JPH0231625A - 果実、種子及びハイブリツドトマトの製造方法 - Google Patents
果実、種子及びハイブリツドトマトの製造方法Info
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- JPH0231625A JPH0231625A JP1116213A JP11621389A JPH0231625A JP H0231625 A JPH0231625 A JP H0231625A JP 1116213 A JP1116213 A JP 1116213A JP 11621389 A JP11621389 A JP 11621389A JP H0231625 A JPH0231625 A JP H0231625A
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
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Description
【発明の詳細な説明】
本発明は新規な果実及び種子に関する。特に本発明は天
然のトマト植物の遺伝学的変性により製造される新規な
トマトの果実及び種子に関する。
然のトマト植物の遺伝学的変性により製造される新規な
トマトの果実及び種子に関する。
本出願人のヨーロッパ特許出題第８７３０９８５３．７
号明細書（公開番号２７１９８８号）において、本出願
人は果実柔軟化酵素けｒｕｉｔ−ｓｏｆｔｅｎｉｎｇ
ｅｎｚｙｍｅｌをエンコード（ｅｎｃｏｄｅ）するＲＮ
Ａに対して相補的なＲＮＡを発現する（ｅｘｐｒｅｓｓ
）ことができるＤＮＡ構築物（ｃｏｎｓｔｒｕｃｔ）を
包含させることにより遺伝学的に変性した植物、特に、
トマト植物を開示した。
号明細書（公開番号２７１９８８号）において、本出願
人は果実柔軟化酵素けｒｕｉｔ−ｓｏｆｔｅｎｉｎｇ
ｅｎｚｙｍｅｌをエンコード（ｅｎｃｏｄｅ）するＲＮ
Ａに対して相補的なＲＮＡを発現する（ｅｘｐｒｅｓｓ
）ことができるＤＮＡ構築物（ｃｏｎｓｔｒｕｃｔ）を
包含させることにより遺伝学的に変性した植物、特に、
トマト植物を開示した。
今般、本発明者らはかかるトマト植物から果実と稔性（
ｆｅｒｔｉｌｅ１種子を製造し得ることを認めた。更に
、かかる植物の自己増殖された後代（θｓｌｆθｄ、
ｐｒｏｇｅｎｙ ｌ としての果実は驚くべき性質を示
すことを認めた；このような性質としては上記果実柔軟
化酵素に対しての予想外に大きい水準の抑制効果が挙げ
られ得る。
ｆｅｒｔｉｌｅ１種子を製造し得ることを認めた。更に
、かかる植物の自己増殖された後代（θｓｌｆθｄ、
ｐｒｏｇｅｎｙ ｌ としての果実は驚くべき性質を示
すことを認めた；このような性質としては上記果実柔軟
化酵素に対しての予想外に大きい水準の抑制効果が挙げ
られ得る。
本発明によれば、植物のゲノム中に、果実熟化酵素（ｆ
ｒｕｉｔ−ｒｉｐｅｎｉｎｇ ｅｎｚｙｍｅ）を生成す
るＲＮＡに対して相補的なアンチセンスＲＮＡ（ａｎｔ
ｉｓｅｎｓｅ ＲＮＡＩを生成することができるＤＮＡ
を存在させることにより得られる、１種又はそれ以上の
果実熟化酵素の発現（ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ）の水準を
減少させた果実、特にトマトの果実が提供される。かか
る果実熟化酵素は果実柔軟化酵素、例えば細胞壁柔軟化
酵素であることが好ましい０本発明によれば、更に、上
記の果実から誘導される稔性種子が提供される；この種
子を播種し、栽培することにより同様な性質を有する果
実を製造し得る。
ｒｕｉｔ−ｒｉｐｅｎｉｎｇ ｅｎｚｙｍｅ）を生成す
るＲＮＡに対して相補的なアンチセンスＲＮＡ（ａｎｔ
ｉｓｅｎｓｅ ＲＮＡＩを生成することができるＤＮＡ
を存在させることにより得られる、１種又はそれ以上の
果実熟化酵素の発現（ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ）の水準を
減少させた果実、特にトマトの果実が提供される。かか
る果実熟化酵素は果実柔軟化酵素、例えば細胞壁柔軟化
酵素であることが好ましい０本発明によれば、更に、上
記の果実から誘導される稔性種子が提供される；この種
子を播種し、栽培することにより同様な性質を有する果
実を製造し得る。
本発明による果実はヨーロッパ特許出願第８７３０９８
５３、７号明細書に開示されるトマト植物を慣用の方法
を使用して生長させ、収穫することにより得ることがで
きる。
５３、７号明細書に開示されるトマト植物を慣用の方法
を使用して生長させ、収穫することにより得ることがで
きる。
既知のトマト植物の遺伝子操作によりかかる植物を製造
する方法は前記ヨーロッパ特許出願公開第２７１９８８
号明細書及び米国特許出願第１１９６１４号明細書に詳
細に記載されており、これらの特許出願において開示さ
れている事項は全体的に本明細書中で参照されている。
する方法は前記ヨーロッパ特許出願公開第２７１９８８
号明細書及び米国特許出願第１１９６１４号明細書に詳
細に記載されており、これらの特許出願において開示さ
れている事項は全体的に本明細書中で参照されている。
かかる植物を得るのに好都合な方法は本発明に従ってト
マトの果実から得られた種子を生長させることである５
本出願人はかかる種子の試料をＮａｔｉｏｎａｌ Ｃｏ
１１ｅｃｔｉｏｎｓ ｏｆ Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ ａ
ｎｄＭａｒｉｎｅ Ｂａｃｔｅｒｉａ （以下、ＮＣ
ＩＭＢと称する）（Ｔｏｒｒｙ Ｒｅ５ｅａｒｃｈ ５
ｔａｔｉｏｎ ＰＯＢｏｘ ３１，１３５．Ａｂｂｅｙ
Ｒｏａｄ、Ａｂｅｒｄｅｅｎ ＡＢ ９８ＤＧ、５ｃｏ
ｔｌａｎｄ）に寄託番号４００１５及び４０１３４とし
て寄託した。
マトの果実から得られた種子を生長させることである５
本出願人はかかる種子の試料をＮａｔｉｏｎａｌ Ｃｏ
１１ｅｃｔｉｏｎｓ ｏｆ Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ ａ
ｎｄＭａｒｉｎｅ Ｂａｃｔｅｒｉａ （以下、ＮＣ
ＩＭＢと称する）（Ｔｏｒｒｙ Ｒｅ５ｅａｒｃｈ ５
ｔａｔｉｏｎ ＰＯＢｏｘ ３１，１３５．Ａｂｂｅｙ
Ｒｏａｄ、Ａｂｅｒｄｅｅｎ ＡＢ ９８ＤＧ、５ｃｏ
ｔｌａｎｄ）に寄託番号４００１５及び４０１３４とし
て寄託した。
果実の成熟は複雑な生物学的及び生化学的プロセスであ
る。この果実の成熟においては、人間が消費する場合に
重要な所望の性質及びかかる消費のために行われる工業
的な加工において重要な所望の性質を果実に付与するの
に必要な、特定の遺伝子の活性化が必要である。トマト
の場合、最終製品としての成熟果実の特徴は良好な、濃
厚なかつ均一な色が生じていること、特殊な芳香成分を
有すること及び所定の最終用途（収穫直後の消費又は工
業的加工を行った後での消費）に適切な感触（又は手触
り） （ｔｅｘｔｕｒｅｌ を有することである。生化
学的な関係から見た場合、これらの性質は色を生じさせ
るための、クロロフィルの破壊とリフベンβ−カロチン
の合成とを行う酵素の作用；リポキシゲナーゼ（ｌｙｐ
ｏｘｙｇｅｎａｓｅｌによる芳香成分の合成：水と無機
質成分のバランスを保持する酵素及びビタミンの産生を
制御する酵素の合成：及び本発明の目的に対して最も重
要な、果実の柔軟化を行う細胞壁分解酵素の生成：によ
り付与される。
る。この果実の成熟においては、人間が消費する場合に
重要な所望の性質及びかかる消費のために行われる工業
的な加工において重要な所望の性質を果実に付与するの
に必要な、特定の遺伝子の活性化が必要である。トマト
の場合、最終製品としての成熟果実の特徴は良好な、濃
厚なかつ均一な色が生じていること、特殊な芳香成分を
有すること及び所定の最終用途（収穫直後の消費又は工
業的加工を行った後での消費）に適切な感触（又は手触
り） （ｔｅｘｔｕｒｅｌ を有することである。生化
学的な関係から見た場合、これらの性質は色を生じさせ
るための、クロロフィルの破壊とリフベンβ−カロチン
の合成とを行う酵素の作用；リポキシゲナーゼ（ｌｙｐ
ｏｘｙｇｅｎａｓｅｌによる芳香成分の合成：水と無機
質成分のバランスを保持する酵素及びビタミンの産生を
制御する酵素の合成：及び本発明の目的に対して最も重
要な、果実の柔軟化を行う細胞壁分解酵素の生成：によ
り付与される。
本発明による好ましい果実においてはポリガラクツロナ
ーゼ遺伝子又はペクチンメチルエステラーゼ遺伝子又は
これらの両者の発現の減少が認められる。このような結
果はゲノム中に遺伝子の一方又は両者に対するアンチセ
ンス構築物（ａｎｔｉｓｅｎｓｅ ｃｏｎｓｔｒｕｃｔ
）の１種又は数種を存在させることによって得ることが
できる。
ーゼ遺伝子又はペクチンメチルエステラーゼ遺伝子又は
これらの両者の発現の減少が認められる。このような結
果はゲノム中に遺伝子の一方又は両者に対するアンチセ
ンス構築物（ａｎｔｉｓｅｎｓｅ ｃｏｎｓｔｒｕｃｔ
）の１種又は数種を存在させることによって得ることが
できる。
ペクチンエステラーゼとポリガラクツロナーゼの両者は
果実の成熟時におけるペクチン質（ｐｅｃｔｉｃｌ細胞
壁物質の生化学的転換に関係する。
果実の成熟時におけるペクチン質（ｐｅｃｔｉｃｌ細胞
壁物質の生化学的転換に関係する。
ペクチンエステラーゼにより脱メチル化された（ｄｅｍ
ｅｔｈｙｌａｔｅｄ）ペクチンはポリガラクツロナーゼ
の基質（ｓｕｂｓｔｒａｔｅｌ であると考えられてい
る。
ｅｔｈｙｌａｔｅｄ）ペクチンはポリガラクツロナーゼ
の基質（ｓｕｂｓｔｒａｔｅｌ であると考えられてい
る。
つの仮説によれば、ポリガラクツロナーゼは成熟の初期
の段階ではペクチン質フラグメントを可溶化しそして成
熟の後期の段階ではペクチン質フラグメントの分子量を
低下させるとされている０本発明による果実においては
可溶化されたペクチンにおける分子量の低下が防止され
る。
の段階ではペクチン質フラグメントを可溶化しそして成
熟の後期の段階ではペクチン質フラグメントの分子量を
低下させるとされている０本発明による果実においては
可溶化されたペクチンにおける分子量の低下が防止され
る。
細胞壁の代謝、特に、果実の成熟時の細胞壁の分解に関
連し得る他の酵素としては下記のものが挙げられる；す
なわち、 キシラナーゼ；α−ガラクトシダーゼ；β−ガラクトシ
ダーゼ；セルロース（β−１，４−グルカナーゼ）；ペ
ルオキシダーゼ：へミセルラーゼイソペルオキシダーゼ
：グルコシダーゼ：マンノシダーゼ、アラビノシダーゼ
：β−フルクトフラノシダーゼ；トレハラーゼ；Ｂ−キ
シロシダーゼ：酸性ホスファターゼ：ラミナーゼ：β−
１，３−グルカナーゼ；カルシウム代謝を行う酵素：及
びアラビノフラノシダーゼ。
連し得る他の酵素としては下記のものが挙げられる；す
なわち、 キシラナーゼ；α−ガラクトシダーゼ；β−ガラクトシ
ダーゼ；セルロース（β−１，４−グルカナーゼ）；ペ
ルオキシダーゼ：へミセルラーゼイソペルオキシダーゼ
：グルコシダーゼ：マンノシダーゼ、アラビノシダーゼ
：β−フルクトフラノシダーゼ；トレハラーゼ；Ｂ−キ
シロシダーゼ：酸性ホスファターゼ：ラミナーゼ：β−
１，３−グルカナーゼ；カルシウム代謝を行う酵素：及
びアラビノフラノシダーゼ。
トマトの場合と同様に、これらの酵素あるいはその中の
あるものはトマト以外の他の果実、例λばイチゴ、メロ
ン、マクワウリ（ｃａｎｔａｌｏｕｐｌ 、コシヨウ及
びアボガドの果実の成熟においても活性であり得る。従
って本発明には前記の酵素の任意のものの発現の水準を
減少させた上記の果実も包含される。
あるものはトマト以外の他の果実、例λばイチゴ、メロ
ン、マクワウリ（ｃａｎｔａｌｏｕｐｌ 、コシヨウ及
びアボガドの果実の成熟においても活性であり得る。従
って本発明には前記の酵素の任意のものの発現の水準を
減少させた上記の果実も包含される。
予備試験の結果から、ポリガラクツロナーゼの発現の水
準を減少させた本発明のトマトは、果実柔軟化酵素の発
現の水準が通常の水準にある同様のトマトより、より長
い期間、硬さを保持していることが示されている。従っ
て、本発明のトマトについては植物上でより長い時間で
柔軟になり、収穫時により硬くそしてより長時間の貯蔵
寿命を有すること、また、病害に対する大きな抵抗性を
潜在的に有することが期待される。風味、香り及び色が
より十分に生ずる、より遅い時期に果実を収穫し得るこ
とは有用なことである。また、本発明の果実においては
固形分が増加しておりまた、ペクチン及び細胞壁成分が
変化しており、その結果、本発明のトマトは加工の面で
の利点を有する。この加工の面での利点としてはトマト
ピユーレを製造する際のエネルギーの節約、不溶性の固
形分の増加及びピユーレのゲル化品質と色の向上が挙げ
られる。
準を減少させた本発明のトマトは、果実柔軟化酵素の発
現の水準が通常の水準にある同様のトマトより、より長
い期間、硬さを保持していることが示されている。従っ
て、本発明のトマトについては植物上でより長い時間で
柔軟になり、収穫時により硬くそしてより長時間の貯蔵
寿命を有すること、また、病害に対する大きな抵抗性を
潜在的に有することが期待される。風味、香り及び色が
より十分に生ずる、より遅い時期に果実を収穫し得るこ
とは有用なことである。また、本発明の果実においては
固形分が増加しておりまた、ペクチン及び細胞壁成分が
変化しており、その結果、本発明のトマトは加工の面で
の利点を有する。この加工の面での利点としてはトマト
ピユーレを製造する際のエネルギーの節約、不溶性の固
形分の増加及びピユーレのゲル化品質と色の向上が挙げ
られる。
本発明の種子は本発明の果実から慣用の方法で得ること
がで、きる。例えばトマトの種子を成熟した果実の果肉
（ｐｕｌｐ）から分離し、ついで乾燥しそして１シーズ
ン又はそれ以上の期間貯蔵し得る。
がで、きる。例えばトマトの種子を成熟した果実の果肉
（ｐｕｌｐ）から分離し、ついで乾燥しそして１シーズ
ン又はそれ以上の期間貯蔵し得る。
本発明の果実は生のままで又は調理した後、すぐに消費
するために販売するか又は加工して缶詰にするか又はス
ープ、ソース又はペーストに変えることができる。同様
に、本発明の果実は本発明の種子を得るのに使用し得る
。
するために販売するか又は加工して缶詰にするか又はス
ープ、ソース又はペーストに変えることができる。同様
に、本発明の果実は本発明の種子を得るのに使用し得る
。
ヨーロッパ特許出願筒８７３０９８５３．７号明細書に
記載されるトマト植物はアンチセンス構築物についてペ
テロ接合性（ｈｅｔｅｒｏｚｙｇｏｕｓ）である。かか
る植物の自己受粉により得られる種子は、アンチセンス
構築物が単一のメンデル遺伝子（Ｍｅｎｄｅｌｉａｎｇ
ｅｎｅ）のように挙動しかつメンデルの法則に従って分
布している集団（ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ）である：例え
ば、かかる植物が上記アンチセンス構築物のコピーを１
個だけ含有している場合には、種子の２５％は上記構築
物のコピーを２個含有しており、種子の５０％は構築物
のコピーを１個含有しておりそして種子の２５％（を構
築物のコピーを全く含有していない、従って、ヨーロッ
パ特許出願筒８７３０９８５３、７号明細書による自己
増殖されたトマト植物（ｓｅｌｆｅｄ ｔｏｍａｔｏ
ｐｌａｎｔｌの後代（ｏｆｆｓｐｒｉｎｇｌの全てが本
発明の果実及び種子を生ずるものではなく、そして、本
発明の果実及び種子を生ずる上記トマト植物の後代は、
それ自体、上記の特定の性質についてペテロ接合性であ
るかホモ接合性で様の既知の果実に比べて、果実熟化酵
素の発現の水準が極めて低いこと、例えば５％又はそれ
以下であることを認めた。
記載されるトマト植物はアンチセンス構築物についてペ
テロ接合性（ｈｅｔｅｒｏｚｙｇｏｕｓ）である。かか
る植物の自己受粉により得られる種子は、アンチセンス
構築物が単一のメンデル遺伝子（Ｍｅｎｄｅｌｉａｎｇ
ｅｎｅ）のように挙動しかつメンデルの法則に従って分
布している集団（ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ）である：例え
ば、かかる植物が上記アンチセンス構築物のコピーを１
個だけ含有している場合には、種子の２５％は上記構築
物のコピーを２個含有しており、種子の５０％は構築物
のコピーを１個含有しておりそして種子の２５％（を構
築物のコピーを全く含有していない、従って、ヨーロッ
パ特許出願筒８７３０９８５３、７号明細書による自己
増殖されたトマト植物（ｓｅｌｆｅｄ ｔｏｍａｔｏ
ｐｌａｎｔｌの後代（ｏｆｆｓｐｒｉｎｇｌの全てが本
発明の果実及び種子を生ずるものではなく、そして、本
発明の果実及び種子を生ずる上記トマト植物の後代は、
それ自体、上記の特定の性質についてペテロ接合性であ
るかホモ接合性で様の既知の果実に比べて、果実熟化酵
素の発現の水準が極めて低いこと、例えば５％又はそれ
以下であることを認めた。
アンチセンス構築物に対してホモ接合性である種子の系
統（ｓｔａｃｋ）を持続させることが好ましい、かかる
種子の系統の交雑物（ｃｒｏｓｓ）の全てはアンチセン
ス構築物のコピーを少なくとも１個含有しており、そし
て自己受粉により生じた後代（ｓｅｌｆ−ｆｅｒｔｉｌ
ｉｚｅｄ ｐｒｏｇｅｎｙ）は２個のコピーを含有して
いるであろう：すなわち、その特性（ｃｈａｒａｃｔｅ
ｒ）に関してホモ接合性であろう、かかるホモ接合性の
種子系統は市販するためのへテロ接合性の種子を製造す
るためのＦｌ交雑（Ｆｌ ｃｒｏｓｓ）において一方の
耕種子（ｐａｒｅｎｔｌとして通常使用し得る。かかる
種子及びこれから得られる果実は本発明の別の要旨を形
成する１本発明によれば異るアンチセンス構築物を有す
る１種又はそれ以上の植物を形質転換しそして得られた
系統（ｌｉｎｅｌの後代を交雑させることにより、２種
又はそれ以上の果実熟成化酵素の発現の水準の減少をも
たらす２個又はそれ以上のアンチセンス構築物を含有す
る植物の種子を得ることができる。
統（ｓｔａｃｋ）を持続させることが好ましい、かかる
種子の系統の交雑物（ｃｒｏｓｓ）の全てはアンチセン
ス構築物のコピーを少なくとも１個含有しており、そし
て自己受粉により生じた後代（ｓｅｌｆ−ｆｅｒｔｉｌ
ｉｚｅｄ ｐｒｏｇｅｎｙ）は２個のコピーを含有して
いるであろう：すなわち、その特性（ｃｈａｒａｃｔｅ
ｒ）に関してホモ接合性であろう、かかるホモ接合性の
種子系統は市販するためのへテロ接合性の種子を製造す
るためのＦｌ交雑（Ｆｌ ｃｒｏｓｓ）において一方の
耕種子（ｐａｒｅｎｔｌとして通常使用し得る。かかる
種子及びこれから得られる果実は本発明の別の要旨を形
成する１本発明によれば異るアンチセンス構築物を有す
る１種又はそれ以上の植物を形質転換しそして得られた
系統（ｌｉｎｅｌの後代を交雑させることにより、２種
又はそれ以上の果実熟成化酵素の発現の水準の減少をも
たらす２個又はそれ以上のアンチセンス構築物を含有す
る植物の種子を得ることができる。
以下に、本発明の実施例を示す。
支胤里ユ
ヨーロッパ特許筒８７３０９８５３．７号明細書の実施
例４０には、トマト植物のゲノム中に組込まれたＰＧア
ンチセンスベクターｐＪＲ１６Ａを含有するトマト植物
の製造が記載されている。この植物（ＧＲ１６と称する
：この植物はＬｉｃｏ ｅｒｓｉｃｏｎｅｓｃｕｌｅｎ
ｔｕｍ Ｍｉｌｌ ｃｖＡｉｌｓａ Ｃｒａｉｇから誘
導される〕を育成室内でトマトを生長させるのに適当な
条件下で生長させた。
例４０には、トマト植物のゲノム中に組込まれたＰＧア
ンチセンスベクターｐＪＲ１６Ａを含有するトマト植物
の製造が記載されている。この植物（ＧＲ１６と称する
：この植物はＬｉｃｏ ｅｒｓｉｃｏｎｅｓｃｕｌｅｎ
ｔｕｍ Ｍｉｌｌ ｃｖＡｉｌｓａ Ｃｒａｉｇから誘
導される〕を育成室内でトマトを生長させるのに適当な
条件下で生長させた。
花を自己受粉させ、得られた１５個の果実を採集した。
これらの果実についてＧ、Ａ、Ｔｕｃｋｅｒ、 Ｎ、Ｇ
。
。
Ｒｏｂｅｒｔｓｏｎ及びり、 Ｇｒｉｅｒｓｏｎの方法
（”ＥｕｒｏｐｅａｎＪｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｃ
ｈｅｍｉｓｔｒｙ 、 １１２．第１１９−１２４頁。
（”ＥｕｒｏｐｅａｎＪｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｃ
ｈｅｍｉｓｔｒｙ 、 １１２．第１１９−１２４頁。
１ｑａｏ参照）に従って分析を行った結果、ポリガラク
ツロナーゼ酵素の発現の水準が低く、同様の生育段階に
ある、対応の通常のトマトの果実における上記酵素の発
現の水準の約１０％であることが認められた。上記で得
た果実について硬さを試験した結果、成熟時を通じて硬
さが増加していることが示された。この果実中の種子を
果肉から分離し、空気中、室温（約２０’Ｃ）で乾燥さ
せついで褐色紙料筒に入れて室温でかつ乾燥した状態で
貯蔵した。得られた種子の約４００個をＮＣＩＭＢに寄
託番号４００１５で寄託した。
ツロナーゼ酵素の発現の水準が低く、同様の生育段階に
ある、対応の通常のトマトの果実における上記酵素の発
現の水準の約１０％であることが認められた。上記で得
た果実について硬さを試験した結果、成熟時を通じて硬
さが増加していることが示された。この果実中の種子を
果肉から分離し、空気中、室温（約２０’Ｃ）で乾燥さ
せついで褐色紙料筒に入れて室温でかつ乾燥した状態で
貯蔵した。得られた種子の約４００個をＮＣＩＭＢに寄
託番号４００１５で寄託した。
夫亘里ｌ
実施例１で製造した種子１２個を取り出し、植物の成熟
段階まで生長させそして自己受粉させた。
段階まで生長させそして自己受粉させた。
生長させた１２本のトマトの木の各々から植物組織を採
取し、ヨーロッパ特許出願第８７３０９８５３．７号明
細書の試験例４０に記載するごときサザン法（Ｓｏｕｔ
ｈｅｒｎ ｂｌｏｔ ａｎａｌｙｓｉｓｌに従って分析
を行った。ホモ接合性植物とへテロ接合性植物とが同定
された。ホモ接合性植物からの種子を捕集し、適当な標
識を付しそして後に使用するために貯蔵した。かかる植
物の一つの種子−ＧＲ１０５の符号で示す−をＮＣＩＭ
Ｂに寄託番号４０１３４で寄託した。 ＧＲ−１０５の
符号で示した植物の果実についてＧ、 Ａ。
取し、ヨーロッパ特許出願第８７３０９８５３．７号明
細書の試験例４０に記載するごときサザン法（Ｓｏｕｔ
ｈｅｒｎ ｂｌｏｔ ａｎａｌｙｓｉｓｌに従って分析
を行った。ホモ接合性植物とへテロ接合性植物とが同定
された。ホモ接合性植物からの種子を捕集し、適当な標
識を付しそして後に使用するために貯蔵した。かかる植
物の一つの種子−ＧＲ１０５の符号で示す−をＮＣＩＭ
Ｂに寄託番号４０１３４で寄託した。 ＧＲ−１０５の
符号で示した植物の果実についてＧ、 Ａ。
Ｔｕｃｋｅｒ、 Ｎ、 Ｇ、 Ｒｏｂｅｒｔｓｏｎ及び
り、Ｇｒｉｅｒｓｏｎの方法（’Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｊ
ｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ 、
１１２ 、第１１９−１２４頁、 １ｑａｏ６照）に従
って分析を行った結果、ポリガラクツロナーゼ酵素の発
現の水準は極めて低く、同様の生育段階にある、対応の
通常のトマトの果実における上記酵素の発現の水準の１
％以下であることが認められた。
り、Ｇｒｉｅｒｓｏｎの方法（’Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｊ
ｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ 、
１１２ 、第１１９−１２４頁、 １ｑａｏ６照）に従
って分析を行った結果、ポリガラクツロナーゼ酵素の発
現の水準は極めて低く、同様の生育段階にある、対応の
通常のトマトの果実における上記酵素の発現の水準の１
％以下であることが認められた。
ホモ接合性の種子を得るための別の方法はＧＲ１６又は
同様の形質転換細胞又はその後代を、形質転換されてい
ないＡ１１ｓａ Ｃｒａｉｇ種に戻し交雑（ｂａｃｋｃ
ｒｏｓｓｌすることであろう、ついで標準的な遺伝子分
析を行うことにより、アンチセンス構築物に対してホモ
接合性の耕種子の同定が可能である。
同様の形質転換細胞又はその後代を、形質転換されてい
ないＡ１１ｓａ Ｃｒａｉｇ種に戻し交雑（ｂａｃｋｃ
ｒｏｓｓｌすることであろう、ついで標準的な遺伝子分
析を行うことにより、アンチセンス構築物に対してホモ
接合性の耕種子の同定が可能である。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、植物のゲノム中に、果実熟化酵素を生成するＲＮＡ
に対して相補的なアンチセンスＲＮＡを生成することが
できるＤＮＡを存在させることにより得られる、１種又
はそれ以上の果実熟化酵素の発現の水準を減少させた果
実。 ２、イチゴ、メロン、マクワウリ、コショウ又はアボガ
ドである、請求項１記載の果実。 ３、果実熟化酵素はキシラナーゼ；α−ガラクトシダー
ゼ；β−ガラクトシダーゼ；セルロース（β−１，４−
グルカナーゼ）；ペルオキシダーゼ；ヘミセルラーゼ；
イソペルオキシダーゼ；グルコシダーゼ；マンノシダー
ゼ；アラビノシダーゼ；β−フルクトフラノシダーゼ；
トレハラーゼ；β−キシロシダーゼ；酸性ホスファター
ゼ；ラミナーゼ；β−１，３−グルカナーゼ；カルシウ
ム代謝を行う酵素；及びアラビノフラノシダーゼ；から
選ばれる、請求項１記載の果実。 ４、果実はトマトであり、酵素は果実柔軟化酵素である
、請求項１記載の果実。 ５、果実柔軟化酵素はポリガラクツロナーゼ又はペクチ
ンメチルエステラーゼである、請求項４記載のトマト。 ６、請求項１〜５のいずれかに記載の果実の種子。 ７、ＮＣＩＭＢに寄託番号４００１５で寄託されている
種子又はこの種子の後代の種子である、請求項６記載の
トマトの種子。 ８、少なくとも一方は果実柔軟化酵素のアンチセンス構
築物に対してホモ接合性である２種の親系列を交雑する
ことを特徴とする、請求項５記載のＦ１ハイブリッドト
マトの製造方法。 ９、一方の親系列はＮＣＩＭＢに寄託番号４０１３４で
寄託されている種子又はその後代の種子である、請求項
８記載の方法。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GB8811115.8 | 1988-05-11 | ||
| GB888811115A GB8811115D0 (en) | 1988-05-11 | 1988-05-11 | Tomatoes |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0231625A true JPH0231625A (ja) | 1990-02-01 |
Family
ID=10636705
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP1116213A Pending JPH0231625A (ja) | 1988-05-11 | 1989-05-11 | 果実、種子及びハイブリツドトマトの製造方法 |
Country Status (9)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0341885B1 (ja) |
| JP (1) | JPH0231625A (ja) |
| AT (1) | ATE126659T1 (ja) |
| AU (1) | AU628818B2 (ja) |
| CA (1) | CA1331837C (ja) |
| DE (1) | DE68923903T2 (ja) |
| ES (1) | ES2075047T3 (ja) |
| GB (1) | GB8811115D0 (ja) |
| GR (1) | GR3017208T3 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2007525144A (ja) * | 2003-07-14 | 2007-09-06 | カイズ リサーチ コーポレイション | 野菜軟化剤 |
Families Citing this family (23)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5296376A (en) * | 1986-11-04 | 1994-03-22 | Imperial Chemical Industries Plc | DNA, constructs, cells and plants derived therefrom |
| GB8927048D0 (en) * | 1989-11-30 | 1990-01-31 | Ici Plc | Dna,constructs,cells and plants derived therefrom |
| US5413937A (en) * | 1986-11-11 | 1995-05-09 | Zeneca Limited | DNA constructs containing segments from tomato polygalacturonase and pectin esterase genes |
| GB8923716D0 (en) * | 1989-10-20 | 1989-12-06 | Ici Plc | Dna,constructs,cells and plants derived therefrom |
| US5744364A (en) * | 1989-10-20 | 1998-04-28 | Zeneca Limited | PTOM36 constructs and tomato cells transformed therewith |
| GB8928179D0 (en) * | 1989-12-13 | 1990-02-14 | Ici Plc | Dna,constructs,cells and plants derived therefrom |
| US5168064A (en) * | 1990-04-20 | 1992-12-01 | The Regents Of The University Of California | Endo-1,4-β-glucanase gene and its use in plants |
| GB9009307D0 (en) * | 1990-04-25 | 1990-06-20 | Ici Plc | Dna,constructs,cells and plant derived therefrom |
| GB9021923D0 (en) * | 1990-10-09 | 1990-11-21 | Ici Plc | Dna,dna constructs,cells and plants derived therefrom |
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| EP0575518A1 (en) * | 1991-03-06 | 1993-12-29 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Methods and compositions for the selective inhibition of gene expression |
| GB9210273D0 (en) * | 1992-05-13 | 1992-07-01 | Ici Plc | Dna |
| CA2158473A1 (en) * | 1993-03-22 | 1994-09-29 | Umi Kalsom Abu-Bakar | Dna, dna constructs, cells and plants derived therefrom |
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