JPH0358790A

JPH0358790A - α―グリコシルルチンの製造法とその用途

Info

Publication number: JPH0358790A
Application number: JP1142205A
Authority: JP
Inventors: Hiromi Tsuchiya; 裕美土屋; Toshio Miyake; 俊雄三宅
Original assignee: Hayashibara Biochemical Laboratories Co Ltd
Current assignee: Hayashibara Seibutsu Kagaku Kenkyujo KK
Priority date: 1989-04-15
Filing date: 1989-06-06
Publication date: 1991-03-13
Anticipated expiration: 2016-06-18
Also published as: JP3177892B2

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】［産業上の利用分野］本発明は、α−グリコシル　ルチンの製造法とその用途
に関し、更に詳細には、高濃度のルチンと澱粉質とを含
有するルチン高含有液に糖転移酵素を作用させてα−グ
リコシル　ルチンを生成せしめ、これを採取することを
特徴とするα−グリコシル　ルチンの製造法、並びに、
この方法で得られるα−グリコシル　ルチンを含有せし
めることを特徴とする飲料、加工食品など飲食物、感受
性疾患の予防剤、治療剤すなわち抗感受性疾患剤、美肌
剤、色白剤など化粧品などの製造法に関する。

［従来の技！］ルチンは、次に示す化学構造を有し、毛細血管の強化、
出血予防、血圧調整などの生理作用を持つビタミンＰと
して、また、黄色色素として古くから知られ、食品、医
薬品、化粧品などに利用されている。

ビタミンＰは、生体内で、ビタミンＣの生理活性、例え
ば、生体結合組織の生成分てあるコラーゲンの合成に必
要なブロリンやリジンのヒドロキシル化反応に関与し、
また、例えば、チトクロームＣのＦｅ＋４＋を還元して
Ｆｅ４４にするなどの酸化還元反応に関与し、更には、
白血球増加による免疫増強作用に関与するなどを増強す
ることが知られており、生体の健康維持、増進に重要な
役割をなしている。

ルチンの用途は、単に栄養素としてのビタミンＰ強化剤
にとどまらず、その化学構造、生理作用から、単独でま
たは他のビタミンなどと併用して、例えば、黄色着色剤
、酸化防止剤、安定剤、品質改良剤、紫外線吸収剤など
として、飲食物などに、また、ウィルス性疾患、細菌性
疾患、循環器疾患、悪性腫瘍など感受性疾患の予防剤、
治療剤すなわち抗感受性疾患剤に、更には、黄色着色剤
、安定剤、酸化防止剤、紫外線吸収剤、メラニン生成抑
制剤などの美肌剤、色白剤などとして化粧品にまで及び
、その範囲は極めて広い。

しかしながら、ルチンは水に難溶性で、室温では８Ｌの
水にわずか１ｇ程度（約０．ＯＩＷ／Ｖ％）しか溶けず
、使用上困難を極めている。

これを改善する方法としては、例えば、特公昭５　− ２５−１６７７号公報に示されるごとく、ルチンにアミ
ノ基を有する脂肪族化合物を加えて水溶性を増大する方
法、また特公昭２６　−　２７２４号公報に示ざれるご
とく、ルチンにモノハロゲン酢酸を作用させ酢酸ソーダ
化合物にして水溶性を増大する方法、また、特公昭２９
−１２８５号公報に示されるごとく、ルチンにロンガリ
ットを作用させ亜硫酸化合物にして水溶性を増大する方
法などが知られていた。

しかしながら、これらの方法は、いずれもアミノ化合物
、モノハロゲン酢酸、亜硫酸化合物などが用いられ、生
成物質に他の生理活性、毒性が懸念され、またその精製
も困難である。

そこで、本発明者等は、先に、特公昭５４　−　３２０
７３号公報で、より安全性の高い水溶化の方法として、
生合成反応を利用した糖転移酵素の作用によるα−グリ
コシル　ルチンの製造法を提案した。

この方法で得られるα−グリコシル　ルチンは、毒性の
懸念もなく、原料のルチンと同じ生理活性を有し、水へ
の溶解性も高く、取り扱い上極めて好都合で、より広範
な用途が期待され、その実現６が鶴首されている。

［発明が解決しようとする課題］上記したように、α−グリコシル　ルチンは、種々の長
所を有しており、その工業化が待たれている。

しかしながら、従来、その生合成反応における仕込濃度
がルチンとして約０．ＩＷ／Ｖ％程度に過ぎず、製品の
α−グリコシル　ルチンに対する使用水量、精製処理水
量、エネルギーコストなどが過大となり、その工業化を
困難にしている。

［課題を解決するための手段］本発明は、上記の欠点を解決するためになされたもので
あって、とりわけ、仕込時のルチン濃度を高めた反応法
と反応後のα−グリコシル　ルチンの精製法について鋭
意研究した。

その結果、高濃度のルチンと澱粉質とを含有するルチン
高含有液に糖転移酵素を作用させることにより、望まし
くは、ルチンを高濃度懸濁状、または、アルカリ側ｐＨ
で溶解させた高濃度溶液状で含有せしめ、その仕込濃度
をルチンとして約１．０乃至２０．０Ｗ／Ｖ％、換言す
れば、従来技術の約１０乃至２００倍にも高めた状態で
糖転移酵素を作用させることにより、α−グリコシル　
ルチンがよく生成されることを見いだし、その製造法並
びに飲食物、感受性疾患の予防剤、治療剤、化粧品など
への用途を確立して本発明を完成した。

また、この反応により生成したα−グリコシルルチンを
精製するに際しては、その反応溶液と多孔性合成吸着剤
とを接触させ、その吸着性の違いを利用することにより
、容易に精製できることを見いだした。

従って、本発明のα−グリコシル　ルヂンの製造法は、
従来方法の欠点を一挙に解消し、使用水量、精製処理水
量、エネルギーコストを大幅に低減できることか判明し
、その工業化の実現を極めて容易にするものである。

以下、本発明を詳細に説明する。

本発明に用いるルチンは、高度に精製されたルチンに限
る必要はなく、ルチンと、例えば、シトロニン、ナリン
ジン、ヘスベリジンなどのフラボノイド配糖体との混合
物、更には、ルチンを含有している各種植物由来の抽出
物、またはその部分精製物などが適宜使用できる。

植物組織としては、例えば、ソバの葉茎、エンジュのつ
ぼみ（塊花）、エニシダのっぽみ、ユーカリの葉茎、イ
チョウの葉茎、柑橘類果実などが有利に利用できる。

本発明に用いる澱粉質は、同時に用いる糖転移酵素によ
ってルチンからα−グリコシル　ルチンを生或すること
のできるものであればよく、例えば、アミロース、デキ
ストリン、シクロデキストリン、マルトオリゴ糖などの
澱粉部分加水分解物、更には、液化澱粉、糊化澱粉など
が適宜選ばれる。

従って、α−グリコシル　ルチンの生成を容易にするた
めには、糖転移酵素に好適な澱粉質が選ばれる。

例えば、糖転移酵素として、α−グルコシダーゼ（Ｅ　
Ｃ　３．２．１．２０）を用いる際には、マルトース、
マルトトリオース、マルトテトラオースなどのマルトオ
リゴ糖、またはＤＥ約１０乃至７０の澱粉部分一　９加水分解物などが好適であり、シクロマルトデキストリ
ン　グルカノトランスフエラーゼ（ＥＣ２．４．１．１
９）を用いる際には、シクロデキストリンまたはＤＥ１
以下の澱粉糊化物からＤＥ約６０の澱粉部分加水分解物
などが好適であり、α−アミラーゼ（ＥＣ　３．２．１
．１）を用いる際には、ＤＥ１以下の澱粉糊化物からＤ
Ｅ約３０のデキストリン、澱粉部分加水分解物などが好
適である。

また、反応時の澱粉質濃度は、ルチンに対して約０．５
乃至５０倍の範囲が好適である。

本発明でいうルチン高含有液とは、ルチンを、例えば、
懸濁状で、または、ｐＨ７．０を越えるアルカリ側ｐＨ
で溶解させた溶液状で高濃度に含有する溶液が適してお
り、その濃度は、約０．５Ｗ／Ｖ％以上の高濃度、望ま
しくは、約１．０乃至２０．ＯＷ／Ｖ％含有している溶
液を意味する。

本発明に用いる糖転移酵素は、ルチンとこの酵素に好適
な性質の澱粉質とを含有するルチン高含有液に作用させ
る時、ルチンを分解せずにα−グリコシル　ルチンを生
成するものであればよい。

１　０例えば、α−グルコシダーゼは、ブタの肝臓、ソバの種
子などの動植物組織由来の酵素、または、ムコール（Ｍ
ｕｃｏｒ）属、ベニシリウム（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ
）属などに属するカビ、またはサツ力ロミセス（Ｓａｃ
ｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）属などに属する酵母などの微生
物を栄養培地で培養し得られる培養物由来の酵素が、シ
クロマルトデキストリン　グルカノトランスフェラーゼ
は、バチルス（Ｂａｃ　ｉ　ｌ　Ｉｕｓ）属、クレブシ
ーラ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ）属などに属する細菌培養
物由来の酵素が、α−アミラーゼは、バチルス属などに
属する細菌、または、アスペルギルス（Ａｓｐｅｒｇｉ
ｌｌｕｓ）属などに属するカビ培養物由来の酵素などが
適宜選択できる。

これらの糖転移酵素は、前記の条件を満足しさえすれば
、必ずしも精製して使用する必要はなく、通常は、粗酵
素で本発明の目的を達成することができる。

必要ならば、公知の各種方法で精製して使用してもよい
。また、市販の糖転移酵素を利用することもできる。

使用酵素量と反応時間とは、密接な関係があり、通常は
、経済性の点から約５乃至８０時間で反応を終了するよ
うに酵素量が選ばれる。

また、固定化された糖転移酵素をバッチ式で繰り返し、
または連続式で反応に利用することも適宜選択できる。

本発明の反応法は、高濃度のルチンと澱粉質とを含有す
るルヂン高含有液に糖転移酵素を作用ざせればよい。

例えば、ルチンを高濃度懸濁状で反応せしめる場合には
、約１．０乃至５．ＯＷ／Ｖ％の懸濁状ルチンと適量の
澱粉質とを含有するルチン高含有液を、ｐＨ約４．５乃
至６．５とし、糖転移酵素の作用しうるできるだけ高温
、具体的には、約７０乃至９０℃に維持し、これに糖転
移酵素を作用させると、ルチンがα−グリコシル　ルチ
ンに変換するにつれて懸濁状ルチンが徐々に溶解し、同
時に、α−グリコシルルチンが容易に高濃度に生成する
。このようにして得られるα−グリコシル　ルチン含有
溶液は、室温下、中性付近で、溶解している大量のαグ
リコシル　ルチンと少量の未反応ルチンとの合計量が、
ルチン換算で約１．０乃至５．ＯＷ／Ｖ％に達すること
が判明した。

また、例えば、ルチンをｐ　Ｈ７．０を越えるアルカリ
側で溶解させた高濃度溶液状で反応せしめる場合には、
ｐＨ約７．５乃至１０．０の水に約１．０乃至５．ＯＷ
／Ｖ％のルチンを加熱溶解し、これに適量の澱粉質を溶
解して得られるルチン高含有液を、糖転移酵素の作用し
うるできるだけ高ｐｆＬ高温、具体的には、ｐＨ約７．
５乃至１０．０、温度約５０乃至８０℃に維持し、これ
に糖転移酵素を作用させるとαグリコシル　ルチンが容
易に高濃度に生成する。

この際、アルカリ性溶液中のルチンは、分解を起しやす
いので、これを防ぐため、できるだけ遮光、嫌気下に維
持するのが望ましい。

このようにして得られるα−グリコシル　ルチン含有溶
液は、室温下、中性付近で、溶解している大量のα−グ
リコシル　ルチンと少量の未反応ルチンとの合計量が、
ルチン換算で約１．０乃至５．ＯＷ／Ｖ％に達すること
が判明した。

１３− 更に、前記条件を組み合せる方法、例えば、約２．０乃
至２０．ＯＷ／Ｖ％の懸濁状ルチンと適量の澱粉質とを
含有するルチン高含有液をｐＨ約７．５乃至１０．Ｏ，
温度約５０乃至８０℃に維持し、これに糖転移酵素を作
用させると、α−グリコシル　ルチンが容易に高濃度に
生成する。

また、ルチンとして、例えば約０．１乃至１．０規定の
カセイソーダ水溶液、カセイカリ水溶液、炭酸ソーダ水
溶液、水酸化カルシウム水、アンモニア水などの強アル
カリ性水溶液に約５．０乃至２０．ＯＷ／Ｖ％の高濃度
に濱解ざせたものを用い、これに塩酸、硫酸などの酸性
水溶液を加えて酵素の作用しうるｐＨに調整するととも
に澱粉質を加え、直ちに糖転移酵素を作用させることは
、α−グリコシルルチンを容易に高濃度に生成ざせるこ
ととなるので極めて好都合である。この際、せっかく高
濃度に溶解させたルチン溶液も、酸性水溶液でｐＨ調整
することによりルチンが析出を起し易いので、そのｐＨ
調整前に、澱粉質や少量のα−グリコシル　ルチンなど
を共存させてルチンの析出を抑制１　４しつつ糖転移反応を開始することも有利に実施できる。

このようにして得られるα−グリコシルルチン含有溶液
は、室温下、中性付近で、溶解している大量のα−グリ
コシル　ルチンと少量の未反応ルチンとの合計量が、ル
チン換算で約５．０乃至２０．ＯＷ／Ｖ％にも達するこ
とが判明した。

また、更に必要ならば、反応前のルチンの溶解度を高め
、ルチンへの糖転移反応を容易にするために、ルチン高
含有液に水と互いに溶解しうる有機溶媒、例えば、メタ
ノール、エタノール、ｎ−プロバノール、ｉｓ○−プロ
パノール、ｎ−ブタノール、アセトール、アセトンなど
の低級アルコール、低級ケトンなどを共存させることも
適宜選択できる。

以上述べたように、本発明の方法は、ルチンの仕込濃度
を従来の約１０乃至２００倍にも高めて反応させること
ができ、α−グリコシル　ルチンを容易に高濃度に生成
しうろことが判明した。

すなわち、反応終了時点において、溶解している大量の
α−グリコシル　ルチンと少量の未反応ルチンとの合計
量が、ルチン換算で約１．０乃至２０．ＯＷ／Ｖ％にも
なり、従来技術の約１０乃至２００倍にも高めうろこと
が判明した。

このようにしてα−グリコシル　ルチンを生成せしめた
反応溶液は、そのままでα−グリコシルルチン製品にす
ることもできる。通常は、反応溶液を濾過、濃縮してシ
ラップ状の、更には、乾燥、粉末化して粉末状のα−グ
リコシル　ルチン製品にする。

本製品は、ビタミンＰ強化剤としてばかりでなく、安全
性の高い天然型の黄色着色剤、抗酸化剤、安定剤、品質
改良剤、予防剤、治療剤、紫外線吸収剤などとして、飲
食物、嗜好物、飼料、餌料、抗感受性疾患剤、化粧品、
プラスチック製品などの用途に有利に利用できる。　更
に、精製されたα−グリコシル　ルチン製品を製造する
場合には、多孔性合成吸着剤による吸着性の差を利用し
てα一グリコシル　ルチンと澱粉質などの夾雑物とを分
離して精製すればよい。

本発明でいう多孔性合成樹脂とは、多孔性で広い吸着表
面積を有し、かつ非イオン性のスチレンージビニルベン
ゼン重合体、フェノールーホルマリン樹脂、アクリレー
ト樹脂、メタアクリレート樹脂などの合成樹脂であり、
例えば、市販ざれているＲｏｈｍ　＆　Ｈａａｓ社製造
の商品名アンバーライトＸＡＤ−１、アンバーライトＸ
ＡＤ−２、アンバーライトＸ　Ａ　Ｄ−４、アンバーラ
イトＸＡＤ７、アンバーライトＸ　Ａ　Ｄ−８、アンバ
ーライトＸＡＤ−１１、アンバーライトＸＡＤ−１２、
三菱化或工業株式会社製造の商品名ダイヤイオンＨＰ−
１０，ダイヤイオンＨＰ−２０、ダイヤイオンＨＰ−３
０，ダイヤイオンＨＰ−４０，ダイヤイオンＨ　Ｐ　−
５０，ＩＭＡＣＴＩ社製造の商品名イマクティＳｙｎ−
４２、イマクティＳｙＨ−４４、イマクテ−ｒｓｙｎ　
−４６などがある。

本発明のα−グリコシル　ルチンを生成せしめた反応液
の精製法は、反応液を、例えば、多孔性合成吸着剤を充
填したカラムに通液すると、α一グリコシル　ルチンお
よび比較的少量の未反応ルチンが多孔性合成吸着剤に吸
着するのに対し、多−　１　７量に共存する澱粉質、水溶性糖類は吸着されることなく
そのまま流出する。

必要ならば、糖転移酵素反応終了後、多孔性合成吸着剤
に接触させるまでの同に、例えば、反応液を加熱して生
じる不溶物を濾過して除去したり、ケイ酸アルミン酸マ
グネシウム、アルミン酸マグネシウムなどで処理して反
応液中の蛋白性物質などを吸着除去したり、強酸性イオ
ン交換樹脂（Ｈ型）、中塩基性または弱塩基性イオン交
換樹脂（ＯＨ型）などで処理して脱塩するなどの精製法
を組み合せて利用することも随意である。

前述のようにして、多孔性合成吸着剤力ラムに選択的に
吸着したα−グリコシル　ルチンと比較的少量の未反応
ルチンとは、希アルカリ、水などで洗浄した後、比較的
少量の有機溶媒または有機溶媒と水との混合液、例えば
、メタノール水、エタノール水などを通液すれば、まず
、α−グリコシル　ルチンが溶出し、通液量を増すか有
機溶媒濃度を高めるかすれば未反応ルチンが溶出してく
る。

１　８このα−グリコシル　ルチン高含有溶出液を蒸溜処理し
て、まず有機溶媒を溜去した後、適当な濃度にまで濃縮
すればα−グリコシル　ルチンを主成分とするシラップ
状製品が得られる。更に、これを乾燥し粉末化すること
によって、α−グリコシル　ルチンを主成分とする粉末
状製品が得られる。

この有機溶媒によるα−グリコシル　ルチンおよび未反
応ルチンの溶出操作は、同時に、多孔性合成吸着剤の再
生操作にもなるので、この多孔性合成吸着剤の繰り返し
使用を可能にする。

また、本発明の多孔性合成吸着剤による精製は、澱粉質
、水溶性糖類だけでなく、水溶性の塩類などの夾雑物も
同時に除去できる特長を有している。

このようにして得られるα−グリコシル　ルチンは、次
の特長を有している。

（１）ルチンと比較してα−グリコシル　ルチンは、水
溶性が極めて大きい。

（２）ルチンと比較してα−グリコシル　ルチンは、耐
光性、安定性が大きい。

（３）α−グリコシル　ルチンは、体内の酵素によりル
ヂンとグルコースとに加水分解され、ルチン本来の生理
活性（ビタミンＰ）を示す。

また、ビタミンＣとの併用により、それらの持つ生理活
性を増強することができる。

（４）＃粉質を含有する製品の場合には、α−グリコシ
ル　ルチンの効果を発揮するのみならず、澱粉質が賦形
、増量効果や、甘味効果を発揮することができ、また、
澱粉質を除去した精製製品の場合には、ほとんど賦形、
増量することなくα−グリコシル　ルチンの効果を発揮
することができ、また、実質的に無味、無臭なので自由
に調味、調香することができる。

これらの特長から、α−グリコシル　ルチンは安全性の
高い天然型のビタミンＰ強化剤としてばかりでなく、黄
色着色剤、抗酸化剤、安定剤、品質改良剤、ウィルス性
疾患、細菌性疾患、循環器疾患、悪性腫瘍など感受性疾
患の予防剤、治療剤、紫外線吸収剤などとして、飲食物
、嗜好物、飼料、餌料、抗感受性疾患剤、美肌剤、色白
剤など化粧品、更には、プラスチック製品などに有利に
利用することができる。

またα−グリコシル　ルチンは、酸味、塩から味、渋味
、旨味、苦味などの呈味を有する各種物質ともよく調和
し、耐酸性、耐熱性も大きいので、普通一般の飲食物、
嗜好物、例えば、調味料、和菓子、洋菓子、氷菓、飲料
、スブレッド、ペースト、漬物、ビン缶詰、畜肉加工品
、魚肉・水産加工品、乳・卵加工品、野菜加工品、果実
加工品など広範に利用することができる。また、家畜、
家禽、蜜蜂、蚕、魚などの飼育動物のための飼料、餌料
などにビタミンＰ強化剤、嗜好性向上などの目的で配合
して利用することも好都合である。

その他、タバコ、トローチ、肝油ドロップ、複合ビタミ
ン剤、口中清涼剤、口中香錠、うがい薬、経営栄養剤、
内服薬、注射剤、練歯みがき、口紅、リップクリーム、
日焼け止めなど各種固状、ペースト状、液状の嗜好物、
感受性疾患の予防剤、治療剤すなわち抗感受性疾患剤、
美肌剤、色白剤２１などの化粧品などに配合して利用することも有利に実施
でき、更には、紫外線吸収剤、劣化防止剤などとしてプ
ラスチック製品などに配合して利用することも有利に実
施できる。

また、本発明でいう感受性疾患とは、α−グリコシル　
ルチンによって予防され、若しくは治療される疾患であ
り、それか、例えばウィルス性疾患、細菌性疾患、外傷
性疾患、免疫疾患、リューマチ、糖尿病、循環器疾患、
悪性腫瘍などであってもよい。α−グリコシル　ルチン
の感受性疾患予防剤、治療剤は、その目的に応じてその
形状を自由に選択できる。例えば、噴霧剤、点眼剤、点
鼻剤、うがい剤、注射剤などの液剤、軟膏、ぱっぷ剤、
クリームのようなペースト剤、粉剤、顆粒、カプセル剤
、錠剤などの固剤なとである。製剤に当たっては、必要
に応じて、他の成分、例えば、治療剤、生理活性物質、
抗生物質、補助剤、増量剤、安定剤、着色剤、着香剤な
どの１種また２種以上と併用することも随意である。

投与量は、含量、投与経路、投与頻度などによっ２　２て適宜調節することができる。通常、α−グリコシル　
ルチンとして、成人１日当り、約ｏ．ｏｏｉ乃至１０．
０グラムの範囲が好適である。

また、化粧品の場合も、大体、前述の予防剤、治療剤に
準じて利用することかできる。

α−グリコシル　ルチンを利用する方法としては、それ
らの製品が完成するまでの工程で、例えば、混和、混捏
、溶解、浸漬、浸透、散布、塗布、噴霧、注入など公知
の方法が適宜選ばれる。

以下、本発明のα−グリコシル　ルチンの無毒性を実験
で説明する。

実験７周令のｄｄ系マウスを使用して、実施例Ａ３の方法で
調製したα−グリコシル　ルチンを経口投与して急性毒
性テストをしたところ、５ｇまで死亡例は見られず、こ
れ以上の投与は困難であった。

従って、本物質の毒性は極めて低い。

また、実施例Ａ−２の方法で調製したα−グルコシル　
ルチンを用いて本テストを行ったところ、同様の結果を
得、毒性の極めて低いことが判明した。

以下、本発明の実施例として、α−グリコシルルチンの
製造例を実施例Ａて、α−グリコシルルチンの用途例を
実施例Ｂで述べる。

実施例　Ａ−１　　α−グリコシル　ルチンルチン３重
量部およびデキストリン（ＤＥ１８）１５重量部を８０
℃の熱水９７重量部に混合して懸濁状のルチン高含有液
とし、これにバチルス・ステアロサーモフイルス（Ｂａ
ｃｉｌｌｕｓ　ｓｔｅａｒｏｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ
）由来のシクロマルトデキストリングルカノトランスフ
エラーゼ（株式会社林原生物化学研究所販売）をデキス
トリングラム当り２０単位加え、ｐ　Ｈ６．０、７５℃
に維持し撹拌しつつ６４時間反応させた。反応液をペー
パークロマトグラフィーで分析したところ、ルヂンの約
８５％が、α−グルコシル　ルチン、α−マルトシルル
チン、α−マルトトリオシル　ルチン、α一マルトテト
ラオシル　ルチン、α−マルトペンタオシル　ルチンな
どのα−グリコシル　ルチンに転換していた。反応液を
加熱して酵素を失活させ、濾過し、濾液を濃縮してシラ
ツブ状の澱粉質を含有するα−グリコシル　ルチン製品
を、固形物当り原料重量に対して約９０％の収率で得た
。

本品は、ビタミンＰ強化剤としてばかりでなく、安全性
の高い天然型の黄色着色剤、抗酸化剤、安定剤、品質改
良剤、予防剤、治療剤、紫外線吸収剤などとして、飲食
物、嗜好物、飼料、餌料、抗感受性疾患剤、化粧品、プ
ラスチック製品などの用途に有利に利用できる。

実施例　Ａ−２　　α−グルコシル　ルチン実施例Ａ−
１の方法に準じて調製したシラツプ状の澱粉質を含有す
るα−グリコシル　ルチン製品１重量部を水４重量部に
溶解し、これにグルコアミラーゼ（ＥＣ　３．２．１．
３、生化学工業株式会社販売）をα−グリコシル　ルチ
ン製品固形物ダラム当り１００単位加え、５０℃、５時
間反応させた。反応液をペーパークロマトグラフィーで
分析したところ、α−グリコシル　ルチンは、２　５ α−グルコシル　ルチンに転換していた。

反応液を加熱して酵素を失活させ、濾過し、濾液を多孔
性合成吸着剤、商品名ダイヤイオンＨ　Ｐ−１０（三菱
化成工業株式会社販売）のカラムにＳＶ２で通液した。

その結果、溶液中のαグルコシル　ルチンと未反応ルチ
ンとが多孔性合成吸着剤に吸着し、グルコース、塩類な
どは吸着することなく流出した。次いで、カラムを水で
通液、洗浄した後、エタノール水溶液濃度を段階的に高
めながら通液し、α−グルコシルルチン画分を採取し、
減圧濃縮し、粉末化して、粉末状のα−グルコシル　ル
チンを固形物当り原料のルチン重量に対して約８０％の
収率で得た。

α−グルコシル　ルチンを酸で加水分解したところ、ケ
ルセチン１モルに対し、Ｌ−ラムノース１モル、Ｄ−グ
ルコース２．モルを生成し、また、α−グルコシル　ル
チンに、ブタの肝臓から抽出し部分精製したα−グルコ
シダーゼを作用させると、ルチンとＤ−グルコースとに
加水分解２　６ざれることが判明した。

本α−グルコシル　ルチンは、高度に精製ざれた水溶性
の高いビタミンＰ強化剤として、また、黄色着色剤、抗
酸化剤、安定剤、品質改良剤、予防剤、治療剤、紫外線
吸収剤などとして、飲食物、嗜好物、抗感受性疾患剤、
化粧品などに有利に利用できる。

実施例　Ａ−３　　α−グリコシル　ルチンルチン４重
量部を水９０重量部にｐ　Ｈ９．５で加熱溶解し、別に
デキストリン（ＤＥ８）２０重量部を水１０重量部に加
熱溶解し、次いで、これら溶液を混合して溶液状のルチ
ン高含有液とし、これにシクロマルトデキストリン　グ
ルカノトランスフエラーゼをデキストリングラム当り３
０単位加え、ｐＨ８．２、６５℃に維持して撹拌しつつ
４０時間反応させた。

反応液をペーパークロマトグラフィーで分析したところ
、ルチンの約９０％がα−グリコシルルチンに転換して
いた。

反応液を加熱して酵素を失活させ、濾過し濾液を多孔性
合成吸着剤、商品名アンバーライトＸＡＤ−７（Ｒｏｈ
ｍ　＆　Ｈａａｓ社製造）のカラムにＳ　Ｖ１．５で通
液した。

その結果、溶液中のα−グリコシル　ルチンと未反応ル
チンとが多孔性合成吸着剤に吸着し、デキストリン、オ
リゴ糖、塩類などは吸着することなく流出した。

このカラムを水で通液、洗浄した後、５０Ｖ／Ｖ％メタ
ノールを通液して、α−グリコシル　ルチンおよびルチ
ンを溶出し、これを濃縮し、粉末化して、粉末状α−グ
リコシル　ルチン製品を原料のルチン重量に対して約１
４０％の収率で得た。

本品は、水溶性の高いビタミンＰ強化剤としてばかりで
なく、安全性の高い天然型の黄色着色剤、抗酸化剤、安
定剤、品質改良剤、予防剤、治療剤、紫外線吸収剤、劣
化防止剤などとして、飲食物、嗜好物、飼料、餌料、抗
感受性疾患剤、化粧品、プラスチック製品などの用途に
有利に利用できる。

実施例　／ｌ−４　　α−グリコシル　ルチンルチン１
３１ｒ量部を１規定カセイソーダ溶Ｗ４重量部で溶解し
、これに０．０１規定塩酸溶液を加えて中和するととも
にデキストリン（ＤＥＩＯ）５重量部を加え、直ちにシ
クロマルトデキストリン　グルカノトランスフエラーゼ
をデキストリングラム当り１０単位加え、ｐ　Ｈ６．０
、Ｔｏ℃に維持しつつ４０時間反応させた。

反応液をペーパークロマトグラフィーで分析したところ
、ルチンの約８０％がα−グリコシルルチンに転換して
いた。

反応液を実施例Ａ−３と同様に精製し、濃縮、粉末化し
て粉末状α−グリコシル　ルチン製品を原料のルチン重
量に対して約１２０％の収率で得た。

本品は、実施例Ａ−３の場合と同様に、水溶性の高いビ
タミンＰ強化剤としてばかりでなく、安全性の高い天然
型の黄色着色剤、抗酸化剤、安定剤、品質改良剤、予防
剤、治療剤、紫外線吸収剤などとして、各種用途に利用
できる。

実施例　Ａ−５　　α−グリコシル　ルチン２９（１）α−グルコシダーゼ標品の調製マルトース４Ｗ／Ｖ％、リン酸１カリウム０．ＩＷ／Ｖ
％、硝酸アンモニウム０．ＩＷ／Ｖ％、硫酸マグネシウ
ム０．０５Ｗ／Ｖ％、塩化カリウム０．０５Ｗ／Ｖ％、
ポリベプトン０．２Ｗ／Ｖ％、炭酸カルシウムＩＷ／Ｖ
％（別に乾熱ｉ１ｉＪ菌して植菌時に無菌的に添加）お
よび水からなる液体培地５００重量部にムコールジャバ
ニカス（Ｍｕｃｏｒ　ｊａｖａｎｉｃｕｓ）　Ｉ　Ｆ　
Ｏ　４５７０を温度３０℃で４４時間振盪培養した。培
養終了後、菌糸体を採取し、その湿菌糸体４８重量部に
対し、０．５Ｍ酢酸緩ｌｆｊ液（ｐ　Ｈ５．３）に溶解
した４Ｍ尿素液５００重量部を加え、３０℃で４０時間
静置した後、遠心分離した。この上清を流水中で一夜透
析した後、硫安０．９飽和とし、４℃で一夜放置して生
成した塩析物を濾取し、０．０１　Ｍ酢酸緩［液（ｐ　
Ｈ５．３）　５０重量部に懸濁溶解した後、遠心分離し
て上清を採取し、α−グルコシダーゼ標品とした。

（２）α−グリコシル　ルチンの調製ルチン５重量部を０．５規定カセイソーダ溶液４０−　
３　０重量部に加熱溶解し、これを５規定塩酸溶液でｐＨ９．
５に調整し、別にデキストリン（ＤＥ３０）２０重量部
を水１０重量部に加熱溶解し、次いで、これら溶液を混
合して懸濁状のルチン高含有液とし、これに（１）の方
法で調製したα−グルコシダーゼ標品１０重量部を加え
、ｐ　Ｈ８．５に維持して撹拌しつつ５５℃で４０時間
反応させた。

反応液をペーパークロマトグラフイーで分析したところ
、ルチンの約６０％がα−グリコシルルチンに転換して
いた。

反応液を実施例Ａ−３と同様に精製し、濃縮、粉末化し
て粉末状α−グリコシル　ルチン製品を原料のルチン重
量に対して約１１０％の収率で得た。

実施例　Ｂ−１　　ハードキャンディー還元麦芽糖水飴
（林原商事株式会社販売、登録商標マピット）　１，５
００重量部を加熱し、減圧下で水分約２％以下になるま
で濃縮し、これにクエン酸１５重量部および実施例Ａ−
３の方法で得た粉末状α−グリコシル　ルチン１重量部
および少量のレモン香料を混和し、次いで常法に従って
、成形、包装してハードキャンディーを得た。

本品は、ビタミンＰを強化した黄色のレモンキャンディ
ーであって、低う蝕性、低カロリーである。

実施例　Ｂ−２　　フキの水煮フキを皮むきし、適当な長さに切断して、薄い食塩水に
数時間浸し、これを実施例Ａ−１の方法で得たシラップ
状α−グリコシル　ルチンと青色１号とを配合して調製
した緑色着色料を含有する液で煮込んで、緑色の鮮かな
フキの水煮を得た。

本品は、各種和風料理の材料として色どりを添えるとと
もに、食物繊維としての生理効果をも発揮する。

実施例　Ｂ−３　　求　肥モチ種澱粉１重量部に水１．２重量部を混合し、加熱糊
化しつつ、これに砂糖１．５重量部、結晶性β−マルト
ース（林原株式会社製造、登録商標サンマルト）０．７
重量部、水飴０．３重量部および実施例Ａ−１の方法で
得たシラップ状α−グリコシル　ルチン０．２重量部を
混和し、以後、常法に従って、戒形、包装して求肥を製
造した。

本品は、風味、口当りとも良好な求肥で、きびだんご風
の和菓子である。

実施例　Ｂ−４　　混合甘味料はちみつ１００重量部、異性化糖５０重量部、黒砂糖２
重量部および実施例Ａ−５の方法で得た粉末状α−グリ
コシル　ルチン１重量部を混合して混合甘味料を得た。

本品はビタミンＰを強化した甘味料で健康食品として好
適である。

実施例　Ｂ−５　　サンドクリーム結晶性α−マルトース（林原株式会社製造、ー　３　３
　ー登録商標ファイントース）１，２００重量部、ショート
ニング１　，　０００重量部、実施例Ａ−４の方法で得
た粉末状α−グリコシル　ルチン１０重量部、レシチン
１重量部、レモンオイル１重量部、バニラオイル１重量
部を常法により混和してサンドクリームを製造した。

本品は、ビタミンＰ強化、黄色着色したサンドクリーム
で、油脂の酸化が抑制され、口当り、溶け具合、風味と
も良好である。

実施例　Ｂ−６　　錠　　剤アスコルビン酸２０重量部に結晶性β−マルトース１３
重量部、コーンスターチ４重量部および実施例Ａ−２の
方法で得た粉末状α−グルコシルルチン３重量部を均一
に混合した後、直径１２問、２０Ｒ杵を用いて、打錠し
錠剤を得た。

本品は、アスコルピン酸とα−グルコシルルチンとの８
複合ビタミン剤で、アスコルビン酸の安定性もよく、飲
み易い錠剤である。

ヘスペリジンとの複合ビタミン剤で、アスコルビン酸の
安定性もよく、飲み易い錠剤である。

３４実施例　Ｂ−７　　カプセル剤酢酸カルシウム・一水塩１０重量部、し−乳酸マグネシ
ウム・三水塩５０重量部、マルトース５７重量部、実施
例Ａ−２の方法で得たα−グルコシル　ルチン２０重量
部及びエイコサペンタエン酸２０′Ｘ含有７−シクロデ
キストリン包接化合物１２重量部を均一に混合し、顆粒
成形機にかけて顆粒とした後、常法に従って、ゼラチン
カプセルに封入して、一カプセル１５０ｍｇ人のカプセ
ル剤を製造した。

本品は、血中コレステロール低下剤、免疫賦活剤、美肌
剤などとして、感受性疾患の予防剤、治療剤、健康増進
用食品などとして有利に利用できる。

実施例　Ｂ−８　　軟　膏酢酸ナトリウム・三水塩１重量部、ＤＬ＝乳酸カルシウ
ム４重量部をグリセリン１０重量部と均一に混合し、こ
の混合物を、ワセリン５０重量部、木ロウ１０重量部、
ラノリン１０重量部、ゴマ油１４．５重量部、実施例Ａ
−４の方法で得たα−グリコシル　ルチン１重量部及び
ハッカ油０．５重量部の混合物に加えて、更に均一に混
和して軟膏を製造した。

本品は、日焼け止め、美肌剤、色白剤などとして、更に
は外傷、火傷の治癒促進剤などとして有利に利用できる
。

実施例　Ｂ−９　　注　射　剤実施例Ａ−２の方法で得たα−グルコシルルチンを水に
溶解し、常法に従って、精製濾過してパイロゲンフリー
とし、この溶液を２０ｍＬ容アンプルにα−グルコシル
　ルチン２００ωｇになるように分注し、これを減圧乾
燥し、封入して注射剤を製造した。

本注射剤は、単体で、または、他のビタミン、ミネラル
などと混合して筋肉内又は静脈内に投与できる。また、
本品は、低温貯蔵の必要もなく、使用に際しての生理食
塩水などへの溶解性は極めて良好である。

実施例　Ｂ−１０　注　射　剤塩化ナトリウム６重量部、塩化カリウム０．３重量部、
塩化カルシウム０．２重量部、乳酸ナトリウム３．１重
量部、マルトース４５重量部及び実施例Ａ−２の方法で
得たα−グルコシル　ルチン２重量部を水１　，　００
０重量部に溶解し、常法に従って、精製濾過してパイロ
ゲンフリーとし、この溶液を滅菌したプラスチック容器
に２５０ｍＬずつ充填して注射剤を製造した。

本品は、ビタミンＰ補給としてだけでなく、カロリー補
給、ミネラル補給のための注射剤で、病中、病後の治療
促進、回復促進などに有利に利用できる。

実施例　Ｂ−１１　経管栄養剤結晶性α−マルトース２０重量部、グリシン１．１重量
部、グルタミン酸ナトリウム０．１８重量部、食塩１．
２重量部、クエン酸１重量部、乳酸カルシウム０．４重
量部、炭酸マグネシウム０．１重量部、実施例Ａ−３の
方法で得たα−グリコシル　ルチン０．１重量部、チア
ミンｏ．ｏｉ重量部及びリボフラピン０．０１重量部か
らなる配合物を調製する。

この配合物２４ｇずつをラミネートアルミ製小袋３　７に充填し、ヒートシールして経管栄養剤を調製した。

本経管栄養剤は、一袋を約３００乃至５００ｍＬの水に
溶解し、経管方法により鼻腔、胃、腸などへの経口的又
は非経口的栄養補給液としても有利に利用できる。

実施例　Ｂ−１２　浴　用　剤ＤＬ一乳酸ナトリウム２１重量部、ビルビン酸ナリトウ
ム８重量部、実施例Ａ−１の方法で得たα−グリコシル
　ルチン５重量部及びエタノール４０重量部を、精製水
２６重量部及び着色料、香料の適量と混合し、浴用剤を
製造した。

本品は、美肌剤、色白剤として好適であり、入浴用の湯
に１００乃至１０，０００倍に希釈して利用すればよい
。本品は、入浴用の湯の場合と同様に、洗顔用水、化粧
水などに希釈して利用することも有利に実施できる。

実施例　Ｂ−１３　乳　液ポリオキシエチレンベヘニルエーテル０．５重量部、テ
トラオレイン酸ボリオキシエチレンソ３　８　一ルビトール１重量部、親油型モノステアリン酸グリセリ
ン１重量部、ビルビン酸０．５重量部、べヘニルアルコ
ール０．５重量部、アボガド油１重量部、実施例Ａ−３
の方法で得たα−グリコシルルチン１重量部、ビタ尖ン
Ｅ及び防腐剤の適量を、常法に従って加熱溶解し、これ
にＬ一乳酸ナトリウム１重量部、１，３−ブチレングリ
コール５重量部、カルボキシビニルボニマー０．１重量
部及び精製水８５．３重量部を加え、ホモゲナイザーに
かけ乳化し、更に香料の適量を加えて撹拌混合し乳液を
製造した。

本品は、日焼け止め、美肌剤、色白剤などとして有利に
利用できる。

実施例　Ｂ−１４　　クリームモノステアリン酸ポリオキシエチレングリコール２重量
部、自己乳化型モノステアリン酸グリセリン５重量部、
実施例Ａ−２の方法で得たαーグルコシル　ルチン２重
量部、流動パラフィン１重量部、トリオクタン酸グリセ
リル１０重量部及び防腐剤の適量を、常法に従って加熱
濱解し、これにＬ一乳酸２重量部、１．３−ブチレング
リコール５重量部及び精製水６６重量部を加え、ホモゲ
ナイザーにかけ乳化し、更に香料の適量を加えて撹拌混
合しクリームを製造した。

［発明の効果］本文で述べたごとく、本発明は、α−グリコシル　ルチ
ンの製造に際して、高濃度のルチンと澱粉質とを含有す
るルチン高含有液に、糖転移酵素を作用させて糖転移反
応を行うことにより、望ましくは、ルヂンを高濃度懸濁
状、または、アルカリ側ｐＨで溶解させた高濃度溶液状
で含有せしめて糖転移反応を行うことにより、ルチンの
仕込濃度を従来技術の約１０乃至２００倍にも高めて反
応きせることかでき、α−グリコシル　ルチンを容易に
高濃度に生成しうろことを見いだし、更に、この反応液
の精製に際して、反応液を多孔性合成吸着剤と接触ざせ
てα−グリコシル　ルヂンを精製できることを見いだし
、α−グリコシル　ルチンの製造に要する使用水量、精
製処理水量、エネルギーコストを大幅に低減できること
となり、その工業化の実現を極めて容易にするものであ
る。

また、このようにして得られるα−グリコシルルチンは
、水溶性良好、耐光性・安定性良好、体内の酵素により
ルチンとグルコースとに加水分解されてルチン本来の生
理活性を発揮するなどの特長を有しており、安全性の高
い天然型のビタミンＰ強化剤としてばかりでなく、黄色
着色剤、抗酸化剤、安定剤、品質改良剤、予防剤、治療
剤、紫外線吸収剤、劣化防止剤などとして、飲食物、嗜
好物、飼料、餌料、抗感受性疾患剤、美肌剤、色白剤な
ど化粧品、更には、プラスチック製品などに有利に利用
される。

従って、本発明によるα−グリコシル　ルチンの工業的
製造法とその用途の確立は、飲食品、化粧品、医薬品、
プラスチック産業における工業的意義が極めて大きい。

４ｌ手続補正書平或１年ｌ１月６日

Claims

【特許請求の範囲】

（１）高濃度のルチンと澱粉質とを含有するルチン高含
有液に糖転移酵素を作用させてα−グリコシルルチンを
生成せしめ、これを採取することを特徴とするα−グリ
コシルルチンの製造法。
（２）高濃度のルチンが、高濃度懸濁状ルチンであるか
、または、アルカリ側ｐＨで溶解させた高濃度溶液状ル
チンであることを特徴とする特許請求の範囲第（１）項
記載のα−グリコシルルチンの製造法。
（３）高濃度のルチンが、ＩＷ／Ｖ％以上の高濃度ルチ
ンであることを特徴とする特許請求の範囲第（１）項ま
たは第（２）項記載のα−グリコシルルチンの製造法。
（４）高濃度のルチンと澱粉質とを含有するルチン高含
有液に糖転移酵素を作用させてα−グリコシルルチンを
生成せしめ、次いで、この溶液を多孔性合成吸着剤に接
触させて精製し、α−グリコシルルチンを採取すること
を特徴とする、α−グリコシルルチンの製造法。
（５）高濃度のルチンが、高濃度懸濁状ルチンであるか
、または、アルカリ側ｐＨで溶解させた高濃度溶液状ル
チンであることを特徴とする特許請求の範囲第（４）項
記載のα−グリコシルルチンの製造法。
（６）高濃度のルチンと澱粉質とを含有するルチン高含
有液に糖転移酵素を作用させてα−グリコシルルチンを
精製せしめ、これを採取し、得られるα−グリコシルル
チンを含有せしめることを特徴とする飲食物の製造法。
（７）高濃度のルチンと澱粉質とを含有するルチン高含
有液に糖転移酵素を作用させてα−グリコシルルチンを
精製せしめ、これを採取し、得られるα−グリコシルル
チンを有効成分として含有せしめることを特徴とする抗
感受性疾患剤の製造法。
（８）高濃度のルチンと澱粉質とを含有するルチン高含
有液に糖転移酵素を作用させてα−グリコシルルチンを
精製せしめ、これを採取し、得られるα−グリコシルル
チンを有効成分として含有せしめることを特徴とする化
粧品の製造法。