JPH0413691A - α―グリコシル ナリンジンとその製造方法並びに用途 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 【産業上の利用分野］ 本発明は、新規α−グリコジル　ナリンジンとその製造
方法並びに用途に関し、更に詳細には、ナリンジンにＤ
−グルコース残基が等モル以上α結合しているα−グリ
コジル　ナリンジン、および、ナリンジンとα−グルコ
シル糖化合物とを含有する溶液に糖転移酵素を作用させ
て新規α−グリコジル　ナリンジンを生成せしめ、これ
を採取することを特徴とするα−グリコジル　ナリンジ
ンの製造方法、並びに、この方法で得られるα−グリコ
ジル　ナリンジンを含有せしめることを特徴とする飲料
、加工食品などの飲食物、感受性疾患の予防剤、治療剤
すなわち抗感受性疾患剤、美肌剤、色白剤などの化粧品
などに関する。 ［従来の技術］ ナリンジンは、次に示す化学構造を有し、毛細血管の強
化、出血予防、血圧調整などの生理作用を持つビタミン
Ｐとして、また、苦味剤として古くから知られ、食品、
医薬品、化粧品などに利用されている。 ナリンジンの化学構造 ビタミンＰは、生体内で、ビタミンＣの生理活性、例え
ば、生体結合組織の主成分であるコラーゲンの合成に必
要なプロリンやリジンのヒドロキシル化反応に関与し、
また、例えば、チトクロームＣのＦｅ４４４を還元して
Ｆｅ”＋にするなどの酸化還元反応に関与し、更には、
白血球増加による免疫増強作用に関与するなどを増強す
ることが知られており、生体の１！康維持、増進に重要
な役割をなしている。 ナリンジンの用途は、単に栄養素としてのビタミンＰ強
化剤にとどまらず、その化学構造、生理作用から、単独
でまたは他のビタミンなどと併用して、例えば、苦味剤
、酸化防止剤、安定剤、品質改良剤、紫外線吸収剤など
として、飲食物などに、また、ウィルス性疾患、細菌性
疾患、循環器疾患、悪性Ｍ瘍など感受性疾患の予防剤、
治療剤すなわち抗感受性疾患剤に、更には、安定剤、酸
化防止剤、紫外線吸収剤、メラニン生成抑制側なとの美
肌剤、色白剤などとして化粧品にまで及び、その範囲は
極めて広い。 しかしながら、ナリンジンは水に難溶で、室温２５℃で
は１しの水にわずか１ｇ程度（約０．１１Ｊ／Ｖ％）し
か溶けず、使用上困難を極めている。 【発明が解決しようとする課題】 従来のナリンジンの欠点を解消し、水溶性に優れ、苦味
を維持し、毒性の懸念もなく、加えて、生体内で生理活
性を充分発揮しうるナリンジン誘導体の実現が強く望ま
れている。 ［課題を解決するための手段］ 本発明は、上記欠点を解消するためになきれたものであ
って、とりわけ、生化学的手法を利用して、新規ナリン
ジン誘導体を目脂して鋭意研究した。 その結果、ナリンジンとα−グルコシル糖化合物とを含
有する溶液に糖転移酵素を作用ぎせることにより、水溶
性に優れ、苦味を維持し、毒性の懸念もな（、生体内で
容易に加水分解され、ナリンジン本来の生理活性を発揮
しうる新規α−グリコジル　ナリンジンの生成しうろこ
とを見い出し、その製造方法並びに飲食物、感受性疾患
の予防剤、治療剤、化粧品などへの用途を確立して本発
明を完成した。 また、この糖転移反応により生成したα−グリコジル　
ナリンジンを精製するに際しては、その反応溶液と多孔
性合成吸着剤とを接触させ、その吸着性の違いを利用す
ることにより、容易に精製できることも見い出し本発明
・を完成した。 従って、本発明のα−グリコジル　ナリンジンの製造方
法は、従来技術の欠点を一挙に解消し、その工業化の実
現を極めて容易にするものである。 以下、本発明の詳細な説明する。 本発明に用いるナリンジンは、高度に精製されたナリン
ジンに限る必要はなく、ナリンジンと、例えば、シトロ
ニン、ヘスベリジン、ルチンなどのフラボノイド配糖体
との混合物、更には、ナリンジンを含有している各種植
物由来の抽出物、またはその部分精製物などが適宜使用
できる。 植物組織としては、例えば、柑橘類の果実、果皮、未熟
果などが有利に利用できる。 本発明に用いるα−グルコシル糖化合物は、同時に用い
る糖転移酵素によってナリンジンからα−グリコジル　
ナリンジンを生成することのできるものであればよく、
例えば、アミロース、デキストリン、シクロデキストリ
ン、マルトオリゴ糖などの澱粉部分加水分解物、更には
、液化澱粉、糊化澱粉などが適宜選ばれる。 従って、α−グリコジル　ナリンジンの生成を容易にす
るためには、糖転移酵素に好適なα−グルコシル糖化合
物が選ばれる。 例えば、糖転移酵素として、α−グルコシダーゼ（Ｅ　
Ｃ３，２，１，２０）を用いる際には、マルトース、マ
ルトトリオース、マルトテトラオースなどのマルトオリ
ゴ糖、またはＤＥ約１０乃至７０の澱粉部分加水分解物
などが好適であり、シクロマルトデキストリン　グルカ
ノトランスフェラーゼ（ＥＣ２゜４．１．１９）を用い
る際には、シクロデキストリンまたはＤＥ１以下の澱粉
糊化物からＤＥ約６０の澱粉部分加水分解物などが好適
であり、α−アミラーゼ（ＥＣ３，２，１，１）を用い
る際には、ＤＥ１以下のＷｉ扮糊化物からＤＥ約３０の
デキストリン、澱粉部分加水分解物などが好適である。 また、反応時のα−グルコシル糖化合物濃度は、ナリン
ジンに対して約０．５乃至１００倍、望ましくは約２乃
至２０倍の範囲が好適である。 反応時のナリンジン含有液は、ナリンジンをできるだけ
高濃度に含有するものが望ましく、例えば、ナリンジン
を、懸濁状で、または、高温で溶解させた、もしくはｐ
Ｈ７，０を越えるアルカリＩ！ｌｐＨで溶解きせた溶液
状で高濃度に含有する溶液が適しており、その濃度は約
Ｉ　Ｖ／Ｖ％以上の高濃度、望ましくは、約２乃至２０
．０Ｖ／Ｖ％含有している溶液を意味する。 本発明に用いる糖転移酵素は、ナリンジンとこの酵素に
好適な性質のα−グルコシル糖化合物とを含有する溶液
に作用させる時、ナリンジンを分解せずにα−グリコジ
ル　ナリンジンを生成するものであればよい。 例えば、α−グルコシダーゼは、ブタの肝臓、ソバの種
子などの動植物組織由来の酵素、または、ムコール（Ｍ
ｕｃｏｒ）属、ペニシリウム（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ
）属などに属するカビ、またはサツカロミセス（Ｓａｃ
ｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ　）属などに属する酵母などの微
生物を栄養培地で培養し得られる培養物由来の酵素が、
シクロマルトデキストリン　グルカノトランスフェラー
ゼは、バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）属、クレブシーラ
（Ｋ　１ｅｂｓ　ｉｅ　ｌ　ｌａ　）属などに属する細
菌培養物由来の酵素が、α−アミラーゼは、バチルス属
などに属する細菌、または、アスペルギルス（Ａｓｐｓ
ｒｇｉｌｌｕｓ）属などに属するカビ培養物由来の酵素
などが適宜選択できる。 これらの糖転移酵素は、前記の条件を満足しさえすれば
、必ずしも精製して使用する必要はなく、通常は、粗酵
素で本発明の目的を達成することがで會る。 必要ならば、公知の各種方法で精製して使用してもよい
。また、市販の糖転移酵素を利用することもでざる。 使用酵素量と反応時間とは、密接な関係があり、通常は
、経済性の点から約５乃至８０時間で反応を終了するよ
うに酵素量が選ばれる。 また、固定化された糖転移酵素をバッチ式で繰り返し、
または連続式で反応に利用することも適宜選択できる。 また、反応溶液中のナリンジンの分解を防ぐために、反
応はできるだけ遮光、嫌気下、微酸性条件で行なうのが
望ましい。 このようにしてα−グリコジル　ナリンジンを生成せし
めた反応溶液は、そのままでα−グリコジル　ナリンジ
ン製品にすることもできる。通常は、反応溶液を濾過、
濃縮してシラツブ状の、更には、乾燥、粉末化して粉末
状のα−グリコシルナリンジン製品にする。 本製品は、ビタミンＰ強化剤としてばかりでなく、安全
性の高い天然型の苦味剤、酸化防止剤、安定剤、品質改
良剤、予防剤、治療剤、紫外線吸収剤などとして、飲食
物、噌好物、飼料、飼料、抗感受性疾患剤、化粧品、プ
ラスチック製品などの用途に有利に利用できる。 更に、精製されたα−グリコジル　ナリンジン製品を製
造する場合には、多孔性合成吸着剤による吸着性の差を
利用してα−グリコジル　ナリンジンとα−グルコシル
糖化合物などの夾雑物とを分離して精製すればよい。 本発明でいう多孔性合成樹脂とは、多孔性で広い吸着表
面積を有し、かつ非イオン性のスチレン−ジビニルベン
ゼン重合体、フェノール−ホルマリン樹脂、アクリレー
ト樹脂、メタアクリレート樹脂などの合成樹脂であり、
例えば、市販されているＲｏｈｍ　＆　　Ｈａａｓ社製
造の商品名アンバー５イトＸＡＤ−１，７＞　）＜　−
’ｙイトＸ　Ａ　Ｄ−２、アンバーライトＸＡＤ−４、
アンバーライトＸＡＤ−７、アンバーライトＸ　Ａ　Ｄ
−８、アンバーライトＸＡＤ−１１、アンバーライトｘ
ＡＤ−１２、三菱化成工業株式会社製造の商品名ダイヤ
イオンＨＰ−１０゜ダイヤイオンＨＰ−２０、ダイヤイ
オンＨＰ−３０、ダイヤイオンＨＰ−４０、ダイヤイオ
ンＨＰ−５０、ＩＭＡＣＴＩ社製造の商品名イマクテイ
５ｙｎ−４２、イマクテ４　Ｓ　ｙ　ｎ−４４、イマク
テイ５ｙｎ−４８などがある。 本発明のα−グリコジル　ナリンジンを生成せしめた反
応液の精製方法は、反応液を、例えば、多孔性合成吸着
剤を充填したカラムに通液すると、α−グリコジル　ナ
リンジンおよび比較的少量の未反応ナリンジンが多孔性
合成吸着剤に吸着するのに対し、多量に共存するα−グ
ルコシル糖化合物、水溶性糖類は吸着きれることなくそ
のまま流出する。 必要ならば、糖転移酵素反応終了後、多孔性合成吸着剤
に接触させるまでの間に、例えば、反応液を加熱して生
じる不溶物を濾過して除去したり、ケイ酸アルミン酸マ
グネシウム、アルミン酸マグネシウムなどで処理して反
応液中の蛋白性物質などを吸着除去したり、イオン交換
樹脂（Ｈ型およびＯＨ型）などで処理して脱塩するなど
の精製方法を組み合せて利用することも随意である。 前述のようにして、多孔性合成吸着剤カラムに選択的に
吸着したα−グリコジル　ナリンジンと比較的少量の未
反応ナリンジンとは、希アルカリ、水などで洗浄した後
、比較的少量の有機溶媒または有機溶媒と水との混合液
、例えば、メタノール水、エタノール水などを通液すれ
ば、まず、α−グリコジル　ナリンジンが溶出し、通液
量を増すか有機溶媒濃度を高めるかすれば未反応ナリン
ジンがｉ言出してくる。 このα−グリコジル　ナリンジン高含有溶出液を蒸溜処
理して、まず有機溶媒を溜去した後、適当な濃度にまで
濃縮すればα−グリコジル　ナリンジンを主成分とする
シラツブ状製品が得られる。 更に、これを乾燥し粉末化することによって、α−グリ
コジル　ナリンジンを主成分とする粉末状製品が得られ
る。 この有機溶媒によるα−グリコジル　ナリンジンおよび
未反応ナリンジンの溶出操作は、同時に、多孔性合成吸
着剤の再生操作にもなるので、この多孔性合成吸着剤の
繰り返し使用を可能にする。 また、本発明の多孔性合成吸着剤による精製は、α−グ
ルコシル糖化合物、水溶性糖類だけでなく、水溶性の塩
類などの夾雑物も同時に除去できる特長を有している。 このようにして得られるα−グリコジル　ナリンジンは
、次の特長を有している。 （１）ナリンジンと比較してα−グリコジル　ナリンジ
ンは、水溶性が極めて大きい。 （２）ナリンジンと比較してα−グリコシルナリンジン
は、耐光性、安定性が大きい。 （３）α−グリコジル　ナリンジンは、ナリンジンと実
質的に同等の苦味を有する。 （４）　α−グリコジル　ナリンジンは、体内の酵素に
よりナリンジンとグルコースとに加水分解きれ、ナリン
ジン本来の生理活性（ビタミンＰ）を示す。また、ビタ
ミンＣとの併用により、それらの持つ生理活性を増強き
せることかできる。 （５）α−グルコシル糖化合物を含有する製品の場合に
は、α−グリコジル　ナリンジンの効果を発揮するのみ
ならず、α−グルコシル糖化合物が賦形、増量効果や、
甘味効果を発揮することができ、また、α−グルコシル
糖化合物を除去した精製製品の場合には、はとんど賦形
、増量することなくα−グリコジル　ナリンジンの効果
を発揮することかできる。 これらの特長から、α−グリコうル　ナリンジンは安全
性の高い天然型のビタミンＰ強化剤としてばかりでなく
、苦味剤、酸化防止剤、安定剤、品質改良剤、ウィルス
性疾患、細菌性疾患、循環器疾患、悪性腫瘍など感受性
疾患の予防剤、治療剤、紫外線吸収剤などとして、飲食
物、−好物、飼料、餌料、抗感受性疾患剤、美肌剤、色
白剤など化粧品、更には、プラスチック製品などに有利
に利用することができる。 またα−グリコジル　ナリンジンの呈味は、酸味、塩か
ら味、渋味、旨味などを呈する各種物質ともよく調和し
、耐酸性、耐熱性も大きいので、普通一般の飲食物、嗜
好物、例えば、調味料、和菓子、洋菓子、氷菓、飲料、
スプレッド、ペースト、漬物、ビン缶詰、畜肉加工品、
魚肉・水産加工品、乳・卵加工品、野菜加工品、果実加
工品、穀類加工品、など広範に利用することができる。 とりわけ、α−グリコジル　ナリンジンが呈する苦味を
柑橘類、ココア、コーヒー、チョコレート、茶類、生薬
類へ、または、これらのフレーバー類へ付与して各種飲
食物の風味改善を行なうことも好都合である。また、α
−グリコジル　ナリンジンをステビオシト、α−グリコ
ジル　ステビオシト、レバウデイオシドＡ１グリチルリ
チン、α−グリコシル　グリチルリチン、ジヒドロカル
コン類など植物由来の甘味料、グリシン、アラニン、Ｌ
−アスパラチル　フェニルアラニンメチルエステルなど
アミノ酸系甘味料、シュクロース、水飴、砂糖結合水飴
、ブドウ糖、異性化糖、フラクトース、蜂蜜、マルトー
ス、ソルビトール、マルチトール、ラクトースなど糖類
甘味料などから選ばれる甘味料の一種または二種以上と
併用して呈味改善、風味向上などの目的で利用すること
も有利に実施できる。また、α−グリコジル　ナリンジ
ンが、果汁中のフラボノイド化合物の晶出、沈澱を阻害
するので、果汁飲料、果汁入りゼリーなどのにこり防止
剤、曇防止剤などとして利用することも有利に実施で診
る。更に、家畜、家禽、蜜蜂、蚕、魚などの飼育動物の
ための飼料、餌料などにビタミンＰ強化剤、嗜好性向上
などの目的で配合して利用することも好都合である。 その他、タバコ、トローチ、肝油ドロップ、複合ビタミ
ン剤、口中清涼剤、口中香材、うがい薬、経管栄養剤、
生薬、内服薬、注射剤、線面みがき、口紅、リップクリ
ーム、日焼は止めなど各種固状、ペースト状、液状の嗜
好物、感受性疾患の予防剤、治療剤、すなわち、抗感受
性疾患剤、美肌剤、色白剤などの化粧品など叫配合して
利用することも有利に実施でき、更には、紫外線吸収剤
、劣化防止剤などとしてプラスチック製品などに配合し
て利用することも有利に実施できる。 また、本発明でいう感受性疾患とは、α−グリコジル　
ナリンジンによって予防され若しくは治療される疾患で
あり、それが、例えば、ウィルス性疾患、細菌性疾患、
外傷性疾患、免疫疾患、リューマチ、糖尿病、循環器疾
患、悪性腫瘍などであってもよい。α−グリコジル　ナ
リンジンの感受性疾患予防剤、治療剤は、その目的に応
じてその形状を自由に選択できる。例えば、噴霧剤、点
眼剤、点鼻剤、うがい剤、注射剤などの液剤、軟膏、は
っぷ剤、クリームのようなペースト剤、粉剤、顆粒、カ
プセル剤、錠剤などの固剤などである。製剤に当たって
は、必要に応じて、他の成分、例えば、治療剤、生理活
性物質、抗生物質、補助剤、増量剤、安定剤、着色剤、
着香剤などの１種また２１１以上と併用することも随意
である。 投与量は、含量、投与経路、投与頻度などによって適宜
調節することができる。通常、α−グリコジル　ナリン
ジンとして、成人１日当り、約０．００１乃至１０．０
グラムの範囲が好適である。 また、化粧品の場合も、大体、前述の予防剤、治療剤に
準じて利用することができる。 α−グリコジル　ナリンジンを利用する方法としては、
それらの製品が完成するまでの工程で、例えば、混和、
混捏、溶解、浸漬、浸透、散布、塗布、噴霧、注入など
公知の方法が適宜選ばれる。 以下、本発明のα−グリコジル　ナリンジンの一例を実
験で説明する。 実験　１　α−グリコジル　ナリンジンの調製（１）糖
転移反応 ナリンジン１重量部およびデキストリン（ＤＥ２０）６
重量部に水５０重量部を加えて加熱溶解し、これにバチ
ルス・ステアロサーモフィルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｓ
ｔｅａｒｏｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）由来のシクロマ
ルトデキストリン　グルカノトランスフェラーゼ（株式
会社林原生物化学研究所販売）をデキストリングラム当
り２０単位加え、ｐＨ６゜０１７０℃に維持して１８時
間反応させ、その後、加熱失活させ、α−グリコジル　
ナリンジン含有液を得た。 （２）精製 （１）の方法で得た反応液を濾過し、濾液を多孔性合成
吸着剤、商品名ダイヤイオンＨＰ　−１０（三菱化成工
業株式会社販売）を充填したカラムにＳｖ２で通液した
。二〇カラムを水で洗浄後、５０Ｖ／Ｖ％エタノールを
通液し、この溶出液を濃縮して溶媒を溜去し、粉末化し
て淡黄色のα−グリコシルナリンジン標品［Ｉ］を原料
のナリンジン重量に対して約１３０％の収率で得た。 （３）アミラーゼによる加水分解 （２）の方法で得たα−グリコジル　ナリンジン標品［
１１を水にＩＷ／Ｖ％に溶解し、これにグルコアミラー
ゼ（ＥＣ３，２，１，３、生化学工業株式会社販売）を
該標品グラム当り１００単位加え、ｐＨ５，０゜５５℃
に維持して５時間反応させた。反応液を加熱して酵素を
失活きせ、濾過し、濾液を多孔性合成吸着剤、商品名ダ
イヤイオンＨＰ−１０（三菱化成工業株式会社販亮）の
カラムにＳＶ２で３１液した。 その結果、ｉ容液中のα−グリコジル　ナリンジンと未
反応ナリンジンとが多孔性合成吸着剤に吸着し、グルコ
ース、塩類などは吸着すること−なく流出した。次いで
、カラムを水で通液、洗浄した後、エタノール水溶液濃
度を段階的に高めながら通液し、α−グリコジル　ナリ
ンジン画分を採取し、減圧濃縮し、粉末化して、淡黄色
のα−グリコジル　ナリンジン標品［１１１を固形物当
り原料のナリンジン重量に対して約７０％の収率で得た
。 また、グルコアミラーゼに代えて、β−アミラーゼ（Ｅ
Ｃ３，２，１，２）、（生化学工業株式会社販売）を用
いて、前述の方法に準じて、α−グリコジル　ナリンジ
ン標品［１１を加水分解し、精製、濃縮、粉末化して、
淡黄色のα−グリコジル　ナリンジン標品［ＩＩＩ　］
を原料のナリンジン重量に対して約７０％の収率で得た
。 実験２　α−グリコジル　ナリンジンの理化学的性質 （１）水溶性の向上 実験１（１）の方法で糖転移反応し調製したα−グリコ
ジル　ナリンジン含有液と、この方法で用いる酵素を予
め加熱失活させて実験１（１）の方法に準じて処理した
対照液とを、４℃の冷室に２日間放置したところ、対照
液では、ナリンジンが析出して白濁したのに対し、α−
グリコシルナリンジン含有液は透明のままであった。 従って、糖転移反応により生成したα−グリコジル　ナ
リンジンは、水溶性が著しく向上している。 （２）溶剤に対する溶解性 α−グリコジル　ナリンジン標品は、水、０．１規定カ
セイソーダ、０．１規定塩酸に易溶、メタノール、エタ
ノール微溶、エーテル、ベンゼン、クロロホルムに不ｉ
容。 （３）呈味 ナリンジン、α−グリコジル　ナリンジン標品［Ｉ］、
ＩＩ品［ＩＩ　］および標品目］１１をそれぞれ１■Ｎ
水溶液とし、その呈味を比較したところ、標品［Ｉ］、
標品［ＩＩ　］および標品〔！１０は、いずれも、原料
ナリンジンの苦味をよく維持し、原料ナリンジンの場合
とほぼ同等の苦味を示すことが判明した。 （４）紫外線吸収スペクトル α−グリコジル　ナリンジン標品の水溶液（ｐＨ６，０
）を用いて紫外線吸収スペクトルを調べたところ、標品
［１１、標品［ＩＩＩおよび標品［ＩＩＩ　］のいずれ
も、ナリンジンの場合と同様に、吸収の強ざの順に２１
１ｎｍ１２８２ｎｍおよび３２９ｎ−付近に吸収極大を
有していた。 （５）赤外線吸収スペクトル ＫＢｒ錠剤法によって、α−グリコジル　ナリンジン標
品の赤外線吸収スペクトルを調べた。 α−グリコジル　ナリンジン標品［１１１の結果を第１
図に示す。対照としてナリンジンの結果を第２図に示す
。 （６）加水分解に対する安定性 （ａ）　α−グリコジル　ナリンジン標品は、ブタの肝
臓由来のα−グルコシダーゼ（Ｅ　Ｃ３，２，１，２０
）により加水分解され、ナリンジンとＤ−グルコースと
を生成する。 （ｂ）β−グルコシダーゼによっては加水分解されない
。 （７）ｔ３１層クロマトグラフィー （ａ）分析方法 プレート；メルク社製、 商品名キーゼルゲル６０Ｆ２６４ 展開溶媒；酢酸エチル：蟻酸：水＝１１：２：３発色剤
　ｉ　１０Ｗ／Ｗ％硫酸水溶液 （ｂ）分析結果 α−グリコジル　ナリンジン標品を分析したところ、標
品［Ｉ］の場合には、Ｒｆｏ、７９のナリンジンのスポ
ット以外に、新たに、ＲｆＯ，６８，０，４９，０，３
８，０，２１などとともに原点まで数個のスポットが認
められ、標品［１］の場合には、Ｒｆｏ、６８のスポッ
トが認められ、標品［ＩＩＩ　］の場合には、ＲｆＯ，
６８，０，４９のスポットが認められた。 以上の理化学的性質から、標品［Ｉ］、標品［ＩＩ　］
および標品［ＩＩＩ　］に含まれるＲｆｏ、６８を示す
物質は、ナリンジン１モルにＤ−グルコース残基が１モ
ルα結合したα−グルコシル　ナリンジンと判断きれ、
標品［１］および標品［ＩＩＩ　］に含まれるＲｆｏ、
４９を示す物質は、ナリンジン１モルにＤ−グルコース
が２モルα結合したα−マルトシル　ナリンジンと判断
され、同様に、標品［１１に含まれるＲｆｏ。 ３８以下の複数のスポットを示す物質は、ナリンジン１
モルにＤ−グルコース残基が３モル以上ｑ結合したα−
マルトオリゴシル　ナリンジンであると判断される。 このように、本願発明のα−グリコシルナリンジンはナ
リンジンにＤ−グルコース残基が等モル以上α結合した
水溶性良好な新規ナリンジン糖詞導体であって、生体内
に摂取されると、α−グルコシダーゼによって容易に加
水分解され、ナリンジン本来の生理活性を発揮する。 実験３急性毒性 ７周令のｄｄ系マウスを使用して、実験１（２）の方法
で調製したα−グリコジル　ナリンジン標品［Ｉ］を経
口投与して急性毒性テストをしたところ、５ｇまで死亡
例は見られず、これ以上の投与は困難であった。 従って、本物質の毒性は極めて低い。なお、実験１（３
）の方法で調製したα−グリコジル　ナリンジン標品［
ＩＩ　］を用いて本テストを行ったところ、同様の結果
を得、毒性の極めて低いことが判明した。 以下、本発明の実施例として、α−グリコシルナリンジ
ンの製造例を実施例Ａで、α−グリコジル　ナリンジン
の用途例を実施例Ｂで述べる。 実施例　Ａ−１α−グリコジル　ナリンジンナリンジン
１重量部およびデキストリン（ＤＥＩＯ）４重量部を水
１０重量部に加熱溶解し、７５℃に冷却後直ちにバチル
ス・ステアロサーモフィルス由来のシクロマルトデキス
トリン　グルカノトランスフエラー＋！（株式会社林原
生物化学研究所販売）をデキストリングラム当り２０単
位加え、ＰＨ５，５，７５℃に維持し撹拌しつつ２４時
間反応させた。反応液を薄層クロマトグラフィーで分析
したところ、ナリンジンの約６５％が、α−グルコシル
　ナリンジン、α−マルトシル　ナリンジン、α−マル
トトリオシル　ナリンジン、α−マルトテトラオシル　
ナリンジン、などのα−グリコジル　ナリンジンに転換
していた。 反応液を加熱して酵素を失活させ、濾過し、濾液を、常
法に従って、イオン交換樹脂（Ｈ型およびＯＨ型）で脱
塩精製し、濃縮してシラツブ状のα−グルコシル糖化合
物を含有するα−グリコジル　ナリンジン製品を、固形
物当り原料重量に対して約８５％の収率で得た。 本品は、ビタミンＰ強化剤としてばかりでなく、安全性
の高い天然型の苦味剤、酸化防止剤、安定剤、品質改良
剤、予防剤、治療剤、紫外線吸収剤などとして、飲食物
、嗜好物、飼料、飼料、抗感受性疾患剤、化粧品、プラ
スチック製品などの用途に有利に利用できる。 実施例　Ａ−２α−グルコシル　ナリンジン実施例Ａ−
１の方法に準じて調製したシラツブ状のα−グルコシル
糖化合物を含有するα−グリコジル　ナリンジン製品１
重量部を水４重量部に溶解し、これにグルコアミラーゼ
（ＥＣ３，２，１゜３、生化学工業株式会社販売）をα
−グリコ゛シルナリンジン製品固形物ダラム当り１００
単位加え、５０℃、５時間反応させた。反応液を薄層ク
ロマトグラフィーで分析したところ、α−グリコシルナ
リンジンは、α−グルコシル　ナリンジンに転換してい
た。 反応液を加熱して酵素を失活させ、濾過し、濾液を多孔
性合成吸着剤、商品名ダイヤイオンＨＰ−１０（三菱化
成工業株式会社販売）のカラムにＳＶ２で通液した。そ
の結果、溶液中のα−グルコシル　ナリンジンと未反応
ナリンジンとが多孔性合成吸着剤に吸着し、グルコース
、塩類などは吸着することなく流出した。次いで、カラ
ムを水を通液、洗浄した後、エタノール水溶液濃度を段
階的に高めながら通液し、α−グルコシルナリンジン画
分を採取し、減圧濃縮し、粉末化して、粉末状のα−グ
ルコシル　ナリンジンを固形物当り原料のナリンジン重
量に対して約５５％の収車で得た。 α−グルコシル　ナリンジンを酸で加水分解したところ
、ナリンゲニン１モルに対し、Ｌ−ラムノース１モル、
Ｄ−グルコース２モルを生成し、また、α−グルコシル
　ナリンジンに、ブタの肝臓から抽出し部分精製したα
−グルコシダーゼを作用させると、ナリンジンとＤ−グ
ルコースとに加水分Ｍされることが判明した。 本α−グルコシル　ナリンジンは、高度に精製された水
溶性の高いビタミンＰ強化剤として、また、苦味剤、酸
化防止剤、安定剤、品質改良剤、予防剤、治療剤、紫外
線吸収剤などとして、飲食物、嗜好物、抗感受性疾患剤
、化粧品などに有利に利用できる。 実施例　Ａ−３α−グリコジル　ナリンジンナリンジン
１重量部およびデキストリン（Ｄ　Ｈ８）１０重量部を
水２０重量部に加熱溶解し、７０℃に冷却し、これにシ
クロマルトデキストリン　グルカノトランスフェラーゼ
をデキストリングラム当り３０単位加え、ｐ　Ｈ６，０
，６５℃に維持して撹拌しつつ４００時間反応せた。 反応液を薄層クロマトグラフィーで分析したところ、ナ
リンジンの約７５％がα−グリコシルナリンジンに転換
していた。 反応液を加熱して酵素を失活きせ、濾過し濾液を多孔性
合成吸着剤、商品名アンバーライトＸＡＤ　−７（Ｒ，
ｏｈｍ　　＆　　Ｈａ　ａ　ｓ社製造）のカラムにＳＶ
ｌ、５で通液した。 その結果、溶液中のα−グリコジル　ナリンジンと未反
応ナリンジンとが多孔性合成吸着剤に吸着し、デキスト
リン、オリゴ糖、塩類などは吸着することなく流出した
。 二〇カラムを水で通液、洗浄した後、５０Ｖ／Ｖ％メタ
ノールを通液して、α−グリコジル　ナリンジンおよび
ナリンジンを溶出し、これを濃縮し、粉末化して、粉末
状α−グリコジル　ナリンジン製品を原料のナリンジン
重量に対して約１１０％の収率で得た。 本品は、水溶性の高いビタミンＰ強化剤としてばかりで
なく、安全性の高い天然型の苦味剤、酸化防止剤、安定
剤、品質改良剤、予防剤、治療剤、紫外線吸収剤などと
して、飲食物、嗜好物、飼料、餌料、抗感受性疾患剤、
化粧品、プラスチック製品などの用途に有利に利用でき
る。 実施例　Ａ−４α−グリコジル　ナリンジン（１）α−
グルコシダーゼ標品の調製 マルトース４Ｖ／Ｖ％、リン酸１カリウム０．１Ｖ／Ｖ
％、硝酸アンモニウム０．１Ｗ／Ｖ％、硫酸マグネシウ
ム０゜０５Ｗ／Ｖ％、塩化力！Ｊ　’７　ム０．０５１
Ｊ／Ｖ％、ポリペプトン０．２１／Ｖ％、炭酸カルシウ
ムＩＶ／Ｖ％（別に乾熱滅菌して植菌時に無菌的に添加
）および水からなる液体培地５００重量部にムコール・
ジャバニカス（Ｍｕｃｏｒ　ｊａｖａｎｉｃｕｓ）　　
Ｉ　Ｆ　０４５７０を温度３０℃で４４時間振盪培養し
た。培養終了後、菌糸体を採取し、その湿間糸体４８重
量部に対し、０．５Ｍ酢酸緩衝液（ｐ　Ｈ５，３）に溶
解した４Ｍ尿素液５００重量部を加え、３０℃で４０時
間静置した後、遠心分離した。この上清を流水中で一夜
透析した後、硫安０゜９飽和とし、４℃で一夜放置して
生成した塩析物を濾取し、０．０１Ｍ酢酸ｌｌ衝液（ｐ
　Ｈ５，３）　５０重量部に懸濁溶解した後、遠心分離
して上清を採取し、α−グルコシダーゼ標品とした。 （２）α−グリコジル　ナリンジンの調製ナリンジン３
重量部およびデキストリン（ＤＥ３０）２０重量部を水
５０重量部に加熱溶解し、５５℃に冷却後直ちに（１）
の方法で調製したα−グルコシダーゼ標品１０重量部を
加え、ｐＨ６，０に維持して撹拌しつつ５５℃で４０時
間反応きせた。 反応液を薄層ペーパークロマトグラフィーで分析したと
ころ、ナリンジンの約５０％がα−グリコジル　ナリン
ジンに転換していた。 反応液を実施例Ａ−３と同様に精製し、濃縮、粉末化し
て粉末状α−グリコジル　ナリンジン製品を原料のナリ
ンジン重量に対して約９５％の収率で得た。 水晶は、実施例Ａ−３の場合と同様に、水溶性の高いビ
タミンＰ強化剤としてばかりでなく、安全性の高い天然
型の苦味剤、酸化防止剤、安定剤、品質改良剤、予防剤
、治療剤、紫外線吸収剤などとして、各種用途に利用で
きる。 実施例　Ｂ−１ハードキャンデイ− 還元麦芽糖水飴（林原商事株式会社販売、登録商標マビ
ット）　１，５００重量部を加熱し、減圧下で水分約２
％以下になるまで濃縮し、これに実施例Ａ−３の方法で
得た粉末状α−グリコシルナリンジン１重量部および適
量のカラメル、コーヒー香料を混和し、次いで常法に従
って、成形、包装してハードキャンデイ−を得た。 水晶は、ビタミンＰおよび苦味を強化したコーヒーキャ
ンデイ−であって、低う蝕性、低カロリーである。 実施例　Ｂ−２フキの水煮 フキを皮むきし、適当な長とに切断して、薄い食塩水に
数時間浸し、これをα−グリコジルルチンと青色１号と
を配合して調製した緑色着色料および実施例Ａ−１の方
法で得たシラツブ状のα−グリコジル　ナリンジンを含
有する液で煮込んで、緑色の鮮かなフキの水煮を得た。 水晶は、野趣に富んだ苦味を有しており、各種和風料理
の材料としても好適である。 実施例　Ｂ−３求　肥 モチ種澱粉１重量部に水１．２重量部を混合し、加熱糊
化しつつ、これに砂糖１゜５重量部、結晶性β−マルト
ース（林原株式会社製造、登録商標サンマルト）０．７
重量部、水飴０．３重量部および実施例Ａ−１の方法で
得たシラツブ状α−グリコジル　ナリンジン０．０２重
量部を混和し、以後、常法に従って、成形、包装して求
肥を製造した。 水晶は、野趣に富んだほのかな苦味を有する風味で、口
当りも良好なきびだんご風の和菓子である。 実施例　Ｂ−４ＩＣ合甘味料 はちみつ１００重量部、異性化糖５０重量部、α−グリ
コジル　ステビオシト（東洋精糖株式会社製造、商品名
　α−Ｇ　スィート）１重量部および実施例Ａ−４の方
法で得た粉末状α−グリコジル　ナリンジン０．０２重
量部を混合して混合甘味料を得た。 水晶はビタミンＰを強化した味質良好な甘味料で、その
甘味度は砂糖の約２倍で健康食品として好適である。 実施例　Ｂ−５サンドクリーム 結晶性α−マルトース（林原株式会社製造、登録商標フ
ァイントース）　１，２００重量部、ショートニング１
　、０００重量部、カカオマス５０重量部、実施例Ａ−
３の方法で得た粉末状α−グリコシルナリンジン３重量
部およびレシチン１重量部を常法により混和してサンド
クリームを製造した。 水晶は、ビタミンＰを強化し、苦味をきかせたチョコレ
ート風味のサンドクリームで、口当り、溶は具合とも良
好である。 実施例　Ｂ−６錠　　剤 Ｌ−アスコルビン酸２０重量部に結晶性β−マルトース
１３重量部、コーンスターチ４重量部および実施例Ａ−
２の方法で得た粉末状α−グルコシル　ナリンジン３重
量部を均一に混合した後、直径１２ｍｍ、　２ＯＲ杵を
用いて、打錠し錠剤を得た。 本品は、Ｌ−アスコルビン酸とα−グルコシル　ナリン
ジンとの複合ビタミン剤で、Ｌ−アスコルビン酸の安定
性もよく、飲み易い錠剤である。 実施例　Ｂ−７カプセル剤 酢酸カルシウム・−水塩１０重量部、Ｌ−乳酸マグネシ
ウム・三水塩５０重量部、マルトース５７重量部、実施
例Ａ−２の方法で得たα−グルコシル　プリンジン２０
重量部及びエイコサペンタエン酸２０％含有７−シクロ
デキストリン包接化合物１２重量部を均一に混合し、顆
粒成形機にかけて顆粒とした後、常法に従って、ゼラチ
ンカプセルに封入して、−カプセル１５０■ｇ人のカプ
セル剤を製造した。 本品は、血中コレステロール低下剤、免疫賦活剤、美肌
剤などとして、感受性疾患の予防剤、治療剤、健康増進
用食品などとして有利に利用できる。 実施例　Ｂ−８軟　膏 酢酸ナトリウム・三水塩１重量部、ＤＬ−乳酸カルシウ
ム４重量部をグリセリン１０重量部と均一に混合し、こ
の混合物を、ワセリン５０重量部、木ロウ１０重１部、
ラノリン１０重量部、ゴマ油１４．５重量部、実施例Ａ
−４の方法で得たα−グリコジル　ナリンジン１重量部
及びハツカ油０．５重量部の混合物に加えて、更に均一
に混和して軟膏を製造した。 本品は、日焼は止め、美肌剤、色白剤などとして、更に
は外傷、火傷の治癒促進剤などとして有利に利用できる
。 実施例　Ｂ−９注　射　剤 実施例Ａ−２の方法で得たα−グルコシルナリンジンを
水に溶解し、常法に従って、精製濾過してパイロゲンフ
リーとし、この溶液を２０＋ｓＬ容アンプルにα−グル
コシル　ナリンジン５０１ｇになるように分注し、これ
を減圧乾燥し、封入して注射剤を製造した。 本注射剤は、単体で、または、他のビタミン、ミネラル
などと混合して筋肉内又は静脈内に投与できる。また、
本品は、低温貯蔵の必要もなく、使用に際しての生理食
塩水などへの溶解性は極めて良好である。 実施例　Ｂ−１０注　射　剤 塩化ナトリウム６重量部、塩化カリウム０゜３重量部、
塩化カルシウム０．２重量部、乳酸ナトリウム３．１重
量部、マルトース４５重量部及び実施例Ａ−２の方法で
得たα−グルコシル　ナリンジン１重量部を水１，００
０１量部に溶解し、常法に従って、精製濾過してパイロ
ジンフリーとし、この溶液を１ｌｉＩｉＩＩｉシたプラ
スチック容器に２５０ＩＩＬずつ充填して注射剤を製造
した。 本品は、ビタミンＰ補給としてだけでなく、カロリー補
給、ミネラル補給のための注射剤で、病中、病後の治療
促進、回復促進などに有利に利用できる。 実施例　Ｂ−１１経営栄養剤 結晶性α−マルトース２０重量部、グリシン１．１重量
部、グルタミン酸ナトリウム０．１８重量部、食塩１．
２重量部、クエン酸１重量部、乳酸カルシウム０．４重
量部、炭酸マグネシウム０．１重量部、実施例Ａ−３の
方法で得たα−グリコジル　ナリンジン０．０１重量部
、チアミン０．０１重量部及びリボフラビン０．０１重
量部からなる配合物を調製する。この配合物２４ｇずつ
をラミネートアルミ製小袋に充填し、ヒートシールして
経営栄養剤を調製した。 本経営栄養剤は、−袋を約３００乃至５００ｍＬの水に
溶解し、経営方法により鼻腔、胃、門などへの経口的又
は非経口的栄養補給液としても有利に利用できる。 実施例　Ｂ−１２浴　用　剤 ＤＬ−乳酸ナトリウム２１重量部、ピルビン酸ナリトウ
ム８重量部、実施例Ａ−１の方法で得たα−グリコジル
　ナリンジン５重量部及びエタノール４０重量部を、精
製水２６重量部及び着色料、香料の適量と混合し、浴用
剤を製造した。 本品は、美肌剤、色白剤として好適であり、入浴用の湯
に１００乃至１０，０００倍に希釈して利用すればよい
。本品は、入浴用の湯の場合と同様に、洗顔用水、化粧
水などに希釈して利用することも有利に実施できる。 実施例　Ｂ−１３乳　液 ポリオキシエチレンベヘニルエーテル０．５重量部、テ
トラオレイン酸ポリオキシエチレンソルビトール１重量
部、親油型モノステアリン酸グリセリン１重量部、ピル
ビン酸０．５重量部、ベヘニルアルコール０．５重量部
、アボガド油１重量部、実施例Ａ−３の方法で得たα−
グリコジル　ナリンジン１重量部、ビタミンＥ及び防腐
剤の適量を、常法に従って加熱溶解し、これにＬ−乳酸
ナトリウム１重量部、１．３−ブチレングリコール５重
量部、カルボキシビニルポニマー０．１重量部及び精製
水８５．３重量部を加え、ホモゾナイザーにかけ乳化し
、更に香料の適量を加えて撹拌混合し乳液を製造した。 本品は、日焼は止め、美肌剤、色白剤などとして有利に
利用できる。 実施例　Ｂ−１４クリーム モノステアリン酸ポリオキシエチレングリコール２重量
部、自己乳化型モノステアリン酸グリセリン５重量部、
実施例Ａ−２の方法で得たα−グルコシル　ナリンジン
２重量部、流動パラフィン１重量部、トリオクタン酸グ
リセリル１０重量部及び防腐剤の適量を、常法に従って
加熱溶解し、これにＬ−乳酸２重量部、１．３−ブチレ
ングリコール５重量部及び精製水６６重量部を加え、ホ
モゾナイザーにかけ乳化し、更に香料の適量を加えて撹
拌混合しクリームを製造した。 本品は、日焼は止め、美肌剤、色白剤などとして有利に
利用できる。 ［発明の効果］ 本文で述べたごとく、本発明の新規物質であるナリンジ
ンにＤ−グルコース残基が等モル以上α結合しているα
−グリコジル　ナリンジンは、水溶性に優れ、苦味を有
し、毒性の懸念もなく、生体内で容易にナリンジンとＤ
−グルコースとに加水分解され、ナリンジン本来の生理
活性を発揮する。 また、このα−グリコジル　ナリンジンが、ナリンジン
とα−グルコシル糖化合物とを含有する溶液に、糖転移
酵素を作用きせる生化学的手法により容易に生成できる
ことより、経済性に優れ、その工業実施も容易である。 更に、ナリンジンの仕込濃度を高めて反応きせることか
でき、α−グリコジル　ナリンジンを容易に高濃度に生
成しうろことを見い出し、併せて、この反応液の精製に
際して、反応液を多孔性合成吸着剤と接触させてα−グ
リコジル　ナリンジンを精製できることも見い出したこ
とにより、α−グリコジル　ナリンジンの大量製造を極
めて容易にするものである。 また、このようにして得られるα−グリコシルナリンジ
ンは、水溶性良好、耐光性・安定性良好、充分な生理活
性を発揮するなどの特徴を有しており、安全性の高い天
然型“のビタミンＰ強化剤としてばかりでなく、苦味剤
、酸化防止剤、安定剤、品質改良剤、予防剤、治療剤、
紫外線吸収剤、劣化防止剤などとして、飲食物、嗜好物
、飼料、餌料、抗感受性疾患剤、美肌剤、色白剤など化
粧品、更には、プラスチック製品などに有利に利用きれ
る。 従って、本発明によるα−グリコジル　ナリンジンの工
業的製造法とその用途の確立は、飲食品、化粧品、医薬
品、プラスチック産業における工業的意義が極めて大き
い。

【図面の簡単な説明】

第１図は、本発明の一例として、α−グリコジル　ナリ
ンジン標品［１１］の赤外線吸収スペクトル図を示す。 第２図は、対照として、ナリンジンの赤外線吸収スペク
トル図を示す。

Claims (6)

【特許請求の範囲】
1. （１）ナリンジンにＤ−グルコース残基が等モル以上α
   結合しているα−グリコシルナリンジン。
2. （２）ナリンジンとα−グルコシル糖化合物とを含有す
   る溶液に糖転移酵素を作用させてα−グリコシルナリン
   ジンを生成せしめ、これを採取することを特徴とするα
   −グリコシルナリンジンの製造方法。
3. （３）ナリンジンとα−グルコシル糖化合物とを含有す
   る溶液に糖転移酵素を作用させてα−グリコシルナリン
   ジンを生成せしめ、次いで、この溶液を多孔性合成吸着
   剤に接触させて精製し、α−グリコシルナリンジンを採
   取することを特徴とするα−グリコシルナリンジンの製
   造方法。
4. （４）ナリンジンにＤ−グルコース残基が等モル以上α
   結合しているα−グリコシルナリンジンを含有せしめた
   飲食物。
5. （５）ナリンジンにＤ−グルコース残基が等モル以上α
   結合しているα−グリコシルナリンジンを有効成分とし
   て含有せしめた抗感受性疾患剤。
6. （６）ナリンジンにＤ−グルコース残基が等モル以上α
   結合しているα−グリコシルナリンジンを有効成分とし
   て含有せしめた化粧品。