JPH04122858A - 免疫測定法 - Google Patents
免疫測定法Info
- Publication number
- JPH04122858A JPH04122858A JP24527590A JP24527590A JPH04122858A JP H04122858 A JPH04122858 A JP H04122858A JP 24527590 A JP24527590 A JP 24527590A JP 24527590 A JP24527590 A JP 24527590A JP H04122858 A JPH04122858 A JP H04122858A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- reaction
- antigen
- antibody
- added
- solution
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 title claims abstract description 25
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims abstract description 102
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 claims abstract description 57
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims abstract description 53
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims abstract description 53
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims abstract description 53
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 claims abstract description 52
- 150000002338 glycosides Chemical class 0.000 claims abstract description 51
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 23
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 claims abstract description 17
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 claims abstract description 8
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims abstract description 7
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims abstract description 7
- 239000000178 monomer Substances 0.000 claims abstract description 7
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 claims abstract description 6
- 229920003169 water-soluble polymer Polymers 0.000 claims abstract description 4
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 9
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 abstract description 14
- 239000000203 mixture Substances 0.000 abstract description 9
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 abstract description 4
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 abstract description 4
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 abstract description 3
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 abstract description 2
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 abstract description 2
- 238000000034 method Methods 0.000 description 61
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 61
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 54
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 44
- 239000004816 latex Substances 0.000 description 41
- 229920000126 latex Polymers 0.000 description 41
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 32
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 30
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 28
- 230000004520 agglutination Effects 0.000 description 26
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical class CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 22
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 21
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 18
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 16
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 16
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 16
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 15
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 15
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 15
- KUQRLZZWFINMDP-BGNLRFAXSA-N 2-[(3r,4s,5s,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxyethyl 2-methylprop-2-enoate Chemical compound CC(=C)C(=O)OCCOC1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O KUQRLZZWFINMDP-BGNLRFAXSA-N 0.000 description 14
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 14
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 13
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 13
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 12
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 10
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 10
- ROOXNKNUYICQNP-UHFFFAOYSA-N ammonium persulfate Chemical compound [NH4+].[NH4+].[O-]S(=O)(=O)OOS([O-])(=O)=O ROOXNKNUYICQNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 10
- 229920001519 homopolymer Polymers 0.000 description 10
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 10
- 208000006379 syphilis Diseases 0.000 description 10
- CERQOIWHTDAKMF-UHFFFAOYSA-M Methacrylate Chemical compound CC(=C)C([O-])=O CERQOIWHTDAKMF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 9
- 229940063557 methacrylate Drugs 0.000 description 9
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 9
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- -1 acibinose Chemical compound 0.000 description 8
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 8
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 8
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 8
- 102100032752 C-reactive protein Human genes 0.000 description 7
- 206010029719 Nonspecific reaction Diseases 0.000 description 7
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 7
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 7
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 7
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 7
- 230000035931 haemagglutination Effects 0.000 description 7
- 238000000691 measurement method Methods 0.000 description 7
- 206010070834 Sensitisation Diseases 0.000 description 6
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 6
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 6
- 230000008313 sensitization Effects 0.000 description 6
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 6
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 6
- 229910001870 ammonium persulfate Inorganic materials 0.000 description 5
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 5
- 239000000047 product Substances 0.000 description 5
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 5
- 239000012429 reaction media Substances 0.000 description 5
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 5
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 5
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 5
- OZAIFHULBGXAKX-UHFFFAOYSA-N 2-(2-cyanopropan-2-yldiazenyl)-2-methylpropanenitrile Chemical compound N#CC(C)(C)N=NC(C)(C)C#N OZAIFHULBGXAKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- HRPVXLWXLXDGHG-UHFFFAOYSA-N Acrylamide Chemical compound NC(=O)C=C HRPVXLWXLXDGHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 4
- CERQOIWHTDAKMF-UHFFFAOYSA-N Methacrylic acid Chemical compound CC(=C)C(O)=O CERQOIWHTDAKMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 4
- PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N Sodium azide Chemical compound [Na+].[N-]=[N+]=[N-] PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 4
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 4
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 description 4
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 4
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 4
- 102000013415 peroxidase activity proteins Human genes 0.000 description 4
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 4
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 4
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 4
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 4
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 4
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 3
- WOBHKFSMXKNTIM-UHFFFAOYSA-N Hydroxyethyl methacrylate Chemical compound CC(=C)C(=O)OCCO WOBHKFSMXKNTIM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WHNWPMSKXPGLAX-UHFFFAOYSA-N N-Vinyl-2-pyrrolidone Chemical compound C=CN1CCCC1=O WHNWPMSKXPGLAX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000030452 Transient pseudohypoaldosteronism Diseases 0.000 description 3
- 241000589884 Treponema pallidum Species 0.000 description 3
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 3
- 239000012491 analyte Substances 0.000 description 3
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229910001873 dinitrogen Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 3
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 3
- 230000008105 immune reaction Effects 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- FYGDTMLNYKFZSV-UHFFFAOYSA-N mannotriose Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(CO)OC(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)C(O)C1O FYGDTMLNYKFZSV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229940093429 polyethylene glycol 6000 Drugs 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 3
- 238000001308 synthesis method Methods 0.000 description 3
- 210000001550 testis Anatomy 0.000 description 3
- HOVAGTYPODGVJG-UVSYOFPXSA-N (3s,5r)-2-(hydroxymethyl)-6-methoxyoxane-3,4,5-triol Chemical compound COC1OC(CO)[C@@H](O)C(O)[C@H]1O HOVAGTYPODGVJG-UVSYOFPXSA-N 0.000 description 2
- SMZOUWXMTYCWNB-UHFFFAOYSA-N 2-(2-methoxy-5-methylphenyl)ethanamine Chemical compound COC1=CC=C(C)C=C1CCN SMZOUWXMTYCWNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N 2-Propenoic acid Natural products OC(=O)C=C NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DBTMGCOVALSLOR-UHFFFAOYSA-N 32-alpha-galactosyl-3-alpha-galactosyl-galactose Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(OC2C(C(CO)OC(O)C2O)O)OC(CO)C1O DBTMGCOVALSLOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920002126 Acrylic acid copolymer Polymers 0.000 description 2
- 108010022366 Carcinoembryonic Antigen Proteins 0.000 description 2
- 102100025475 Carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule 5 Human genes 0.000 description 2
- RXVWSYJTUUKTEA-UHFFFAOYSA-N D-maltotriose Natural products OC1C(O)C(OC(C(O)CO)C(O)C(O)C=O)OC(CO)C1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 RXVWSYJTUUKTEA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 2
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 2
- 238000011891 EIA kit Methods 0.000 description 2
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- 101000942118 Homo sapiens C-reactive protein Proteins 0.000 description 2
- 101000922020 Homo sapiens Cysteine and glycine-rich protein 1 Proteins 0.000 description 2
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000003377 acid catalyst Substances 0.000 description 2
- 125000005396 acrylic acid ester group Chemical group 0.000 description 2
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000003429 anti-cardiolipin effect Effects 0.000 description 2
- MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N beta-D-galactosamine Natural products NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- 150000004683 dihydrates Chemical class 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 238000005227 gel permeation chromatography Methods 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 239000011964 heteropoly acid Substances 0.000 description 2
- 102000051143 human CRP Human genes 0.000 description 2
- FZWBNHMXJMCXLU-BLAUPYHCSA-N isomaltotriose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O)O1 FZWBNHMXJMCXLU-BLAUPYHCSA-N 0.000 description 2
- AMXOYNBUYSYVKV-UHFFFAOYSA-M lithium bromide Chemical compound [Li+].[Br-] AMXOYNBUYSYVKV-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- HOVAGTYPODGVJG-VOQCIKJUSA-N methyl beta-D-galactoside Chemical compound CO[C@@H]1O[C@H](CO)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O HOVAGTYPODGVJG-VOQCIKJUSA-N 0.000 description 2
- HOVAGTYPODGVJG-UHFFFAOYSA-N methyl beta-galactoside Natural products COC1OC(CO)C(O)C(O)C1O HOVAGTYPODGVJG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NWVVVBRKAWDGAB-UHFFFAOYSA-N p-methoxyphenol Chemical compound COC1=CC=C(O)C=C1 NWVVVBRKAWDGAB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 2
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 2
- 125000001436 propyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 2
- 238000001226 reprecipitation Methods 0.000 description 2
- FQENQNTWSFEDLI-UHFFFAOYSA-J sodium diphosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O FQENQNTWSFEDLI-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 2
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 2
- FYGDTMLNYKFZSV-BYLHFPJWSA-N β-1,4-galactotrioside Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@H](CO)O[C@@H](O[C@@H]2[C@@H](O[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]2O)CO)[C@H](O)[C@H]1O FYGDTMLNYKFZSV-BYLHFPJWSA-N 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HEGSGKPQLMEBJL-RQICVUQASA-N (2r,3s,4s,5r)-2-(hydroxymethyl)-6-octoxyoxane-3,4,5-triol Chemical compound CCCCCCCCOC1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O HEGSGKPQLMEBJL-RQICVUQASA-N 0.000 description 1
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CUJMXIQZWPZMNQ-XYYGWQPLSA-N 13,14-dihydro-15-oxo-prostaglandin E2 Chemical compound CCCCCC(=O)CC[C@H]1[C@H](O)CC(=O)[C@@H]1C\C=C/CCCC(O)=O CUJMXIQZWPZMNQ-XYYGWQPLSA-N 0.000 description 1
- MSWZFWKMSRAUBD-GASJEMHNSA-N 2-amino-2-deoxy-D-galactopyranose Chemical compound N[C@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O MSWZFWKMSRAUBD-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N 2-amino-2-deoxy-D-glucopyranose Chemical compound N[C@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N 0.000 description 1
- MSWZFWKMSRAUBD-CBPJZXOFSA-N 2-amino-2-deoxy-D-mannopyranose Chemical compound N[C@@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O MSWZFWKMSRAUBD-CBPJZXOFSA-N 0.000 description 1
- OMIGHNLMNHATMP-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxyethyl prop-2-enoate Chemical compound OCCOC(=O)C=C OMIGHNLMNHATMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001763 2-hydroxyethyl(trimethyl)azanium Substances 0.000 description 1
- GWZMWHWAWHPNHN-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxypropyl prop-2-enoate Chemical compound CC(O)COC(=O)C=C GWZMWHWAWHPNHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OELQSSWXRGADDE-UHFFFAOYSA-N 2-methylprop-2-eneperoxoic acid Chemical compound CC(=C)C(=O)OO OELQSSWXRGADDE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PZPXDAEZSA-N 4β-mannobiose Chemical compound O[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PZPXDAEZSA-N 0.000 description 1
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-M Acrylate Chemical compound [O-]C(=O)C=C NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 102100023635 Alpha-fetoprotein Human genes 0.000 description 1
- 101100139907 Arabidopsis thaliana RAR1 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 108010074051 C-Reactive Protein Proteins 0.000 description 1
- 235000019743 Choline chloride Nutrition 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-CUHNMECISA-N D-Cellobiose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-CUHNMECISA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 1
- HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N D-ribofuranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H]1O HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090000371 Esterases Proteins 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- AYRXSINWFIIFAE-SCLMCMATSA-N Isomaltose Natural products OC[C@H]1O[C@H](OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O AYRXSINWFIIFAE-SCLMCMATSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- DKXNBNKWCZZMJT-UHFFFAOYSA-N O4-alpha-D-Mannopyranosyl-D-mannose Natural products O=CC(O)C(O)C(C(O)CO)OC1OC(CO)C(O)C(O)C1O DKXNBNKWCZZMJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AYRXSINWFIIFAE-UHFFFAOYSA-N O6-alpha-D-Galactopyranosyl-D-galactose Natural products OCC1OC(OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O)C(O)C(O)C1O AYRXSINWFIIFAE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N Ribose Natural products OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N 0.000 description 1
- 101100028790 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) PBS2 gene Proteins 0.000 description 1
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 1
- XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N Silicon Chemical compound [Si] XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HIWPGCMGAMJNRG-ACCAVRKYSA-N Sophorose Natural products O([C@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O)[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HIWPGCMGAMJNRG-ACCAVRKYSA-N 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- FTNIPWXXIGNQQF-UHFFFAOYSA-N UNPD130147 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(CO)OC(OC2C(OC(OC3C(OC(OC4C(OC(O)C(O)C4O)CO)C(O)C3O)CO)C(O)C2O)CO)C(O)C1O FTNIPWXXIGNQQF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LUEWUZLMQUOBSB-UHFFFAOYSA-N UNPD55895 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(CO)OC(OC2C(OC(OC3C(OC(O)C(O)C3O)CO)C(O)C2O)CO)C(O)C1O LUEWUZLMQUOBSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 1
- HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N alpha-D-Furanose-Ribose Natural products OCC1OC(O)C(O)C1O HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LHAOFBCHXGZGOR-NAVBLJQLSA-N alpha-D-Manp-(1->3)-alpha-D-Manp-(1->2)-alpha-D-Manp Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 LHAOFBCHXGZGOR-NAVBLJQLSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 1
- 108010026331 alpha-Fetoproteins Proteins 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000149 argon plasma sintering Methods 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QLTSDROPCWIKKY-PMCTYKHCSA-N beta-D-glucosaminyl-(1->4)-beta-D-glucosamine Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](N)[C@H](O)O[C@H](CO)[C@H]1O[C@H]1[C@H](N)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 QLTSDROPCWIKKY-PMCTYKHCSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- DLRVVLDZNNYCBX-ZZFZYMBESA-N beta-melibiose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O1 DLRVVLDZNNYCBX-ZZFZYMBESA-N 0.000 description 1
- HIWPGCMGAMJNRG-UHFFFAOYSA-N beta-sophorose Natural products OC1C(O)C(CO)OC(O)C1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HIWPGCMGAMJNRG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 1
- 238000012662 bulk polymerization Methods 0.000 description 1
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000003850 cellular structure Anatomy 0.000 description 1
- 230000003196 chaotropic effect Effects 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- SGMZJAMFUVOLNK-UHFFFAOYSA-M choline chloride Chemical compound [Cl-].C[N+](C)(C)CCO SGMZJAMFUVOLNK-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229960003178 choline chloride Drugs 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 1
- 239000000306 component Substances 0.000 description 1
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 1
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 238000007334 copolymerization reaction Methods 0.000 description 1
- ATDGTVJJHBUTRL-UHFFFAOYSA-N cyanogen bromide Chemical compound BrC#N ATDGTVJJHBUTRL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000004691 decahydrates Chemical class 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000396 dipotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019797 dipotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- ZGSPNIOCEDOHGS-UHFFFAOYSA-L disodium [3-[2,3-di(octadeca-9,12-dienoyloxy)propoxy-oxidophosphoryl]oxy-2-hydroxypropyl] 2,3-di(octadeca-9,12-dienoyloxy)propyl phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].CCCCCC=CCC=CCCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCCC=CCC=CCCCCC)COP([O-])(=O)OCC(O)COP([O-])(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCCC=CCC=CCCCCC)COC(=O)CCCCCCCC=CCC=CCCCCC ZGSPNIOCEDOHGS-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- KDQPSPMLNJTZAL-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogenphosphate dihydrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O KDQPSPMLNJTZAL-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000397 disodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019800 disodium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- GYQBBRRVRKFJRG-UHFFFAOYSA-L disodium pyrophosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])(=O)OP(O)([O-])=O GYQBBRRVRKFJRG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000010894 electron beam technology Methods 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 238000010556 emulsion polymerization method Methods 0.000 description 1
- DANUORFCFTYTSZ-UHFFFAOYSA-N epinigericin Natural products O1C2(C(CC(C)(O2)C2OC(C)(CC2)C2C(CC(O2)C2C(CC(C)C(O)(CO)O2)C)C)C)C(C)C(OC)CC1CC1CCC(C)C(C(C)C(O)=O)O1 DANUORFCFTYTSZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000002329 esterase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 238000010528 free radical solution polymerization reaction Methods 0.000 description 1
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 1
- DBTMGCOVALSLOR-AXAHEAMVSA-N galactotriose Natural products OC[C@@H]1O[C@@H](O[C@@H]2[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@@H](O[C@H]3[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H](CO)[C@@H]3O)[C@@H]2O)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O DBTMGCOVALSLOR-AXAHEAMVSA-N 0.000 description 1
- 230000005251 gamma ray Effects 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- DLRVVLDZNNYCBX-CQUJWQHSSA-N gentiobiose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O1 DLRVVLDZNNYCBX-CQUJWQHSSA-N 0.000 description 1
- 229960002442 glucosamine Drugs 0.000 description 1
- 239000003316 glycosidase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940106780 human fibrinogen Drugs 0.000 description 1
- 150000002433 hydrophilic molecules Chemical class 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 125000000959 isobutyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- DLRVVLDZNNYCBX-RTPHMHGBSA-N isomaltose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O1 DLRVVLDZNNYCBX-RTPHMHGBSA-N 0.000 description 1
- FBJQEBRMDXPWNX-FYHZSNTMSA-N isomaltotriose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](OC[C@@H]2[C@H]([C@H](O)[C@@H](O)C(O)O2)O)O1 FBJQEBRMDXPWNX-FYHZSNTMSA-N 0.000 description 1
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- FJCUPROCOFFUSR-UHFFFAOYSA-N malto-pentaose Natural products OC1C(O)C(OC(C(O)CO)C(O)C(O)C=O)OC(CO)C1OC1C(O)C(O)C(OC2C(C(O)C(OC3C(C(O)C(O)C(CO)O3)O)C(CO)O2)O)C(CO)O1 FJCUPROCOFFUSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UYQJCPNSAVWAFU-UHFFFAOYSA-N malto-tetraose Natural products OC1C(O)C(OC(C(O)CO)C(O)C(O)C=O)OC(CO)C1OC1C(O)C(O)C(OC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)C(CO)O1 UYQJCPNSAVWAFU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FJCUPROCOFFUSR-GMMZZHHDSA-N maltopentaose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O[C@H]([C@H](O)CO)[C@H](O)[C@@H](O)C=O)O[C@H](CO)[C@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O[C@@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)[C@@H](CO)O2)O)[C@@H](CO)O1 FJCUPROCOFFUSR-GMMZZHHDSA-N 0.000 description 1
- LUEWUZLMQUOBSB-OUBHKODOSA-N maltotetraose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@H](CO)O[C@@H](O[C@@H]2[C@@H](O[C@@H](O[C@@H]3[C@@H](O[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]3O)CO)[C@H](O)[C@H]2O)CO)[C@H](O)[C@H]1O LUEWUZLMQUOBSB-OUBHKODOSA-N 0.000 description 1
- 238000010339 medical test Methods 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- 229920003145 methacrylic acid copolymer Polymers 0.000 description 1
- 229940117841 methacrylic acid copolymer Drugs 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 description 1
- 239000012046 mixed solvent Substances 0.000 description 1
- DANUORFCFTYTSZ-BIBFWWMMSA-N nigericin Chemical compound C([C@@H]1C[C@H]([C@H]([C@]2([C@@H](C[C@](C)(O2)C2O[C@@](C)(CC2)C2[C@H](CC(O2)[C@@H]2[C@H](C[C@@H](C)[C@](O)(CO)O2)C)C)C)O1)C)OC)[C@H]1CC[C@H](C)C([C@@H](C)C(O)=O)O1 DANUORFCFTYTSZ-BIBFWWMMSA-N 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- PNJWIWWMYCMZRO-UHFFFAOYSA-N pent‐4‐en‐2‐one Natural products CC(=O)CC=C PNJWIWWMYCMZRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007981 phosphate-citrate buffer Substances 0.000 description 1
- DHRLEVQXOMLTIM-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;trioxomolybdenum Chemical compound O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.OP(O)(O)=O DHRLEVQXOMLTIM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 229920000447 polyanionic polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000003505 polymerization initiator Substances 0.000 description 1
- 239000002954 polymerization reaction product Substances 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- USHAGKDGDHPEEY-UHFFFAOYSA-L potassium persulfate Chemical compound [K+].[K+].[O-]S(=O)(=O)OOS([O-])(=O)=O USHAGKDGDHPEEY-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K potassium phosphate Substances [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 150000003242 quaternary ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000001235 sensitizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 238000007086 side reaction Methods 0.000 description 1
- 229910052710 silicon Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010703 silicon Substances 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- AMRSXIYUZOPFKB-UHFFFAOYSA-M sodium dihydrogen phosphate decahydrate Chemical compound O.O.O.O.O.O.O.O.O.O.[Na+].OP(O)([O-])=O AMRSXIYUZOPFKB-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 1
- PZDOWFGHCNHPQD-VNNZMYODSA-N sophorose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](C=O)O[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O PZDOWFGHCNHPQD-VNNZMYODSA-N 0.000 description 1
- 239000012086 standard solution Substances 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000013076 target substance Substances 0.000 description 1
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- RYCLIXPGLDDLTM-UHFFFAOYSA-J tetrapotassium;phosphonato phosphate Chemical compound [K+].[K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O RYCLIXPGLDDLTM-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CMPGARWFYBADJI-UHFFFAOYSA-L tungstic acid Chemical compound O[W](O)(=O)=O CMPGARWFYBADJI-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000004879 turbidimetry Methods 0.000 description 1
- 238000005199 ultracentrifugation Methods 0.000 description 1
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 1
Landscapes
- Addition Polymer Or Copolymer, Post-Treatments, Or Chemical Modifications (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
め要約のデータは記録されません。
Description
し、特に、グリコシド誘導体含有重合体を反応系に存在
させた免疫測定法に関する。
するために抗原抗体反応が利用されている。
度定量法として放射免疫測定法(RIA)、酵素免疫測
定法(BIAまたはELISA)、蛍光免疫測定法(F
IA)等の各種の方法が知られている。また、赤血球や
細菌等の生物系の担体やラテックス等の人工担体に抗原
あるいは抗体を担持させ、検体中の抗体あるいは抗原を
検出する免疫測定法が広く行われてきた。
かつ選択的に行われるという点で特異性が高く、また検
出感度が極めて高いということにより、重要な医学的検
査法として位置付けされている。
体反応を促進させ、あるいは微量成分を効果的に測定す
ることを目的として種々の添加剤が用いられている。例
えば、反応系にポリエチレングリコール(特開昭58−
47256号、特開昭59−54968号、特開昭63
−45066号)やデキストラン等の親水性ポリマーを
添加する方法が採用されてきた。
も性状も多様であり、そのため多くの免疫反応では抗原
抗体反応とは無関係な副反応とも言うべき非特異反応を
多々伴うことが知られている。上記のような添加物を使
用すると、目的とする物質とそれに対する抗原または抗
体との免疫反応を増強すると同時に、非特異反応までも
増強する場合が多い。その結果、バックグラウンド値(
目的とする抗原または抗体が含まれていない検体の測定
値)が高値となり、バンクグラウンド値を鰯える量の測
定値でないと検出することができなかった。つまり検出
感度が低くなり、かつ一定の量販上のシグナルを得るた
めに多量の試料を必要としていた。従って、この方法は
、短時間で反応を進行させることは可能であるが、非特
異反応をも増強するために、抗原抗体反応のみを促進し
、微量成分を効果的に測定するには充分な方法とは言え
なかった。
度が低いので十分な増感作用が得られる濃度の溶液を調
製することが困難であり、調製された溶液の粘度も高く
なり使用し難いという問題があった。
の目的とするところは、非特異反応が抑制されかつ高感
度の免疫測定法を提供することにある。
定法は、被測定物質である抗原または抗体に、対応する
抗体または抗原を反応させる抗原抗体反応を利用した免
疫測定法において、該反応系に、下記の一般式(1)で
表される少なくとも1種のグリコシド誘導体を七ツマー
単位として含む水溶性重合体及び/または水溶性共重合
体を存在させることを特徴とする免疫測定法である。
は水素原子、メチル基またはエチル基を示す0mは1〜
3の整数を示す、nは1〜4の整数を示す、)。
末端のグリコシド炭素原子に結合した水酸基から水素原
子が外れた基である。具体的には糖単位1〜3程度の単
糖またはオリゴ糖の残基を意味する。
ス、ガラクトース、グルコサミン、マンノサミン、ガラ
クトサミン等の六単糖類、アシビノース、キシロース、
リボース等の五単I!類を挙げることができる。
トース、トレハロース、セロビオース、イソマルトース
、ゲンチオビオース、メリビオース、ラミンアリビオー
ス、キトビオース、マンノビオース、ソホロース糖の2
糖類、マルトトリオース、イソマルトトリオース、マル
トテトラオース、マルトペンタオース、マンノトリオー
ス、マルトトリオース等を挙げることができる。
シド誘導体をモノマー単位として含む水溶性重合及び/
または水溶性共重合体は、下記の一般式(Ia) (Ia) (式中、G−0−は保護基を有しない糖残基を示す。R
は水素原子、メチル基またはエチル基を示す0mは1〜
3の整数を示す、nは1〜4の整数を示す、) で表されるグリコシド誘導体をモノマーとして、重合ま
たは共重合させることによって得られる。
誘導体(I a)は、ヘテロポリ酸及び重合禁止剤の存
在下に、下記の一般式(II)G−0−R’
・・・(I[)(式中、G−0−は保護基を有しない糖
残基を、R’ は低級アルキル基を示す。)。
、Rは水素原子、メチル基またはエチル基を示す0mは
1〜3の整数を示す、nは1〜4の整数を示す、)で表
される(アルキル)アクリル酸エステルとを反応させる
ことにより製造できる。
キル基とは、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプ
ロピル基、ブチル基、tert−ブチル基、イソブチル
基等の炭素数1〜4程度の直鎖または分枝鎖状のアルキ
ル基を意味する。
特に制限されず、公知の方法で製造されたもの、または
市販のものを使用してもよい0例えば、メチルグルコシ
ド、メチル β−D−ガラクトシド、メチル D−マル
トシド、ブチルマンノシド等の、アルキル部分が炭素数
1〜4程度の直鎖または分校鎖状アルキル基であるアル
キルグリコシドを使用できる。アルキルグリコシド(I
l)は単独で使用してもよくまたは2種以上を併用して
もよい。
(I[I)としても特に制限されず、公知のものを使用
でき、例えば、アクリル酸2−ヒドロキシエチル、アク
リル酸2−ヒドロキシプロピル、メタクリル酸ヒドロキ
シプロピル、エチルアクリル酸2−ヒドロキシエチル等
を挙げることができるが、この限りではない。
ない。
できる。
リコシド誘導体CTa)は酸触媒及び重合禁止剤の存在
下、反応系に酸素を供給しながら、保護基を有しない糖
と(アルキル)アクリル酸エステルとを反応させること
によっても製造できる。
ルキルグリコシドを用いることなく、入手可能な保護基
を有しない糖を用いて、目的とするグリコシド誘導体(
Ia)を高収率で得ることができる。
オリゴ糖であって、保護基を有しないものであれば特に
制限なく利用できる。
III)で表されるものが使用できる。
。
と同様、公知のものを使用できる。
例えば、空気等の酸素を含む気体または酸素を反応混合
物中に吹き込めばよい。
通常の精製手段、例えばシリカゲルクロマトグラフィー
、または抽出分離等によって精製できる。
式(Ia)で表される誘導体をモノマーとして用い、繰
り返し単位(1)からなるホモポリマー、2種以上の異
なる繰り返し単位(1)からなるコポリマー、並びに、
繰り返し単位(1)とそれに共重合可能な繰り返し単位
からなるコポリマーの重合については、通常の方法に従
って行うことができる。具体的には、例えば、塊状重合
法、溶W!L(もしくは均一)重合法、l!?11重合
法、乳化重合法、放射線(γ線、電子線)重合法等を挙
げることができる。
び溶媒の使用割合も特に制限されない。
重合させる場合、及びグリコシド誘導体(Ia)とそれ
に共重合可能な化合物を共重合させる場合も、その使用
割合は特に制限されず、得ようとする共重合体の用途等
に応じて適宜選択すればよい。
としては、α、β不飽不飽和2舎結有する親水性化合物
が好ましく、例えば、アクリルアミド、アクリル酸、メ
タクリル酸、N−ビニルピロリドン等が挙げられる。
する重合体を分離採取及び精製できる。
製してもよい。
量を有している。
シド誘導体含有共重合体を、適当な濃度で免疫測定系に
添加した場合、抗原抗体反応を特異的に増強する作用を
示す。
の方法で反応系に添加すればよい。
は、従来から周知の方法を用いることができる。
が可溶性のものを用いる、いわゆる溶液系と、反応物を
反応媒体に実質的に不溶性の担体に感作(担持)する、
いわゆる担体系のいずれにも適用される。
素免疫測定法(EIA)、蛍光免疫測定法(FIA)、
または光散乱を利用した免疫測定法等が挙げられる。ま
た、凝集反応を利用した測定法として、例えば、ラテッ
クス凝集反応、ラテックス近赤外比濁法(LPIA)、
免疫比濁法、血球凝集法その他における抗原抗体反応を
利用した測定法が挙げられる。
おいて顕著な効果が発揮される。
ド誘導体含有共重合体の利用方法としては、検体に添加
して用いる方法と、免疫測定試薬の構成品に予め添加し
ておく方法がある。
疫測定試薬の構成品を検体に添加する前に、該グリコシ
ド誘導体含有重合体及び/または該グリコシド誘導体含
有共重合体を含む緩衝液等を検体に添加する方法が挙げ
られる。
出しようとする抗原または抗体に対する抗体または抗原
を含んだ反応用試薬、または、反応媒体である1llI
i液成分のみを含んだ希釈液等に、予め該グリコシド誘
導体含有重合体及び/またはグリコシド誘導体含有共重
合体を添加しておく方法等が挙げられる。
測定物質を測定する場合には、被測定物質である抗原ま
たは抗体に対する抗体または抗原を含有するラテックス
試薬に予め該グリコシド誘導体含有(共)重合体を添加
しておく、このような試薬を用いて凝集反応を行い、生
じた凝集の程度を光学的にもしくは目視観察することに
より被測定物質が測定され得る。
いラテックス試薬を使用することも可能であり、この場
合には抗原抗体反応時にグリコシド誘導体含有(共)重
合体が該反応系に存在するようにすればよい。例えば、
検体に予めグリコシド誘導体含有(共)重合体を添加し
ておく方法;使用する緩衝液にグリコシド誘導体含有重
合体を加えてお(方法等があり、特に限定されない。
測定物質を測定する場合には、被測定物質である抗原ま
たは抗体に対する抗体または抗原を酵素で標識したコン
ジュゲート(酵素標識抗体もしくは酵素標識抗原)溶液
中に予めグリコシド誘導体含有(共)重合体を添加して
おく、このような試薬を用いて抗原抗体反応を行い、最
終的に酵素反応により得られた吸光度の変化量を光学的
にもしくは目視観察することにより被測定物質が測定さ
れ得る。あるいは、グリコシド誘導体含有(共)1合体
を含まないコンジュゲートを使用することも可能で、こ
の場合には抗原抗体反応時にグリコシド誘導体含有(共
)重合体が該反応系に存在するようにすればよい0例え
ば、検体に予めグリコシド誘導体含有(共)重合体を添
加しておく方法;使用する緩衝液にグリコシド誘導体含
有(共)重合体を加えておく方法等があり、特に限定さ
れない。
グリコシド誘導体をモノマー単位として含む(共)重合
体について以下の(1)、(2)。
することも可能である。
ー (2)2種類以上の繰り返し単位(りからなるコポリマ
ー (3)1種類以上の繰り返し単位(1)とそれに共重合
可能な繰り返し単位からなるコポリマー盪足l亘 本発明によれば、−gに抗原抗体反応を利用して測定し
得る生理活性物質はいずれも測定が可能である。
ロイド、脂質、ホルモン等があり、例えば、各種抗原、
抗体、レセプター、酵素等が挙げられる。具体的には、
梅毒トレポネーマ菌に対する抗体、抗カルジオライビン
抗体、インスリン、C反応性タンパク質、アルファーフ
ェトプロティン、CEA (癌胎児性抗原)、HBs抗
原、抗HBs抗体、抗)(Bc抗体、HBe抗原、抗H
Be抗体、ヒトフィブリノーゲン、リウマチ因子、抗ス
トレプトリジン0抗体、HTLVI、It、■に対する
抗体等が例示される。
本発明者らの研究により、グリコシド誘導体(1a)と
して以下の構造式で表されるグルコシルエチ!レメタク
リレート(Glucosylethyl methac
rylate 、以下GEMAと略す)を使用して得ら
れた(共)重合体が重合が容易であり、分子量の調整を
行い易く、かつ優れた増感効果が観察されるという結果
が得られた。
子量の範囲については、抗原抗体反応における反応媒体
に可溶のものであれば、特に限定はされないが、分子量
が小さすぎると、多量の該(共)重合体を必要とし、ま
たそのため反応媒体に溶解させるのに長時間要する等の
手間がかかる。
い、しかし測定する項目によってはこれに限定されない
。
フィ(cpc法)、末端基定量法、粘度法等より適宜選
ばれる。
させるグリコシド誘導体含有(共)重合体の濃度は、用
いるグリコシド誘導体含有(共)重合体の分子量、共存
する塩、タンパク、糖類等の添加物の濃度によって適宜
選ばれる。一般には該反応系における反応時の終濃度が
0.01〜10.0%(W/VL好ましくは0. 1〜
5.0%(W/V)、特に好ましくは0.5〜2.0%
(W/V)の割合で含有されるように調整を行う。
W/V)を下回ると、抗原抗体反応を促進する効果が小
さくなる。逆に10.0%(W/■)を上回ると目的成
分以外の物質との非特異反応が増大する。
、免疫比濁法等の凝集法において顕著な効果が発揮され
る。
子に抗原または抗体を物理的または化学的方法により担
持(感作)させる、用いる抗体は免疫グロブリンあるい
はその断片、例えばF(ab′)2等でもよい。前述の
ような方法で、該反応系にグリコシド誘導体含有(共)
重合体を存在させ、上記のような試薬を用いて凝集反応
を行い、生じた凝集の程度を光学的に観察もしくは目視
観察することにより被測定物質が測定され得る。
出する方法においては、測定は散乱光強度、吸光度また
は透過光強度を測定する光学機器で行う、測定の波長は
300〜2400nmが使用できる。
ス粒子の大きさあるいは濃度の選択、反応時間の設定に
より、散乱光強度の増加もしくは減少を測定することに
より行われる。また、これらの方法を併用することも可
能である。ラテックス粒子の凝集の程度を肉眼で判定す
る試薬においては、通常、試料と感作ラテツクス粒子を
含む溶液とを判定板上で混合し、1〜10分間揺り動か
した後、凝集の有無を観察する。凝集判定には、単に肉
眼判定以外に、ビデオカメラで撮影し、画像処理を施す
ことによって判定することも可能である。
デヒド等で固定し、この固定血球に検査すべき抗原に対
応する抗体を感作(吸着)させ、得られた抗体感作血球
を生理食塩液またはリン酸緩衝食塩液(PBSと略す)
を基材とする反応液(検体の希釈にも用いられるため希
釈ともいう)に浮遊させて抗体感作担体含有反応液を調
製し、これにあらかじめ反応液で希釈した被検血清を加
えて反応させ、一定時間後に逆受身凝集反応によって生
じる感作血球凝集像を測定する。
存在させる方法は、前述の■朋方迭の項で述べた通りで
ある。
る場合には、被測定物質である抗原または抗体に対する
抗体または抗原を常法により固相に吸着させ、かかる固
相と検体を反応溶液中で抗原抗体反応を行わせ、さらに
上記の抗原または抗体と、被測定物質である抗原または
抗体に対する抗体または抗原を公知の方法により酵素で
標識したコンジュゲート(酵素標識抗体もしくは酵素標
識抗原)溶液とを反応させ、最終的に酵素反応により得
られた吸光度の変化量を光学的にもしくは目視観察する
ことにより被測定物質が測定され得る。
存在させる方法は、前述の五里方抜の項で述べた通りで
ある。
応媒体としては、被測定物質の種類に応じた各種緩衝液
が用いられる。この緩衝液は、被測定物質を失活させる
ことなく、かつ抗原抗体反応を阻害しないようなイオン
強度やpHを有するものであればよい0例えば、リン酸
緩衝液、グリシン緩衝液、トリス緩衝液が使用される0
反応のPHは、5〜10、特に6〜8が好ましい。
。反応時間は適宜法められる。
応を抑制するために、塩化コリン等の第4級アンモニウ
ム塩、EDTA、ポリアニオン、カオトロピックイオン
(C1−、I−,5CN)、ゼラチン等を添加すること
も可能である。
防ぐために、各種の防腐剤(NaNs)やエステラーゼ
及びグリコシダーゼ阻害剤等を反応系に添加することも
可能である。
重合体及び/または該グリコシド誘導体含有共重合体が
免疫反応系に添加されるため、抗原−抗体反応が特異的
に増強される。しかも、後述の実施例から明らかなよう
に、目的とする特異反応を増感させるだけでなく、非特
異反応は抑制される。従って、免疫測定法の検出感度を
効果的に高めることが可能となる。
本発明を一層明瞭なものとする。
の1) メチルグルコシド(STA−MRG 106. Hor
izon社g)19.4 gをメタクリル酸2−ヒドロ
キシエチル140威に懸濁させ、ハイドロキノンモノメ
チルエーテル2.6gとリンモリブデン酸1. 0gと
を加え、充分に混合撹拌した後に徐々に加熱した。80
〜90℃に達したところで、その温度を維持しながら約
2時間撹拌した後、2N水酸化ナトリウムで中和した。
ルクロマトグラフィーに供した。(溶離液は、クロロホ
ルム:メタノ−/Lz9:lの混合溶剤)、Rf=0.
2(7)分画物を濃縮し、グルコシルエチルメタクリレ
ート20゜1gをオイル状物質として得た(収率は68
.8%であった。) (2)グルコシルエチルメタクリレートの合成方法(そ
の2) ブドウ糖90gを、メタクリル酸2−ヒドロキシエチル
650dに懸濁させ、ハイドロキノンモノメチルエーテ
ル1.0gとパラトルエンスルホンft1O,5gとを
加え、空気を吹き込みながら加熱した。温度が約110
℃に達したところでその温度を維持しながら2時間撹拌
した後冷却し、炭酸水素ナトリウムで中和した。得られ
た反応物を減圧下に1liiL、次いでシリカゲルクロ
マトグラフィーにて精製しく溶離液はクロロホルム:メ
タノール−1:O〜1:1、勾配溶離)、目的物である
グルコシルエチルメタクリレート110gを得た(収率
は75%であった。) (3)ガラクトシルエチルメタクリレート(以下HEA
−Gapと略す)の合成方法 下記に示す原料化合物及び触媒を用いたこと以外は、(
1)と同様にして目的化合物を得た。
リル酸2−ヒドロキシエチル・・・140m触媒:シリ
コンタングステン酸・・・1.Og目的化合物ニガラク
トシルエチルメタクリレート収量:22.Og(収率7
2%) 1金侠■貞製 (1)GEMAのホモポリマーの重合法OEMAIOg
を蒸留水70dに溶解した。この溶液に過硫酸アンモニ
ウム(APS)101gを添加し、窒素ガス気流中撹拌
下において50℃で12時間反応させた0反応終了後、
反応液を12のアセトンに投入し、析出した白色沈澱を
濾取し、アセトンで洗浄した後減圧乾燥した。得られた
白色沈澱を100dの蒸留水に熔解し、これを11のア
セトンに投入した。析出した沈澱を減数し、ポリ(グル
コシルエチルメタクリレート)(以下、pGEMAと略
す)9.5gを白色沈澱として得た。収率は95%であ
った。
により測定した。溶媒系は0.1M臭化リチウムを含む
DMFを溶離液として用い、Ink物質はポリエチレン
オキサイドを用いた。その結果、得られた重量平均分子
量は40万であった。
全てこの方法で行った。
えたこと以外は、上記と同様に反応させたところ、重量
平均分子量15万のpGEMAが得られた。
−Ga 42110 gをジメチルスルホキシド(DM
SO)70dに溶解した。この溶液に、アゾビスイソブ
チロニトリル(AIBN)25g+gを添加し、窒素ガ
ス気流中撹拌下に75°Cで12時間反応させた0反応
終了後、(1)のpGHMAを得た場合と同様にしてア
セトン沈澱で重合体を回収し、再沈澱精製を行い、真空
乾燥し、ポリ(ガラクトシルエチルメタクリレート)(
以下、pHEA−Galと略す)8.9gを白色粉末と
して得た。収率は89%であった。
して反応させたところ、重量平均分子量40万のpHE
A−Gallが得られた。
1に溶解した。この溶液に過硫酸アンモニウム40■を
添加し、窒素ガス気流中撹拌下に55°Cで10時間反
応させた。反応終了後、反応液を22のアセトンに投入
し、析出した白色沈澱を濾取し、さらにアセトンで洗浄
した後、減圧乾燥した。得られた白色沈澱を10(ld
の蒸留水に溶解し、これを2j2のアセトンに投入して
ポリマーを析出させた。析出した沈澱を濾取、アセトン
洗浄の後、減圧乾燥し、8.7gの白色粉末を得た。
F)に可溶で重量平均分子量は30万であった。
15g及びアクリル酸5gを蒸留水80H1に溶解し、
2N KOHでpH6,0に調製した。以下、(1)
のアクリルアミドとの共重合体を得た場合と同様にして
反応を行い8.2gの白色粉末を得た。このものは水に
可溶で、重量平均分子量ば40万であった。
M1に溶解した。この溶液に過硫酸カリウム30■を添
加し、重合反応を行った。以下、(1)の共重合体調製
法と同様にして反応を行い、8.0gの白色粉末を得た
。このものは水、DMF、DMSOに可溶で重量平均分
子量は35万であった。
MA15g及びメタクリル酸5gを蒸留水70M1に溶
解した。この溶液にAPS40gを添加し、重合反応を
行った。以下、(1)の共重合体調製法と同様にして反
応を行い、15.2gの白色粉末を得た。このものは水
、DMF、DMSOに可溶で重量平均分子量は42万で
あった。
るインスリンの測定系に本発明を適用した0本実施例に
おいては、次に挙げる試薬及び測定用検体を使用した。
B−Test Hako (和光純薬社製)を用いた
。
他のインスリン測定用キットlN5LILIN[MIT
SLII II] (カイノス社製)により、インス
リンを含有することが確認されている血清。
ィーにより、インスリンを除去した血清で他のインスリ
ン測定用キット lN5ULIN [MITSLIII
I](カイノス社製)により、インスリンが含まれてい
ないことが確認されている血清。
ーの重合法に準じて調製されたGEMAのホモポリマー
で、平均分子量400,000のもの(以下、pGEM
A40万と略す)、及び150.000のもの(以下、
pGEMA15万と略す)を用いた。
製法に準じて調製されたGEMAのコポリマーで、GE
MAとアクリルアミドのコポリマー(以下、pGEMA
/AAmと略す、平均分子量約30万)、及びGEMA
とアクリル酸とのコポリマー(以下、pGEMA/AA
と略す、平均分子量約40万)を用いた。
用いた。(牛丼化学社製;試薬1級)キット構成品であ
る酵素標識抗体溶液中に、PGEMA40万、pGEM
A15万、pGEMA/ A A mまたはpC,EM
A/AAを各々添加し、反応系における終濃度が各々1
.0.1.5.0゜8.1.0%(W/V)になるよう
に調製した。
の使用添付書に従って、インスリン値が低、中、高値を
示す3種の血清について、インスリン濃度の測定を行っ
た。
ITSIII If] (カイノス社製)によりイン
スリンが含まれていないことが確認されたインスリン除
去血清についても同時に測定した。420nmにおける
吸光度(n=4の平均値)を第1表に示す。
、pGEMA40万あるいはpGEMA15万の代わり
にポリエチレングリコール(平均分子量6,000)を
終濃度が3.0%(W/V)となるように添加した場合
についてそれぞれ測定を行った。その結果を第1表にま
とめて示す。
いると、比較例に対してインスリンが低値の血清につい
ても充分な吸光度が得られ、かつ正常なヒト血清につい
ても非特異反応がほとんど見られない等、感度及び特異
性について優れた結果が得られた。
本発明の効果を、全自動分析装置を用いてラテックス診
断試薬の凝集を測定することにより確認した。なお、特
に断らない限り同名の試薬については実施例1と同一の
ものを使用した。
和物)、リン酸二す) IJウム(十三水和物)、塩化
ナトリウム及びアジ化ナトリウムを精製水に溶解し、リ
ン酸、塩化ナトリウム及びNaN、の終濃度がそれぞれ
0.02M、0.127M及び0.1%(W/W) 、
pHが7.40となるように調製した。
.635Mとしたこと以外は、上記PBSと同じもの。
ウシ血清アルブミン)を1%(W/W)となるように溶
解させて調製した。
ン酸二カリウム(無水)を精製水に溶解し、pHを6.
0に調製したもの。
−D−グルコピラノシド) (以下、OGと略す):難
溶性タンパク質研究用(ナカライテスク■)を用いた。
)になるように溶解したもの。
レポネーマ・パリダム[Treponemapalli
dum; CDC(Center for Di
seases Control。
、S、Departwent of)1ealth、E
ducation and Welfare、Atl
antaGeorgia )より入手されたものを家兎
こう丸に接種し、継代培養したものを用いた]を生理食
塩水に109個菌体/蔽となるように懸濁した菌体懸濁
液1dを採り、PBS中で遠心分1m(6,000rp
mXS分、3回)することにより洗浄した。
にて30分間インキュベートした。その後、これを超遠
心にかけて(50,000rpmX1時間)、上清を採
取したものを1%OGで100倍希釈したものを梅毒抗
原液とした。
接種後、45日間飼育した家兎から血清を採取した。市
販のTPHAキット[セロディアTP(富士レビオ)及
び七ロクリフトTP(化血研)]を用いて力価を測定し
たところ、いずれのキットにおいても10,000タイ
ターを示した。
0倍に希釈して用いた。
ない家兎から採取した血清を用いた。市販TPHAキッ
トにより力価を測定したところ、陰性であった。この血
清を1%BSA−PBSで100.200.400倍に
希釈して用いた。
クス(固型分10%、種水化学工業■製)を用いた。
水)、リン酸二水素ナトリウム(十三水和物)及びNa
N、を精製水に加えて、0.1%(W/W)NaNsを
含有する100mM NaPB (pH7,40)を
調製した。
Aが1%(W/W)になるように調製したものを用いた
。
行った。
、25%(W/W)となるように溶解し、調製したもの
。
15万、共重合体の調製の項(3)に示したGEMAと
ビニルピロリドン共重合体(以下、pGEMA/VPと
略す、平均分子量35万)、または共重合体の調製項(
4)に述べたGEMAとメタクリル酸との共重合体(以
下、pGEMA/MCと略す、平均分子量42万)を、
反応時の終濃度が各々0.8.1.0.0.9.0.9
%(W/V)となるように希釈液に添加した。
液の調製 梅毒抗原液を1%OGで25倍希釈したもの0゜05M
!、NaCj!−PBSを0.10m!、10mM
KPBを0.05m、及び1%OGを0.20II!l
混合した計0.40dの混合液を抗原感作液とした。
中でマグネチックスクーラーで撹拌しながら、抗原感作
液0.4mを素早く添加し、4℃にて1時間撹拌した。
けて1.5時間撹拌した。その後、15.00Orpm
にて1時間遠心分離した。得られた沈澱にさらに1%B
SA−NaPB5dを添加し、よく分散させて固形分0
.2%のラテックス試薬とした。このようにして調製し
たラテックス試薬は4℃にて保存した。
) :asoμl測定波長
:570nm測定温度 :37℃ 測定開始後、80秒と320秒の波長570nmにおけ
る吸光度の差(ΔO,D、 sw。)を測定し、この吸
光度の変化量を104倍したものを第2表に示した。(
n=4の平均値)。
SA−PBSにて100.200.400倍希釈したも
のを用いた。対照として正常家兎血清を同様に希釈した
ものを用いた。
もの及びポリエチレングリコール6000を反応時の終
濃度3.0%(W/V)となるように希釈液に添加した
ものを使用したこと以外は、実施例2と同様の操作を繰
り返した。結果を実施例2の結果と共に第2表に示す。
液では、従来の希釈液では凝集が見られなかった、高希
釈率の陽性血清においても、陽性と判定し得る結果が得
られた。正常血清については、比較例で見られていた非
特異反応による凝集が解消されるなど、本ラテックス試
薬は、特異性が高く、感度の良いものであることがわか
る。
用した0本実施例においては、次に挙げる試薬及び測定
用検体を使用した。特に断らない限りは実施例2と共通
の試薬及び検体を用いた。
HA)セロクリット−TP(化学及び血清療法研究新製
)を使用した。
0万、及びpGEMA15万を用いた。
均分子量30万)、及びpHEA−Gaj!(平均分子
量40万)を用いた。
万、pGEMA15万、pHEA−Gal30万または
p HEA−Ga l 40万を添加し、反応系におけ
る終濃度が各々0.9.1.1.0゜8.0.9%(W
/V)になるように調製した。
用説明書に従って、各血清について抗TP抗体の測定を
行った。
した。この結果を第3表に示した。第3表及び後述の第
5表、第7表において、記号は以下の意味を示す。
もの及びポリエチレングリコールを反応時の終濃度が3
.0%(W/V)となるように緩衝液に添加したものを
使用したこと以外は、実施例3と同様の繰作を繰り返し
た。結果を実施例3の結果と共に第3表に示す。
液では、従来の希釈液では凝集が見られなかった高希釈
率の陽性血清についても陽性と判定し得る結果が得られ
た。正常血清6二ついては、比較例で見られていた非特
異性反応による凝集が解消され、よりクリアーな陰性像
が得られる等、本実施例の希釈液では感度及び特異性に
優れた結果が得られた。
系に本発明を適用した0本実施例においては、次に挙げ
る試薬及び測定用検体を使用した。
0.25%(W/W)となるように溶解し、調製したも
の。
15万、共重合体の調製の項(3)に示したGEMAと
ビニルピロリドンとの共重合体(以下、pGEMA/V
Pと略す、平均分子量35万)、または共重合体の調製
の項(4)に示したGEMAとメタクリル酸との共重合
体(以下、pGEMA/MCと略す。平均分子量42万
)を、反応時の終濃度が各々1.0.1. 2.0.8
.0.9%(W/V)となるように希釈液に添加した。
ラフィーにより精製した精製HBs抗原を使用した。抗
原はリン酸緩衝液に溶解し、濃度をローリ−法により測
定した。
0μg/dになるように調製して、抗原として用いた。
フロイントの完全アジュバントと共に家兎に免疫して得
られた抗血清を正常ヒト血清を結合させたカラムで吸収
操作をしてから用いた。正常ヒト血清を結合させたカラ
ムはCNBr活性化セファロースCL4B (ファルマ
シア社)を用い、メーカー(ファルマシア社)の説明書
に従って行った。
より、100.200.400倍に希釈して用いた。
採取した血清を用いた。市販EIAキット(HBs −
ACQUICKテスト「ミズホ」ミズホメディー社製)
により抗体の有無を測定したところ、陰性であった。こ
の血清を1%BSA・PBSで100.200.400
倍に希釈して用いた。
ンラテックス直径0.232μm、固形分10%)を用
いた。
行った。
HBs抗原の感作 ラテックス100Jffiと、HBs抗原液400μl
とを素早く混合し、室温で撹拌した。1時間後、1%B
SA−PBSを5I11加え、15.00Orpmで1
時間遠心した。これを2回繰り返し、ラテックスを洗浄
した。
し、よく分散し、固形分0.5%のラテックス試薬とし
た。これを4℃で保存した。
を、全自動分析装置を用いてラテックス診断試薬の凝集
を測定することにより確認した。
) :350μ!測定波長
:570nm測定温度 =37℃ 測定開始後、80秒と320秒の波長570nmにおけ
る吸光度の差(ΔO,Do、、、 )を測定し、この吸
光度の変化量を104倍したものを第4表に示した*
(n =4の平均値、)なお、検体としてはHBs陽
性家兎血清を1%BSA−PBSを用いた100.20
0.400倍に希釈したものを検体として用いた。対照
として正常家兎血清を同様に希釈したものを用いた。
もの及びポリエチレングリコール6000を反応時の終
濃度3.0%(W/V)となるように希釈液に添加した
ものを使用したこと以外は、実施例4と同様の操作を繰
り返した。結果を実施例4の結果と共に第4表に示す。
、従来の希釈液では凝集が見られなかった、高希釈率の
陽性血清においても、陽性と判定し得る結果が得られた
。正常血清については、比較例で見られていた非特異反
応による凝集が解消される等、本ラテックス試薬は、特
異性が高く、感度の良いものであるという結果が得られ
た。
用した0本実施例においては、次に挙げる試薬及び測定
用検体を使用した。
)を使用した。
る陽性コントロールを、他のHBs抗原検出用キット(
HBsAG QUICKテスト「ミズホ」ミズホメデ
ィー社製)により測定し、HBs抗原が陽性であること
を確認したコントロール血清を1%BSA−PBSにて
、100倍、200倍、400倍希釈したものを用いた
。
により、HBs抗原陰性であった家兎血清を用いた。
40万及びpGEMA15万を用いた。
P (平均分子量35万)、及びpGEMA/MC(平
均分子量42万)を用いた。
A15万、pGEMA/VPまたはpGEMA/MCを
各々添加し、反応系における終濃度が各々、0.8.1
.0.0.7.0.9%(W/V)になるように調製し
た。この緩衝液を使用し、グイナボット社のキットの使
用説明書に従って、HBs抗原陽性家兎血清についてH
Bs抗原の測定を行った。
した。この結果を第5表に示した。
もの及びポリエチレングリコールを反応時の終濃度が3
.0%(W/V)となるように緩衝液に添加したものを
使用したこと以外は、実施例5と同様の操作を繰り返し
た。結果を実施例5の結果と共に第5表に示す。
液では、従来の緩衝液では凝集が見られなかった高希釈
率の陽性血清についても陽性と判定し得る結果が得られ
た。正常血清については、比較例で見られていた非特異
反応による凝集が解消され、よりクリアーな陰性像が得
られる等、本実施例の希釈液では感度及び特異性に優れ
た結果が得られた。
定法を利用したプラスチックプレートを用いた抗カルジ
オライピン抗体の測定系に本発明を適用した0本実施例
においては、次に挙げる試薬及び測定用検体を使用した
。なお、特に断らない限り、同名の試薬については実施
例1,2と同様のものを使用した。
製)を用いた。
トリーズ社のポルオキシダーゼ標識抗ウサギ抗体を1%
BSA−PBS (但し、N a N sは含まない)
で1,000倍に希釈して用いた。
タイタープレート(平底)を用いた。
リン酸二ナトリウムと0.1Mクエン酸を混合し、pH
5,50±0.01となるように調製した。
フ二二レンジアミン(二塩酸塩)を2■/d、そして過
酸化水素水0.03%(HtOりとなるように加えた。
用いた。
M NaPB (pH7,40)、0゜25%BSA
(W/W)となるように調製したもの]に、実施例2
で用いたpGEMA40万、pGEMA15万、pGE
MA/VP、pGEMA/MCを各々、0.9.1.1
.0.8.1.0%(W/V)となるように添加して調
製したものを検体希釈液とし、実施例2に挙げた梅毒陽
性家兎血清を100.200.400倍に希釈して用い
た。
陽性家兎血清を希釈するのに用いたものと同様のPGH
MA溶液を用いて100.200400倍に希釈して用
いた。
の各ウェルに50plずつ分注し室温で1時間インキュ
ベートした。1時間後、抗原液を吸引除去し、次いで1
%BSA−PBS200μEで1回洗浄した後、1%B
SA−PBS200μ!を加えて室温で1時間インキュ
ベートし、ブロッキングを行った。その後、1%BSA
−PBSを吸引除去し、0.9%Na Cj!水溶液2
00μlで3回洗浄を行った。
した梅毒陽性家兎血清を各ウェルに50plずつ分注し
、室温で1時間インキュベートした。対照として正常家
兎血清を同様に希釈したものを各ウェルに分注・インキ
ュベートした。
00μlで3回洗浄した後、第2抗体としてペルオキシ
ダーゼ標識抗ウサギIgGを各ウェルに50μlずつ分
注した。室温で1時間インキュベートした後、反応液を
吸引除去し、1%BSA−PBS (但し、N a N
sは含まない)200μ!で3回洗浄した。洗浄後、
直ちに各ウェルに結合した酵素活性を測定した。
し、室温で15分間インキエベートした。
添加していないウェルを用意し、同様に基質液を添加し
てインキュベートした。インキュベート後、IN硫酸を
100μ1分注し、酵素反応を停止させた。各ウェルの
酵素反応時間が一定となるように操作を行った。
TP−100,コロナ社)により、基質ブランクを対照
として492nmの吸光度を測定した。その結果を第6
表に示す(n=4の平均ff1f)。
もの及びポリエチレングリコールを反応時の終濃度が3
.0%(W/V)となるように緩衝液に添加したものを
使用したこと以外は、実施例6と同様の操作を繰り返し
た。結果を実施例6の結果と共に第6表に示す。
いると、比較例に対してカルジオライビンが低値の血清
についても充分な吸光度が得られ、かつ正常な家兎血清
についても、非特異反応がほとんどみられない等、感度
及び特異性について優れた結果が得られた。
ークロマトグラフィーにて精製し、IgG濃度1■/M
1に調製したもの。
社製、試薬特級)、IN NaOHを用いてpH8,
8に調製したものを用いた。
固型分10%、平均粒径0.26μm)のものを用いた
。
リウム(二水和物)、リン酸二ナトリウム(二水和物)
、塩化ナトリウム及びアジ化ナトリウム(NaNs、以
上すべてナカライテスク社製、試薬1級)を精製水に溶
解し、リン酸、塩化ナトリウム及びNaN、の濃度が、
それぞれ、0.05M、0.1M及び0. 1%(W/
W) 、p H7゜0となるように調製した。
,0)にBSAを1%(w / w )となるように溶
解させて用いた。
CRP抗体を1■/dのIgG濃度で0゜1M グリシ
ン緩衝液(pH8,8)に溶解した。
レンラテックス(固形分10%、積水化学社製)IJ1
!を添加し、37℃にて60分間撹拌した。
mで遠心分離した。
MA40万、pGEMA15万、実施例2で用いたpG
EMA/VP、pGEMA/MCを各々添加し、検体と
の反応時の終濃度が各々0゜8.1.0.0.9.0.
9%(W/V) となるように含有させた0、1M グ
リシン緩衝液(pH8,8)1(ldを添加し、ラテッ
クスを懸濁させ、抗CRP抗体感作ラテックス液を調製
した。
、0.00.0.10.0.50.1.00.2.00
.ug/d濃度に調製したもの。
1)項の抗CRP抗体感作ラテックス液50μlを滴下
し混和する0判定板を手に持ち、緩やかに揺動し2分後
に凝集の度合を肉眼で観察した。結果を第7表に示した
。
もの及びポリエチレングリコール6000を反応時の終
濃度3.0%(W/V)となるように希釈液に添加した
ものを使用したこと以外は、実施例7と同様の操作を繰
り返した。結果を実施例7の結果と共に第7表に示す。
)μg/dで凝集を示したものは、PEGによってラテ
ックスそのものが凝集してしまったことによる。
を使用した場合の検出感度は0.25Mg/dであるが
、PEGの場合のそれは、0.50Mg/dlであるこ
とがわかる。従って、本実施例のように、pciHMA
のホモポリマー及びコポリマーを使用した方が高感度の
得られることがわかる。
Claims (1)
- (1)被測定物質である抗原または抗体に、対応する抗
体または抗原を反応させる抗原抗体反応を利用した免疫
測定法において、該反応系に、下記の一般式( I )で
表される少なくとも1種のグリコシド誘導体をモノマー
単位として含む水溶性重合体及び/または水溶性共重合
体を存在させることを特徴とする免疫測定法。 ( I ) ▲数式、化学式、表等があります▼ (式中、G−O−は保護基を有しない糖残基を示す。R
は水素原子、メチル基またはエチル基を示す。mは1〜
3の整数を示す。nは1〜4の整数を示す。)。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP24527590A JP2947600B2 (ja) | 1990-09-14 | 1990-09-14 | 免疫測定法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP24527590A JP2947600B2 (ja) | 1990-09-14 | 1990-09-14 | 免疫測定法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPH04122858A true JPH04122858A (ja) | 1992-04-23 |
JP2947600B2 JP2947600B2 (ja) | 1999-09-13 |
Family
ID=17131257
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP24527590A Expired - Fee Related JP2947600B2 (ja) | 1990-09-14 | 1990-09-14 | 免疫測定法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JP2947600B2 (ja) |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH06235730A (ja) * | 1992-06-26 | 1994-08-23 | Boehringer Mannheim Gmbh | グリコシド型界面活性剤を含むアナライトの検出 方法、及び当該検出試薬 |
JP2009031061A (ja) * | 2007-07-25 | 2009-02-12 | Jsr Corp | 標的物質の検出方法およびラテックス凝集反応用試薬 |
WO2009123060A1 (ja) | 2008-03-31 | 2009-10-08 | 積水メディカル株式会社 | 精製血清アルブミン及び免疫学的測定方法 |
WO2012169453A1 (ja) * | 2011-06-07 | 2012-12-13 | 和光純薬工業株式会社 | 凝集促進剤 |
Families Citing this family (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20090246884A1 (en) | 2005-12-07 | 2009-10-01 | Takayuki Akamine | Reagent for Assaying Antiphospholipid Antibody and Reagent for Assaying Anti-Treponema Pallidum Antibody |
-
1990
- 1990-09-14 JP JP24527590A patent/JP2947600B2/ja not_active Expired - Fee Related
Cited By (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH06235730A (ja) * | 1992-06-26 | 1994-08-23 | Boehringer Mannheim Gmbh | グリコシド型界面活性剤を含むアナライトの検出 方法、及び当該検出試薬 |
JP2009031061A (ja) * | 2007-07-25 | 2009-02-12 | Jsr Corp | 標的物質の検出方法およびラテックス凝集反応用試薬 |
WO2009123060A1 (ja) | 2008-03-31 | 2009-10-08 | 積水メディカル株式会社 | 精製血清アルブミン及び免疫学的測定方法 |
US8445213B2 (en) | 2008-03-31 | 2013-05-21 | Sekisui Medical Co., Ltd. | Purified serum albumin, and immunological measurement method |
WO2012169453A1 (ja) * | 2011-06-07 | 2012-12-13 | 和光純薬工業株式会社 | 凝集促進剤 |
US9797886B2 (en) | 2011-06-07 | 2017-10-24 | Wako Pure Chemical Industries, Ltd. | Agglutination enhancer |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP2947600B2 (ja) | 1999-09-13 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US4210723A (en) | Method of coupling a protein to an epoxylated latex | |
IE912079A1 (en) | Biologically active reagents prepared from¹carboxy-containing polymer, analytical element and methods¹of use | |
CN103940816A (zh) | 一种测定人体中甘胆酸含量的试剂盒及制备方法 | |
EP0468585B1 (en) | Biologically active reagent, analytical element and methods for use of the reagent | |
CN102405412B (zh) | 免疫学测定的灵敏度增强方法或避免血红蛋白影响的方法 | |
JPS6315551B2 (ja) | ||
EP0017224A1 (en) | Method and reagent for counteracting lipemic interference | |
KR20030029860A (ko) | 재현성이 양호한 응집면역측정법 및 시약 | |
US4552633A (en) | Fine particulate for use in clinical testing and a process for producing thereof | |
JP3623657B2 (ja) | 非特異反応抑制剤、免疫測定試薬及び免疫測定方法 | |
EP1956373B1 (en) | Method for assaying anti-treponema pallidum antibody | |
JPH0613582B2 (ja) | 多官能性親水性球状微粒子、その製造方法及びその使用方法 | |
JPH04122858A (ja) | 免疫測定法 | |
JP4879067B2 (ja) | 免疫測定用検体前処理液、免疫測定用試薬キット及び免疫測定方法 | |
JPH10153599A (ja) | 蛋白質非特異的吸着防止剤およびその用途 | |
US5262297A (en) | Specific binding analytical and separation methods using carboxy containing polymers | |
JPH02194360A (ja) | カルボキシル基含有重合体を含む免疫化学試験用剤 | |
WO1999060401A1 (fr) | Immunoreactifs et procede de dosage immunologique | |
JP3471198B2 (ja) | 免疫学的ラテックス比濁定量用試薬 | |
JPH03502247A (ja) | 高分子粒子への直接結合による単純ヘルペスウイルス抗原の測定方法及びキット | |
EP0597510B1 (en) | Biologically active reagent prepared from aldehyde-containing polymer, test kit, analytical element and methods of use | |
JP4524446B2 (ja) | 糖脂質抗原の活性化剤及び活性化方法、並びに試料中の抗糖脂質抗体の測定方法及び測定試薬キット | |
CN116990505B (zh) | 一种白介素-6aie荧光免疫层析试纸条、试剂盒及其应用 | |
JPH09127113A (ja) | 免疫測定法 | |
JPH08110340A (ja) | 改質ラテックス粒子、その製造方法及び免疫学的凝集反応試薬 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20080702 Year of fee payment: 9 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20090702 Year of fee payment: 10 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20090702 Year of fee payment: 10 |
|
S111 | Request for change of ownership or part of ownership |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313111 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20090702 Year of fee payment: 10 |
|
R360 | Written notification for declining of transfer of rights |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R360 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20090702 Year of fee payment: 10 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20090702 Year of fee payment: 10 |
|
R370 | Written measure of declining of transfer procedure |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R370 |
|
S111 | Request for change of ownership or part of ownership |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313115 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20090702 Year of fee payment: 10 |
|
R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |