JPH0380095A - 可溶化絹フイブロインの製造法 - Google Patents
可溶化絹フイブロインの製造法Info
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- JPH0380095A JPH0380095A JP21428789A JP21428789A JPH0380095A JP H0380095 A JPH0380095 A JP H0380095A JP 21428789 A JP21428789 A JP 21428789A JP 21428789 A JP21428789 A JP 21428789A JP H0380095 A JPH0380095 A JP H0380095A
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Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
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Description
【発明の詳細な説明】
[技術分野]
本発明は、水に難溶性の蛋白質として知られている絹フ
ィブロインを新規な可溶化絹フィブロインに変換する方
法に関する。
ィブロインを新規な可溶化絹フィブロインに変換する方
法に関する。
[背景技術]
絹フィブロインは、分子量約33 、000の水に難溶
性の蛋白質として知られており、グリシン、アラニン、
セリンおよびチロシンなどが主たる構成アミノ酸成分と
なっている蛋白質であることが知られている。人類の生
活史の上で古くから使用されている絹繊維は、絹フィブ
ロインかその主体となっている繊維である。この絹フィ
ブロインに関しては、それが適度に吸湿性、保水性を有
すること、「親水性と親油性のバランス」が良好である
ことおよび優れた生体への適合性を有すること等により
、広汎な用途の開発が試みられている。例えば、絹フィ
ブロインは、化粧料基材あるいは軟膏などの医療薬への
添加剤や手術用縫合糸として用いられており、更にその
力学的特性からコンタクトレンズ、人工皮膚及び人工臓
器への応用も試みられている。然しなから絹フィブロイ
ンは、水に対する溶解度が、極めて低いのでその適用範
囲を拡大するには溶解性を高める必要がある。絹フィブ
ロインに水溶性を付与する試みは古くからなされている
。例えは、古くは、P、P、 von Weimar
n ; Reports of Imperial I
ndustrial Re5earch 1nstit
ute(Osaka)、7巻 9頁(1926)、村瀬
良−:繊維誌5巻、362頁(1951)、高松勇次部
;工化雑35巻20頁(1932)等にその報告が見ら
れるが、何れも、アルカリ金属またはアルカリ土類金属
のハロゲン化物、硝酸塩、チオシアン酸塩なとの濃厚水
溶液、酸化銅アン干ニア溶液、銅エチレンシアミン溶液
等を用いて絹フィブロインを溶解させるものであって、
絹フイブロイン自体を可溶化物質に変換したものではな
い。
性の蛋白質として知られており、グリシン、アラニン、
セリンおよびチロシンなどが主たる構成アミノ酸成分と
なっている蛋白質であることが知られている。人類の生
活史の上で古くから使用されている絹繊維は、絹フィブ
ロインかその主体となっている繊維である。この絹フィ
ブロインに関しては、それが適度に吸湿性、保水性を有
すること、「親水性と親油性のバランス」が良好である
ことおよび優れた生体への適合性を有すること等により
、広汎な用途の開発が試みられている。例えば、絹フィ
ブロインは、化粧料基材あるいは軟膏などの医療薬への
添加剤や手術用縫合糸として用いられており、更にその
力学的特性からコンタクトレンズ、人工皮膚及び人工臓
器への応用も試みられている。然しなから絹フィブロイ
ンは、水に対する溶解度が、極めて低いのでその適用範
囲を拡大するには溶解性を高める必要がある。絹フィブ
ロインに水溶性を付与する試みは古くからなされている
。例えは、古くは、P、P、 von Weimar
n ; Reports of Imperial I
ndustrial Re5earch 1nstit
ute(Osaka)、7巻 9頁(1926)、村瀬
良−:繊維誌5巻、362頁(1951)、高松勇次部
;工化雑35巻20頁(1932)等にその報告が見ら
れるが、何れも、アルカリ金属またはアルカリ土類金属
のハロゲン化物、硝酸塩、チオシアン酸塩なとの濃厚水
溶液、酸化銅アン干ニア溶液、銅エチレンシアミン溶液
等を用いて絹フィブロインを溶解させるものであって、
絹フイブロイン自体を可溶化物質に変換したものではな
い。
[発明の開示]
本発明は絹フィブロインを可溶化物質に変換するため、
フィブロイン中に存在するチロシンの水酸基を、酵素を
用いて硫酸エステル化し、新規な可溶化物質とするもの
である。すなわち、本発明は、絹フィブロインを、アリ
ールスルフオトランスフエラーゼを用い、硫酸基を供与
する物質を含有せしめた媒質中で、酵素反応に付するこ
とにより、絹フィブロインの構造中のチロシンの水酸基
をWt酸エステルに変換せしめることを特徴とする可溶
化絹フィブロインの製造法を提供するものである。
フィブロイン中に存在するチロシンの水酸基を、酵素を
用いて硫酸エステル化し、新規な可溶化物質とするもの
である。すなわち、本発明は、絹フィブロインを、アリ
ールスルフオトランスフエラーゼを用い、硫酸基を供与
する物質を含有せしめた媒質中で、酵素反応に付するこ
とにより、絹フィブロインの構造中のチロシンの水酸基
をWt酸エステルに変換せしめることを特徴とする可溶
化絹フィブロインの製造法を提供するものである。
本発明方法の最も大きな技術的利点の一つは絹フィブロ
インを温和な条件下でチロシンを特異的に硫酸エステル
化する反応を行い得ることにある。したがって、絹フィ
ブロインを熱により変性させることなく、また酸性ある
いはアルカリ性条件で処理することによって変性させる
こともなく、可溶化物質に変換することができる。
インを温和な条件下でチロシンを特異的に硫酸エステル
化する反応を行い得ることにある。したがって、絹フィ
ブロインを熱により変性させることなく、また酸性ある
いはアルカリ性条件で処理することによって変性させる
こともなく、可溶化物質に変換することができる。
本発明方法に使用する酵素としてはアリールスル7オト
ランスフエラーゼ活性を有するものであれば特に限定さ
れるものではないが例えば本発明者の一人、小橋らがヒ
ト腸内細菌より見出した(Kobashi K、、 K
im D・H,、and MorikawaT、、 J
ournal of Protein Chemist
ry 6(3) 237(1987):]ユウバクテリ
ウムレクテール(Eubacterium recta
le)菌の産生ずる、アリールスルフオトランスフエラ
ーゼ等が使用される。
ランスフエラーゼ活性を有するものであれば特に限定さ
れるものではないが例えば本発明者の一人、小橋らがヒ
ト腸内細菌より見出した(Kobashi K、、 K
im D・H,、and MorikawaT、、 J
ournal of Protein Chemist
ry 6(3) 237(1987):]ユウバクテリ
ウムレクテール(Eubacterium recta
le)菌の産生ずる、アリールスルフオトランスフエラ
ーゼ等が使用される。
本発明の方法においては、アリールスルフオトランスフ
エラーゼ活性を有する酵素を不溶性の担体に結合した固
定化アリールスル7オトランスフエラーゼを使用するこ
とができる。例えば、本発明者らは、先に、アリールス
ルフオトランスフエラーゼを不溶性誘導体とすることに
より元のアリールスルフオトランスフエラーゼに比べ、
非常に安定で酵素反応を行わせる際に繰り返し使用でき
る固定化酵素を提供することに成功したが(特願昭6O
−187434) 、この固定化アリールスルフオトラ
ンスフエラーゼ等ヲ使用することができる。硫酸基の供
与体としては、アリールサルフェートあるいはその塩が
用いられるが、その例を示すと以下のとおりである。
エラーゼ活性を有する酵素を不溶性の担体に結合した固
定化アリールスル7オトランスフエラーゼを使用するこ
とができる。例えば、本発明者らは、先に、アリールス
ルフオトランスフエラーゼを不溶性誘導体とすることに
より元のアリールスルフオトランスフエラーゼに比べ、
非常に安定で酵素反応を行わせる際に繰り返し使用でき
る固定化酵素を提供することに成功したが(特願昭6O
−187434) 、この固定化アリールスルフオトラ
ンスフエラーゼ等ヲ使用することができる。硫酸基の供
与体としては、アリールサルフェートあるいはその塩が
用いられるが、その例を示すと以下のとおりである。
なお、これらアリールザルフェートの塩としては、例え
ば、ナトリウム塩、カリウム塩、マダイ・シウム塩、カ
ルシウム塩、アンモニウム塩などがあげられる。
ば、ナトリウム塩、カリウム塩、マダイ・シウム塩、カ
ルシウム塩、アンモニウム塩などがあげられる。
4〜
S03H
アリ
ルサルフェ
ト
式
%式%
式
以下実施例により本発明の詳細な説明するが、これらの
例により本発明は制限されるものではない。
例により本発明は制限されるものではない。
実施例
絹フィブロインl 7 、 Omgを50%塩化カルシ
ウムを含む7m(lのO,1M トリス・塩酸緩衝液(
pH8゜O)1:Z懸M L、50mMのp−二1へロ
フエニール硫酸0.2mα及び54.5U/m(lのア
リールスルフオトランスフエラーゼ0.1mo、を加え
た。この混合液を3700で5時間、反応させた後、こ
の反応生成物を蒸留水にて透析した後遠心分離により上
溝と沈澱物とを得た。
ウムを含む7m(lのO,1M トリス・塩酸緩衝液(
pH8゜O)1:Z懸M L、50mMのp−二1へロ
フエニール硫酸0.2mα及び54.5U/m(lのア
リールスルフオトランスフエラーゼ0.1mo、を加え
た。この混合液を3700で5時間、反応させた後、こ
の反応生成物を蒸留水にて透析した後遠心分離により上
溝と沈澱物とを得た。
比較実験例
実施例と同様の操作を酵素とp−ニトロ7エ=−ル硫酸
とヲ用いないもの(コントロールl)及び、酵素のみを
用いないもの(コントロール2)について、行った。
とヲ用いないもの(コントロールl)及び、酵素のみを
用いないもの(コントロール2)について、行った。
実施例、コントロール1およびコントロール2で得られ
た生成物のそれぞれについて、タンパク質量を測定した
。結果を表1に示す。
た生成物のそれぞれについて、タンパク質量を測定した
。結果を表1に示す。
表1
実施例で得られた生成物について、混濁度測定法により
硫酸基を定量したところ上清より得られた絹フィブロイ
ンには2.18μmOな(タンパク質量りに計算すると
、0.13μmoQ7mg)の硫酸基が/ 検出されたが不溶画分 (沈澱物) には検出され なかった。
硫酸基を定量したところ上清より得られた絹フィブロイ
ンには2.18μmOな(タンパク質量りに計算すると
、0.13μmoQ7mg)の硫酸基が/ 検出されたが不溶画分 (沈澱物) には検出され なかった。
Claims (1)
- 絹フィブロインを、アリールスルフオトランスフエラー
ゼを用い、硫酸基を供与する物質を含有せしめた媒質中
で、酵素反応に付することにより、絹フィブロインの構
造中のチロシンの水酸基を硫酸エステルに変換せしめる
ことを特徴とする可溶化絹フィブロインの製造法。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP21428789A JPH0380095A (ja) | 1989-08-22 | 1989-08-22 | 可溶化絹フイブロインの製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP21428789A JPH0380095A (ja) | 1989-08-22 | 1989-08-22 | 可溶化絹フイブロインの製造法 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPH0380095A true JPH0380095A (ja) | 1991-04-04 |
Family
ID=16653234
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP21428789A Pending JPH0380095A (ja) | 1989-08-22 | 1989-08-22 | 可溶化絹フイブロインの製造法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JPH0380095A (ja) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US10584810B2 (en) | 2015-06-09 | 2020-03-10 | The Yokohama Rubber Co., Ltd. | Hydrogen-dispensing hose |
-
1989
- 1989-08-22 JP JP21428789A patent/JPH0380095A/ja active Pending
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US10584810B2 (en) | 2015-06-09 | 2020-03-10 | The Yokohama Rubber Co., Ltd. | Hydrogen-dispensing hose |
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