JPH03115223A

JPH03115223A - 癌転移阻害剤

Info

Publication number: JPH03115223A
Application number: JP25354189A
Authority: JP
Inventors: Genji Imokawa; 玄爾芋川; Shinji Yamada; 山田　真二; Akira Kawamata; 章川俣
Original assignee: Kao Corp
Current assignee: Kao Corp
Priority date: 1989-09-28
Filing date: 1989-09-28
Publication date: 1991-05-16

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】〔産業上の利用分野〕本発明は、糖脂質誘導体を含有する安全性の高い癌転移
阻害剤に関する。

〔従来の技術及び発明が解決しようとする課題〕癌の転
移とくに血行性転移においては、癌細胞が原発巣から遊
離し血管に侵入する浸潤の段階、さらに標的器官の血管
内皮細胞膜や細胞間マトリックスへの着床段階、そして
血管外に出てからの増殖段階の３段階より転移が完成す
ることが知られ、転移の抑制はこのいずれか・の段階を
抑制することにより可能と考えられている。近年自然発
生転移の実験モデルがかなり確立され、なかでも癌細胞
が血管に侵入したのち原発巣以外の組織で増殖を開始し
転移が完成するまでを定量的に評価できる系が出現する
におよんで、高転移クローンと低転移クローンの生物学
的性状の違いや転移形成過程の各段階における腫瘍細胞
側、宿主細胞側の因子が明らかになってきている。即ち
、高転移クローンでは一般にコンカナバリンＡ結合性糖
タンパクが少なく、Ｎ−アセチルガラクトサミンが細胞
表面に露出し大豆アグルチニン（ＳＢ＾）への高結合性
や小麦胚アグルチニン（ＷＧＡ）高感受性を示すなど、
癌細胞膜糖蛋白における糖鎖構造の違いがかなり明確に
示されている。またマウス腫瘍系では皮下腫瘍からの自
然発生転移は腫瘍細胞膜表面のガラクトース、Ｎ−アセ
チルガラクトサ、ミン基に結合しているシアル酸量と相
関が示され、Ｔ細胞ハイブリドーマ（Ｔ−ｃｅｌｌ　ｈ
ｙｂｒｉｄｏｍａ）でもノイラミニダーゼで細胞表面の
シアル酸を除去することにより、細胞がより高転移性に
変化することが報告されている。また一般には高転移性
癌細胞では細胞表面の負電荷が高いことや、シアル酸が
糖鎖末端に多数添加されやすいような多分岐型糖鎖構造
が多く、またこれら多分岐型糖鎖構造の合成に係わるト
ランスフェラーゼも特異的に誘導されていることが知ら
れている。これらの糖鎖構造の特異性と高転移性の関連
は主として血管内に侵入した癌細胞が標的器官の血管内
皮細胞膜や細胞間マトリックスへの着床段階での相互作
用のし易さや、またある種の糖鎖構造が宿主の免疫のタ
ーゲッテングに重要な役割をにない、とくに転移形成に
抑制的に作用することが知られているＮに細胞等の標的
糖鎖構造はやはり高転移性癌細胞上には欠落しているこ
とが知られ、シアル酸による被覆作用もあいまって、Ｎ
に細胞の認識排除を避けることにより、高転移性を獲得
していると考えられている。

以上のように癌の転移のメカニズムに関しては、種々の
知見が得られてきてはいるものの、癌の転移を有効に阻
害する薬剤は未だ見出されていないのが現状である。

従って、本発明の目的は安全性の高い癌転移阻害剤を提
供することにある。

〔課題を解決するための手段〕

本発明者らは、上述の如く癌細胞表面のシアル酸が、転
移形成の種々の段階に深く関わっている事実より、癌細
胞の転移抑制について鋭意研究を行った結果、アミド化
合物にシアル酸を付与した特定の糖脂質誘導体が優れた
癌転移阻害剤作用を有する事を見出し、本発明を完成し
た。

すなわち本発明は次の式（Ｉ）以下余白Ｃ＋５）ｌｓｓ口ＣＨ２Ｃｌ０）１０Ｈ（１）で表わされる糖脂質誘導体を含有することを特徴とする
癌転移阻害剤を提供するものである。

本発明に用いる脂質誘導体（１）は例えば、公知の方法
［Ｐｏｌ、　Ｊ、　Ｃｈｅｍ、、　５２．１０５９　（
１９７８）、同５２、１２８３　（１９７８）、特開昭
５４−１１７４２１号、同５４−１４４３０８号、同５
４−１４７９３７号、同６３−２１６８５２号、同６４
−３１７５２号、同６４−７９１９５号〕に従って、グ
リシジルエーテルとエタノールアミンとから得られる化
合物（ｎ）のアミノ基のみを選択的にアシル化して化合
物（ＩＩＩ）となし、次いで水酸基保護のため化合物（
ｒＶ）を経て化合物（Ｖ）とし、この化合物（Ｖ）をグ
リコジル化することにより製造される。

〔式中、ｐｈはフェニル基を、Ｂｔはエチル基を、ＡＣ
はアセチル基を、Ｍｅはメチル基を示す〕次に糖脂質誘
導体（Ｉ）の癌転移抑制作用及び安全性について説明す
る。

（１）癌転移抑制作用Ｂ５７ＢＬ系雄性６週令のマウスに糖脂質誘導体（１）
を０．１％又は１．０％となるように１６．７％ジメチ
ルスルホキシド（ＤＭＳＯ）含有生理食塩液に懸濁し、
１日２回３００μｌを腹腔内投与した。対照群には糖脂
質誘導体（Ｉ）を含まない以外は、上記同様の生理食塩
液を同様に腹腔内投与した。３日後、投与終了後Ｂ−１
６Ｐ〜１０細胞ｌＸｌ０’個を尾静脈から注入して移植
した。翌日さらに２回糖脂質誘導体（Ｎを同様に腹腔内
最終投与し、１４日白心マウスを殺して肺に転移し、コ
ロニーを形成している肺転移巣の数を測定した。結果を
第１表に示す。

以下余白第１表１）：平均±ｓｏ　　本：ｐ＜　ｏ。０１で有意差あり
。

（２）急性毒性試験糖脂質誘導体（Ｉ）のマウス腹腔内投与による急性毒性
試験を行った。その結果、体重１　ｋｇ当り１、５ｇを
投与しても死亡例は見られず、糖脂質誘導体（１）のＬ
Ｄｓ。は１．５ｇ／　ｋｇを超える値であることが判明
した。

以上の結果より、糖脂質誘導体（１）は優れた癌転移抑
制作用を有するとともに極めて安全性の高いものである
。

本発明癌転移阻害剤における式（１）で示される糖脂質
誘導体の作用機構の詳細は完全には解明されていないが
、該誘導体（１）が癌細胞表面のシアル酸含有複合糖質
受容体もしくは、血管壁の基底膜受容体を被覆するか、
正常細胞に対して、これらと競合した相互作用をするこ
とによって、癌細胞の転移能を失わせるためと思われる
。

糖脂質誘導体（Ｉ）を癌転移阻害剤として使用する場合
、その投与量は患者の・体重、年令、性別、投与方法、
体調、病状等により異なるが、経口投与の場合は１日に
１００〜５００ｍｇ、非経口投与の場合は１日に２〜１
００１１１ｇ程度が適当である。

本発明の癌転移阻害剤は、通常の方法で錠剤、顆粒剤、
散剤、カプセル剤、懸濁剤、注射剤、串刺等の種々の剤
形とすることができる。固型製剤を製造するには、糖脂
質誘導体Ｈ）に賦形剤、更に必要に応じて結合剤、崩壊
剤、滑沢剤、着色剤、矯味矯臭剤、増量剤、被覆剤、糖
衣剤などを加えた後、常法により錠剤、顆粒剤、散剤、
カプセル剤、串刺等とすることが好ましい。注射剤を調
製する場合は、糖脂質誘導体（Ｉ）を注射用蒸留水等の
水性担体にあらかじめ溶解、分散、乳化等するか、また
は注射用の粉末にして、用事に溶解等すればよい。注射
剤の投与方法としては、静脈内投与、動脈内投与、門脈
内投与、腹腔的投与、筋肉内投与、皮下投与、腫瘍内投
与が挙げられる。

本発明の癌転移阻害剤は、必要により更に一般の抗癌剤
、抗炎症剤、抗生物質、止血剤、消化性潰瘍治療剤等を
含有せしめて投・与することもできる。

〔実施例〕

次に、製造例を挙げて本発明をさらに詳細に説明するが
、本発明はこれらに限定されるものではない。

製造例１　糖脂質誘導体（１）の合成：ａ）Ｎ−（３−
ヘキサデシロキシ−２−ヒドロキシプロピル）−Ｎ−２
−ヒドロキシエチルへキサデカナミド〔式（ＩＩＩ）の
化合物〕の合成；攪拌装置、滴下漏斗、温度計、還流冷
却器及び窒素導入管を備えた５１容４ツロフラスコにエ
タノールアミン１６３７ｇ（２６，８ｍｏ　ｉ　）及び
エタノール３２７ｇ　（７，１１ｍｏ　ｌ　）を入れＮ
２雰囲気下で８０℃に加熱攪拌しつつ、これにヘキサデ
シルグリシジルエーテル４００ｇ　（１，３４ｍｏ　Ｉ
！、）を３時間かけて滴下した。滴下終了後、更に同条
件下３０分間加熱攪拌したのち、蒸留装置をとりつけエ
タノール及び未反応のエタノールアミンを減圧下に留去
（７９〜ｂ酸化カリウム３．７６ｇ　（０，０６７ｍｏ　１　）７
を加え、８０℃／　２０　Ｔｏｒｒで加熱攪拌しつつ、
これにヘキザデカン酸メチル３６２．３ｇ　（１，３４
ｍｏ　Ａ’　）を３時間かけて滴下した。滴下終了後更
に同条件下１時間加熱攪拌することにより、淡黄色の粗
生成物８０１ｇを得た。

これをヘキサンから１回、エタノールから２回再結晶す
ることにより無色粉末の目的化合物（Ｉ）６４９ｇを得
た（収率８１％）。

融点＝７４〜７６℃ ＩＲ（ｃ「’）　　：３３２０（ｂｒ）、　２９２４．２Ｂ５２．１６１６．
１４６Ｂ、　１１１２゜０６２ ’Ｈ−ＮＭＲ：０．８６（６８，ｔ）、　１．０〜１．６（５４１（、
ｍ）、　２．２〜２．５（２Ｈ，ｍ）　、　３．２〜４
．１　（１３Ｈ，ｍ）元素分析計算値（％）　　Ｃ；７４，３１　Ｈ；１．２．６４　
Ｎ；２．３４実測値（％）　　Ｃ；７４．１２　）１；
１２．７０　Ｎ；２．２３ｂ）Ｎ−（３−ヘキサデシロ
キシ−２−ヒドロキシプロピル）−Ｎ−２−）リフェニ
ルメトキシエチルへキサデカナミド〔式（ＩＶ）・の化
合物〕の合成：攪拌装置、滴下漏斗、還流冷却器及び窒素導入管を備え
た５００ｍｊ！容４ツロフラスコ中、工程ａ）で得うれ
たＮ−（３−ヘキサデシロキシ−２−ヒドロキシプロピ
ル）−Ｎ−２−ヒドロキシエチルへキサデカナミド（Ｉ
ＩＩ）　５９．８１ｇ（０，１ｍｏｆｆ）　、塩化トリ
フェニルメチル２８．７３ｇ　（０，ｌｏ１ｍｏβ）及
び無水ジクロロメタン３００ｍ１を窒素気流下、攪拌混
合した。これにピリジン８．７０ｇ　（０，１１，ｍｏ
　１２　）の無水ジクロロメタン５０ｍｊ！溶液を約５
分間かけて滴下し、４０℃で６時間加熱還流した。反応
終了後放冷し、析出したピリジン塩酸塩を濾別し、濾液
を１００−の水で４回洗浄し、無水硫酸す）　ＩＪウム
で乾燃後溶媒を留去して、無色ワックス状の粗生成物７
７、　ｌ１ｇを得た。これをシリカゲルフラッシュカラ
ムクロマトグラフィー（シリカゲル：２３ｏ〜４００メ
ツシユ、１ｋｇ、展開溶媒；ジクロロメタン／酢酸エチ
ル＝１９／１）にて精製して、無色ワックス状固体の目
的化合物５９．３７ｇを得た（収率７０．７％）。

融点＝４６〜４７℃ ＩＲ（ＫＢｒ、ｃｍ−’）　　：３４１２、３０５８．３０２８．２９２６．２ｇ５４．
１６５３．１６２６１４７３、１４５２．１０８３．７
０５’Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｊ！　３．δ）：１、８６　
（６Ｎ、　ｔ）　、　１．０〜１．６　（５４Ｎ、　ｍ
）、　２．２〜２．５（２Ｈ，ｎ＋）、　３．２〜４．
１（１２）１．ｍ）、　７．２〜７．５（１５）１．ｍ
）ｃ）Ｎ−（２−アセトキシ−３−ヘキサデシロキシプロ
ピル）−Ｎ−２−ヒドロキシエチルへキサデカナミド〔
式（Ｖ）の化合物〕の合成：攪拌装置、滴下漏斗、還流
冷却器、温度計及び窒素導入管を備えた３０ｍ１容４ツ
ロフラスコに工程ｂ）で得られたＮ−（３−ヘキサデシ
ロキシ−２−ヒドロキシプロピル）−Ｎ−２−トリフェ
ニルメトキシエチルヘキサテ゛カナミド５００　ｍｇ　
（０，５９５ｍｍｏｊりを無水ジクロロメタン１０−に
溶解した。

これにピリジン４ｍＪ２．次いで無水酢酸２−を３０分
かけて滴下し、室温下で８時間攪拌した。反応終了後、
２規定塩酸、次いで水・で洗い、芒硝で乾燥後、溶媒留
去し、シリカゲルプレバラティブ薄層クロマトグラフィ
ーで精製して、Ｎ−（２−アセトキシ−３−ヘキサデシ
ロキシプロピル）−Ｎ−２−トリフェニルメトキシエチ
ルヘキサテ゛カナミド５２０　ｒｎｇを得た。この化合
物１０５ｍｇ（０，１１９ｍ＋ｎｏｆ　）を１０−２０
．フラスコ中、無水ジクロロメタン２ｒｎｌに溶解し、
室温、窒素雲囲気下に塩化ジエチルアルミニウム１７％
ヘキサン溶液０、６ｍｌ！　（０，５９５ｍｍｏ　１　
）を加え４０分間攪拌後、５％重曹水を加えて反応を止
めた。生成した白色不溶物をセライトを用いて濾別後、
水洗し芒硝で乾燥後溶媒留去し、シリカゲルプレバラテ
ィブ薄層クロマトグラフィーで精製して、無色結晶の目
的化合物７３ｍｇ（収率９５％）を得た。

融点：５９．５〜６０．０℃ ＩＲ（ν□１．。ｍ−１）。

３５１４、　２９２０．　２８５４．　１？１３．　１
６４１．　１４７３．　１３Ｂ６゜１２７５、　１２２
４．　１２０６゜１１４５．　１０７７、　１０１０５
０Ｈ−Ｎ　（δ、ＣＤＣｌ、）：０．８８（６）１．ｔ）、　　１．２〜１．８（５４Ｈ
，ｍ＞、　　２．０７（３１１，ｓ）。

２．３８（２ｔｌ、ｍ）、　　３Ｊ〜３．９（１，１）
１．ｍ）、　　５．１〜５．３（Ｉｔ（、ｍ）ｄ）Ｎ−（２−アセトキシ−３−ヘキサデシロキシプロ
ピル）−Ｎ−［２−０−（メチル５−アセタミド−３，
５−ジデオキシ−α−Ｄ−グリセローβ−Ｄ−ガラクト
−２−ノヌロピラノソネート）エチル〕ヘキサデカナミ
ドの合成：攪拌装置、還流冷却器、温度計及び窒素導入管を備えた
５０−４ツロフラスコ中、工程Ｃ）により調製したＮ−
（２−アセトキシ−３−ヘキサデシロキシプロピル）−
Ｎ−２−ヒドロキシエチルへキサデカナミド２．８６ｇ
　（４，４８ｍｍｏβ）及び公知の方法（ヘミッシエ・
ベリヒテ、１９６６年刊、９９巻、６１１ページならび
にケミカル・アンド・ファーマシューティカル・プリテ
ン、１９８６年刊。

３４巻、２７２５ページ）により調製した２−デオキシ
−２−クロロ−４，７，８，９−テトラ−０−アセチル
−Ｎ−アセチルノイラミン酸メチルエステル１゜９０ｇ
（３，７３ｍｍｏｉ！　）を無水ジクロロメタン５．Ｏ
ｍｊ！及び無水トルエン５．　Ｏｒｄの混合溶媒に溶解
し、室温、窒素気流下に粉末無水硫酸カルシウム２．０
ｇを加え３０分攪拌した。ここに粉末炭酸銀１．５４ｇ
　（５，６０ｍｍｏ　１　）を加え、室温下さらニ３，
５時間攪拌ののち、不溶物を濾別し、濾液を減圧下に濃
縮してから、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（シ
リカゲル；２３０〜４００メツシュ３００ｇ、展開溶媒
；酢酸エチル／ヘキサン−３／１）で精製し、無色油状
の目的化合物３．０６ｇを得た（収率７３．７％）。

以下余白０ＡｃＩＲ（液膜、　　ｃｍ−’　）　　：３２２０、　１７４９．　１６６２．　１２２４．　１
１３１．　１０４４Ｈ−Ｎ１０４４Ｈ−Ｎ　、、δ）：０、８７９　（ＯＨ，ｔ、　Ｊ＝６．５９ｔｌｚ）　、
　１゜２５７　（５叶、Ｓ）。

１．５６９（４）１．ｍ）、　　１．８８１（３）１．
ｓ、ＨＮＡｃ）、　　２゜０２５゜２．０４０．　２．
０４９．　２．０６０．　２．１２１．　２．１３９．
　２．１５６（１５Ｈ，ｅａｃｈ　ｓ、０Ａｃ）、　　
２Ｊ４（２ｔｌ、ｍ）、　　２．５６４（１８゜ｄｄ、
　　Ｊ＝５．１　　ａｎｄ　　１３．７Ｈｚ、　　３’
−Ｈｅｑ）、　　３．４０９〜４．１６（１３Ｈ，ｍ）
、　　３．７７８（３Ｈ，ｓ、ＣＯ口Ｍｅ）、　　４．
２５９　（ＩＨ。

ｍ、９’−Ｈ）、　　４．８６（ＩＨ，ｍ、ＣＨＯ＾ｃ
）、　　５．０８〜８．４１（４ｔｌ、　ｍ、　　４’
　−）１．　７’　−Ｈ，８’　−Ｈ，ＮＨ八へ）元素
分析計算値（％’）　　Ｃ；６３．６４．　Ｈ；９．４１．
　Ｎ；２．５２実測値（％）　　Ｃ；６３，５８．　）
ｌ；９．４１．　Ｎ；２．３４ｅ）Ｎ−（３−ヘキサデ
シロキシ−２−ヒドロキシプロピル）　−Ｎ　−［２−
０−（５−アセタミド−３，５−ジデオキシ−α−Ｄ−
グリセローβ−Ｄ−ガラクトー２−ノヌロビラノシル）
エチル〕へキサデカナミド〔糖脂質誘導体（Ｉ）〕の合
成：攪拌装置、滴下漏斗、還流冷却器、温度計及び窒素
導入管を備えた２　００ｒｒｔｅ４ツロフラスコ中、上
記工程ｄ）により調製したＮ−（２−アセトキシ−３−
ヘキザデシロキシブロピル）−Ｎ−Ｃ２−０−（メチル
５−アセタミド−３，５−ジデオキシ−α−Ｄ−グリセ
ローβ−Ｄ−ガラク）−２ノヌロビラノソネート）エチ
ル〕ヘキサテ°カナミド２．１０ｇ（１，８９ｍｍｏｉ
）を無水ピリジン３０ｍ１に溶解し、ヨウ化リチウム１
．５０ｇ（１１，２ｍｍｏりを加えて窒素気流下に４時
間加熱還流した。反応液にクロロホルムを加え２規定塩
酸、水の順でクロロホルム溶液を洗浄、分液後、無水硫
酸ナトリウム上で乾燥した。溶媒を留去して得られた淡
黄色油状物を無水ジクロロメタン１００ｍｊ’に溶解し
、室温、窒素気流下に２８％ナトリウムメトキシド−メ
タノール溶液２．２ｇ　（１１，４ｍｍｏ　１　）を滴
下し、３時間攪拌した。次いで反応液をアンバーリス）
１５１０ｇと３時間攪拌することによって中和後、固形
物を濾別した。濾液を濃縮後、シ１リカゲルカラムクロ
マトグラフィー（シリカゲル；２３０〜４００メツシユ
　１５０ｇ、展開溶媒クロロホルム／メタノール／水＝
１００／４０／ｌ）で精製し、無色粉末の目的化合物（
１）　１．２０９ｇを得た（収率７５．７％）。

以下余白ｉ融点＝２０２℃（分解）ＩＲ（ＫＢｒ、ｃｍ−’）　　：３３８８、１６２０．１１２２．１０７７、１０３２’
　）ｌ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄｇ／Ｄ、０＝１００／１
．３５℃、δ）：０、８１６（６Ｈ，ｂｒ、　ｓ）、　
１．２１２（５０１１，ｂｒ、　ｓ）、　１．４６（４
Ｈ，ｂｒ、ｓ）、　１．８０８　ａｎｄ　１．９２２（
３１１，ｅａｃｈ　ｓ。

Ｎ）ＩＡｃ）、　２．３０（２Ｈ，ｍ）、　２．６９（
ＬＨ，ｍ、３ｅｑ−１ｔ）。

３．２３〜３．８３　（１８ｆｔ、　ｍ＞元素分析計算値（％）　　Ｃ；６４，８３．　Ｉｔ；１０，４３
．　Ｎ；３．］、５実測値（％）　　Ｃ；６４，８３．
　ｔｌ；１０．５０．　Ｎ；３０２〔発明の効果〕本発明癌転移阻害剤は、このような作用を有する糖脂質
誘導体（Ｉ）を含有するものであるため。

人間並びに動物の悪性腫瘍の遠隔転移予防に効果的に使
用することができ、またきわめて安全である。従って、
担癌患者に長期にわたって、内服させることはもちろん
のこと、外・利手術における術後の癌転移予防にも効果
的に使用することができる。

以上

Claims

【特許請求の範囲】１、次の式（ I ） ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ）で表わされる糖脂質誘導体を含有することを特徴とする
癌転移阻害剤。