JPH02303427A

JPH02303427A - アスパラガス属植物の組織培養方法

Info

Publication number: JPH02303427A
Application number: JP12295789A
Authority: JP
Inventors: Yukimasa Hirata; 平田　行正; Rie Moriwaki; 森脇　理恵; Shigeru Takahashi; 滋高橋
Original assignee: Mitsui Petrochemical Industries Ltd
Current assignee: Mitsui Petrochemical Industries Ltd
Priority date: 1989-05-18
Filing date: 1989-05-18
Publication date: 1990-12-17

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】〔産業上の利用分野〕本発明はアスパラガス属植物の組織培養方法に関し、特
にアスパラガス属植物の苗の大量増殖に好適な組織培養
方法に関する。

〔従来の技術〕

アスパラガスの増殖は、従来、播種もしくは株分けによ
って行われてきた。アスパラガスは、雌Ｉｊ１異株であ
り、雄株の方が品質や栽培管理の点で良いとされており
、播種による増殖は、雌株の混入を招くことが知られて
いる。さらに、遺伝的に変異の大きな作物であるため、
株毎の収量及び品質の差異を招き、栽培主著しい問題と
なっている。

また、株分けによる増殖は多くの人手と長い年月を必要
とし、効率が非常に悪く、ウィルス病などが伝染してい
く危険性も非常に高い。

以上のような問題点を改善する目的で、近年、組織培養
による優良株クローンの大量増殖が注目されている０通
常、アスパラガスの大量増殖は、組織片を培養し、多量
の苗条（ｓｈｏｏｔ）を増殖させた後、各々を発根培地
に移植し、不定根の分化を経て幼苗となす。しかし、ア
スパラガスの組織培養による増殖は一般的に時間がかか
る上に、増殖率が低いという問題点がある。

以上のようなことから、効率よくアスパラガスの苗条を
増殖する方法の開発が待たれている。

〔発明が解決しようとする課題〕

本発明者らは従来のアスパラガスの組織培養方法には前
記した問題点のあることを認知した上で、従来法とは異
なる新規な方法によって＆Ｉｌ織培養してアスパラガス
の種苗を効率よく増殖する方法について検討した。

［課題を解決するための手段］その結果、本発明者らはアスパラガス属植物の組織また
は細胞に作用して増殖あるいは不定根の分化を促進する
培養方法を見出し、この培養方法によれば、アスパラガ
ス属植物の種苗を効率よく増殖できることを見出した。

すなわち、本発明によれば、溶存酸素濃度（ＤＯ）が９
　ｐｐｍ以上の液体培地を用い、組織培養することを特
徴とするアスパラガス属植物の組織培養方法が捉供され
る。

〔発明の詳細な説明〕

本発明の組織培養方法が適用できる植物はアスパラガス
属植物であり、具体的には食用アスパラガスであるＡｓ
ｐａｒａｇｕｓ　ｏｆｆｉｃＪｎａＢｓ　Ｌ、ｖａｒ、
ａＪｔｉｌ−ｉｓ　Ｌ、等があげられる。

本発明の組織培養方法では、上記アスパラガス属植物の
Ｍｌｔａ又は細胞を用いて組織培養を行う。

該組織として具体的には、胚、茎頂、茎、凝集、地下茎
またはその他の組織を例示することができる。また、細
胞としては、前記組織片を組織培養して得たカルス等の
培養細胞が例示できる。

本発明によってアスパラガスの組織又は細胞を組織培養
してアスパラガスの種苗を形成させるにあたって以下に
詳述する方法が採用される。

本発明に係わる組織培養方法では、溶存酸素濃度（ＤＯ
）が９ｐｐｍ以上の液体培地を用いて組織培養が行われ
る。

以下、本発明に係わるＤＯが９　ｐｐＬｎ以上の液体培
地を用いて組織培養する方法について詳述する。

本発明は液体培地中の溶存酸素濃度が９ｐｐｍ以上の条
件で培養することを特徴とするが、この場合の培地中の
溶存酸素濃度が９−２０ｐｐｒｎとなることが好ましい
。そのため本発明では通常の空気より高い濃度の酸素を
含有する気体を液体培地中に通気して培養を行う。この
場合の酸素含有気体としては酸素を単独に用いたり、酸
素、空気、窒素、二酸化炭素などのうちの２種類以上の
気体を混合した気体を用いることができる。本発明では
これらの気体中の酸素含有量は通常２２−１００νｏ１
％で、好ましくは２５−１００ｖｏ１％である。該気体
の液体培地中への通気速度としては、培養器の形状によ
って異なるが、一般に酸素移動容量係数（ＫＬａ）で表
示してＯ，ｌ　−３０程度となるような通気速度が好ま
しい。

本発明で使用される培地は、無機成分及び炭素源を必須
成分とし、これに植物ホルモン類、ビタミン類を添加し
、更に必要に応じてアミノ酸類を添加した培地である。

該培地の無機成分としては、窒素、リン、カリウム、ナ
トリウム、カルシウム、マグネシウム、イオウ、鉄、マ
ンガン、亜鉛、ホウ素、モリブデン、塩素、ヨウ素、コ
バルト等の元素を含む無機塩をあげることができ、具体
的には、硝酸カリウム、硝酸ナトリウム、硝酸アンモニ
ウム、塩化カリウム、塩化カルシウム、リン酸１水素カ
リウム、リン酸２水素ナトリウム、硫酸マグネシウム、
塩化マグネシウム、硫酸ナトリウム、硫酸第１鉄、硫酸
第２鉄、硫酸マンガン、硫ＭｔＲ、モリブデン酸ナトリ
ウム、二酸化モリブデン、ヨウ化カリウム、硫酸亜鉛、
ホウ酸、塩化コバルト等の化合物を例示できる。

該培地の炭素源としては、前記のシー！＠　（Ｓｕｃｒ
ｏｓｅ）などの炭水化物とその誘導体、脂肪酸などの有
機酸及びエタノール等の１級アルコールなどを例示でき
る。

該培地の植物ホルモンとしては、例えば、ナフタレン酢
酸（ＮＡＡ）、インドール酢酸（ＩＡＡ）、ｐ−クロロ
フェノキシ酢酸、２．４−ジクロロフェノキシ酢酸（２
，４−Ｄ）　、インドール酢酸（ＩＢＭ）、及びこれら
の誘導体等のオーキシン類及びヘンシルアデニン（ＢＡ
）、カイネチン、ゼアチン等のサイトカイニン類を例示
できる。

該培地のビタミン類としては、ビオチン、チアミン（ビ
タミンＢｌ）、ピリドキシン（ビタミンＢ、）、ピリド
キサール、ピリドキサミン、パントテン酸カルシウム、
アルコルビン酸（ビタミンＣ）、イノシトール、ニコチ
ン酸、ニコチン酸アミド及びリボフラビン（ビタミンＢ
、）などを例示できる。

該培地のアミノ酸類としては、例えばグリシン、アラニ
ン、グルタミン、システィン、フェニルアラニン及びリ
ジンなどを例示できる。

本発明の前記培地は、通常は、前記無機成分を約０．１
μＨないし約１００ｍＭ　、前記植物ホルモン類を約０
．０１■／ｌないし約１５０■／２及び前記アミノ酸類
をＯないし約１０００ｍｇ／ｆ含ませて使用されること
が望ましい。

本発明に係わる組織培養に用いられる前記培地として具
体的には、従来から知られている植物のＭ４微培養に用
いられている培地、例えば、ムラシゲ・スクーグ（’６
２）　［Ｍｕｒａｓｈｉｇｅ　＆　Ｓｋｏｏｇ］の培地
、リンスマイヤー・スクーグ（ＲＭ−１９６５）　［Ｌ
ｉｎｓｍａｉｅｒ＆　Ｓｋｏｏｇ］の培地、ホワイト（
’　６３）　　［Ｗｈ　ｉ　Ｌｅ　］の培地、ガンボル
グ［Ｇａｍｂｏｒｇ］の８−５培地、三井のト９培地、
ニッチ・エッチの培地［Ｎ１ｔｃｈ　＆　Ｎ１ｔｃｈ］
等に前記した炭素源及び植物ホルモンを添加し、更に必
要に応じて前記したビタミン類、アミノ酸類を添加して
調整された培地を例示できるが本発明ではこの中でも特
にニッチ・ニッチ、リンスマイヤー・スクーグ、ムラシ
ゲ・スクーグの培地を用いて調整される培地が好ましい
。上記した従来公知の培地の組成に関しては、例えば、
性向、中島、古谷著の「新植物組織培養ｊｐ３８６〜ｐ
３９１、朝倉書店、１９７９年に記載されている。本発
明で使用できる前記培地は液体培地又は例えば寒天やゲ
ルライトなどのゲル化剤を通常０．１〜２％含有させた
固形培地である。

本発明によれば、アスパラガス属植物のｔ、ｕｍ、細胞
を効率よく分化・増殖・生長させることができる。尚、
本発明で得られた植物は、通常の栽培を行うと、性質が
一定で健全な植物体に生長させることができる。

〔実施例］実施例１アスパラガスの品種“北海ｌＯＯ”の無菌系で維持して
いるシュートを節を含む長さ７〜１０胴に調整したもの
を材料とした。培地は、無機要素をＭＳ培地、有機要素
をエッチ・ニッチを基本とし、ＮＨａＮＯｉをη倍に、
ＣａＣｌ□を２倍とし、グルタミン１０−”Ｍを添加し
たものを基本培地（以後、ＡＳＰ培地と略記）とした。

これにシ：１糖６０ｇ／ＩＩ、　　ｐＨ５，８、オーキ
シンとしてＩＢ八を１０−’Ｍ　、サイトカイニンとし
てＢＡを３ＸＩＯ−７Ｍ　、抗ジベレリンとしてアンシ
ミドールを１０−”Ｍ添加した。

この液体培地５０ｄを入れた培養器（容量１５０ｄ）に
１容器あたり１０切片を１０個の容器に植え込んだ。

グラスフィルターをとりつけたガス通気管を培養器に装
着し、０．２２μｍの除菌フィルターを通過させた純酸
素を３ｍ１／分の速度でガス通気管を通して液体培地中
に吹き込み（酸素移動容量係数（ＫＬａ）は５．０）な
がら、２５゛Ｃ１３，０００１ｕｘの照度、１６時間日
長で３０日間培養した。培養中の培地中の平均溶存酸素
濃度は約４０ｐｐｍであった。

結果を表１に示す。

比較例１通気する気体を空気とする以外は実施例１と同様にして
行なった。酸素移動容量係数（ＫＬａ）は５．０、培養
中の培地の平均溶存酸素濃度は８．ｌｐｐｍであった。

結果を表１に示す。

表　　１〔発明の効果〕本発明に係わるＤＯ（溶存酸素濃度）が９ｐｐｍ以上の
液体培地を用いて組織培養する方法を用いれば、アスパ
ラガス属植物の組織及び細胞の分化・増殖・生長が著し
く促進されるので、これを経由して種苗を大量に増殖す
ることができる。従って、本発明方法によれば、アスパ
ラガス属植物の組織又は細胞から従来法に比べて効率よ
く高品質の植物体を大量に培養することができ、種苗を
大量に増殖することができる。

Claims

【特許請求の範囲】

アスパラガス属植物の組織又は細胞を溶存酸素濃度（Ｄ
Ｏ）が９ｐｐｍ以上の液体培地を用いて培養することを
特徴とするアスパラガス属植物の組織培養方法。