JPH0377883A - カスタノスペルミンエステル類の製法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 カスタノスペルミンはカスタノスペルマムオーストラレ
（Ｃａｓｔａｎｏｓｐｅｒｍｕｍ　ａｕｓｔｒａｌｅ）
の種子から単離されたアルカロイドであって、次の式を
有する 系統的にこの化合物は以下の様に幾つかの方法で命名で
きる：　ＥＬＳ−（ｌａ　、６β、７α、８β、８ａβ
）］−オクタヒドロ−１．６，７．８−インドリジンテ
トロールは（ＩＳ、６Ｓ、７Ｒ，８Ｒ，８ａＲ）−１，
６，７，８−テトラヒドロキシインドリジジン又は１，
２，４．８−テトラデオキシ−１、４，８−ニトリロ−
し−グリセロ−Ｏ−ガラクトーオクチトール。

第１の系統名又は“カスタノスペルミン”と言う用語を
以下の議論に於いて使用する。

カスタノスペルミンのエステル類及び腸のシュークラー
ゼ及びリソソームのグリゴシダーゼの阻害剤としてのそ
れらの活性及び糖尿病の治療に於けるそれらの有用性が
、ヨーロッパ特許出願０２９７５３４に記載されている
。この示されている特許出願はこれらのエステルの製造
を記載しているが、これに伴う手順は分離されなければ
ならないエステルの混合物を与えるか、または多段階の
化学合成を含むかのいずれかである。

〔発明が解決しようとする課題〕

本発明は、カスタノスペルミンのエステルの新規な酵素
的な製造方法に間するものである。よりくわしくはカス
タノスペルミンの１−エステルを選択的に与える酵素的
なエステル化方法に関している。従って本発明は、次の
一般式を有する化合物の製造方法に間する ｃ式中ＲはＣ１−１゜アルカノイル、シクロヘキサンカ
ルボニル、 ナフタレンカルボニルであって任意付加的にメチル又は
ハロゲンで置換されていても良いもの、フェニル（Ｃ２
−６フルカノイル）であってフェニルが任意付加的にメ
チル又はハロゲンで置換されていても良いもの、メチル
又はハロゲンで任意付加的に置換されても良いピリジン
カルボニル、メチルで任意付加的に置換されていてもよ
いチオフェンカルボニル、メチルで任意付加的に置換さ
れていても良いフランカルボニルであり、Ｙは水素、Ｃ
１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシ、ハロゲン、トリ
フルオロメチル、またはＣ７−４アルキルスルホニルテ
アリ、Ｙ′は水素、Ｃｔ−４７ル’Ｆ　ル、Ｃｔ−ａ７
Ｌコキシ、ハロゲンであるか又はＹと一緒に３．４−メ
チレンジオキシを形成し、Ｙ　ＩＴは水素０１−４アル
キル、Ｃ１−４アルコキシ又はハロゲンである。この方
法はカスタノスペルミンを式 Ｒ”Ｃ（０１０Ｒ” Ｅ式中Ｒ”Ｃ（０）−は上のＲと同じように定義され、
ＲＩＴはビニル又はβ−ハロゲン化エチルである］のエ
ステルと反応させることからなり、この反応がピリジン
溶媒中でスプチリシンの存在下で実施される。

上に使用される“β−ハロゲン化エチル″という用語は
遊離の原子価に対し、βの位置にある炭紫原子」二にｌ
ないし３個のフッ素又は塩素原子を有しているエチル基
を示す。そのような基の例は２．２．２〜トリクロロエ
チル、２，２．２−トリプルオロエチル、２．２−ジク
ロロエチル、２，２・ジフルオロエチル、２〜クロロエ
チル及び２−フルオロエチルである。

ＲＩＩに対する好ましい基は、ビニル２，２．２−　）
ジクロロエチル又は２，２．２−　）リフルオロエチル
である。′ピリジン溶媒”という用語はピリジン自身及
びα−ピコリン、β−ピコリン又はγ−ピコリンなとの
単純なメチル置換ピリジンを包含しているものとする。

ピリジンは反応に好ましい溶媒である。反応は好ましく
は８４〜１２０時間案施されるが、明らかに反応が起こ
った程度を決めるために４層クロマトグラフィによ７て
追跡することが出来、そして反応の期間をそれに従って
修正することができる。明らかにより短い反応時間が使
用できるが、これは１ＩＩ１．適の生成物収率を与えな
いかもしれない。別の方法としてより長い反応時間も使
用できるが、もし反応がより早く実質的に完了するなら
ばより長い時間を使用することは有利ではない。

本発明方法で使用されるスブチリシン酵素は、土壌繍薗
バシルススブチリスの菌株から単離された、蛋白質分解
酵素であり、この物質は市販されている。

上に述べたＣ１−１゜アルカノイル基は、直鎖又は分枝
鎖であり得、そしてホルミル、アセチル、プロピオニル
、ブチリル、イソブチリル、ヘキサノイル、オクタノイ
ル及びデカノイルで例示できる。

上に述へたハロゲンはフッ素、塩素、臭素又はヨウ素に
よつて例示される。上に述べたＣ　１−４アルキル基は
、単独の物又はアルコキシ又はアルキルスルホニル又は
それ以外の基の一部として、直鎖又は分枝鎖アルキル基
であって、４個までの炭秦原子を含有するものであり得
る。そのような種々の基の例はメチル、エチル、プロピ
ル、ブチル、メトキシ、エトキシ、ブトキシ、メチルス
ルホニル又は、エチルスルホニルである。上ｆ述べたプ
エニル（Ｃ２、アルカノイル）基は、ベンゼンアセチル
及びベンゼンプロピオニルによって例示できる。上に述
べた種々のナフタレンカルボニル、ピリジンカルボニル
、チオフェンカルボニル及びフランカルボニル基には幡
々の位置異性体が含まれ、そ（）でこれらは、ナフタ！
／ンーｌ−カルボニル、ナルグレン−２−カルボニル、
ニコチノイル、イソニコチノイル、チオフェン−２−カ
ルボニル、チオフェン−３−カルボニル２、フラン−２
−カルボニル及びフラン−３−カルボニルによって例示
できる。ナフタレン、ピリジン、チオフェン及びフラン
基は任意付加的に、さらに上に示したように置換される
ことができる。

本発明の好ましい具体例は、ＲがＣ０−７゜アルカノイ
ルである化合物を製造する方法を、使用することである
。

上に記載１ノた方法ζこよフて得られるカスタノスペル
ミンのトｌステルは、それ自体活性であり、壱用な化合
物であるか又はこれらは、それら事態が有用であるか又
は他のモノエステルを与える為に、遺沢的に加水分解す
ることができるジエステルの製造に於ける中間体として
使用できる。従って、特に上記の手順で得られるカスタ
ノスペルミンの１−エステルは、さらに酵素的に別の式
％式％ 〔式中Ｒ′及びＲ″は上に定義の通り］のエステル分子
と酵素的に反応されて、カスタノスペルミンの対応する
１、７−及び１．６−ジエステルの混合物を与えること
が出来、１，７−ジエステルが好ま１ノい。この反応は
、リパーゼ酵素の存在下で不活性溶媒中で実施される。

有用な不活性溶媒の例はテトラヒドロフラン、ｔ・アミ
ルアルコール、アセトニトリル又はアセトンであり、テ
トラヒドロフランが好ましい。上で使用されるリパーゼ
酵素が異なる−から得ることができる。したがって、例
えばプロジンバンクレアチックリパーゼ（ＰＰＬ）また
は、クロモバクテリウムビスコスム（（１１「Ｈｏｌ）
ａｃｔｅｒｉｕｗｖｉｓｃｏｓｕｓ）（ＣＶ）からのリ
パーゼを使用することが可能である。この様にして得ら
れた１、７−ジエステルは選択的にスブチリシン酵素で
加水分解でき、対応する７−モノエステルを与える。

本発明の方法によって得られる化合物は、糖尿病の治療
に有用である。より詳しくは、これらは、グルコースの
前駆体が摂取された時に、ある種の糖尿病症状において
観測できる、過度の過血糖症の生じることを防止するの
に使用することができる。従って炭水化物がグルコース
として又はマルトース、蔗糖、澱粉などの形態で食物又
は飲料中で摂取されたときに、血清のグルコース水準が
高い濃度に上昇する。健康な人に於いては、この過血糖
状態は素速く正常にもどり、血液中のグルコースは急速
に代謝され、貯蔵されるか及び又は臓器によって利用さ
れる。真性糖尿病に於いては患者のグルコース許容度が
低下し、そして異常に高い血清のグルコース水準が生じ
て上昇したまま長期閏続く０人において見られる類似の
応答は他の、家畜、家禽、ペット動物、実験動物を含め
た動物中においても観測できる。そのような症状は、食
後の過血糖症と記載できる。そのような症状を処置する
一つの方法は、複雑な糖がグルコースに転換することを
防ぐ何らかの試薬を投与し、それによって過度のグルコ
ース水準の発達を防止することである０本発明に於いて
は高い水準のグルコースが、複雑な糖の加水分解の結果
である場合には、本発明のカスタノスペルミン誘導体の
投与が血液中のグルコースの初期形成を抑制し、従って
血清グルコースの長期間にわたる高水準に関連した問題
を避けることを可能とする。

この結果が達成される機構は以下の通りであるが、上に
述べられた有用性はこの機構の厳密な詳細によフて限定
されるべきものではない。複雑な炭水化物の加水分解を
触媒している酵素は、吸収できない炭水化物を、吸収で
きる糖に転換する。

これらの酵素の急速な作用は、糖尿病に於ける血清中の
グルコースの急性的なそして望ましくない上昇に導かれ
る０本発明の化合物はこれらの酵素の強力な阻害剤であ
り、炭水化物の食物と一緒に投与されたとき、これらは
この種の有害な過血糖症の襲撃を防止する。しかしなが
ら、これらの加水分解酵素の阻害が、腸に存在する物に
対し選択的であることが望ましく、これは本発明の化合
物についても当てはまることである。そうでないならば
全身的なグリコハイドロラーゼの阻害は、細胞内の炭水
化物の利用に於ける困難につながる。

上記の最初の酵素は、腸のシュークラーゼである一方、
第２の酵素は細胞内のりソゾームのα−グルコシダーゼ
である。本発明の方法で得られる化合物は、次の手順に
よってこれらの酵素に対する活性について試験される。

腸シュークラーゼ シュークラーゼはコリスカ［Ｂｉｏｃｈｅｍ、　Ｂｉｏ
ｐｈｙｓ。

Ａｃｔａ、２８４，２３５（）９８４）］の塩抽出手順
を用いて粗製のホモゲネートとしてラットの腸から単離
される。

培養混合物は、１００μｍの酵素製剤プラス試験化合物
を含有していて、１００μｍの０．１Ｍマレイン酸ナト
リウムｐＨ５，９中の６．６μモルのシュークロースの
添加の前、１時間培養される。混合物をさらに３０分閉
環養し、次に８０〜１００℃で３分間熱不活性化する。

変性した蛋白質を遠心で取除く。遊離してきたグルコー
スを、グルコースデヒドロゲナーゼ試薬によって測定す
る（　Ｓｅｒａｇｅｎ　Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ）＊リ
ソソームのα・グルコシダーセ リソワームα−グルコシダーゼを単離し、デイソース［
Ａｎａｌ、８ｉｏｃｈｅｓ＋、　、１１６．３５（１９
８１）］の方法によって硫酸アンモニウム分流段階を通
じて、ラット肝臓から部分的に精製する。酵素を試験化
合物と共に３７℃で１時間、ρ−ニトロフェニルーα−
Ｏ−グルコシドの添加前に最終容量で０．６１の０．１
Ｍ酢酸ナトリウム、２５霧阿塩化カリウムｐＨ４，２中
で培養する。混合物をさらに３０分間３７℃で培養し、
次に９０℃で熱不活性化する。変性した蛋白を遠心で除
去する。１ｍｌの０．１Ｍ炭酸ナトリウムを上澄みフラ
クションに加え、遊離してきたニトロフェノールを４１
０ｎｍに於けるその吸収によって測定した。

本発明の方法によって得られる化合物を、さらに、血清
グルコース上昇を抑制するその能力を測定するために、
蔗糖負荷試験に於いて試験する、この手順を以下の櫟に
まとめることができる、−夜絶食さぜたＩｃＲスイスマ
ウスに試験化合物プラス蕪糖２．Ｏｇｌ恥で経口投与し
たゆ献糖投与３０分後に！！Ｊｊ物を殺し、そ１ノでそ
れらの血清グルコース１度を測定した。血清グルコース
上昇を有意（に抑明夕゛るのに必要な試験化合物の鑑を
、煎糖だけを投与した１ｌ１１１ｊｌの血清グルコース
１度との比較によって測定した。作用の持続期間を試験
するために、マウスを２度経口投与した。′ＭＩＩＪｌ
の投ワ、が＆を馴化合物又は賦形剤である。１．２また
は３時間後にマウスに２．０ｇ／に８で蔗糖を投４した
。鵬糖投９゜さらに３０分後、動物を殺し、それらの血
清グルコースａ度を測定１）た、試験化合物の活性は、
対応する対照からの血清グルコース濃度の有意義な差に
よって示される。

スクラーグドーレーラットを一夜絶食させ、試験化合物
プラス蔗糖を２．０ｇ／にｇで、経口投ｑ・する。

投与後、０．０．５．１．０．１゜５．２．０．２．５
および３．０時間後に、結晶間Ｎをグルコース濃度につ
いて分析した。

作用の持続期間を試験するために、ラットを２度経口投
与した。初期投与は、水または試験化合物の有効量４ｆ
＃である、！または４時間後にラットを２．０３／ＫＨ
で煎糖投与した。血漿試料を０．５、１．０．１．５．
２゜０．２゜５および３．０時閉で取りだし、グルコー
ス満席について分析した。試験化合物の活性は、曲線の
下の面積を用いろ対照動物からの有意義な差によフて示
される。

化合物の有効量即ち、＊後の過血糖症を抑制するのに充
分な量は、処置されろ動物の大きさ、種類及び年齢、特
定の化合物又は使用される軽薬学的に受入れられる塩、
投与の関度、症状のひとざ及び投与の時間等の種々の因
子りこ依存するや一般的に言えば、化合物は０゜１ｍｐ
ｋ〜５０ｓｐｋの投与量で経口投与され０．５Ｉｌｐｋ
〜５ｍｐｋが好ましい。より詳しくは、本発明で造られ
る化合４ｖは、３５ａ＋ｇ〜３５０ｆｇの活性成分を含
有する単一の投与単位投与形で人に投与され、このもの
は食事時に一日に３回投与される。

本発明の方法によって、得られた化合物を用いる場合に
、活性成分は好ま１ノ＜は、製薬担体及び約５〜約９帽
１％の本発明の化合物又は、軽築上受入れられるその塩
からなっている組成物中εこ入れられる。製薬担体とい
う用語は、動物への内部投与のためにａ葉上活性の化合
物を処方するのに有用な、既知の製剤上の賦形剤をさし
、そ（）で使用条件下で実質的に無毒で非感作性のもの
である。

組成物は錠剤、カプセル、エルキシル、シロップ、エマ
ルジョン、分散液、水和剤、及び醗酵粉末を製造の既知
の技術によって造ることができ、所望の組成物の特定の
種類の製造に有用な事が知られている適当な賦形剤を含
有１ノ得る。：ａ当な製Ｍ担体及び処方技術は、櫃準の
教科書例えば、ペンシルバニフイーストンのマツクバプ
リッシングカンパニーによる、レミントンズファーマー
スティカルサイエンス等に見出される。

次の実施例は本発明を説明するために与えられる。しか
しこれらは制限するものとは解釈されるべきではない。

これらの実施例使用される出発物質と０て使用される種
々のエステルは、市販されているか又は文献で知られて
いるかまたは、これらは、標串の知らシ］。た手順で製
造できる、従って例えば、エステルはステグリッチ等Ａ
ｎｑｅ冒、　Ｃｈｅｉｍ、。

！ｎｔ、　７．　Ｅｎ５１゜ｉｌ！、９８１（１９６９
）によって記載された手順を用いて、適当なアルコール
から製造できる。

〔実施例〕

以下の実緻例は、本発明に使用される化合物類の調製を
例示するために、更に櫟供されている。

実施例１ １Ｓｍ１の温い無水ピリジン中のｕ７０ｍｇのカスタノ
スペルミンの溶液に３９６＋Ｉ１ｇの２．２．２−　）
リクロロエチルプチ１ノートを加えた。次に７５ｍｇの
固体スブチリシンを加えた。［市販のスブチリシン（Ｅ
Ｃ３，４２１゜４、即ち、Ｂ、スブチリスからのプロテ
アーゼを０．１Ｍ燐酸緩衝液ｐＨ７，８中に溶解し、そ
して凍結乾燥１〕た］、生じる懸濁液を４５℃で、モし
て２６０ｒｐｍｌ？４ｓｒＷｊ振盪し、その間に７リコ
ートを取りだし、そして薄層クロマトグラフィーで分析
した（塩化メチレン中８ｚエタノール）、酵素（スブチ
リシン）を濾過で除去し、そしてピリジン溶媒を減圧下
で蒸発した。残留物質をシリカゲルラヂアルクロマトグ
ラフィー（塩化メチレン中８ｚエタノール）によって精
製し、８２χ収率でＥＬＳ−（ｌａ、６β、７α、８β
。

８ａβ）］−オクタヒドロ−１．６，７．８−インドリ
ジンテトロール１ブチレートを得た。

別の方法として、クロマトグラフィーで得られた粗生成
物を精製するかわりに、スズチリシンの濾過及びピリジ
ンの蒸発の後に得られた残留物を単に温い酢酸エチルか
ら再結晶し、約１Ｓ０〜１Ｓ１’ｃで溶融する白色結晶
固体として［＋５−（１α、６β、７α。

８β、８ａβ）］−オクタヒドロ−１．６，７．８−イ
ンドリジンテトロール１−ブチレートを得た。　（６９
％収率）。

実施例２ 実施例１の第１バラグラフの手順を、２，２，２−　）
リフルオロエチルオクタノエートを２．２．２−　）リ
クロロエチルプチレートの代りに用いて繰返した時に、
ワックス様の黄色な半固体として、［１Ｓ−（１α。

６β、７ａ　、８β、８ａβ）］−オクタヒドロ−１．
６，７．訃インドリジンテトロール１オクタノエーが得
られた。

ＲｆＱ、２３＜塩化メチレン中ＥＨ工９　／　−ル）　
、　ＭＳ：ｔｓ／ｅ３１６［Ｍ）１”］、ｍ／ｅ２９８
［ＭＨ”−）１２０コ、＋ｗ／ｅ１７２ｒＭ）Ｉ”−Ｈ
ｏＣ（０）ＣＨ２（Ｃ）Ｉ２）５ｃ■３１　（収率２３
Ｘ）。

カスタノスペルミン及び酢酸ビニル（２，２ｎｎｏｌ）
を用いて同じ一般手順を繰返し、そして反応時間８４時
間を用いてＣ＋５−（ｌａ　、６β、７ａ　、８β、８
ａβ）］−オクタヒドロ−１．６，７．８−インドリジ
ンテトロールｌ−アセテーを得た。融点約１Ｓ１〜１Ｓ
３℃（収率９１　り。

同様に９６時間にわたってカスタノスペルミンをビニル
フェニルアセテートと反応させると、（＋５−（ｌａ　
、６β、７ａ　、８β、８ａβ）］−オクタヒドロ−１
、６　、７．８−インドリジンテトロール！−フェニル
アセテート、融点約１１０ないし１１２℃（収率３０Ｘ
）を得た。

実施例３ 実施例１の最初のバラグラフの手順を安息香酸又は置換
安息香酸の適当なエステル又はシクロヘキ酸カルボン酸
、ピリジンカルボン酸、チオフェンカルボン酸又はフラ
ンカルボン酸の適当なエステルを用いて繰返した時に、
対応するカスタノスペルミンのｌ−エステル類が得られ
る。

実施例４ ［１ｓ−（Ｉａ　、６β、？ａ　、８β、８ａβ）コー
オクタヒドロ・１．６，７．８−イントリジンテトロー
ルｌ−フェニルアセテ−）　（１，５−モル）を１Ｓｍ
１の無水テトラヒドロフラン中に溶解した０次に４モル
当量の２．２．２−トリクロロエチルブチレートを加え
た０次に生じる溶液を用いて、リパーゼＣＶ（１０ｍｇ
／ｍｌクロモバクテリウムバスクスムからのリパーゼを
、使用の前ｐＨ７，０に於いて０．１Ｍ燐酸緩衝液から
凍結乾燥した）を加え、懸濁液を４５℃で３日間振盪し
た。薄層クロマトグラフィによって示される様に反応が
、水平におさまってきた時に、酵素を濾過で除去し、テ
トラヒドロフランを減圧下で蒸発させ、そして生じる残
留物をラジアルクロマトグラフィーを用いてエタノール
／塩化メチレン系中でクロマトグラフィーにかけた。こ
のようにして得られた生成物は、油として［＋５−（ｌ
ａ　、６β、７ａ　、８β、８ａβ）］−オクタヒドロ
−１．６．？、８−インドリジンテトロールトフヱニル
アセテート７ブチレートであるｅ　ＭＳ：ｍ／ｅ　３７
Ｂ［ＭＨ”］　、ｓ／ｅ３６０［ＭＨ”−Ｈ２Ｏ３、ｍ
／ｅ２９０［ＭＨ”−ＨＯ−Ｃ（０）ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ
ｓｌ、ｗ／ｅ２４２［：ＭＨ”−Ｈｏ−Ｃ（０）（ＪＩ
２ＣａＨｓｌ−［１ｓ−（＋（Ｘ　、６β、７ａ　、８
β、８ａβ）］−オクタヒドロ−１６，７．８−インド
リジンテトロールｌ−ブチレート及び２，２．２−トリ
クロロエチルブチレートを用いて上の手順を繰返したと
きに得られた生成物は、油としてＣ＋５−（ｌａ　、６
β，７α，８β、８ａβ）］−オクタヒドロ−１．６，
７．８−インドリジンテトロール１７ブチレートであっ
た。ＭＳ：ｍ／ｅ　３３０［ＭＨ”］、ｗ／ｅ３１２［
ＭＨ”−Ｈ２Ｏ３゜＠／ｅ２４２［ＭＨ”−ＨｏＣ（０
）ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３］同様な方法で、［＋５−（ｌａ
　、６β、７ａ　、８β、８ａβ）コーオクタヒドロ−
１，６，７，８−インド＋７ジンテトロール１−アセテ
ートと２．２．２−トリクロロエチルブチレートとの反
応によって、ワックス状の半固体として、［１ｓ−（１
（１，８β、７ａ、８β、８ａβ）］−オクタヒドロ−
１６．７．８−インドリジンテトロールｌ−アセテート
７−７チレートが得られたＭＳ：ｍ／ｅ　３０２［ＭＨ
”ｌ、ｍ／ｅ２８４［ＭＨ”−Ｈ２Ｏ３，ｍ／ｅ２４２
［ＭＨ”−ＨｏＣ（０）ＣＨａ］−追加的にＣ＋５−（
１ａ　、８β、７ａ　、８β、８ａβ）コーオクタビド
ロー１．６．？、８−インドリジンテトロールトブチ１
／−トとビニルフェニルアセテートとの同様な方法に於
ける反応によって、ワックス状の半固体として［ｌ５−
（Ｉα、６β、７α＋８β、８ａβ）］−オクタヒドロ
−１．６，７．８−イントリジンテトロールトブチレ１
・７−フェニルアセテートが得られた。Ｍ５：ｍ／ｅ３
．７８［ＭＨ”：ｌ、ｍ／ｅ３６０［ＭＨ”−Ｈ２Ｏ２
，ｗ／ｅ２９０［ＭＨ”−ＨｏＣ（０）ＣＨ２Ｃ８ＨＣ
Ｈ３コ、ｍ／ｅ２４２［ＭＨ”−ＨＯＣ（０）ＣＨ２Ｃ
８Ｈ，５］。

実施例５ １０ｍエタノールを含有１ノでいる５７１の燐酸緩衝液
（ｐＨ６，０）中の１８９ａｇの［ｌ５−（ｌａ、６β
、？（！　、８β、８ａβ〉］−オクタヒトロー１．６
，７．８〜インドリジンテトロール１，７−ジ７チレー
トの溶液を造り、そしてスアチリシンカールスベルグ（
５＋＋ｇ／ａｌｌ　）を加えた。

反応を薄層クロマトグラフィーによって、塩化メチ１／
ン中の１０％エタノールを用いて反応を追跡した。７時
間後、カスタノスペルミンは現れ始め、反応を凍結によ
って止め、反応混合物を凍結乾燥した。凍結乾燥した粉
末を、塩化メチレン中の４エタノールの混合物を用いて
ラジアルクロマトグラフィーにかけた。得られた生成物
は、６４１収率で［ｌ５（ｆｃｘ　、６β、７ａ　、８
β、８ａβ）］−オクタヒドロ−１６，７．８・インド
リジンテトロール７−ブチレートであった。

上記の手順は、安息香酸、置換安息香酸の適当なエステ
ル又は他の酸の適当なエステルを用いて、本発明の上に
述べた範囲内で繰返（）たときに、対応するカスタノス
ペルミンの対応するエステルが得られる。

同様に、実施例１の平明を２−クロロエチルブチ１ノー
ト又は２．２−ジクロロエチルブチ１ノートを用いて繰
返したとき、得られる生成物は［１Ｓ−（１α、６β、
７α、８β、８ａβ）］−オクタヒドロ−１．６，７．
８−インドリジンテトロール１−ブチレートである。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、式 ▲数式、化学式、表等があります▼ ［式中ＲはＣ＿１＿−＿１＿０アルカノイル、シクロヘ
   キサンカルボニル、 ▲数式、化学式、表等があります▼ ナフタレンカルボニルであって任意付加的にメチル又は
   ハロゲンで置換されていても良いもの、フェニルが任意
   付加的にメチル又はハロゲンで置換されていても良いフ
   ェニル（Ｃ＿２＿−＿６アルカノイル）、メチル又はハ
   ロゲンで任意付加的に置換されていても良いピリジンカ
   ルボニル、メチルで任意付加的に置換されていてもよい
   チオフェンカルボニル、メチルで任意付加的に置換され
   ていても良いフランカルボニルであり、Ｙは水素、Ｃ＿
   １＿−＿４アルキル、Ｃ＿１＿−＿４アルコキシ、ハロ
   ゲン、トリフルオロメチル、またはＣ＿１＿−＿４アル
   キルスルホニルであり、Ｙ’は水素、Ｃ＿１＿−＿４ア
   ルキル、Ｃ＿１＿−＿４アルコキシ、ハロゲン又はＹと
   結合して３，４−メチレンジオキシであり、Ｙ”は水素
   、Ｃ＿１＿−＿４アルキル、Ｃ＿１＿−＿４アルコキシ
   又はハロゲンである］を有する化合物を製造する方法に
   於いて、カスタノスペルミンを式 Ｒ’−Ｃ（Ｏ）−ＯＲ” ［式中Ｒ’−Ｃ（Ｏ）−は上のＲと同じように定義され
   、Ｒ”はビニル又はβ−ハロゲン化エチルである］のエ
   ステルと反応させ、この反応をピリジン溶媒中てスブチ
   リシンの存在下で実施することからなる方法。 ２、式 ▲数式、化学式、表等があります▼ 〔式中ＲはＣ＿１＿−＿１＿０アルカノイル、シクロヘ
   キサンカルボニル、 ▲数式、化学式、表等があります▼ ナフタレンカルボニルであって任意付加的にメチル又は
   ハロゲンで置換されていても良いもの、フェニルが任意
   付加的にメチル又はハロゲンで置換されていても良いフ
   ェニル（Ｃ＿２＿−＿６アルカノイル）、メチル又はハ
   ロゲンで任意付加的に置換されていても良いピリジンカ
   ルボニル、メチルで任意付加的に置換されていてもよい
   チオフェンカルボニル、メチルで任意付加的に置換され
   ていても良いフランカルボニルであり、Ｙは水素Ｃ＿１
   ＿−＿４アルキル、Ｃ＿１＿−＿４アルコキシ、ハロゲ
   ン、トリフルオロメチル、またはＣ＿１＿−＿４アルキ
   ルスルホニルであり、Ｙ’は水素、Ｃ＿１＿−＿４アル
   キル、Ｃ＿１＿−＿４アルコキシ、ハロゲンであるか又
   はＹと一緒に３，４−メチレンジオキシを表し、Ｙ”は
   水素、Ｃ＿１＿−＿４アルキル、Ｃ＿１＿−＿４アルコ
   キシ又はハロゲンである］を有する化合物を製造する特
   許請求の範囲第１項に記載の方法に於いて、カスタノス
   ペルミンを式 Ｒ’−Ｃ（Ｏ）−ＯＲ” ［式中Ｒ’−Ｃ（Ｏ）−は上のＲと同じように定義され
   、Ｒ”はビニル、２，２，２−トリクロロエチル又２，
   ２，２−トリフルオロエチルである］のエステルと反応
   させるが、この反応をピリジン中でスブチリシンの存在
   下で実施することからなる方法。 ３、式 ▲数式、化学式、表等があります▼ ［式中ＲはＣ＿１＿−＿１＿０アルカノイル、シクロヘ
   キサンカルボニル、 ▲数式、化学式、表等があります▼ フェニル（Ｃ＿２＿−＿６アルカノイル）であってフェ
   ニルが任意付加的にメチル又はハロゲンで置換されてい
   ても良いものであり、Ｙは水素、Ｃ＿１＿−＿４アルキ
   ル、Ｃ＿１＿−＿４アルコキシ又はハロゲンである］を
   有する化合物を製造する特許請求の範囲第１項に記載の
   方法に於いて、カスタノスペルミンを式Ｒ’−Ｃ（Ｏ）
   −ＯＲ” ［式中Ｒ’−Ｃ（Ｏ）−は上のＲと同じように定義され
   、Ｒ”はビニル、２，２，２−トリクロロエテル又２，
   ２，２−トリフルオロエチルである］のエステルと反応
   させるが、この反応をピリジン中でスブチリシンの存在
   下で実施することからなる方法。 ４、一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ ［式中ＲはＣ＿１＿−＿１＿０アルカノイルである］を
   有する化合物を製造する特許請求の範囲第１項に記載の
   方法に於いて、カスタノスペルミンを式 Ｒ’−Ｃ（Ｏ）−ＯＲ” ［式中Ｒ’−Ｃ（Ｏ）−は上のＲと同じように定義され
   、Ｒ”はビニル、２，２，２−トリクロロエチル又２，
   ２，２−トリフルオロエチルである］のエステルと反応
   させるが、この反応をピリジン中でスブチリシンの存在
   下で実施することからなる方法。 ５、カスタノスペルミンをピリジン中でスブチリシンの
   存在下で酪酸のビニル、２，２，２−トリクロロエチル
   又は２，２，２−トリフルオロエチルエステルと反応さ
   せることからなる［１Ｓ−（１α，８β，７α，８β，
   ８ａβ）］−オクタヒドロ−１，６，７，８−インドリ
   ジンテトロール１−ブチレートを製造する特許請求の範
   囲第１項に記載の方法。 ６、ピリジン中でスブチリシンの存在下で酪酸の２，２
   ，２−トリクロロエチルエステルとカスタノスペルミン
   を反応させることからなる［１Ｓ−（１α，６β，７α
   ，８β，８ａβ）］−オクタヒドロ−１，６，７，８−
   インドリジンテトロール１−ブチレートを製造する特許
   請求の範囲第１項に記載の方法。