比較例の基質(G5α−PNP)はそれがG2α−P
NPとG3α−PNPの混合物となる。
して、アミラーゼの作用部位が1カ所であること、また
もし作用部位が2カ所以上であったとしても、生成した
反応生成物のいずれに対しても共役酵素(α−グルコシ
ダーゼ)が同一の反応性を示し、完全に測定系に導ける
ことが必要である(第2回臨床化学夏期セミナープログ
ラム資料集)。本願発明の基質はアミラーゼによる反応
生成物がほとんどG2β−CNP単一であるのに対して
、比較例の基質(G5α−PNP)はそれがG2α−P
NPとG3α−PNPの混合物となる。
【0039】図1に示すようにα−グルコシダーゼによ
るG3α−PNPとG2α−PNPに対する反応性は約
4倍も異なり、G3α−PNPが多量に生成すると完全
に測定系に導くのに障害となる。
るG3α−PNPとG2α−PNPに対する反応性は約
4倍も異なり、G3α−PNPが多量に生成すると完全
に測定系に導くのに障害となる。
図1はα−グルコシダーゼの種々の基質に対する反応性
と基質重合度との関係を示すグラフである。
と基質重合度との関係を示すグラフである。
【化8】
Claims (1)
- 【請求項1】 次式 【化1】 で表わされ、融点198〜201℃、紫外部吸収スペク
トルにおいて295nm付近に吸収極大を有するβ−(
2−クロロ−4−ニトロフェニル)−マルトペンタオシ
ド。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP998691A JPH04305594A (ja) | 1991-01-04 | 1991-01-04 | β−(2−クロロ−4−ニトロフェニル)−マルトペンタオシド |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP998691A JPH04305594A (ja) | 1991-01-04 | 1991-01-04 | β−(2−クロロ−4−ニトロフェニル)−マルトペンタオシド |
Related Parent Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP18582983A Division JPS6078994A (ja) | 1983-10-06 | 1983-10-06 | β−(2−クロロ−4−ニトロフエニル)−マルトペンタオシド及びその製造法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPH04305594A true JPH04305594A (ja) | 1992-10-28 |
JPH0541636B2 JPH0541636B2 (ja) | 1993-06-24 |
Family
ID=11735206
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP998691A Granted JPH04305594A (ja) | 1991-01-04 | 1991-01-04 | β−(2−クロロ−4−ニトロフェニル)−マルトペンタオシド |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JPH04305594A (ja) |
Families Citing this family (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US11039620B2 (en) | 2014-02-19 | 2021-06-22 | Corning Incorporated | Antimicrobial glass compositions, glasses and polymeric articles incorporating the same |
US9622483B2 (en) | 2014-02-19 | 2017-04-18 | Corning Incorporated | Antimicrobial glass compositions, glasses and polymeric articles incorporating the same |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS602199A (ja) * | 1983-06-21 | 1985-01-08 | Toyobo Co Ltd | α−アミラ−ゼ活性測定法 |
-
1991
- 1991-01-04 JP JP998691A patent/JPH04305594A/ja active Granted
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS602199A (ja) * | 1983-06-21 | 1985-01-08 | Toyobo Co Ltd | α−アミラ−ゼ活性測定法 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JPH0541636B2 (ja) | 1993-06-24 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US4709020A (en) | Heptaose compounds and preparation thereof | |
US5320954A (en) | Aromatic substituted glycoside | |
JPH03175999A (ja) | β―ガラクトシダーゼのための基質 | |
McCleary et al. | Measurement of amyloglucosidase using p-nitrophenyl β-maltoside as substrate | |
JPH04305594A (ja) | β−(2−クロロ−4−ニトロフェニル)−マルトペンタオシド | |
Tsou et al. | Synthesis of Phenyl β-D-Glucopyruronoside1 | |
JPH026760B2 (ja) | ||
US4526784A (en) | Amino-cyclitol derivatives and medicaments containing them | |
US5254677A (en) | β-galactosidase substrates for cedia | |
EP0557021B1 (en) | Oligosaccharide derivatives suitable for alpha-amylase determination | |
JP3029925B2 (ja) | マルトオリゴ糖誘導体およびその製造法 | |
JPH06179690A (ja) | フコース誘導体、その製造方法、このものを有効成分とするα−L−フコシダーゼ活性測定用試薬及びこれを用いたα−L−フコシダーゼ活性の測定方法 | |
Tokutake et al. | Syntheses of subtractively modified 2-chloro-4-nitrophenyl β-maltopentaosides and their application to the differential assay of human alpha-amylases | |
JP3016099B2 (ja) | オリゴ糖化合物およびその製法 | |
JP3070709B2 (ja) | マルトオリゴ糖誘導体の製造法 | |
JPH05170785A (ja) | オリゴ糖誘導体の製造 | |
EP0346912B1 (en) | Sugar ester derivatives, reagents for measurement of hydrolase activity and methods for measurement of hydrolase activity | |
JPS63214193A (ja) | 6−グルコシルマルトオリゴ糖誘導体の製法およびそれを用いるα−アミラ−ゼ活性測定法 | |
JP4197750B2 (ja) | マルトオリゴ糖誘導体の製造方法 | |
JPH02258794A (ja) | 色素を生成し得る配糖体およびその製法 | |
JPH05161498A (ja) | 非還元末端修飾フェニル化マルトテトラオース誘導体の製造法 | |
Madson et al. | Methyl 6-S-Methyl-6-thiohexopyranosides. Effect of the Methylthio Group at C-6 on Rates of Enzymic and Nonenzymic Hydrolysis1 | |
JPH09322798A (ja) | α−アミラーゼ活性の測定方法及び測定試薬 | |
JPH0220567A (ja) | アゾ色素配糖体およびその製法 | |
JPH04211390A (ja) | β−(2−クロロ−4−ニトロフェニル)−マルトペンタオシドの製造法 |