JPH02251A - マヌマイシン誘導体及びその製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、次の一般式■ （式中、Ｒ１ばＨまたばＯＨテあり：Ｒ２はＨ″または
ＯＨテあｌ：＞　：　Ｒ５はＨ，ＯＨ，ＯＣＨ３、ＣＨ
ｓまた＃ｉＮＨ，２であり：　Ｒ４ＦｉＨ，ＯＨ，ＯＣ
Ｈ３、ＮＨ２まのマヌマイシン誘導体に関する。

本発明は、また一般式Ｉの化合物の製造方法にも関し、
それは適当な栄養培地中で、次の式（式中Ｒ１はＨまた
ｔｉＯＨであシ：Ｒ２はＨまたはＯＨであり：Ｒ３はＨ
ｌｏＨ，ＯＣＨ３、ＣＨ３またはＮＨ２であシ：　Ｒ’
　ＦｉＨ１０Ｈｓ　ＯＣＨ３またはＮＨ２である） の置換された安息香酸の存在下で、菌株Ｓｔｒｅｐｔｏ
−ｍｙｃｅｓ　ｐａｒｖｕｌｕｓ　Ｔｉｉ　６４　（Ｄ
ＳＭ　４０７２２　）を発酵させることからなる。

一般式Ｉの化合物は、Ｆ、Ｂｕｚｚｅｔｔｉらによシ文
献に記載されていて（「Ｐｈａｒ、Ａｃｔａ、　Ｈｅ１
ｖ、　Ｊ　（１９６３）３８．８７１）　　その構造及
び絶対配置がＡ　、　Ｚｅｅａｋらにより決定されてい
る（　ｒ　Ｊ　、Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ　Ｊ　（１９
８７）４０．１５３０及び１５４９　）マヌマイシン（
式■）から誘導される。

マヌマイシンの中心ｍ　−０７Ｎスターターユニツトの
通常の生合成を防止するために、非生理学的量のその他
の０７プレ力−サー分子を、８ｔｒｅｐｔｏ−ｍｙｃｅ
ｓ　ｐａｒｖｕｌｕｓ　（ＤＳＭ　４０７２２　）の成
長の安定期に、培地へ加える。炭素及び窒素源の他に、
上記培養基は慣用の無機塩を含む。水と非混和性かまた
はほんのわずかに混和性の有機溶媒によって菌糸体を抽
出すると、有色の抽出物が得られ、それから脂肪親和性
の成分を除き、粗生成物をクロマトグラフィーによりｎ
Ｍした後には、−般式■の化合物が得られた。

（マヌマイシンの側鎖））の化合物を２０優強度のメタ
ノール性ＫＯＨで加水分解するととＫよシ、一般式ｌ　
（Ｒ４＝ＮＨ２）の化合物が得られる。

下記表Ｉの化合物（１）及び（２）は、Ａ、Ｚｅａａｋ
らによ〕文献記載（ｒＪ、Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ　Ｊ
　（１９８７）、４０．１５４１）されているような公
知の方法によってマヌマイシン（式Ｉｆ）を還元するこ
とによっても得ることができる。本発明者らは、一般式
■の化合物、特に下記表１中の化合物（１）、（２）、
（３）及び（５）が白血球エラスターゼを阻書すること
を発児した。

白血球エラスターゼは、１種の中性プロテアーゼであプ
、ヒト及び動物の体内で非常に広範囲の溶性で組織関連
のタンパク質の減成に影響を与えている。

しかし、制御なしのタンパク質分解によれば、重要な調
節タンツク質の減成が起こるので（例えば凝固及び補体
系）、生理的条件下では、生体は酵素と天然の阻害剤（
例えばα１−プロテアーゼ阻害剤、α２−マクログロブ
リン）のｆｌ１７）平衡を維持している。様々の病理的
状態において、白血球（好ましくは多形核頌粒性白血球
）からのエラスターぜの分泌が増加するか、または阻害
剤の放出が減少し、それによって重要な調節または組織
タンパク質の破壊が起こ）５る。

この病因による症候群は多く、シかも様々であり、種々
の器官及び組織に影響を与える。例えば、種々のショッ
ク状態（例えば敗血性のショック）、凝固系の障害、肺
の疾患例えば急性呼吸障害症候群（ＡＲＤＳ）及び肺気
型、外傷後及び術後の合併症、急性及び慢性の種々の炎
症、例えば慢性関節リュウマチ及びその他の膠原病があ
る。

さらに、腫瘍細胞から分泌されるエラスターゼは腫瘍の
転移及び侵襲性の成長１ｃｌｉ要な役割を果たし、−次
腫瘍を囲む基底膜を破壊し、その細胞間質を経る腫瘍細
胞の通過を助長する。

従って、エラスターゼ阻害剤の用途は、上記全ての疾患
において治療学士の利点がある。

以下、本発明を実施例によシさらに詳しく説明する。

実施例　１ ６４−ｍＡＢＡ　（上記表１中の化合物（３）の製造）
ａ）産生菌株の胞子の懸濁液の製造 隔壁入口を有する５００Ｍ容のエルレンマイキーフラス
コ中の栄養分溶液（＃母エキス４ｆ。

麦芽エキス１０２、グルコース４ｆ、生水１！、滅菌前
の−＝７．３）１００ｍｌに菌株ＤＳＭ　４０７２２を
植え付け、２８℃で７２時間２５０　ｒｐｍの回転攪拌
器上でインキュベートした。その後培養１２ＯＮを、上
記組成の栄養培養基を含み凝固のために１１当シ寒天２
０？を加えておいた５００ｍＪ容のＲｏｕｘフラスコへ
均一に分散し、次いで傾瀉した。この培養物を２８℃で
１０〜１４日間インキュベートした。この時よシ後に各
Ｒｏｗｘフラスコ中で産生された胞子を商業的に入手可
能な非イオン性界面活性剤１滴を含む脱イオン水５００
ｍ／ですすぎ、さらに直ちに用いるか、または−２２℃
で保存した。

ｂ）エルシンマイヤーフラスコ中の産生菌株の培養物ま
たは予備培養物の製造 ２チの脱脂大豆粉、２俤のマンニトール及び水を加えて
１００ゴとした栄養分溶液１００Ｍ（オートクレーブ前
の−＝７．５）を含む隔壁人口付キの５００７Ｍ容のエ
ルレンマイヤーフラスコに、傾斜管中で成長した培養物
または胞子懸濁液Ｑ、　２　ｍｌを植え付け、次いで２
８℃において２５０　ｒｐｍの攪拌器上にてインキュベ
ートした。

１０．２０．２５及び１００！の発酵槽への植え付けに
は、同じ栄′！ｉ溶液から得られた４８時間齢の液内培
養物（５係）で充分である。

Ｃ）発酵 １５！容の発酵器は以下のようにして操作する。１分当
り４！の空気を、インキュベーション温度２８℃で１分
当り２５０回転で培養液中を通過させた（培養基：脱脂
大豆粉２憾、マンニトール２チ、滅菌前に溶液の声をＮ
ａＯＨで７．５に調整）。泡の生成は、数滴のエタノー
ル性ポリオール溶液を繰り返し加えることによって抑え
ることができた。５０〜４５時間、好ましくは３６時間
後に、培養基１！当り３−アミノ安息香酸５５ｍｍｏｔ
（少量の水中に溶解したもの、声＝７）を加えた。さら
に３８時間後に、培養物を２ＭのＨＣｔによりｐＨ４，
５に調整し、１０分間Ｈｙｆｌｏ　Ｃｅ１ｉｔｅ　（５
０ｆ？／ｉ）を用いて攪拌し、次いで濾過した。濾過の
残留物をアセトンによシ（培養液１ｐ当り２５０ｍＡ）
３回抽出し、培養炉液を酢酸エチルによυ３回抽出し；
抽出物を濃縮した。水性−油性残留物を合わせ、クロロ
ホルムによシ４回抽出した（培養液１ｉ当り３０ｍ１　
）。溶媒蒸発後、合わせた有機相から油性の粗生成物が
得られ、水冷の石油エーテルで処理することによって凝
固した。暗茶色の無定形の粉末をセファデックスＬＨ−
２０カラム上で２回クロマトグラフィー処理した（　１
００　ｘ　２．５ｃＩｒＬ、展開及び溶離剤：　ＣＨＣ
ｌ５　）。次いでＲＰ　−ｓシリカゲルカラム上のクロ
マトグラフィー処理（アセトニトリル／水、３　：　１
　ｖ／ｖ　）をして、最適発酵後に、純粋な黄色無定形
の６４−ｍＡＢＡ（化合物（３））の培養ブロス１２３
ｗ１／Ａを得た。融点１９６〜１９７℃。

他の性質は下記の通シである。

〔α）：２＝−２１３°（ｃｍ［１１５ｃＨｃｔ５中）
ＩＲ（ＫＢｒ）　：　３４２０．３２６０１２９４０，
２９１０゜１６０５．１５７５　（ｓｈ）　１５３０及
び９９６　ｃｍ−’買スペクトル： λｍａ！（メタノール）　＝　３５１　（４０８００）
、２６３（２５１００）１３ｃ　、　ＩＨ−ＮＭＲ（２
００ＭＨｚ　、　ＣＤＣｌ２　）　：　ｃｍ１９７．４
（ｓ　。

Ｃ−１“）、１７４．３（Ｃ−３”）、１６８．７（ａ
、Ｃ−１’）、１６５．９（ｓ、Ｃ−１３）、１４４．
０（ｄ、Ｃ’−１１）、１４２．１（ｄ、Ｃ−５’）、
１４１．６（ｄ、Ｃ’−９）、１３８．９（ｄ、Ｃ−３
’）、１３８．８（ｓ、Ｃ−２）、１３７．４（ｓ、Ｃ
−４）、１３６．９（ｄ。

Ｃ−７）、１３０．２（ｄ、Ｃ−１０）、１３０．１（
ｓ、Ｃ−２’）、１２９．４（ｓ、ｃ−４０，１２９，
３（ｄ、Ｃ−６）、１２８．５（ｄ、Ｃ−８）、１２３
．ｏ（ａ、ｃ−５）、１２０．４（ｄ、Ｃ−１２）、１
２０．１（ｄ、Ｃ−１）、１１ｓ、０（ａ、ｃ−ｓ）、
１１５．３（ｓ。

Ｃ−２”）、３７．１（ｔ、Ｃ−７０，３２，８（ｄ、
Ｃ−６つ、３２．２（ｔ、Ｃ−５つ、２９．８（ｔ、、
ｃ−８’）、２５．７（ｔ、、ｃ−、ａ’）、２２．８
（ｔ、Ｃ−９０，２０，８（ＱＩＣ−１３’）、１６．
６　（ｑ。

Ｃ−１２’）、１４．４（ｑ、Ｃ−１０’）、１４．１
　（Ｑ　、　ｃ−１１’）、δＨ（ＣＤＣｌ２）、０．
８６　（ｔ　、　Ｈ６，４Ｈｚ　、　１０’−Ｈ５）、
０．９３（ｄ　、Ｊ　６．４Ｈｚ　、　１５’−Ｈｓ　
）、１．１４−１．４２（ｍ、幅広。

７’−Ｈ２、８’−Ｈ２、９’−Ｈ２）、１．８４（ｄ
、Ｊ　１．６Ｈｚ。

１２’−Ｈｓ　）、２．１２　（ｄ　、　Ｊ　１．６Ｈ
ｚ　、　１１’−Ｈ３）、２．３４−２．５０（ｍ、幅
広、　６’−Ｈ）、２．５８−２．６０（ｓ、幅広、４
′−Ｈ２，５”−Ｈ２）、５．３６（ｄ、Ｊ　１０Ｈｚ
、５’−Ｈ）、６．０９（ｄ、Ｊ　１５Ｈｚ　、　１２
−Ｈ）、６．４２　（ｄｄ　、　Ｊ　１３．５及び１２
Ｈｚ、１Ｏ−Ｈ）、６．６２−６．８８（ｍ、７−Ｈ，
９−Ｈ，６，８２を含む、３’−Ｈ）、６．９０（ｄｄ
、Ｊ　１５．５及び１１Ｈｚ、８−Ｈ）、７．１５（ｄ
、［ｉｌ広　Ｊ　７．５Ｈｚ　、　５−Ｈ）、７．２２
−７．４６（ｍ、１−Ｈ，１ｌ−Ｈ）、１１−Ｈ）、７
．６４（ｓ、幅広。

ＮＨ）、７．８６（ｓ、３−Ｈ）、７．８８（ａ、幅広
、ＮＨ）、１３．８０（ｓ、幅広、ＯＨ）： マススペクトル：　ｍ／ｚ　５０２（２１４、Ｍ”、　
５０２．２８３２Ｃ！１１Ｈ３８Ｎ２０４として）、４
１７（２４１）、３２４（１１俤）、１９５（３８優）
、１２３（１１憾）、１０９（６４憾）：元素分析値：
　Ｃ，７４，０４：Ｈ，７，８１：Ｎ、５．４９Ｃ３１
Ｈ３ａＮ２０４として：ｃ、７４．０６：Ｈ，７，６２
：Ｎ、５．５７実施例　２ ６４−ｍＡＢＡの加水分解による表１中の化合物（４）
の製造 ６４−ｍＡＢＡ　９４１１９を２（１強度のメタノール
性ＫＯ）ｆ　５０　を中に溶解し、２４時間還流処理し
た。

黄色の反応混合物を水性蓚酸によ！り　ｐ）１２に調整
し、ＣＨＣｌ５５００　ｒａｔで２度抽出した０合わせ
た有機抽出物をＮａ２８０ａで乾燥し、蒸発させ、黄色
の無定形の粉末を得た。この粗生成物をシリカゲル上の
カラムクロマトグラフィー（４５ｃｍｘ　２．５ＣＩｎ
％ＣＨＣＬＳ／’ＭｅＯＨ，９：　Ｉ　Ｖ／ｖ　）で処
理した後に、３つの主生成物が得られた。

（ａ）　　出発物質５．８１１９％ＲＦ　＝　０．６０
　（ＣＨＣ１５／’ＭｅＯＨ，９：　１　ｖ／ｖ）（ｂ
）　　淡黄色油状物３ＯＮ９、ＲＦ　＝　０．４３　（
ＣＨＣｔｓ／ＭｅＯＨ。

９　：　１　ｖ／ｖ　） （ｃ）黄色粉状物３４．２１１１Ｐ、ＲＦ　＝　０．３
９　（Ｃ）ＴＣＪＪ／ＭｅＯＨ。

９　：　１　ｖ／ｖ　） セファデックスＬＨ−２０カラム（４５ｃｍＸ２．５傭
、　ｃＨｃｔ３）上で（ｔ）ｌをさらに精製した後、２
，４．６−ドリメチルー２，４−デカジエン酸（式■）
２０．０η（５４憾）が得られた。

生成物（Ｃ）をセファデックスＬＨ−２０カラム（５０
ｃｒｒＬＸ　２．５ｃｒｒＬ、　ＣＨＣｌ３）上のクロ
マトグラフィーで処理した後、化合物（４）　５０２　
Ｗ　（５５係）を下記の性質を有する黄色の無定形粉末
として得た。

融点；２５６℃ ＩＲ（ＫＢｒ）　：　３４４０．３３８０．３２６０．
１６８０　（ｓｈ）１６１０．１５５０及び１００１０
Ｏ８’買スペクトル　メタノール中： λ、ｎａｘ＝３４２（４４５００）、２５９（２４６０
０）１５Ｃ、ＩＩ（−ＮＭＲ（２００ＭＨｚ　、　ＤＭ
ＳＯ−４６）　：δ１２．０９　（ｓ　、　４’−）Ｔ
２　）、２．４８（ｓ、５“−Ｈ２）、３．３０（ａｓ
幅広、ＮＨ，ＨＯＤと重なシ）、６．４３−７．０８（
ｍ。

９プロトン）、７．２９（ｄｄ、Ｊ　１５．０及び１２
．５　Ｈｚ　＊１ｌ−Ｈ）、９９１（ａ、幅広、ＯＨ）
：δＣ１６６，１（Ｓ、Ｃ−１３）、１４８．８（ｓ、
Ｃ−２）、１４２．５（ｄ、Ｃ−１１）、１３７．５（
ｄ、Ｃ−９）、１３６．９（ｄ、Ｃ−７）、１２９．９
（ｓ。

Ｃ−４）、１１４．８（ｓ、Ｃ−２“）、２８．８（ｔ
、幅広、Ｃ−４”）　Ｃ−５’）、信号１２９．１（ｄ
）、１２７．４（ｄ）、１２１．２（（１）、１１９．
０（ｄ）、１１４．９（ｄ）、１１４．６（ｄ）及び１
１２．５（ｄ）はｃ−ｉ、Ｃ−３、Ｃ−５、ｃ−６、Ｃ
−８、Ｃ−１０及びＣ−１２につ黄色の無定形粉末とし
て得た。

明確に当てはめられず、並びにＣ−１′及びＣ−５“の
信号は望められなかった。

マススペクトルニ ｍ／ｚ　３１０（１３４，Ｍ”、３１０．１３１７　　
Ｃ＋ｓＨ＋ａＮ２０５として）、１９８（４９係）、１
８０（１５悌）、１７０（９２％）、１３２（１００優
） 実施例　５ ６４−　ｐＡＢＡの製造（表１中の化合物（５））４−
アミノ安息香酸５５　ｍｍｏｌμをＳｔｒｅｐｔｏｍｙ
ｃｅｓｐａｒｖｕｌｕｓ　ＤＳＭ　４０７２２の３６時
間齢の培養物へ送った（上記実施例１　ｃ）と同じ方法
による）。７４時間後に菌糸体と培養物炉液の抽出を上
記のように行った。暗茶色の粗生成物をシリカゲル上で
２度カラムクロマトグラフィー処理（３０ｃｒＩＬＸ５
ｃｍ１ＣＨＣＩｓ／Ｍｅ○Ｈ，９：　１ｖ／ｖ）　　Ｌ
、た後に、６４−Ｉ）ＡＢＡ　（化合物（５）　）　３
５．８η／ｊを下記の性質を持融点：２４２℃ ＩＲ（ＫＥｒ）：　３４４０．３３５０．３２４０．２
９６０．２８６０．１７１０Ｓｈ、１６１５ｓｈ、　１
５８５、Ｉ　Ｄ　ＯＯｃｍ、−１ＵＶスペクトルメタノ
ール中： ３９２（３１５００）、２６１（１４４００）、２［］
１（１５２００）＋３Ｃ、１ＨＮＭ　（２００ＭＨｚ、
ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ。１６６．４（８１Ｃ−１３）、
１４９．６（ｓ、Ｃ−１）、１４ｓ１（ａ、ｃ−１１）
、１４２．５（ｄ、Ｃ−９）、１３７．８（ｄ、Ｃ−７
）、１２８．３（ｄ。

Ｃ−３及びＣ−５）、１２７．３（ｄ、Ｃ−１０）、１
２４．ｉ（ｓ、ｃ−４）、１２２．９（ｄ、Ｃ−８）、
１１９．４　（ｄ　、　Ｃ−１２）、１１４．９（ｓ　
、Ｃ−２’）、１１　！１．８　（ｄ　、　Ｃ−２及び
Ｃ−６）、２８．８（ｔ、幅広、Ｃ−４’及びｃ　−５
ＩＩ　）、Ｃ−１′及びＣ−６′の信号は認められなか
った。

δＨ２，１０（ｓ　、　４“−Ｈ２）、２．４７（、ｓ
、５“−Ｈ２）、３．１（ｓ。

幅広、　ＮＨ，ＨＯＤと重なり）、５．５０（Ｓ、幅広
、ＮＨ）、６．３４−６．９４（１！！、７プロトン＋
　６．５７　（ｄ　、Ｊ　Ｂ−５Ｈｚ　。

２−Ｈ及び６−Ｈ））を含む、７．２３（ｄ、Ｊ　８．
５Ｈｚ。

３−Ｈ及び５−Ｈ）、７．３０　（ｄｄ　、　Ｊ　１４
．５及び１２Ｈｚ。

１１−Ｈ）、９．９４（ｓ、幅広、ＯＨ）：マススーｅ
クトル：　ｍ／ｅ　３１０（８，４４Ｍ”　５１０．１
５ｊ７Ｃ＋　ａＨ１ａＮ２０５として）　　１９８（１
０，４憾）、１７０（４０，７係）、１３２（１００チ
） 実施例　４ 多形核顆粒性白血球から得られたエラスターゼ試駆（Ｐ
ＭＮエラスターゼ） エラスターゼをＦａｇｓｌｂｒｅｃｈｔら（Ｈｏｐｐｅ
−８ｅｙｌｅｒ’ｓＰｈ、ｙｓｉｏｌ、　Ｃｈｅｍ、　
３６３，３０５〜３１５（１９８２））による方法で、
ヒトの白血球から単離した。使用した基質１ｄ　Ｎａｋ
ａｊｉｍａら（ｒ　Ｊ、Ｂｉｏｌ、　Ｃｈｅｍ、　Ｊ　
２５４　、４０２７〜４０３２（１９７９））によるＭ
ｅＯ−８ｕｃ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−ｐＮ
Ａ　（Ｃａｌｂｉｏｃｈｅｍ　）である。１５分間の基
質からのｐ−ニトロアニリンの遊離は、スペクトロメー
ターの４０５　ｎｍにおける吸収の増加として認められ
た。この吸収を酵素ＰＭＮエラスターゼの１００優活性
として定義した。ＰＭＮエラスターゼの阻害剤は、濃度
を最大１００　ｔｔｔ７稙着で増加して酵素とともに１
時間予備インキュベートし、その酵素反応は基質により
開始した。

ＩＣ５０は、酵素活性を５０％阻害する阻害剤濃度であ
ると定義した。１００μｙ／ｍｅの最大濃度で阻害効果
を示さない物質を不活性であると定義した。

得られたＩＣ５０値を表２に示す。対照化合物であるマ
ヌマイシンの活性は、化合物（１）〜（３）と匹敵する
が、化合物（５）は阻害効果が著しく弱い。

化合物（４）はこの試験では不活性であった。

表２＝マヌマイシン及び本発明のマヌマイシン誘導体の
ＰＭＮエラスターゼに与える阻害効果物 質 ＩＣ５ｏ（μφｊ） マヌマイシン（弐■） ４．４ 化合物（１） ２．５ 化合物（２） ６．１ 化合物（３） （−６４−ｍＡＢ人） ３．６ 化合物（４） 化合物（５） （−６４−ｐＡＢＡ） ４２．０

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １）次の式 I ▲数式、化学式、表等があります▼ I （式中Ｒ＾１はＨまたはＯＨであり：Ｒ＾２はＨまたは
   ＯＨであり：Ｒ＾３はＨ、ＯＨ、ＯＣＨ＿３、ＣＨ＿３
   またはＮＨ＿２であり：Ｒ＾４はＨ、ＯＨ、ＯＣＨ＿３
   、ＮＨ＿２または▲数式、化学式、表等があります▼を
   示す） の化合物。 ただし、上記式中、Ｒ＾１＝ＯＨでＲ＾２＝Ｈで、Ｒ＾
   ３＝ＯＨでＲ＾４＝▲数式、化学式、表等があります▼
   である 化合物（１）と、Ｒ＾１＝Ｈで、Ｒ＾２＝Ｈで、Ｒ＾３
   ＝ＯＨで、Ｒ＾４＝▲数式、化学式、表等があります▼
   である化合物 （２）を除く。 ２）Ｒ＾１＝Ｒ＾２＝Ｒ＾３＝Ｈで、Ｒ＾４が▲数式、
   化学式、表等があります▼を示す式 I の化合物。 ３）Ｒ＾１＝Ｒ＾２＝Ｒ＾３＝Ｈで、Ｒ＾４がＮＨ＿２
   である式 I の化合物。 ４）Ｒ＾１＝Ｒ＾２＝Ｒ＾４＝Ｈで、Ｒ＾３がＮＨ＿２
   である式 I の化合物。 ５）次の式II ▲数式、化学式、表等があります▼II （式中Ｒ＾１はＨまたはＯＨであり：Ｒ＾２はＨまたは
   ＯＨであり：Ｒ＾３はＨ、ＯＨ、ＯＣＨ＿３、ＣＨ＿３
   またはＮＨ＿２であり：Ｒ＾４はＨ、ＯＨ、ＯＣＨ＿３
   またはＮＨ＿２である） の置換された安息香酸を各場合において ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　ｐａｒｖｕｌｕｓ　ＤＳＭ
   ４０７２２の培養物に加えることからなる式 I の化合
   物の製造方法。 ６）請求項５）に記載の方法において、３−アミノ安息
   香酸を加えることからなる請求項２）に記載の化合物の
   製造方法。 ７）請求項５）に記載の方法において、４−アミノ安息
   香酸を加えることからなる請求項４）に記載の化合物の
   製造方法。 ８）式 I の化合物またはマヌマイシンからなるエラス
   ターゼ阻害剤。 ９）医薬としての式 I の化合物の用途。