JPH02186993A - 生細胞へのレーザー光照射方法 - Google Patents
生細胞へのレーザー光照射方法Info
- Publication number
- JPH02186993A JPH02186993A JP1005010A JP501089A JPH02186993A JP H02186993 A JPH02186993 A JP H02186993A JP 1005010 A JP1005010 A JP 1005010A JP 501089 A JP501089 A JP 501089A JP H02186993 A JPH02186993 A JP H02186993A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- cells
- cover glass
- serum
- laser
- living cells
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 239000006059 cover glass Substances 0.000 claims abstract description 26
- 238000007667 floating Methods 0.000 claims abstract description 18
- 239000012679 serum free medium Substances 0.000 claims abstract description 15
- 230000001678 irradiating effect Effects 0.000 claims abstract description 12
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 15
- 239000006152 selective media Substances 0.000 claims description 4
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims 1
- 238000004062 sedimentation Methods 0.000 claims 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 abstract description 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 33
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 5
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 230000007257 malfunction Effects 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕
本発明は、生細胞へのレーザー光照射方法に係り、特に
浮遊性の生細胞へのレーザー光照射に好適な生細胞への
レーザー光照射方法に関するものである。
浮遊性の生細胞へのレーザー光照射に好適な生細胞への
レーザー光照射方法に関するものである。
生細胞への遺伝子等の注入方法の中で、すく゛れた機能
を有する方法として、特公昭６２−７８３７号に記載の
ようなレーザー光による穿孔方法がある。
を有する方法として、特公昭６２−７８３７号に記載の
ようなレーザー光による穿孔方法がある。
この方法は遺伝子等を含む液中に生細胞を浸しておき、
生細胞にレーサー光をレンズを通して集光させることに
より細胞膜の透過性を一時的に向上させ、遺伝子等を生
細胞内に取り込ませるものである。
生細胞にレーサー光をレンズを通して集光させることに
より細胞膜の透過性を一時的に向上させ、遺伝子等を生
細胞内に取り込ませるものである。
上記従来技術は、浮遊性の生細胞へのレーザー光照射に
ついて配慮がされておらず、溶液中の細胞がレーザー光
照射時に動き、フォーカスがずれるという不具合や、ま
たレーザー光照射後に処理された細胞を全て回収するこ
とが非常に困難であるという不具合があった。
ついて配慮がされておらず、溶液中の細胞がレーザー光
照射時に動き、フォーカスがずれるという不具合や、ま
たレーザー光照射後に処理された細胞を全て回収するこ
とが非常に困難であるという不具合があった。
本発明の目的は、上記両者の不具合を解決し、フォーカ
スの精度や処理された細胞の回収率等の向上を図る生細
胞へのレーザー光照射方法を提供することにある。
スの精度や処理された細胞の回収率等の向上を図る生細
胞へのレーザー光照射方法を提供することにある。
上記目的は、培養中の浮遊性の生細胞は、無血清培地中
では容器のガラス面に付着するという性質を利用して、
容器内の無血清培地中にレーザー光照射用カバーガラス
を入れておくことで浮遊性の生細胞が旧記カバーガラス
に付着することにより、達成される。
では容器のガラス面に付着するという性質を利用して、
容器内の無血清培地中にレーザー光照射用カバーガラス
を入れておくことで浮遊性の生細胞が旧記カバーガラス
に付着することにより、達成される。
浮遊性の生細胞はカバーガラスに付着しているために、
細胞の動きは止まりレーザー光照射のためのフォーカス
調整が容易となり、誤動作することがない。また細胞の
回収においても細胞が付着しているカバーガラスを培地
中に移すだけなので非常に容易に行なえ、簡略化できる
。
細胞の動きは止まりレーザー光照射のためのフォーカス
調整が容易となり、誤動作することがない。また細胞の
回収においても細胞が付着しているカバーガラスを培地
中に移すだけなので非常に容易に行なえ、簡略化できる
。
イＴ・１
〔実 施 謂〕
以下本発明の一実施例を第１図〜第４図により説明する
。
。
図において、第１図＜ａ＞のようにカバーガラス３を接
着したシャーレ６甲の無血清培地４中に懸濁した浮遊生
細胞ｌを入れておくと、第１図（ｂ）のように浮遊生細
胞１は沈澱しカバーガラス３上に付着する。その後無血
清培地４を取り除き、カバーガラス３を逆さにしても垂
れない程度のＤＮＡ溶液８を浮遊性細胞１に加え、カバ
ーガラス３を上向きにしてレーザー光２を浮遊性細胞ｌ
に照射する。この場合、レーザー光２の照射装置として
王立型の顕微鏡を使用して健るためレーザー光２は上側
から照射される。その（＆ＤＮＡ溶液８を堆り除き、カ
バーガラス３を下にして、選択培地５を加えて、形質発
現を待つ。
着したシャーレ６甲の無血清培地４中に懸濁した浮遊生
細胞ｌを入れておくと、第１図（ｂ）のように浮遊生細
胞１は沈澱しカバーガラス３上に付着する。その後無血
清培地４を取り除き、カバーガラス３を逆さにしても垂
れない程度のＤＮＡ溶液８を浮遊性細胞１に加え、カバ
ーガラス３を上向きにしてレーザー光２を浮遊性細胞ｌ
に照射する。この場合、レーザー光２の照射装置として
王立型の顕微鏡を使用して健るためレーザー光２は上側
から照射される。その（＆ＤＮＡ溶液８を堆り除き、カ
バーガラス３を下にして、選択培地５を加えて、形質発
現を待つ。
第２図は本発明の他の実施例を示すものであり、第２図
は第１図のカバーガラス付シャーレの代りに培養ビン７
を用いた場合を示している。これらの方法によれば、王
立型顕微鏡が使用できる、細胞が付着しているため培地
交換が容易である等の効果がある。
は第１図のカバーガラス付シャーレの代りに培養ビン７
を用いた場合を示している。これらの方法によれば、王
立型顕微鏡が使用できる、細胞が付着しているため培地
交換が容易である等の効果がある。
第３図は本発明の他の実施例を示すものであり、シャー
レ６の中にあらかじめカバーガラス３を入れておき、レ
ーザ２をカバーガラス３上の細胞にのみ照射し〔第３図
（ｂ）〕、レーザ照射後カバーガラス３ごと細胞を選択
培地５中に移すものである。本実施例によれば、レーザ
ーを照射した細胞と照射しない細胞とを容易に分けるこ
とが可能となる。
レ６の中にあらかじめカバーガラス３を入れておき、レ
ーザ２をカバーガラス３上の細胞にのみ照射し〔第３図
（ｂ）〕、レーザ照射後カバーガラス３ごと細胞を選択
培地５中に移すものである。本実施例によれば、レーザ
ーを照射した細胞と照射しない細胞とを容易に分けるこ
とが可能となる。
第４図は本発明の無血清培地中で高密度にカバーガラス
上に付着させた浮遊性細胞ｌにレーザー光２を走査して
照射する場合である。この場合、細胞が付着しているた
めレーザー光２を照射しても移動しないため、高効率に
レーサー光照射が可能である。なお、上記実施例類は、
選択培地を用いたもので説明したが、選択培地を使用し
ない場合にも本願発明は適用できる。
上に付着させた浮遊性細胞ｌにレーザー光２を走査して
照射する場合である。この場合、細胞が付着しているた
めレーザー光２を照射しても移動しないため、高効率に
レーサー光照射が可能である。なお、上記実施例類は、
選択培地を用いたもので説明したが、選択培地を使用し
ない場合にも本願発明は適用できる。
本実施例によれば、浮遊性の生細胞へのレーザー光照射
が容易になり、実質効率の向上や安全性の向上が図れる
等の効果がある。
が容易になり、実質効率の向上や安全性の向上が図れる
等の効果がある。
本発明によれば、浮遊性の生細胞へのレーザー光照射が
容易になり、フォーカスの精度や処理された細胞の回収
率等の向上が図れる効果がある。
容易になり、フォーカスの精度や処理された細胞の回収
率等の向上が図れる効果がある。
第１図は本発明の一実施例の浮遊性細胞を付着させる場
合の説明図、第２図は同じ鴫他の実施例の説明図、第３
図は同じくさらに他の実施例の図、第４図は高密度に付
着させた場合のレーザー走査を示す説明図である。 １・・・・・・浮遊性細胞、２・・・・・・レーザー光
、３・・・・・・カバーガラス、４・・・・・・無血清
培地、５・・・・・・選択培地、６・・・・・・シャー
レ、７・・・・・・培地ビン、８・・・・・・ＤＮＡ溶
液 ４１図 ４２図 月３図 イ４ 図
合の説明図、第２図は同じ鴫他の実施例の説明図、第３
図は同じくさらに他の実施例の図、第４図は高密度に付
着させた場合のレーザー走査を示す説明図である。 １・・・・・・浮遊性細胞、２・・・・・・レーザー光
、３・・・・・・カバーガラス、４・・・・・・無血清
培地、５・・・・・・選択培地、６・・・・・・シャー
レ、７・・・・・・培地ビン、８・・・・・・ＤＮＡ溶
液 ４１図 ４２図 月３図 イ４ 図
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、生細胞へのレーザー光照射方法において、浮遊性細
胞を無血清培地中でカバーガラスに付着させ、該カバー
ガラスに付着した浮遊性細胞にレーザー光を照射させる
ことを特徴とする生細胞へのレーザー光照射方法。 ２、生細胞へのレーザー光照射方法において、浮遊性細
胞を無血清培地中で沈澱によりカバーガラスに付着させ
た後、前記無血清培地を取り除き、ＤＮＡ溶液を加えた
状態で前記カバーガラスに付着した浮遊性細胞にレーザ
ー光を照射させることを特徴とする生細胞へのレーザー
光照射方法。 ３、生細胞へのレーザー光照射方法において、浮遊生細
胞を容器内の無血清培地中で沈澱によりカバーガラスに
付着させ、前記容器内の無血清培地を取り除き、ＤＮＡ
溶液を加えた状態で前記カバーガラスに付着した浮遊性
細胞にレーザー光を照射させ、その後容器内のＤＮＡを
取り除き、選択培地を加えることを特徴とする生細胞へ
のレーザー光照射方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1005010A JPH02186993A (ja) | 1989-01-13 | 1989-01-13 | 生細胞へのレーザー光照射方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1005010A JPH02186993A (ja) | 1989-01-13 | 1989-01-13 | 生細胞へのレーザー光照射方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH02186993A true JPH02186993A (ja) | 1990-07-23 |
Family
ID=11599579
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP1005010A Pending JPH02186993A (ja) | 1989-01-13 | 1989-01-13 | 生細胞へのレーザー光照射方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH02186993A (ja) |
Cited By (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0633499U (ja) * | 1992-10-09 | 1994-05-06 | 住友ベークライト株式会社 | 培養用容器 |
| US5720921A (en) * | 1995-03-10 | 1998-02-24 | Entremed, Inc. | Flow electroporation chamber and method |
| US6074605A (en) * | 1995-03-10 | 2000-06-13 | Entremed, Inc. | Flow electroporation chamber and method |
| US6773669B1 (en) | 1995-03-10 | 2004-08-10 | Maxcyte, Inc. | Flow electroporation chamber and method |
| EP1607474A1 (en) * | 2004-06-15 | 2005-12-21 | Fujitsu Limited | Apparatus and method for injecting a substance into a cell |
| US7029916B2 (en) | 2001-02-21 | 2006-04-18 | Maxcyte, Inc. | Apparatus and method for flow electroporation of biological samples |
| US7141425B2 (en) | 2001-08-22 | 2006-11-28 | Maxcyte, Inc. | Apparatus and method for electroporation of biological samples |
| US7771984B2 (en) | 2004-05-12 | 2010-08-10 | Maxcyte, Inc. | Methods and devices related to a regulated flow electroporation chamber |
| JP4593857B2 (ja) * | 1999-09-09 | 2010-12-08 | 株式会社東京大学Ｔｌｏ | 膜の穿孔方法および装置 |
-
1989
- 1989-01-13 JP JP1005010A patent/JPH02186993A/ja active Pending
Cited By (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0633499U (ja) * | 1992-10-09 | 1994-05-06 | 住友ベークライト株式会社 | 培養用容器 |
| US5720921A (en) * | 1995-03-10 | 1998-02-24 | Entremed, Inc. | Flow electroporation chamber and method |
| US6074605A (en) * | 1995-03-10 | 2000-06-13 | Entremed, Inc. | Flow electroporation chamber and method |
| US6773669B1 (en) | 1995-03-10 | 2004-08-10 | Maxcyte, Inc. | Flow electroporation chamber and method |
| JP4593857B2 (ja) * | 1999-09-09 | 2010-12-08 | 株式会社東京大学Ｔｌｏ | 膜の穿孔方法および装置 |
| US8507258B2 (en) | 1999-09-09 | 2013-08-13 | Akita Prefectural University | Apparatus for perforating membrane |
| US7029916B2 (en) | 2001-02-21 | 2006-04-18 | Maxcyte, Inc. | Apparatus and method for flow electroporation of biological samples |
| US7141425B2 (en) | 2001-08-22 | 2006-11-28 | Maxcyte, Inc. | Apparatus and method for electroporation of biological samples |
| US7186559B2 (en) | 2001-08-22 | 2007-03-06 | Maxcyte, Inc. | Apparatus and method for electroporation of biological samples |
| US7771984B2 (en) | 2004-05-12 | 2010-08-10 | Maxcyte, Inc. | Methods and devices related to a regulated flow electroporation chamber |
| US9546350B2 (en) | 2004-05-12 | 2017-01-17 | Maxcyte, Inc. | Methods and devices related to a regulated flow electroporation chamber |
| US7534598B2 (en) | 2004-06-15 | 2009-05-19 | Fujitsu Limited | Apparatus and method for injecting substance into cell |
| EP1607474A1 (en) * | 2004-06-15 | 2005-12-21 | Fujitsu Limited | Apparatus and method for injecting a substance into a cell |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP4002720B2 (ja) | 一細胞長期培養顕微観察装置 | |
| JPWO2006088154A1 (ja) | 細胞分離方法及び装置 | |
| JP2004081086A (ja) | 細胞培養マイクロチャンバー | |
| JP2024510169A (ja) | 自動細胞培養のためのプラットフォームおよびシステム | |
| JPH02186993A (ja) | 生細胞へのレーザー光照射方法 | |
| CN102666851A (zh) | 细胞粘附性光控制基材、细胞的解析区别方法及细胞的解析区别装置 | |
| WO2004018664A1 (ja) | 核酸分析チップと核酸分析装置 | |
| US11931737B2 (en) | Platforms and systems for automated cell culture | |
| JP3626952B2 (ja) | レーザー照射によって標本から個々の対象物を分離するための標本用支持装置 | |
| WO2023055543A1 (en) | Platforms and systems for automated cell culture | |
| JP2020174598A (ja) | 粒子操作方法、粒子捕捉用チップ、粒子操作システム、及び粒子捕捉用チャンバ | |
| WO2019069931A1 (ja) | 細胞培養容器、細胞の取得方法、および細胞の培養方法 | |
| JPH1062332A (ja) | レーザトラッピング装置及びこれを利用したマイクロマ ニピュレータ | |
| JP4216018B2 (ja) | 核酸回収チップと核酸回収装置 | |
| JP2007189916A (ja) | 細胞捕捉シャーレ | |
| US20080032034A1 (en) | Receiving Element For Receiving An Object Which Dissolved From A Biological Material By Means Of Laser Radiation | |
| JPH0436636Y2 (ja) | ||
| JPH04166081A (ja) | カルスヘのレーザ光の照射方法 | |
| JPH0436635Y2 (ja) | ||
| CN101215320B (zh) | 采用超声强化荷电超滤改善蛋白质分离行为的方法 | |
| JPS645486A (en) | Cell culture method and apparatus therefor | |
| JPH0714345B2 (ja) | 生試料のレ−ザ加工方法 | |
| Chen et al. | Precision isolation and cultivation of single cells by vortex and flat-top laser ejection | |
| CN116904296A (zh) | 一种基于光电镊的微藻分离提纯装置及方法 | |
| WO2019069979A1 (ja) | 細胞培養容器、細胞回収システム、細胞の取得方法および細胞の培養方法 |