JPH0250428B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 ［発明の技術分野］ 本発明は、試料の分析方法に関するものであ
る。

［発明の目的］ 多くの液体基準化学分析では試験しようとする
試料を適当な装置により計量しなければならない
（正確なアリコートを送出さなければならない）
ことがよく知られている。さらに適当に希釈した
試料が得られるように試料と混合するための希釈
剤を計量する必要のあることが分つている。希釈
処理は通常試料を試薬と混合する前に実施する。
試薬は又与えられた反応で使うのに適当なように
計量しなければならない。アリコートを得る方法
の精度により後続のどの分析測定もその精度の限
界が決まる。正確なアリコートを得てその希釈を
行うことも又、試料に関係的に過剰な試薬を用意
し干渉物の影響を減らすのに必要である。

所要の物質及び全部のこれ等の工程の準備は時
間がかかり不便である。従つて本発明の目的は、
分析しようとする物質の正確なアリコートを得て
希釈分析を行う簡単な新規な方法を得ることにあ
る。

［従来の技術とその問題点］ 水溶液、ミルクのような食品及び生物学的液体
のような液体の化学分析は望ましい又は必要なこ
とが多い。液体分析を容易にする種種の要素が知
られている。このような要素は、分析する物質
（被分析物）に対する分析試薬を含むことが多い。
試薬は、被分析物と反応すると、着色物質が生成
し又はその他の検知できる変化が生ずる。分析要
素はたとえば、紙又はその他の吸収性の強い担体
に前記の被分析物に対し化学的に反応性を持つ物
質を浸透させたPH試験条片及び同様な指示片を含
む。これ等の試験条片内の物質は、水素イオン又
はその他の被分析物を含む液体との接触に応答し
発色するか又は変色する。応答物質に従つてこの
変化は通常定性的に又はせいぜい半定量的に評価
される。

若干の分野では分析技術により迅速な定量成績
を得る必要のあることが多い。極く最近の開発作
業では、血液、血清、尿及び類似物のような体液
を含む生物学的液体の試験により高度に定量的な
成績を迅速簡便に生じなければならない、診断用
化学分析に有用な要素を提供するようにしてい
る。

化学溶液に適用する分析技術は化学実験室等で
とくに自動化分析の際に広く認められている。し
かしこのような技術は複雑な溶液−取扱い及び移
送能力を持つ分析装置を必要とする。たとえば米
国特許第2797149号明細書に記載してある種々の
『湿式化学』の分析装置は費用の高いことが多く
又熟練者を必要とする。

溶液化学に対する１変型として、『乾式』化学
分析のための種々の多重層の構成要素が提案され
ている。分析要素の説明にこの場合使つた『構
成』という用語は２重の又はそれ以上の各別の層
を含む要素のことである。使用条件のもとでこれ
等の層は実質的に密接に接触した状態に積層す
る。『乾式』分析では物質を貯え取扱うのに実質
的な便宜が得られるが、『乾式』分析の研究では
単に制限された成功度しか得られない。この分析
は主として定性試験用及び半定量試験用に使われ
ている。

多重層分析要素の１例が米国特許第3092465号
明細書に記載してある。このような多重層要素
は、１種類又は複数種類の試薬を含浸させた吸収
性繊維質担体を使う。これ等の要素は、半透膜を
被覆した発色剤を含んでいる。試験液体に接触す
ると、被分析物が当透膜を通過し繊維質担体内に
入る。この場合被分析物の濃度に関連した量の色
が生ずる。半透膜は、色の読みを妨げる赤血球の
ような若干の干渉成分の通過及び吸収を防ぐ。

吸収性繊維紙又はその他の繊維質媒体により液
体試料を受けて分析させる分析要素は臨床実験室
では一般的でない。おそらくこれはこれ等の要素
が高度に正確な定量成績を生ずることができない
からである。米国特許第3050373号明細書では繊
維紙のような吸収性材料の使用が提案されてい
る。溶液を含浸させる際に沈殿が生じてこれ等の
吸収性担体に試薬が均等に分析するのを妨げるこ
とがいわれている。又繊維質の吸収性材料を使う
要素は『しまの生成』と称する不均等が生じやす
い。このことは、要素の一部分たとえば加えた試
料の浸透した領域の周辺の方が高い価を生ずる試
験成績によつて例示される。このことは明らか
に、吸収性材料内の試料成分又は試薬の広範囲の
不均等な移行の結果である。このことは大体、こ
のような化学薬品の著しく局部化した濃度をもた
らすクロマトグラフイー効果による。ゼラチン及
びゼラチン状物質は含浸溶液の有用成分として米
国特許第3061523号及び同第3104209号の各明細書
に記載してある。このことは、これ等の物質が試
料の高い移行割合を拘束し従つて試験成績の均等
性を向上する明らかな能力による。しかし繊維質
の試薬含有吸収性母体内のゼラチン及びゼラチン
状物質はゼラチンを含まない一層吸収性母体のゼ
ラチン状物質はゼラチンを含まない一層吸収性の
強い吸収性母体に比べて試料吸上げの割合を減小
させる。このような減小した吸収作用により母体
に表面液体を残し、試験測定を行う前に母体を洗
浄し過剰分を除く必要がある。従つて吸収性母体
に含浸させようとするゼラチンの量に上限があ
る。このような性質は又米国特許第3526480号明
細書に記載してあるようにゼラチン（又は類似
の）物質だけから成る層に見られる。

自動化試験法に適した構成分析要素は又米国特
許第3368872号及び同第3526480号明細書に記載し
てある。このような記載は要素内のクロマトグラ
フイー効果（環形成、円部形成、ドーナツ形生成
又はしま生成と称することが多い）を避ける手段
についてのものである。これ等の効果は試薬を不
動にすることによつて避けられる。繊維質のろ紙
のような吸収性の試薬含有材料の代りに単純な多
孔膜を使うことが提案されている。しかし制御し
た時限にわたる試薬含浸材料内への拡散により被
分析物のような試料成分を分け取る（均等に受け
て希釈する）手段を使うことはこれ等の文献には
提案されていない。濃度計、比色計、ケイ光光度
計又はその他の読みにより定量試験の成績を得る
際には均等な希釈が極めて大切である。このこと
は、クロマトグラフイー効果により導入される不
均等性のような著しい不均等性が存在しないとき
にもいえる。

繊維質部片内の検出できる反応変化を計測する
ことはむずかしい。ろ紙のような多くの一般的な
試薬母体材料は不透明でこの母体材料の表面でし
か分析成績の検出ができない。この場合分析成績
の認識できる値及び範囲が減少し低濃度の被分析
物の測定がむずかしくなる。材料自体が計測する
光学信号に変化を生じないように透明な母体材料
を使うことが望ましい。

極く最近まで分析要素に関する分野では試料成
分（被分析物）を一様に受ける層については提案
が行われていない。実際上よく知られているよう
に使用する吸収性の又その他の繊維質材料（たと
えば吸収性のセルロース質ろ紙、ガラス繊維紙、
木材等）の構造上及び化学的な特性により試料成
分の一様な浸透が損われた。さらに繊維質材料の
選択により、その著しい光学的不均等性によつて
極めて正確な光学的測定値が無効になる。

仏国特許第2191734号及び米国特許第3992158号
の各明細書には新規な多重層分析要素について記
載してある。このような多重層要素は、液体試料
を受けこの試料を広い層に広げ一様な濃度の被分
析物が得られるようにする。被分析物の均等性に
より正確な分析成績が測定できる。仏国特許第
2191734号明細書に記載してある要素は、広い層
と反応性又は相互作用性の物質を含む試薬層とを
備えている。これ等の要素の均等な活動性により
これ等の層が測光により再現できる変化を促進す
る。

問題になる最近の特許には米国特許第398305
号、同第4042335号、同第4069016号及び同第
4069017号がある。これ等の各特許明細書には液
体中の成分の試薬含有基層母体への移行について
記載してある。しかし前記の各特許明細書では制
御した時限にわたりゲル体内に試料を拡散するこ
とにより試料の正確なアリコートを得る方法につ
いては記載してない。これ等の特許明細書では制
御した時限にわたりゲル媒体内の試薬に対し試料
を希釈し反応させる手段として拡散についても記
載してない。このようにさらに拡散することによ
り前記試料がこの試料と反応する過剰な試薬と一
様に確実に混合する。

［本発明による従来技術問題点の解決］ 本発明は、試料成分を制御した時限にわたりゲ
ル体内に拡散させることによりこの試料成分の正
確なアリコートを得てこれを希釈し分析する方法
に係わる。

又ゲルを使うことが考えられる。ゲルをたとえ
ば顕微鏡のスライドの寸法に近い小さな扁平な板
のくぼみ又は溜め内に適宜に装入する。このゲル
には与えられた化学試験用の試薬を含ませる。試
料からの成分（被分析物）を拡散作用によりゲル
内に次次に含浸させる。液体試料は前もつて用意
した硬化したゲル表面の所定の区域をおおうよう
にする。正確なアリコートは、比較的正確な選定
した時限にわたりゲル内に被分析物を拡散させる
ことにより得られる。液体試料の容積は正確に測
定しなくてもよい。この場合技術者が正確に計測
する必要がない。技術者によるこのような正確な
計測は多くの時間及び費用がかかるだけでなく又
手による試験手順で誤差を伴いやすい作業であ
る。使用試薬は、実際の必要性及び使用に先だつ
て（すなわち試料を加えるかなり前に）若干の適
宜な時間に自動化装置によりゲル系内に含ませ
る。

本発明方法の少くとも１つの実施例では定量分
析しようとする成分を含む液体試料はゲル表面上
に広げる。このゲルは与えられた試験用の試薬を
含む。試料容積はゲルの全表面又はその所定の部
分におおうのに充分なだけ大きくする。成分の少
なくとも一部分にこのゲルの仕切つた表面積を経
て拡散させるのに十分な時限後に、液体試料をた
とえば洗浄により除く。拡散法則の時間及び距離
間の関係によつて、ゲル表面に対する試料の露出
時間の計測の誤差から生ずる分析誤差は時間の平
方根に比例する。このような誤差は従つて、時間
誤差から生ずる普通の液体分析における分析誤差
より小さい。従つて本発明の意義は極めて重要で
ある。

別の実施例ではゲルに試薬を含ませる必要がな
い。たとえばヘモグロビン、ビリルビン又はその
他の光吸収物質は、分析前の試薬との反応を必要
としないで前記の方法により分析測定できる。こ
のような被分析物は公知の測光法により定量測定
ができる。

さらに本発明方法は、全血液、血清、血しよ
う、尿又はその他の生物学的液体に有効である。
試料は滴程度に小さくてよい。さらに本発明方法
は血液中の拡散性又は可溶性の成分の分析に使え
るから、全血液を使うことができる。ゲルの分子
構造によつて血球はゲル内に移行できない。従つ
て分析に先だつて血球から血清または血しようを
分離する必要がない。

問題の被分析物以外の試料成分は又液体試料か
らゲル内に拡散する。この拡散が起る際には、識
別できる反応のために選定する分析試薬は或る程
度注意して選ぶ。又ゲル内の適当な多孔寸法の装
入及び官能基の選択は、所望の成分の優先的拡散
が選択的に得られるようにする。分析試薬を前も
つてゲル内に含ませてある場合にゲル中の試薬の
濃度は均等になる。ゲルの表面から液体試料を除
いた後、前もつて選定した露出時間にわたりさら
に拡散が起る。この時間中にゲルの表面区域に導
入した成分はさらにゲル全体にわたり拡散する。
この場合被分析物は、ゲル内の試薬との完全な反
応を妨げる濃度より低い濃度に希釈することがで
きる。この希釈と同時に被分析物がゲル中の試薬
と反応する。従つて被分析物の正確な測定が、本
発明による方法により容積測定の従来知られてい
る無効性及び不便さを伴わないでタイミング操作
により得られる。

［本発明の作用］ 本発明は、試料の正確なアリコートを得てこれ
を希釈し試料中の被分析物を分析する新規な方法
を提供する。

本発明は又、血液成分の前分離を必要としない
で全血液を分析する方法を提供する。

本発明は又、血液試料のゲル媒体内への拡散後
に普通の洗浄工程を必要としないで全血液を分析
する方法を提供する。

［実施例］ 以下本発明分析方法の実施例を添付図面につい
て詳細に説明する。

第１図に示した実施例では支持体１１は扁平な
長方形の形状を持つている。支持体１１は、試薬
を含むゲル１３を満たした溜め１２を普通の方法
で形成してある。支持体１１はプラスチツク材又
はガラスから構成してある。寸法上の形状はあま
り重要ではないが、溜め１２は深さが0.1ないし
２mm、直径が５ないし20mmである。第１図及び第
２図に示した実施例では深さ１mm、直径８mmの溜
め１２を使う。溜め１２は一般に、適当な光度計
又は分光光度計の光ビームにゲルが交さする位置
で支持体１１上に中心を持つ。ゲル１３は溜め１
２を表面まで満たし供給液体試料に十分接触する
ようにするのがよい。たとえば１滴の試料１４を
利用するときは、この滴は溜め１２を囲む支持体
１１の環状部分に重ならなければならない。溜め
１２をゲル１３で一ぱいに満たす必要のあること
は、補助担体により試料を加えるときにはなお一
層重要である。たとえば液体試料は毛管作用ウエ
ブに含ませてもよい。このようなウエブはこの場
合ゲルの表面に向き合わせに接触させる。試料の
一部たとえば被分析物は、試料を含む毛管作用ウ
エブから直接ゲル内に拡散する。所定の時限後に
ゲルの表面からウエブを取りのぞく。ゲルの一部
に浸透した被分析物は定温時限中にさらに拡散さ
せる。この定温時限の終りにゲルは普通の手段で
分析する。

第３図、第４図及び第５図に示した実施例では
支持体１５はその一方の表面にＵ字状のくぼみ１
６を形成してある。くぼみ１６の広い方の端部は
支持体１５の端部に開口している。この実施例の
構造は大量生産に滴している。このことは複数個
の同様な各支持体の主開口面を感圧接着テープ１
７で密封しくぼみ１６の端部は開いた状態にする
ことによつてできる。この開いた部分を経てゲル
１３をくぼみ１６内に装入する。ゲル１３は硬化
させ、次いで接着テープ１７の残りの自由な部分
を支持体１５の端部のまわりに巻付けくぼみ１６
の残りの部分を密封する。この実施例では所定の
時限にわたり試料内に浸すように液量計としてこ
の装置を使う。テープ１７は使用に先だつて除
く。次いでこの液量計を液体試料中に、ゲル媒体
の比較的浅い表面積だけに試料被分析物を拡散さ
せるのに十分短い所定の時限にわたり浸す。ゲル
は通常、その中に前以つて捺入れた試薬を含む。
被分析物はこれが拡散する際に試薬と反応する。
反応物の比率は反応が確実に終るようにすなわち
被分析物より試薬が多いように選定する。この反
応は通常の方法により監視することができる。

第６図は第３図、第４図及び第５図に示した実
施例に類似な実施例を示す。しかし複数個のくぼ
み２０を形成し複数種類の試験又は評価分析が単
一の支持体１９で行われるようにしてある。

前記した説明でこの種の装置は、溜め又は少な
くとも或る種のくぼみを形成した基板であつた。
本発明の範囲で実際上、液量計を又特別に作つた
テープロールから構成するようにしてある。従つ
てこのような構造を第９図について述べる。初め
に細長い透明なテープに少なくとも一方の表面に
ゲルを被覆する。取扱いのためには或る程度のた
わみ性が望ましいが、このゲルを硬化させる。こ
のゲルは従来のようにすなわち試料内の被分析物
との反応を生ずるのに使う試薬を装入する。

得られるテープは第９図に展開して示すように
適当な複合長さ５０に切断する。ゲル５１を上向
きにすると共にテープ基層５２を下側に位置させ
る。基層５２はその下側に或る量の接着剤を被覆
してある。この複合テープは、長さ５０より相対
的に長いかなり剛性の高いプラスチツク材製支持
体５３に固着する。延長した部分は取手５４を備
えている。取手５４によりこの液量計を前記した
ように或量の液体試料内に装入する。

さらに第９図に示したテープは、各部分を切断
しないようにして使うが自動化分析装置ではロー
ル全体を使う。従つて第１０図に示すように右か
ら左に見ると、ゲルテープ６０は送りリール６１
から巻きほぐれ矢印により示した径路に沿い水平
に移動する。テープ６０は試料付与場所６２を通
る。付与場所６２では各別の液体試料を滴下す
る。テープ６０の径路及び移動速度は、ゲルの表
面区域に短い深さにわたつて十分な拡散が起るよ
うにしてある。場所６３では残りの液体試料は当
業界にはよく知られている適当な手段により手早
く洗い去る。次の場所６４ではテープ６０を定温
処理し前記したようにさらに拡散させる。次いで
テープ６０は測定場所６５に送る。測定場所６５
では反応区域を普通の方法で光学的に読取る。次
いでテープ６０は巻取りリール６６によりふたた
び巻取る。

前記実施例ではテープ基層は、ポリエチレンテ
レフタレート（マイラー）、ポリエチレン、ポリ
プロピレン、メチル−メタクリレート（ルーサイ
ト）等のような複数種類のよく知られている透明
なプラスチツク材の任意のものでよい。

第１１図にはなお別の自動化学分析装置を示し
てある。この場合にもゲルテープ６０をリール６
１に取付ける。この実施例では試料滴はゲルテー
プ６０に直接には加えない。水透過性ウエブ６８
を巻いた第２の供給リール６７を使う。ウエブ６
８はセルロース、ナイロン又は透析膜として通常
使う材料から成つている。ウエブ６８はリール６
７から試料付与場所６９を横切る径路に沿つて放
出する。試料付与場所６９は試料滴をウエブ６８
に送出す。試料滴は拡散又は手管作用によりウエ
ブ６８に浸透して位置７０でウエブ６８が接触す
るとその下側を経て試料でゲルテープ６０を湿ら
せる。ウエブ６８からゲルテープ６０に試料を拡
散させるには十分な時限が必要である。ウエブ６
８及びテープ６０が互いに分れた後、ウエブ６８
は巻取りリール７１に巻取る。この間にテープ６
０はその径路（矢印により示してある）に沿い定
温器６４に移動し続ける。次いでテープ６０は分
析のために測定場所６５に前進させる。最後にテ
ープ６０は巻取りリール６６に巻取る。

本発明が種種の臨床化学分析を行う考え方につ
いてのものであるのは明らかである。第１０図及
び第１１図の前記した装置では説明は複数種類の
試料について同じ分析を行うことに関するもので
あつた。第１２図には複数種類の試料について分
析を行うだけでなく又複数種類たとえば３種類の
互いに異なる臨床化学分析を行う装置を示してあ
る。このことはたとえばマイラー又はセロフアン
から成る細長いテープ７５を使うことにより実施
できる。第１２図に示した実施例は部分図であ
る。第９図の液量計構造と同様な１連の小片（チ
ツプ）７６を用意する。この場合のゲルテープは
小片７６として設ける。各小片７６はテープ７５
に互いに間隔を隔てた関係に接着する。第１列の
小片７６はすべてたとえばアルブミン分析に使
う。第２列の小片７６はすべてたとえばグルコー
ス分析のために使う。最後に第３列の小片７６は
乳酸脱水素酵素（LDH）分析に使う。

又１連の小片７６は第１０図及び第１１図のテ
ープ６０に設けて互いに異なる化学分析テープ６
０に加える次次の各試料に関して行えるようにす
ることができるのは明らかである。このような場
合には測定場所６５は、各試料に関係的に相関す
るように対応する各小片で得られる反応成績を分
析するようにしてある。

前記の装置では１連の各別の小片７６を示して
ある。又小片７６は断続的にしないで互いに平行
な細長い条片すなわち所望に応じ選定した各分析
に対し１条ずつの条片を使うようにしてもよい。

化学分析装置の直線性は信頼性のある性能の重
要な基準である。この直線性は１次の反応動力学
を意味し試験物質の濃度を容易に評価分析するこ
とができる。直線性を得るには過剰な試薬を使う
ことが必要なのはよく知られている。このことは
この場合２段処理で分析を行うことによりでき
る。

前記した装置の操作法を以下に述べる。ゲルの
表面と試料とを短い時限だけすなわち10ないし
60secの程度だけ互いに接触させる。次いでこの
試料を取除く。本発明者は実験の結果、このよう
にすることによつて試料被分析物がゲルの表面領
域内に拡散することを見出した。ここで被分析物
分子の浸透深さがゲルの厚みに対して小さくなる
ような条件を設定する。この条件の設定をそれ自
体は容易である。こうしてゲルの表面近くに被分
析物の溜めを生ずる。たとえば第７図は１％アガ
ロース上のアルブミンに対し20sec間の拡散形状
（ゲル媒質中の自由拡散）を示す線図である。
20sec間ではアルブミンの拡散の平均距離はゲル
内へ約0.05mmである。第８図の線図は、試料に対
する20secの露出に次いで5minの定温処理後にア
ルブミンの移動する距離を示す。

極めて有効にするには、ゲル内に被分析物がさ
らに拡散することがゲル表面との接触から試料液
体を除いた後に必要である。この拡散によつてゲ
ル中に試料を再分布することができる。この拡散
は、比較するならば溶液化学において既知希釈度
の試料物質を混合することに相当するといえる。
こうして試料はゲル中にわたり全部の点で、試験
するもとの試料内におけるよりも低い等しい濃度
で分布する。２段拡散処理のこの構成が普通の従
来の希釈法の代りになるのは明らかである。この
方法は又試料中の干渉物を希釈することにより分
析に対するこれ等の干渉物の影響を弱めるのに有
用である。さらに試料の希釈によつて試料と十分
に反応させるのに試薬の濃度が一層低くてよい。
このような有益な条件は被分析物濃度に対し直線
的な１次反応動力学及び校正曲線の設定のために
有利である。しかし前記したように反応の時間依
存性は、拡散の距離が時間の平方根関数であるか
ら直線的でない。すなわちゲルを液体試料に露出
する時間を計測する際の誤差は、時間の平方根だ
けに比例する一層小さい分析誤差を生ずる。

この説明で使つたようにゲルという用語は、相
互作用物質を分布するすなわち溶解し又は分散さ
せる母体に係わる。母体物質の選択は変更でき所
期の用途によるのはもちろんである。ゲル媒質に
対する望ましい母体物質は、ゼラチン、ゼラチン
誘導体、親水性セルロース誘導体、デキストラン
のような多糖類、アラビアゴム、アガロース及び
類似物のような天然産物質と、又ポリ（ビニルア
ルコール）及びポリ（ビニルピロリドン）のよう
な水溶性ポリビニル化合物とアクリルアミド重合
体等とのような合成物質とを含む親水性物質を含
む。

本発明にはどのような分析手順も適合すること
ができる。本発明方法は、グルコース、血液尿
素、窒素、尿酸、アルブミン、クレアチニン、ビ
リルビン、りん酸塩、全たんぱく質、アミラー
ゼ、カルシウム等のような普通の血液化学剤にと
くに適しているが、周期的に行われる多くの分析
試験は本発明により自動的に行うことができる。

本発明の実施に有用な種種の実施例及び装置の
作用について述べたが、さらに分析の実施に関す
る若干の例を述べる。

例 １ 乳酸脱水素（LDH）の分析のための１装置例
では、6.0ｍＭのニコチンアデニンジヌクレオチ
ドと100ｍＭの乳酸リチウムと１重量％のアガロ
ースと0.7MでPH9.0に緩衝したAMPとを含む水
溶液から１mmの厚みのゲルを調合する。このゲル
を、種種の既知濃度のLDHを含む試験溶液に
1min露出した。次いでこのゲルの340nｍの波長
における吸収の変化を測定すると、露出処理後３
ないし5minにわたつて変化した。5min後の吸収
変化は、第１３図に示すように、700単位／mlま
でのLDH濃度に対し、比例関係にあることが分
つた。従つて本例の場合は第１の時限1minに対
して第２の時限5minの組合わせは適当である。

例 ２ 第２例の装置ではグルコースの分析を行う。４
−クロル−１−ナフトール（0.006％）グルコー
スオキシターゼ（120000単位／ml）とペルオキシ
ターゼ（170000単位／ml）とりん酸塩緩衝塩類
（0.1M、PH7.0）とアガロース（１％）とを含む
１mmの厚みのゲルを調合した。このゲルを、400
mg／dlまでの種種の既知濃度のグルコースを含む
試験溶液に15sec露出し、次いで10min定温処理
した。処理後のゲルについて、540nｍの波長に
おける吸収の変化を測定すると、第１４図に示す
ように、400mg／dlまでのグルコース濃度に対し、
比較関係にあることが分つた。従つて本例の場
合、第１の時限15secに対して第２の時限10min
は適当な組合わせである。

例 ３ 例１及び例２と同様にしてアルブミンの分析を
行う第３の例の装置を、１％アガロース中の0.5
％ブリジ35とPH4.2のこはく酸遠緩衝液中のブロ
ムクレゾールグリーン（32mg／100ml）から作つ
た。630nｍの波長における吸収変化を測定した
結果、アルブミン溶液に対する露出時間（すなわ
ち第１の時限）は20secでよく、その後の定温処
理時間（すなわち第２の時限）は10minでよいこ
と、そして第１５図に示すように、±２ないし３
％の精度で、吸収の変化は０ないし５ｇ／dlのア
ルブミン濃度に対し比較関係にあることが分つ
た。定温処理を10min以上行つても吸収はそれ以
上変化しない。アルブミンは分子が大きいが、ゲ
ルの孔寸法はアルブミン分子が容易に入れるだけ
十分に容易に大きくすることができる。

以上本発明をその実施例について詳細に説明し
たが本発明はその精神を逸脱することなく種種の
変化変型を行い得ることは云うまでもない。

［本発明の効果］ こうして本発明により簡単正確に試料のアリコ
ートを得てこれを希釈分析することが可能となつ
た。

【図面の簡単な説明】

第１図は本発明方法を実施する分析装置の１実
施例の斜視図、第２図は第１図の分析装置に試料
滴を加えた場合にその２−２線に沿う断面図であ
る。第３図は本分析装置の他の実施例をその充て
んしようとするくぼみ部分にたわみ性カバーを設
けて示す斜視図、第４図は第３図の実施例のくぼ
みに試薬含有ゲルを充てんし透明なテープで密閉
して示す斜視図、第５図は第３図及び第４図をそ
の透明テープを引きはがして示す斜視図である。
第６図は本分析装置のさらに別の実施例の斜視
図、第７図は試料の被分析物がゲルに浸透する状
態を示す線図、第８図は定温処理後のゲル内への
被分析物の浸透を示す線図である。第９図は本分
析装置の液量計形の実施例の斜視図、第１０図は
本発明方法を実施する自動化分析装置の１実施例
の線図的配置図、第１１図は本自動化分析装置の
他の実施例の線図的配置図である。第１２図は本
分析装置のさらに別の実施例の部分斜視図であ
る。第１３図はLDH分析を示す線図、第１４図
はグルコース分析を示す線図、第１５図はアルブ
ミン分析を示す線図である。 １１……支持体、１３……ゲル、１４……試
料、６０……ゲルテープ、６１……ゲルテープ送
りリール６１、６２……試料付与場所、６５……
測定場所、６６……ゲルテープ巻取りリール。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ (a) 被分析物を含む試料を該試料中の該被分
   析物と反応する試薬を含むゲル体の所定の表面
   積と接触させ、 (b) 該試料の少なくとも一部分を前記ゲル体内に
   第１の時限にわたり拡散移行させることによつ
   て、該被分析物の少なくとも一部分を、このゲ
   ル体内の前記試薬の全量と反応するために必要
   な量より少ない量で、前記ゲル体内に拡散移行
   させた後に、前記ゲル体の表面から試料の拡散
   していない部分を分離し、 (c) この被分析物拡散移行部分を前記ゲル体を経
   て第２の時限にわたりさらに拡散させ所望の程
   度に希釈し前記試薬と十分に反応させ、そして (d) 前記反応の程度を測定する ことから成る、試料の分析方法。 ２ 被分析物をゲル体内の１種類より多い試薬と
   反応させる前項１に記載の方法。 ３ 試料の拡散していない部分をゲル体の表面か
   ら洗浄除去する前項１に記載の方法。 ４ 試料として全血液を使う前項１に記載の方
   法。 ５ 被分析物が生物学的試料の少なくとも１成分
   である前項１に記載の方法。 ６ ゲル体としてヒドロコロイドを使う前項１に
   記載の方法。 ７ 測定工程(d)において、被分析物を光度計によ
   り測定する前項１に記載の方法。 ８ 拡散工程(b)において、試料を担体上に保持
   し、そしてこの保持した試料を第１の時限中にゲ
   ル体に接触させる前項１に記載の方法。 ９ 担体として多孔質の媒体を使い、拡散工程(b)
   においてこのような担体に試料を含浸させる前項
   ８に記載の方法。 １０ ゲル体として透明なものを使い、測定工程
   (d)において前記ゲル体内の反応を測定する前項１
   に記載の方法。 １１ 接触工程(a)において、ゲル体の所定の表面
   積に重なるように試料を分与する前項１に記載の
   方法。 １２ 被分析物として触媒を使い、測定工程(d)に
   おいて反応速度を測定する前項１に記載の方法。 １３ 被分析物として酵素を使う前項１２に記載
   の方法。