JPH03258729A

JPH03258729A - ペプチド組成物

Info

Publication number: JPH03258729A
Application number: JP2055050A
Authority: JP
Inventors: Hideo Morita; 日出男森田; Hideki Matsuda; 秀喜松田; Toshinori Nagaoka; 俊徳長岡; Katsuhiro Osajima; 克裕筬島; Tadasu Sawabe; 澤辺　質
Original assignee: SHOKUHIN SANGYO HIGH SEPAREESHIYON SYST GIJUTSU KENKYU KUMIAI
Current assignee: SHOKUHIN SANGYO HIGH SEPAREESHIYON SYST GIJUTSU KENKYU KUMIAI
Priority date: 1990-03-08
Filing date: 1990-03-08
Publication date: 1991-11-19
Anticipated expiration: 2015-06-05
Also published as: JP3048594B2

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】〔産業上の利用分野〕本発明は、アンギオテンシン転換酵素阻害能を有するペ
プチド組成物に関する。

〔従来の技術〕

高血圧の発症と維持には種々の因子が関与していると考
えられるが、中でも一般にレニン・アンギオテンシン系
と呼ばれている酵素系が血圧維持において重要な役割を
果している。このレニン・アンギオテンシン系で中心的
な役割を果しているのがアンゼオテンシン１転換酵素（
以下、ＡＣＥと略記する）で生理活性を持たないアンギ
オテンシンＩを強い血管壁平滑筋収縮作用を有するアン
ギオテンシン■に転換せしとることを通じて血圧上昇に
関与している。したがって、この酵素活性を抑制するこ
とによって血圧上昇を防ぐこと（降圧）が可能である。

ＡＣＥの活性阻害物質として既に種々の物質が見出され
ている。例えば、天然物については蛇毒自乗のペプチド
あるいは牛乳カゼインのトリプシン分解物中のペプチド
、魚肉出来のペプチド等が知られている。

前記魚肉出来のペプチドに関しては、日本栄養・食糧学
会誌、第４２巻、第１号、第４７〜５４頁（１９８９）
に分子量１．０００〜２．０００のペプチド組成物が、
また特開昭６４−９０１２８号公報には分子量５００〜
５．０００のペプチド画分が、それぞれＡＣＥ活性阻害
能を有することが記載されている。

更に、合成物としては、Ｄ−２−メチル−３−メルカプ
トプロパノイル−し−プロリンし一般名カブトプリル（
Ｃａｐｔｏｐｒ　ｉ　１）　）が、その高い阻害活性か
ら、経口降圧剤として実用に供されている。実用に供さ
れている血圧降下剤はいずれも合成物である。

〔発明が解決しようとする課題〕

近年、学問の進歩により海産魚介類に優れた生理機能を
有する各種物質、例えばある種のペプチド、多価不飽和
脂肪酸及びタウリンなどが存在することが知られ、健康
増進の面からその利用が見直されている。また、イワシ
などの多獲性魚類の７０％は飼料−肥料に供されており
、その有効利用が望まれている。

現在までに報告されている天然のＡＣＥ阻害ペプチドは
いずれも１０個前後の比較的長いペプチドである。しか
し、これらのペプチドは、実際に経口で摂取すると、消
化器系で分解される確率が高く、また腸内ではそのまま
で吸収される確率も低く血圧降下が見られないことが多
い。また、最近ではタンパク資源がアミノ酸まで消化さ
れて吸収されるというよりは、むしろアミノ酸が２〜３
分子が結合しているペプチドにまで消化された形で吸収
され、実際このペプチドの形での吸収の方がこれと同じ
組成のアミノ酸混合物よりも能率よく吸収されるとする
知見が有力となり、この臨床応用としてペプチドをタン
パク資源とする経腸・経口栄養剤が関心を呼んでいる〔
千葉医学、第６１巻、第３８９〜３９６頁（１９８５）
］。

本発明の目的は、これらの課題を解決し、魚類資源の有
効利用となる安価な天然物由来の、吸収性の優れたＡＣ
Ｅ阻害能を有するペプチド組成物を提供することにある
。

〔課題を解決するための手段〕

本発明をｇｉ説すれば、本発明は魚類タンパク質を加水
分解して得られる、アンギオテンシン転換酵素阻害能を
有し、平均アミノ酸残基数が３以下であることを特徴と
するペプチド組成物に関する。

本発明者らは、前記問題点を解決すべく鋭意研究を重ね
た結果、魚類のタンパク質を加水分解することにより、
目的とするペプチド組成物を生成させることができ、か
つ更にこのペプチド組成物を大量にかつ高純度に精製す
ることができるという事実を見出し、本発明を完成した
。

本発明のペプチド組成物は、以下の方法により得ること
ができる。すなわち、魚類を加水分解（自己消化処理を
含む）することによりペプチド組成物を生成させ、次い
でこれをイオン交換樹脂処理等の分離・精製により目的
とするペプチド組成物が得られる。

本発明にあける魚類は、特に限定はなく、イワシ、サバ
や、エビ、タコ等が適宜使用できる。

また、本発明における加水分解は酸分解、アルカリ分解
及び酵素分解のいずれでも良いが、酵素分解が好ましい
。更に、本発明に用いる酵素はタンパク質分解酵素であ
れば何でも良く、後述のように必要に応じて適宜使用で
きる。

当該ペプチドの組成は、第１表に示すとおり、使用する
タンパク質分解酵素の種類や温度、時間、ｐＨ１濃度な
どの加水分解の反応条件によって異なる。エキソペプチ
ダーゼ活性の高い酵素を用いる場合は、分解率が低く、
平均アミノ酸残基数も小さくなり、目的の平均アミノ酸
残基数３以下のペプチド組成物を多く得られるが、遊離
アミノ酸の生成も多くなり、ＡＣＥ阻害活性の低下を伴
う。また、トリプシンのような基質特異性の高い酵素を
用いると遊離アミノ酸の生成は抑えられるが分解度が低
くなる。

また、必要であれば当該ペプチド組成物と各種アミノ酸
、その他脂肪、ポリオール、グルコース、オリゴ糖類、
無機質及びビタミンなどの栄養素を単独又は組合せて添
加することにより、高血圧予防あるいは治療のたｔの食
品、経口摂取物を製造することができる。

なお、本発明のペプチド組成物は食用天然物由来であり
、極とて低毒性である。

本発明における生成物の分析方法は次のとおりである。

（１）ペプチド量ケルブール法により総窒素を測定し、それに６．２５を
乗じた値を用いた。

（２）平均アミノ酸残基数（ｉ）平均アミノ酸残基数＜ｉ＞は以下の式によって求めた。

試料ＩＷｔｌ中の遊離アミン基のモル数加水分解は６Ｎ
塩酸で１０℃、２４時間行い、アミノ基の定量はＴＮＢ
Ｓ法により行った。

（３）アミノ酸組成試料を６Ｎ塩酸で１１０℃、２４時間加水分解後、アミ
ノ酸自動分析法により測定した。

（４）遊離アミノ酸の定量試料を塩酸加水分解しないでそのまま前記（２）項と同
様にアミノ酸自動分析法により測定し、個々のアミノ酸
量の総和をもって遊離アミノ酸量とした。

（５）　Ａ　ＣＥ阻害活性測定試料を試験管に５０μβ入れ、これに１００μｍのＡＣ
Ｅ　（シグマ社製、２．５０］Ｍ）溶液を添加し、３７
℃で５分間保温後、基質として、１００μｌのＢｚ−Ｇ
ｌｙ−Ｌ−）１ｉｓ−Ｌ−Ｌｅｕ　（ペプチド研究新製
、最終濃度５ｍＭ、　ＮａＣ１４００ｍＭを含む）を添
加し、３７℃で６０分間反応させた。その後０．５　Ｎ
塩酸０．２５ｍ１を添加して反応を停止させた後、１．
５−の酢酸エチルを加え、１５秒間激しくかくはんした
。その後３０００　ｒｐｒｎで１０分間遠心して、酢酸
エチル層を１４０℃で２０分間加熱し、溶媒を除去した
。溶媒除去後、３ｗＬｌのＩＭ　　ＮａＣｌ水溶液に溶
解させ、抽圧された馬尿酸の吸収（２２８ｎｏ＋の吸光
度）を測定し、これを酵素活性とした。

阻害率＝　（Ａ−Ｂ）／ＡＸ１００　　（％）Ａ；阻害
剤を含まない場合の２２８ｒ＋ｍの吸光度Ｂ；阻害剤添加の場合の２２８ｎｍの吸光度そして、阻害率５０％の時の阻害濃度をＩＤ、。とする
。

（６）平均分子量（Ｍ）Ｍ＝ミ・１−１８　（Ａ−１）伍；アミノ酸組成より求めたアミノ酸の平均分子量ｌ；平均アミノ酸残基数〔実施例〕以下、本発明を実施例により更に具体的に説明するが、
本発明はこれら実施例に限定されない。

実施例１イワシ肉質のすり身１００ｇに水５００ｎｔ’を加え、
ブナチームＡＰ２ｇを添加し、４０℃で５時間酵素分解
を行った。反応終了後９５℃で１５分間煮沸して酵素失
活した後、冷却して、遠心分離、ろ過してろ液５００ｉ
を得た。次いで活性炭粉末〔武田薬品■製カルポラフィ
ン〕５ｇを加えて、かくはん後ろ過して、ろ液４８０献
を得た。このろ液をダウエックス５０Ｗ（Ｈ”）を充て
んしたカラム（２，５φＸ２０ＣＩｌ）に注入した。そ
して、脱イオン水５００ｒＲ１で洗浄し、２Ｎ　　ＮＨ
，ＤＨ３００ｍｆ！で溶出した。溶出液を減圧下で濃縮
し、アンモニアを除去した後、凍結乾燥してペプチド粉
末Ｉ（１２ｇ）を得た。この粉末のＩＤｓ。値は、１．
１■／ｄ、平均アミノ酸残基数１．８、遊離アミノ酸３
５．４％（１’ｉ／Ｗ）、平均分子量２２６であった。

実施例２イワシ肉質のすり身１００ｇに水１１を加え、ブナチー
ムＡＰ２ｇを添加し、４０℃で５時間酵素分解を行った
。次いで９５℃で１５分間煮沸して酵素失活した後、冷
却して、遠心分離ろ過して、ろ液１０５０ｄを得た。こ
のろ液をダウエックス５０Ｗ（Ｈａを充てんしたカラム
（２，５φＸ２０ｃｍ）に注入した。そして、脱イオン
水５００−で洗浄し、２Ｎ　　ＮＨ，ＯＨ３００献で溶
出した。溶ａ液を減圧下で濃縮し、アンモニアを除去し
た後、凍結乾燥してペプチド粉末（１２ｇ）を得た。以
下第２表及び第３表にその分析値を示した。

第２表ペプチド粉末の分析値第３表ペプチド粉末のアミノ酸組成と遊離アミノ酸組成（両／Ｉ％）実施例３実施例２のペプチド粉末３ｇにデキス）ＩＩＪン１１．
５ｇ、ビタミンミックス１■、脱脂粉乳０、７　ｇ　、
全粒粉８ｇ、シュガーエステル０．１ｇ。

米油１．Ｏｇ、レシチン０−１ｇ、乳化剤０．０５ｇ。

重曹０．１ｇ、若干のフレーバー剤を加え、水を加えて
、１００艷にして、栄養ドリンクを得た。

実施例４実施例２のペプチド粉末３ｇにサンザシ抽出液０゜２ｇ
１ビタミンミックス０．０１ｇ、ハチミツ０．５　ｇ　
、ビタミンＣ０，０１ｇ、クエン酸０．３ｇ１フラクト
ース８．８　ｇ　、フレーバーを加え、水を加えて１０
０艷にし、炭酸ガスを加えることによって優れた味の清
涼飲料水を得た。

〔発明の効果〕

本発明によれば魚類タンパク質の加水分解物を使用する
ことにより、吸収性に優れ、安全性の高い高血圧予防あ
るいは治療のためのペプチド組成物を得ることができる
。更に、イワシなどの多獲性魚類を原料に用いれば、資
源の有効利用となり、安価で有用なペプチド組成物が提供される。

特許ａ！！！人食品産業ノ）イセバレージョンシステム技術研究組合代理同同

Claims

【特許請求の範囲】

１、魚類タンパク質を加水分解して得られる、アンギオ
テンシン転換酵素阻害能を有し、平均アミノ酸残基数が
３以下であることを特徴とするペプチド組成物。