JPH04270261A - イソプレノイドホスホリパーゼ▲ａ２▼阻害剤およびそれを包含する製剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明はホスホリパーゼＡ２（Ｐ
ＬＡ２）阻害活性を示すレチノイド誘導体およびこれら
の化合物を包含する製薬組成物に関する。同じく、哺乳
動物におけるＰＬＡ２の阻害方法に係る。

【０００２】

【従来の技術】ホスホリパーゼは膜リン脂質を加水分解
して遊離脂肪酸を放出させることを接触する酵素である
。哺乳動物組織において、ホスホリパーゼＡ２（ＰＬＡ
２）は、特にリン脂質のＳｎ−２−アシル結合を開裂し
て遊離のアラキドン酸およびリゾリン脂質を生成するカ
ルシウム依存性酸素である。〔ファン・デン・ボッシュ
・Ｈ（Ｖａｎ　　ｄｅｎ　　Ｂｏｓｃｈ　　Ｈ）、ビオ
ケム・ビオフィズ・アクタ（Ｂｉｏｃｈｅｍ　　Ｂｉｏ
ｐｈｙｓ　　Ａｃｔａ）、６０４巻、１９１−２４６頁
（１９８０年）〕。この反応の双方の生成物は炎症メデ
ィエーターの生合成の出発点としての働きをする。アラ
キドン酸はシクロオキシゲナーゼおよびリポオキシゲナ
ーゼ経路によってプロ炎症性プロスタグランジンおよび
ロイコトリエンに変換される。〔ヒグス・ＧＡ（Ｈｉｇ
ｇｓ　　ＧＡ）およびベイン・ＪＲ（ＶａｎｅＪＲ）、
Ｂｒ・メド・ブル（Ｂｒ　　Ｍｅｄ　　Ｂｕｌｌ）、３
９巻、２６５頁（１９８３年）〕。リゾリン脂質はある
種の細胞タイプにより血小板活性化因子（ＰＡＦ）、強
力な炎症メディエーターを生成するのに利用される。〔
チルトン・ＦＨ（Ｃｈｉｌｔｏｎ　　ＦＨ）等、Ｊ．ビ
オル・ケム（Ｊ．Ｂｉｏｌ　　Ｃｈｅｍ）、２５７巻、
５４０２頁（１９８２年）〕。

【０００３】多くの非ステロイド系抗炎症剤例えばイン
ドメタシンはシクロオキシゲナーゼ反応を阻害し、それ
でアラキドン酸からのプロスタグランジンの形成を阻止
する。リポキシゲナーゼ阻害剤である多くの化合物も見
い出されている。〔ゴードン・ジョーンズ（Ｇｏｒｄｏ
ｎ　　Ｊｏｎｅｓ）等、Ｊ．メド・ケム、２９巻、１５
０４−１５１１頁（１９８６年）〕。〔マーディン・Ｍ
（Ｍａｒｄｉｎ　　Ｍ）およびブッセ・ＷＤ（Ｂｕｓｓ
ｅ　　ＷＤ）、ロイコトリエンズ・アンド・アザー・リ
ポキシゲナーゼ・プロダクツ（Ｌｅｕｋｏｔｒｉｅｎｅ
ｓ　　ａｎｄｏｔｈｅｒ　　Ｌｉｐｏｘｙｇｅｎａｓｅ
　　Ｐｒｏｄｕｃｔｓ）、Ｐ．Ｊ．パイパー（Ｐ．Ｊ．
Ｐｉｐｅｒ）編、プロスタグランジン・シリーズ（Ｐｒ
ｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎ　　Ｓｅｒｉｅｓ）、３、２６
３−２７４頁、チチエスター・リサーチ・スタディス・
プレス（Ｃｈｉｃｈｅｓｔｅｒ　　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　
　ＳｔｕｄｉｅｓＰｒｅｓｓ）〕。これらの化合物はロ
イコトリエンの形成を阻止し、また抗炎症作用を有する
ことがわかっている。更に、数種の化合物が二重リポキ
シゲナーゼ／シクロオキシゲナーゼ阻害剤であることが
報告されている。〔サモン・ＪＡ（Ｓａｌｍｏｎ　　Ｊ
Ａ）、シモンズ・ＰＭ（Ｓｉｍｍｏｎｓ　　ＰＭ）およ
びモンカダ・ＳＨ（Ｍｏｎｃａｄａ　　ＳＨ）、Ｊ・フ
ラルム・ファルマク（Ｊ．Ｐｈａｒｍ　　Ｐｈａｒｍａ
ｃ）、３５巻、８０８頁（１９８３年）〕。〔ボネイ・
ＲＪ（Ｂｏｎｎｅｙ　　ＲＪ）等、ビオケム・フアルマ
コル（Ｂｉｏｃｈｅｍ　　Ｐｈａｒｍａｃｏｌ）、３６
巻、２２号、２８８５−２８９１頁（１９８７年）〕。 これらの化合物は、そのアラキドン酸カスケードの更に
完全な阻止により、更に有効な抗炎症剤であると考えら
れる。ホスホリパーゼＡ２の阻害剤に二重リポキシゲナ
ーゼ／シクロオキシゲナーゼ阻害剤と同じメディエータ
ーの生成を減少させるものと予想される。しかし、この
減少はアラキドン酸放出の阻害を経て達成される。更に
、ＰＬＡ２阻害はＰＡＦ生成の減少を結果として生じる
。その結果、ＰＬＡ２活性阻害は炎症性障害の治療のた
めの新しい薬剤の開発のために魅力のあるアプローチを
示している。

【０００４】様々のレチノイドおよび関連レチノイン酸
誘導体が当該分野で知られている。すなわち、キャロル
（Ｃａｒｒｏｌｌ）等の米国特許第４，５６８，７５７
号には立体配置が固定されたレチノイドが開示されてい
る。米国特許第４，１２６，６９３号および同第４，０
５５，６５９号〔ガンダー（Ｇａｎｄｅｒ）等〕、なら
びに米国特許第４，１９４，００７号にはトランス−レ
チノイン酸のエステルおよびアミドならびにその誘導体
である種々のレチノイドが一般的に開示されている。こ
れらの特許では、その中に記載されている種々のレチノ
イドに一般的に「ビタミンＡ型活性」に帰すものとし、
そして特に皮膚疾患または異常状態、異常な角質化、ア
クネ等の治療のためのこれらの化合物の用途、ならびに
日焼け止め剤としてのそれらの用途が記載されている。

【０００５】様々のレチノイドおよびレチノイド中間体
の製造を開示している更に他の技術文献がある。米国特
許第２，６６２，９１４号には、１４位にカルボン酸置
換分を有するレチノイン酸誘導体が開示され、一方レウ
イン（Ｌｅｗｉｎ）等は〔ジャーナル・オブ・オーガニ
ック・ケミストリー（Ｊｏｕｒｎａｌ　　ｏｆ　　Ｏｒ
ｇａｎｉｃ　　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）、４８巻、２２２
頁（１９８３年）およびジャーナル・オブ・アメリカン
・ケミカル・ソサイエテイ（Ｊｏｕｒｎａｌ　　ｏｆＡ
ｍｅｒｉｃａｎ　　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　　Ｓｏｃｉｅｔ
ｙ）、１０３巻、２５２７頁（１９８１年）〕に種々の
レチノイドの合成を開示している。その他のレチノイド
およびＰＬＡ２阻害剤はＣ．フィードラー（Ｃ．Ｆｉｅ
ｄｌｅｒ）〔ナギイ（Ｎａｇｙ）等、エージェンツ・ア
ンド・アクションズ（Ａｇｅｎｔｓ　　ａｎｄＡｃｔｉ
ｏｎｓ）、４６巻、６２０−６２１頁（１９８５年）お
よび２７巻、３１３−３１５頁（１９８９年）〕；Ａ．
Ａ．ファウジイ（Ａ．Ａ．Ｆａｗｊｙ）等、エージェン
ツ・アンド・アクションズ、２５巻、３９４−４００頁
（１９８８年）〕；Ａ．Ｃ．ハングロウ（Ａ．Ｃ．Ｈａ
ｎｇｌｏｗ）等〔エージェンツ・アンド・アクションズ
、２７巻、３４７−３５０頁（１９８９年）〕およびＣ
．マルセロ（Ｃ．Ｍａｒｃｅｌｏ）等、〔クリン・レス
（Ｃｌｏｎ．Ｒｅｓ）、３４巻、７６６Ａ頁（１９８６
年）〕に述べられている。

【０００６】従って、本発明の目的は、ＰＬＡ２阻害特
性を有するレチノイド化合物、および炎症性疾患、例え
ば関節炎、炎症性腸障害および顕性の炎症を特徴とする
多くの関連症状の治療に有用な該化合物を包含する組成
物を提供するにある。

【０００７】

【発明の構成】本発明は構造式Ａ

【０００８】

【化４】 （式中、Ｒ１はＣＨ＝ＣＹ−Ｃ（ＣＨ３）＝ＣＨＸであ
り、ここでＸおよびＹは異っていて、そして各々は式Ｃ
Ｏ２Ｒ′または

【０００９】

【化５】 （式中、Ｒ′およびＲ″は独立してＨまたはＣ１−Ｃ６
のアルキルである）を有し、そしてＲ１はすべての可能
な幾何異性体を包含する〕を有する化合物が著しいＰＬ
Ａ２活性阻害を示し、そして顕著な抗炎症効果を奏する
知見に存する。この組の構造異性体およびその製薬上許
容し得る塩は局所適用のためのローション、クリームま
たはゲルの形態で製薬上許容しうる担体と組み合せるこ
とができるし、あるいはまた所望により内服用の錠剤形
態にまたはエリキシール剤として配合することもできる
。本発明の構造異性体の組には、以下の［化６］に記載
するとおり８種の別異の化合物が包含される。

【００１０】

【化６】 本発明の実施化に当り、これらの異性体は実質的に精製
された形態あるいは複数の異性体の混合物として使用す
ることができる。活性は適用毎に、また異性体毎に変る
ものと期待される。しかし、異性体はいずれも本発明で
関心のある抗炎症特性を有し、活性であるものと考えら
れ、それで単独もしくは組み合せで使用し得る。

【００１１】本発明の化合物は先行技術の合成操作に従
って製造することができ、これらの操作には米国特許第
４，５６８，７５７号に開示された操作が包含され、こ
の特許の内容を参考として本文中に挿入する。当業者に
は、その他の合成様式も想到することができるが、それ
自体では本発明の特徴を構成するものではない。典型的
な合成ルートには次のものが包含される。

【００１２】

【化７】 異性体混合物の製造 次の反応およびその次の操作は他に注記のない限り薄暗
い赤色光を備えた室内で実施した。カリウムｔ−ブトキ
サイド（７．８０ｇ、０．０６９モル）をＮ２下に炉で
乾燥した三つ口１０００ｍｌ丸底フラスコに入れた。無
水テラトヒドロフラン（３５０ｍｌ）を加え、そして混
合物を１０分間０℃に冷却した。無水テトラヒドロフラ
ン２００ｍｌ中の（２）の化合物（１１．７ｇ、０．０
４５モル）の溶液を滴加した。得られた赤色溶液を０℃
で１５分間かくはんした。無水テトラヒドロフラン２０
０ｍｌ中の（１）の化合物（９．７４ｇ、０．０４５モ
ル）の溶液を滴加した。この極めて暗色の溶液を１．５
時間０℃でかくはんし、次に３０℃の回転蒸発によりテ
トラヒドロフランを除去した。残渣を３Ｍ水酸化カリウ
ム／メタノール３５０ｍｌに溶解し、そして得られた溶
液を２時間加熱還流させた。溶液を室温に冷却し、次に
水で希釈し、そしてジエチルエーテルで抽出した。水層
を３ＮＨＣｌで酸性化し、そしてジエチルエーテルで抽
出した。有機層を水層から分離し、そしてＮａ２ＳＯ４
で乾燥した。濾過し、回転蒸発で溶媒を除去すると、異
性体混合物がフォーム状固体として１４．５ｇ得られた
。

【００１３】１３−シス−１２（３１−カルボキシフェ
ニル）レチノイン酸（化合物Ｉ）の製造固体を分離用Ｈ
ＰＬＣ〔ウオーターズ・プレプパック（Ｗａｔｅｒｓ　
　Ｐｒｅｐ　　Ｐａｋ）５００　　Ｃ−１８カラム；３
７．５％　　ＣＨ３ＣＮ：６２．５％１％ＮＨ４ＯＡｃ
〕で精製した。適当なフラクション（分析用ＨＰＬＣで
チェックした）を回転蒸発させてＣＨ３ＣＮを除去し、
そして得られた水溶液を濃ＨＣｌで酸性化し、そしてジ
エチルエーテルで抽出した。濾過し、そしてエーテルを
回転蒸発させると、若干不純な生成物３．２１ｇが得ら
れた。酢酸エチル／ヘキサンから再結晶すると純粋な生
成物２．０ｇが得られた。融点１１７−１１８℃１Ｈ　
　ＮＭＲ（２５０　　ＭＨｚ，ジオキサン−ｄ８）δ（
ｐｐｍ）７．９３−７．９０（ｍ，２Ｈ，１′，６′−
ＡｒＨ），７．５４−７．５０（ｍ，２Ｈ，４′，５′
−ＡｒＨ），６．６３（ｄ，Ｊ＝１２Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ−
１１），６．１９（ｄ，Ｊ＝１６Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ−７）
，６．１０（ｄ，Ｊ＝１２Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ−１０），５
．９１（ｄ，Ｊ＝１６Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ−８），５．８５
（ａｐｐ　　ｓ，１Ｈ，Ｈ−１４），１．９６（ｓ，３
Ｈ，９ａまたは１３ａ−ＣＨ３），１．９０（ｓ，３Ｈ
，９ａまたは１３ａ−ＣＨ３），１．６３（ｓ，３Ｈ，
５ａ−ＣＨ３），１．６０−１．１９（ｍ，６Ｈ，Ｈ−
２−４），０．９９（ｓ，６Ｈ，２（１ａ）−ＣＨ３）
．

【００１４】本発明の化合物は特にクリームまたはゲル
として局在化した炎症の治療のための局所投与に適した
形態で調製することができ、そして眼組成の炎症の治療
のための眼科用製剤、例えば点眼剤等をも包含する。あ
るいはまた、特に内服用として錠剤形態に配合されてい
るか、または希釈剤および担体と混和するか、また潜在
的に他の有効剤と混和したエリキシール剤中の化合物も
企図されている。更に、本発明の化合物は徐放性処方物
、例えば生物分解性重合体マトリックスに混入すること
ができ、このものは徐放性材料の挿入に基いて特効レベ
ルで時間をかけて化合物を放出する。徐放性重合体の例
には、ポリカプロラクトン、ラクチド、グリコール等を
ベースとする重合体が包含される。

【００１５】有効投与量範囲の濃度は化合物毎、患者毎
および処理された症状もしくは患者の状態で変化する。 一般に、局所適用には、化合物の抗炎症量は適当な局所
適用量形態中０．００５％乃至１０％ｗ／ｖの範囲にあ
る。内服用の投与量値は０．１ｍｇ／ｋｇ乃至５０ｍｇ
／ｋｇ／日の範囲に制限されなければならない。連続放
出装置または徐放性送達装置に配合された場合、濃度値
は使用された重合体マトリックスまたは受容体固定材料
の性状に基づいて変化する。一般に、徐放性送達装置は
上述の数値内で一定の用量を送達するように調製されな
ければならない。当該分野で認められている操作に従っ
て、所定の重合体について遊動および拡散速度を定める
ことができ、これは本発明の特徴を構成するものではな
い。本発明およびその有効性は以下の試験管内および生
成内試験を参照することにより更により理解されよう。

【００１６】

【実施例】ＰＬＡ２阻害検定 この検定は供試化合物によるヒト血小板ＰＬＡ２の阻害
を測定するのに使用される。方法はフランソン（Ｆｒａ
ｎｓｏｎ）等が報告しているのと同様である。〔ジェセ
ＲＬ（Ｊｅｓｓｅ　　ＲＬ）およびフランソンＲＣ、ビ
オケム・ビオフィズ・アクタ（Ｂｉｏｃｈｅｍ　　Ｂｉ
ｏｐｈｙｓ　　Ａｃｔａ）、５７５巻、４６７−４７０
頁（１９７９年）〕。〔フランソンＲＣ、パトリアルカ
Ｐ（Ｐａｔｒｉａｒｃａ　　Ｐ）およびエルスバックＰ
（Ｅｌｓｂａｃｋ　　Ｐ）、Ｊ・リピド・レス（Ｊ．Ｌ
ｉｐｉｄ　　Ｒｅｓ）、１５巻、３８０−３８８頁（１
９７４年）〕。酵素をヒト血小板から単離した。使用し
た基質は１４Ｃ−オレエート標識Ｅ．コリ（Ｅ．ｃｏｌ
ｉ）膜からなっていた。Ｅ．コリ細胞を１４Ｃ−オレイ
ン酸の存在下に生育させ、次にオートクレーブ処理して
膜を調製した。検定において、供試化合物様々の濃度で
２５ｍＭ　　ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７）１５０ｍＭ　　Ｎａ
Ｃｌ、５．０ｍＭ　　ＣａＣｌ２および１０％　　ＤＭ
ＳＯ（供試化合物溶媒）からなる緩衝剤中でＰＬＡ２（
７．５μｇ／ｍｌ）と共に前培養した（３７℃、７分間
）。次に、Ｅ．コリ膜基質を加え（０．１ｍＭホスホリ
ピドすなわちリン脂質）、そして反応を３７℃で３０分
間培養した。最終反応容量は０．１ｍｌである。反応を
テトラヒドロフラン（１．９ｍｌ）で急冷し、そして溶
液全体を固相抽出カラム〔アミノプロピル樹脂、アナリ
チケム（Ａｎａｌｙｔｉｃｈｅｍ）〕にかけた。カラム
を追加の１ｍｌのテトラヒドロフランで洗いすすぎした
。遊離脂肪酸をテトラヒドロフラン中２％酢酸１．０ｍ
ｌでカラムから溶離し、そしてシンチレーションバイア
ルに集める。遊離酸生成物の量を液体シンチレーション
計数により測定した。供試化合物によって生成される阻
害の量を化合物の存在下で得られたカウントの数を比較
対照反応（供試化合物溶媒のみ）で得られたカウントの
数と比較して算出した。阻害％の値を次の式で求める。

【００１７】

【数１】 ＩＣ５０値（５０％阻害を生じるのに必要な阻害剤の濃
度）は、阻害％対対数濃度のプロットの内挿により求め
る。表１の結果に、選択された化合物のヒト血小板ＰＬ
Ａ２の阻害のＩＣ５０値を示す。これらのデータはこれ
らの化合物は用量依存でホスホリパーゼＡ２を阻害する
ことを実証している。

【００１８】

【表１】

【００１９】ホルボールエステル−誘起皮膚炎症検定供
試化合物の抗炎症活性をホルボールエステル−誘起マウ
ス耳炎症モデルで測定した。〔ヤングＪＭ（Ｙｏｕｎｇ
　　ＪＭ）、ワグナーＢＭ（ｗａｇｎｅｒ　　ＢＭ）お
よびスパイレスＤＭ（Ｓｐｉｒｅｓ　　ＤＭ）、Ｊ．イ
ンベスト・デルマトル（Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔ　　Ｄｅｒｍ
ａｔｏｌ）、８０巻、４８−５２頁（１９８３年）〕。 この検定で、炎症反応は、ＣＤ−１マウスの耳に０．０
１％（ｗ／ｖ）テトラデカノイルオールボール−１３−
アセテート（ＴＰＡ）の局所適用により誘起させる。急
性炎症反応は耳の膨張および炎症細胞の耳組織への浸潤
を生じる。ＴＰＡを供試化合物の様々の濃度を伴うかま
たは伴わずに耳の内外面に適用する（１０μｌ／表面）
。６時間後、マウスをと殺し、そして耳を切除する。各
耳から耳組織パンチ（５／１６″）をとり、秤量して浮
腫を測定する。次に、耳パンチをブラドレイ（Ｂｒａｄ
ｌｅｙ）等の方法によりミエロペルオキシダーゼ（ＭＰ
Ｏ）活性を測定することによって好中球集積測定のため
に処理する。〔ブラドレイ　　ＰＰ等、Ｊ．インベスト
．デルマトル、７８巻、２０６−２０９頁（１９８２年
）〕。 ＭＰＯは組織中の好中球の存在に対する特異マーカーで
ある。供試化合物によって生じる抗炎症活性を、薬物処
理した耳について得られた浮腫またはＭＰＯ値を非薬物
処置耳について得られたそれらと比較することにより算
出する。阻害％値は次の式で求めた。

【００２０】

【数２】 化合物（Ｉ）についてのデータを第１図に示す。化合物
（Ｉ）はＴＰＡ−誘起マウス耳浮腫を用量依存で阻止す
る。ＥＤ５０は０．８％であると推定される。細胞浸潤
阻止の用量反応データを第２図に示す。このパラメータ
ーについてのＥＤ５０は＜０．１％であることが判った
。この化合物はこのモデルでの浮腫および細胞浸潤を有
効に阻止する。

【００２１】本発明を特別な実施態様および一般的説明
に関して記述した。本文に開示した実施態様について当
業者は発明能力を駆使することがなく変化をなし得る。 このような変化は特に他の活性剤の添加、追加の担体、
希釈剤、添加剤等の使用、ならびに用量値に対して均衡
した投与時期の変化を包含し、このような変化は、特許
請求の範囲に明記した限定を除いて、本発明に包含され
る。

【図面の簡単な説明】

【図１】耳重量の増加に対してグラフとした用量濃度の
凾数として、本発明の抗炎症効果を示すグラフである。

【図２】濃度％の凾数として、本発明のミエロペルオキ
シダーゼに対する効果を具体的に示すグラフである。

Claims (10)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】　　式Ａ 【化１】 〔式中、Ｒ１，はＣＨ＝ＣＹ−Ｃ（ＣＨ３）＝ＣＨＸで
   あり、ここでＸおよびＹは異っていて、そして各々は式
   ＣＯ２Ｒ′または 【化２】 であり、ここでＲ′およびＲ″は独立してＨまたはＣ１
   −Ｃ６のアルキルであり、そしてＲ１はすべての可能な
   幾何異性体を包含する〕を有する化合物。
2. 【請求項２】次のものおよびその混合物からなる群から
   選択される請求項１の化合物。 【化３】
3. 【請求項３】請求項１の化合物の有効な量を含有するこ
   とを特徴とするホスホリパーゼＡ２阻害用組成物。
4. 【請求項４】前記化合物が請求項２の化合物から選択さ
   れる請求項３の組成物。
5. 【請求項５】製薬上許容し得る担体中に請求項１の化合
   物の炎症減少に有効な量を包含する哺乳動物の表面組織
   の炎症を減少させるのに有効な局所製薬組成物。
6. 【請求項６】前記の量が０．００５％乃至１０％（ｗ／
   ｖ）である請求項５の局所製薬組成物。
7. 【請求項７】前記組成物が眼科用組成物であり、前記担
   体が眼組織への適用に許容し得るものである請求項５の
   局所製薬組成物。
8. 【請求項８】製薬上許容し得る担体と混和した請求項１
   の化合物の製薬上有効な量を包含する哺乳動物での炎症
   を伴う疾病状態でであう炎症を治療するための製薬組成
   物。
9. 【請求項９】前記の量が０．１ｍｇ／ｋｇ乃至５０ｍｇ
   ／ｋｇである請求項６の組成物。
10. 【請求項１０】前記化合物が、ローション、クリームま
    たはゲルの形態で製薬上許容しうる担体と混合せしめら
    れているものである請求項８記載の組成物。