JPH01500589A - 薬剤組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 薬剤組成物 本発明は一般に、生物学的活性形の蛋白質系材料の経口投与用組成物、その製法 およびその製造用の装置に関する。更に詳しくは１本発明はインシュリンの経口 投与による糖尿病治療のための組成物に関する。 多くの薬剤、医薬および療法は、非経口投与されていた。何故なら、それらは胃 および胃腸管内で分解するか或いは適切に吸収されず、従って経口投与できない からである。例えば以下に詳しく論じるように、インシュリンは糖尿症をわずら う多（の患者に皮下注射により投与される。 糖尿症は炭水化物、脂肪および蛋白質代謝に影響する慢性の疾病である。それは 、欠陥のある又は不完全なインシュリン分泌反応から生じる過血糖症および糖尿 により特徴づけられる。 その疾病には二つの主な変形が存在する。糖尿病と診断された患者の数は米国内 だけで一千万人と推定され、この数は１年当り６％の割合で増加していると思わ れる。 全ての自然発生的糖尿病の約ｌＯ％に見られる一つの変形は、インシュリン依存 性糖尿症（“ＩＤＤＭ”）又は若年性初期糖尿病と呼ばれる。この変形は初めに 若者にしばしば顕われ、そして膵臓のベータ細胞によるインシュリン分泌機能が 進行的に失われることを特徴とし、従って炭水化物代謝の維持に外からのインシ ュリンに進行的に“依存性”を示すことを特徴とする。（この特徴は、元来膵臓 疾病に不調がある。自然発生的でない、或いは“二次的な”糖尿病患者にも表わ れる。）第二の自然発生的糖尿症は、非インシユリン依存性糖尿症（“ＮＩＤＤ Ｍ”）又は成人初期糖尿症と呼ばれ、自然発生的糖尿住人口の残りを占める。 遺伝的および環境上の背景又は糖尿病の初期の年令に関係な（、全ての糖尿病は 共通してインシュリンの明らかな欠乏又は適切でないインシュリン機能を有する 。血液から筋肉および脂肪組織へのグルコースの輸送はインシュリンに依存する ので、糖尿病患者はグルコースを適切に利用する能力に欠けている。 更に、糖原分解は通常インシュリンにより阻止されるので、糖原分解が糖尿病患 者においては高められる。正常な代謝作用のこれらの両者の“障害”のため、腎 グルコース再吸収容量を超えそして糖尿が生じるまで血液中にグルコースが蓄積 する（過血糖症）ことになる。従って糖尿病患者の主なエネルギー源は、脂肪組 織に貯蔵されたトリグリセリドから誘導された脂肪酸となる。 肝臓においては、脂肪酸は酸化されてケトン体となり、該ケトン体は循環されそ して組織によりエネルギー源として使用される。ＩＤＤＭ患者においてそして時 々ＮＩＤＤＭ患者において、ケトン体の形成速度はその利用速度を越えることが あり、モしてケト−ジスが代謝性アシド−ジスと共に起り得る。組織はグルコー スに飢えているように見えるので、蛋白質の食餌および組織源が糖原分解による ブドウ糖産出に使用される。グリコーゲン、トリグリセリドおよび蛋白質の合成 のような同化過程が、糖尿分解、糖質新生および脂肪の５動化を含む異化作用活 性のための犠牲となる。従って、本来“単純”なインシュリン欠乏であった糖尿 病状態が、身体のほぼ全ての器官および組織に長期間の病理的効果を有する広範 囲の代謝障害となる。事実、糖尿病状態は、心筋梗塞、腎不全、脳血管性疾病、 アテローム性動脈硬化心臓疾病、および全身感染により引き起こされる死亡に対 して寄与する主なものの一つである。 糖尿病疾病の過血糖症および糖尿の状態は、食匣療法、体重の制御、および物理 的活動の調整によって治療し得る。幾人かの糖尿病患者、特にＮＩＤＤＭを患う 患者においては、過血糖症および糖尿の状態は、スルホニルウレア、スルホンア ミド、ビグアニドおよびその他の化合物の誘導体のような抗過血糖剤を経口投与 することにより管理できる。しかしながら、ＩＤＤＭおよび進行したＮＩＤＤＭ を患う糖尿病患者については、治療法は外からのインシュリンの投与に焦点が合 わされている。 インシュリンは、膵臓に位置するランゲルハンス小島で生成されるポリペプチド である。インシュリン分子は初めは単一ポリペプチド鎖として合成されるが、そ の活性形は二つのアミノ酸鎖が二つのシスティンジスルフィド結合で結合された ものから成るように加工される。二つの鎖の一方は、第３のジスルフィド結合の 結果、その端を折り返されている。分子全体で分子量５，７３４を有し、生物学 的活性構造を維持するために、ジスルフィド結合に依存する。 過去においては外からのインシュリンは主として牛および豚源から誘導していた が、最近は組換えＤＮＡ技術の結果、“人間”の形体で得られるようになった。 組換え源から誘導された“人間”インシュリンを入手できることは、動物源から 誘導されたインシュリンに不耐性の糖尿病患者に非常に有益であることが示され た。 それにもかかわらず、インシュリン療法に関する最も重大な問題はインシュリン の源に関するのではなく、むしろ体内へのそれの導入方法に関する。インシュリ ンの最も一般的な投与方法は、皮下注入である。この方法は不便で、苦痛であり 、そして病気の苦痛を激化させることがある。インシュリンの皮下注入は周辺の 組織に比較的高いインシュリンレベルを生じさせ、そして外からのインシュリン 活性の主要部位である肝臓を循環するインシュリンが比較的低レベルとなる。周 辺組織での高レベルのインシュリンは、血管病変（例えば血管収縮および透過性 の変化）および周辺組織に病的影響、例えば糖尿網膜症、を伴う。皮下投与され たインシュリンの周辺の循環組織に及ぼす“湿潤（ｓｗａｍｐｉｎｇ）”効果は 、肝臓に循環するインシュリンの量を減少させ得るーその結果、再び所望のイモ 謝効果を達成するために、投与量を増加することが必要となる。これらの種々の 理由のため、インシュリンの投与方法としての注入の代替法が長い間探究された 。 インシュリン注入の代替法として、幾人かの研究者は、生薬によるインシュリン の直腸内投与に努力を向けた。　プラン（Ｂｒａｈｎ）による米国特許第２．３ ７３．６２５号には、乳酸又はクエン酸のような弱有機酸を界面活性剤と組合せ て含有するインシュリン坐薬が開示されている。 サポニン、とうもろこし油、ポリオキシエチレン−９−ラウリル−アルコールお よびポリオキシエチレンラウリル−エーテル等の種々の成分を利用したインシュ リン坐薬もまた当業界で知られている。インシュリンはまた、アクリル酸−ベー ス水溶性ゲルおよび界面活性剤を含む軟質ゲルカプセルにカプセル化された。イ ンシュリンの直腸内投与法は有望の兆しを示したが、生物有効性テストの結果は 矛盾があり、その方法は不便である。 イシダ等によるＣｈｅｍ、　Ｐｈａｒｍ、　Ｂｕｌｌ、　、　２９巻、８１０頁 、は、インシュリンを口の頬粘膜を経て投与する方法を開示している。インシュ リンは、頬粘膜へ投与する前に、ココア脂肪ベースおよび界面活性剤と混合され た。犬への実験で、このようにして投与したインシュリンの生物有効性は低いこ とが例証された。 他の研究者は、インシュリンの肺臓内投与に努力を指向した。ライグレー（Ｗｉ ｇｌｅｙ）等による“糖尿病”、第２０巻、５５２頁（１９７１年）は、インシ ュリン噴露器により、直径２μｍの粒状で５０００／ｍｌ投与することを開示し ている。３０Ｕ／Ｋｇ　（体重）（全生物有効性がほぼ７ないし１６％）の投与 後、低血糖症反応が観察された。ヨシダ等によるＪ、Ｐｈａｒｍ、Ｓｃｉ、６８ 巻、６７０頁（１９７９年）には、フルオロエタンに溶解されたラクトースおよ びアセチルグリセリンモノステアレートと組合せてインシュリンを肺臓内導入す ることが開示されている。このエアーゾルは、ラビットに２．５Ｕ／Ｋｇ（体重 ）の量で投与した場合、低血糖症反応を引き起こした。 有望の兆しを示した他のインシュリン投与法は、インシュリンの鼻内投与である 。ヒライ等によるＩｎｔ、Ｊ、Ｐｈａｒｍ、、　９巻。 １６５頁（１９８１年）には、インシュリンをナトリウムグリココレート溶液の ような界面活性剤と組合せて鼻内投与することが開示されている。ナガイ等によ るジャーナル　オブ　コンドロールド　リリース（Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｃｏ ｎｔｒｏｌｌｅｄ　Ｒｅ１ｅａｓｅ　）　、１巻、１５頁（１９８４年）には、 犬にインシュリンを鼻内投与した場合、インシュリンの高い生物有効性が開示さ れている。この方法においては、結晶性インシュリンを０．ＩＮのＭＣＩ溶液に 溶解し、それに界面活性剤を添加した。次に該溶液を、０．０ＩＮのＮａＨＣｌ 溶液の添加によりｐＨ７，４に調節し、そして凍結乾燥した。次に該溶液を、鼻 内投与前に結晶性セルロースと混合した。 インシュリン投与の代替法の探究で最も注目されたのはインシュリンの経口投与 である。インシュリンの経口投与方法は、安全性、便利さ、および心地良さの理 由で非常に望ましく、そしてインシュリンの注入を含む方法の多くの欠点を回避 するであろう。インシュリンの経口投与法が明らかに望ましいにかかわらず、二 つの主な難点が経口インシュリン療法を成立させる試みの成功を制限した。 経口インシュリン療法を成立させる際の第１の主な難点は、インシュリンポリペ プチドが胃腸管内でトリプシン、キモトリプシンおよびその他の漠散性酵素のと つな酵素により不活性化されることである。インシュリンポリペプチドは比較的 簡単なポリペプチドで、二つのジスルフィド結合を有するために、胃及び胃腸管 の苛酷な条件下で容易に分解する。 インシュリンの経口投与の第２の難点は、ポリペプチドの胃および胃腸管内での 分解が回避されたとしても、胃腸膜を通して僅かしかそして一定した量で吸収さ れない。生物学的有効性が低いため、低血糖症効果を確実にするためには多量の 経口投与量を与えなければならない。種々の量のインシュリンが有効とされるた め、経口投与法の利点よりも、インシュリンの過少又は過剰投与量はインシュリ ンを全（与えないよりも健康上危険であるという事実の方が重要であり得る。 経口インシュリン投与固有の難点を克服するために、いくつかの方法がなされた 。これらの方法のい（つかは、インシュリン機能の不活性化の原因となる漠散性 胃腸酵素を不活性化するか、或いはかかる酵素による不活性化に対して耐性のあ るインシュリン類似物を提供する試みが含まれる。シチリ　（Ｓｉｃｈｉｒｉ） 等による“糖尿病”　（日本糖尿病刊行物）１．１８：　６１９　、１９７５年 には、ラビットに１５０　ＩＵ／Ｋｇ　（体重）の割合で投与した場合に低血糖 症反応を引き起すインシュリン類似物（ベーターナフチルーアゾーポリステアリ イレーインシュリン）が開示されている。他の研究者は、トリエチルアミン）（ ＣＬ並びに界面活性剤を添加することによりインシュリンのアルキル化合物を作 ることを試みた。テンプ（−）による、アメリカ糖尿病患者総会（Ａｍｅｒｉｃ ａｎ　Ｄｉａｂｅｔｉｃ　５ｏｃｉｅｔｙ　Ｍｅｅｔｉｎｇ　）　、　１９８３ 年５月、テキサス州サンアントニオ、での経口提案がある。 胃腸管内での漠敗性酵素の不活性化によりインシュリン分解を防ぐ試みは幾分成 功した。ダンフォース（Ｄａｎｆｏｒｔｈ）等による内分泌学、６５巻、１１８ 頁（１９５９年）には、イソプロピル　フルオロホスフェート（トリプシンおよ びキモトリプシンの阻止剤）およびインドール−３−アセテート（肝臓内に見出 される“インシュリナーゼ“として知られる酵素の阻止剤）と共に経口投与する インシュリン組成物が開示されている。該組成物は、ラットに経口投与した場合 、低血糖症効果を引き起すことが見出された。他の研究者は、インシュリンを膵 臓不活性化剤と共に経口投与した後、穏やかな（インシュリンの生物学的有効性 の３％と同等）低血糖症反応を開示した〔ラスコースキイ（Ｌａｓｋｏｗｓｋｉ ）等、サイエンス、１２７巻、ｔｉｉｓ頁（１９５８年）〕、他の研究者は、イ ンシュリンの経口投与が、胃内でのペプシンによるインシュリンネ活性化の結果 および腸膜を通過しての吸収が乏しいために、生物学的活性が低（なることを見 出した〔クレーン（Ｃｒａｎｅ　）等による“糖尿病”、１７巻、６２５頁（１ ９６８年）〕。 研究者等は、インシュリンを界面活性剤と共に投与することにより、経口投与さ れたインシュリンの生物学的有効性を増大させることをも試みた。ポリエチレン グリコール−１０００モノアセチルエーテルおよびラウリル硫酸ナトリウムのよ うな界面活性剤とトリエチルアミンＭＣＩとの併用は、ある程度インシュリンの 生物学的有効性を増大する能力があることが示された；但し、経口投与された３ ５単位のインシュリンは血糖レベルについて静脈内投与されたインシュリンのわ ずか４単位と同等の効果を有するにすぎなかった［トライトウ（Ｔｏｕｉｔｏｕ ）等によるＪ。 Ｐｈａｒｍ、　Ｐｈａｒｍａｃｏｌ、、　３２巻、　１０８頁（１９８０年）〕 。 努力は、インシュリンをエマルジョン系と組合せて経口投与することにも向けら れた。研究者の一つのグループ（シチリ等１．Ａｃｔａ　Ｄｉａｂｅｔ、　Ｌａ ｔ、、１５巻、１７５頁（１９７１１１年））は、水／油／水エマルジョン系を 添加したインシュリンをラットに投与することにより、低血糖効果が観察された ことを開示した。２５０　ＩＵ　７ｋｇ　（体重）の投与量は、筋肉的投与され たｌ０ＩＵ／ｋｇ投与量と同等の効果を生じることが報告された。インシュリン はまた、脂溶性ビタミンを用いて他のエマルジョンにより投与されたが、犬のよ うな動物での低血糖効果は穏やかで、投与量に敏感でない。 経口投与されたインシュリンの生物学的有効性を増大させるために向けられた最 も有望な努力のい（つかは、マイクロカプセル化されたインシュリン材料に対す る努力である。インシュリンはアクリル酸エステル中にマイクロカプセル化され （シチリ等、Ａｃｔａ　Ｄｉａｂｅｔ、　Ｌａｔ、、１５巻、１７５頁（１９７ ８年））、そして高分子ポリマーの使用も開示された。他の研究者は、インシュ リンを種々の脂質組成物からなる細胞内脂肪粒子内にマイクロカプセル化した。 細胞内脂肪粒子を含むインシュリンは、ホスホチジルコリン、コレステロールお よびステアリルアミン；シミリストイル　ホスファチジルコリン；シミリストイ ル　ホスファチジルコリンおよびコレステロールのような組成物、並びにレシチ ンおよびコレステロールおよびその他の材料を用いて形成された。 ドブレ（Ｄｏｂｒｅ）等によるＲｅｖ、　Ｒｏｕｍａｎｉａｎ　Ｍｅｄ、−Ｅｎ ｃｄｏｃｒｉｎａ１２２巻、２５３頁（１９８４年）には、経口投与用にインシ ュリンを細胞内脂肪粒子内へ捕える方法が開示されている。下記を含む、細胞内 脂肪粒子を構成するための材料が開示されている：卵黄ホスファチジルコリン、 コレステロール、ステアリルアミン、およびジパルミトイルホスファチジルコリ ン。しかしながら、細胞内脂肪粒子コーチングでさえも、封入されたインシュリ ンを、胃内に見られる塩酸および胃腸管内に見られるペプシン、トリプシンおよ びキモトリプシンのような酵素の分解作用から完全に保護することはできなかっ た。 ヨシダ等による欧州特許出願第１４０，０８５号は、リン脂質の水溶液又は水性 懸濁液の形体にある内部水性相から構成される脂質小胞を含む脂質小胞製剤を含 むインシュリンを開示している。 本発明は、経口摂取された場合に薬学的に有効量の蛋白質系化合物を与えるのに 適合した組成物を提供する。驚くべきことに、胃腸管内で分解され易くそして胃 腸管を通じて体内に首尾よく吸収される能力のない薬剤が、薬学的に有効な量で 体内に吸収されるように被覆できることが見出された。 改良された組成物は下記を含む：（ａ）薬剤；および（ｂ）脂質コーチング材： そして（ｃ）腸溶皮材料を含んでもよい。該薬剤は、脂質コーチング材を含む内 部コーチングと腸溶皮コーチング材を含む外部コーチングとにより被覆されてい る。該組成物は脂肪分解（ｌｉｐｏｌｙｔｉｃ）酵素を含んでもあるいは該酵素 と共に投与してもよい。該組成物は更に水溶性コーチング材、結合材、界面活性 材料、乳化剤、安定剤、殺菌剤、および酵素阻止剤を含んでもよい。 本発明の別の態様において、改良された組成物は、（ａ）薬剤：（ｂ）脂肪蛋白 質材料；および（ｃ）脂質コーチングを含み、そして　（ｄ）水溶性コーチング および（ｅ）腸溶皮材料を含んでもよい。該薬剤は該脂肪蛋白質に結合され、そ して得られた生成物は水溶性コーチングで被覆されそして次に脂質内部コーチン グで被覆されていてもよく、該内部コーチングは外部腸溶皮コーチングで被覆さ れていてもよい。該組成物は脂肪分解酵素を含んでもよ（；或は該酵素と共に投 与することができる。該組成物は更に結合材、界面活性材料、乳化剤、安定剤、 殺菌剤および酵素阻止剤を含んでもよい。 本発明の一態様において、インシュリンは乳化剤／可溶化剤、界面活性剤、酵素 阻止剤、消泡剤および殺菌剤を含む組成物と混合される。該混合物は次に、ポリ エチレンゲルコール脂肪酸エステルを含む脂質コーチングで被覆される。該材料 は次に腸溶皮で更に被覆され、次に硬質ゲルカプセル又は錠剤中に入れられるか 、或いはカプセル又は錠剤に入れられそして次に被覆される。各錠剤又はカプセ ルは２５０ｍｇの重さであり、そして豚の結晶性インシュリンを１６国際単位含 む。 本発明の別の態様において、インシュリンは、脂質；アミノ酸；結合剤：酵素阻 止剤：消泡剤；および水溶性材料の少な（とも１種を含む組成物と混合される。 該混合物は次に、トリグリセリド、リン脂質およびコレステロールを含む脂質コ ーチングで被覆される。得られた生成物は次にゲルカプセル内に入れられ、そし て腸溶皮で被覆される。 本発明の更に別の態様において、経口インシュリン配合物は約２．００ｍｍの大 きさの粒状物からなる。好ましくはクエン酸粒子を重炭酸ナトリウムで被覆して 粒子を形成し、それを次に脂質で被覆する。得られた粒子を経口インシュリン配 合物で被覆し、そして次に腸溶皮溶液で被覆する。 更に別の態様において、脂質コーチング層および次に腸溶皮で被覆されたインシ ュリン粒子を、リパーゼおよび胆汁酸塩の腸溶皮被覆粒子と共にカプセルに入れ る。好ましくは、重炭酸ナトリウムおよびクエン酸もまた該カプセルに加える。 上記組成物を製造するための装置は、室を有する容器を含む。該室の底部には、 穴をあけた回転円板、空気流動（エアーフロー）手段および細断機がある。該室 の底部の上にノズルが位置する。組成物を生成するために、粒子を該室の底部に 置き、そして細断機で細断する。空気流動手段は粒子を該室内に浮遊させる。薬 剤をノズルから噴霧して、該薬剤を該粒子と結合させる。薬剤が粒子と結合した 後、結合粒子を次に、ノズルから噴霧された脂質コーチング材で被覆する。脂質 コーチングを適用した後、腸溶皮を適用することができる。 第１図は、ジェットミルの断面略図を示す。 第２図は、第１図のジェットミルの断面図を示す。 第３図は、スビルーアーフロ−（Ｓｐｉｒ−Ａ−Ｆｌｏｗ）の断面略図を示す。 第４図は、例１の組成物のクロマトグラフである。 第５図は、例１の組成物の顕微鏡写真である。 第６図は、例１の組成物の顕微鏡写真である。 第７図は、二頭の豚の静脈血清糖レベルの比較であり、一方は例１の組成物を与 えられ、そして他方はアクトラビッド（Ａｃｔｒａｐｉｄ）を与えられている。 例１の組成物を与えられた豚の静脈血清糖レベルは“Ｏ”で表わされ、そしてア クトラビッドを与えられた豚の静脈血清糖レベルは“Ｘ”で表わされる。 Ｘ軸は分であり、そしてｙ軸は血清グルコースのミリモルである。 第８図は、例１の経口インシュリンであるタング−シン（Ｔａｎｇ−Ｓｈｉｎ） インシュリンと、試験１−Ｄの試験に準拠するノボ（ＮＯＶＯ）インシュリンと の比較である。 第９図は、例１の経口インシュリンと試験１−Ｈに準拠する通常に注入されたイ ンシュリンとの比較である。 第１０図は、例１の経口インシュリンと試験２−Ｂに準拠する例２の経口インシ ュリンとの比較である。 第１１図は、例１の経口インシュリンと試験２−Ｂに準拠する例２の経口インシ ュリンとの比較を示す。 第１２図は、例６の血液グルコースレベルに対する影響を示す。 第１３図は、注入可能なインシュリンと例６との比較を示す。 第１４図は、注入可能なインシュリンと例６との比較を示す。 第１５図は、注入可能なインシュリンと例６との比較を示す。 第１６図は、例６の血液グルコースレベルに対する影響を示す。 第１７図は、例６の血液グルコースレベルに対する影響を示す。 第１８図は、例６の血液グルコースレベルに対する影響を示す。 第１９図は、注入可能なインシュリンと例６との比較を示す。 第２０図は、注入可能なインシュリンと例６との比較を示す。 第２１図は、注入可能なインシュリンと例６との比較を示す。 第２２図は、例７の経口インシュリンと通常の注入可能なインシュリンとの比較 を示す。 第２３図は、ＣＦ造粒機の断面略図を示す。 第２４図は、例１２の経口インシュリン粒状物の略図である。 第２５図は、例１２のインシュリン配合物を投与された犬の血液内のインシュリ ンレベルを示す。 第２６図は、例１２の経口インシュリン粒状物が犬の血糖レベルに及ぼす影響を 示す。 第２７図は、例１２の経口インシュリンが犬の血漿グルコースレベルに及ぼす影 響を示す。 第２８図は、例１１の経口インシュリン配合物と例１２の経口インシュリン配合 物との血糖に及ぼす影響を示す。 第２９図は、例１３の経口インシュリン配合物が血糖に及ぼす影響を示す。 本発明は、生物学的活性形の選択された蛋白質系化合物材料を経口投与するのに 適合した組成物を提供する。前に論じたように、多くの薬剤、薬物および治療法 は経口投与できなかった。何故なら、それらは胃および／又は胃腸管内で分解さ れるか成るいは十分に吸収されなかったからである。これらの薬剤の例には特に 次のものが含まれる：インシュリンー糖尿病治療用；ウロキナーゼ（ｕｒｏｋｉ ｎａｓｅ）−血栓症治療用；因子（Ｆａｃｔｏｒ）■−血友病治療用；ロイプロ リド　（ｌｅｕｐｒｏｌｉｄ　）−腸（ｐｒｏｓｔ−ｒａｔｅ）ガン治療用；ガ ングリオシド（ｇａｎｇｌｉｏｃｉｄｅｓ）−神経伝達改善用；ビンクロスチン （ｖｉｎｃｒｏｓｔｉｎｅ）−ガン治療用：ベロマイエイン（ｂｅｌｏｍｙｅｉ ｎ）−ガン治療用；アドリアマイシン　（ａｄｒｉａ−ｍｙｃｉｎ）−ガン治療 用；リドカイン（ｌｉｄｏｃａｉｎｅ）−心臓不整脈治療用；およびセファロス ポリジン（ｃｅｐｈａｌｏｓｐｏｒｉｄｉｎｅｓ）−感染治療用。他の薬剤及び 薬物は、経口投与され、た場合、あまり吸収されない、例えばゲンタミシン（ｇ ｅｎｔａｍｉｃｉｎ）、エリスロマイシン　（ｅｒｙｔｈｒｏｍｙｃｉｎ）　、 プレチリウム　トシレート（ｂｒｅｔｙｌｉｕｍｔｏｓｙｌａｔｅ）　、セチェ ダイル（ｃｅｔｉｅｄｉｌｅ　）、シフランデレート（ｃｙｃｌａｎｄｅｌａｔ ｅ）、およびクロラムフェニコール（ｃｈｌｏｒａｍｐｈｅｎｉ−ｃｏｌ）であ る。 殆んどの患者に対してこれらの薬剤の経口投与はより便利であり、そして超人か に対してより治療効果があるであろう。本発明は、以前非経口投与しなければな らなかった蛋白質系化合物を薬学的に有効な量で経口投与できる組成物を提供す る。 このために、本発明の一態様において、該組成物は固体の乳化剤および界面活性 剤から本質的に成る粒子を含み、この粒子に選ばれた生物学的に活性な蛋白質系 材料が該粒子の表面に結合剤によって結合されている。次に脂質コーチングが該 粒子および蛋白質系材料上に適用される。該粒子は平均直径約１ミクロンないし 約坏ミリメートルを有することができるが、好ましくは該粒子は平均直径約１な いし約１００ミクロンを有する。脂質コーチングは、好ましくは該粒子および蛋 白質系材料上に約０．０５ないし１．０ミクロンの厚さで被覆する。該脂質コー チングは腸溶皮層で被覆することができる。 本発明の別の態様において、蛋白質系材料は脂肪蛋白質粒子に結合されている。 該粒子は平均直径１ミクロンないし坏ミリメートルを有することができるが、好 ましくは該粒子は平均直径工ないし１００ミクロンを有する。該粒子は次に水溶 性材料で被覆され、そして得られた生成物は脂質コーチングで被覆される。該脂 質コーチングは好ましくは厚さ約０．１ないし約０．３ミクロンを有する。得ら れた生成物をゲルカプセル内に入れ、そして次に腸溶皮で厚さ約０．１ミクロン ないし約０．３ミクロンに被覆することができる。 別の態様において、蛋白質材料は粒状物上に被覆される。該粒状物はクエン酸の 粒子（好ましくはｌｏｏ〜１５０グラムの太きさ）上に重炭酸ナトリウムおよび 所望により少量の澱粉を被覆することにより形成される。蛋白質系材料を含む配 合物を次に該粒状物上に被覆する。得られた生成物を次に腸溶皮で被覆する。得 られた粒状物は好ましくは２．０ｍｍ未満の大きさを有する。生理学的には、２ ．００１１！１未満の粒サイズが急速に十二指腸内に入れることができる。粒状 物を大きいゲルカプセルではなく小さい硬質ゲルカプセルに入れることにより、 腸内吸収も増大する。重炭酸ナトリウムおよびクエン酸を、粒状物の製造におい て或いは配合物と共に粉末として使用すると、該カプセル又は粒状物の急速な破 裂および開口が促進され、従って蛋白質系材料が十二指腸内で放出される。勿論 、例えば、クエン酸ナトリウムおよびその他の重炭酸塩（例えば重炭酸カリウム ）のような他の化合物をこの破裂効果を促進するために使用できる。 腸溶皮は、組成物が胃内で分解されることなく腸管に入るのを確実にする。腸管 内で腸溶皮は溶解する。脂質コーチングは、組成物が使用者のリンパ管系へ入る のを確実にする。このために、脂質コーチングは組成物に絨毛（ｖｉｌｌａｅ） 　（腸膜内のリンパ管系の末端開口部）との親和性を付与する。薬剤が脂肪蛋白 質粒子に結合されると、これらの粒子は該薬剤の組織への吸収を増大させる。脂 肪蛋白質は細胞膜を容易に浸透し、従って該薬剤を使用者の組織に運ぶベヒクル となることが見出された。 この時、薬剤がインシュリンであると、脂肪分解酵素も投与すべきであると思わ れる。脂肪分解酵素は組成物と組合せるか、或いは別個の錠剤又はカプセルの形 で投与することができる。脂肪分解酵素は、脂質被覆材料が絨毛内に吸収される のを高める。 本発明の組成物の好ましい成分を以下に示す。 ！豆！及旦上 本発明で有用な生物学的活性の蛋白質系材料又は薬剤は、胃腸管内で分解され易 い薬剤又は胃腸管から体内に十分に吸収されない薬剤を含み得るが、これらに限 定されない。これらの薬剤には動物又は組換え源からのインシュリン、並びに特 に以下のものを含むその他の薬剤が含まれる：ウロキナーゼ（ｕｒｏｋｉ−ｎａ ｓｅ）、因子Ｉ［１（Ｆａｃｔｏｒ　ＩＩＩ）　、　ロイプロリド（ｌｅｕｐｒ ｏｌｉｄ）　、ガングリオシド（ｇａｎｇｌｉｏｃｉｄｅｓ）、ビンクリスチン （ｖｉｎｅｒｉｓｔｉｎｅ）　、ベロマイエイン（ｂｅｌｏｍｙｅｉｎ）、リド カイン（ｌｉｄｏｃａｉｎｅ）　、セファロスポリジン　（ｃｅｐｈａｌｏｓｐ ｏｒｉｄｉｎｅｓ）、ゲンタミシン（ｇｅｎｔａｍｉｃｉｎ）、プレチリウム　 トシレート（ｂｒｅｔｙｌｉｕｍ　ｔｏｓｙｌａｔｅ）、セタイダイル（ｃｅｔ ｅｉｄｉｌｅ）、シフランデレート（ｃｙｃｌａｎｄｅｉａｔｅ）、エリスロマ イシン（ｅｒｙｔｈｒｏｍｙｃｉｎ）、クロラムフェニコール　（ｃｈｌｏｒａ ｍｐｈｅ−ｎｉｃｏｌ）、アドリアマイシン（ａｄｒｉａｍｙｃｉｎ）、および ストレプトキナーゼ（ｓｔｒｅｐｔｏｋｉｎａｓｅ）。 五！二二±之ｌ這 本発明で有用な脂質コーチング材には、小腸の絨毛（ｖｉｌｌａｅ）により引き 寄せられそしてそれに引き寄せられる、チクロミクロン（ｃｈｙｃｌｏｍｉｃｒ ｏｎ）様の物質が含まれる。かかる物質には次のものが含まれるが、それらに限 定されない：ポリエチレングリコール脂肪酸エステル、グリセロホスファチド、 ホスファチジイレホスフェート、卵黄レシチン、オレイン酸、ステアリン酸、パ ルミチン酸エステル、コレステロール、モノ−、ジー、およびトリーグリセリド 、コレステロールエステル、卵黄レシチン含有５〜２０％ホスファチジン酸、リ ノール酸、リルン酸、ラウリン酸、ホスファチジイレ　ホスフェート、グリセリ ン、大豆油、ごま種油、およびスロメタン（ｔｈｒｏｍｅｔｈａｎ）。これらの 脂質コーチング材は薬剤の表面上に被覆された後、薬剤を封入するばかりでな（ 、かかる薬剤粒子の絨毛、即ち脇腹でのリンパ管の末端開口部、に対する“親和 性”および絨毛への吸収”を増大させ、従って薬剤はリンパ系に吸収される。 十分に機能することが見出された脂質コーチング組成物は次の通りである： モノ−、ジー、およびトリーグリセリドの形体であり得る脂質８０〜９０％； リン脂質６〜９％； コレステロール−エステル２％および遊離コレステロール１％；および 遊離脂肪酸（ＮＥＦＡ）　１％未満。 低分子量蛋白質／アミノ酸約２％を添加してもよい。 上記のコレステロール−エステルは下記の通りである：コレステロールーリノー ル酸エステルとして３０％；コレステロール−オレイン酸エステルとして２０％ ；およびコレステロール−パルミチン酸エステルとして２２％。 ｌ預己Ｕ生魁 本発明で有用な腸溶皮材料には、胃内での分解に耐性であるが腸管の条件では分 解して被覆された材料を露出するコーチング材が含まれる。かかる腸溶皮材料に は下記の成分の一つ又は組合せたものが含まれるが、これらに限定されない：ヒ ドロキシプロピルメチルセルロース　フタレート、ポリエチレングリコール−６ ０００、およびセラック。それらはジクロロメタン、エタノールおよび水、セル ロース　フタレート、又はポリビニルアセテート　フタレートを含む溶媒中に溶 解してもよい。 インシュリンを被覆するのに好ましい腸溶皮材料は、４．５重量部のヒドロキシ メチルセルロース、０．５重量部のセラック、０．５重量部のポリエチレングリ コール−６０００を含む。この材料を４７．３部のジクロロメタンと３７．８部 のエタノール中に溶解する。次に腸溶皮材料を水で希釈して最適濃度とし、そし て本発明の組成物に塗布する。 ｉ肌ｌ旦亘五１ 本発明で有用な脂肪蛋白質材料は、結合して低密度脂肪蛋白質を形成することが できる脂質および蛋白質を含む。好ましくは、低密度脂肪蛋白質は人間の低密度 脂肪蛋白質側面を模倣したものである。 脂質成分にはコレステロール、オレイン酸、ステアリン酸、ラウリル硫酸ナトリ ウム、レシチン、ラウリル硫酸ナトリウムとレシチン、ホスファチド、バルミチ ン酸およびホスファチドホスフェートコリンが含まれるが、これらに限定されな い。 蛋白質成分にはあらゆるアミノ酸又は低分子量蛋白質が含まれるが、これらに限 定されない。最も好ましいアミノ酸にはアルギニン、リジン、ヒスチジンおよび アスパラギン酸が含まれ、そして最も好ましい蛋白質としてはアルブミンおよび グロブリンが含まれる。 好ましくは、脂質は低分子量蛋白質又はアミノ酸と、分子量で１＝１ないし約３ ：１の割合で結合される。好ましい態様においては、脂質と蛋白質はｌ：１の割 合で結合されている。 コレステロールエステル（４６％）、遊離コレステロール（１４％）、リン脂質 （２５％）、脂肪（１４％）、および　ＮＥＦＡ　（ＦＦＡ）約１％からなる脂 質組成物が２０〜２５重量％のアミノ酸と結合された場合、申し分なく作用する ことが見出された。 溶付コーチング　車・ 本発明で有用な水溶性コーチング材料には、親水性コーチングを与える化合物が 含まれ、次のものが含まれるが、それらに限定されないニジクロロメタン、エタ ノールおよび水、セルロースフタレート、およびポリビニルアセテートフタレー ト中に溶解した、ヒドロキシプロピルメチルセルワースフタレート、ポリエチレ ングリコール−６０００、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプ ロピルセルロース、結晶性セルロースおよびセラック。蛋白質系材料が脂肪蛋白 質に結合され、そして水溶性コーチングで被覆される場合には、好ましくは該材 料は約０．０５ないし約０．５ミクロンの厚さを有するコーチングで被覆する。 区念旦五 本発明で有用な結合材料は、ペプチドを脂質又は脂肪蛋白質に結合する化合物で ある。これらには、微結晶性セルロース、メチルセルロース、エチルセルロース 、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、メ チルヒドロキシプロピルセルロースゼラチン、ポビドン　（ｐｏｖｉｄｏｎｅ） 　。 およびポリエチレングリコール脂肪酸エステル群が含まれるが、これらに限定さ れない。 胆坊玉ｌｊｌ二 本発明で有用な脂肪分解酵素は、脂質が絨毛へ吸収されるのを促進する酵素であ る。これらの酵素には、特に膵臓リパーゼを含めたリパーゼ、アミラーゼ、プロ テアーゼ、および胆汁酸塩が含まれる。脂肪酸および脂質の腸吸収は、・胆汁酸 塩の存在下で膵臓リパーゼにより高められそして促進される。従って、蛋白質系 材料が胆汁酸塩の存在下で脂肪蛋白質膵臓リパーゼで被覆されると、蛋白質系材 料の吸収が増加するであろう。必要に応じて、脂肪分解酵素を組成物と組合わせ るか或いは別個の錠剤又はカプセルとして投与してもよい。薬剤がインシュリン の場合に満足に作用することが見出された脂肪分解酵素混合物には、膵臓リパー ゼ、アミラーゼ、プロテアーゼおよび胆汁酸塩が含まれる。 五１１ 蛋白質系材料が脂肪蛋白質に結合される場合には、充填剤を使用し得る。充填剤 は物理的結合剤として使用しても或いはかかる結合剤として使用されなくてもよ い。充填剤にはアラビアゴム、結晶性セルロース、ヒドロキシプロピルセルロー ス、およびヒドロキシプロピルメチルセルロースが含まれるが、これらに限定さ れない。 １皿孟ユ且上 本発明に有用な界面活性材料は、絨毛への吸収をより促す化合物を含み、カチオ ン性、アニオン性又は非イオン性界面活性剤、例えばラウリル硫酸ナトリウム、 ステアリルアミン、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ポリエチレンアルキルエス テル、ポリオキシエチレンアルキルフェニルエステル、脂肪酸モノグリセリド、 ソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン脂肪酸アミン、およびポリエチ レングリコール脂肪酸エステルが含まれるが、これらに限定されない。 瓦化別 本発明で有用な乳化剤には、盃２　ヴイボでエマルジョンを生成する化合物が含 まれ、下記の物質又は該物質の組合せが含まれるが、それらに限定されない：コ レステロール、ステアリン酸、ステアリン酸ナトリウム、パルミチン酸、バルミ チン酸ナトリウム、オレイン酸、オレイン酸ナトリウム、グリセリルモノステア レート、ポリエチレン５０ステアレート、ポリオキシ４０ステアレート、ポリソ ルベート２０、ポリソルベート４０、ポリソルベート６０、ポリソルベート８０ 、プロピレングリコールジアセテートおよび、プロピレングリコールモノステア レート。 乳化剤はまた、人間の血漿に見られる“低密度脂肪蛋白質”に似たものとなる化 学物質および成分を含み、例えばアルギニンＨＣＩ　、アラビアゴム、コレステ ロール、コレステロールエステル、リン脂質、および脂肪酸を含む。 斉ｌおよび　素β　斉１ 本発明で有用な安定剤および酵素阻止剤は分解哨乳類酵素、例えばベブチターゼ 、プロテアーゼ、ホスホリラーゼ、グルタチオン−インシュリン−トランスヒド ロゲナーゼ、およびインシュリン分解酵素、即ちインシュリナーゼの作用を不活 性化又は阻止することができる化合物である。安定剤化合物にはステアリルアミ ン、ステアリルアルコール、クエン酸、乳酸、トリエチルアミンＨＣＩピロホス フェート、トリエタノールアミン、オボムコイド、エチレンジアミンテトラアセ テート、ヨードアセトアミド、フェニルヒドラジン、ヒドロキシルアミンおよび ８−ヒドロキノリンが含まれるが、これらに限定されない。 秋ｘμ 本発明で有用な殺菌剤は、微生物の混入、および薬剤化合物およびそれに結合し た結合剤、コーチングおよび添加剤の微生物分解を防止することができる化合物 である。殺菌剤を選ぶ際には、膣剤の微生物活性を、薬剤組成物の他の化合物と の適合性並びに処理すべき生物に対するその殺菌剤固有の毒性と釣り合せなけれ ばならない。これらの要件を一般に満す殺菌性化合物にはメチルパラベン、エチ ルパラベン、プロピルパラベン、ブチルパラベン、フェノール、デヒドロ酢酸、 フェニルエチルアルコール、安息香酸ナトリウム、ソルビン酸、チモール、チメ ロザール、デヒドロ酢酸ナトリウム、ベンジルアルコール、ブチルパラベン、ク レゾール、ｐ−クロロ−ｍ−クレゾール、クロロブタノール、酢酸フェニル水銀 、ホウ酸フェニル水銀、硝酸フェニル水銀およびベンジルアルコニウムクロリド が含まれるが、これらに限定されない。 本発明は、下記の例を参照すると一層良（理解されるであろう。 一亘−−一二一 この例では、インシュリンの経口投与に適する組成物を本発明に従って製造する 。平均直径はぼ５０ミクロンを有する粒子をコレステロール、ラウリル硫酸ナト リウム、および抗菌性防腐剤としてのメチルおよびプロピルパラベン（ｐＨ６） の混合物から製造した。この粒子は、日本国、東京、フロイント　インターナシ ョナル社（Ｆｒｅｕｎｄ　Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　Ｌｔｄ、）から入手で きるジェット・ミル（Ｊｅｔ　Ｍｉｌｌ）を使用することにより製造した。 第１および２図は、ジェット・ミルｌＯを図解して示している。製造されるべき 粒子を振動供給装置により送込室に送る。 この送込室中の粒子を空気ノズル１３を通る気流によって微粉砕室１２内に運ぶ 。懸濁している粒子を運ぶ気流に対抗して、空気ノズル１４を通してカウンター 気流を適用する。これらの気流は、矢印によって示されている。これにより、円 形微粉砕室１２内で粒子の微粉砕作用が起こる。ノズルを通る気流はこの室内で の微粉砕作用を調整するように調節される０粒子は所望直径大まで微粉砕されて から、微粉砕室の中央の排気口１５へ運び出される。分離器６は、粉砕した粒子 を、空気は排気管の口８を通して排出されるけれども粒子は集塵びん７中に堆積 させられるように、管理する。 次に、結晶性の単−成分豚インシュリン［デンマーク国、ベイガーベヤード、ノ ボ（ＮＯＶＯ）から得た］を８重量％のヒドロキシ−プロピルセルロースおよび ０．００５Ｍのラウリル硫酸ナトリウム、０．００５ＭのトリエチルアミンＨＣ Ｉおよび０．００５Ｍのクエン酸より成る溶液を用いてこの粒子に結合させた。 その表面にインシュリンを結合させた粒子を、次に、６重量％のポリエチレング リコールモノステアレート［日本国、東京、花王（ＫＡＯ）から得たエマノン（ ＥＭＡＮＯＮ）　−３１９９］　より成る溶液で被覆して、はぼ０．１ミクロン の厚さの脂質コーチングを形成させる。次に４７，３容量部のジクロロメタンお よび３７．８容量部のエタノールより成る溶液に４．５Ｗ／Ｗ％のヒドロキシメ チルセルロースフタレート（ＲＰＣ−５５）　、０．５　Ｗ／Ｗ％のセラック［ 日本国、シンエラ・ケミカル（Ｓｈｉｎ−Ｅｔｓｕ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ）］およ び０．５Ｗ／Ｗ％のポリエチレングリコール−６０００［日本国、シンク・ヤク ヒン（ＳｈｉｎＷｈａＹａｋｕｈｉｎ）　］を溶解させることによって、腸溶皮 溶液を製造した。次いでこの溶液を水で希釈して、脂質被覆粒子を次に、はぼ０ ．１ミクロンの厚さの腸溶皮で被覆するように、最適濃度にする。次いで２５０ ｍｇの腸溶皮被覆粒子を手で硬質ゼラチンカプセル内に詰めた。 この組成物は、改造された“フロイント（Ｆｒｅｕｎｄ）”スビール３Ｐ［日本 国、東京、フロイント・インターナショナル（Ｆｒｅｕｎｄ　Ｉｎｔｅｒｎａｔ ｉｏｎａｌ）から入手可能］を使用して製造した。 標準のスビールーアーフロー（Ｓｐｉｒ−Ａ−Ｆｌｏｗ）は、次のように改造さ れた。ローター内のメツシュ穴が大きすぎることがわかった。従って、２つのメ ツシュ環を追加した。これらのメツシュ環も、粒子が通りぬけて落ちないように 方向をつけた。 スビールーアーフロ−（Ｓｐｉｒ−Ａ−Ｆｌｏｗ）もポンプで送られる空気が乾 燥され、すべての油が粒状除去されるように改造された。空気は絶対湿度２０％ まで乾燥させた。気流圧も毎分９２０リツトルまで増加させ、この気流を、それ が底を通って吹き上がるように方向づけだ。 さらに、底面の１つの空気送込口の代りに、４つの口を使用した。これらの口は 、底面で０６．９０’　、１８０°および２７０°に方向づけだ。バッグフィル ターおよびパルシングフィルターもまた、その長さの％に切った。 その上、容器の底にある１つのノズルの代りに、３つのノズルを容器の底で方向 づけだ。第４の被覆用ノズルも容器の頂部に位置を定めた。底のノズルは結合の ために使用し、頂部のノズルは被覆に使用した。 第３図は、スビールーアーフロ−（Ｓｐｉｒ−Ａ−Ｆｌｏｗ）装置２ｏを具体的 に示している。簡単にいえば、スピールーアーフロー（Ｓｐｉｒ−Ａ−Ｆｌｏｗ ）装置２０は、次のように機能する。粒子を回転ディスク２２の上に置く。この 回転ディスク２２にはメツシュ穴３１特表平１−５００５８９（１１） がある。チョッパー２９と撹拌機２１とはディスク２２と共働して、粒子を与え られた大きさにする。次に気流を出して粒子を容器２６内に懸濁させる。スリッ ト空気と流体空気の２つの型の気流を発生させる。スリット気流は口３３を通っ て入るが、−力流体空気は口３２を通って入る。懸濁した粒子は、次に下方のノ ズル２７から噴霧される結合溶液により被覆されることができる。下方のノズル ２７は一つだけが改造スビールーアーフロー（Ｓｐｉｒ−Ａ−Ｆｌｏｗ）　２０ 中に示されているけれども、３つの下方の噴霧ノズル２７を使用した。粒子は被 覆されるとともにディスク２２に落ちてもどる。一旦粒子がすべて結合剤で被覆 されたら、気流を増大させ、被覆された粒子を再被覆することができ、これをく り返すことができる。本明細書中で後に論する通り、粒子はまた上方のノズル２ ８から噴霧される溶液により被覆することもできる。 粉末状粒子の結合および被覆における（り返し運動のため、粒子は、十分に混合 され、湿潤され、混練され、そして非常に有効に混転されて、極めて迅速に高品 質の顆粒に変わる。ディスクの有孔部を通る熱気流がこの顆粒を能率的にそして 有効に乾燥させる。もし、微粉状の物質が発生して頂部まで上がるならば、この 微粉をバッグフィルター２４によって集める。エアジェツト清浄可ノズル２５は 、フィルターによって集められた微粉状物質を必要に応じて底のディスク２２に 吹きもどすために使用される。 回転ディスク２２およびチョッパー２９は、組合わさって、高いい機械的強度、 高い嵩密度および狭い粒子サイズ分布の、球状でなめらかな面を有する粒子を形 成する。この例の組成物を製造するために、固体の乳濁液−可溶化剤、界面活性 剤、抗菌性防腐剤を、送込口を通じて容器内に入れた。粉末原料が容器内に入れ られたとき、ゆるい気流が、回転ディスクの有孔部および、回転ディスクと室（ 容器）の内壁との間の円周方向の間隙を通って吹き上げられた。空気の流れが、 原料がこの間隙および有孔部を通って落下するのを妨げる。 回転ディスク２２、撹拌機２１、およびチョッパー２９は、原料が挿入された後 に始動させた。例１の組成物を製造するために、ロークーは（従って有孔ディス クは）毎分３００回転の速度（ｒ、ｐ、ｍ、）で回転させ、チョッパーは２，０ ００　ｒ、ｐ、ｍ、で、そして撹拌機は５００　ｒ、ｐ、ｍ、で回転させた。温 度３２ないし３５℃で気流は、流速毎分８ないし１０リツトルでローター内の開 口部を通過しく“流体空気”）、フないし８リットル／分でローターと壁との間 のスリットを通過する（“スリット空気”）。結合した粒子は３０分間乾燥させ た。 結晶性インシュリン（ノボの単−成分豚結晶性インシュリンバッチ番号８３３１ １５、ロット番号６９１９５−０１　）を、ヒドロキシ−プロピルセルロース、 ラウリル硫酸ナトリウム、クエン酸、およびトリエチルアミンＭＣＩ、ｐＨ２， ０を含有する溶液に完全に溶解させた。 粒子が“スリット空気”および“流体空気”によって被覆ならびに結合装置の壁 内で吹き上げられている間に、結合溶液を微細な霧として、噴霧気圧３．０　ｋ ｇ／Ｍ”、空気の流速１０リットル／分で、２重噴霧ノズルから噴霧した。 次に、インシュリン結合した固体乳化粒子を、ポリエチレングリコール脂肪酸エ ステル類［日本国、花王石鹸（ＫＡＯ５ＥＫＫ　−ＥＮ）　：エマノン（ＥＭＡ ＮＯＮ）　３１９９．ロット番号１２７４４　ｙ　］の溶液より成る脂質皮膜で 、噴霧気流速１０リツトル／分および噴霧気圧３．０　ｋｇ／Ｍ”で被覆した。 次に上で被覆したインシュリン−結合固体乳化粒子を硬質ゲルカプセル内に入れ 、これらのカプセルを次に腸溶皮被覆した。 こうして得られる各３５０ｍｇカプセルは、次のものを含　有した： （３５０ｍｇカプセル） −６，７６Ｘｌ０−’Ｍ −１，３７７ｘ　１０−’Ｍ −１，５４３Ｘ　１０−”Ｇｍ インシュリン［ノボ（ＮＯＶＯ）　］　−８単位クエン酸は、インシュリン安定 化剤およびｐＨ調整剤と同様、インシュリンネ活性化酵素の阻害剤として使用さ れる。 トリエチルアミンＨＣＩは、インシュリン安定化剤としてモして消泡剤として、 使用される。 仄秩−上二五 この試験では例１の経口用インシュリン組成物を、アクトリピッド（Ａｃｔｒｉ ｐｉｄ）静脈内用インシュリン溶液〔ノボ（ＮＯＶＯ）　］の試料と化学的に比 較した。例１に従って製造したノボ（ＮＯＶＯ）単−成分豚の結晶性インシュリ ン８国際単位（１，Ｌｌ、　）を含有する経口用インシュリン組成物ｌカプセル を、５分間ウルトラソニファー（ｕｌｔｒａｓｏｎｉｆｅｒ）を用いる音波発生 によって、水に溶解させた。この溶液の半分（％）　−−４１，Ｕ、の経口用イ ンシュリン組成物を含有するｍ−を、逆相（ｒｅｖｅｒｓｅｐｈａｓｅ）クロマ トグラフィーを用いて分析した。４　１．Ｕ、のノボ（ＮＯＶＯ）アクトリピッ ドインシュリンも１．逆相クロマトグラフィーを用いて分析した。この結果は、 両方の試料が同一量の化学的に当量のインシュリンを含有することを示した。（ 第４図参照）。 区１−土二１ この試験では、走査電子顕微鏡を用いて、例１の経口用インシュリン組成物の顕 微鏡写真を写した。粒子の腸溶皮および脂質コーチングを、水中のジクロロメタ ン４７．３容量部およびエタノール３７．８容量部より成る溶媒により除去した 。５００Ｘ倍率での粒子の顕微鏡写真は、比較的大きなコレステロールおよびラ ウリル硫酸ナトリウム材料の粒子（平均直径約５０ミクロン）に付着した比較的 小さなインシュリンおよびヒドロキシプロピルセルロース結合剤材料の粒子（平 均直径約５ないし１０ミクロン）を示した。（第５図参照）　、　３０００ｘの 倍率では、棒の形のインシュリン結晶が、ヒドロキシプロピルセルロース粒子内 に含浸されて見える。（第６図参照）。 区腋−上二旦 この試験では、例１の経口用インシュリン組成物を生物検査において、アクトリ ピッド静脈内用インシュリン溶液［ノボ（ＮＯＶＯ）　］　と比較した。２匹の ヨークシャー豚を一晩絶食させ、一方の豚には８　１．Ｕ、のアクトリピッドイ ンシュリンを静脈内投与した。もう一方の豚には５０ｍ１の水に溶解させた例１ の経口用インシュリン８１．Ｕ、を１５分かけて静脈内注入した。その対の豚か ら血液をとり、血清糖レベルを測定した。例１の組成物に対する低血糖作用の期 間は、アクトリピッドインシュリンの低血糖作用の期間よりもいくらか長いけれ ども、この２匹の豚の静脈血清糖レベルはおおざっばには同程度減少した。（第 ７図参照）。 試Ｍ−一り二旦 この試験では、例１の経口用インシュリン組成物を静脈内の兎による生物検査に おいて、ノボ（ＮＯＶＯ）単−成分豚結晶性インシュリンおよび適音の注射用イ ンシュリン−４０［トン−シン・ファーマシニーティカル社　（Ｔａｎｇ−Ｓｈ ｉｎ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ・ＣＯ，）］　と比較した。各々体重１． ８　Ｋｇの３匹の白兎を一晩絶食させ、各々４１．Ｕ、のノボ（Ｎ０ＶＯ）イン シュリン、トン−シン（Ｔｏｎｇ−Ｓｈｉｎ）インシュリン−４０、または例１ の経口用インシュリン組成物より成る乳濁液のいずれかを１０分かけて静脈内注 入することにより処置した。インシュリン注入の３０分前および注入完了後０， １５．３０．４５．６０．７５．９ｏおよび１０５分でこれらの兎の各々の耳の 静脈から静脈血試料を集めた。 ３つの形のインシュリンは各々、注入の開始の３０分以内に起こる低血糖作用の 初期についてはほぼ同じ低血糖効果を示した。ノボ（ＮＯＶＯ）インシュリンの ピークの低血糖効果の時間は注入の完了後３０分以内であると決定されたが、ト ン−シン（Ｔｏｎｇ−Ｓｈｉｎ）インシュリン−４０については、それは６０分 であった０例１の経口用インシュリン組成物の乳濁液は、ノボ（ＮＯＶＯ）イン シュリンとトン−シン（Ｔｏｎｇ−Ｓｈｉｎ）インシュリンとの中間でその低血 糖活性のピークに行き当たった。、（第８図参照）。 仄挾−に上 この試験では、例１の経口用インシュリン組成物を２人の健康な男性志願者に経 口的に投与した。経口用インシュリンの投与は、当量の注射用インシュリン［ト ン−シン（Ｔａｎｇ−Ｓｈｉｎ）　］の皮下注射によりひき起こされるものに匹 敵する低血糖効果をひき起こした。 ２人の健康な男性志願者（年令３７オおよび３８才、体重５２および５４ｋｇ） が、この研究に関係した。各被検者はこの研究中に例１の経口用インシュリン組 成物１６１．Ｕ、の投与を受けた。例１の経口用インシュリン組成物とともに、 各々の関係者は、２カプセルの脂肪分解酵素を受けた。各カプセルは３５０Ｂの カブセ膵臓リパーゼ　１，０００単位 アミラーゼ　７．５００単位 プロテアーゼ　７．５００単位 および 胆汁酸塩　４０ｍｇ より成り、“賦形薬”としてとうもろこしでん粉を使用していた。 酵素カプセルは次のようにして製造した：膵臓リパーゼは０．１ないし０．３ミ クロンの厚さのヒドロキシプロピルセルロースコーチングで被覆し、そして例１ のコーチングで腸溶皮被覆した。次に、アミラーゼおよびプロテアーゼを加えた 。次いで、こうして得られた組成物を０．１ミクロンのヒドロキシプロピルセル ロースで被覆した。ｏ、１ミクロンのヒドロキシプロピルセルロースで被覆した 胆汁酸塩をその後、膵臓リパーゼから得た生成物とともに硬質ゲルカプセルに加 えた。 試験の日焼午前７：３０に、各関係者は目玉焼き卵２個、ベーコン２枚、焼いた 黒パン２きれ、茶さじ１杯のバター、およびブラックコーヒー１杯の標準的な朝 食を全部食べた０例１のインシュリン組成物を開被検者に午前１０：００に経口 投与した。経口用インシュリンは１６１．Ｕ、のノボ（ＮＯＶＯ）結晶性単−成 分豚インシュリンを含むカプセルで投与した。１２：００に開被検者は、ビーフ ステーキ１８０ｇｍ　、油および酢のドレッシングをかけたかんたんに料理した グリーンサラダ、黒パン１きれおよびブラックコーヒーより成る標準昼食をたい らげな。 血液試料を１０：００．１３　：　００および１６：００に被検者から集め血中 グルコースレベルについて分析した。試料は経口用インシュリン組成物は、３時 間後には開被検者に強い低血糖効果を示すが、６時間後には血中グルコースレベ ルが彼らの処置前のレベルにもどったことを示した。 インシュリンの投与の３時間後には、血中グルコースレベルは両方の被検者につ いて劇的に落ちた。１０　：　４５頃には、第一の被検者が視界がぼやけること 、集中することができないこと、および吐気がすること、を訴え始めた。１１： ２０までに、同じ被検者が、腕および脚の痙♀および震λ、および冷汗が出るこ と、を訴え始めた。第二の被検者もだいたい同じような症状を訴えたが、それほ ど強くはなかった。１１：３．Ｏに、開被検者に、２５０　ｍｌの純粋なオレン ジジュースを与え、第一の被検者はさらに２５０　ｍｌのアルコール分のない飲 み物を飲んだ。 １週間後に両志願者は、同じ時間に標準朝食（すなわち、試験の第１日にとった 朝食）をとった。１０：００に、開被検者は、１６１、Ｌｌ、のトン−シン（Ｔ ｏｎｇ−Ｓｈｉｎ）の通常の注射用インシュリン−４０の皮下注射を受けた。　 １０：３０頃に、開被検者は２時間はど続く低血糖反応を経験し始めた。開被検 者は、１１：２０に、純粋オレンジジュースを供され、１２：ＯＱには標準昼食 を供された。 １０：００．１３：００および１６：００に測定した血中グルコースレベルは、 注射されたインシュリンが投与後３時間はどでピークの低血糖効果を生じること 、および例１の経口用インシュリン組成物と同様、この効果は投与後６時間まで に消失することを示した。（第９図参照） 区鼠−土二上 この試験では、例１の経口用インシュリン組成物をインシュリン依存糖尿病（Ｉ ＤＤＭ）にかかっている５人の個体および非−インシュリン依存糖尿病（ＮＩＤ ＤＭ）にかかつている５人の個体に投与した。ＩＤＤＭの患者は、試験の前に最 低３日間入院して世話をうけ、彼らの血糖レベルを適当な病院治療食と一連の通 常のインシュリントン−シン（Ｔｏｎｇ−Ｓｈｉｎ）の皮下注射とによって調整 した。ＮＩＤＤＭ患者は、病院治療食およびクロロプロパミド［ニューヨーク州 、ニューヨーク市、ファイザー・ラボラトリーズ・ディヴイジョン（Ｐｆｉｚｅ ｒ　ＬａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓＤｉｖｉｓｉｏｎ）により製造されたジアビナー ゼ（Ｄｉａｂｉｎａｓｅ）　］のような経口用低血糖剤の経口投与により調節さ れた血糖レベルを有していた。 試験の第１日の朝、各々の患者は通常の朝食を平らげたが、経口用低血糖剤およ びインシュリンの皮下注射は患者に与えるのをさし控えた０代わりに、患者は、 適当な投与量の例１の経口用インシュリン組成物および試験１−Ｅで述べた脂肪 分解酵素組成物２カプセル、の経口投与を受けた。血液試料は、経口用インシュ リン組成物の投与１前および、投与後２時間および４時間で各個体から取った。 次に、これらの試料を血中グルコースレベルについて測定した。標準化された病 院昼食が、経口用インシュリン組成物の投与の２時間後に各々の患者に供された 。 試験の結果を表１に示す。 表　１ 平均日必要量 Ａ　ＩＤＤＭ　男　４９　４０　８０　０Ｂ　ＩＤＤき１　男　５９　６０　１ ４５　０ＣＩＤＤＭ　男　５４　３０　３０　０Ｄ　ＩＤＤＭ　男　４８　９０ 　１１０　０Ｅ　ＩＤＤＭ　女　４４　４０　７０　０Ｆ　ＮＩＤＤＭ　女　４ １　０　０　２５０Ｇ　ＮＩＤＤ１４　女　５７　０　０　２５０ＨＮＩＤＤＭ 　男　５２　０　０　２５０Ｉ　ＮＩＤＤＭ　男　６３　０　０　２５０Ｊ　Ｎ ＩＤＤｌｉｌ　女　６５　０　０　３７５表　１　（つづき） 平均日必要量 Ａ　２４　２５２　１０３　１４０ Ｂ　３２　２２７　１５３　２２０ Ｃ３２２０１１３７１７７ Ｄ　３２　１９９　１４０　１９７ Ｅ　３２　２０３　１６３　２１２ Ｆ　３２　２９０　１７０　’１１７ Ｇ　３２　２７６　２０１　１０９ Ｈ２４１ｇ９　１８８　１３２ Ｊ　３２　２４１　１７１　１２０ 表１に示された通り、すべての患者の血中グルコースレベルは経口用１２９１９ ン組成物の投与と２時間後との間にかなり落ちた。しかしＩＤＤＭ患者のグルコ ースレベルは２時間と４時間との間で再び急に上がり５人の患者のうち３人では 処置前のレベルとほぼ等しくなるかまたはそれを越えた。一方、ＮＩＤＤＭにか かっている患者の血中グルコースレベルは、５人の患者のうちの４人で、２時間 と４時間の間に減少し続けた。５番目の患者では、血中グルコースレベルは２時 間と４時間との間で上昇したが、処置前のレベルには近づかなかった。 丑−−１ この例では、長期作用性経口用インシュリン組成物を例１の一般的な方法に従っ て製造した。コレステロール、ラウリル硫酸ナトリウムおよび、メチルおよびプ ロピルパラベンより成る粒子を製造して、ヒドロキシプロピルセルロース（水６ ００ｍ１中のヒドロキシプロピルセルロース４０ｇｍ　；　６．０７％溶液）、 ラウリル硫酸ナトリウム、トリエチルアミンＨＣＩ　、およびクエン酸、で結合 させたノボ（ＮＯＶＯ）単−成分豚インシュリンより成る粒子で被覆した。次に 、その表面にインシュリンが結合しているこれらの粒子を、ポリエチレングリコ ールモノステアレートで被覆して例１の組成物のほぼ０．１ミクロンの厚さのコ ーチングと対照的に、はぼ０．３ミクロンの厚さの脂質コーチングをこの粒子の まわりに形成させた。次にこの粒子をほぼ０．１ミクロンのコーチングの厚さの 例１の組成物に使用したと同じ物質より成る腸溶皮で被覆した。 区且又二Ａ この試験では、例２の長期作用性経口用インシュリン組成物をＩＤＤＭにかかっ ている３人の被検者およびＮＩＤＤＭにかかっている３人の被検者（試験１−Ｆ からの被検者Ａ、Ｄ、Ｅ、Ｇ、工およびＪ）に投与した。この研究の朝、被検者 は各々通常の朝食を摂ったが、被検者らは、彼らの普通の治療の一部である経口 用低血糖剤および皮下インシュリン注射を受けなかった０代わりに、彼らは経口 的に投与される用量の例２の組成物および試験１−Ｅで述べた脂肪分解酵素組成 物２カプセルで治療された。血液試料を、経口用インシュリン組成物の投与時お よびその後のいろいろな時間にとった。インシュリン組成物の投与の４時間後に 標準的な病院昼食が被検者らに供された。 種々の試料の血中グルコースレベルの分析は、例２の組成物が例１の組成物より もさらに延長された低血糖効果を生むことを示す。より厚い脂質コーチングおよ び腸溶皮をもつこの組成物は、４ないし６時間後にピークの低血糖効果を生じ、 効果は７時間まで継続したが、これはこの研究の全期間であった。 （表２参照） 表−−ｌ 平均の日必要量 Ａ　ＩＤＤＭ　男　４９　３２ Ｄ　ＩＤＤＭ　男　４８　４０ Ｅ　ＩＤＤＭ　女　４４４８ Ｇ　ＮＩＤＤＭ　女　５７３２ Ｉ　ＮＩＤＤＭ　男　６３　２４ Ｊ　ＮＩＤＤＭ　女　６５３２ １−一旦ユユゴ１） 平均の日必要量 Ａ　２７４　２４０　−−−　１４５　１２６　１３２Ｄ　２７７　２３０　− −−　１３５　−−−　１６８Ｅ　２８５　１８４　−−−　１２６　１１８　 １２６Ｇ　３０１　３０６　−−−　１０９　１１２　２００Ｉ　２７０　１３ ０　−−−　１１４　１２９　−−−Ｊ　２５２　１３５　１２２　−−−　１ ４０区−に旦 この試験では、例１の経口用インシュリン組成物と例２の長期作用性経口用イン シュリン組成物とに関する比較試験を行なった。３人のＩＤＤＭ患者および３人 のＮＩＤＤＭ患者に試験１−Ｅで述べた脂肪分解酵素２カプセルとともに、−日 おきに例１の組成物または例２の組成物のどちらかを投与した。各々の経ロ用イ ンシェリン用量のために２カプセルを与えた。各被検者は一晩絶食し、朝食を供 されず、そして、彼らの通常の抗糖尿病治療薬も拒絶された。各被検者の血中グ ルコースレベルをこの経口用組成物の投与時およびその後の種々の時間に試験し た。 例１および２の組成物のＩＤＤＭ被検者への投与の結果は例１の組成物が投与の ２時間以内に強い低血糖効果を生じたが、血中グルコースレベルは４時間後には ほぼそのベースラインレベルにもどったことを示す。しかしながら例２の組成物 は、もっと漸進的な効果を示し、４ないし６時間後までそのピークの低血糖効果 を生じなかった。しかしながら、７時間後でさえ、これらは著しい低血糖効果を 生じた。 ＮＩＤＤＭ被検者への投与の結果は、２つの組成物の間の差がこればとはっきり していないことを示している。例２の組成物は、例１の組成物よりもより長期の 作用を有することができるけれども、両組成物に対するピーク低血糖作用は約４ 時間後に起こるように思われる。両組成物は、ＩＤＤＭ被検者よりもＮＩＤＤＭ 被検者においてより長期間の“血糖正常”状態を生じた。 ＩＤＤＭ患者における例１の組成物の比較的短期間の低血糖効果はこの組成物中 のインシュリンが例２の組成物のインシュリンよりもより速い速度で開放される が、それはまた、ＩＤＤＭ患者においてしばしば見出される抗−インシュリン抗 体の存在のためにＩＤＤＭ患者においてより速い速度で不活化される、という事 実によるであろうことが示唆される。（第１０および１１図参照） 匠−−ユ この例では、代替の長期作用性経口用インシュリン組成物を例１の基本法に従っ て製造した。平均直径約５０ミクロンを有する粒子をコレステロール、ラウリル 硫酸ナトリウム、およびメチルおよびプロピルパラベンの混合物から製造した。 次にノボ（ＮＯＶＯ）結晶性単一成分インシュリンをヒドロキシプロピルセルロ ース、ラウリル硫酸ナトリウム、トリエチルアミンＨＣＩ　、およびクエン酸よ り成る結合剤で粒子に結合させた。インシュリンをその表面に結合させた粒子を 、次に、各々０．１５ミクロンの厚さのポリエチレングリコールモノステアレー トコーチングで２回被覆した。次に２重の脂質コーチングをもつこの粒子を例１ の組成物に従って、厚さ０．１ミクロンの腸溶皮で被覆した。 沢−扶旦二Ａ この試験では１例３の長期作用性インシュリン組成物をＩＤＤＭにかかっている ３人の被検者に投与した。処置は、被検者を一晩絶食させ、彼らの通常の低血糖 治療を行なわない臨床試験１においてたどられた一般的なプロトコルに従った。 被検者らは標準的な病院の朝食を摂り、経口用量の例３のインシュリン組成物お よび試験１−Ｅで述べた脂肪分解酵素組成物２カプセルを投与された。被検者ら は、例３の経口用インシュリン組成物の投与の３時間後に標準的な病院の昼食を 摂った。 被検者の血中グルコースレベルは、経口用インシュリンの投与後の種々の時間に 被検者から集めた静脈血試料から測定した。表３に示されているデータは、ピー クの低血糖効果が４時間と６時間との間で起こるが、低血糖活性が９時間は続く 、長期の低血糖効果を示した。 ＮＩＤＤＭにかかっている１人の被検者はまた、例３の組成物および試験１−Ｅ で述べた脂肪分解酵素を用いて処置された。 この被検者は試験の期間中と同様に試験前に一晩絶食した。このＮＩＤＤＭ被検 者は午前１０：００に処置され、彼女の血中グルコースレベルは５時間半の試験 期間中ずっと落ち続けた。 表−−１ 平均日必要量 ＣＩＤＤＭ　男　５４　３２ Ｋ　ＩＤＤＭ　女　２０３２ Ｌ　ＩＤＤＭ　男　３１　３２ Ｍ　ＮＩＤＤＭ　女　５８４８ 表−一」ＬＬλ乏皇） 平均日必要量 Ｃ１９１−−−２０８１４４−−−１６３Ｋ　２９１　１３８　２６ｇ　−−− １９３Ｌ　１８０　１８１　１４９　１７６　−−−Ｍ　３８９　−−−　２４ １　１５９　−−−　−−−丑一−Ａ この例では、例１の経口用インシュリン組成物の組成に類似した組成を有する経 口用インシュリンを製造した。例１の組成物を、脂質コーチングを変えることに より変化させた。脂質コーチングをポリエチレングリコールモノステアレート、 に加えて、ホスホチジルホスフェート（最終濃度０．　ｏ４ｅｘ　１０−”ｇ＋ ｎにするのに十分な量）、リン脂質（最終濃度０．０４６　Ｘ　１０−”ｇｍに するのに十分な量）、およびコレステロール（最終濃度２．６２８　ｘｌｏ−４ モルにするのに十分な量）を脂質コーチング物質に加えるように変えた。この脂 質コーチングをインシュリンおよび粒子上に厚さ０．３ミクロンで被覆した。次 に経口用インシュリン生成物２４０　ｍｇを硬質ゲルカプセル内に手で詰めた。 このゲルカプセルを例１の腸溶皮で被覆した。 丑−一１ この例では、例３の経口用インシュリン組成物に類似した経口用インシュリンを 製造した。この経口用インシュリンは、例３のコレステロールを、コレステロー ル−アルギニンＨＣＩの組み合わせ物で１き換える程度まで改質される。　コレ ステロール−アルギニンＨＣＩは生体内で低密度の脂肪蛋白質を真似る組成物を 与える。また、脂質コーチング材料も変えた。この組成物を厚さ０．１５ミクロ ンの例４のコーチングと類似の脂質コーチングで被覆した後、第二の脂質コーチ ングを施す、この第二の脂質コーチングには、オレイン酸く最終濃度８．７７６ 　ｘｌＯ−”モルとするのに十分な量）、およびトロメタン（最終濃度８．７６ ４　Ｘ１０−８モルとするのに十分な量）を液体塗膜の“加硫剤”または“可塑 剤”として含む。 簡単に言えば、この例の経口用インシュリンは基剤としての“低密度脂肪蛋白質 一様”固体乳化剤より成る。ノボ単−成分結晶性豚インシュリンはこの乳化剤に 結合させられ、この結果生ずる生成物を０．１ミクロンの厚さのヒドロキシプロ ピルメチルセルロース水溶性コーチングで被覆し、次にこれを脂質コーチング材 料で２回被覆して最終膜厚を０．３ミクロン（脂質コーチング１層あたり０．１ ５ミクロン）とし、“安定化剤トロメタン”を加え、そして次にこの生成物を手 で硬質ゲルカプセルに（各カプセルが２４０　ｍｇの組成物を含有するように） 詰めた。次にこのカプセルを例１の腸溶皮材料で被覆した。水溶性コーチングに より、インシュリン−コレステロールアルギニンＨＣＩは脂質コーチングで被覆 されることができる。 区牧−五二Ａ インシュリンの生物学的利用能およびその相当する例４および例Ｓの経口用イン シュリン製剤の低血糖効果をＩＤＤＭおよびＮＩＤＤＭ患者群で研究した。例４ の経口用インシュリンはまた２人の正常な健康な男性志願者についても研究され た。 ５−Ａに述べるすべての試験において、被検者は、各用量の経口用インシュリン とともに、試験１−Ｈの脂肪分解酵素２カプセルを受けた。 この研究の前の少なくとも１２または２４時間は、その患者の通常の抗糖尿病治 療薬を被検者に与えるのをひかえた。−晩の絶食および研究の全期間を通じての 絶食の後で、例４または例５の経口用インシュリン製剤を経口投与した。 静脈試料採取用カテーテルを静脈内、通常は肘前の静脈に入れ血液試料を薬の投 与後Ｏ１１，０，１，５，２，０，２，５，３，０，４，０および／または５． ０時間でひき出した。血清グルコースをギルフォード（Ｇｉｌｆｏｒｄ）　ｘ　 ４００で測定し、血清インシュリンを免疫−酵素性Ｏ−フェニレンジアミン　（ Ｉｍｍｕｎｏ−Ｅｎｚｙｍａｔｉｃ　Ｏ−Ｐｈｅｎｙｌｅｎｄｉａｍｉｎｅ）　 （ＯＰＤ）法およびワコー（ＷＡＫＯ）　（日本）のインシュリン−Ｂ試験具（ Ｉｎｓｕｌｉｎ−Ｂ　ｔｅｓｔＫｉｔ）を用いることにより分析した。すべての 分析は重複して行なわれた。 上に述べたように、２人の健康な男性志願者（年令３８才および３１才）がこの 研究に関係した。一方の被検者は例４の経口用インシュリンを２週間の期間に２ 回、すなわち、各週に１回、１ｋｇあたり０．２０および０．２７１．Ｕ、の経 口用インシュリンを受けた。この被検者の血清グルコースレベルはベースライン 平均１１１・Ｏｍｇ／ｄｉから、薬の投与時から３時間で平均８０．５Ｂ／ｄｉ まで減少した。血清インシュリンレベルは、両方の場合に薬の摂取後１．５時間 で起こる１ｍｌあたり２０マイクロ−Ｕのピークに達した。経口用インシュリン の投与後４５分でこの被検者は視界がぼやけること、冷発汗、被刺激性、および 集中不能を訴λた。 第二の志願者は１０１．Ｕ、の通常の注射用インシュリン−４０［韓国、ソウル 市のトン−シン・ファーマシューティカル社（Ｔｏｎｇ−Ｓｈｉｎ　Ｐｈａｒｍ 、　Ｃｏ、）製］を皮下に受けた。通常のインシュリンの注射後７２分で、典型 的なインシュリン誘発ショック症状が観察され、血清グルコースはその時点で４ ７ｍｇ／ｄｉであった。彼は、グラス１杯の新鮮なオレンジジニースを与えられ 、血清グルコースレベルは１時間以内に約１１５１１Ｉｇ／ｄｉまで上昇した。 ５人のＩＤＤＭ患者は、試験５−Ａの研究の全３相を完了した。すなわち彼らは 最初の週に通常の注射用インシュリン−４０［韓国、ソウル市のトン−シン・フ ァーマシューティカル社（Ｔａｎｇ−Ｓｈｉｎ　Ｐｈａｒｍ、　Ｃｏ、）製］　 １０１．Ｕ、の皮下注射を受け；彼らは１週間後に例４の１回の単一経口投与（ ０，５４４１，Ｕ、／ｋｇ平均用量）を受け；そして次の週に彼らは６時間間隔 で与えられる例４の９回の連続投与（平均用量は０．５４４１．肌／ｋｇであっ た）を受けた。 経口用インシュリン例４は、全体で８人のＩＤＤＭ患者（１０試験）（２人は研 究をくり返した）および７人のＮＩＤＤＭ患者（１１試験）（４人の患者は研究 を（り返した）に与えられた。 ７人のＩＤＤＭ患者は、例５の経口用インシュリン製剤の単一用量の経口投与後 に研究を完了した。 これらの研究は、例４の経口用インシュリンは、明らかに、通常のインシュリン のそれと比較して、作用の開始期は遅いがＩＤＤＭ患者とＮＩＤＤＭ患者との両 方においてより長期間の“低血糖”作用を示すことを証明した。組成物例４のイ ンシュリンの生物学的利用能は、通常のインシュリンのそれの約３倍であったが ；しかしながら、インシュリンの用量を調整することによって、それはだいたい 同じとなった。 （表４参照） これらの研究は、また、例５のインシュリン組成物が通常のインシュリンの皮下 注射後に観察されるものに全体に類似している低血糖症の全期間を有すると同様 に低血糖症の開始を生むことをも証明した。インシュリンの生物学的利用能は、 例５の経口摂取に対して、例４の経口摂取よりも大きい。 −−Ａ 経口用例４および５の後、対、通常のインシュリン皮下注射後、のインシュリン の生物学的利用能および低血糖効果例４ 経口１回目投与　０．５４４　２２１　９５．０　５．０　４．７　２７．０２ 例４ 経口９回目投与　０．５５６　２５０　７ｇ、５　５．０　３．６　３７．７８ 例４ 例４ 例５　０．６４９　２３７　９８．９　３．０２．５５９．０８経ロ１回目−絶 食 例５　０．４１Ｂ５　１９２１０８　５．０５．３２９．５０経ロ１回目−食後 表一土ユ２二１１ 例４　７．８　５７．９　１．５　？、２６０．０１　９３５．７経ロ１回目投 与　６５．２＠３．０゜ 例４　６４．０１２１．０　１．０　ｇ、２７２．４３１０７１．１１１経口９ 回目投与 例４ 例５　１３．９１ｇ５．０　２．０　？、８７６．３８１２２９．４経ロ１回目 −絶食 例５ 経口１回目−食後 Ｃｏ＝血清グルコースの基線値；　Ｃｍ１ｎ＝グルコースの最小値；Ｔｃ−ｍ１ ｎ＝最小グルコースレベルをし察する時間；Ｔ、。。＝ｇ；血清グルコース、が １００　ｍｇ／ｄｉに達する時間；　ｄＣ／ｄＴ　＝血清グルコースレベルにお ける減少の速度。Ｉｏ”血清インシュリンの基線値；　Ｉｍａｘ＝インシュリン の最大値：　Ｔｌ−＋ａａｘ　＝最大血清インシュリンレベルに達するための時 間；Ｔｌ−０＝血清インシユリンレベルの基線値に達するための時間、ｄＩ／ｄ Ｔ＝血清インシュリンレベルの上昇の速度、　ＡＵＧ　＝　（研究）時間にわた る血清インシュリンレベル曲線の下の面積。（０血清インシユリンレベルにおけ る二重ピーク）。 皿−−１ 例５の組成物をインシュリン（ノボ単一成分）を、例１に記載したようなコレス テロール−ラウリル硫酸ナトリウム粒子と結合させることによって製造した。イ ンシュリン−結合した固体乳化粒子を、次に、ポリエチレングリコール脂肪酸エ ステル類および５％ホスファチド酸を含む卵黄レシチン（３５０ｍｇのカプセル 剤の最終生成物が０．３０９　Ｘ　１０−２ｇｍを含有するために十分な量）を 含有するコーチング溶液で被覆した。エタノールに溶解させた５％のホスファチ ド酸を含有する卵黄レシチンを使用した。［ミズーリ州、セントルイス市、シグ マケミカル（ＳＩＧＭＡ−ＣＨＥＭＩＣＡＬ）　］ 区組一旦 ＩＤＤＭおよびＮＩＤＤＭ患者群における管理された研究は韓国において韓国の 研究チームおよび合衆国の研究チームにより実施された。患者は、例６の組成物 の単一経口用量を与えられた。韓国研究チームの血液試験は、韓国において分析 され、そして合衆国研究チームの試験と同じ合衆国の研究所で分析された。患者 のうちの何人かはまた、−日おきに通常の注射用インシュリン（トン−シン）を １０１．Ｕ、与えられた。各患者は研究中と前夜は絶食した。その他の形の糖尿 病治療はすべて、患者に与えることをひかえられた。血清試料は、血清グリコ− スレベルについて分析された。結果（第１２−２１図参照）は、例６の組成物が ＩＤＤＭ患者とＮＩＤＤＭ患者との両方において経口的に活性なインシュリンで あることを示している。さらに、これらの結果は両方の研究所が同じ結果を得た ことを示している。 第１２−２１図に言及すれば、実線は韓国の研究チームにより実施された試験で あり、破線は、合衆国研究チームにより実施された試験である。ｙ軸は時間（時 間）であり、ｙ軸は血中グルコースｍｇ／ｄｉである。第９図は例６の６カプセ ルを与えた４６オの女性の結果を示している。第１０図では被検者（３８才のＮ ＩＤＤＭの男性）は、Ｘとして表わした通常の注射用インシュリンｌＯ単位を与 えられ、次に６カプセル（２４単位）の例６を与えられた。 第１１図では４７オのＩＤＤＭ男性被検者が（［］）で表示される注射用インシ ュリンｌＯ単位を与えられ、２日目に６カプセル（２４単位）の例６（ｘ）を与 えられた。第１１図では、４５才のＩＤＤＭの男性被検者が１０単位の注射用イ ンシュリン（［］）を与えられ２日目に８カプセル（３２単位）の例６（Ｘ）を 与えられた。 第１２図では、４７オのＮＩＤＤＭ女性が６カプセル、すなわち、２４単位の例 ６を与えられた。第１３図では、ＩＤＤＭが１４カプセル、５６単位の例６を与 λられた。第１４図ではＩＤＤＭが１２カプセル、４８単位の例６を与えられた 。第１５図では、３８才の男性ＩＤＤＭが１０単位の注射用インシュリン（［］ ）を与えられ、２日目に１０カプセル、４０単位の例６　（ｘ）、を与えられた 。 第１６図では４７オの男性ＩＤＤＭが１０単位の通常注射用インシュリン（［］ ）を与えられ、２日目に８カプセル（３２単位）の例６（ｘ）を与えられた。第 １７図では、４９才の男性ＩＤＤＭが１０単位の通常の注射用インシュリン（［ ］）および２２日に６カプセル（２４単位）の例６（Ｘ）を与えられた。 すべての被検者は、各々の用量の例６の組成物とともに２カプセルの試験１−Ｈ の脂肪分解酵素を受けた。 瓢−−ユ 例７の組成物を製造するためにコレステロール［スイス国、フル力・ニー・ジー （Ｆｕｌｕｋａ、　Ａ、　Ｇ、　）］および］Ｌ−アルギニンＨＣＩ　［日本国 、ワコー・ジュンヤク（Ｗａｋｏ　ＪｕｒｒＹａｋｕ　）　；　ＫＷＪ３７７８ ］を２対１の比率で、容器中で完全にまぜ合わせた。アカシア・ゴム［日本国、 ヤクリーカガク（Ｙａｋｕｒｉ−Ｋａｇａｋｕ）　：ＡＯＯＩ　＝０３］を賦形 薬として使用した。 脂質（コレステロール）およびアミノ酸（Ｌ−アルギニンＭＣＩ　）をインシュ リン（ノボ単−成分豚結晶性インシュリン）を含有するヒドロキシプロピルセル ロースを用いて結合させた。インシュリン−不活性化酵素の阻害剤として、そし てｐＨ調整剤として、クエン酸を使用した。トリエチルアミンＭＣＩを消泡剤と 同様に、インシュリン−安定化剤として使用した。 インシュリンを粒子に結合させる方法は、噴霧気−流速を１２リットル／分に設 定し、噴霧気圧２．５　Ｋｇ／Ｍ”で例１におけるものと同じであった。 結晶性インシュリンで結合させた脂質およびアミノ酸粒子は、ヒドロキシプロピ ルメチルセルロース［日本国、信越化学（Ｓｈｉｎ−Ｅｔｓｕ−Ｋａｇａｋｕ） 　］より成る水溶性膜で被覆された。上記の、水溶性膜で被覆されたインシェリ ンー結合脂質−アミノ酸粒子を、ポリエチレングリコール脂肪酸エステル類、５ ％のホスファチド酸を含有する卵黄レシチン、およびオレイン酸［セントルイス 市、シグマ・ケミカル（Ｓｉｇｍａ　Ｃｈｅｍ、）］より成る脂質コーチングで 被覆した。トロメタミンを加硫剤として使用した。 こうして得られる組成物を、硬質ゲルカプセル中に入れ、例１におけるように、 腸溶皮で被覆した。 こうして得た２４０Ｂのカプセルは各々次のものを含有した：コレステロール　 −２，０１１Ｘ　１０−’Ｍラウリル硫酸ナトリウム　−７，９８２Ｘ　１０− ’ＭアルギニンＨＣＩ　−２，５７５ｘ　１０−’ＭトリエチルアミンＭＣＩ　 −２，０６０ｘ　１０−’Ｍクエン酸　−６，５６３ｘ　１０−”Ｍオレイン酸 　−１，９０１ｘ　１０−”Ｍヒドロキシプロピルセルロース−Ｌ　−０，７３ ３Ｘ　１０−”Ｇｍヒドロキシプロピルメチルセルロース　−０，４５８Ｘ　１ １０−２Ｇ卵黄レシチン（５％ホスファチド酸）　−０，２９９Ｘ　１１０−２ Ｇインシユリン（ノボ）　−８単位 メチルパラベン　−５，７８０Ｘ　１０−’Ｍプロピルパラベン　−１，２４５ Ｘ　１０−’Ｍシリカゲル　−０，４５８Ｘ　１０−”ＧＭ例７の組成物は、ヒ トにおける通常のインシュリンの皮下注射と類似した活性を生じる。 例７に従って製造される組成物に対して下記の範囲を使用することができると考 えられる。得られる２４０ｍｇのカプセルはそれぞれ、次のものより成ることが できる：コレステロール　−（１，６０９ないし２．４１３）　Ｘ　１０”’Ｍ ラウリル硫酸ナトリウム　−（５，５８７ないし９．９７８）　ｘ　１０−’Ｍ アルギニン　ＨＣＩ　−（１，９３１ないし３．２１９）　ｘ　ｌｏ−’Ｍトリ エチルアミンＭＣＩ　−（１，５４５ないし２．５７５）　Ｘ　１０−’Ｍクエ ン酸　−（４，２６６ないし８．３６０）　Ｘ　１［１−”Ｍオレイン酸　−（ １，４２６ないし２．３７６）　Ｘ　１０−’Ｍトロエタミン　−（１，３３１ ないし２．５６１１１）　Ｘ　１０−２Ｍアカシア・ゴム　−（１，８２５ない し２．５７６）　Ｘ　１０−”Ｇｍヒドロキシプロピルセルロース−し −（０，１１５ないし０．２９幻Ｘ　１０−”Ｇｍヒドロキシプロピルメチルセ ルロース −（０，２７５ないし０．６４１）　Ｘ　１１０−２Ｇノボ単−成分豚結晶性イ ンシュリンまたは他のインシュリンは、各カプセルに４ないし４０国際単位／カ プセルのインシュリンを含有させるように加えた。 ０°０メチルパラベン（３，１７９ないし７．８０３）　Ｘ　１０−６Ｍ、プロ ピルパラベン（０，８０９ないし１．６８１）　Ｘ　１０−’Ｍおよびシリカゲ ル（０，２７５ないし０．６４１）　Ｘ　１０−”Ｇｍを最終的な粉状の被覆さ れた経口用インシュリン粒子に加えてもよい。 最終的な被覆された経口用インシュリン粉末を硬質ゲルカプセル、軟質ゲルカプ セル内に入れるか、または固（プレスした錠剤の形にすることができる。これら の形を腸溶皮被覆するこ組成物を例７の処方に従って製造したが、しかしながら 、こうして得られる処方物は次のように改質した：上記含有カプセルの２４０ｍ ｇは各々、次のものより成るであろう： コレステロール　−２，４１３Ｘ　１０−’Ｍラウリル硫酸ナトリウム　−８， ０８１Ｘ　１０−’ＭアルギニンＨＣＩ　−２，５９２Ｘ　１０−’Ｍトリエチ ルアミンＨＣＩ　−２，０７３Ｘ　１０−’！１１クエン酸　−３，０２４ｘ　 １０−”！１１オレイン酸　−２，３７６ｘ　１０−’Ｍトロエタミン　−８， ７６４ｘ　１０−’Ｍアカシア・ゴム　−２，１１９Ｘ　１０−”Ｇｍヒドロキ シプロピルセルロース−Ｌ　−０，７３７Ｘ　１１０−２Ｇヒドロキシプロピル メチル セルロース　−〇、　４６１　Ｘ　１０−”Ｇ。 インシュリン（ノボ）　−８単位 メチルパラベン　−５，８１５ｘ　１０−’Ｍプロピルパラベン　−１，１５３ ｘ　１０−’Ｍシリカゲル　−０，４６１Ｘ　１１０−２Ｇ区銑−−上 ７人のインシュリン−依存糖尿病（ＩＤＤＭ）患者［男性６人および女性１人、 年令２４ないし４７オ（平均３４．４才）、体重各々４８ｋｇないし６８ｋｇ　 （平均５Ｌ６ｋｇ）　］は、−晩の絶食およびこの研究中を通しての絶食の後で 、例７の経口用インシュリン処方物３２ないし４８（平均４２．６）国際単位、 を経口的に摂取した。 ５人の男性ＩＤＤＭ患者には、通常の注射用インシュリン（トン−シン）　０． １７２ＩＵ／ｋｇを一晩の絶食および別の５人の男性ＩＤＤＭ患者での研究中を 通しての絶食後に、皮下に投与したところ、血清グルコースレベルの低下におけ る例７の経口用インシュリン処方物の総合効果は、通常の注射用−インシュリン のそれに類似している（第２２図参照）。 通常インシュリン　０．１７２　２７１９４．５　４．０　２．１　５９．１６ ＣＯ＝グルコースの基線値； Ｃｍ１ｎ　＝観察されたグルコースの最小値；Ｔｃ−ｗｉｎ　＝最小グルコース レベルを観察する時間；Ｔ＋ｏｏ　＝１００　ｍｇ／ｄｉに達するまでの時間； ｄＣ／ｃｌＴ＝低血糖作用の速度 ２人のＩＤＤＭ患者において、例７の経口用インシュリン処方物の経口投与（０ ，６３ＩＵ／ｋｇ　）後に、インシュリンの生物学的利用能（血清中のインシュ リンレベル）を測定した。 ０、１７２ＩＬＩ／ｋｇの通常インシュリンの５人のＩＤＤＭ患者における皮下 注射に比べて、インシュリンの“薬物動態および生物学的利用能”は次の通りで ある： 通常インシュリン　０．１７２　８．０　２０．３　１．５　４．８　３８．２ ９　３０５．３経口用インシュリン　０．６３０　１４．０　１３６．４　２． ５　５．５　８６．２２　１，４２６．８型０９１４ ■。＝血清インシュリンの基線値： Ｉ□８＝インシュリンの最大値； Ｔ□−１，工＝血清インシュリンの最大値を観察する時間二Ｔｌ−０＝血清イン シュリンの基線値に達するまでの時間：６′／６ア＝血清インシユリンの上昇速 度（吸収速度）；ＡＵＣ＝研究期間にわたる血清インシュリンレベルの曲線の下 の面積 試験８の各被検者は、各々の用量の経口用インシュリンとともに試験１−Ｅで述 べた脂肪分解酵素組成物２カプセルを与えられた。 臨床研究は、例７の経口用インシュリン処方物は、０．６３０ＩＵ／ｋｇのイン シュリンの経口による１回の投与で、もう一つのインシュリン−依存糖尿病患者 群における通常の注射用インシュリン（トン−シン）の、インシュリン０．１７ ２　ＩＵ／ｋｇの皮下投与後の効果と同一の、糖尿病患者における“低血糖”　 （または血清グルコースを低下させる効果）効果をひき起したことを証明した。 我々が研究した７人のインシュリン−依存糖尿病患者のうちの４人は、インシュ リン−ショックを経験し、砂糖水および新鮮なオレンジジュースの経口摂取によ り矯正された。 しかしながら、通常の注射用インシュリン（トン−シン）０．１７２　ＩＵ／ｋ ｇの皮下注射に比べ、０．６３０　ＩＵ／ｋｇの例７の経口用インシュリン処方 物後の薬物動態および生物学的利用能データは、インシュリン吸収速度は、経口 用インシュリン後が通常のインシュリンの注射後の２倍より大きいことを示した 。経口用インシュリン（０，６３０ＩＵ／ｋｇ　）後のインシュリンの生物学的 利用能（ＡＵＧ）は、通常のインシュリン（０，１７２ＩＵ／ｋｇ　）の皮下注 射後のＡＵＧのほとんど４．７倍である。経口用インシュリン後に投与されたイ ンシュリン投与量を調整した後のＡＵＧは、２．２６４．８　／ＩＵであり、通 常インシュリンの皮下注射後にはそれは１．７７５．０／ＩＵである。例７の経 口用インシュリン処方物の生物学的利用能は与えられたインシュリン投与量あた りで、通常の注射用インシュリンの生物学的利用能と等しいか、またはそれより 大きい。 糖尿病患者において血清グルコースレベルを低下させる際の例７の経口用インシ ュリン処方物の効果および例７の経口用インシュリン処方物の経口投与後の糖尿 病患者におけるインシュリンの生物学的利用能は、優れており、インシュリン− 依存糖尿病患者における皮下注射された通常の注射用インシュリンのそれと類似 している。 丑−一旦 この例において、脂肪分解酵素が脂質であり、そして腸溶被膜を有し、−個のカ プセルまたは錠剤中に経口インシュリン製剤と組合せることができる。 Ａ、膵リパーゼ 膵リパーゼ粒子は下記のようにして調整する。下記の諸成分を前述した改良型Ｓ ｐｉｒ−Ａ−Ｆｌｏｗ　に装入する。 メチルパラベン　１２．Ｏｇ　Ｓｈｉｇｍａ　（３２Ｆ−０５１１）これらの成 分はＳｐｉｒ−Ａ−Ｆｌｏｗのディスク上に置き、約３０〜３２℃の範囲の温度 でローターを３００回転／分（ｒｐｍ）で、撹拌機を５０Ｏｒｐｍで、そしてチ ョッパーを２，０００　ｒｐｍで回転させながら乾燥させる。諸成分の細かい乾 燥粒子がこれにより、生成され約３０〜３２℃の温度に加熱されている空気によ り基部の底から吹き出される。加熱された空気はローターと容器壁間に作り出さ れているスリットを通過して（スリット　エアー）およびローター　ディスク上 の細かいメツシュ状開口部を通して（流体エアー）吹き出させる。スリットエア ーおよび流体エアーの両方は１００〜４５０ｍｍＨｚＯの範囲の空気圧を有する 。成分の細粒をこのスリット　エアー及び流体エアーによりＳｐｉｒ−Ａ−Ｆｌ ｏｗの容器内に懸濁させる。この成分粒子を次いで下記の被覆溶液で被粒子を被 覆溶液で被覆するためには、被覆溶液を容器内に懸濁されている成分粒土に、１ ０ｍ１／分の速度で％１．０〜５．０ｋｇ／Ｍ”の加圧下に、１２０分間、噴霧 する（スプレーノズルは交互に２０〜４０秒間スイッチオンにし、そして６０〜 ９０秒間スイッチオフにする）。 この結果、ＨＰＭＣ−Ｌ膜の薄層で被覆されており、従って遮蔽されている膵リ パーゼ粒が得られる。この被膜は水溶性である。 これらのＨＰＭＣ−Ｌ膜で被覆された膵リパーゼ粒を次いで、下記の腸溶被覆溶 液を用いて腸溶被覆する： 日本（１９１１８４） ポリエチレンクリコール−６００００，５％　Ｋａｏ　５ｅｋｋｅｎ、日本ジク ロロメタン　４７．３％ エタノール　３７．８％ 水　９．４％ 上記の腸溶被覆溶液は約５．２〜５．６のｐＨを有する。 別法として、粒の被覆に、ＥＵＤＲＡＧＩＴｌｌＬ−１００−５５（またはＬ− １００）あるいはＥＵＤＲＡＧＩＴ”−Ｌ−３０−Ｄ−５５と称される市販紙の アクリル系樹脂を使用することもできる。 イソプロピルアルコール　５０２　部 ポリエチレンクリコール−６０００６部　Ｋａｏ　５ｅｋｋｅｎ、日本または ポリエチレンクリコール−６０００３０部　Ｋａｏ　５ｅｋｋｅｎ、日本水　８ ９８部 シリコーンエフルジョン　２　部 粒子は上記に第一に記載した腸溶被覆溶液を使用し、容器内に、再び懸濁されて いるＨＰＭＣ−Ｌ被覆粒上に、１０ｍ１／分の速度および２．５　ｋｇ／Ｍ２の 圧力で、３〜４時間、噴霧することにより腸溶被覆する。スプレィノズルは２０ 〜４０秒間スイッチオンにし、そして６０〜１２０秒間スイッチオフにする。 生成した生成物は「胃液」中でそして「−二指腸液」中で所望の溶解時間を有す る。 Ｂ、且−辻一ユ 胆汁塩粒子はＳｐＬｒ−Ａ−Ｆｌｏｗを用いて、胆汁塩およびアビセルを前記の 膵リパーゼの被覆に用いられた被覆溶液および上記の初めの方の腸溶被覆溶液で 被覆することにより生成する。胆汁塩およびアビセルは前記Ａに記載されている ようにして被覆する。使用された胆汁塩およびアビセルは下記のとおりである： 胆汁塩　４０６．６ｇ　Ｄｉｌｃｏ　（７１４７２０）経口インシュリン製剤は 下記のとおりにして調整する。 ５ｐｉｒ−、Ａ−Ｆｌｏｗで下記の成分を混合する。 アルギニンＨＣ１１１０，２ｇ　Ｆｕｒｕｋａ、スイス国アラビア・ゴム　２４ ．０ｇ グリセリン　３１．２ｇ ラウリル硫酸ナトリウム　４８．０ｇ これらの成分はＳｐｉｒ−Ａ−Ｆｌｏｗの容器内で充分に混合し、次いで乾燥さ せる。　Ｓｐｉｒ−Ａ−Ｆｌｏｗでは次のパラメーターを用いる：ローターは３ ５０ｒ四にセットする；撹拌機は５００にセットする：チョッパーは２，０００ 　ｒｐｍにセットする；スリットエアー圧は１００〜３００　ｍｍＨｚｏであり ；流体エアー圧は１００〜３５０　ｍｍ　Ｈ２Ｏであり、空気は２４〜約３１℃ の生成物温度にし、そして成分はＳｐｉｒ−Ａ−Ｆｌｏｗでこれらのパラメータ ーにおいて、大体３０分間混合しそして乾燥させる。次いで容器内の空気中に懸 濁されている、充分に混合され、乾燥されている成分を下記の結合溶液で結合さ せる。 トリメチルアミン　０．８１５０ｇ　Ｗａｋｏ　Ｋａｇａｋｕ、日本水　２２０ ｍ１ 溶液のｐＨはほぼ２．０〜約３．５である。 上記で生成された粒子を被覆するために、この結合溶液をＳｐｉｒ−Ａ−Ｆｌｏ ｗの頂上部に位置する（第３図の２８参照）スプレィノズルから噴霧する。結合 溶液をシリング−中に入れ、次いで噴霧処理の前および処理中、水冷ビーカー中 にしづめて冷却させる。結合溶液を空気懸濁されている細粒上に、１０〜１４ｍ １／分の速度、１．０〜２．０ｋｇ／Ｍ”の空気圧および１５〜２５Ｌ／分の空 気容積で、はぼ２時間、全部の結合溶液が使用されるまで、被覆する。スプレィ ノズルは交互に、２０〜４０秒間スイッチオンにそして３０〜９０秒間オフに切 り変える。この処理の全体を通して、生成物温度は、粒子の懸濁に用いられる空 気をこの温度に維持することにより、はぼ２５〜約３２℃に保持する。結晶イン シュリンを含有する生成した粒子は次いで直ちに、はぼ２４℃の温度を有する水 に溶解し、インシュリンが結合している細粒のエマルジョンを生成する。エマル ジョンはほぼ４．２〜約５．４のｐＨを有する。 その後直ちに、エマルジョン中に含まれているインシュリン結合粒子を次いで、 下記のとおりに生成させた脂質波Ｆ！溶液で被覆する。下記の成分よりなる脂質 被覆溶液をインシュリン結合粒子上に噴霧する。 卵黄レシチン　２４．Ｏｇ　Ｓｉｇｍａ、　Ｓｔ、　Ｌｏｕｔｓ水　２００ｍ１ の最終容量まで加える 生成した溶液はほぼ５．５〜約６．５のｐＨを有する。 この脂質被覆溶液はまた、容器の頂上部に位置するスプレィノズル２８から噴霧 する。Ｓｐｉｒ−Ａ−Ｆｌｏｗのパラメータは次のとおりである二ローターは２ ５０〜３０Ｏｒｐｍにセットする；撹拌機は５００にセットする：チョッパーは ２．５００〜３．００Ｏｒｐｍにセットする。スプレィノズルおよびその噴霧速 度は１．２〜１．５ｋｇ、Ｑ１２の空気圧、１５〜２０工／分の空気容積で１２ ．０ｍｌ／分にセットし、生成物温度はほぼ３０〜約３４℃にする。また、生成 物温度は容器に流入する空気が所望の温度を有するように、５ｐｉｒ−Ａ−Ｆｌ 囲の熱調節機をセットすることにより保持する。脂質被覆溶液は６０分間ｏ＊ｉ する。スプレィノズルは交互に、２０秒間スイッチオンにし、そして６０〜９０ 秒間オフに切り変える。 生成した脂質被覆粒子は次いで、再被覆用脂質被覆溶液で再被覆する。再被覆用 脂質被覆溶液は次の成分を含有する。 オレイン酸　７．５ｇ　Ｊｕｎｓｅｔ−日本この再被覆用脂質溶液はＳｐｉｒ− Ａ−Ｆｌｏｗの横側から、１２ｍ１／分の噴霧速度、１．０〜１．５ｋｇ／Ｍ２ の空気圧および１５〜２０２／分の空気容積で噴霧する。ローターは３００〜３ ５０ｒｐｍにセットし、撹拌機は５００にセットし、チョッパーは３．０００〜 ３．５０Ｏｒｐｍにセットし、そして生成物の温度はほぼ３１〜約３５℃に保持 する。スプレィノズルは交互に、２０〜４０秒間スイッチオンにし、そして６０ 〜９０秒間オフに切り換える。 所望により、トロメタモルは再被覆用脂質溶液から省略できる。しかしながらト ロメタモルを省略した場合に、乾燥時間が増加し、粒子の「過度の脂性湿潤」を 防止するために厳重な注意が必要である。トロメタモル（トロメタモル）は米国 薬局方およびヨーロッパ薬局方に記載されている。 再被覆脂質溶液工程の後に、被覆され、乾燥された粒子は硬質カプセルに装入す るかまたは錠剤形に圧縮する。この経口インシュリン結合被覆粒子は単独でまた は前述のリパーゼおよび胆汁塩の腸溶被覆粒子と混合してカプセルまたは錠剤の 形にすることができる。生成したカプセルまたは錠剤は腸溶被覆することができ る。 別法として、脂質被覆された経口インシュリン結合粒子はそれら自体な腸溶被覆 することもできる。この脂質被覆された経口インシュリン粒子の被覆用の腸溶被 覆溶液は下記の成分を含ポリエチレンークリコール−６０００３０部タルク　（ 粉末）　７０部 シリコーンエマルジョン　２部 水　８９８部 生成した溶液はほぼ５．５〜約６．５のｐＨを有する。 腸溶被覆され、脂質被覆された経口インシュリン粒子を生成するために、この腸 溶被覆溶液をＳｐｉｒ−Ａ−Ｆｌｏｗ　の容器の頂上部に位置するスプレィノズ ル２８から、はぼ５００ｇの脂質被覆績゛合した経口インシュリン粒子に対し、 １　ｇ／ｋｇ／分の噴霧速度で噴霧する。粒子は交互に５秒間の噴霧と５秒間の 乾燥を行ない、所望の厚さの腸溶被覆を達成する。 施用されるべき腸溶被覆溶液の量（ｒＱＪ）を乾燥ラッカー物質％（腸溶被覆溶 液）で決定するために、被覆される粒子の表面積（ｍｍ”単位、ＳＡ）を乾燥ラ ッカーのｍｇ（Ｌ）／所望のｃｍ”　（ｍｇ／ｃｍ”単位、被覆物の厚さ）と掛 算し、この数値を経口インシュリン結合粒子の重量（ｍｇ単位、Ｗ）で割算する 。従って、乾燥ラッカー物質％ｒＱＪは次式により計算される：Ｑ＝　（ＳＡｘ Ｌ）／Ｗ 好ましくは、経口インシュリンの腸溶被覆された粒子はほぼ０．１〜約０．８ｍ ｍの径を有する（従って、表面積はほぼ０．３１４〜約２．０４ｍｍ”の範囲に ある）、約４５０ｇの重量の経口インシュリン粒子上にほぼ１２０〜約１５０ｍ １の前記腸溶被覆溶液を噴霧することにより、生成した被覆粒子は約１．２のｐ ）ｌを有する溶液（胃液）中に少な（とも１０分間入れても溶解しない；しかし ならがら、この被覆粒子はほぼ６．８のｐＨを有する溶液（−二指腸液）中で３ ０秒以内に溶解し、分散する。従って経口インシュリン粒子用の理念的な腸溶被 覆が達成される。 Ｄ、やロインシュリンｒ　リパーゼ／日汁土せカプセルこの例では、経口インシ ュリン被覆粒、被覆リパーゼおよび被覆胆汁塩を含有するカプセルを調製する。 この目的のために、それぞれ＃１−サイズの硬質ゲルカプセルに、腸溶被覆した 経ロインシニリン粒（Ｃで前述したとおりに調製）、腸溶被覆したリパーゼ粒（ Ａで前述したとおりに調製）および腸溶被覆した胆汁塩粒（Ｂで前述したとおり に調製）を相互に混合し、下記の割合で、硬質ゲルカプセル中に装入する：経口 インシュリン　２００口ｇ　（１２ＩＵＳ　）膵リパーゼ　２８ｍｇ　（１，０ ００）単位胆汁塩　２５ｍｇ 重炭酸ナトリウム（オーブン乾燥）　５０ｍｇおよび 充填剤としてクエン酸　５０ｍｇ 重炭酸ナトリウムおよびクエン酸は破裂効果を提供し、硬質ゲルカプセルを胃内 で開放させ、１ｍｍより小さいサイズで、経口インシュリン、リパーゼおよび胆 汁塩の各腸溶被覆粒を放出させる。それらのサイズおよび組成により、これらの 粒子は幽門を迅速に通過して、十二指腸に移行する。重炭酸ナトリウムおよびク エン酸はまた、腸内ｐＨをアルカリ性方向に調整する機能を果たし、そして胆汁 塩の存在における膵リパーゼの活性を増大させる。 Ｅ、Ｃの経口インシュリン製剤対りの経ロインシュリン斉１の　ケ床・ ６人の糖尿病患者（インシュリン依存患者３名とインシニリン非依存患者３名； 男性５名と女性１名）において、Ｃの経口インシュリン製剤を脂質分解酵素の４ 個のカプセル（このカプセルはそれぞれリパーゼ１０００単位および胆汁塩２５ ｍｇを含有する）とともに与えた場合と、Ｄの経口インシュリン製剤、すなわち Ａの被覆リパーゼ、Ｂの被覆胆汁塩、重炭酸ナトリウムおよびクエン酸を組合せ て硬質ゲルカプセルに入れたＣの経口インシュリン製剤を与えた場合とを比較試 験した。 各患者には別々の日に各製剤を投与する。この目的のために、各患者には試験の 第−５目に、リパーゼ４０００単位および胆汁塩１００ｍｇを含有するカプセル ４個とともに、経口インシュリン４８単位を投与し、試験の第二日月に、経口イ ンシュリン４８ＩＵとリパーゼ４０００単位と胆汁塩１００ｍｇを含有するカプ セル４個を投与した。試験の三日月および四日目に、これを繰返した。 一般に、脂質分解酵素カプセルは別にあるいは経口インシュリン（４８ＩＵ）カ プセルとともに与えるかまたは脂質分解酵素が経口インシュリンと同一のカプセ ル中に含まれていて、組合せカプセルとして与えられたが、血糖に対する総合的 効果および経口インシュリンの血糖低下作用／効果は同一であった。 Ｆ、経口インシュリン　リパーゼ／日汁土せＰ斉ｊ前記Ａ、ＢおよびＢに記載さ れている腸溶被覆されていない粒を一緒に組合わせ、硬質圧縮錠剤形に成形した 。この目的のために、次の成分を混合した： 重炭酸ナトリウムー−−−−一−−−−−５０．０ｇ重炭酸カリウムー−−−− −−−一一一−３２．０ｇクエン酸−−−−−−−−−−−−−−１７，６５ｇ タルクー−−−−−−−−−−−−−−−５００ｍｇアビセルーーー　−−−− 一−−−−−−−５００ｍｇ乳糖−−−−−−−−−−−−−−−−−４５，０ ｇトウモロコシデンプン−−−−−−−−−２８，０ｇ３００、０ｇ 上記混合物をほぼ２００ｍｇサイズ（所望によりこのサイズは太き（でも小さく でもよい）の硬い圧縮錠剤に成型した。結晶インシュリンの代りに、前記Ｃの製 剤を使用した場合に、各錠はインシュリン６ＩＵを含有できる；インシュリン投 与量は、所望により、４０ＩＵまで増加できる。 生成した錠剤なＥＵＤＲＡＧＩＴ’−Ｅ−１００で、はぼ０．１〜約０．１５ｍ ｍの最終「膜状被覆」厚さに被覆した。このように被覆された錠剤は５．０まで のｐＨを有する胃液内で３０秒またはそれ以下の時間内に溶解することが見い出 された。かくして粒子、すなわち経口インシュリン、リパーゼ、および胆汁塩が 放出され、これらは腸溶被覆されているので６．０またはそれ以上のｐＨを有す る溶液中で容易に溶解する。さらにまた、粒は１ｍｍより小さいサイズを有し、 従って、幽門を容易に通過して十二指腸で溶解する。 十二指腸において、これらの粒は乳化され、そこに結合しているインシュリンを 有する微小脂肪球状粒（１ミクロンより小さいサイズを有する）および（または ）［脂質層で被覆された」微少−脂肪球状体結合インシュリン（５０ミクロンよ り小さいサイズを有する）を放出する。従って、これらの粒は十二指腸の内腔内 で生成されたエマルジョン中に浮遊される。これらの粒は、従って腸内粘膜上の 絨毛から、肝臓を通過することな（、好ましく吸収される。 経ロインシニリン／リパーゼ／胆汁塩の錠剤形の臨床学的研究を３人のインシュ リン依存性糖尿病患者で行ない、次の結果ＪＳＬ男　５９５６　ＩＤＤＭ　６０ ＩＵ　１６ｇ　１４２１２６１１５１０３８８ＫＣＫ男　５５６３　ＩＤＤＭ６ ０ＩＬＪ　１９５１７５１５７１３５１０８６２ＫＳＫ　５８　４２　ＩＤＤ〜 ＋　４８ＩＵ　１５２　１３２　１２０　９９　７２　−経ロインシュリン粒、 胆汁塩粒およびリパーゼ粒の被覆に、ＥＵＤＲＡＧＩＴ”−Ｌ−１００またはＬ −３０のような腸溶被覆溶液を使用すると、下記の特徴を有する被覆粒が得られ る：１、胃液に対し耐性である； ２、これらの粒により与えられるいずれかの腐蝕に対し胃内壁が防護される； ３、配合禁忌の薬物を単離できる； ４、製品の貯蔵寿命が改善される； ５、吸湿性芯が隔離される：そして ６、大気の影響に対して粒子が保護される。 前述したように、ＥＵＤＲＡＧＩＴｌ″は胆汁塩が有するいずれかの腐蝕作用か ら胃壁を保護し、しかも貧弱な貯蔵寿命を有し、極めて不安定で、吸湿性である 経口インシュリン製剤を改善する。 丑−土工 この例では、経口インシュリン製剤を調整する。下記の成分をＳｐｉｒ−Ａ−ｆ ｌｏｗの容器に入れる。 これらの粉末状成分を前述したＪｅｔ　Ｍｉｌｌ（第１図および第２図参照）を 用いて、５０ミクロンより小さい粒子サイズに粉砕し、次いでＳｐｉｒ−Ａ−Ｆ ｌｏｗの容器内で下記のパラメータにおいて充分に混合し、そして乾燥する： ローター（回転７分）＝２５０〜３００撹拌機（ｒｐｍ）　＝　５００〜７００ チヨツパー（ｒｐｍ　）　＝　４０００〜５０００流体エアー圧　＝４０〜５０ ｍｍＨＪ スリットエアー圧＝２５〜３５ｍｍＨｔ。 供給（主）空気圧　＝　９００〜１０００１００Ｏ充分に混合され、乾燥された 成分（粒子）を次いで、スリットエアー圧および流体エアー圧をほぼ５０〜約１ ００ｍｍＨｚＯに増加することにより、容器内に懸濁させる。懸濁されている乾 燥した細粒を次いで下記の溶液で被覆する： この結合溶液を容器の頂上部に位置するスプレィノズルから１ｊ霧し、粒子を被 覆する。このインシュリン結晶を含有する結合溶液は次のパラメーターを用いて 乾燥した細粒に結合させる： ローター　＝２００〜３０Ｏｒｐｍ 撹拌機　＝５００〜７００　ｒｐｍ チョッパー　＝　ｚｇｏｏ〜３５００　ｒｐｍ流体エアー圧　”　５０〜８０ｍ ｍＨｚＯ主供給空気圧　＝　８０１３〜１５００ｍｍＨｇスプレィポンプ流速　 ＝　１２．０〜１５．０ｍｌ／分スプレィ空気圧　：　１．２〜１．５　Ｋｇ７ ｃｍ”スプレィ空気容積　＝　２０〜４０Ｌ−Ｍｉｎスリットエアー圧　＝　５ ０〜９０ｍｍＨｚＯ生成物温度　酸物　２６．７〜２８．５℃粒子には全溶液が 使用されるまで、はぼ９０〜約１２０分の間にわたり断続的に噴霧する。粒子に は交互にほぼ５秒間の噴霧とほぼ２２秒間の乾燥とを行なう。 インシュリン結晶溶液を結合させた粒（結合粒）は次いで第一被覆溶液で被覆す る。この第一被覆溶液は下記の成分を含有する： 卵黄レシチン　１５〜２４．０ｇ　Ｓｉｇｍａ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ水　最終容積 を５００＋０１にする量；温度＝２５〜２６℃、　ｐＨ＝４．５〜６．５前記結 合粒を次いでＳｐｉｒ−Ａ−Ｆｌｏｗ内に懸濁し、下記の条件下に上記の第一被 覆溶液で被覆する： ローター　＝２２０〜３００　ｒｐｍ 撹拌機　＝５００〜８００　ｒｐｍ チョッパー　＝　２８００〜４０００　ｒｐｍ流体エアー圧　＝　５０〜１００ ｍｍＨｚＯ主供給空気圧　＝　９００〜１０００１００Ｏスプレィポンプ流速　 ：　１２．０〜１５．０ｗｌ／分スプレィ空気圧　＝　Ｌ、２〜２．０　Ｋｇ／ Ｃｍ”スプレィ空気容積　＝２０〜４０Ｌ／分スリットエアー圧　＝　５０−５ ０−１Ｏ０，０生成物源度　＝３２゜０〜３３．８℃ 結合粒にはほぼ５〜約１０秒間の噴霧およびほぼ２０〜約２２秒間の乾燥を行な う。 次いで、この被覆された結合粒に第二被覆溶液を再被覆する。第二被覆溶液は下 記の成分を含有する：（ＩＦＭ０９８１ｇ） 第二被覆溶液は懸濁されている被覆された結合粉上に、容器の横側に位置するス プレィノズルから下記のパラメーターを用いて噴霧する： ローター　＝２５０〜３００　ｒｐｍ 撹拌機　＝５００〜７００　ｒｐｍ チョッパー　＝　３０００〜４５００　ｒｐｍ流体エアー圧　＝　６０〜１１０ ｍｍＨ，０主供給空気圧　＝　９００〜１１００ＯｎｒｎＡスプレィポンプ流速 　＝　１２．０〜１５．０＋ｎｌ／分スプレィ空気圧　＝　１．２〜１５　Ｋｇ ／ｃｍ”スプレィ空気容積　２２０〜４０１７分スリットエアー圧　＝　６０〜 １１０ｍｍＨ，０生成物温度　＝３０〜３２．５℃ インシュリンを含有し、脂質で被覆されている生成した被覆結合粉は２ｍｍより 小さい径を有するサイズの細かい顆粒にすることができ（デンプンで被覆された シードとしてＮａＨＣＯ，：クエン酸を３＝１比で使用する。この顆粒は被覆層 で被覆されており、外層等として前記のインシュリン結合化学校を有し、この顆 粒に次いで腸溶被覆する）、あるいは重炭酸ナトリウム２０〜３０重量％、クエ ン酸１０〜２０重量％およびシリカゲル３〜６ｇを最終組織物重量５００〜６５ ０ｇに対して使用して、これらを混合し、次いで、ＮｌＪサイズの硬質ゲルカプ セルに装入することができる。生成したカプセルは次いで下記の腸溶被覆溶液で 腸溶被覆を施す。 エタノール　３７．８％ 水　９．４　％　ｐＨ＝５．２〜５．６別法として、下記の成分を含有する腸溶 被覆溶液を使用することもできる： シリコン　エマルジョン　２部 タルク　７０部 水　８９８部 前記の１番目の腸溶被覆溶液を使用して、結合インシュリン粒を充填した＃４カ プセルを腸溶被覆する。このように被覆された＃４カプセル中に含有されている 結合インシュリン粒は約１．２のｐＨを有する胃液中に、２時間またはそれ以上 さらした後に溶解するだけであることが見い出された。しかしながら、このカプ セルは約６．８のｐＨを有する十二指腸液中に１５分またはそれ以下の時間内に 溶解する（米国局方に規定されているとおりである）、もう一種の腸液被覆溶液 で被覆されたカプセルはまた同様の特徴を有することが見い出された。 伍−一」」２ この例の経口インシュリン製剤を調製するために、下記の成分をＳｐｉｒ−Ａ− Ｆｌｏｗの容器中に装入する：日本　（９Ｌ１２０２） これらの成分をＳｐｉｒ−Ａ−Ｆｌｏｗの容器中で例１０（上記）に記載のパラ メーターを用いて混合し、乾燥した後に、これらの粒子をインシュリン含有結合 溶液と結合させる。このインシュリン含有結合溶液は下記の成分を含有する：イ ンシュリン　（２〜２０ＩＵを有する最終カプセルを得るに要する量） 混合し、乾燥した成分を容器内に懸濁し、このインシュリン含有結合溶液を容器 の頂上部に位置するスプレィノズル２８から噴霧する。この結合溶液は上記例１ ０に記載の条件で操作されるＳｐｉｒ−Ａ−ｆｌｏｗで噴霧する。 このインシュリン結合粒を次いで第一被覆溶液で被覆する。 第一被覆溶液は下記の化学材料を含有する：卵黄レシチン　１５〜２４ｇ　Ｓｉ ｇｍａ　Ｃｈｅｍｉｃａｌエマノン−３１９９１２〜１６ｇ　Ｋａｏ　５ｅｋｋ ｅｎ、日本（Ｅｍａｎｏｎ）　（１２７４４Ｙ） 被覆されたインシュリン結合粒を第一被覆溶液で例１０（上記）に記載のとおり にして被覆する。 生成した被覆粒を次いで第二被覆溶液で被覆する。第二被覆溶液は次の組成を有 するニ オレイン酸　１０〜１５．Ｏｇ　Ｊｕｎｓｅｉ　Ｃｈｅｍｉｃａ１日本　（９Ｄ ４０３４） この第二被覆溶液を容器の横側に位置するスプレィノズル２７から例１０（上記 ）に記載の条件下に噴霧する。 生成した被覆粒は２ｍｍより小さい径のサイズを有し、シードとして３：ｌまた はｌ：１比混合物として重炭酸ナトリウムおよびクエン酸を含有し：ノンバレイ ユとしてデンプンを有し；被覆層で被覆されており：外層としてインシユリン結 合粒を有し、そして腸溶被覆されている細かい顆粒に調製でき、あるいは重炭酸 ナトリウム約２０〜約３０重量％、クエン酸約１０〜約２０重量％およびシリカ ゲル約０．５〜約２．０重量％と混合することができる。生成した混合物は次い でＮα４硬質ゲルカプセル中に充填でき、そして腸溶被覆することができる。 医−−１ｌ この例では、例１０および例１１で調製された２、０ｍｍより小さい径を有する 経口インシュリン製剤を被覆する。ＣＦ顆粒形成機（第２３図参照）を使用し、 例１Ｏまたは例１１のどちらかの経口インシュリン製剤を「ノンパレイユ」とし て施用される、０．５ｍｍより小さいサイズを有する約３：ｌの比率の重炭酸ナ トリウム／クエン酸と配合する。生成した顆粒を次いで前述の腸溶被覆製液の一 種で腸溶被覆する。生成した顆粒は約１．２のｐＨを有する胃液中で少なくとも ２時間溶解しないが、約６．８のｐＨを有する十二指腸液中で１５分またはそれ 以下の時間内に溶解することが見い出された。Ｆｒｅｕｎｄ　Ｉｎｄｕｓｔｒｉ ｅｓ、Ｉｎｃ、　（東京、日本）から市販されているＣＦ顆粒形成機は遠心シス テムを使用することによって凝集、顆粒形成および被覆が行なわれるように設計 されており、第２３図に示されている。簡単に言えば、ＣＦ顆粒成形機４０は粉 末供給器４２、ローター４４、空気供給器４６およびスプレィノズル４８を包含 する。 ＣＦ顆粒成形機で生成物を調製するために、空気供給器の温度を約２８〜約３４ ℃にセットし、ローター速度を約１３０〜約２００回転／分にセットし、空気供 給流速を３０〜５０ε／分にセットし、スプレィノズル噴露速度を噴霧圧１０〜 ３０Ｌ／分で２０〜５０ｍ１／分にセットする。 重炭酸ナトリウム／クエン酸組成物を生成するために、シードとしてクエン酸１ １０〜約１５０　ｇ　、重炭酸ナトリウム粉末約４００〜約４５０ｇ及び少量の アルファ・デンプン粉末約１０〜約５０ｇをクエン酸上にオーバーコートし、次 いで３０分間、Ｓｐｉｒ−Ａ−Ｆｌｏｗで乾燥させる。 シードとしてクエン酸およびオーバーコートとして重炭酸ナトウリム及びデンプ ン（両方ともにノンパレイユとして）を使用し、デンプン約３０重量％と予備混 合した粉末状の例１０および例１１の経口インシュリン製剤をアルコール中のヒ ドロキシプロピルセルロース−Ｌ　（ＲＰＣ−Ｌ）約６〜約２０％により、約１ ００〜約２０Ｏｒｐｍのローター速度、２０〜５０Ｌ／分の空気供給、１５〜４ ０ｍ１／分のスプレィノズル流速で、１０〜３０Ｌ／分の加圧下に顆粒上ノンバ レイユ上に２０〜４０分間被覆する（温度は約２５〜３０℃である）。生成した 顆粒はＳｐｉｒ−Ａ−Ｆｌｏｗで約３０〜約３５℃の温度で３０分間乾燥させる 。 生成した顆粒状製剤は約０．４９０〜約１．４５０ｍｍの径を有する顆粒であり 、これをエタノールで溶解した５％ＨＰＣ−メチルーフタレートおよびポリエチ レングリコール−６０００（０，５％）の腸溶溶液を用いて腸溶被覆する。前述 の他の腸溶被覆溶液を使用することもできる。顆粒は約１５０〜２５０ｒｐｍの ローター速度、３０〜５０Ｌ／分の空気供給、２０ｍ１／分のスプレィ流速で１ ５〜３０Ｌ／分の圧力下に、そして約２５〜約３０℃の温度において腸溶溶液で 被覆する。生成した顆粒は第２４図に例示されているものと実質的に同様の構造 を有する。顆粒５０は芯またはシード５２、ノンパレイユ５４、ＨＰＣ−Ｌ被覆 ５６、インシュリンの層５８および腸溶被覆５９を有する。これらの顆粒は約１ ．２のｐＨを有する胃液中で少なくとも２時間溶解しないが、約６．８のｐＨを 有する十二指腸溶液中で、１５分またはそれ以下の時間内に溶解する。 鼠腺上ｌ旦 約０．９（０，６９〜１．０７）　ＩＵ／Ｋｇの生成した生成物をインビトロで 塩類溶液１０〜２０ｍ１に溶解し、３匹の犬の十二指腸にＷａｌｌａｃｅ−Ｄｉ ａ−ｍｏｎｄ二重内腔管を経て投与する。大腿静脈の連続血液試料を、３匹の犬 から製剤投与後の０時、６０．８０．１００．１８０．２４０および３００分目 に採血する。１匹が雄で、２匹が雌の犬は４．０（約３．０〜約５．６）Ｋｇの 平均体重をそれぞれ有した。血漿ゲルコールレベルおよびインシュリンレベルを 測定した（放射免疫定量法およびＷａｋｏの酸素免疫定量法による）。 約８０分後に、顕著で有意の度合いの血糖低下が見られ、これは約３０分持続す る。他方、最高血漿インシュリンレベルは製剤の十二指腸投与後の約１００分に 見られた（第２５図および第２６図参照）。 ■駿−上１１ インシュリン１．ＯＩＵ／Ｋｇを含有する、例１２に記載のように修飾された例 １１の製剤を６．０Ｋｇの雄の犬に十二指腸内投与する。この製剤の血糖低下作 用を十二指腸に投与された通常の注射用インシュリン（ノボ　アクトラビド　イ ンシュリン、１．　ｏｘｕ／Ｋｇ）の作用および静脈投与された通常の注射用イ ンシュリン（ノポアクトラビド　インシュリン、０．５１０／Ｋｇ）の作用と比 較する。 通常の注射用インシュリン１．２６ＩＬＩの静脈注入後に、血漿グルコースレベ ルは２０分以内に１０２ｍｇ／ｍｌから２３ｍｇ／ｍｌに低下し、３時間以内に １００　Ｂ／ｍｌに戻った。次いで、通常の注射用インシュリン６ＩＵを十二指 腸に投与する。３時間にわたり、血中グルコースレベルにおける変化は見られな かった。本発明に係る製剤６ＩＵを十二指腸内に投与すると、顕著で、持続性の 血糖レベル減少が見られた。この製剤の投与後の２時間で、動物は重篤な低血糖 症のため死亡した（第２７図参照）。 区狡−上ｌ至 インシュリンまたは経口血糖低下剤が与えられていない、−夜にわたり断食させ た３人のインシュリン依存性患者および２人のインシュリン非依存性患者に、２ ４時間の観察期間後に、例１２に記載のように修飾された例１０のインシュリン 製剤を約０．６４〜約０．７３ＩＵ／　Ｋｇの量で投与する。血糖レベルを５時 間にわたり１時間毎に測定する。しかしながら、ＩＤＤＭの一人およびＮＩＤＤ Ｍの１人は断食による低い血中グルコースレベルが見られたので、標準的朝食を 与え、次いで食事後に試験を続けた。これらの患者において、有意の程度の血糖 低下が見られた（下記第５表参照）。 ４人のＩＤＤＭおよび２人のＮＩＤＤＭの別の６人の患者に、例１２に記載のよ うに変えられた例１１の製剤を０．４９〜０．６３ＩＵ／　Ｋｇの量で経口投与 する。１人の患者は断食による低血糖レベルが見られたので、標準的朝食を与え 、試験を続けた。残りの５人の場合は、断食状態で試験を続けた。製剤の経口投 与後に有意の程度の血糖低下効果が見い出された（下記第６表参照）。 第５表： 経口インシュリン製剤の経口摂取後の血糖レベル（Ｋｇ）　（ｃｍ）　（ＩＵ／ Ｋｇ） ＬＥＥＹＳ　Ｍ　５５　１６１　０．７３　ＩＤＤＭＬＥＥＫＷ　Ｍ　７２　１ ６５　０．６４　ＩＤＤ〜ＩＫＩＭＣＳ　Ｆ　４６　１５０　０．６６　ＩＤＤ ＭＬＥＥＪＳ　Ｍ　６２　１７３　０．６５　ＮＩＤＤＭＨＯＮＧＣＪ　Ｆ　５ ２　１６０　０．６５　ＮＩＤＤＳｌ（第５表つづき） し　二点　：′＝Ａ）における血糖（ｍ／ｍ１）名前　０　１２　３４　５ ＬＥＥＹＳ　１７３．５　１６３．５　１４４．０　１３６．０　１２７．０　 １０３．５ＬＥＥＫＷ　＊１ｇ３．０　１３７．０　ｇ５．０　９６．０　７６ ．５　−ＫＩＭＣＳ　２１６．０　１７８．５　１７７．５　１６２．０　１４ ９．５　−ＬＥＥＪＳ　１５ｆ；、０　１５２．５　１２６．０　１１８．０　 ８９．５　ｇ６．５ＨＯＮＧＣＪ　＊２５７．５　２５９．５　１９６．５　１ ８３．０　１６５．０　１３６．５第６表： 経口インシュリン製剤の経口摂取後の血糖レベル（Ｋｇ）　（ｃｍ）　（ＩＵ／ Ｋｇ） ＬＥＥＹＳ　Ｍ　６４　１６５　０．６３　ＩＤＤＭＬＥＥＪＷ　Ｍ　８２　１ ６９　０．４９　ＩＤＤＭＭＯＯＮＹＪ　Ｍ　６５　１６８　０．６３　ＩＤＤ ＭＳＨＩＮＧＳ　Ｍ　６６　１６９　０．４９　ＩＤＤＭＫＩＭＣＳ　Ｆ　６７ 　１５９　０．６３　ＮＩＤＤＭＣＨＯＩＤＳ　Ｍ　５９　１６５　０．６３　 ＮＩＤＤｌｉ＋（第６表つづき） 名前　０　１２３４　５ ＬＥＥＹＳ　＊３１Ｇ、０　３５３．５　３２５．０　２７０．０　１６５．０ 　１４ｇ、０ＬＥＥＪＷ　１５３．０　１３７．５　１３１．０　１２９．０　 １３０．５　−−ＭＯＯＮ　ＹＪ　３２９．０　２４７．０　１５８．０　−一 ５ＨＩＮＧＳ　３３３．５　３７８．５　２６５．６　２３８．０　１７０．５ 　−−ＫＩＭＣＳ　１５７．０　１５２．０　１３７．０　１３４．０　１３０ ．５　−−ＣＨＯＩＤＳ　２０９．５　１６２．５　９７．５　８８．０　ｇ６ ．０　−−（＊朝食を与えた場合） 例１０および１１の製剤を２週間の期間にわたり二回試験する研究に一群の糖尿 病患者が参加した。第−週の間、各患者に、腸溶被覆されている＃４カプセル中 の例１０または例１１の経口インシュリンを与え、１週間後に、同一患者に例１ ０または例１１の別の方の顆粒状製剤を経口投与した。例１１の顆粒状製剤では 、体重ＩＫｇ当り０．１４５単位の平均インシュリン投与量（０，１１〜０．１ ８単位／体重Ｋｇ）が経口投与され、平均インシュリン投与量が０、５８３単位 ／体重Ｋｇ（０，４９〜０．６３単位／体重Ｋｇ）である＃４カプセル中の例１ １の製剤の経口投与の場合（顆粒状の例１１の製剤の投与量のほぼ４倍の投与に 相当する）に比較して、２時間の測定期間でより迅速な血糖レベルの減少が生じ た。しかしながら、＃４カプセル中の例１１の製剤は長時間持続性のその血糖低 下効果を示し、投与後の２時間の時点を超えて効果を示した（第２８図参照）。 例１０の製剤の投与後１時間の時点で生じた血糖低下レベルは経口インシュリン 製剤を顆粒形で投与した場合に＃４硬質ゲルカプセル内に入れて投与した場合よ りも僅かに大きいことを示す。しかしながら＃４硬質ゲルカプセル中に入れた例 １０の経口インシュリン製剤は顆粒形の例１０の経口インシュリン製剤よりも比 較的長く持続する血糖低下効果を有する。 従って、理念的には、顆粒形と＃４硬質ゲルカプセル形との例１０の製剤を組合 せるか、あるいは別法として、顆粒形と＃４硬質ゲルカプセル形の例１１の製剤 を組合せることにより、糖尿病において、迅速で、しかも長時間持続性の血糖低 下効果を生じさせることができる。例１１の経口インシュリン製剤を顆粒形（平 均０．１６４単位／　Ｋｇ）および＃４硬質ゲルカプセル剤（平均０、５６６単 位／　Ｋｇ）で投与すると、これらの糖尿病患者において、迅速に発現し、しか も長時間持続する血糖低下効果が確実に見られる（第２８図参照）。 別様に、ＣＦ−顆粒形成された形および非顆粒形の例１ｏまたは例１１の経口イ ンシュリン製剤（あるいは前述のいずれが他の経口インシュリン製剤）を相応し て組合せて、硬い圧縮錠剤にすることもでき、これにより糖尿病患者において、 迅速に発現し、しかも長時間持続する血糖低下効果を得ることができる。 丑−一遷 一群の糖尿病患者において、非常に良好な血糖低下効果を有する経口インシュリ ン製剤を下記のように調製した。 全部の（脂肪球形状）化学材料（例１１において前記した材料）を新鮮な大豆粉 末に加える（トリプシンを阻害するため、大豆粉末はインシュリンに対し不活性 である）。Ｅ、　ＦｒｅｄｒｉｃｑおよびＨ，Ｆ、　Ｄｅｕｔｓｃｈに従い　［ Ｊ、Ｂｉｏｌ、Ｃｈｅｍ、　１８１．４９９頁（１９４９年）〕、卵白から新し く調製されたオボムコイドをそこに配合し、次いで水とアルコールとの混合物（ ５０−５０比）中に結晶インシュリンとともに７．２のｐＨで溶解させる。塩化 力ルシュウム（２ｍｍ）を加えて、中性インシュリン溶液の物理的安定性を改善 する［Ｊ、ＢｒａｎｇｅおよびＳ、　ＨａｖｅｌｕｎｄにょるＰｒｏｐｅｒｔｉ ｅｓ　ｏｆ　Ｉｎ５ｕｌｉｎ　５ｏｌｕｔｉｏｎ：　Ｉｎ　Ａｒｔｉｆｉｃｉａ ｌ　Ｓｙｓｔｅｍ　ｆｏｒ　Ｉｎ５ｕｌｉｎＤｅｌｉｖｅｒｙ、　Ｐ、ＢＲＵＮ ＥＴＴＩ等編集、Ｒａｖｅｎ出版社、Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ、８３〜８８頁〕卵白か らのオボムコイドは強力なトリプシン阻害剤である。別法として、アルコールに 溶解した新鮮な卵白を使用することもできる。 下記の成分をＳｐｉｒ−Ａ−Ｆｌｏｗの容器に入れる。 新鮮大豆粉末　１５〜３０ｇ これらの粉末状成分をＪｅｔ　Ｍｉｌｌにより５０ミクロンより小さいサイズを 有する粒子に粉砕する。粒子をＳｐｉｒ−Ａ−Ｆｌｏｗの容器中で、例１Ｏに記 載の条件下に充分に混合し、乾燥する。乾燥粉末であるこれらの成分を容器内に 懸濁し、インシュリン、オバムコイド（または卵白）およびクエン酸ならびに表 面活性剤を含有する結合溶液で結合させる。結合溶液は次のように調製するニ トリエチルアミン　１．５５〜３．２２ｇ　Ｗａｋｏ　Ｋａｇａｋｕ、日本これ らの化学材料をエタノール（１００〜２００ｍ１　）に溶解する。 アミノ酢酸　０．２Ｍ ポリソルベート−８０１，０〜２．５ｇヒドロキシプロピル−５％ セルロース−Ｌ これらの化学材料を８．０のｐＨを有するリン酸塩緩衝液約１００〜約２００　 ｍｌに溶解し、上記のエタノール溶液と化学材料を溶解させたリン酸塩緩衝剤溶 液とを混合し、次いでインシュリンを加える。溶液のｐＨは７．２に調整する。 生成した結合溶液を例１Ｏに記載のように、コレステロール、表面活性剤、大豆 粉末および抗微生物保存剤よりなる細かく乾燥した脂肪球状で、空気中に懸濁さ れている粉末状に噴霧する。 このインシュリン結合した「脂肪球状粉末」は充分に乾燥させた後に、下記の被 覆溶液で被覆する：大豆レシチン　２４ｇ ポリエチレン−グリ　ＩＦ＋〜４０ｇ　Ｋａｏ　５ｅｋｋｅｎ　日本コール−６ ０００ ＣａＣ１ｚ　２．５〜５．８　ｇ オレイン酸　２０〜３５ｇ コレステロール　１〜５ｇ メチル　パラベン　１〜３ｇ 上記化学材料を、これらの化学材料を溶解するに充分のエタノール約１５０〜約 ４００　ｍｌに溶解する。 上記の脂質被覆溶液を例１２に記載のように、インシュリン結合脂肪球状粉末上 に噴霧する。 ・　１３　経ロインシュリン゛剤の臨床臼・血糖仁王り美男性２人および女性２ 人の平均年齢４６．０才（３６〜５６オ）で平均体重６０．３Ｋｇ（５０〜７４ Ｋｇ）および身長１６４．３ｃｍ　（１５８〜１６８　ｃｍ）の４人の糖尿病患 者に、断食後に、例１３の経口インシュリン製剤を平均して０．５７３単位／　 Ｋｇ　（０，４６〜０．６８ＩＵ／　Ｋｇ）の投与量で投与した。顕著で、臨床 的に有意の度合の血糖レベルの低下が見い出された（第２９図参照）。 不明細書に記載の好適態様に対する種々の変更および修飾は当業者にとって自明 であろう。これらの変更および修飾は本発明の精神および範囲から逸脱すること なく、そしてその達成された利点を減じることなく行なうことができる。従って 、これらの変更および修飾は請求の範囲に含まれているものである。 ＦＩＧ、　３ ＦＩＧ、５ ＦＩＧ、　６ ＦｊＧ、９ ＴＩＭＥ　（ＨＲ５，１ ＦＩＧ、２２　＋ｓｐ［（ン°シ′５２）ｙ＊ｌｌ’）／）ＪＬ与　イｌ°１６ ＦＩＧ、２３ に’、ｉ（ンシシソ／ Ｐｌａｓｍａ　１ｎｓｕｌｉｎ　ヒｔｔ／ｒｎｔ’Ｊ　Ｆｌに、２５Ｂｌｏｏｄ 　ｓｕｇａｒ　［ｍｇ／ｄＬ）　ＦＩＧ、２６伯、雪とフ゛Ｉレコ−１ ＰＩＪＳＩＴＬＩ　ｇ［ｕｃｏｓｅ　ｌｒｎｇ／１００ｍ１）ＦＩＧ、２９ （岐） 手続ネ甫正書（方式） ％式％ １、事件の表示 ＰＣＴ／ＵＳ　８７１００４８５ ２、発明の名称 薬剤組成物 ３、補正をする者 事件との関係　特許呂願人 名　称　ユーラシアム　ラボラトリーズインコーホレーテッド ４、代理人 居　所　〒１０２東京都千代田区一番町２５番地ダイヤモンドブラザビル　６階 電話（０３）２３４−５６４１ ６、補正の対象 国際調査報告

Claims (69)

【特許請求の範囲】
1. １．選択された生物学的活性形の蛋白質系材料を経口投与するのに適合した、下 記を含む組成物： （ａ）平均直径約１ないし約１００ミクロンを有しそして固体乳化剤および界面 活性剤から本質的に成る粒子；（ｂ）該粒子の表面に結合剤によって結合された 、選択された生物学的に活性な蛋白質系材料；および（ｃ）該粒子の表面に結合 された該蛋白質系材料を有する該粒子を囲む、厚さ約０．０５ないし約１．０ミ クロンを有する脂質コーティング。
2. ２．更に下記を含む、請求の範囲第１項の組成物：（ｄ）該粒子上の該脂質コー ティングを取り囲む腸溶皮層。
3. ３．上記の蛋白質系材料がインシュリンである、請求の範囲第２項の組成物。
4. ４．上記の固体乳化剤がコレステロール、グリセリルモノステアレート、オレイ ン酸、ポリエチレン５０ステアレート、ポリオキシ４０ステアレート、ポリソル ベート２０、ポリソルベート４０、ポリソルベート６０、ポリソルベート８０、 プロピレングリコールジアセテート、プロピレングリコールモノステアレート、 アルギニンＨｃｌ、アラビアゴム、コレステロールエステル、リン脂質および脂 肪酸から成る群から選ばれる、請求の範囲第１項の組成物。
5. ５．上記界面活性剤がラウリル硫酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、ステ アリン酸、ソルビタンモノラウレート、ソルビタンモノステアレート、および乳 化ワツクスから成る群から選ばれる、請求の範囲第１項の組成物。
6. ６．上記の生物学的に活性な蛋白質系組成物がインシユリン、ウロキナーゼ、因 子ＶＩＩＩ、ロイプロリド、ガンダリオシド、ビンクリスチン、ベロマイエイン 、リドカイン、ゲンタミシン、プレチリウム、トシレート、セチエダイル、シク ランデレート、エリスロマイシン、クロラムフエニコール、アドリアマイシン、 ストレプトキナーゼ、およびセフアロスポリジンから成る群から選ばれる、請求 の範囲第１項の組成物。
7. ７．上記の結合剤がナトリウムカルボキシメチルセルロース、微結晶性セルロー ス、エチルセルロース、ゼラチン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチ ルセルロース、ポビドンおよびヒドロキシプロピルセルロースから成る群かに選 ばれる材料を含む、請求の範囲第１項の組成物。
8. ８．上記の脂質コーティングがポリエチレングリコール脂肪酸エステル、グリセ ロホスフアチド、ホスフアチシロホスフェート、卵黄レシチン、オレイン酸、モ ノ、ジ、およびトリ−グリセリド、ステアリン酸、パルミテート、コレステロー ル、コレステロールエステル、およびスロメタンから成る群から選ばれる材料を 含む、請求の範囲第１項の組成物。
9. ９．上記の腸溶皮層がヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、ポリエ チレングリコール−６０００、セラミツク、セルロースフタレート、およびポリ ビニルアセテートフタレートから成る群から選ばれる材料を含む、請求の範囲第 ２項の組成物。
10. １０．上記の粒子が更に殺菌剤を含む、請求の範囲第１項の組放物。
11. １１．上記の殺菌剤がデヒドロ酢酸、メチルバラベン、エチルパラベン、フエノ ール、フエニルエチルアルコール、プロピルパラベン、安息香酸ナトリウム、ソ ルビン酸、チモール、チメロザール、デヒドロ酢酸ナトリウム、ベンジルアルコ ールおよびブチルパラベンから成る群から選ばれる、請求の範囲第１０項の組成 物。
12. １２．脂肪分解酵素を含む、請求の範囲第１項の組成物。
13. １３．上記の脂肪分解酵素がリパーゼ、膵臓リパーゼ、アミラーゼ、プロテアー ゼ、および胆汁酸塩から成る群から選ばれる、請求の範囲第１２項の組成物。
14. １４．上記の組成物が更に酵素阻止剤を含む、請求の範囲第１項の組成物。
15. １５．上記の酵素阻止剤がステアリルアミン、ステアリルアルコール、トリエチ ルアミンＨｃｌ、クエン酸、乳酸、ピリホスフエート、トリエタノールアミン、 エチルアミンテトラアセテート、ヨードアセトアミド、フエニルヒドラジン、ヒ ドロキシルアミン、３および８−ヒドロキノリンから成る群から選ばれる、請求 の範囲第１４項の組成物。
16. １６．上記の組成物が更に消泡剤を含む、請求の範囲第１項の組成物。
17. １７．上記の消泡剤がステアリルアルコールおよびシリコーンから成る群から選 ばれる、請求の範囲第１６項の組成物。
18. １８．生物学的活性形のインシユリンを経口投与するのに適合した、下記を含む 組成物： （ａ）平均直径約１ないし約１００ミクロンを有しそしてコレステロール、ラウ リル硫酸ナトリウム、およびメチル−およびプロピルパラベンから本質的に成る 粒子：（ｂ）ヒドロキシプロピルセルロース、ラウリル硫酸ナトリウム、トリエ チルアミンＨｃｌおよびクエン酸から本質的に成る溶液を用いて上記粒子の表面 に結合されたインシユリン；（ｃ）厚さ約０．１ないし０．３ミクロンを有する 脂質コーティング；およ び （ｄ）ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、セラツクおよびＰＥＧ −６０００を含み、該粒子上の該ポリエチレングリコールモノステアレートコー ティングを取り囲む、厚さ０．１ミクロンの腸溶皮層。
19. １９．選択された生物学的活性形の蛋白質系材料を経口投与するのに適合した組 成物の、下記の工程を含む製造法：（ａ）平均直径約１ミクロンないし１／２ミ リメートルを有しそして固体乳化剤および界面活性剤から本質的に成る粒子を形 成し； （ｂ）選択された生物学的に活性な蛋白質系材料を結合剤により該粒子の表面に 結合させ；そして （ｃ）表面に該蛋白質系材料が結合された該粒子を厚さ０．０５ないし０．１ミ クロンの脂質コーティング層で被覆する。
20. ２０．更に下記の工程を含む、請求の範囲第１９項の方法：（ｄ）該粒子を、該 脂質コーティング層を取り囲む腸溶皮層で被覆する。
21. ２１．更に下記の工程を含む、請求の範囲第１９項の方法：（ｄ）該粒子を、脂 質コーティングを適用する前に水溶性コーティングで被覆する。
22. ２２．請求の範囲第１９項の方法の生成物。
23. ２３．請求の範囲第２０項の方法の生成物。
24. ２４．請求の範囲第２１項の方法の生成物。
25. ２５．生物学的活性形のインシユリンを経口投与するのに適合した、下記を含む 組成物： 平均直径約１ないし約１００ミクロンを有しそして乳化剤および界面活性剤から 本質的に成る粒子；該粒子の表面に結合されたインシユリン；表面に結合された 蛋白質系材料を有する該粒子を取り囲む脂質コーティング；およ び該脂質コーティングを取り囲む腸溶皮層。
26. ２６．固体乳化剤／可溶化粒子の表面に結合されたインシユリンを含み、ここで 該インシユリンおよび該粒子は脂質コーティングで被覆されており、該粒子は平 均直径約１ミクロンないし約 １００ミクロンを有し、そして該脂質コーティングは腸溶皮で被覆されている、 経口摂取用の組成物を与えることを特徴とする、インシユリンの経口投与法。
27. ２７．脂肪蛋白質粒子の表面に結合されたインシユリンを含み、ここで該インシ ユリンおよび該粒子は脂質コーティングで被覆されており、そして該脂質コーテ ィングは腸溶皮で被覆されている、経口摂取用の組成物を与えることを特徴とす る、インシユリン組成物の経口投与法。
28. ２８．脂肪分解酵素を投与する段階を含む、請求の範囲第２７項の方法。
29. ２９．少なくとも１種の脂肪分解酵素を含むカプセルの少なくとも１／２を経口 投与することを含む、請求の範囲第２７項の方法。
30. ３０．選択された生物学的活性形の蛋白質系材料を経口投与するのに適合した、 下記を含む組成物： （ａ）脂肪蛋白質組成物； （ｂ）該脂肪蛋白質組成物の表面に結合した、選択された生物学的に活性な蛋白 質系材料；および （ｃ）該脂肪蛋白質組成物および蛋白質系材料を取り囲む脂質コーテイング。
31. ３１．上記の脂肪蛋白質および蛋白質系材料を取り囲む水溶性コーティングを含 み、上記の脂質コーティングが該水溶性コーティングを被覆している、請求の範 囲第３０項の組成物。
32. ３２．上記の脂肪蛋白質が低密度脂肪蛋白質である、請求の範囲第３０項の組成 物。
33. ３３．上記の脂肪蛋白質が少なくとも１種のアミノ酸を含む、請求の範囲第３０ 項の組成物。
34. ３４．ゲルカプセルを含み、上記の脂質コーティング材が該ゲルカプセル内に詰 められている、請求の範囲第３０項の組成物。
35. ３５．上記のゲルカプセルが腸溶皮で被覆されている、請求の範囲第３４項の組 成物。
36. ３６．上記の生物学的に活性な蛋白質系組成物がインシユリン、ウロキナーゼ、 因子ＶＩＩＩ、ロイプロリド、ガングリオシド、ビンクリスチン、ベロマイエイ ン、リドカイン、ゲンタミシン、ブレチリウム、トシレート、セチエダイル、シ クランデレート、エリスロマイシン、クロラムフエニコール、アドリアマイシン 、ストレプトキナーゼ、およびセフアロスポリジンから成る群から選ばれる、請 求の範囲第３０項の組成物。
37. ３７．脂肪分解酵素を含む、請求の範囲第３０項の組成物。
38. ３８．上記の脂肪分解酵素がリパーゼ、膵臓リパーゼ、アミラーゼ、プロテアー ゼ、および胆汁酸塩から成る群から選ばれる、請求の範囲第３７項の組成物。
39. ３９．上記の脂肪分解酵素がリパーゼおよび胆汁酸塩を含む、請求の範囲第３８ 項の組成物。
40. ４０．上記の脂質コーティングがポリエチレングリコール脂肪酸エステル、グリ セロホスフアチド、ホスフアチシロホスフェート、卵黄レシチン、オレイン酸、 モノ、ジ、およびトリ−グリセリド、ステアリン酸、パルミテート、コレステロ ール、コレステロールエステル、およびスロメタンから成る群から選ばれる材料 を含む、請求の範囲第３０項の組成物。
41. ４１．上記の腸溶皮層がヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、ポリ エチレングリコール−６０００、セラミツク、セルロースフタレート、およびポ リビニルアセテートフタレートから成る群から選ばれる材料を含む、請求の範囲 第３５項の組成物。
42. ４２．上記の粒子が更に殺菌剤を含む、請求の範囲第３０項の組成物。
43. ４３．上記の殺菌剤がデヒドロ酢酸、メチルパラベン、エチルパラベン、フエノ ール、フエニルエチルアルコール、プロピルパラベン、安息香酸ナトリウム、ソ ルビン酸、チモール、チメロザール、デヒドロ酢酸ナトリウム、ベンジルアルコ ールおよびブチルパラベンから成る群から選ばれる、請求の範囲第４２項の組成 物。
44. ４４．上記の組成物が更に酵素阻止剤を含む、請求の範囲第３０項の組成物。
45. ４５．上記の酵素阻止剤がステアリルアミン、ステアリルアルコール、トリエチ ルアミンＨｃｌ、クエン酸、乳酸、ビリホスフエート、トリエタノールアミン、 エチルアミンテトラアセテート、ヨードアセトアミド、フエニルヒドラジン、ヒ ドロキシルアミン、３および８−ヒドロキノリンから成る群から選ばれる、請求 の範囲第４４項の組成物。
46. ４６．上記の組成物が更に消泡剤を含む、請求の範囲第３０項の組成物。
47. ４７．上記の脂肪蛋白質が脂質およびアミノ酸を含む、請求の範囲第３０項の組 成物。
48. ４８．上記の脂質がコレステロール、オレイン酸、ステアリン酸、ラウリル硫酸 ナトリウム、レシチン、ホスフアチド、ラウリル硫酸ナトリウムとレシチン、パ ルミチン酸およびホスフアチドホスフエートコリンから成る群から選ばれる、請 求の範囲第４７項の組成物。
49. ４９．上記のアミノ酸がアルギニン、リジン、ヒスチジン、およびアスパラギン 酸から成る群から選ばれる、請求の範囲第４７項の組成物。
50. ５０．上記の消泡剤がステアリルアルコールおよびシリコーンから成る群から選 ばれる、請求の範囲第４６項の組成物。
51. ５１．生物学的活性形のインシユリンを経口投与するのに適合した、下記を含む 組成物： （ａ）平均直径約１ミクロンないし１／２ミリメートルを有しそして低密度脂肪 蛋白質組成物を含む粒子；（ｂ）該粒子の表面に結合剤で結合されたインシユリ ン；（ｃ）該粒子およびインシユリンを被覆するための水溶性コーティング層 ：およ び （ｄ）該水溶性層、粒子およびインシユリンを被覆するための脂質コーティング 。
52. ５２．脂肪分解酵素を含む、請求の範囲第５１項の組成物。
53. ５３．該脂質層を被覆するための腸溶皮コーチンゲ層を含む、請求の範囲第５１ 項の組成物。
54. ５４．生物学的活性形の選択された蛋白質系材料を経口投与するのに適合した組 成物の、下記の工程を含む製造法：（ａ）平均直径約１ミクロンないし１／２ミ リメートルを有する低密度脂肪蛋白質粒子を形成し； （ｂ）選択された生物学的に活性な蛋白質系材料を結合剤で該粒子の表面に結合 し； （ｃ）該粒子および蛋白質系材料を水溶性コーティングで被覆し ：そし て （ｄ）表面に結合された該蛋白質系材料を有する水溶性コーティング被覆粒子を 厚さ０．０５ないし１．０ミクロンの脂質コーティング層で被覆する。
55. ５５．下記の工程を更に含む、請求の範囲第５４項の方法；（ｅ）上記の粒子を 、上記の脂質コーティング層を取り囲む腸溶皮層で被覆する。
56. ５６．請求の範囲第５４項の方法の生成物。
57. ５７．請求の範囲第５５項の方法の生成物。
58. ５８．生物学的活性形のインシユリンを経口投与するのに適合した、下記を含む 組成物： 低密度脂肪蛋白質粒子； 該粒子の表面に結合されたインシユリン；該粒子およびインシユリンを取り囲む 水溶性コーティング ；該水溶性コーティングおよび表面にインシユリンが結合した該粒子を取り囲む 脂質コーティ ング；該脂質コーティングを取り囲むゲルカプセル；および該ゲルカプセルを取 り囲む腸溶皮層。
59. ５９．下記の段階を特徴とする、糖尿病の治療法：低密度脂肪蛋白質、該脂肪蛋 白質に結合されたインシユリン、該インシユリンおよび該脂肪蛋白質上の水溶性 コーティング、および該水溶性コーティング上の脂質コーティングを含む組成物 を有する少なくとも一つのカプセルを経口投与し； そして脂肪分解酵素および胆汁酸塩を含む組成物を有する少なくとも一つのカプ セルを経口投与する。
60. ６０．下記の段階を特徴とする、糖尿病の治療法：乳化剤／可溶化剤粒子、該粒 子に結合したインシユリン、および該粒子上の脂質コーティングを含む組成物を 有する少なくとも一つのカプセルを経口投与し；そして脂肪分解酵素を含む組成 物を有する少なくとも一つのカプセルを経口投与する。
61. ６１．膵臓リパーゼ、アミラーゼ、プロテアーゼ、および胆汁酸塩を含む群から 選ばれた脂肪分解酵素を含む、蛋白質系化合物の経口投与に有用な組成物。
62. ６２．選ばれた上記の脂肪分解酵素が膵臓リパーゼおよび胆汁酸塩である、請求 の範囲第６１項の組成物。
63. ６３．下記の成分を含む、インシユリンの経口投与に適合した組成物： （ａ）膵臓リパーゼの粒子： （ｂ）胆汁酸塩の粒子； （ｃ）脂質被覆インシユリンが結合された脂質粒子；（ｄ）重炭酸ナトリウム： および （ｅ）クエン酸。
64. ６４．上記の成分が硬質ゲルカプセル内に入れられている、請求の範囲第６３項 の組成物。
65. ６５．上記の成分が錠剤に加圧形成されている、請求の範囲第６３項の組成物。
66. ６６．重炭酸ナトリウム対クエン酸の重量パーセント比が３：１ないし１：１で ある、請求の範囲第６３項の組成物。
67. ６７．インシユリン結合粒子が１５ミリメートル未満の球径を有する、請求の範 囲第６３項の組成物。
68. ６８．上記の膵臓リパーゼおよび胆汁酸塩の粒子が腸溶皮で被覆されている、請 求の範囲第６３項の組成物。
69. ６９．約３：１ないし約１：１の比の重炭酸ナトリウムおよびクエン酸の混合物 を含み、該混合物は種を形成してインシユリン−脂質混合物の層で被覆され、そ して得られた粒子は次の腸溶皮で被覆されている、インシユリンの経口投与に適 合した組成物。