JPH0285295A

JPH0285295A - α―Ｌ―アスパルチル―Ｌ―フェニルアラニンメチルエステルの分離方法

Info

Publication number: JPH0285295A
Application number: JP1038188A
Authority: JP
Inventors: Toshio Kato; 敏雄加藤; Chojiro Higuchi; 長二郎樋口; Takeshi Oura; 剛大浦; Masanobu Ajioka; 正伸味岡; Teruhiro Yamaguchi; 彰宏山口
Original assignee: Mitsui Toatsu Chemicals Inc
Current assignee: Mitsui Toatsu Chemicals Inc
Priority date: 1988-03-14
Filing date: 1989-02-20
Publication date: 1990-03-26
Anticipated expiration: 2012-10-08
Also published as: EP0333036A2; KR890014575A; NO891069L; CA1339657C; DE68928249D1; DK123089A; ATE156840T1; CN1036580A; DK123089D0; JP2662287B2; KR910006286B1; AU3127789A; EP0333036B1; AU605683B2; EP0333036A3; NO891069D0; BR8901174A; DE68928249T2; CN1036201C

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】〔産業上の利用分野〕本発明は、粗α−Ｌ−アスパルチル−し一フェニルアラ
ニンメチルエステルを有機カルボン酸中または有機カル
ボン酸含有有Ｎ？ｇ媒中、共存する不純物からα−Ｌ−
アスパルチル−し一フェニルアラニンメチルエステル鉱
酸塩または有機スルホン酸塩として分離する方法に関す
る。

さらに詳しくは、粗α−Ｌ−アスパルチル−しフェニル
アラニンメチルエステル（以下、αＡＰＭと略記する）
を有機カルボン酸中または有機カルボン酸含有有機溶媒
中、溶解ないし懸潤させ、これに鉱酸または有機スルホ
ン酸を添加し、α−ＡＰＭ鉱酸塩または有機スルホン酸
塩とし、β−Ｌ−アスパルチル−し一フェニルアラニン
メチルエステル（以下、β−ＡＰＭと略記する）ＦＬ酪
酸塩たは有機スルホン酸塩等と分離する方法に関するも
のである。

α−ＡＰＭはジペプチド系の甘味料として広く知られ良
質な甘味特性ならびに蔗糖の２００倍近い高甘味度を有
し、ダイエツト甘味側としてその需要が大きく伸長して
いるものである。

〔従来の技術及び発明が解決しようとする課題〕α−Ａ
ＰＭは、Ｌ−アスパラギン酸とＬ−フェニルアラニンメ
チルエステルとから成るジペプチド化合物であり、その
製法に関しては化学的製造法を中心に既に多数の方法が
知られているが、Ｎ−保ｆｆ１−Ｌ−アスパラギン酸無
水物を出発原料とする方法が一般的である。

例えば、Ｎ−保ＪＬ−アスパラギン酸無水物とＬ−フェ
ニルアラニンメチルエステルを適当な媒体中で縮合させ
たのち、常法によって保護基を脱離させて製造する方法
（米国特許第３．７８６，０３９号）が知られている。

Ｌ−フェニルアラニンメチルエステルを用いない方法と
しては、Ｎ−ホルミル−し−アスパラギン酸無水物とＬ
−フェニルアラニンとを酢酸中で縮合させた後、ハロゲ
ン化水素酸との共存下に脱ホルミル化し、水、アルコー
ルおよびハロゲン化水素酸と処理することによりエステ
ル化を行い、α−ＡＰＭをハロゲン化水素酸塩として単
離する方法（特公昭５５−２６１３３）も知られている
。

あるいは、Ｎ−ホルミル−し−アスパラギン酸無水物と
Ｌ−フェニルアラニンとを縮合させたのち、酸性媒体中
で脱ホルミル化とエステル化を同時に行うα−ＡＰＭの
製造法が知られている（特開昭５３−８２７５２）。

また、Ｌ−アスパラギン酸無水物の鉱酸塩を用い、この
ものとＬ−フェニルアラニンメチルエステルを強酸と水
とメタノールの混合溶媒中反応させ、同溶媒中からα−
ＡＰＭの強酸塩として単離する方法（特開昭５ｌ−１３
７３７）　も知られている。

しかしながら、いずれの場合においても、目的とするα
−ＡＰＭの他にβ−ＡＰＭの副生をさけることができな
い。このβ−ＡＰＭは甘味効果がなくむしろ苦味を呈す
るため、その混在はα−ＡＰＭの商品価値を低下させる
。

また、Ｎ−アシル基、特にＮ−ホルミル基を保護基とし
て用いた場合には、水性溶媒中で強酸と接触させて保護
基を脱離する方法が一般的である。

しかしながらこの条件下では、α−ＡＰＭのメチルエス
テルの加水分解が一部進行し易く、またメタノールを共
存させた場合、α−Ｌ−アスパルチル−し一フェニルア
ラニンーβ−メチルエステルやα−Ｌ−アスパルチル−
し一フェニルアラニンジメチルエステルが副生し、目的
のα−ＡＰＭのみを選択的に得ることは困難である。

これに対してベンジルオキシカルボニル基をＮ保護基と
して用いた場合には、接触還元により容易に保護基を除
くことができるため、メチルエステルの加水分解の問題
がなく、高選択的に脱保護基できることが知られている
。特公昭５７−２５５３７号および特公昭５７−２５５
３８号には、ベンジルオキシカルボニルアスパラギン酸
無水物とＬ−フェニルアラニンメチルエステルから得ら
れたＮ−ベンジルオキシカルボニル−し−アスパルチル
−し−フェニルアラニンメチルエステル（以下、Ｚ−Ａ
ＰＭと略記する）を鉱酸水溶液の存在下に水素化し、得
られた反応液を中和してα−ＡＰＭを得る方法が示され
ている。しかし、この方法もまたβ−ＡＰＭを副生じ、
脱保護基のため鉱酸水溶液を用いるためα−Ａ　Ｐ　Ｍ
のメチルエステルの加水分解が進行し易い点はＮ−ホル
ミル基を脱離する場合と同様である。また酢酸溶液中、
接触還元する方法も示されているが、反応後に酢酸を留
去する際にジケトピペラジン誘導体を生成し、収率の低
下をきたす。ジケトピペラジンＨＡ　”１体もまた甘味
効果がなく、その混在はα−ＡＰＭの商品価値を低下さ
せる。

また、従来からの分離方法としては、α−ＡＰＭとβ−
ＡＰＭを水性媒体中、β−レゾルシル酸と接触させ、α
−ＡＰＭを難溶性の付加物として、不純物β−ＡＰＭと
分離する方法が知られている（特公昭４９−６３０５号
）。

この方法は、多量に含有する不純物とα−ＡＰＭを分離
することができるものの、α−ＡＰＭおよびβ−ＡＰＭ
と同量のβ−レゾルシル酸を用いること、また希薄水溶
液中からα−ＡＰＭ付加物を単離し、有１１２ｇ剤等を
用いてβ−レゾルシル酸を回収し、さらには水溶液を減
圧濃縮しα−ＡＰＭを単離したのち、水から再結晶する
ことなど、操作が繁雑であるばかりでなく高価なα−Ａ
　Ｐ　Ｍの回収率が低く、経済的に不利である。

また、α−ＡＰＭを水性媒体中でハロゲン化水素酸と接
触させることによって、難溶性のα−ＡＰＭのハロゲン
化水素酸塩を生成させ、不純物として共存するβ−ＡＰ
Ｍを分離する方法が知られている（特公昭４９−４１４
２５）。

しかしながら、この分離方法については、α−ＡＰＭ中
のβ−ＡＰＭとの分離は良好なものの、希釈ハロゲン化
水素溶液に溶解させるため、αＡ　Ｐ　Ｍのメチルエス
テルの加水分解が進行し易い。

また、ハロゲン化水素溶液を過剰量使用し、不純物とα
−ＡＰＭが良く分離される反面、α−ＡＰＭハロゲン化
水素塩の回収率が低いなどの欠点を有する。

このように従来公知のα−ＡＰＭの分離方法はそれぞれ
欠点を有し、工業的分離精製法とするには必ずしも満足
できる方法ではない。

〔課題を解決するための手段］本発明者らは、上記のような従来法の欠点がなく、しか
もα−ＡＰＭと不純物が共存する中から効率良くα−Ａ
ＰＭを分離する方法について鋭意検討した結果、有機カ
ルボン酸中または有機カルボン酸含有有機溶媒中、粗α
−ＡＰＭを鉱酸またはｆｆｆｌスルホン酸と接触させる
と、難溶性のαＡＰＭの鉱酸塩または有機スルホン酸塩
が析出し、一方、不純物であるβ−ＡＰＭやα−Ｌ−ア
スパルチル−し一フェニルアラニン、ジケトピペラジン
誘導体等は塩の形として析出せず、α−ＡＰＭの鉱酸塩
または有機スルホン酸塩のみが高収率で得られることを
見出し、本発明を完成した。

すなわち、本発明は、有機カルボン酸中または有機カル
ボン酸含有有機溶媒中、粗α−ＡＰＭと鉱酸または有機
スルホン酸とを接触せしめ、次いで固液分離し、α−Ａ
ＰＭ鉱酸塩またはを有機スルホン酸塩として分離するこ
とを特徴とする単離収率の高いα−ＡＰＭの分離方法で
ある。

本発明の方法で使用する粗α−ＡＰＭは、いかなる製造
法によって製造されたものでもよい、すなわち、Ｌ−フ
ェニルアラニンメチルエステルまたはＬ−フェニルアラ
ニンを出発原料とし、Ｎ−保護−Ｌ−アスパラギン酸無
水物と縮合させたのち、脱保護基あるいは脱保護基〜エ
ステル化反応をさせる製造方法により得られた粗α−Ａ
　Ｐ　Ｍからα−ＡＰＭを分離することに適用できる。

特に、ベンジルオキシカルボニル基を保護基としたヘン
シルオキシカルボニルアスパラギン酸無水物とＬ−フェ
ニルアラニンメチルエステルから得られた粗Ｚ−ＡＰＭ
を有機カルボン酸中または有機カルボン酸含有有機溶媒
中水素化して得られた反応ｉ・夜から、才且α−Ａ　Ｐ
　Ｍを単なすること、なくα−ＡＰＭを分離することに
適用できる。

このような方法で得られたα−ＡＰＭ中の不純物は、通
常β−ＡＰＭやその加水分解生成物、αＡＰＭの加水分
解生成物、あるいはジエステル体、ジケトピペラジン誘
導体等である。

本発明の方法で用いる有機カルボン酸としては酢酸、プ
ロピオン酸のごとき脂肪族カルボン酸類をあげることが
できるが、好ましくは酢酸が使用される。また、α−Ａ
ＰＭと鉱酸との塩生成またはα−Ａ　Ｐ　Ｍと有機スル
ホン酸との塩生成を阻害しない有機溶媒であれば有機カ
ルボン酸と他の有機）８媒との混合溶媒中からも容易に
行うことができる。具体的にはトルエン、キシレン、ヘ
キサンなどの炭化水素類、酢酸エチル、酢酸ブチルなど
のカルボン酸エステル類またはテトラヒドロフラン、ジ
オキサなどのエーテル類を有機カルボン酸を含有する混
合溶媒として用いることもできる。

有機カルボン酸の使用量は特に限定されるものではない
が、操作上α−ＡＰＭに対して３〜１０重千倍の範囲で
使用するのが好ましい。

本発明の方法で用いる鉱酸としては、硫酸、硝酸、リン
酸、塩酸、塩酸ガスをあげることができるが、好ましく
は硫酸が使用される。また、用いる各種鉱酸の濃度につ
いては特に制限はないが、含水率が高いと、エステル加
水分解が起こりやすくなるとともに、α−ＡＰＭの塩の
溶解度を大きくするため、α−ＡＰＭの収率低下につな
がる。

これらの鉱酸の使用量は、溶液中のα−ＡＰＭおよびβ
−ＡＰＭが鉱酸塩になる理論量あればよく、通常は小過
剰量使用すれば十分である。鉱酸を添加する温度は特に
制限はないが、高すぎるとα−ＡＰＭの加水分解が起こ
り、塩の枚重が低下する恐れがあるので、通常、１０〜
５０°Ｃが好ましい。

本発明の方法で用いる有機スルホン酸としては、具体的
には、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼン
スルホン酸、Ｐ−トルエンスルホン酸、トリフルオロメ
タンスルホン酸およびナフタリンスルホン酸で代表され
る脂肪族スルホン酸または芳香族スルホン酸類をあげる
ことができるが、好ましくはメタンスルホン酸が使用さ
れる。

これらの有機スルホン酸の使用量は、溶液中のα−ＡＰ
Ｍおよびβ−ＡＰＭが有機スルホン酸塩になる理論量で
あればよく、通常は、小過剰量使用すれば十分である。

有機スルホン酸を添加する温度は、通常、１０〜５０°
Ｃが好ましい。

本発明の方法を実施するには、有機カルボン酸中または
有機カルボン酸含有有機溶媒中にα−ＡＰＭを懸濁また
は溶′Ａダさせ、次に鉱酸または有機スルホン酸を添加
すると、α−ＡＰＭの鉱酸塩または有機スルホン塩が析
出してくるため、この結晶を濾過、洗浄するのみでα−
ＡＰＭの鉱酸塩または有機スルホン酸塩を単離すること
ができる。

また、有機カルボン酸または有機カルボン酸含有有機溶
媒中に、粗Ｚ−ＡＰＭを溶解又は懸澗させ、次に還元触
媒を加えて水素雰囲気上攪拌することにより得られた粗
ｃｒ−ＡＰＭの反応液に鉱酸または有機スルホン酸を添
加すると、α−Ａ　Ｐ　Ｍの鉱酸塩または有段スルホン
酸塩が析出してくるため、濾過、洗浄するのみで、α−
ＡＰＭの鉱酸塩または有段スルホン酸塩をｍ　４ＪＪす
ることができる。

水素化で用いる還元触媒としては、鉄属及び白金属に属
する金属を用いることができる。その形態は単体でも不
活性担体に担持した形でもよい。

好ましくは白金カーボン、パラジウムカーボン等のカー
ボン担持貴金属系触媒が用いられる。その使用量につい
ても特に制限はないが、金属換算でｉＩＩ　Ｚ　−Ａ　
Ｐ　Ｍの０．０１〜１％が好ましい。水素化の反応温度
は、粗Ｚ−α−ＡＰＭ及び生成物のα−ＡＰＭの安定性
から一１θ〜８０°Ｃが好ましい。水素化反応は、加圧
下においても行うことができるが、常圧でも十分反応が
進行する。水素化の反応時間は、用いる溶媒、触媒、温
度等により異なるが、好適な条件を選べば１〜５時間で
十分である。

本発明の方法によって単離したα−Ａ　Ｐ　Ｍの鉱酸塩
または有機スルホン酸塩から遊離のα−ＡＰＭを製造す
る際には、α−Ａ　Ｐ　Ｍの鉱酸塩または有機スルホン
酸塩を水に溶解せしめたのち、通常中和に用いられる炭
酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウム、炭酸ナトリウム
、炭酸カリウム、アンモニアなどの無機塩基あるいはト
リエチルアミン、ピコリンなどの有機塩基を添加して、
α−Ａ　Ｐ　Ｍの等電点にｐＨを調節することにより高
純度のαＡＰＭが容易に得られる。

〔作用および効果〕

本発明の方法によれば、α−ＡＰＭをβ−ＡＰＭ等を不
純物とする粗α−Ａ　Ｐ　Ｍから面単な模作で容易にα
−ＡＰＭ鉱酸塩または有機スルホン酸塩のみを分刈する
ことができる。また、↓ｎＺ−ＡＰＭの脱保護基を高収
率で行った後、β−ＡＰＭ等を含む）■α−ＡＰＭを反
応液から取りだすことなく、同反応液に鉱酸または有機
スルホン酸を加えるだけで、α−ＡＰＭ鉱酸塩または有
機スルホン酸塩のみを単＾１することができる。しかも
従来法に比較して高収率で単９ｕできることから、本発
明は工業的にα−ＡＰＭの分離法として価値の高いもの
である。

〔実施例〕

以下、実施例により本発明の方法を詳しく説明する。

実施例１ α−Ａ　Ｐ　Ｍ　２２．１ｇ（０，０７５モル）とβ−
Ａ　Ｐ　Ｍ７．４ｇ（０，０２５モル）を含有する酢酸
溶液１３３．２ｇに２０〜２５°Ｃで９８％硫酸１０．
５ｇ（０，１０５モル）を３０分要して添加した。同温
度で１時間撹拌したのち、析出している結晶をｔｉ４過
、洗浄、乾燥することにより硫酸塩の結晶２９．６ｇを
単離した。

得られた結晶を高速液体クロマトグラフィーで分析した
結果、α−Ａ　Ｐ　Ｍ含有７（遊１モ「換算）は２０．
８ｇ　　（回収率９４％（対α−Ａ　Ｐ　Ｍ））であり
、αＡＰＭ：β−ＡＰＭは９９．０：　　１．０であっ
た。

また、このものの元素分析の結果はα−ＡＰＭ硫酸塩に
一致した。

元素分析（％）　　Ｃ＋Ｊｚ。Ｎｚ０ｑＳとしてｌｌＮ
５実測値　４２．７２　５．３４　７．１４　８．１６計
算値　４２．８６　５．１４　７．１４　８．１７実施
例２ α−Ａ　Ｐ　Ｍ　２３．５ｇ（０，０８モル）とβ−Ａ
ＰＭ５．９ｇ（０，０２モル）を含有する酢酸溶液１３
３．２ｇに２０〜２５°Ｃで９８％硫酸１０．５ｇ（０
，１０５モル）を３０分要して添加した。同温度で１時
間撹拌したのち、析出している結晶を濾過、洗浄、乾燥
することによりα−ＡＰＭの硫酸塩３０．９ｇを得た。

得られた結晶を高速液体クロマトグラフィーで分析した
結果、α−ＡＰＭ含有量（遊離換算）は２２．９ｇ　（
回収率９７．５％（対α−Ａ　Ｐ　Ｍ））であり、α−
ＡＰＭ：β−ＡＰＭは９９．０：　　１．０であった。

この結晶２７．０ｇをとり、水１７８ｇ中に加え、炭酸
水素ナトリウムでｐｌ＋　５．２に調整した。５°Ｃに
冷却し、析出した結晶を濾過、冷水洗浄、乾燥すること
によりα−ＡＰＭの結晶１８．８ｇを得た。

旋光度：〔α）　ｇ’＋１５．８　　（Ｃ＝４．１５規
定蟻酸）高速液体クロマトグラフィーで分析した結果、
得られた結晶は高純度のα−ＡＰＭであった。

実施例３不純物として、４．１％のβ−ＡＰＭを含むαＡＰＭ純
度９５．６％の粗α−ＡＰＭ３０．０ｇ　（α−ＡＰＭ
とβ−ＡＰＭで０．１０モル）を含有する酢酸）８液１
３３．２　ｇに２０〜２５°Ｃで９８％硫酸１０．５ｇ
　（０，１０５モル）を３０分を要して添加した。同温
度で１時間撹拌したのち、析出している結晶を濾過、洗
浄、乾燥することにより３７．６　ｇの結晶を得た。

この結晶を高速液体クロマトグラフィーで分析した結果
、α−ＡＰＭ硫酸塩としての純度は９９．１％でありβ
−ＡＰＭ硫酸塩は０．５％であった。

収率９７．４％（対α−ＡＰＭ）。

また、このものの元素分析の結果、α−ＡＰＭ硫酸塩に
一致した。

元素分析値（％）　　Ｃｌ４Ｈ２゜Ｎ、Ｏ１ＳＨＮＳ実測値　４２．７６　５．３３　７．１２　８．１６計
算値　４２．８６　５．１４　７．１４　８．１７この
結晶２７．０　ｇをとり、水１７８ｇ中に加え、炭酸水
素ナトリウムでｐ　Ｈ５，２に中和した。５°Ｃに冷却
した結晶を濾過、冷水洗浄、乾燥することによりα−Ａ
ＰＭの結晶を得た。

物量１Ｂ、８ｇ［α］　”＝１５．８舌’（Ｃ＝４．１５規定蟻酸）こ
こに得られた結晶を高速液体クロマトグラフィーで分析
した結果純粋なα−ＡＰＭであった。

実施例４実施例３と同様の粗α−Ａ　Ｐ　Ｍ２Ｏ，０ｇを含有す
る酢酸溶液２９４ｇに２０〜２５°Ｃで３５％塩酸１１
．０ｇ（０，１０５モル）を３０分を要して添加した。

同温度で１時間撹拌したのち、析出している結晶を濾過
、洗浄、乾燥することにより３０．７ｇの結晶を得た。

この結晶を高速液体クロマトグラフィーで分析した結果
、α−Ａ　Ｐ　Ｍ塩酸塩としての純度は９９．６％であ
り、β−ＡＰＭ塩酸塩は０．３％であった。

収率９４．９％（対α−ＡＰＭ）。

また、このものの元素分析の結果、α−ＡＰＭ塩酸塩に
一致した。

元素分析値（％）　　Ｃ，、Ｈ，、ＣＩ　Ｎ２０゜ＣＨ
Ｎ　　　Ｃ／！実測値　５０．７０　５．８３　８．３５　１０．５３
計算値　５０．８４　５．７９　８．４７　１０．７２
実施例５ α−Ａ　Ｐ　Ｍ　２３．５ｇ（０，０８モル）、β−Ａ
　Ｐ　Ｍ５．９ｇ（０，０２モル）とα−Ｌ−アスパル
チルーＬ−フェニルアラニン２．５ｇ（０，００ｉ３９
モル）を含有する酢酸溶液１３３．２ｇに２０〜２５°
Ｃで攪拌しながら９８％硫酸１１．４ｇ（０，１１４モ
ル）を３０分要して添加した。

同温度で１時間撹拌したのち、析出している結晶を濾過
、洗浄、乾燥することにより硫酸塩の結晶３０．６ｇを
得た。

得られた結晶を高速液体クロマトグラフィーで分析した
結果、α−ＡＰＭ含有量（遊離換算）は２２゜８ｇであ
った。またこのものは、元素分析の結果、α−ＡＰＭ硫
酸塩と一致した。

回収率９７．０％（対α−ＡＰＭ）実施例６ α−Ａ　Ｐ　Ｍ　２３．５ｇ（０，０８モル）、β−Ａ
ＰＭ５．９ｇ　（０，０２モル）、α−Ｌ−アスパルチ
ル−し一フェニルアラニン２．５ｇ（０，００８９モル
）およびβ−Ｌ−アスパルチルーＬ−フェニルアラニン
０．６ｇ（０，００２１モル）を含有する酢酸溶液２３
５ｇに２０〜２５°Ｃで攪拌しながら９８％硫酸１１．
７ｇ（０，１１７モル）を３０分要して添加した。同温
度で１時間撹拌したのち、析出している結晶を濾過、洗
浄、乾燥することにより硫酸塩の結晶２９．４ｇを得た
。

得られた結晶を高速液体クロマトグラフィーで分析した
結果、α−ＡＰＭ含有量（遊１ｉｄｉ挨算）は２１．９
ｇであった。またα−ＡＰＭ：β−ＡＰＭは９９．５：
　　０．５であった。

回収率９３．２％（対α−ＡＰＭ）実施例７ α−Ａ　Ｐ　Ｍ　２３．５ｇ（０，０８モル）、β−Ａ
ＰＭ５．９ｇ　（０，０２モル）、α−Ｌ−アスパルチ
ル−し一フェニルアラニン２．５ｇ（０，００８９モル
）、β−Ｌ−アスパルチルーＬ−フェニルアラニン０．
６ｇ（０，００２１モル）および５−ベンジル−３，６
−シオキソビペラジンー２−酢酸０．６ｇ（０，００２
３モル）を含有する酢酸溶液２３５ｇに２０〜２５°Ｃ
で撹拌しながら９８％硫酸１１．７ｇ（０，１１７モル
）を３０分要して添加した。同温度で１時間撹拌したの
ち、析出している結晶を濾過、洗浄、乾燥することによ
り硫酸塩の結晶２９．０ｇを得た。

得られた結晶を高速液体クロマトグラフィーで分析した
結果、α−ＡＰＭ含有量（遊離換算）は２１．４ｇであ
った。またα−ＡＰＭ：β−ＡＰＭは９９．５：　　０
．５であった。

回収率９１．１％（対α−ＡＰＭ）実施例８ α−Ａ　Ｐ　Ｍ　１４．７ｇ（０，０５モル）、β−Ａ
ＰＭ１４．７ｇ　（０，０５モル）を含有する酢酸溶液
１３３．２ｇに２０〜２５℃で攪拌しながら９８％硫酸
５．２ｇ　（０，０５２モル）を３０分要して添加した
。同温度で１時間撹拌したのち、析出している結晶を濾
過、洗浄、乾燥することにより硫酸塩の結晶１７．２ｇ
を得た。

得られた結晶を高速液体クロマトグラフィーで分析した
結果、α−ＡＰＭ含有量（遊離換算）は１２．８ｇであ
った。またα−Ａ　Ｐ　Ｍ　：β−ＡＰＭは９９．１：
　　０．９であった。

回収率８７．０％（対α−ＡＰＭ）実施例９有機カルボン酸としてプロピオン酸を用いる以外は実施
例２と同様に行った。

収量３０．３　ｇ得られた結晶を高速液体クロマトグラフィーで分析した
結果、α−Ａ　Ｐ　Ｍ含有量（遊離換算）は２２．５ｇ
であった。

回収率９５．７％（対α−ＡＰＭ）またこのものは、元素分析の結果、α−ＡＰＭ硫酸塩で
あった。

実施例１Ｏさらにトルエン１３３．２　ｇを添加する以外は実施例
５と同様に行った。

収量２８．５　ｇ得られた結晶を高速液体クロマトグラフィーで分析した
結果、α−ＡＰＭ含有量（遊離換算）は２１．２ｇであ
った。

回収率９０．２％（対α−ＡＰＭ）実施例１１〜１５有機カルボン酸と鉱酸として第１表に記載したものを用
いる以外は実施例２と同様に行・った。

結果を第１表に示す。

比較例１ α−Ａ　Ｐ　Ｍ５．０ｇ（０，０１’７モル）とβ−Ａ
　Ｐ　Ｍ５．０ｇ（０，０１７モル）とを含有する水？
１ｔｆｆ１５００　ｍｌにβ−レゾルシル酸６．０ｇ（
０，０３９モル）を加え室温で５時間攪拌した後、冷蔵
庫に一夜保存した。　ｔＪ’ｉ出した結晶を濾過、乾燥
することにより９．３ｇの結晶を得た。

この結晶から常法の処理をしｉｓのα−ＡＰＭ４．０ｇ
を得た０回収率８０％（対α−ＡＰＭ）比較例２ α−Ａ　Ｐ　Ｍ５．０ｇ（０，０１７モル）とβ−Ａ　
Ｐ　Ｍ５．Ｏｇ（０，０１７モル）とをＩＮ塩酸５０ｄ
に室温で溶かすと直ちに結晶が析出した。冷蔵庫に一夜
保存した後析出している結晶を濾過し４．８ｇのα−Ａ
ＰＭ塩酸塩の結晶を得た。

得られた結晶を遊離のα−ＡＰＭにし、分析した結果、
高純度のα−ＡＰＭであった。

回収率７２％（対α−ＡＰＭ）実施例１６ α−Ａ　Ｐ　Ｍ２２．１　ｇ　（０，０７５モル）とβ
−ＡＰＭ７．４　ｇ　（０，０２５モル）を含有する酢
酸溶液１３３．２ｇに２０〜２５°Ｃで９８％メタンス
ルホン酸１０．６ｇ（０，１０５モル）を３０分要して
添加した。同温度で１時間攪拌した後、析出している結
晶を濾過、洗浄、乾燥することによりメタンスルホン酸
塩の結晶を単＾Ｗした。収量２６．７ｇ。

得られた結晶を高速液体クロマトグラフィーで分析した
結果、α−ＡＰＭ含有量（遊離換算）は１９．９　ｇで
あった。またα−ＡＰＭ：β−ＡＰＭは９９．０　：　
１．０であった。回収率９０％（対α−ＡＰＭ）。

また、このものの元素分析の結果、α−ＡＰＭのメタン
スルホン酸塩に一致した。

元素分析値（％）　　（ＣＩＳ’ｈｚＮｔＯｓＳとして
）Ｃ）ＩＮｓ実測値　４６．０１　５．７３　７．１６　８．０５計
算値　４６．１５　５．６８　　？、１８　８．２１実
施例１７ α−Ａ　Ｐ　Ｍ２３．５　ｇ　（０，０８モル）とβ−
ＡＰＭ５．９　ｇ　（０，０２モル）を含有する酢酸溶
液１３３．２　ｇに２０〜２５°Ｃでメタンスルホン酸
１０．６　ｇ　（０，１０５モル）を３０分要して添加
した。同温度で１時間攪拌した後、析出している結晶を
濾過、洗浄、乾燥することによりα−ＡＰＭのメタンス
ルホン酸塩を得た。収量２９．８ｇ。

得られた結晶を高速液体クロマトグラフィーで分析した
結果、α−ＡＰＭ含有量（ｉＶ離換算）は２２．３ｇで
あった。またα−ＡＰＭ：β−ＡＰＭは９９．０　：　
１．０であった。

回収率９５％（対α−ＡＰＭ　）。

この結晶２６．７ｇをとり、水１７８ｇ中に加え、炭酸
水素ナトリウムでＰＨ５，６に中和した。５°Ｃに冷却
し、析出した結晶を濾過、冷水洗浄、乾燥することによ
りα−ＡＰＭの結晶１８．７　ｇを得た。

旋光度：　〔α］ε’＝１５．６　（Ｃ＝４．１５規定
蟻酸）得られた結晶を高速クロマトグラフィーで分析し
た結果、純粋なα−ＡＰＭであった。

実施例１８ α−Ａ　Ｐ　Ｍ２３．５　ｇ　（０，０８モル）、β−
ＡＰＭ５．９　ｇ　（０，０２モル）およびα−Ｌ−ア
スパルチルーＬ−フェニルアラニン２．５　ｇ　（０，
００８９モル）を含有する酢酸溶？＆　１３３．２ｇに
２０〜２５°Ｃでメタンスルホン酸１１．０　ｇ　（０
，１１４モル）を３０分要して添加した。同温度で１時
間攪拌した後、析出している結晶を濾過、洗浄、乾燥す
ることにより、メタンスルホン酸塩の結晶２７．８　ｇ
を得た。

得られた結晶を高速液体クロマトグラフィーで分析した
結果、α−ＡＰＭ含有量（遊離換算）は２０．９ｇであ
った。また、元素分析の結果、α−ＡＰＭメタンスルホ
ン酸塩と一致した。回収率は８９．０％（対α−ＡＰＭ
　）であった。

実施例１９ α−Ａ　Ｐ　Ｍ２３．５　ｇ　（０，０８モル）、β−
ＡＰＭ５．９（０，０２モル）、α−Ｌ−アスパルチル
−し一フェニルアラニン２．５　ｇ　（０，００８９モ
ル）およびβＬ−７スバルチルーし一フェニルアラニン
０．６ｇ　（０，００２１モル）を含有する酢酸溶液２
３５ｇに２０〜２５°Ｃでメタンスルホン酸１１．２　
ｇ　（０，１１７モル）を３０分要して添加した。同温
度で１時間攪拌した後析出している結晶を濾過、洗浄、
乾燥することによりメタンスルホン酸塩の結晶を２７．
６ｇ得た。

得られた結晶を高速液体クロマトグラフィーで分析した
結果、α−ＡＰＭ含有量（遊離換算）は２０．７ｇであ
った。またα−ＡＰＭ：β−ＡＰＭは９９．５　：　０
．５であった。回収率８８．０％（対α−ＡＰＭ）。

実施例２０ α−Ａ　Ｐ　Ｍ２３．５　ｇ　（０，０８モル）、β−
Ａ　Ｐ　Ｍ５．９　ｇ　（０，０２モル）、α−Ｌ−ア
スパルチル−し一フェニルアラニン２．５　ｇ　（０，
００８９モル）、βＬ−アスパルチルーし一フェニルア
ラニン０．６ｇ（０，００２１モル）および５−ベンジ
ル−３６−シオキソビペラジンー２−酢酸０．６　ｇ　
（０，００２３モル）を含有する酢酸溶液２３５ｇに２
０〜２５°Ｃでメタンスルホン酸１１．２ｇ　（０，１
１７モル）を３０分要して添加した。同温度で１時間攪
拌した後、析出している結晶を濾過、洗浄、乾燥するこ
とによりメタンスルホン酸塩結晶を２７．７ｇ得た。

得られた結晶を高速液体クロマトグラフィーで分析した
結果、α−ＡＰＭ含有量（遊離換算）は２０．８ｇであ
った。またα−ＡＰＭ：β−ＡＰＭは９９．５　：　０
．５であった。回収率８８．３％（対α−ＡＰＭ　）。

実施例２１実施例１７において、有機カルボン酸の種類をプロピオ
ン酸にかえる以外は実施例１７と同様に行なった。収量
２８．１ｇ。

得られた結晶を高速液体クロマトグラフィーで分析した
結果α−ＡＰＭ含有量（遊離換算）は２１．２ｇであっ
た。回収率９０．２％（対α−ＡＰＭ）。

実施例２２実施例１８においてトルエン１３３．２　ｇを添加スる
以外は実施例１８と同様に行なった。収量２１．６ｇ。

得られた結晶を高速液体クロマトグラフィーで分析した
結果α−ＡＰＭ含有量（遊離換算）は２０．８ｇであっ
た。回収率８８．７％（対α−ＡＰＭ　）。

実施例２３〜２６実施例１７において、第２表に示す有機カルボン酸と有
機スルホン酸の種類をかえる以外は実施例１７と同様に
行なった。結果を第２表に示す。

実施例２７Ｚ−α−ＡＰＭ３４．３ｇ　（０，０８モル）とＺ−β
ＡＰＭ　８．６ｇ　（０，０２モル）を含有する酢酸溶
液４２８ｇに５％パラジウムカーボンを２．１ｇ添加し
、常圧、室温下で２時間接触還元を行った。反応後触媒
を濾過し、濾液に９８％硫酸１０．５ｇ　（０，１０５
モル）を３０分を要して添加した。同温度で１時間攪拌
した後、析出している結晶を濾過、洗浄、乾燥すること
により結晶２９．８ｇを得た。

ここに得られた結晶を高速液体クロマトグラフィーで分
析の結果、α−ＡＰＭ含有量（遊離換算）は２２．１　
ｇであった。また、α−ＡＰ〜■：β−Ａ　Ｐ　Ｍ　＝
９９．Ｏ：　　１．０であった。

収率９４％（対α−ＡＰＭ）また、このものの元素分析の結果、α−ＡＰＭ硫酸塩に
一致した。

元素分析値（％）　Ｃｌ　ａｌｌｚｏＮｔＯ７ｓとして
Ｃ）ＩＮＳ実測値　　４２．７６　５．３３　７．１２　８．１６
計算値　　４２．８６　５．１４　７．１４　８．１７
次にこの結晶２０ｇをとり、水１８０　ｇに加え炭酸水
素ナトリウムでｐＨ５，２に中和した。５°Ｃに冷却し
析出した結晶を濾過、冷水に洗浄、乾燥することにより
１４．２ｇの結晶を得た。

ここに得られた結晶を高速液体クロマトグラフィーで分
析の結果、純粋なα−ＡＰＭであった。

旋光度：　〔α）　！’＝１５．８　（Ｃ＝４．１５規
定蟻酸）実施例２８Ｚ−α−Ａ　Ｐ　Ｍ３４．３ｇ（０，０８モル）とＺ−
β−ＡＰ　Ｍ　８．６ｇ（０，０２モル）を含有する酢
酸溶液４２８ｇに５％パラジウムカーボンを２．１ｇ添
加し、常圧、室温下で、２時間接触還元を行った０反応
後、触媒を濾過し、濾液に２０〜２５°Ｃで９８％メタ
ンスルホン酸１０．６ｇ（０，１０５モル）を３０分を
要して添加した。

同温度で１時間攪拌した後、析出している結晶を濾過、
洗浄、乾燥することにより、α−ＡＰＭのメタンスルホ
ン酸塩の結晶２８．１ｇを単離した。

得られた結晶を高速液体クロマトグラフィーで分析した
結果、α−Ａ　Ｐ　Ｍ含有量（遊離換算）は１７．５ｇ
であった。またα−ＡＰＭ：β−ＡＰＭは９９．０　：
　１．０であった。

回吸率　８８％（対α−Ａ　Ｐ　Ｍ　）また、このもの
の元素分析の結果、ａ−ＡＰＭのメタンスルホン酸塩に
一致した。

元素分析値（％）　Ｃｌ５Ｈ２□Ｎ、０．３としてＨＮ
Ｓ実測値　　４６．０６　５．７１　７．１７　８．０９
計算（直　　　　　４６．１５　　　５．６８　　　７
．１８　　　８．２１実施例２９実施例２７と同様の組成のＺ−α−Ａ　Ｐ　ＭとＺ−β
−ＡＰＭ混合物を触媒として、白金カーボン２．１ｇを
用いた以外は実施例１と同様の役作で接触還元して得ら
れた反応液に３５％塩酸１１．０ｇ　（０、１０５モル
）を３０分を要して添加した。同温度で１時間撹拌した
後、析出している結晶を濾過、洗浄、乾燥することによ
り結晶２３．８ｇを得た。

ここに得られた結晶を高速液体クロマトグラフィーで分
析の結果、α−ＡＰＭ含有量（遊離換算）は２１．２　
ｇであった。また、α−ＡＰＭ：β−Ａ　Ｐ　Ｍ　＝９
９．５　：　　０．５であった。

収率９０％（対α−ＡＰＭ）また、このものの元素分析の結果、α−ＡＰＭ硫酸塩に
一致した。

元素分析値（％）　Ｃｌａｌ（＋ｑＣＩＮ２０Ｓとして
ＣＩＩ　　　　Ｎ　　　ＣＩ実測値　　５０．７０　５．８３　８．３５　１０．５
３計算値　　５０．８４　５．７９　　Ｂ、４７　１０
．７２次にこの結晶２０ｇをとり、水１８０ｇに加え２
８％アンモニア水でｐＨ５，２に中和した。５°Ｃに冷
却し析出した結晶を濾過、冷水洗浄、乾燥することによ
り１４．０　ｇの結晶を得た。

ここに得られた結晶を高速液体クロマトグラフィーで分
析の結果、純粋なα−ＡＰＭであった実施例３０溶媒として用いる有機カルボン酸の種類を、プロピオン
酸にかえる以外は実施例２７と同様の方法で接触還元後
、ＡＰＭの硫酸塩として単離した。

収量２９．９ｇ高速液体クロマトグラフィーで分析の結果、Ｕ−ＡＰＭ
含有量（遊離換算）は２２．１ｇ（収率９４％対α−Ａ
ＰＭ）でα−ＡＰＭ：β−Ａ　Ｐ　Ｍ　＝９８．８＝１
．２であった。

実施例３１溶媒としてトルエン２０％を含んだ酢酸を用いる以外は
、実施例２７と同様の操作でＡＰＭの硫酸塩として単離
した。

収量３０．４ｇ高速液体クロマトグラフィーによる分析の結果、α−Ａ
ＰＭ含有量（遊離換算）は２２．１ｇ　（収率９４％対
α−ＡＰＭ）でα−ＡＰＭ：β−ＡＰＭ＝９８．５：　
　１．５であった。

実施例３２Ｚ−α−Ａ　Ｐ　Ｍ３２．１　ｇ　　（０，０７５モル
）、Ｚ−β−Ａ　Ｐ　Ｍ８．６ｇ（０，０２モル）、Ｎ
−ベンジルオキシカルボニル−α−Ｌ−アスパルチル−
し一フェニルアラニン２．１ｇ　（０，００５モル）お
よび５−ベンジル−３，６−シオキソピペラジンー２−
酢酸０．１ｇ　（０，０００３８モル）を含有する酢酸
溶液４２８ｇを実施例２７と同様の操作により、接触還
元後、ＡＰＭの硫酸塩として単離した。

収量２７．７　ｇ高速液体クロマトグラフィーによる分析の結果、ｒｒ−
ＡＰＭ含有景（遊１ｔｌｔ　？Ａ算）　１ｔ２０．５ｇ
　（収率９３％対α−ＡＰＭ）でα−ＡＰＭ：β−Ａ　
Ｐ　Ｍ　＝９９゜Ｏ：Ｘ、Ｏであり、α−Ｌ−アスパル
チル−し一フェニルアラニンと５−ベンジル−３，６−
ジオキソピペラジンは検出されなかった。

実施例３３〜３６有機カルボン酸溶媒の種類と、鉱酸の種類をかえる以外
は、実施例２７と同様に行った。

結果を第３表に示す。

Claims

【特許請求の範囲】

（１）粗α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニン
メチルエステルを有機カルボン酸中または有機カルボン
酸含有有機溶媒中、鉱酸または有機スルホン酸と接触せ
しめ、ついでα−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラ
ニンメチルエステルを鉱酸塩または有機スルホン酸塩と
して単離することを特徴とするα−Ｌ−アスパルチル−
Ｌ−フェニルアラニンメチルエステルの分離方法。
（２）粗α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニン
メチルエステルが、粗Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−
α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチルエ
ステルを有機カルボン酸中または有機カルボン酸含有有
機溶媒中、水素化触媒を用いて水素化して得られた反応
生成物である特許請求項１記載の分離方法