JPH037598A - Ｎ―アシルアルキルアミンの製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は或種の（Ｒ）　−Ｎ−アシル−１−メチル−オ
メガ−フェニルアルキルアミンの製造方法に関するもの
である。このような化合物は医薬品の製造における中間
体としての用途が見い出されている。

〔発明の背景〕

Ｎ−保護型（窒素原子が保護されている）（且）−１−
メチル−オメガ−フェニルアルキルアミンは多くの医薬
品の製造における中間体としての用途が見い出されてい
る。この問題としている医薬品の１つはデイレバロール
（ｄｉｌｅｖａｌｏｌ）、すなわち（且、且）−ラベク
ロール（ｌ　ａｌ）６　ｔａ　ｌｏ　１）　　としても
知られている（Ｒ）−１−ヒドロキシ−２−（（Ｒ）　
−（１−メチル−３−フェニルプロピル）アミノコエチ
ルサリチルアミドである。デイレバロールは血圧降下薬
であって、欧州特許出願公開公報第００９７０２号に記
載されている。

欧州特許出願公開公報第００９７０２号によれば、デイ
レバロールは、Ｎ−保護型（Ｒ）−１−メチル−３−フ
ェニルプロピルアミンを〇−保護型４−ヒドロキシ−ア
ルファーフロム−３−カルバモイルアセトフェノンと反
応させ；その生成物を還元して異性体混合物を形成させ
、ついでこの混合物からＮ、Ｏ−保護型（Ｒ）−１−ヒ
ドロキシ−２−〔（且）−（１−メチル−３−フェニル
プロピル）アミノコエチルサリチルアミドを分離させ；
そして保護基を除去してデイレバロール、または医薬品
として受は入れることができるその塩を形成させること
からなる、多段階方法によって、前記Ｎ−保護型アミン
から製造することができる。この方法に使用されるＮ−
保護型（且）−１−メチル−３−フェニルプロピルアミ
ンはＮ−保護型−１−メチル−３−フェニルプロピルア
ミンのラセミ体を分解することによって製造される。

この明細書に示されているＮ−保護型−１−メチル−３
−フェニルプロピルアミンの例は、ベンジルアミンをベ
ンジルアセトンと反応させてから、その生成したシッフ
塩基を還元するか、あるいは１−メチル−３−フェニル
プロピルアミンのラセミ体をベンジル化することによっ
て製造できるＮ−ベンジル誘導体である。

Ｎ−（５ｉ４１型１−メチル−３−フェニルプロピルア
ミンの且鏡像体の製造は特に費用がかかるので、それの
改良された製法を見い出す多くの試みが提案されてきた
。

米国特許第４．６５８．０６０号に記載されている一つ
の試みでは、Ｎ−保護用の基が旋光性１−フェニルエチ
ル基になっている。且鏡像体は（Ｂ、）−アルファーメ
チルベンジルアミンをベンジルアセトンと反応させ、つ
いでこれを還元して、慣用の物理的方法で所望の（Ｒ，
Ｒ）−ジアステレオマーを分離できる異性体混合物を形
成させることによって製造される。この方法の欠点は旋
光性の出発原料、すなわち（Ｒ）−アルファーメチルベ
ンジルアミンを必要とするということであった。

特開昭６３−５４３５１号公報に記載されている別の方
法では、（Ｒ）−１−メチル−３−フェニルプロピルア
ミンは、これに対応する且アジドの還元によって製造さ
れ、このアジドは、ベンジルアセトンを微生物で不整還
元して（旦）−１−メチル−３−フェニルプロパツール
を生成させ：このアルコールをこれに対応スる（Ｓ）　
−ｐ−トルエンスルホネートに転化し；そしてこの生成
物を金属アジ化物と反応させて所望の（Ｒ）−１−メチ
ル−３−フェニルプロピルアジドを生成させることから
なる多段階プロセスによって製造される。しかしながら
、この方法は多数の段階を含むので魅力がない。

特開昭６３−２３７７９６号公報に記載されているもう
一つの試みにおいては、旦鏡像体を優先的に代謝できる
微生物を使用して、（Ｒ）−１−メチル−３−フェニル
プロピルアミンをそのラセミ体から製造している。

より一般的には、或範囲にわたるＮ−ｐ−アミノフェニ
ルアセチルアミノ誘導体のユおよび旦鏡像体の製造がロ
ッジ（Ｉｌｏｓｓｉ）等によって試みられてきた（ジャ
ーナル・サブ・ジ・オーガニック・ケミストリイー　（
Ｊ、Ｏｒｇ、　Ｃｈｅｍ、）、第４４巻、第１３号、１
９７９年、第２２２２頁〜第２２２５頁）。これらの鏡
像体は生体触媒としてベンジルペニシリンアシラーゼ（
ｂｅｎｚｙｌｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎａｃｙｌａｓｅ）を
使用して選択的に製造される。特に、ロッジ等は、対応
するラセミ化合物から、それぞれ光学純度１９％および
５８％の収率でＮ−ｐ−アミノ−１−フェニルアセチル
−１−フェニルエチルアミンおよびＮ−ｐ−アミノ−１
−フェニルアセチル−１−フェニル−ｎ−プロピルアミ
ンの且鏡像体を製造した。

しかしながら、生体触媒のベンジルペニシリンアシラー
ゼはその活性が限定されていて、アシル基がフェニルア
セチル誘導体であるＮ−アシル−１−メチル−オメガ−
フェニルアルキルアミンに対してしか活性でないことが
判明した。このような方法を商業的に適用するに当って
は、構造が簡単な基は医薬の最終製品を製造する間に結
局除去されて失われるので、このような構造が簡単な基
の範囲からＮ−保護用基を選択できることが非常に望ま
しい。

最も驚くべきことには、生体触媒の使用を含む、或種の
（Ｒ）−Ｎ−アシル−１−メチル−オメガ−フェニルア
ルキルアミンの新しくてを利な製造方法がここに発見さ
れた。

〔発明の構成〕

したがって、本発明は、旦鏡像体のＮ−アシル基を立体
選択的に加水分解できる生体触媒にＮ−アシル−１−メ
チル−オメガ−フェニルアルキルアミンを供給し、つい
で優勢的にＲ鏡像体の形で残っているＮ−アシル−１−
メチル−オメガ−フェニルアルキルアミンを回収するこ
とを含む、優勢的に且鏡像体の形の、アシル基が脂肪族
アシル基であり、かつアルキル基が１〜３個の炭素原子
を有する、Ｎ−アシル−１−メチル−オメガ−フェニル
アルキルアミンの製造方法を提供するものである。

〔発明の詳細な説明〕

本発明方法によって、９９．５％を超える鏡像体純度を
有する（Ｒ）−Ｎ−アシル−１−メチル−オメガ−フェ
ニルアルキルアミンを高収率で製造できることがわかっ
た。鏡像体純度は１００％×〔且鏡像体］／（〔且鏡像
体〕＋〔盈鏡像体］）と定義される。

Ｎ−アシル−１−メチル−オメガ−フェニルアルキルア
ミンは、好ましくはラセミ混合物の形で生体触媒に供給
される。

Ｎ−アシル−１−メチル−オメガ−フェニルアルキルア
ミンの中のアシル基は好ましくはアルカノイル基、アル
コキシカルボニル基またはホルミルである。アルカノイ
ル基は好ましくは２〜６個の炭素原子、より好ましくは
２〜４個の炭素原子を有し、アセチルが特に好ましい。

アルコキシカルボニル基は好ましくは２〜６個の炭素原
子、より好ましくは２〜４個の炭素原子を有し、メトキ
シカルボニルが特に好ましい。アシル基は最も好ましく
はアセチルである。

Ｎ−アシル−１−メチル−オメガ−フェニルアルキルア
ミンの中のアルキル基は１〜３個の炭素原子を有する。

アルキル基は好ましくはプロピルである。

生体触媒は微生物、特に細菌、菌類または酵母、あるい
は植物または動物の細胞、またはそれらの抽出物、また
は酵素であり得る。好ましくは生体触媒は微生物１．そ
れの抽出物または酵素である。

より好ましくは生体触媒はロドコッカス（Ｒｈｏｄｏ−
匹匹旦Ｌ１バシラス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）　、アルスロ
バクタ−Ａｒｔｈｒｏｂａｃｔｅｒおよびコリネバクテ
リウムＣｏｒ　ｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属から選ばれ
た微生物である。

本発明方法において生体触媒として使用できる微生物の
具体的な例は、コリネバクテリウム・シュードジフセリ
チクムＣｏｒ　ｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ　　匹ｌ可と−
ｃｔｉ　ｈｔｈｅｒｉｔｆｃｕｍ）　ＮＣＩＭＢ　４０
１４５　、ロドコッカス−ｑ垣世旦藏！シ組）種ＮＣＩ
ＭＢ　４０１３９　；アルスロバクタ−」狛上匹崩立匡
ｄ種ＮＣＩＭＢ４０１４０　？アルスロバクターｆＡｍ
匹地立ｌ吐種ＮＣＩＭＢ　４０１４１　；コリネバクテ
リウム、包ｙ１ル±鱈１虹士徂）種ＮＣＩＭＢ　４０１
４２　ｉコリネバクテリウム　Ｃｏｒ　ｎｅｂａｃｔｅ
ｒｉｕｍ種ＮＣＩＭＢ４０１４３およびコリネバクテリ
ウム（Ｃ９ＬｙＭ−７種ＮＧＩＭＢ　４０１４４であっ
て、これらはすべて１９８９年５月９日、英国、アバデ
ィーンＡＢ９　８ＤＧ、アベイ・ロード（Ａｂｂｅｙ　
Ｒｏａｄ）１３５、Ｐ、　Ｏ，Ｂｏｘ　３１のナショナ
ル・コレクションズ・サブ・インダストリアル・アンド
・マリーン・バクテリア有限会社；トリー研究所（Ｎａ
ｔｉｏｎａｌ　　Ｃｏ１１ｅｃｔｉｏｎｓ　ｏｆ　Ｉｎ
ｄｕｓｔｒｉａｌ　ａｎｄＭａｒｉｎｅ　Ｂａｃｔｅｒ
ｉａ　Ｌｔｄ；　Ｔｏｒｒｙ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈ　５ｔ
ａｔｉｏｎ）に寄託されている。本方法において生体触
媒として使用できる微生物の別の具体的な例はバシラス
」互剋土廊搬一種ＮＣＩＭＢ　４０２４５およびバシラ
ス孤匹旦り旦種ＮＣＩＭＢ　４０２４６であって、両者
は１９８９年１２月２１日、英国、アバディーン　ＡＢ
９８ＤＧ、アベイ・ロード１３５、Ｐ、　０．　Ｂｏｘ
　３１のナショナル・コレクションズ・サブ・インダス
トリアル・アンド・マリーン・バクテリア有限会社、ト
リー研究所に寄託されている。

本発明方法において使用するのに適した微生物は、アセ
トアミド、例えばＮ−第二プチル−アセトアミドによっ
て生育できる微生物を識別する選別方法によって土壌試
料から分離された。

微生物を生体触媒として使用するとき、それは増殖状態
または非増殖状態のいずれにあってもよい。

Ｎ−アシル−１−メチル−オメガ−フェニルアルキルア
ミンの加水分解は通常、微生物細胞全体の存在下で遂行
されるけれども、加水分解酵素系は加水分解を遂行する
前に、微生物から完全にまたは部分的に抽出しておくこ
とができる。不必要な分離、酵素の精製および酵素の固
定化を避けるために、酵素は通常少なくとも若干の細胞
成分とともに存在している。細胞と合体させるとき、こ
れらの細胞は、酵素成分自体が加水分解の進行を許す活
性でかつ安定な形を保持する限り、生きているか、ある
いは何らかの方法で処理されてもとのままの形で死んで
いるか、あるいは細胞自体固定化されて随意に均質化さ
れているかのいずれであってもよい、酵素の加水分解活
性が完全に維持される限り、酵素または細胞の固定化は
当該技術で公知のどの方法によって遂行してもよい。

微生物は好ましくは、加水分解に使用される前に約１〜
１０日間培養し、その後細胞を液体の塩培地、好ましく
はできるだけ少量の液体栄養培地中に分散させ、そして
Ｎ−アシル−１−メチル−オメガ−フェニルアルキルア
ミンに細胞の作用を受けさせる。加水分解に使用される
微生物を増殖させるためには、有機栄養源のための薬剤
（例えば酵母エキス、麦芽エキスペプトン、肉エキス等
）および無機栄養源のための薬剤（例えば燐酸塩、マグ
ネシウム、カリウム、亜鉛、鉄およびその他の微量の金
属）とともに同化可能な炭素Ｓ＜例えばグルコース、ラ
クテート、サッカロース等）、窒素源（例えば硫酸アン
モニウム、硝酸アンモニウム、塩化アンモニウム等）を
含む通常の培地を、アセトアミド誘導物質（例えばアセ
トアミドまたはＮ−アルキルアセトアミド、例えばＮ−
第二ブチルアセトアミド）または必要ならば、好ましく
はチオアセトアミド（例えばチオアセトアニリド）と−
緒に使用することができる。これの代りに培地として、
塩に加えてアセトアミド（例えばＮ−第二ブチルアセト
アミド）またはチオアセトアミドを含む培地が使用され
る。

微生物の生育中に０〜４５°Ｃの温度および３．５〜８
のＰＨが維持される。

好ましくは微生物は２０〜３７°Ｃの温度および４〜８
のｐＨで生育される。

Ｎ−アシル−１−メチル−オメガ−フェニルアルキルア
ミンの加水分解中には、必要な場合の有機栄養源のため
の薬剤（例えば酵母エキス、塩エキス、ペプトン、肉エ
キス等）および必要な場合の無機栄養源のための薬剤（
例えば燐酸塩、マグネシウム、カリウム、亜鉛、鉄およ
びその他の微量の金属）とともに必要な場合の同化可能
な炭素ａ（例えばグルコース、ラクテート、サッカロー
ス、フルクトース、グリセロール等）、必要な場合の窒
素源（例えば硫酸アンモニウム、硝酸アンモニウム、塩
化アンモニウム等）を含む通常の培地を使用することが
できる。好ましくはＮ−アシル−１−メチル−オメガ−
フェニルアルキルアミンの加水分解中に、微生物は無機
培地を使用して実質的に非増殖状態に保持される。微生
物は、塩（例えば塩化ナトリウム、燐酸カリウム等）を
含む水性培地、または水単独の中で、例えば同化可能な
炭素源の排除の下に、あるいは窒素源の排除の下に非増
殖状態の形で使用することができる。

この段階中に０〜４５°Ｃの温度および３．５〜９のｐ
Ｈが維持される。好ましくは微生物は２０〜３７°Ｃの
温度および４〜８のｐＨに維持される。

Ｎ−アシル−１−メチル−オメガ−フェニルアルキルア
ミンは、有利には、１−２００ｇ／ｊ！、好ましくは少
なくとも５　ｇ／ｊ２の濃度で生体触媒に供給すること
ができる。

主として且鏡像体の形にある残りのＮ−アシル−１−メ
チル−オメガ−フェニルアルキルアミンは、このような
生成物自体についてそれ自体公知であるいずれかの方法
、例えばブイヨンからの分別結晶または酸／塩基／溶媒
の分画抽出（ｄｉＨｅｒｅｎｔｉａｌ　ｅｘｔｒａｃｔ
ｉｏｎ）によって回収し、そして精製することができる
。

Ｎ−アシル−１−メチル−オメガ−フェニルアルキルア
ミンの且鏡像体の製造の他に、本発明方法はまた、これ
に対応する１−メチル−オメガ−フェニルアルキルアミ
ンの旦鏡像体を製造するためにも使用できる。本方法に
おいては、Ｎ−アシル−１−メチル−オメガ−フェニル
アルキルアミンの旦鏡像体が生体触媒により加水分解さ
れて、所望の且鏡像体が残る。本方法において使用され
る生体触媒を適切に選ぶことによって、（Ｓ）−Ｎ−ア
シル−１−メチル−オメガ−フェニルアルキルアミンの
加水分解は、それに対応する（盈）−１−メチル−オメ
ガ−フェニルアルキルアミンを生成することができる。

（Ｓ）−１−メチル−オメガ−フェニルアルキルアミン
はこのような生成物についてそれ自体公知の方法のいず
れかによって回収し、そして精製することができる。

本発明方法によって製造される主として且鏡像体の形に
あるＮ−アシル−１−メチル−オメガ−フェニルアルキ
ルアミンは、これに対応する、主として且鏡像体の形に
ある１−メチル−オメガ−フェニルアルキルアミン、そ
の塩またはそのＮ−保護型の製造において使用すること
ができる。

Ｎ−アシ／Ｌ；−１−メチル−オメガ−フェニルアルキ
ルアミンは、アルカリ金属水酸化物のような塩基または
無機酸のような酸、例えば塩酸または硫酸のいずれかを
使用する加水分解によって１−メチル−オメガ−フェニ
ルアルキルアミンに転化することができる。この加水分
解は水の存在下、有利には５０°Ｃ〜還流温度において
遂行される。

１−メチル−オメガ−フェニルアルキルアミンは慣用方
法によって塩に転化することができ、例えばハロゲン化
水素酸を用いる処理によってハロゲン化水素酸塩、例え
ば塩化水素酸塩（塩酸塩）または臭化水素酸塩に転化す
ることができる。

１−メチル−オメガ−フェニルアルキルアミンのその他
のＮ−保護型も慣用方法を使用して製造できる０例えば
、Ｎ−ベンジルまたはＮ−アルファーメチルベンジルの
ようなアラルキル型は適切なハロゲン化アラルキルをア
ミンと反応させることによって製造できる。

Ｎ−アシル−１−メチル−オメガ−フェニルアルキルア
ミンの且鏡像体は医薬品のような化合物の製造における
中間体としての使用が見い出されている。特に、主とし
て且鏡像体は（Ｒ）−１−ヒドロキシ−２−〔（且）−
（１−メチル−３−フェニルプロピル）アミノコエチル
サリチルアミドまたはその医薬品として受は入れること
ができる塩、例えば塩酸塩の製造において使用される。

このようにして、アシル化合物は、前述のように、（Ｒ
）−１−メチル−３−フェニルプロピルアミンのＮ−保
護型に転化することができる。ついで、このＮ−保護型
化合物は、欧州特許出願公開公報第００９７０２号の方
法にしたがって、（Ｒ）−１−ヒドロキシ−２−〔（且
）−（１−メチル−３−）エニルプロビル）アミノ］エ
チルサリチルアミドまたは医薬品として許容されるその
塩に転化することができる。別法として、このアシル化
合物は遊離のアミンに転化し、ついで〇−保護型４−ヒ
ドロキシ−アルファーブロム−３−カルバモイルアセト
フェノンまたはこれに相当する反応性化合物と直接反応
させることができる。

本発明方法において出発物質として使用されるＮ−アシ
ル−１−メチル−オメガ−フェニルアルキルアミンは、
これに対応する１−メチル−オメガ−フェニルアルキル
アミンを慣用技術を使用してアシル化することによって
容易に製造することができる。例えば、このアミンは適
当なハロゲン化アシルまたは酸無水物と反応させること
ができる。

〔実施例〕

以下の実施例によって本発明を説明する。

使用した培地は次のとおりであった。

ＪＣＭｉ”池 に！ＨＰＯ。

ＭｇＳＯ４・　７日２０ ＦｅＳＯｎ　　１　７１（ｚＯ ＣａＣ１ｔ　　・　２ＴｏＯ ＺｎＳＯ４・　’ｌｈ。

Ｍｎ５Ｏ＊　　・　３ＨｚＯ （ＮＨ４）ｚｓＯ４ グルコース バクト（Ｂａｃｔｏ）ペプトン 酵母エキス 麦芽エキス ｐＨを７．２に調整した。

アンモニウム　　　　ないＭ ＮａｚＦＩＰ０４ ＫＥＩ！ＰＯ。

Ｍｇ５Ｏａ　　・　７Ｈ！０ ＣａＣｊ！ｚ　　・２Ｌ０ 含有量（ｇ／ｌ） ０．２ ０．００２５ ０．０１２５ ０．００２５ ０．００２５ ０ ｏｄ　　　Ｄ２ 含有量Ｃｇ／ｌ） ０．２ ０．０１４７ ＦｅＣｌ　。

ＺｎＳＯ４−ＩＨｚＯ ＣｕＳＯａ　　・　５８ｔＯ ＭｎＳＯｎ　　Ｈ４１（ｇ。

ＣｏＣ４２ｇ　　・　６８ｚＯ ＪＯａ ＮａｚＭｏＯ４１２ＥＩｚＯ ｐＨを６．８に調整した。

この培地に下記のビタミン混合物Ｏ０ を加えた（添加量はｍｇ／１．で示す）ビオチン 葉酸 ピリドキシン・Ｉ４Ｃ１ リボフラビン チアミン ニコチン酸 バントラン酸カルシウム ビタミンＢＩ！ ｐ−アミノ安息香酸 チオクト酸 ０．０１６７ ０．０００３６ ０．０００３２ ０．０００３ ０．０００３６ ０．００００２ ０．０００６ ５ｍｌ／ｌ。

ＳＸ 含有量Ｃｇ／１） ＫＨ２ＰＯ４８，９２ Ｎａｇ）ＩＰＯｎ　　　　　　　　　　　　２．８４（
ＮＨ４）　！ＨＰＯ４１ （ＮＨ４）ｚｓＯ４０，２ ＫＣｌ　　　　　　　　　　　　　０．２クエン酸三ナ
トリウム　　　　　０．２９４ＣａＳＯ４・７１（ｚｏ
　　　　　　　　　　０．００５ＭｇＳＯ４・７１ｂ０
　　　　　　　　　０．２ＺｎＳＯｉ　・７１１ｚＯＯ
，０００５ＭｎＣｊ！　ｚ　・４Ｈ！ＯＯ，０００３Ｃ
ｕＳＯｎ　・５ＨｚＯＯ，０００１５Ｈ３ＢＯ３０，０
０００５ ＮａＪｏＯ４・２Ｈ！０　　　　　　　　０．００００
５５ＫＩ　　　　　　　　　　　　　　　Ｏ，０００１
（ＮＨ４）ＩＳ０４　・Ｆｅ５Ｏａ　・６ＨｇＯＯ，０
０２５ｐＨを７．０に調整した。

実施例１ 生体触媒としてロドコッカス種ＮＣＩＭＢ　４０１３９
を使用する（Ｒ３）−Ｎ−アセチル−１−メチル−３−
フェニルプロピルアミンからの（Ｒ）−Ｎ−アセチル−
１−メチル−３−フェニルプロピルアミンの製造 ロドコッカス種ＮＣＩＭＢ　４０１３９を栄養基天領斜
面上で増殖させて貯蔵した。無菌のＪＣＭ培地１００ｍ
１を含む２５０ｍ１の三角フラスコを接種するために傾
斜面を使用した。フラスコを（好気性条件を維持するた
めに）３０°Ｃにおいて４８時間オービタルインキュベ
ータ中で保温した。

細胞を遠心分離によって増殖培地から沈澱させ、ついで
これをｐ　Ｈ７，０の０．１Ｍ燐酸カリウム溶液２０ｍ
ｊ！中に再び懸濁させた。（Ｒ３）−Ｎ−アセチル−１
−メチル−３−フェニルプロピルアミン（１００ｍｇ）
を加えた。２５０ｍｆの三角フラスコ中にある細胞懸濁
液および基質を軌道振盪機で４８時間３０°Ｃに保温し
た。

２ＭＮａＯＨを使用して細胞懸濁液のｐＨを１１に調整
した。この懸濁液を２０ｍｊ２のジクロルメタンで抽出
した。回収されたＮ−アセチル−１−メチル−３−フェ
ニルプロピルアミンおよび１−メチル−３−フェニルプ
ロピルアミンの量をガスクロマトグラフィーにより下記
の条件下で測定した。

測定器：バリアン（Ｖａｒｉａｎ）　３７００　　ガス
クロマトグラフ カラム：ガスクロム（Ｇａｓ　Ｃｈｒｏｍ）　Ｑ　（１
００〜１２０メツシユ）上５％ＪＸＲ，１，８４ｍＸ内
径２ｍｍ（フェイズ　セパレーションズ（Ｐｈａｓｅ　
５ｅｐａｒａｔｉｏｎｓ）　、英国クルーイド州りイー
ンズフェリー（Ｑｕｅｅｎｓｆｅｒｒｙ）　）キャリャ
ーガス二流量３０　ｍ　！！　／ｍｉｎの窒素インゼク
タ；２００°Ｃ 検出器：水素炎イオン化型検出器、２２０°Ｃオーブン
：カラム初期温度１４０℃（２分）、その後１０°Ｃ／
ｌｌｌ１ｎの昇温速度で１９０°Ｃまで加熱するプログ
ラム 信親のおける基準を用いる検量プロットを作成した。

この方法によって、培養の終期において２．５１ｇ／ｌ
のＮ−アセチル−１−メチル−３−フェニルプロピルア
ミンおよび！、１２ｇ／ｊ！の１−メチル−３−フェニ
ルプロピルアミンが細胞懸濁液中に存在していたことが
わかった。Ｎ−アセチル−１−メチル−３−フェニルプ
ロピルアミンおよびその加水分解生成物である１−メチ
ル−３−フェニルプロピルアミンを酸／塩基／溶媒の分
画抽出によって精製した。２種の化合物の鏡像体組成物
をキラル（ｃｈｉｒａｌ）ｌ（ＰＬＣカラム上で分解す
ることによって、その組成物を測定した。

測定器：ギルソン（Ｇｉｌｓｏｎ）アイソクラティック
システム（ｉｓｏｃｒａｔｉｃ　ｓｙｓｔｅｍ）検出器
：２５４ｎｍの紫外線 カラム：キラルセル（Ｃｈｉｒａｌｃａｌ）　ＯＤ　　
２５０　ｏｎ×内径４．６　ｗｍ　（ヒフロム（旧ｃｈ
ｒｏｍ）　、英国、バークシャー州、レディングによっ
て供給される） 移１ｊＪ相、ヘキサン／プロパン−２−、ｔ−）Ｌｔ／
’；エチルアミン（８０：２０：０．１） 流　速：１−メチル−３−フェニルプロピルアミン分析
用１ｍｆ／ｍｉｎまたはＮ−アセチル−１−メチル−３
−フェニルプロピルアミン分析用２ｍｆ／ｆｆ１ｉｎ 温度；室温 保持時間：　１−メチル−３−フェニルプロピルアミン
且鏡像体　　　約３．１分 旦鏡像体　　　約３．８分 Ｎ−アセチル−１−メチル−３−フェ ニルプロピルアミン 且鏡像体　　　約５．５分 旦鏡像体　　　約６．５分 試験した両試料とも単一の鏡像体を含むことがわかり、
すなわちＮ−アセチル−１−メチル−３−フェニルプロ
ピルアミンの場合これは且鏡像体（＞９９．５％且）で
あり、一方１−メチルー３−フェニルプロピルアミンは
旦鏡像体（＞９９．５％−５工）であった０本実施例並
びにこれにつづ〈実施例において、そこに記載されてい
る且鏡像体の鏡像体純度は１００％×〔且鏡像体）／（
（Ｒ鏡像体〕＋〔旦鏡像体〕）と定義され、同様に盈鏡
像体の鏡像体純度は１００％×〔旦鏡像体）　／（［Ｒ
鏡像体〕＋〔旦鏡像体〕）と定義される。

鏡像体の溶離順序に関する証拠が次のようにして得られ
た。

ロドコッカス（勤ｌ桓鵠葛１吐種ＮＣＩＭＢ　４０１３
９を用いる（Ｒ３）−Ｎ−アセチル−１−メチル−３−
フェニルプロピルアミンの加水分解によって製造された
１−メチル−３−フェニルプロピルアミンの試料の場合
、ピークは、それよりも遅く溶離する鏡像体（保持時間
的３．８分）に対応していた。

この化合物は〔α）Ｄ”−＋３．４″’（Ｃ＝０．６、
ＣＨＣｌ５）の右旋性をもつことがわかった。１−メチ
ル−３−フェニルプロピルアミンの呈鏡像体が右旋性を
有することが文献から知られている（例えば日本化学協
会誌（Ｂｕｌｌ　ＣｈｅｒａＳｏｃ　　Ｊａ　ａｎ工主
、第３７４４頁（１９７５）に白木Ｙ０、オダＪ、およ
び弁上Ｙ、によって〔α〕Ｄ１ミ＋１０”　　（正味）
であることが報告されている）。

旦構造を有する１−メチル−３−フェニルプロピルアミ
ン鏡像体の遅い溶離を示す別の証拠が次のようにして得
られた。

１−メチル−３−フェニルプロピルアミンの針状（−）
−マンデル酸塩の少量を分別結晶によって調製した。こ
の塩から解放された遊離塩基はキラルＨＰＬＣカラム上
で徐々に流動する純粋な鏡像体であった。この鏡像体の
固有の形状を測定するためにベンジリデン誘導体の円偏
光二色性を次のように測定した。

針状アミン（＝）−マンプレート（３ｍｇ、１０μモル
）、２，２．４−１−リメチルペンクン（０，５ｍｆ）
および２ＭＮａＯＨ水溶液（４滴）を窒素の下で振盪し
た。上層の大部分を分離し、そしてベンズアルデヒド（
２μモル）およびゾンデ４Ａ分子篩２ペレットとともに
８０°Ｃで１時間加熱した。

ガスクロマトグラフィー分析によると（２５ｍＣｐＳｉ
ｆ　　５　；　９０〜２５０”Ｃ昇温速度１０”Ｃ／＋
ｌｌ１ｎ）、ベンズアルデヒド（保持指数９５０　；　
５２％）、１−メチル−３−フェニルプロピルアミン（
保持指数１２２５　；　０．３％）およびベンジリデン
誘導体（保持指数１８９０　；　４７％）の存在が示さ
れた。

この溶液を８００倍に希釈したものをｃ、ｄ、スペクト
ルの測定に用いると、このスペクトルは２４２Ｂｍ１デ
ルタニブシロン ートの質量を基とする）において広い正の最高値を示し
た。２，２．４−　）ジメチルペンクン中の（旦）−（
＋）−１−メチル−３−フェニルプロピルアミンのベン
ジリデン誘導体について、ポタポフ（Ｐｏｔａｐｏｖ）
等は、アミンの光学的純度について補正されている、２
４３Ｂｍにおけるデルタニブシロン最大値＋１１．５を
見い出した（ポタボフ（Ｐｏｔａｐｏｖ）、Ｖ．Ｍ．、
デムヤノピッチ（Ｄｅｍ　’　ｙａｎｏｖ　ｉｃｈ）、
Ｖ．Ｍ．、ソロベバ（Ｓｏｌｏｖ’ｅｖａ）、Ｌ．Ｄ．
　、およびベンドロバ（Ｖｅｎｄｒｏｖａ）、０．Ｅ．
　（１９７Ｂ）　Ｚｈ．　Ｏｒ　、　Ｋｈｉｍ　　１土
、８８２−８８３）。それ故旦アミンはキラルＨＰＬＣ
カラム上でゆっくり移動する鏡像体である。

且であるＮ−アセチル−１−メチル−３−フェニルプロ
ピルアミンの固有形状は（Ｓ’）−１−メチル−３−フ
ェニルプロピルアミンが加水分解生成物であるという事
実から結論を出した。これに基づいて、Ｎ−アシル−１
−メチル−３−フエニルゾ、、ロピルアミンの且鏡像体
はキラルＨＰＬＣカラムから速やかに溶離する鏡像体で
あることがわかる。

実施例２ 住体触媒としてコリネバクテリウム・シェードジフセリ
チクムＮＧＩＭＢ　４０１４５を使用する（１旦）−Ｎ
−アセチル−１−メチル−３−フェニルプロピルアミン
からの（１−Ｎ−アセチル−１−メチル−３−フェニル
プロピルアミンの製造コリネバクテリウム・シェードジ
フセリチクムＮＣＩＭＢ　４０１４５を栄養寒天斜面上
で増殖させて貯蔵した。グルコース（５ｇ／ｌおよびア
セトニトリル（０．５ｇ／ｌ）を補った、アンモニウム
塩を含まないＭｏｄＤ２培地の中で細菌を増殖させた点
を除いて実施例１の手順を繰り返した。（１旦）−Ｎ−
アセチル−１−メチル−３−フェニルプロピルアミンを
用いた培養を１００時間続けた。

培養の終期において、細胞懸濁液は２．５４ｇ／ｌのＮ
−アセチル−１−メチル−３−フェニルプロピルアミン
および２．１６ｇ／ｆｆｉの１−メチル−３−フェニル
プロピルアミンを含むことがねかった。Ｎ−アセチル−
１−メチル−３−フェニルプロピルアミンは９９．５％
を超える且鏡像体を含んでいた。

実施例３ 炭素源としてＮ−第二ブチルアセトアミドを利用できる
細菌の単離 増殖のための炭素源としてＮ−第二ブチルアセトアミド
を利用できる生物を次の方法によって単離した。

２５０ｍｊ！の三角フラスコの中のＰＳＸ培地５０ｍｊ
２に１ｇの土と０．２５　ｇ　（５ｇ／／りのＮ−第二
ブチルアセトアミドを加えた。この混合物をオービタル
インキュベータにより３０°Ｃで３〜７日間培養した。

時々１ｍｆのアリコートをフラスコから取り出して、こ
れを５０ｍ１のＦＳＸと５ｇ／ｌのＮ−第二ブチルアセ
トアミドを含む新しいフラスコに接種するために使用し
た。この二次培養手順を２回遂行した後、培養物の試料
で栄養寒天の上を覆った。寒天プレートを３０°Ｃにお
いて１〜３日間培養し、ついでプレートの表面から単一
のコロニーをむしり取った。このようにして得た純粋な
培養物を栄養寒天斜面上で増殖させ（３０°Ｃで）で貯
蔵した（４°Ｃで）。

このようにして得た単離物はＡＰＩ　　２０Ｂ試験キツ
ト（Ａ　Ｐ　Ｉ　−ｂｔｏ　Ｍｅｒｉｕｘ、英国、ハン
プシャー州、パシングストーク（Ｂａｓ　ｉｎｇｓ　ｔ
ｏｋｅ）を使用してアルスロバクタ一種およびコリネバ
クテリウム種であると同定された。

実施例４〜１５ 炭素源として用いられたＮ−第二ブチルアセトアミドに
よって単離された細菌を使用する（１旦）−Ｎ−アセチ
ル−１−メチル−３−フェニルプロピルアミンからの（
Ｒ）−Ｎ−アセチル−１−メチル−３−フェニルプロピ
ルアミンの製造実施例に記載したように単離させた１２
種の細菌単離物（Ａ−Ｌで示す）を次のようにして増殖
させた。１００ｍｊ！のＰＳＸ培地と５ｇ／ｌのＮ−第
二ブチルアセトアミドを含む２５０ｍｌの三角フラスコ
に接種するために各単離物の栄養寒天斜面を使用した。

オービタルインキュベータを用いて（好気性の状態を維
持するため）フラスコを４８〜７２時間培養させた。

このようにして増殖させた細胞を、実施例１に記載した
（Ｒ３）−Ｎ−アセチル−１−メチル−３−フェニルプ
ロピルアミン（５ｇ／ｆ）とともに６時間または２４時
間培養した。培養の終期において、残留しているＮ−ア
セチル−１−メチル−３−フェニルプロピルアミンおよ
び１−メチル−３−フェニルプロピルアミンを前記のよ
うに細胞懸濁液から抽出した。

得られた結果を第１表に示す。回収されたＮ−アセチル
−１−メチル−３−フェニルプロピルアミンは、いずれ
の場合でも１型であった。

実施例１６ ラクテートによって増殖するアルスロバクタ−種ＮＣＩ
ＭＢ　４０１４０を使用する（１旦）−Ｎ−アセチル−
１−メチル−３−フェニルプロピルアミンからの（且）
−Ｎ−アセチル−１−メチル−３−フェニルプロピルア
ミンの製造 増殖基質としてのＮ−第二ブチルアセトアミドを乳酸ナ
トリウム（１０ｇ／ｌ）で置き換えた点を除いて、アル
スロバクタ一種ＮＣ（ＭＢ　４０１４０（”単離物Ａ″
）を実施例４のようにして増殖させた。

アセトアニリド（０，５ｇ／４１’）も加え、３０°Ｃ
で４８時間増殖させた。

このような細胞増殖物を実施例１のように（−Ｒ４Ｓ）
−Ｎ−アセチル−１−メチル−３−フェニルプロピルア
ミン（Ｌｏｇ／ｌ）とともに４．５時間培養した。培養
の終期において細胞懸濁物を２ＭＮａＯＨ水１液でアル
カリ性に（ｐＨ１１）した。この懸濁物を２０ｍ！のジ
クロルメタンで２回抽出した。一つに合わせたジクロル
メタンをガスクロマトグラフィーによりＮ−アセチル−
１−メチル−３−フェニルプロピルアミンおよび１−メ
チル−３−フェニルプロピルアミンについて分析した。

この分析によって細胞懸濁物が４．７５ｇ／ｌのＮ−ア
セチル−１−メチル−３−フェニルプロピルアミンと４
．２ｇ／ｆｆｉの１−メチル−３−フェニルプロピルア
ミンを含んでいたことが示された。精製したＮ−アセチ
ル−１−メチル−３−フェニルプロピルアミンは、キラ
ルＨＰＬＣによって分析したとき、単独のｌ鏡像体Ｄ９
９．５％ｆｌ）を含んでいることがわかった。

実施例１７ （且）−Ｎ−アセチル−１−メチル−３−フェニルプロ
ピルアミンの加水分解 （且）−Ｎ−アセチル−１−メチル−３−フェニルプロ
ピルアミン（実施例４に記載したようにアルスロバクタ
一種ＮＣＩＭＢ　４０１４０を使用してラセミ化合物を
分解することによって製造した）の試料（８４０ｍｇ）
を還流下で１．７Ｍ硫酸水溶液（９ｍｊ２）とともに４
８時間加熱した。この混合物を冷却し、水（５ｍｆｆｉ
）で希釈し、そしてジエチルエーテルで２回抽出した。

１０Ｍ水酸化カリウム水溶液を使用して水性層のｐＨを
１３まで上昇させ（この操作とこれにつづく操作は窒素
の下で遂行した）、そしてジエチルエーテルでその水性
層を３回抽出した。エーテル抽出物を無水硫酸マグネシ
ウム上で乾燥して蒸発させ、そしてその残渣を７０トル
（浴温１３０〜１５０°Ｃ）において蒸留した。〔α）
Ｄ”０＝−１，６°の（Ｒ）−１−メチル−３−フェニ
ルプロピルアミンが無色の液体の形で得られた（Ｃ＝２
．２、メタノール）。

気液クロマトグラフィーの保持指数（２５ｍクロムバッ
ク（Ｃｈｒｏｍｐａｃｋ）　　ＣｐＳｔ　ｉ　５　　毛
管カラム）および赤外スペクトル（液膜）は（Ｒ３）−
１−メチル−３−フェニルプロピルアミンに関するもの
と同じであった。

生成した１型である１−メチル−３−フェニルプロピル
アミンの固有立体形状は、ベンジリデン誘導体を製造し
てその円偏光二色性を次のように測定することによって
確認した。再蒸留した１−メチル−３−フェニルプロピ
ルアミン（５，０μ！１３０．９μモル）、ベンズアル
デヒド（５μ！、４９μモル）および２，２．４−　）
リメチルペンクン（０，２ｍ　１．　）を２０分間６０
℃に温めた。気液クロマトグラフィーによる分析は上記
アミンがＮ−ベンジリデン−１−メチル−３−フェニル
プロピルアミンに完全に転化したことを示した（保持指
数１８９０）　、この混合物を２．２．４−　）リメチ
ルペンタンによって５０ｍ１とし、そして円偏光二色性
を測定するためにさらに２０倍に希釈すると、この測定
は２４１．５　ｎ　ｍにおいてデルタニブシロン最大値
−１１，７を示した。これは、光学的純度について補正
された、２．２．４−　トリメチルペンタン中の（Ｓ）
−１−メチル−３−フェニルプロピルアミンのベンジリ
デン誘導体に関する、２４３　ｎｍにおける＋１１．５
の値と比較することができた（ポタポフ、Ｖ、Ｍ、　、
デムヤノピッチ、Ｖ、Ｍ、、ソロベバ、Ｌ、Ｄ、および
ベンドロバ、０．　Ｅ、　（１９７８）Ｚｈ、　Ｏｒ　
、　Ｋｈｉｍ　　　１４．　８８２〜８８３）。

（Ｒ）−１−メチル−３−フェニルプロピルアミンの鏡
像体純度は実施例１で述べたようにキラルＨＰＬＣによ
って確認した。この方法を用いると、試料は９９．５％
を超えるｆｌ鏡像体を含んでいることがわかった。

（Ｒ）−１−メチル−３−フェニルプロピルアミンの鏡
像体純度のさらに別の確認は次のようにして得られた。

１．５ｍｇの１−メチル−３−フェニルプロピルアミン
および５ｍｇの（＋）−１０−カンファースルホニルク
ロリド（Ｆｌｕｋａ）をＯ，１ｆｆ１のジエチルエーテ
ルに加えた。室温で１５分間放置した後、０．５Ｍの硫
酸水溶液１ｍｌを加えた。

（４）−１０−カンファースルホンアミド誘導体を２ｍ
ｌ、のジエチルエーテル中に抽出した。このエーテル抽
出物をデカンテーションしてから溶媒を蒸発させた。試
料に次の）ＩＰＬｃ分析を受けさせた。

カラム：スフェリソルブ（Ｓｐｈｅｒｉｓｏｒｂ）　−
Ｎｌ２．２５０ｎｍｘ内径４．６ｍｍ、５μｍ粒子寸法
（ヒフロム、英国、バークシャー化、リーディング） 移動相：ヘキサン／ジクロルメタン／プロパン−２−オ
ール（２４０：９：１）移動速度４ｍｊ！／ｓｉｎ 検出器：２５４ｎｍの紫外線 温度：室温 （Ｒ３）−１−メチル−３−フェニルプロピルアミンの
（＋）−１０−カンファースルホンアミドのジアステレ
オマー誘導体は１５．０分および１７．８分の保持時間
を具えていた。これとは対照的に、（Ｒ）−１−メチル
−３−フェニルプロピルアミンの（＋）−１０−カンフ
ァースルホンアミドは１５．１分の保持時間で単一のピ
ークの形で移動し、−＄−鏡像体に対応するジアステレ
オマーは微量も観察されず、９９．５％を超える一Ｒ４
鏡像体が存在していることが示された。

実施例１８ チオアセトアニリドの存在下に栄養ブイヨンによって増
殖するアルスロバクタ一種ＮＣｒＭＢ　４０１４０を使
用する（Ｒ３）−Ｎ−アセチル−１−メチル−３−フェ
ニルプロピルアミンからの（Ｒ）　−Ｎ−アセチル−１
−メチル−３−フェニルプロピルアミンの製造 使用した培地が栄養ブイヨン（１３ｇ／ｊ！；英国、ハ
ンプシャー州、パシングストークのオキソイド社（Ｏｘ
ｏｉｄ　Ｌｔｄ、）によって供給される）であった点を
除いて、アルスロバクタ−［ＮＣＩＭＢ　４０１４０（
“単離物Ａ”）を実施例と同様に増殖させた。

チオアセトアニリド（ｏ、２ｓｇ／ｌも加えて、３０°
Ｃにおいて４８時間増殖させた。

このように増殖させた細胞を実施例１と同様に、（１旦
）−Ｎ−アセチル−１−メチル−３−フェニルプロピル
アミン（１０ｇ／ｊりとともに培養した。細胞を遠心分
離によって除去してから、その上澄液をＩＮ硫酸で（ｐ
Ｈ２まで）酸性化した。

ついでこの上澄液を２０ｍｊ２のジクロルメタンで抽出
した。ジクロルメタン抽出物を１０ｍｊ！のＩＮ硫酸で
２回洗浄した。ジクロルメタン抽出物の分析によって、
１−メチル−３−フェニルプロピルアミンが存在してな
く、Ｎ−アセチル−１−メチル−３−フェニルプロピル
アミンだけが存在していることが示された。回転１発に
よってジクロルメタンを除去した後、実施例１で述べた
ようにキラルＩ（ＰＬＯによってＮ−アセチル−１−メ
チル−３−フェニルプロピルアミンを検査した。それは
単一の且鏡像体（＞９９．５％尺）を含んでいることが
わかった。

実施例１９および２０ バシラス種ＮＣＩＭＢ　４０２４５およびＮＣＩＭＢ　
４０２４６を使用する（Ｒ３）−Ｎ−アセチル−１−メ
チル−３−フェニルプロピルアミンからの（Ｒ）−Ｎ−
アセチル−１−メチル−３−フェニルプロピルアミンの
製造 培養温度が３７°Ｃであった点を除いて、実施例３と同
様にバシラス種ＮＣＩＭＢ　４０２４５およびＮＣＩＭ
Ｂ４０２４６を土から単離した。生物を栄養寒天斜面上
に４°Ｃで貯蔵した。

増殖培地に５　ｇ／ｉのＮ−第二ブチルアセトアミドを
加え、そして培養温度を３７°Ｃとした点を除き、実施
例１と同様にＪＣＭ培地で細菌を増殖させた。このよう
に増殖させた細胞を、培養温度を３７°Ｃとした点を除
き、実施例１と同様に（且５）−Ｎ−アセチル−１−メ
チル−３−フェニルプロピルアミン（Ｌｏｇ／ｆ）とと
もに培養した。

９６時間後に、残留しているＮ−アセチル−１−メチル
−３−フェニルプロピルアミンを実施例１８と同様にし
て精製した。

キラルＨＰＬＣによって分析すると、バシラス種ＮＣＩ
ＭＢ　４０２４５による培養から生成したＮ−アセチル
−１−メチル−３−フェニルプロピルアミンは７６％の
Ｒｆｉ像体を含んでいることが示された。

バシラス種ＮＣＩＭＢ　４０２４６による培養から生成
し７’、：　Ｎ　−７−１！　ｆルーｌ−メチル−３−
フェニルプロピルアミンは８５％の且鏡像体を含んでい
た。

実施例２１および２２ アルスロバクタ一種ＮＣＩＭＢ　４０１４０を使用する
（Ｒ３）−Ｎ−ブチリル−１−メチル−３−フェニルプ
ロピルアミンからの（Ｒ）−Ｎ−ブチリル−１−メチル
−３−フェニルプロピルアミンおよび（Ｓ）−１−メチ
ル−３−フェニルプロピルアミンの製造 次のようにしてアルスロバクタ一種ＮＣＩＭＢ４０１４
０を増殖させた。

２５０ｍｊ！の三角フラスコ中の無菌ＰＳＸ培地１００
ｍｆに５　ｇ　／　ｌのＮ−第二ブチルアセトアミドを
加えた。オービタルインキュベータによって生物を３０
°Ｃにおいて４８時間増殖させた。このように増殖させ
た細胞を遠心分離によって採取してから、これを実施例
１と同様にｐ　Ｈ７，０の０、１　Ｍ燐酸カリウム溶液
２０ｍ！中に再び懸濁させた。これに（Ｒ３）−Ｎ−ブ
チリル−１−メチル−３−フェニルプロピルアミン（１
０ｇ／ｌ）を加えた。２５０ｒｎｅの三角フラスコ中に
ある混合物を軌道振盪機を用いて３０℃で６時間培養し
た。残留しているＮ−ブチリル−１−メチル−３−フェ
ニルプロピルアミンを実施例１９に述べたようにして精
製した。

実施例１で述べたようにキラルセル（Ｃｈ　ｉｒａ　Ｉ
ｃａ　１）００　ＨＰＬＣカラムで鏡像体を分解するこ
とによってＮ−ブチリル−１−メチル−３−フェニルプ
ロピルアミンの鏡像体組成を調べた（移動相の流速１ｍ
１／ｗｉｎ）。この方法にしたがった且鏡像体および５
Ｌ鏡像体の保持時間はそれぞれ５分および６．５分であ
った。Ｎ−ブチリル−１−メチル−３−フェニルプロピ
ルアミンは９９％の且鏡像体を含んでいることがわかっ
た。さらに且鏡像体の円偏光二色性を（Ｒ）−Ｎ−アセ
チル−１−メチル−３−フェニルプロピルアミンのそれ
と比較することによって、上記Ｎ−ブチリル−１−メチ
ル−３−フェニルプロピルアミンが且鏡像体であるとい
う証拠も得られた。両者とも１９５〜２３０ｎｍの領域
で正の円偏光二色性を示した。

別個の培養において、Ｎ−ブチリル−１−メチル−３−
フェニルプロピルアミンの加水分解の結果製造された１
−メチル−３−フェニルプロピルアミンを３時間の培養
後に精製した。実施例１で述べたようにキシルセル０Ｄ
ＨＰＬＣカラムを用いて鏡像体を分離することによって
アミンの鏡像体組成を調べた（流速２　ｍ　ｌ　／ｍｉ
ｎ　）。この調査によってアミンが９１％の−５−鏡像
体と９％の−Ｒ−鏡像体を含んでいることが示された。

実施例２３および２４ アルスロバクタ一種ＮＣＩＭＢ　４０１４０を使用する
（１旦）−Ｎ−ホルミル−１−メチル−３−フェニルプ
ロピルアミンからの（Ｒ）−Ｎ−ホルミル−１−メチル
−３−フェニルプロピルアミンおよび（Ｓ）−１−メチ
ル−３−フェニルプロピルアミンの製造 転換基質が（且５）−Ｎ−ホルミル−１−メチル−３−
フェニルプロピルアミン（１ｇ／ｆ）であることを除い
て、実施例２１と同様にアルスロバクタ一種ＮＣＩＭＢ
　４０１４０を増殖させて、転換を遂行した。７２時間
培養させた。製造された残留Ｎ−ホルミル−１−メチル
−３−フェニルプロピルアミンおよびニーメチル−３−
フェニルプロピルアミンを酸／塩基抽出によって精製し
た。

実施例１で述べたようにキラルセル００　ＨＰＬＣカラ
ムを用いて鏡像体を分離することによって、１−メチル
−３−フェニルプロピルアミンの鏡像体組成を調べた（
移動相の流速２ｍ　ｌ　／ｍｉｎ　）。この方法によっ
て、１−メチル−３−フェニルプロピルアミンが単独の
旦鏡像体として存在していることが示された（＞９９．
５％盈）。

同じようにして、Ｎ−ホルミル−１−メチル−３−フェ
ニルプロピルアミンの鏡像体組成を測定した（流速１　
ｍ　ｌ、／１ＩＩｉｎ　）。この方法によると、（１旦
）−Ｎ−ホルミル−１−メチル−３−フェニルプロピル
アミンは保持時間７．０分および９．７分の２つのピー
クに分解された。微生物によって誘導されたＮ−ホルミ
ル−１−メチル−３−フェニルプロピルアミンは第二の
ピーク（９，７分）の８０％を含んでいることがわかっ
た。（Ｓ）−１−メチル−３−フェニルプロピルアミン
が製造されたので、Ｎ−ホルミル−１−メチル−３−フ
ェニルプロピルアミンは圧倒的に且鏡像体である（８０
％）と結論を下すことができる。

Ｎ−ホルミル−１−メチル−３−フェニルプロピルアミ
ンの円偏光二色性を（Ｒ）−Ｎ−アセチル−１−メチル
−３−フェニルプロピルアミンのそれと比較することに
よって、Ｎ−ホルミル−１−メチル−３−フェニルプロ
ピルアミンが圧倒的に且鏡像体からなるという証拠も得
られた。両者とも２００〜２２０ｎｍの領域において正
の円偏光二色性を示した。

実施例２５および２６ アルスロバクタ一種ＮＣＩＭＢ　４０１４０を使用する
（Ｒ３）−Ｎ−メトキシカルボニル−１−メチル−３−
フェニルプロピルアミンからの（Ｒ）　−Ｎ−メトキシ
カルボニル−１−メチル−３−フェニルプロピルアミン
および（Ｓ）−１−メチル−３−フェニルプロピルアミ
ンの製造 転換基質が（Ｒ３）−Ｎ−メトキシカルボニル−１−メ
チル−３−フェニルプロピルアミンであることを除いて
、実施例２１で述べたようにアルスロバクタ一種ＮＣＩ
ＭＢ　４０１４０を増殖させて、転換を遂行した。培養
時間は４８時間であった。残留しているＮ−メトキシカ
ルボニル−１−メチル−３−フェニルプロピルアミンお
よび１−メチル−３−フェニルプロピルアミンを酸／塩
基／溶媒の分画抽出によって精製した。

実施例１のように鏡像体を分解することによって、１−
メチル−３−フェニルプロピルアミンの鏡像体組成を調
べた。これによってアミンは旦鏡像体を９１％含んでい
ることが示された。

Ｎ−メトキシカルボニル−１−メチル−３−フェニルプ
ロピルアミンの鏡像体組成を同様にして測定した。使用
したＨＰＬＣカラムはキラルセルＯＢであった。移動相
は９７０／３０／１容量比のヘキサン／プロパン−２−
オール／ジエチルアミンを含んでいた。流速は３ｍｊ！
／ｗｉｎであって、２５４　ｎｍにおける吸収によって
検出した。したがって、ラセミ体のＮ−メトキシカルボ
ニル−１−メチル−３−フェニルプロピルアミンは、１
４分および２０分の保持時間を有する、鏡像体に対応す
る２つの等寸法ピークに分解された。微生物によって誘
導されたＮ−メトキシカルボニル−１−メチル−３−フ
ェニルプロピルアミンの試料は第一のピーク８８％と第
二のピーク１２％を含んでいることがわかった。（Ｓ）
−１−メチル−３−フェニルプロピルアミンが製造され
たので、Ｎ−メトキシカルボニル−１−メチル−３−フ
ェニルプロピルアミンは圧倒的に且鏡像体である（８８
％且）と結論づけることができる。

実施例２７ アルスロバクタ一種ＮＣＩＭＢ　４０１４０を使用する
（Ｒ３）−Ｎ−アセチル−１−フェニルエチルアミンか
らの（Ｒ）　−Ｎ−アセチル−１−フェニルエチルアミ
ンの製造 実施例２１に述べたようにアルスロバクタ一種ＮＣＩＭ
Ｂ　４０１４０を増殖させた。このように増殖させた細
胞をＮ−アセチル−１−フェニルエチルアミンとともに
４日間培養した。残留しているＮ−アセチル−１−フェ
ニルエチルアミンを実施例１９と同様に精製した。

実施例１で述べたようにキラルセル００１（ＰＬＣカラ
ムを用いて鏡像体を分解することによって、Ｎ−アセチ
ル−１−フェニルエチルアミンの鏡像体組成を調べた（
移動相の流速１　ｍ　ｌ　／ｌｌｌ１ｎ　）。この方法
によると、盈鏡像体および且鏡像体の保持時間はそれぞ
れ１２分および１３分であった。真正の（Ｒ）−Ｎ−ア
セチル−１−フェニルエチルアミンの分析によって溶離
順序を測定した。後者は（Ｒ）　−（＋）−１−フェニ
ルエチルアミン（英国、ドーセット州、ギリングハム（
Ｇｉｌｌｉｎｇｈａｍ）のアルドリッチ・ケミカル社（
Ａｌｄｒｉｃｈ　Ｃｈｅａ＋１ｃａｌＣｏ、）によって
供給される）を無水酢酸でアセチル化することによって
製造した。

Ｎ−アセチル−１−フェニルエチルアミンは単一の且鏡
像体を含んでいる（＞９９．５％且）ことがわかった。

実施例２８ アルスロバクタ一種ＮＣＩＭＢ　４０１４０を使用する
（Ｒ３）−Ｎ−アセチル−１−フェニルエチルアミンか
らの（Ｓ）−１−フェニルエチルアミンの製造 Ｎ−アセチル−１−フェニルエチルアミンを用いる培養
を６時間続けたことを除いて、実施例２２と同様にアル
スロバクタ一種ＮＣＩＭＢ　４０１４０を増殖させて、
転換を遂行した。

実施例１に述べたようにキラルセル００　ＨＰＬＣカラ
ムを用いて鏡像体を分解することによって、製造された
１−フェニルエチルアミンの鏡像体組成を調べた（移動
相の流速１　ｍ　ｊ！　／ｗｉｎ　）。真正の（Ｒ）−
および（Ｓ）−１−フェニルエチルアミン（アルドリッ
チ・ケミカル社によって供給される）を分析することに
よって、鏡像体の溶離順序を測定した。保持時間はそれ
ぞれ１１分および１３．５分であった。

１−フェニルエチルアミンは単一＋７）Ｓ鏡像体を含ん
でいる（＞９９．５％旦）ことがわかった。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （１）￥Ｓ￥鏡像体のアシル基を立体選択的に加水分解
   できる生体触媒に、アシル基が脂肪族基であり、かつア
   ルキル基が１〜３個の炭素原子を有するＮ−アシル−１
   −メチル−オメガ−フェニルアルキルアミンを供給し、
   ついで優勢的に￥Ｒ￥鏡像体の形で残っているＮ−アシ
   ル−１−メチル−オメガ−フェニルアルキルアミンを回
   収することを含む、優勢的に￥Ｒ￥鏡像体の形にあるＮ
   −アシル−１−メチル−オメガ−フェニルアルキルアミ
   ンの製造方法。 （２）Ｎ−アシル−１−メチル−オメガ−フェニルアル
   キルアミンをラセミ体の形で供給する、請求項１記載の
   製造方法。 （３）アシル基が２〜６個の炭素原子を有するアルカノ
   イル基、２〜６個の炭素原子を有するアルコキシカルボ
   ニル基またはホルミルである、請求項１または２記載の
   製造方法。（４）生体触媒が微生物、微生物の抽出物ま
   たは酵素である、請求項１〜３のいずれか１つに記載の
   製造方法。 （５）生体触媒がロドコッカス（￥Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃ
   ｕｓ￥）、バシラス（￥Ｂａｃｉｌｌｕｓ￥）、アルス
   ロバクター（￥Ａｒｔｈｒｏｂａｃｔｅｒ￥）およびコ
   リネバクテリウム（￥Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ
   ￥）属から選ばれる微生物である、請求項４記載の製造
   方法。 （６）アセトアミドまたはチオアセトアミドの存在下で
   微生物が増殖されている、請求項４または５記載の製造
   方法。 （７）微生物がチオアセトアニリドの存在下で増殖され
   ている、請求項６記載の製造方法。 （８）Ｎ−アシル−１−メチル−オメガ−フェニルアル
   キルアミンのアルキル基がプロピルである、請求項１〜
   ７のいずれかに記載の製造方法。 （９）生体触媒が、Ｎ−アシル−１−メチル−オメガ−
   フェニルアルキルアミンの￥Ｓ￥鏡像体のＮ−アシル基
   を立体選択的に加水分解して、それに対応する￥Ｓ￥ア
   ミンを生成させることができ、そしてさらにこの￥Ｓ￥
   アミンを回収する段階を含む、請求項１〜８のいずれか
   に記載の製造方法。 （１０）（￥Ｒ￥）−Ｎ−アシル−１−メチル−２−フ
   ェニルアルキルアミンを、これに対応する（￥Ｒ￥）−
   １−メチル−２−フェニルアルキルアミン、その塩また
   はそのＮ−保護型に転化する段階をさらに含む、請求項
   １〜９のいずれかに記載の製造方法。