JPH036456A - 歯周疾患検査方法 - Google Patents
歯周疾患検査方法Info
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- JPH036456A JPH036456A JP14231689A JP14231689A JPH036456A JP H036456 A JPH036456 A JP H036456A JP 14231689 A JP14231689 A JP 14231689A JP 14231689 A JP14231689 A JP 14231689A JP H036456 A JPH036456 A JP H036456A
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Landscapes
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- Investigating Or Analyzing Non-Biological Materials By The Use Of Chemical Means (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
産栗↓勿程朋分界
本発明は、歯周疾患の検査方法に関する。
従来の技術
従来より、歯周炎などの歯周疾患の検査方法としては、
歯垢中の歯周病原性細菌を直接あるいは間接的に検出す
る方法、歯肉溝浸出液などから炎症性酵素を検出する方
法が知られている。
歯垢中の歯周病原性細菌を直接あるいは間接的に検出す
る方法、歯肉溝浸出液などから炎症性酵素を検出する方
法が知られている。
例えば、モノクローナル抗体を用いる方法としては、バ
クテロイデス・ジンジバリス(Bacteroides
gingivalis)に対するモノクローナル抗体
を用いて、歯周病の病巣におけるB、gingival
isの動態を調べることによる歯周病の診断法(特開昭
60−73463号公報);アクチノバチルス・アクチ
ノミセテムコミタンス (Actinobacillus actinomyc
etemcomitans)に特異的なモノクローナル
抗体を用いる検査方法(特開昭62−211558号公
報)が報告されている。
クテロイデス・ジンジバリス(Bacteroides
gingivalis)に対するモノクローナル抗体
を用いて、歯周病の病巣におけるB、gingival
isの動態を調べることによる歯周病の診断法(特開昭
60−73463号公報);アクチノバチルス・アクチ
ノミセテムコミタンス (Actinobacillus actinomyc
etemcomitans)に特異的なモノクローナル
抗体を用いる検査方法(特開昭62−211558号公
報)が報告されている。
しかし、これらのモノクローナル抗体法は、高度の技術
を必要とし、判定までに時間を要するという問題があっ
た。
を必要とし、判定までに時間を要するという問題があっ
た。
また、特開昭61−257200号公報には、プローブ
RNAまたはDNAと接触させ、歯周疾患に伴う微生物
細胞またはヒト細胞を検出する方法が提案されている。
RNAまたはDNAと接触させ、歯周疾患に伴う微生物
細胞またはヒト細胞を検出する方法が提案されている。
しかし、このDNAプローブ法は、感度は高いが、アイ
ソトープを使うなど操作性において問題があった。
ソトープを使うなど操作性において問題があった。
さらに、ある種の基質を用いることにより、細菌が産生
するアミノペプチターゼ様酵素活性を特異的に、かつ簡
便、迅速に検出する試みも為されている(特開昭63−
36800号公報、同6387999号公報)。しかし
、この方法は良好な操作性が期待されるものの、臨床で
の対応が明確でない。
するアミノペプチターゼ様酵素活性を特異的に、かつ簡
便、迅速に検出する試みも為されている(特開昭63−
36800号公報、同6387999号公報)。しかし
、この方法は良好な操作性が期待されるものの、臨床で
の対応が明確でない。
一方、炎症症状が存在するときに酵素活性が増加するこ
とから、コラゲナーゼ酵素活性(特開昭61−7100
0号公報)、ペルオキシダーゼ酵素活性(特開昭60−
222768号公報、同61−254854号公報)を
呈色により検出することが報告されている。
とから、コラゲナーゼ酵素活性(特開昭61−7100
0号公報)、ペルオキシダーゼ酵素活性(特開昭60−
222768号公報、同61−254854号公報)を
呈色により検出することが報告されている。
発明が解決しようとする課題
本発明は、歯周疾患を迅速、簡便、かつ正確に、しかも
視覚によって容易に判定できる検査方法を提供するもの
である。
視覚によって容易に判定できる検査方法を提供するもの
である。
溌1譚城ヨ
本発明の歯周疾患検査方法は、インドールと反応して発
色する発色成分を含むインドール発色試薬に、検体を接
触させ、その際のインドール発色試薬の発色程度によっ
て、歯周疾患の程度の診断あるいは進行の予測を行うこ
とを特徴とする。
色する発色成分を含むインドール発色試薬に、検体を接
触させ、その際のインドール発色試薬の発色程度によっ
て、歯周疾患の程度の診断あるいは進行の予測を行うこ
とを特徴とする。
以下、本発明についてさらに詳細に説明する。
本発明において用いられる発色成分としては、例えば、
p−ジメチルアミノケイ皮アルデヒド、p−ジメチルア
ミノベンズアルテヒド、ピリジルピリジニウム、1,2
−ナフトキノン−4スルホン酸ナトリウム、キサントヒ
トロール、シュウ酸、ニトロプルジッドナトリウム、亜
硝酸ナトリウム等が例示され、これらは一種で、または
2種以上組み合わせて用いられる。
p−ジメチルアミノケイ皮アルデヒド、p−ジメチルア
ミノベンズアルテヒド、ピリジルピリジニウム、1,2
−ナフトキノン−4スルホン酸ナトリウム、キサントヒ
トロール、シュウ酸、ニトロプルジッドナトリウム、亜
硝酸ナトリウム等が例示され、これらは一種で、または
2種以上組み合わせて用いられる。
インドール発色試薬は、これら発色成分を適当な溶媒に
溶解して液状発色試薬としたり、あるいは適当な基体に
担持させるなど、適宜の方法によって調製される。
溶解して液状発色試薬としたり、あるいは適当な基体に
担持させるなど、適宜の方法によって調製される。
担持型の発色試薬は、発色成分を酸、水、有機溶媒など
に溶解して基体に含浸したり、塗布することなどにより
調製され、さらにこれを乾燥させてもよい。この場合、
発色成分は、乾燥時に基体重量の0.00001〜」−
%となるように担持させることが好ましい。なお、上記
基体の材質は特に制限されないが、毛細管現象等による
吸水性を有するものであることが好ましく、例えば「新
包装技術便覧J (1971年日本包装技術協会編、日
本生産性本部発行)第202〜251頁及び第447〜
486頁に記載された紙、織布、不織布、フェルト、焼
成されたシリカ等の無機多孔質体、発泡ウレタン等の有
機スポンジ体、ガラス管、プラスチック管等のキャピラ
リ管、水溶性もしくは水膨潤性高分子物質からなる乾膠
体、こう膠体などが好適に用いられる。なお、基体はフ
ィルム状等の適宜な形状に形成することができ、さらに
必要により基体を水不溶性の保持体に保持させるように
してもよい。
に溶解して基体に含浸したり、塗布することなどにより
調製され、さらにこれを乾燥させてもよい。この場合、
発色成分は、乾燥時に基体重量の0.00001〜」−
%となるように担持させることが好ましい。なお、上記
基体の材質は特に制限されないが、毛細管現象等による
吸水性を有するものであることが好ましく、例えば「新
包装技術便覧J (1971年日本包装技術協会編、日
本生産性本部発行)第202〜251頁及び第447〜
486頁に記載された紙、織布、不織布、フェルト、焼
成されたシリカ等の無機多孔質体、発泡ウレタン等の有
機スポンジ体、ガラス管、プラスチック管等のキャピラ
リ管、水溶性もしくは水膨潤性高分子物質からなる乾膠
体、こう膠体などが好適に用いられる。なお、基体はフ
ィルム状等の適宜な形状に形成することができ、さらに
必要により基体を水不溶性の保持体に保持させるように
してもよい。
インドール発色試薬と検体とを接触させることにより、
検体中に含まれるインドール量を化学的な発色反応で測
定でき、発色程度を視覚で判定することができる。発色
成分の量にもよるが、検体中のインドールの量に応じて
発色試薬が強く発色し、例えば、発色成分としてp−ジ
メチルアミノケイ皮アルデヒドを用いた場合は、黄色の
発色試薬が、黄緑色→緑色→濃緑色の順に強く発色する
。発色の度合いを判断することにより、歯周疾患の程度
が診断でき、あるいは、連続して検査を繰り返すことに
より、歯周疾患の進行状態の診断、予測を行うこともで
きる。
検体中に含まれるインドール量を化学的な発色反応で測
定でき、発色程度を視覚で判定することができる。発色
成分の量にもよるが、検体中のインドールの量に応じて
発色試薬が強く発色し、例えば、発色成分としてp−ジ
メチルアミノケイ皮アルデヒドを用いた場合は、黄色の
発色試薬が、黄緑色→緑色→濃緑色の順に強く発色する
。発色の度合いを判断することにより、歯周疾患の程度
が診断でき、あるいは、連続して検査を繰り返すことに
より、歯周疾患の進行状態の診断、予測を行うこともで
きる。
検体としては、歯垢、歯肉溝浸出液、唾液などを用いる
ことができる。
ことができる。
見更勿羞来
本発明によれば、インドール発色試薬と検体とを接触さ
せ、インドール発色試薬の発色程度によって歯周疾患を
検査することにより、簡便、迅速かつ正確に、しかも視
覚によって容易に、歯周疾患の程度を診断したり、歯周
疾患の進行状況を予測したりすることができる。
せ、インドール発色試薬の発色程度によって歯周疾患を
検査することにより、簡便、迅速かつ正確に、しかも視
覚によって容易に、歯周疾患の程度を診断したり、歯周
疾患の進行状況を予測したりすることができる。
実施例1
各種口腔細菌のインドール産生量を、下記に示すように
評価した。
評価した。
使用した細菌は、パイテロイデス・ジンジバリス3株、
バクテロイデス・インターメディアス2株、フシバクテ
リウム・ヌクレイタム3株、アクチノバチラス・アクチ
ノミセテムコミタンス3株、バイロネラ・アルカレンセ
ンス3株、アクチノマイセス・ビスコサス2株、ストレ
プトコッカス・サンイス2株およびストレプトコッカス
・ミュータンス2株を用いた。
バクテロイデス・インターメディアス2株、フシバクテ
リウム・ヌクレイタム3株、アクチノバチラス・アクチ
ノミセテムコミタンス3株、バイロネラ・アルカレンセ
ンス3株、アクチノマイセス・ビスコサス2株、ストレ
プトコッカス・サンイス2株およびストレプトコッカス
・ミュータンス2株を用いた。
バクテロイデス属およびフシバクテリウム属の細菌は、
ヘミン(3μg/m Q )、メナジオン(0,5μg
/m Q )を含むトッド・ヘイット・ブロス培地を用
いた。
ヘミン(3μg/m Q )、メナジオン(0,5μg
/m Q )を含むトッド・ヘイット・ブロス培地を用
いた。
バイロネラ属の細菌はロゴサ培地を用いた。
他の細菌は、トッド・ヘイット・ブロス培地を用いた。
培養は、いずれも37℃で、24〜72時間行った。
培養液中のインドールの測定は、次のように行った。培
養液2mflにトルエン3muを加え、1分間撹拌後、
遠心してトルエン層2mρを採取した。これに、0.5
%P−ジメチルアミノケイ皮アルデヒド溶液を0.5m
l1添加し、37℃で10分間反応させた。続いて、8
%硫酸溶液を0.25mfl添加し、37℃で10分反
応させて発色の程度を肉眼で判定した。
養液2mflにトルエン3muを加え、1分間撹拌後、
遠心してトルエン層2mρを採取した。これに、0.5
%P−ジメチルアミノケイ皮アルデヒド溶液を0.5m
l1添加し、37℃で10分間反応させた。続いて、8
%硫酸溶液を0.25mfl添加し、37℃で10分反
応させて発色の程度を肉眼で判定した。
判定基準は下記に示した通りである。
:黄色
+:黄緑色
++:緑色
十十十二濃緑色
結果は表−1に示すごとく、歯周病原細菌の一つとして
考えられているバクテロイデス・ジンジバリス、バクテ
ロイデス・インターメディアスおよびフシバクテリウム
・ヌクレイタムは強いインドール産生能を有していた。
考えられているバクテロイデス・ジンジバリス、バクテ
ロイデス・インターメディアスおよびフシバクテリウム
・ヌクレイタムは強いインドール産生能を有していた。
バクテロイデス・ジンジバリス
バクテロイデス・インターメディアス
フゾバクテリウム・ヌクレイタム
アクチノバチラス・
アクチノミセテムコミタンス
バイロネラ・アルカレッセンス
アクチノマイセス・ビスコサス
ストレプトコッカス・サンギス
ストレプトコッカス・ミュータンス
十十+
+++
千十+
7
実施例2
下記方法により、本発明の歯周疾患検査方法の有効性を
確認した。
確認した。
臨床所見上、健常であると認められた者5名および歯周
炎患者5名から、各々、スケーラ−により歯肉溝内プラ
ークを採取し、トルエン100μQを加えて1分間撹拌
した後、0.5%P−ジメチルアミノケイ皮アルデヒド
溶液(n−プロパツール中)25μ℃を加えて37℃で
10分間反応させ、さらに8%硫酸溶液(95%エタノ
ール中) 12.5μQを加えて37℃で10分間放置
し、色の変化を以下の判定基準に従い肉眼で判定した。
炎患者5名から、各々、スケーラ−により歯肉溝内プラ
ークを採取し、トルエン100μQを加えて1分間撹拌
した後、0.5%P−ジメチルアミノケイ皮アルデヒド
溶液(n−プロパツール中)25μ℃を加えて37℃で
10分間反応させ、さらに8%硫酸溶液(95%エタノ
ール中) 12.5μQを加えて37℃で10分間放置
し、色の変化を以下の判定基準に従い肉眼で判定した。
インドールを測定することにより、歯周疾患の診断を客
観的に行うことができる。
観的に行うことができる。
Claims (1)
- 1、インドールと反応して発色する発色成分を含むイン
ドール発色試薬に、検体を接触させ、その際のインドー
ル発色試薬の発色程度によって、歯周疾患の程度の診断
あるいは進行の予測を行うことを特徴とする歯周疾患検
査方法。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP14231689A JPH036456A (ja) | 1989-06-01 | 1989-06-01 | 歯周疾患検査方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP14231689A JPH036456A (ja) | 1989-06-01 | 1989-06-01 | 歯周疾患検査方法 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPH036456A true JPH036456A (ja) | 1991-01-11 |
Family
ID=15312522
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP14231689A Pending JPH036456A (ja) | 1989-06-01 | 1989-06-01 | 歯周疾患検査方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JPH036456A (ja) |
-
1989
- 1989-06-01 JP JP14231689A patent/JPH036456A/ja active Pending
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