JPH04128299A - 新規なペプチド - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】

［０００月

【産業上の利用分野］ 本発明は新規ペプチドに関し、より詳しくはウナギ脳か
ら得た利尿ペプチドに関する。本発明はまた、このペプ
チドを有効成分とする降圧剤、利尿剤および血管拡張剤
にも関し、さらにこのペプチドに対する抗体を含有する
材料とその使用方法にも関する。 ［０００２］ 【従来の技術】 心臓あるいは脳が、体液バランス調節に重要な働きを担
うホルモンを分泌していることは既に実証されており、
それぞれ、心房性ナトリウム利尿ペプチドＧＮＰと略称
する）　および脳ナトリウム利尿ペプチド（ＢＮＰと略
称する）と呼ばれている。このＡＮＰおよびＢＮＰに関
する従来の知見を以下に述べる。 ［０００３］ 心筋細胞内に特殊な顆粒が存在しくＫ１５ｃｈ、　Ｅｘ
ｐ、　Ｍｅｄ、　Ｓｕｒｇ、　１６１　：５０８−５１
６．１９５６）内分泌細胞内のペプチドホルモン貯蔵顆
粒と形態学的によく似ていることが指摘されていた（Ｊ
ａｍｉｅｓｏｎ、　Ｊ、　Ｃｅｌ　１．　Ｂｉｏｌ、　
２３　：　１５１−１７２．１９６４）。ｄｅ　Ｂｏｌ
ｄ等はラット心房抽出液を他のラットに静注し、尿量お
よびナトリウム利尿の増加を観察した（Ｌｉｆｅ　Ｓｃ
ｉ、　２８：８９−９４．１９８１）。さらに、Ｃｕｒ
ｒｉｅ等はヒト、ウサギ、ブタおよびラットの心房中に
ナトリウム利尿作用を有するペプチド様物質の存在を示
唆し、これが、平滑筋弛緩活性をも有することを見出し
た（Ｓｃｉｅｎｃｅ　２２１ニア１−７３．１９８３）
。 ［０００４］ この平滑筋弛緩活性を目印に、寒川等によって、ヒト心
房より単離されたペプチドの構造決定がなされた（ＢＢ
ＲＣ１１８：１３１−１３９．１９８４）。その後、ラ
ット（寒川等、ＢＢＲＣ１２１：５８５−５９２．１９
８４）　　マウス、ウサギ、イヌ（及用等、ＢＢＲＣ１
３２：８９２−８９９゜１９８５）、ブタ（Ｆｏｒｓｓ
ｍａｎｎ等、　Ｃｅ１ｌ　Ｔｉ５ｓｕｅ　Ｒｅｓ、　２
３８：４２５−４３０．１９８４）、カエル（成田等、
　ＢＢＲＣ１５５：１３３８−１３４５．１９８８）　
　ニッＦｒバ宮田等、ＢＢＲＣ１５５：１３３０−１３
３７．１９８８）のＡＮＰの構造が決定された。また、
脳からも同様の活性物質が単離同定され、構造の相違か
らＢＮＰとよばれている。これまでに、ブタ（須藤等、
ＢＢＲＣ１５５ニア２６−７３２、１９８８）　　ヒト
（須藤等、ＢＢＲＣ１５９：１４２７−１４３４．１９
８９）　　ラット（小島等、ＢＢＲＣ１５９：１４２０
−１４２６．１９８９）のＢＮＰが単離同定されている
。 ［０００５］ これらはいずれも、７位のシスティンと２３位のシステ
ィン間のＳ−８結合により形成された１７個のアミノ酸
残基の環状構造は高度に保存されているが′、各アミノ
酸残基における置換がみられ、生物学的活性に差違があ
る。 ［０００６］ ＡＮＰおよびＢＮＰの治療効用については、水、ナトリ
ウム利尿および血管平滑筋弛緩作用によって、利尿剤お
よび血管拡張剤としての利用が予想される。例えば、水
分の過剰停滞が見られるうっ血性心不全に対して利尿剤
として、また、血管拡張効果が重要な役割を果たす高血
圧症の治療、特に本態性（悪性）高血圧症の治療に利尿
および血管拡張作用の両方の特性を有するＡＮＰまたは
ＢＮＰが有用であることが期待される。また、腎血流量
低下のみられる腎機能低下症に対し、血管拡張作用が腎
血流量増大をもたらして症状を改善しうろことが、さら
に、臓器移植時に摘出臓器の洗浄液にＡＮＰまたはＢＮ
Ｐを用いると、拡張した血管内の不用物の洗浄効果と被
提供者血液の十分な循環、順応を促し成功率を上昇させ
ることも期待される。 ［０００７］ 治療剤の具体例としては、ヒ）　ＡＮＰからなる利尿剤
が特公昭６３−１９５２０号公報にラットＡＮＰからな
る利尿剤が特開昭６０−１０５６９７号公報、特開昭６
０−１８４０９７号公報、特開昭６０−２１４７９７号
公報に開示されている。　しかしながら、これまでに見
出された利尿ペプチドは、いずれも血中での生理活性の
消失は速やかであった。 例えばヒ）　ＡＮＰでは血中において約１００秒で半減
する（中尾等、Ｅｕｒ、　Ｊ、　ＣＩ　ｉｎ、　Ｐｈａ
ｒｍａｃｏｌ、　３１　：１０１−１０３．１９８６）
。 ［０００８］

【発明が解決しようとする課題】

上述のように、従来の利尿ペプチドは、血中での生理活
性の持続性が不十分であった。 本発明は、持続的生理活性を有する利尿ペプチドおよび
それを有効成分とする実用上有用な薬剤を提供すること
を目的とするものである。 ［０００９］

【課題を解決するための手段】

本発明者等は、薬理活性スペクトルを変化させることな
く、持続的生理活性を有する利尿ペプチドを見出して、
実用性の高い薬剤を得るための１つの方法として、この
ようなペプチドを自然界より見出し単離同定する方法を
採用しな。ウナギは海水および淡水の両相を移動し生息
するため、外界のナトリウム濃度の激変に適応しうる体
液バランス調節機能を有することが推測される。本発明
者らは、このような事実に着目し、この調節機能に強力
な活性をもつ利尿ペプチドの存在を予測して、単離同定
の対象としてウナギを選択した。ウナギ利尿ペプチドの
うちＡＮＰについては、本発明者等はすでにウナギの心
房より単離して構造を決定しすぐれた利尿作用および降
圧作用をもつことを見出した（特願平１−２１０８３６
号）。 ［００１０］ 本発明者等はさらにウナギの脳の利尿ペプチドについて
も研究を行い、その結果、ウナギの脳より利尿ペプチド
を単離し、これが従来の利尿ペプチドと異なった構造を
有する新規なペプチドであること、そしてこのペプチド
が優れた利尿作用、降圧作用および平滑筋弛緩作用を有
し、しかもその生理活性の持続性が優れていることを見
出し、本発明を完成した。以下、ウナギの脳ナトリウム
利尿ペプチドをウナギＢＮＰと略称する。 ［００１１］ 本発明は、ウナギ脳より得られ、２２個のアミノ酸より
構成される、利尿作用降圧作用および平滑筋弛緩作用を
有するペプチドである。 このウナギＢＮＰは、後記配列表の配列番号１で示され
るアミノ酸配列を有する。但し、このアミノ酸配列にお
いて６位と２２位のシスティン残基は−５−８−結合に
より架橋されていてもよい。また、このシスティン間の
結合はジカルボキシル結合であってもよい。 従って、本発明はまた、別の側面から、配列番号１のア
ミノ酸配列を有するペプチドおよびその塩に関する。 ［００１２］ この明細書で使用するアミノ酸の略号は以下の通りであ
る。 三文字表記 アスパラギン：　　Ａｓｎ、　　アスパラギン酸：Ａｓ
ｐアルギニン　：　Ａｒｇ、　イソロイシン：　　　Ｉ
ｌｅグリシン　　：Ｇｌｙ、　システィン　：　　　Ｃ
ｙｓセリン　　　：　Ｓｅｒ、　　フェニルアラニン：
　Ｐｈｅ。 トリプトファン：　　Ｔｒｐ、リシン　　　　：　　Ｌ
ｙｓ、ロイシン　　　：　Ｌｅｕ ［００１３］ さらに、本発明は上記ウナギＢＮＰまたは配列番号１の
アミノ酸配列で表されるペプチドに対する抗体を含有す
る抗体含有材料も提供する。またこの抗体含有材料とウ
ナギＢＮＰまたは配列１のアミノ酸配列で表されるペプ
チドまたはそのペプチドを標識したペプチドとを用いて
利尿ペプチドを測定する方法にも関する［００１４］ 本発明のペプチドは、ウナギの脳から単離精製するか、
あるいはアミノ酸からの化学合成によって製造できる。 ウナギ脳から単離精製するには、抽出、ゲル濾過クロマ
トグラフィー　イオン交換クロマトグラフィー　高速液
体クロマトグラフィー　電気泳動、再結晶等のペプチド
の単離精製に通常使用される処理を組み合わせて用いる
ことができるが好ましい具体例としては、ウナギより摘
出した脳を凍結させ粉砕後、例えば寒月等のＮａｔｕｒ
ｅ　３１３：３９７−４００．１９８５に示された方法
に準拠して粗抽出を行ない、粗抽出液を分子ふるいクロ
マトグラフィー　イオン交換クロマトグラフィー、逆相
高速液体クロマトグラフィーに順次実行させることによ
り行なうことができる。 これはヒト、ラット、カエル、ニワトリＡＮＰの単離方
法に準じた方法であるが、これらのＡＮＰに比較してウ
ナギは高脂肪であるため、脱脂操作を加えることが望ま
しい。各単離精製段階においては、Ｃｕｒｒｉｅ等の発
見した平滑筋弛緩作用（Ｓｃｉｅｎｃｅ　２２１：５８
５−５９２．１９８４）および丸茂等が開発したラジオ
イムノアッセイ（ＢＢＲＣ１３７：２３１−２３６．１
９８６　）を目印とした。 ［００１５］ 本発明のペプチドを化学合成するには、慣用のペプチド
合成方法が使用できるが、例えば製送等がヒ）　ＡＮＰ
類似体を化学合成した方法に準じた溶液化学合成法によ
って行なうことができる。その他、遺伝子導入による発
現を利用した生物学的合成のような方法も使用できる。 このようにして合成したペプチドをヨウ素による酸化に
よってジスルフィド結合させる。あるいはジカルボキシ
ル結合させても良い。その後、例えばイオン交換クロマ
トグラフィー等の精製手段によって精製する。精製度の
確認は、薄層クロマトグラフィー、逆相高速液体クロマ
トグラフィー　イオン交換クロマトグラフィーにて実施
することができる。 ［００１６］ 本発明ペプチドのアミノ酸配列の決定は、上記のように
して高度に単離精製したウナギＢＮＰを、自動アミノ酸
分解装置を用いたエドマン分解によって、アミノ末端よ
り段階的に切断し、高速液体クロマトグラフィーによっ
て行なった。 本発明ペプチドの分子量はゲル濾過法により測定して約
２４００である。 ［００１７］ 利尿ペプチドの定量は、利尿ペプチドの代謝動態、生理
変動、薬剤として投与時の副作用発現、高血圧等の病態
発生機序等の解明に有効である。 本発明では、ウナギＢＮＰの測定方法として、ウナギＢ
ＮＰに対する抗体を含有する材料を用いた免疫検定法に
より行う方法を確立した。この抗体含有材料としては、
例えば、ウナギＢＮＰを免疫原として哺乳動物に免疫し
て得られた抗血清が使用できる。 ［００１８］ 免疫検定法の１例としては、本発明者らにより確立され
た、上記抗血清と放射性同位体で標識したウナギＢＮＰ
を用いたラジオイムノアッセイが例示される。 標識ウナギＢＮＰは、ウナギＢＮＰをポルトン−ハンタ
ー法により放射化して１２５■−ウナギＢＮＰとするか
、あるいは合成ペプチドのアミノ末端にさらにチロシン
残基が結合したＴｙｒＯウナギＢＮＰを合成し、これに
ペルオキシダーゼ法により放射化することにより作製で
きる。このラジオイムノアッセイ法によれば、血液、組
織抽出液、組織培養液等の体液サンプル中のウナギＢＮ
Ｐの濃度を測定できる。また、これはブタＣ型利尿ペプ
チド（ブタＧＮＰ）の測定にも使用可能である。免疫検
定法としてはラジオイムノアッセイに限らずエンザイム
イムノアッセイ等も使用できる。 ［００１９］ 本発明の抗体含有材料、特に抗血清は、さらに組織染色
用にも適用することができるためウナギＢＮＰの体内分
布を研究するための手段としても有用である。 また、遺伝子組み換えによりペプチドを産生かせる場合
に遺伝子発現産物の同定にも使用できる。 上記方法等で得た標識ウナギＢＮＰは、受容体分布、利
尿ペプチドの代謝速度、排泄機構の解明にも利用するこ
とができる。 ［００２０］

【作用】

本発明ペプチドは利尿作用、降圧作用および平滑筋弛緩
作用を有するため、利尿剤、降圧剤および血管拡張剤と
して有用である。 さらに、本発明ペプチドは従来の利尿ペプチドに比べて
作用の持続時間が長いという利点を有する。 治療剤として投与する場合は、静脈内注射、筋肉的注射
、皮下注射等の非経口的投与、あるいは経口投与により
、または点眼剤等の局所投与により行うことができるが
、静脈内注射が好ましい。投与量は０．０１〜１００ｎ
　ｍｏｌ　７ｋｇであり、静脈内注射の場合、体重およ
び期待効果に応じた投与量を通常１〜１０ｍ１の生理的
食塩水に溶解して用いる。 ［００２１］ 本発明ペプチドを薬剤として用いる場合は、該ペプチド
および添加剤を含む乳剤、水和剤、錠剤、水溶液、粉剤
、粒剤、カプセル剤、火剤等の種々の形態に製剤化して
使用できる。 上記製剤化に用いる添加剤には薬理的に許容しうる賦形
剤、崩壊剤、潤滑剤、結合剤、分散剤、可塑剤、充填剤
、担体等が使用できる。賦形剤としては乳糖、ぶどう糖
等が、崩壊剤としては澱粉、寒天末等が、潤滑剤として
はタルク、流動パラフィン等が、結合剤としては単シロ
ップ、エタノール等が、分散剤としてはメチルセルロー
ス、エチルセルロース等が、可塑剤としてはグリセリン
、澱粉等が例示できる。 本発明の抗体含有材料は、標識したウナギＢＮＰと共に
ラジオイムノアッセイ等の免疫検定法によりウナギＢＮ
ＰあるいはブタＧＮＰの濃度を測定するのに使用でき、
高血圧等の病態発生機序の解明に有用である。 ［００２２］

【実施例】

以下、本発明を実施例によって詳細に説明する。

【実施例１】 ウナギ脳からのウナギＢＮＰＯ単離 ２０００匹のウナギから脳８６ｇを摘出し、７倍量の蒸
留水中で５分間煮沸した。直ちに冷却後、酢酸を添加し
ＩＭとし、ポリトロンミキサーでホモジナイズすること
により抽出した。得られた抽出液を２５０００　Ｘｇで
３０分間遠心分離し、上清に冷却したアセトンを滴加し
て６７％とした後、１６０００　Ｘｇで３０分間遠心分
離して上清を得た。上溝を減圧濃縮乾固し、得られた残
渣をＩＭ酢酸３０ｍ１に溶解後、２１の冷却アセトンを
加え、４℃で一昼夜放置した。その後１６０００　Ｘｇ
で３０分間遠心分離し、沈渣３０５ｍｇを得た。この沈
渣をＩＭ酢酸３９ｍ１に再溶解し、５ｅｐｈａｄｅｘ　
Ｇ２５（７アルマシヤ製、５　Ｘ８２ｃｍ；溶離液：１
Ｍ酢酸：流速ニア０　ｍｌ／時間；フラクションサイズ
：６．５ｍ１）でゲル濾過および脱塩を行った。 ［００２３］ ヒヨコ直腸標本弛緩活性のあるフラクションを集め、１
Ｍ酢酸溶液で平衡にした５Ｐ−３ｅｐｈａｄｅｘ　Ｃ−
２５（７フルマシャ製、１．６　Ｘ１７ｃｍ）に供与し
、１Ｍ酢酸、２Ｍピリジン溶液および２Ｍピリジン−１
Ｍ酢酸溶液（ｐＨ５，０）で各々溶出し、５Ｐ−Ｉ、Ｓ
Ｐ　−ＩＩ、５Ｐ−ＩＩＩのフラクションを得た。５Ｐ
−ＩＩＩを凍結乾燥し、その乾燥物（６０ｎｇ）を１Ｍ
酢酸に溶解し５ｅｐｈａｄｅｘ　Ｇ−７５によりゲル濾
過（２，６Ｘ７１ｃｍ；溶離液：１Ｍ酢酸；流速：３６
　ｍｌ／時間；フラクションサイズ：５ｍ１）　した。 ヒヨコ直腸標本弛纏活性のあるフラクション（３８−６
４画分）を陽イオン交換高速クロマトグラフィー（日本
分光製Ｂｉｏｔｉｎｅ　ＩＥＣ−ＣＭ、？、５　Ｘ７５
ｍｍ、流速：１ｍｌ／分、フラクションサイズ：２ｍ１
）に付した。１０％アセトニトリルを含むぎ酸アンモニ
ウムｐＨ６，８の１０ｍＭからＩＭの３０分間直線勾配
法により分画した。活性のあるフラクション（２３画分
）を逆相高速液体クロマトグラフィー（脂化成製、Ａｓ
ａｈｉｐａｋ　Ｇｅｌ　０ＤＰ−５０，４，６ｘ２５０
ｍｍ；流速１　ｍｌ／分）に付した。０．１％トリフル
オロ酢酸を含むアセトニトリルの１０％がら６ｏ％の４
０分間直線勾配法により分画し、活性のあるフラクショ
ンを再度逆相高速液体クロマトグラフィー（０，１％ト
リフルオロ酢酸を含むアセトニトリルの１５％から３０
％の４０分間直線勾配法）によって、純粋なウナギＢＮ
Ｐ（４００ｐｍｏｌ　　ｅｅｌＡＮＰ等量）を得た（第
１図）。 ［００２４］

【実施例２】 ウナギＢＮＰの合成 配列番号ｌのアミノ酸配列を有するペプチドの合成をＹ
ａｎａｇｉｓａｗａ等の方法（Ｐｒ。 Ｎａｔｌ、　Ａｃａｄ、　Ｓｃｉ、　ＵＳＡ　８５：６
９６４−６９６７、１９８８）の方法に準じて行った。 すなわち、Ａｐｐｌｉｅｄ　Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ製全
自動ペプチド合成機を用い、フェニルアセトアミドメチ
ル−レジンを固相とし、Ｆｍｏｃ法によるアミノ酸のカ
ップリングを行い、最終的に９５％トリフルオロ酢酸に
よって固相からペプチドを切り出した。９９．４％以上
の純度で合成品が得られた。得られた直鎖ウナギＢＮＰ
のシスティンの保護基をヨウ素による酸化によって除去
すると同時にスルフィド結合が形成された。合成品は、
逆相高速液体クロマトグラフィー（Ｗａｔｅｒｓ　Ｐｒ
ｅｐＬＣＳｙｓｔｅｍ　５００）によって精製した。次
いで前述の逆相高速液体クロマトグラフィー（Ａｓａｈ
ｉｐａｋ　Ｇｅｌ　０ＤＰ−５０）によって再精製を行
い、同時にウナギ脳から抽出精製した天然のウナギＢＮ
Ｐと同一の溶出位置にあることを確認した。 ［００２５］

【実施例３】 実施例２で合成して得たペプチドをＴｒｉｔｏｎＸ−３
０５（０，０１％）を含む生理食塩水に溶解し、１０−
４モル／ｌ濃度の溶液を注射剤とした。 この注射剤を用いて降圧作用および利尿作用を検討した
。 ［００２６］ （試験法） 利尿作用 ＳＤ系ラットの膀胱に挿入したカニユーレから尿を採取
した。なお、注射剤は大腿静脈に注入した。 降圧作用 （１）　Ｓ　Ｄ系ラットの大腿動脈に挿入したカニユー
レによって血圧を測定した。なお、注射剤は大腿静脈に
注入した。 （２）ウナギの背面動脈にカニユーレを挿入し、血圧を
測定した。注射剤は腹面静脈に注入した。 ［００２７］ 上記試験方法によりラットおよびウナギにおいて本発明
ペプチドの薬理効果を検討した結果、図２に示すように
ラットおよびウナギにおいて降圧作用が確認され、図３
に示すようにラットにおいて利尿作用が確認された。 なお、図２および図３では、＊印は生理金塩水のみを注
入したものに比較して有意差が認められた場合を示す。 ［００２８］

【実施例４】 降圧作用の持続時間の検討 ラットにヒ）ＡＮＰを５　ｎ　ｍｏｌ／ｋｇ注入した場
合、血圧の降下作用は１１．８±２．０分（ｎ＝９）持
続したのに対して、０．０５ｎ　ｍｏｌ／ｋｇのウナギ
ＢＮＰでは１７．１±２．８分（ｎ＝９）持続した。こ
れより本発明のウナギＢＮＰは生理活性の持続時間が長
いことが確かめられた。 ［００２９］

【実施例５】 実施例２で合成したペプチドとサイログロブリンをカッ
プリングさせた免疫原を用いて、家兎に免疫して抗血清
を得た。 合成ウナギＢＮＰをポルトン−ハンター法により放射化
した１２５■−ウナギＢＮＰを作製し、逆相高速液体ク
ロマトグラフィーを用いて精製し、標識ウナギＢＮＰを
得た。さらに標識ウナギＢＮＰとして、別の作製方法、
即ち、実施例２で合成したペプチドのアミノ末端にチロ
シン残基を結合させてＴｙｒＯウナギＢＮＰを合成し、
これをペルオキシダーゼ法により放射化する方法で作製
したものも用いた。 ［００３０１ した。図４に示すラジオイムノアッセイの標準曲線によ
り、種々の体液サンプルのウナギＢＮＰ濃度を測定する
ことができた。このラジオイムノアッセイによればブタ
ＧＮＰを測定することも可能であった。 なお、ペルオキシダーゼ法およびポルトン−ハンター法
による標識ウナギＢＮＰのラジオイムノアッセイ上の挙
動は同一であった。 ［００３１］

【発明の効果】

本発明によれば、新規なペプチドを提供することができ
、このペプチドは優れた利尿作用、降圧作用および平滑
筋弛緩作用を有しており、しかも生理活性の持続時間が
従来の利尿ペプチドに比べて長いので、降圧剤、利尿剤
、血管拡張剤として有用である。 また、本発明ペプチドに対する特異的抗体を含有する抗
体含有材料を用いて利尿ペプチドを測定することができ
、これは高血圧等の病態発生機序の解明に有効である。

【配列表】

配列番号：１ 配列の長さ：２２ 配列の型ニアミノ酸 トポロジー：両形態 配列の種類：ペプチド 起源 生物名：アンギラ　ヤポニカ（Ａｎｇｕｉｌｌａ　Ｊａ
ｐｏｎｉｃａ）組織名：脳 配列 Ｇｌｙ　Ｔｒｐ　Ａｓｎ　Ａｒｇ　Ｇｌｙ　Ｃｙｓ　Ｐ
ｔｒｅ　Ｇｌｙ　Ｌｅｕ　Ｌｙｓ　Ｌｅｕ　Ａｓｐ　Ａ
ｒｇＩｌｅ　Ｇｌｙ　５ｅｒＬｅｕ　Ｓｅｒ　Ｇｌｙ　
Ｌｅｕ　Ｇｌｙ　Ｃｙｓ

【図面の簡単な説明】

【図１】 逆相高速液体クロマトグラフィーによるウナギＢＮＰ

【
図２】 本発明ペプチドの降圧作用を示す図である。

【図３】 本発明ペプチドの利尿作用を示す図である。

【図４】 ラジオイムノアッセイの標準曲線を示す図である。 の溶出を示す図である。

【書類芯】

【図１】

【図２】 図面

【図３】

【図４】

Claims (7)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】ウナギの脳より得られ、２２個のアミノ酸
   から構成される、利尿作用、降圧作用および平滑筋弛緩
   作用を有するペプチド。
2. 【請求項２】次のアミノ酸配列を有するペプチドおよび
   その塩。 【遺伝子配列があります】 （但し、６位と２２位のシステイン残基が−Ｓ−Ｓ−結
   合により架橋されていてもよい
3. 【請求項３】請求項１ま
   たは２記載のペプチドに対する特異的抗体を含有する抗
   体含有材料。
4. 【請求項４】請求項３記載の抗体含有材料と、請求項１
   もしくは２記載のペプチドまたは該ペプチドを標識した
   ペプチドとを用いた免疫検定法により、利尿ペプチドを
   測定することを特徴とする利尿ペプチドの測定方法。
5. 【請求項５】請求項１または２記載のペプチドまたはそ
   の塩を有効成分とする降圧剤。
6. 【請求項６】請求項１または２記載のペプチドまたはそ
   の塩を有効成分とする利尿剤。
7. 【請求項７】請求項１または２記載のペプチドまたはそ
   の塩を有効成分ととする血管拡張剤。