JPH03135991A - 哺乳類の神経組織からガングリオシド類を得る方法及び該物質組成物を用いた精神的器質性疾患の治療方法 - Google Patents

哺乳類の神経組織からガングリオシド類を得る方法及び該物質組成物を用いた精神的器質性疾患の治療方法

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JPH03135991A
JPH03135991A JP2185154A JP18515490A JPH03135991A JP H03135991 A JPH03135991 A JP H03135991A JP 2185154 A JP2185154 A JP 2185154A JP 18515490 A JP18515490 A JP 18515490A JP H03135991 A JPH03135991 A JP H03135991A
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nervous tissue
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カルロス マンマレラ
Pablo Rodriguez
パブロ ロドリゲス
Federico A Cumar
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Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、哺乳類の神経組織からガングリオシド類の混
合物を得る方法及びこの物質組成物を用いた精神的器質
性疾患(psychoorganic disease
s)の治療方法に関する。
更に、本発明は、モノアミンオキシダーゼ抑制剤(s+
onoamine oxidase 1nhibiLo
rs) 、或はノルアドレナリン又はセロトニンのニュ
ーロン摂取遮新薬(neuronal uptake 
blockers)の使用を必要とする気分の疾患の治
療用補助剤として有効であり、薬理学的活性を有し、哺
乳類の神経組織から抽出されるガングリオシド類の画分
(friction )又は混合物を含む物質組成物を
提供する。なおまたそれらは傷んだニューロンの回復及
びニューロン可塑性(neuronal plasti
city)の刺激を必要とする精神的器質性疾患の治療
に有効である。
免匪葛1j ガングリオシド類が、スフィンゴリピド属(sphyn
golipids family)を構成する三つの群
の一つ、即ち神経組織(脳、大脳皮質、脊髄等)に大量
に、また脂肪組織に少量だけ存在する複合脂質からなる
ことが知られている。
スフィンゴリピドは、三つの構成ブロック成分(bui
lcling blocks components)
 、即ち、一般に「スフィンゴシン」と命名されるアミ
ノアルコール(その30以上の異なる種類が知られてい
る、)にペプチド結合により結合されている10乃至2
0個の炭素原子(C+。−C2゜)を有する脂肪酸で、
「セラミドJと呼ばれている構成単位、即ち下記の式の
ステアリン酸とスフィンゴシンからなるセラミド類2 3 2 1 を構成するものを含有する。
第三ブロック成分はC3におけろ水酸基の置換から生じ
る。
ホスホスリルコリン(phospho−rylchol
ine)又はホスホスリルエタノールによるアルコール
基のエステル化(ビー マジオ(B、 Maggio)
 、エフニー クマ(F、八、 Cu鵠ar)、アール
 カプト(R,Caputto)著、ビオケムービオフ
ィス アクタ(Biochem−Biophys Ac
La) 1981.650.69−87参照)が、哺乳
類の神経組織中に高い割合で存在するスフィンゴミエリ
ン類と呼ばれる一つの重要な群の脂質類の形成を庸す。
例:ホスホスリルコリン  − この型の複合脂質類のその他の群は「中性グリコスフィ
ンゴリピドjで、それにおいては位置1のアルコールの
機能が中性炭水化物残留物(ガラクトース、グルコース
等)とのグルコシドの結合によって遮断される。これら
の化合物は神経組織内に大量に存在し、また非神経組織
内に少ない程度に存在する。
スフィンゴリピドの呼称の下に包含される化合物の第三
の群は、1−アルコールの機能がグリコサツカリド分子
とのグルコシドの結合によって同様にjI!断される、
通常「ガングリオシド」と呼ばれる「酸グリコスフィン
ゴリピド」であり、これはシアル酸を有し、この酸類の
中で、N−アセチルノイラミン酸(N−acetyl 
neuraminic acid)は人間のガングリオ
シド類において同様に見いだされるもので、全く普通の
N−グリコリルノイラミン酸(N−glicolil 
neuraminic)である。
ヘキソース、及びシアル酸残留物の量及び相対的位置が
異なる、20以上の異なる型のガングリオシドが確認さ
れた。
一つのシアル酸の部分(fraBent)のみを含有す
るガングリオシド類はモノシアロガングリオシド類(m
ono−sialogangliosides)と呼ば
れる。ガングリオシド類が2つのシアル酸の部分を含有
するときは、それらはジシアロガングリオシド類(di
sialogangliosides)と呼ばれる。ガ
ングリオシド類が3つのシアル酸の部分を含有するとき
は、トリジアロガングリオシド類(trisialog
anglios:des)と呼ばれる。またガングリオ
シド類が4つのシアル酸の部分を含有するときはテトラ
シアロガングリオシド類(teLrasialogan
gliosides )と呼ばれる。それらは、GM、
GD、GT及びGQでそれぞれ示される。撚数及び文字
が付けられる。
撚数はnを中性ヘキソースの構成単位とすると、5−n
に等しい6文字(−最にa、b)はシアル酸の部分の異
性体の位置を示す、これらの部分は、薄層クロマトグラ
フィーにおける異なるRfを有する。
例・ G M + : 4つの中性ヘキソースを有するジシア
ロガングリオシド(n=4)。
GDla:n=4であり、シアル酸の部分の特定の配置
を有するジシアロガングリオシド。
GD、b:n=4であり、GD+aに対してシアル酸の
部分の位置にI!l達する構造異性(i somery
 )を示す。
シナプスを通しての神経インパルス及び組織の免疫反応
の伝達及び細胞対細胞認識(cell t。
cell recognition)におけるガングリ
オシド類の重要性は、広く知られている。
更にニューロンの膜中のその他のスフィンゴリピド類に
関連したガングリオシド類の高い割合を考慮して、それ
らが構造上の重要な機能及びその機能を果たすことが立
証された。ガングリオシド類は、外因的に加えられると
き、生体外で培養されたニューロンのシナプトソームの
機能的な変化及び可塑性の(plastic)変化を伝
えるのに有効であり、この作用を証明する多数の研究が
存在する(ビー マジオ(B、 Haggio) 、エ
フ エークマ(F、^、 Cu+mar) 、アール 
カプト(R,Caputto)著、ビオケムービオフィ
ス アクタ(Biochem−Biophys AcL
a> 1981.850.69−87、及びバーン エ
ム シー(Byrne  M、 C,) 、アール ダ
ブリュー レディーン(R,lIl、Ledeen) 
、エフ リュー ライゼン(F、 J、 Ra1sen
) 、ジー ヨーキー(G、 Yorkee)及びリュ
ー アール スカラファ:、、 (J、 R,5cal
afani)著、雑誌 ジャーナルニューロケム(J、
 Neurochem、) 、1983.41.121
4−1222参照)。
(以下余白) ゛ングリ シト の典P+  六′ としてG M 1
の1を−す 組織の培養で@察されるこれらの効果は、それらが実験
下で生体内で動物に注射されるときにも実証しうる。か
くして世界の様々な所で幾つかの研究者のグループがガ
ングリオシド類の外因的な投与がニューロンの組織(種
々の型の病毒によって損なわれた)の修復を容易にする
ことを証明したくエム エーティルソン(H,^、 T
i1son) 、ジー ジエー メリー(G、 J、 
Marry) 、ケー ナンリー(K、 Nanry)
 、ビー エム ハドソン(P。
M、 )Iudson) 、ジエー ニス ホン(J、
 S、 long)著、ジャーナル オブ ニューロス
フ レス(J。
of Neurosc Re5) 、1988、l、8
8−93参照)、シかし上記の総ての研究、並びにいく
つかの出願された特許及び授与された特許は、損なわれ
た細胞の解剖学的修復に対するガングリオシド類の作用
の分野を限定し、またそれ故、糖尿病、アルコール中毒
、抗新生物薬、外傷等によって生ぜしめられる種々の末
梢の神経障害等の外傷、代謝又は中毒作用によって生ぜ
しぬられるニューロンの構造の変化に対してのその可能
な医学的な利用を制限し、ガングリオシド類の作用の治
療の分野を制限すると言われた(アール アブラハム(
R,^braham)、デイ−エム レヴ4  (D、
 H,Levy)及びアール エム アブラハム(R,
M、へbraha泊)、糖尿病の研究、1988.7.
129−135参照)。
機能性のニューロン可塑性を促進するためにガングリオ
シド類を適用することが可能であることは今では実証さ
れている。基礎的な実験の証拠がガングリオシド類がニ
ューロンの可塑性と関連した一連の行動の反応を促進す
ることを示す(学習及び記憶:神経系における情報記憶
の8!楕に関して、エッチ ラーマン(If、 Rah
man) 、エッチマシーズ パーガモン プレス(1
1,NatLhies Pergamon Press
)発行、ニューヨーク、1988.235−245頁参
照)。
ガングリオシド類の混合物が行動に関連した疾患の治療
用に開発された実験医薬であるという提案は信頼できる
事実によって確証された仮説である。
現在まで知られているガングリオシド類の治療方法に関
して、それらの方法は種々の型のエーテル(eters
 )のような溶媒を形成する過酸化物の採用をも含めて
、生の製品を得る多数−の段階を使用する。
この過酸化物は二重結合と反応し、最終製品の収率を減
少させる。
今日まで知られている精製段階は、基本的に沈澱又は透
析に存する。第一の方法は溶液中の活性生成物と薬剤(
drag)不純物を残し、それ故それは必要とされる精
製段階の数を増加させ、また第二の方法は、長くまた高
価であり、また活性生成物の収率の損失を肩す。
l匪曵■」 本発明は、哺乳類の神経組織から抽出され、そして精製
されたガングリオシド類の患者への投与を包含する、ニ
ューロン可塑性の回復又はモノアミンオキシダーゼ抑制
剤又はノルアドレナリン又はセラトニンのニューロン摂
取遮断薬(uptakeblockers)の使用を必
要とする、精神的器質性疾患の治療用のガングリオシド
類を哺乳類の神経組織から得る方法を説明する。
本発明のほかの目的は、受容しうる薬学的ビヒクル中に
哺乳類の神経組織から抽出したガングリオシド類を投与
可能なように含むことを特徴とする、ニューロン摂取ノ
ルアドレナリン又はセラトニンの遮断に帰する気分障害
の治療における、又はモノアミンオキシダーゼ抑制剤に
より治療される疾患における補助剤として有効な、また
ニューロン可塑性の再設定(re−establ is
h+5ent )を必要とする精神身体疾患を治療する
ために一層有効な薬理学的活性を有する活性物質粗製物
を得ることである。
1乳1鳳11」 本発明の目的であるガングリオシド類を得る方法は、既
に述べた方法よりも収率が高く且つコストが低い状態で
・、先に述べた複数の段階を回避して、抽出及び有機相
とヒドロアルコール相間の及び分配を行い(ジエー フ
ォルシ(J、 Folch)、エム リース(H,Le
es)及びジー ビー スロウンースタンレイ(G、 
B、 5toane−3tanley)著、ジャーナル
 バイオロジカル ケミストリー(J。
Bial、 CheIl、) 、226、イ97(19
5)参照)、次いでイオン交換変成セルロース(DEA
Eセファデックス(DEAE 5ephadex ) 
)による精製及びその選択的溶出を行うことを提案する

Claims (15)

    【特許請求の範囲】
  1. (1)a)1乃至4個の炭素原子を有するアルカノール
    類及び芳香族有機溶媒又は塩素化された有機溶媒等の無
    極性有機溶媒を使用して、均質化した神経組織を抽出し
    、次いで、濾過し、水で希釈して、この形成されたヒド
    ロアルコール相を回収する段階と、 b)前記相内に存在するガングリオシド類を陰イオン交
    換用吸着材料で保持し、次いでケトン類で洗浄する段階
    と、 c)アルカリ性媒質中に、水、1乃至4個の炭素原子を
    有するアルカノール類及び有機溶媒類を含む溶媒混合物
    による溶出によって、前記保持されたガングリオシド類
    を回収する段階と、 d)前記溶媒を蒸留し、次いで水、1乃至4個の炭素原
    子を有するアルカノール類及び有機溶媒を含む溶媒混合
    物を用いて残留物を抽出し、この溶液をシリカゲルカラ
    ム又はハイフロー(Hyflow)、セライト(Cel
    ite)等の天然又は変成珪酸塩中の分配クロマトグラ
    フィー又は吸着クロマトグラフィーによって精製する段
    階と、 e)ガングリオシド類を含む適当な画分を、前記溶媒混
    合物を用い、次いで極性混合物を増加させて溶出して集
    める段階と、 f)前記溶媒を蒸発させ、抽出されたガングリオシド類
    が含有する残留物を回収する段階を包含することを特徴
    とする哺乳類の神経組織からガングリオシド類を得る方
    法。
  2. (2)得られた残留物が水性媒質中に再び溶解され、次
    いで凍結乾燥されることを特徴とする請求項1に記載の
    哺乳類の神経組織からガングリオシド類を得る方法。
  3. (3)神経組織が牛の動物の脳塊、脊髄、小脳あること
    を特徴とする請求項1に記載の哺乳類の神経組織からガ
    ングリオシド類を得る方法。
  4. (4)段階a)において使用されるアルカノールがイソ
    プロパノールであり、また有機溶媒がトルエン、ジクロ
    ロメタン、クロロホルム、1,2−ジクロロエタン、ジ
    クロロエチレンであることを特徴とする請求項1乃至3
    のいずれか一項に記載の哺乳類の神経組織からガングリ
    オシド類を得る方法。
  5. (5)段階a)において、エチレングリコールモノメチ
    ルエーテル(メチルセロソルブ)が使用されることを特
    徴とする請求項1に記載の哺乳類の神経組織からガング
    リオシド類を得る方法。
  6. (6)段階a)において、メタノールがアルカノールと
    して使用され、またクロロホルムが不活性溶媒として使
    用されることを特徴とする請求項1に記載の哺乳類の神
    経組織からガングリオシド類を得る方法。
  7. (7)段階b)の陰イオン交換材料が、吸着されるべき
    ガングリオシドの各0.1gについて0.8乃至1.5
    gの割合で適用されるDEAEセファデックス(Sep
    hndex)又はDEAEセルロース(ジメチルアミノ
    エチルセルロース)であることを特徴とする請求項1乃
    至6のいずれか一項に記載の哺乳類の神経組織からガン
    グリオシド類を得る方法。
  8. (8)段階b)の洗浄溶媒がアセトンであることを特徴
    とする請求項1乃至7のいずれか一項に記載の噛乳類の
    神経組織からガングリオシド類を得る方法。
  9. (9)段階b)において保持されるガングリオシド類が
    、水と1乃至4個の炭素原子(C_1−C_4)を有す
    るアルカノール類とメチルアミン40%とジクロロエタ
    ン又は塩化メチレン又はクロロホルムの混合物で溶出さ
    れることを特徴とする請求項1乃至8のいずれか一項に
    記載の哺乳類の神経組織からガングリオシド類を得る方
    法。
  10. (10)アンモニアがメチルアミンの代わりに使用され
    ることを特徴とする請求項9に記載の哺乳類の神経組織
    からガングリオシド類を得る方法。
  11. (11)段階d)及びf)における溶媒の蒸発が38℃
    乃至45℃において得られた溶液の乾燥状態に至るまで
    の真空蒸発により達成されることを特徴とする請求項1
    乃至10のいずれか一項に記載の哺乳類の神経組織から
    ガングリオシド類を得る方法。
  12. (12)段階d)において得られる残留物が、クロロホ
    ルムとメタノールと水の溶媒混合物を用いて再び取られ
    ることを特徴とする請求項1乃至11のいずれか一項に
    記載の哺乳類の神経組織からガングリオシド類を得る方
    法。
  13. (13)請求項1に記載の薬剤組成物としての哺乳類の
    神経組織から抽出され、精製されたガングリオシドを患
    者に投与することを特徴とする、ニューロン可塑性の回
    復又はモノアミンオキシダーゼ仰制剤(monoami
    no−oxydaseinhibitors)又はノル
    アドレナリン又はセロトニンのニューロン受容体ディブ
    ロッカー(deblockers)の使用を必要とする
    精神的器質性疾患の治療方法。
  14. (14)薬学的に受容しうる媒質中に哺乳類の神経組織
    から抽出したガングリオシド類を投与可能なように含む
    ことを特徴とする、ノルアドレナリン又はセロトニンの
    ニューロン摂取遮断薬で治療される単極内因性うつ病、
    双極内因性うつ病、メランコリー又は反応性うつ病等の
    気分障害の治療に、又はモノアミンオキシダーゼ抑制剤
    で治療される疾患において、またニューロン可塑性の修
    復を必要とする精神病身体疾患を治療するとき、補助剤
    として有効な薬理学的活性を有する組成物。
  15. (15)前記神経組織が牛属の動物の脳塊、脊髄又は小
    脳であることを特徴とする請求項14に記載の組成物。
JP2185154A 1989-07-12 1990-07-12 哺乳類の神経組織からガングリオシド類を得る方法及び該物質組成物を用いた精神的器質性疾患の治療方法 Pending JPH03135991A (ja)

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