JPH02211241A - ハプテンが共有結合している固相マトリツクスの製法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 産業上の利用分野 本発明は、へブテンが共有結合している固相マトリック
スの製法に関する。

従来の技術 ハプテンか吸着もしくは共有にぶり結合している担持材
料は、イムノアッセイｍ埋による免疫学的検出法を実施
する際にも、ま九親和性クロマトグラフィにも使用され
る。その丸めに、ハプテンが親和性クロマトグラフィも
しくはイムノアッセイｔｇＡ施する際に適用される条件
下に分離しないように強くハシテンがマトリックスに結
合している必要がある。

親和性クロマトグラフィではハプテンを担体に結合させ
、それにぶりこのハシテンと時異的に結合性の物質、例
えばハプテンに対して作用する抗体上混合物から分離す
る、混合物を例えばクロマトグラフィカラム中で分離し
九後で、結合した特異的結合性の物質ｔ−Ｍびハプテン
η為ら＃！畦しなければならない。その際にハプテンは
分離してはならない、 イムノアッセイでは固相に結合したハシテンは、ハシテ
ンと！Ａ的に結合性である物質、例えばハプテンに対し
て作用する抗体と結合させることにエフ、測定すべき複
合体を反応溶液から分離するのに使われる。この場合に
も、ハプテンな相体に結合したままであることが重要で
ある。さもないと結果に誤差が生じるからである。

ハプテンをマトリックスに結合させるための従来公知の
方法はすべてが最適であるとは判明しなかった。

ハプテンｔ−担体に結合させる際の他の間馳は、ハプテ
ンの活性部位が越断されないエフに、つハシその活性が
部分的にも失なわれないようにハプテンを結合させなけ
れはならないという点である。それ故、従来は少なくと
も４個、膏利には６個あるいはそれ以上の０原子１−有
するスペーサを介してハプテン食用甘する必要があると
考えられ九。例えばファルマテア社Ｌ　Ｆｉｒｍ＆Ｐｈ
ａｒｍａａｉａ　）のパンフレット１アフイニテイ・ク
ロマトグラフィ・プリンシプルズ・エンド・メソツズ（
Ａｆｆｉｎｉｔｙ　Ｏｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ　ｐ
ｒｉｎｃｉｐｌｅｓ＆　ｍｅｔｈｏｄｓ　）　’、第１
９ｊ［、項目２に、低分子を 量のりがンドに関してはスペーサｐ使う必要があり、こ
れに二９スペーサと反応する分子に対するスペーサの接
近を保旺する。このことは第２０貞の２．２にもと載さ
れている。２．６に最適なスペーサの手の長さとしては
炭素原子６個のスペーサが記載されている。それにもか
かわらず、スペーサを介して固相に結合したハプテン食
用いては最適な結果を達成することはできなかつ九。特
に安定性が不十分であり、それ故この１うな面相マトリ
ックスの長期の貯蔵は可能ではない。

発明が解決しようとする昧趙 それ故、本発明の課題は、ハプテンがその活性を失なわ
ず、ハプテンがイムノアッセイ又は親和性クロマトグラ
フィで必要とされる条件上適用する際に相体力為ら分離
せず、かつハプテンを品質の低下なしに貯蔵することの
できるＬうにハシテンｔ−担体に固定させることのでき
る方法を開示することであつ几。

課題を解決する丸めの手段 この課題は、少なくとも１個の官能基を含有するハプテ
ンと固相材料と會、両方の成分の一万七予め活性した後
で反応させることにより、ハプテンｔ−面相としての材
料に、スペーサの結合なしに直接共有結分させることを
特徴とする、ハプテンが共有結合している固相マトリッ
クスの農法により解決される。

本発明方法を適用する際に、へブテンはマトリックスに
強く結合して漱しい条件ｔ−適用する場合でもハプテン
は分離せずかつ長時間貯蔵しｆｃ場合でもハプテンの活
性が基本的に失なわれることなく結合していることが紹
められｊ！異的であった。

本発明方法なハシテン化した固相マトリックスの製造に
有用である、固相マトリックスとしては、ハプテンとの
結合に好適な官能基、例えはヒドロキシル基、カルボキ
シル基、アルデヒド基又はアば）基を有する材料を使用
することができる。これには重合体及びポリサラ刀すド
材料が好適である。固相材料としては水に不溶なポリサ
ツカリド含有材料上使用すると優れており、これは場合
にエフ不活性成分と混合することができる。特に有利に
は、セルロース含有材料、特に純粋なセルロース、亜硫
酸パルプ、ステープルファイバー及び／又はセルロース
アセテート蒼びにこれらの成分の混合物全使用する。セ
ルロース含有材料を、このような材料で一般に使われる
他の轍維と混ぜることもできる。

例えば、ポリエステル、ナイロン又はポリアクリルニト
リルが好適である、 面相マトリックスにハプテンを結合させる。

ハプテンとは定義に工れば、約１５００ダルトンニジ低
い分子量を有し、単独では免疫応答を誘導する能力金持
九ないが抗体とは結合し得る分子である。本発明にエフ
、少なくとも１個の官能基を有するエフなハシテンを使
用することができる。官能基がアミノ基、ヒドロキシル
基、アルデヒド基又はカルボキシル基であると優れてい
る。不発明方法はコルチゾン、ニストロール、エストリ
オール、エストラジオール、テストステロン、！ロゲス
テロン、アルドステロン、？３＆びＴ、の工うなホルモ
ン、ビタミンＤ２．又は葉酸塩のようなビタミン蛋びに
７″ｉキシン、ゾギトキシン、ゾゴキシデニン、フェノ
バルビタール又嬬テオフィリンのような医薬の結合に及
びビオチンの結合に特に好適である、ハプテンを同相に
結合させるには、ノ・ゾテンか又は固相材料を活性化す
る。このための方法は当業省に公知である、例えは、活
性エステル又はイミダゾリドへの変換が好適である。例
えば、活性化する丸めの可能性については、Ｋ。

リュゾケ（Ｌｉｉｂｌｃｅ）、Ｅ、シエレーダ（ｓａｈ
ｒ６ｄｅｒ）＊Ｇ、クロス（Ｋｌｏｓｓ　）共著、１ヒ
エミー・ラント・ビオヒエミー・デア・アオノゾイレン
・ペプチデ・ラント・プロテイネエ（Ｏｈｅｍｉｅ　ｕ
ｎｄＢｉｏａｈｅｍｉｅ　ｄｅｒ　Ａｍ１ｎｏａａｕｒ
ｅｎ＋Ｐｅｐｔｉｄｅ　ｕｎｄＰｒＯｔｓｉｎｅ工）　
’　　１３６〜１５７　ｊｌ　（Ｇ、ＴｈｉｅｍｅＶｅ
　ｒｌａｇ　＊　８　ｔｕｔｔｇ、＆　ｒ’ｅ在；１９
７５年ンに記載されている。

固相材料とハプテンとを無水媒体中で反応させると優れ
ている。その際に、アセトン、ＤＭ］Ｆ又μゾオキサン
の工５な無７に有機溶剤中で反応させると有利である。

本発明によフ製造した、ハプテンが共有結合している面
相マトリックスを公知方法で用途に応じて加工する。親
和性クロマトグラフィで使用する際に材料が球状物スル
粉末の形で存在すると優れている。イムノアッセイで使
用する際に材料をフィルム、７リース又は紙の形で使用
すると優れてい、ｂ、その際に、固相材料を初めにハプ
テンと反応嘔せ、引続いてハプテン化材料を所望の形状
に成形することができる。まに、初めに固相材料を所望
の形状に成形し、引続いてハプテンと反応させることも
できる。例えば初めに七ルロース繊維ｔハプテン化し、
引続いて繊維を７リースに加工することができる。初に めｔ同相材料小ら球状物を成形し、久に引続いてハシテ
ン化することができる。

固相材料とハプテンとの反応は、反応溶液の容器中の巻
取りコア及び循環ポンプ系′に特命とする装置中で行な
りと優れており、ｓｉｐミルコアに多数の孔鷺葺する、
−万の１部が閉じている管と軸方向の２つの側板とを有
し、この管拡処境ナベ自材料の４！き物を収容するため
のｔのであり、側板は巻き物の軸方向・の端面を上貼す
るためのものでありｓｖｈつ循環ポンプ系は反応浴液を
容器ｐ為ら管の他方の地部に供給する０その際に、側板
は巻き物の軸方向の端面に対して締め付けることができ
る。

容器中に活性化したハプテンｔ−を有する反応溶液を装
入すると優れている。固相材料、殊に帯状の紙材を＠取
りコアに巻取９刀為つ細目網で固定する。紙材の緑を側
板で密閉する。反応浴液を循環ポンプ光を介して容器か
ら管の他端部に供給する。七の際に、反応溶液は壱自取
った材料中を放射状に全方向で内側から外側へ流動する
。この装置の利点は、非常に少量の″４！Ｉ４部剤を使
うに過ぎないことである。更に、この装置の取り扱いも
洗浄も非常に簡便なことである。

本発明方法にＬ　Ｄ　、容易に人中し得る使用物質の使
用下に、多方面で使用可能な同相マトリックスを生産規
模に２いて均一にかつ再現可能に製造することができ、
このマトリックスはクロマトグラフィにも、ま九イムノ
アッセイの特異的マトリックスとして又は万能マトリッ
クスとしても使用することができる、本発明にエフ得ら
れ几固相マ）　ＩＪラックス非常に艮好な安定性を有し
ている。

実施例 次に不発明を添付１面及び実施例により詳説する。

本発明方法ｔ−実施するための装置を示す第１図にに巻
ｊｌｓ！クコア３が存在する反応溶液の容器１が図示さ
れている。巻取りコア３は、処理丁べき材料の巻き物を
収容するための、−万の地部９が閉じている管１１を有
し、その際に官１１は多数の孔７ｔ−有する。巻き物の
端面には密閉のために軸方向の２つの＊ａ１５．１７が
設けられており、側板は巻き物の軸方向の端面に対して
締め付けることができる。更に、この装置は循環ボンデ
系１９をＷＬ、この糸は反応溶液會容器１力為ら管１１
の他の端ｓ２１に供給する。

例１ ＢＯ（：！−Ｔ３−イミダゾリドｔセルロースにｗ酋紙
材（セルロースリンター）２９に無水アセ）ン１２５Ｉ
ＩＩｊ中のＢｏｏ−τ、−イミダゾリド５ＩＩｙｔ−麿
見かつ室温で一晩振盪した、引続いて、アセトンで４回
及び水で２回洗浄いしこの工うにして処理した紙材ｔ″
２０ミリモル／ｊホスフェート緩衝液（、ｐＨ８）２．
５ｊｋ用いて１２時間にわたってカラム甲でゆっくり流
しながら処理し、引続いて各々５０４〇Ｈ２０及びアセ
トンで処理しａ−つ真空中で乾燥させ友。

例２ セルロースを塩化トシルにＬシ活性化及びＴ３への結合 紙材２ｇに無７Ｘゾオキサン５〇−中の塩化トシル２０
０１１５１ＸＩえた。ビリシン２０μ！の添加後、１時
Ｍｆｉ煮しカ為つ紙材ｔ”ジオ今すン２×５Ｃ１＋７及
びＨｇＯ２’　５０　ｍで洗浄した。

紙材２９に０．１モル／　ｌ　−ＮａＨＣＯ３中のＴ３
１０■η島らの溶液を加えかつ搗盪下に２４時間恒温保
持し九〇引続いて、それぞれ５０４の０．１モル／　ｌ
　−ＮａＣＡ！　％水及び０．１モル／１１−ホスフェ
ート緩衝液（ｐＨ７，５）及び水で洗浄しかつ真空中で
乾燥させ友。

例６（比較） 比較のために、紙材に合成ポリハプテンを高分子スペー
サを介して結合させた。それについては初めにアリルア
ミン全アクリルアミドと共重合させ友。再蒸留Ｈ２０２
００ｍ　１アクリルアミド（５ｅｒｖａ　ｓ　４回結晶
させ、ｑ）１５Ｊ及びアリルアミン０．４５ｘｌ工り成
る溶液に１０％の開始溶液２　ｍｌ　ｆ加え、軽く攪拌
し７７１つ重合の開始までに穏やかに璧素會導通した。

１２時間の後反応時間後、Ｈ２Ｏに対して２４時間透析
した。

引続いて共重合体を凍結乾燥しかつそれ以後の加工に使
用し友。

この共重合体にノ１ゾテンとしてＯＴ３及びゾ♂キシｒ
ニンを結甘さく　ｔ。

工、Ｔ３ 得られ九凍結乾燥物１．６９ｆｔ１０ｔリモル／１−　
ＫＰＯ４（ｐ）１８．２　）　１６０ｓＩｊ中に溶ｐ為
しかつ徐徐にジオキサン８０ｄｔ−加えｆｃ、この澄明
な溶液中にジオキサン２０ｔＪ中のＢＯＯ−Ｔ５−Ｎ　
一方ニトロキシスクシンイミド１００■を滴加し九。反
応溶液を１２時間２０℃でｆｉ元下に放置し７Ｉ！：、
？精製するため、反応生成物ｔアセトン１０１００Ｏ中
で沈殿させ〃１つ遠心分離した（　８ｔｏｃｋ遠心機、
１時間、３０００　ｒｐｍ）。沈殿１ｒ：再蒸留水１６
０ｄ中に取り、再度アセトン５００ｄで沈殿させ友、遠
心処理後に、この工うに和製したポリハシテン會Ｈ２Ｏ
８０！ＲＩ甲に溶〃＾しかつ一２０℃で貯蔵した。

１、ジオキシゲニン 不方法勿Ｉと同様に、使用物質の濃度全変史して英施し
丸。

共重合体１．６ｇ、１０ミリモＡ／　／　ｌ　−ＫＰＯ
４（ｐＨ８，２）５０．ｊ、クオキサ゛ン１５−、ジオ
印サン５ｄ当シシオキシゲニンースクシニルーＮ−ヒド
ロキクスクシンイミド６２■ −ブテン會担持材料としての紙に結合させた。

紙材を結合前に活性化した。

方法ａノ リ アル刀リセルロースｔ−）７クロルトリアシン（ＴＯＴ
）により活性化 装置：第１１１ｇ１Ｋよる反応器、５Ｘ１０ｍコア＝１
．５×１０ａ１１１ ポンプ：フエルダー（Ｖ、ｒ４ｅｒ　）イアポンチ、送
り−及び帰り管 紙材（８ｃｈｌｅｉａｈｅｒ　＆日ｃｈｕ１１ｓ　３５
１２　）　１．６　ｍをポリエチレン支持細目網でコア
の周りに巻き付けて、反応器甲に挿入し九。その後、１
時間５０＜リモｙ７１−メタノール性ＮａＯＨ５００ｄ
をポンプ循環させた（５００ｍｇ／分ン、アル刀り性化
の後で分析用アセトン４０゛０−で４回洗いか）１時間
５％−ＴＣＴ　／アセトンー溶液５００ｉＪＩｊで示ン
プ循環嘔せた。引続いて６回アセトン４００ｄで洗つ友
。洗浄溶液に４−（４−ニトロペンシル）　−ｅ　ＩＪ
シンで遊離ＴＣＴについて試験した。活性化した紙材會
反応器力為ら増り出し、乾燥させかつその後の加工処理
に使用しｆｅ、。

貯蔵条件：４℃、乾燥、最高２週間 方法ｂ） ジイソプロビルエチルアミンの添加下にＴＯＴで活性化 この方法ｔ−ａ）と同様に行なったが、予めアルカリ性
化しなη為つ７ｊ、　１％−ＴＣＴ　／アセトン溶液５
０〇−及びジイソプロビルエチルアミン５　ｒｇｌを使
用し九。反応時間は６時間であつ友。

洗浄は方法ａ３と同様に行なつ几。

方法Ｃン 紙材担体のベルヨデート活性化 紙材１０．Ｆに０．１モル／　ｌ　−Ｎａ工０４′−溶
液１１を側え、かつ室温で一晩振盪させた。引続いて、
Ｋエーデンゾン紙で変色が見られなくなるまでＨ２Ｏで
洗つ友。その後、Ｊｉｃ空中呈温室温燥し友。

方法ａ）〜Ｃ）に工り得られた紙担体にポリ・・ブテン
！及びＨを結合させた。

α）　Ｔｆ：！Ｔ活性化した紙担体への結合ＴＣＴ紙（
例ｂ　）　１．６　ｍ　ｋ　０．２モル／　１３　ＫＰ
Ｏ２（ｐ）１８．２　）　３００ゴ甲のＴ３　（例３１
）３２０■で為らの溶液を用いて室温で１２時間負荷し
７＋？、、引続いて、５時Ｍ　Ｏ，５モル／ｊ−エタノ
ールアばン溶液（ｐＪ−ＩＦ３．２）４００Ｊｋ用いて
流量６００ｄ１分でポンプ循環させ九。

その後、次のように洗浄した：　５０　＜　ＩＪモル／
ｊ−アセテ−）　（ｐＨ６，０）　２０１５１’１０６
−ツイーン２０ ポンプ処理時間：１２時間 ０．１モル／　ｌ　−ｘｐｏ、　／　０．５モル／　ｌ
　−ＮｔｓＯ１２０１，５，０１０ｏ・１−ツイーン２
０＃８．２ポンプ処理時間：１２時間 ０．５岨ル／１−ＫＰＯ４（ｐ）１６．０ン、５’／ｄ
。

クイーン２０ ボンゾ処理時間＝８時間 １ミリモル／　ｊ　−ＩＣＰＯ４（ｐＩ（６，０）　５
１ポンプ処理時間：２時間 分析用純粋アセトン６×５００１１Ｌｌボンｆ速度：３
００−／分 洗浄工程後、紙を反応器から取り出しｐｌつ真壁中ｉ　
Ｑ−”　１ｇで８時間乾燥嘔七九。

β）ベルヨデート活性化紙卸体へのＴ３−３１合体の結
合 過沃素酸塩酸化したセルロース紙５９ｋｌ　２時間室温
で０．１モ／Ｉ／／ｌ　−ＫＰＯ４（Ｘ７．２　）２５
０ｄ甲のＴ３−重合体（例５参照）　１８．５９及びＮ
ａＢＨ３０Ｎ　Ｏ，９４＆　２１為らの溶液で負荷した
。

流量：３００．ｗｊ／分 洗浄及び乾燥なαノと同様に行なった。

例４（比較） 史に比較のために、例６に工り得られ九トリクロルトリ
アクン（Ｔ　ＯＴ　）活性化した租相体に低分子スペー
サを介してハプテンを結合させた。

ＴＯＴ活性化紙１ｇに７オキサン１２５−中の１．８−
シアミン−６，５−ジオキサオクタン（ＤＡＤＯＯＪ　
５〜１０　ｌｉｔの溶液’ｉｍえη１つ１時間振盪させ
た。引続いて４回ゾオ印サンで洗浄したＯ この工すに処理した紙にンオキサ７１２５ｄ中のＢＯＣ
−Ｔ３−０８ｕ　（Ｂｏａ　：　ｔ−ブチルオキシカル
ボニル、０８ｕ　：　Ｎ−ヒドロキシスクシンイミｐ）
ｉｏ■Ｏ溶液ｔ″Ｗえかつ２時間振盪した。

更に、ＴＯＴ活性化紙１９ｔ−７オキサン１２５４中の
ＤＡＤＯＯ−Ｂｏｏ−Ｔ３１〜５■と２時間振盪し、そ
の後４回ゾオギサンで処理し次。

その後、それぞれ３回アセトン及びＨ，Ｏで洗浄し、引
続いて２０ミリ七ル／！−アセテート（−６）及び０．
１％−ライ−７２０で１２時間カラム中で徐々に洗浄し
ながら処理した。Ｈ２Ｏで洗った後、紙を２回アセトン
５０ｍで処理しかつ真壁中で乾燥させた。

洗浄は一前記の工うに行なった。

例５ 例１〜４で得られ九固相マトリックスの安定性を比較し
次。その丸めに、マトリックスをそれぞれろａ間乾燥箱
中６７℃で貯蔵した。負荷後の結合能の低下をヨーロッ
パ公開特許第０１６７１７１号明細書及び同第０１６７
１７５号明細書による装置中で第２図による挿入喪紮七
便って測定した、 挿入要素による測定： ａニリンター９４１　４０％、ポリアミド５０％１キユ
ラロン（ＩＣｕｒａｌＯｎ　：　？　’）　ヒニルアル
コール繊維、クラレ社、日本）１０％からの７リース６
０ミリ−ｅ　＃　／　ｌ　−Ｎａ３ＰＯ４”１２　Ｈ２
゜Ｏ，５０／’ｏｏ−ゲナポール（ＧｅｎａｐＯｌ　）
　ＰＦ’　２０（エチレンオキシド／　ｆａピレンオキ
シド−ブロック重曾体とのフルキルポリグリコールエー
テル、Ｈｏｅｏｈｓｔ　ＡＧ社） ）：空室（７リース含ます） ０ニリンター９４１　２０％、ステーゾルファイバー６
０％、ポリアミド８．２／４　４０％、キエラロン１０
％η為うの７リースＮ５Ｌ２ＨＰＯ４”２　Ｈ１！０３
　Ｂ　＜リモル／！ＮａＨ２ＰＯ４’ＨｊＯ３６ミリモ
ル／！ＭｇＫ２１ＤＴＡ・２　Ｈ２Ｏ３，５ミリモル／
ｌ牛血渭アルブミン　０．７％ クロティン００．７％ アニリノナフチルスルホン酸（ＡＮｓ）　０．０３５％
ゲナポールＰＸ’２０　０．０１％の溶液で含浸ｄ：ポ
リエステル８０％、ステープルファイバ−２ロ τ３に対するポリクロナール抗体、β−ガラクトシダー
ゼに結合させ７ｅ　　２８０Ｕ／１３４−（２−ヒＶロ
キシエチル）一方−ざベラｙンｚｐｉールスｙ＊ンＷＲ
（ＨｘＰｙ．５）ｐＨ７．２　５１００ミリモ／Ｌ／／
　Ｉ Ｌ−アスパラギン酸Ｍｇ　　　　　　　５ミリモル／ｉ
クロティン０　　１％ の漬液で含浸し九〇 貯蔵のために含浸７リースｔ−凍結乾燥した。

ｅ：例１の７リース（マトリックスノ ｆ：りンター２０％、ステープル７アイ／（−６０％、
ポリアミＰ４０％、キエラロン１０％ｌｈらの７リース クロルフェノールレッド−ガラクトシド１９ミリモル／
ｌ ａｍｐｘｓ　（ｐｉ（　７．２　５ノ　　　１００ミリ
モル／ｊ硼＠　　　　　　　　　　　　１０ミリモル／
ｌ液体のピペットｍｍ 試料として０．９Ｘ！％−ＮａＯＪ　ｉｌ　＊　ｂ　６
μｊｔ試料装入室（１Ｋ）中にピペット添加する。

反応の笑施 試料を試料装入室中にピペット添加したら遠心処理プロ
グラムを開始する。重力、毛細管力及び遠心力が一緒に
働いて試料溶液は稙々の試薬担体全通ってキュベツト中
に輸送ちれる。反応工程の時間的順番ｔ−動制御るため
に、ヨーロッパ特許公開第０１　６７１　７１号明細書
の例４に記載の遠心プログラムを適用する。

測定に当り，溶液ｔー中ユベット中に輸送しかつ反応を
光度測定にょシ５　７　８　ｎｍで追跡する。

マトリックス（７リースｅ）に結合しない接合体分子は
マ？　１７ツクスｔＲｉｔｂし、相応する量の酵素がキ
ュペット中に存在する。それ故、測定される単位時間当
りの色濃度の上昇（吸光度７分、−７分）か嘴トリック
スの結合能の尺度である。測定される１分間当りの色濃
度の上昇が少ない程、マトリックスの結合能は大きい。

第２図は例６の笑施に使われるエフな装置全示し、その
際に、ＰＡＫは試料装入型、ＶＫｌ、ｖｘ２、ＶＨ２は
５Ｐ嵐、Ｋは測定キュベツト、′Ｌは通気路を表わす。

各７リース及びｍｔ−図示した。それぞれの呈及びフリ
ースとの関を結合する通ｗｒは、試験すべき液体を輸送
することのできる迷ＩＩｉ！ｉＢを表わす。

次表ｐらｆ１果が明ら〃島である。

【図面の簡単な説明】

第１図は本発明方法を実施するための装置の図、第２図
は従来の方法を実施するｆｃＩＩＯの挿入要素の断面図
である。 １・・・容器、３・・・巻増りコア、１・・・孔、１１
・・・管、１５．１７・・・側板、１９・・・循環ボン
ノ系、ＰＡＫ　・＠料装入室、７に１　、ＶＩＣ２、Ｖ
Ｈ２−・・９Ｐ室、Ｋ・・・測定ヤニペット。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. １、少なくとも１個の官能基を含有するハプテンと固相
   材料とを、両成分の一方を予め活性化してから反応させ
   ることによりハプテンを固相としての材料に、スペーサ
   の結合なしに直接共有結合させることを特徴とする、ハ
   プテンが共有結合している固相マトリックスの製法。