JPH01244342A - 液体クロマトグラフ - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野ン 本発明は検出器として分光螢光光度計を備えた液体クロ
マトグラフに関する。

（従来の技術） 液体クロマトグラフの検出器として螢光検出器を備えた
場合は、複数の溶離成分毎に最適の励起・螢光波長を選
択・設定する必要がある。このように−分析中に螢光検
出器の励起、螢光波長と切換える目的でタイムプログラ
ムが使用される。従来は溶離成分毎に励起・螢光スベク
）／ｌ／ｌｌ−測定して。

該スペクトルよシ、最適の励起・螢光波長を選択し０分
析開始時点よυの時刻と励起・螢光波長をコンビエータ
に手動入力してタイムプログラムを作成していた。

（発明が解決しようとする課題） 各々の溶離成分の最適励起、螢光波長を調べるＫは、多
くの時間を必要とする。また励起・螢光波長や波長を切
替える時刻の決定は入手で行わなければならない。更に
はこれら条件をタイムプログラムに入力するＫあたって
誤シも生じやすい。

本発明燻液体クロマトグラフに付した分光螢光光度計の
タイムプログラムを自動的に作成する機能を付した液体
クロマトグラフ提供することを目的とする。

（課題を解決するための手段） 本発明においては液体クロマトグラフの検出器として紫
外多波長同時検出器と分光螢光光度計を直列に接続し、
多波長同時検出器で測定した分離物質の最大吸収波長を
分光螢光光度計の励起波長として設定し、螢光波長を走
査してそのスペクトルデータよシ螢光波長を設定し、か
つ、紫外多波長同時検出器のクロマトグラムよシ、これ
ら励起・螢光波長の切シ換え時刻を自動的にタイムプロ
グラムに設定する機能をイ島えた。

本発明において紫外多波長同時検出器とは光検出素子と
してフォトダイオードアレイを持つもの。

複数の受光素子を持つもの、単１の受光素子で短時間に
時分割して波長、ｌＥを行なうものすべてが含まれまた
測定波長領域は単に紫外光の範囲のみを測定する検出器
の他に紫外・可視光の範囲を測定する検出器も含まれる
。

（作用） 螢光物質は１通常紫外領域の光によシ励起されこの励起
光よシ長い波長の光である螢光を発する。

本発明にかかる液体クロマトグラフでは、紫外多波長同
時検出器によシカラムで分離された物質の紫外光吸収ス
ペクトルを測定する。そしてこの吸収スペクト〃よシ最
大吸収が生ずる波長が決定され、この波長に分光螢光光
度計の励起波長が設定される。一方分光螢光光度計の螢
光波長はこの励起波長よ多波長が長い方向へ螢光の走査
が行われこのスペクトμよシ最大螢光が生ずる波長が決
定される。また紫外多波長同時検出器のクロマトグラム
データよシ複数の分離成分の溶出時間が求められる５分
光螢光光度計の励起、螢光波長を切シ換える時刻はピー
クの溶出のない点を種々の方法で求めることができるが
９例えば隣り合うピーク溶出時刻の中点が決定される。

以上の切換時刻、励起波長、螢光波長が分光螢光光度計
を制御するタイムプログラムに自動的に１良定される。

（実施例） 以下図面に基づき本発明の一実施例を説明する。

第−ｌ−図は本発明にかかる液体クロマトグラフのタイ
ムプログラム作成機能説明図、第２図は本発明の液体ク
ロマトグラフの構成図である。第２図においてｌは液体
クロマトグラフィ分析用移動相であってこの移動相ｌは
ポンプ２によりカラム３に圧送される。被験液は試料導
入口４よシ流路に導入され、カラム３で被験液中の個々
の成分が分離され、紫外多波長同時検出器５のフローセ
ｆｉＪ１Ｆ！：通過し、その後分光螢光光度計６のフロ
ーセ／Ｉ／を通過する。７はコンピュータであってＣＰ
Ｕ８と記憶部９と螢光光度計を制御するタイムプログラ
ム部７よシ成る。タイムプログラムには時間と、螢光分
光光度計６の励起、螢光波長が１行のデータセットとし
て、成分数に応じた１行以上のデータが記憶されておシ
、一連のデータ脱走後に分析を行うとタイムプログラム
の機能によシクロマトグフフィー分析開始後設定された
時間毎に分光螢光光度計の励起・螢光波長が切換えられ
る。

タイムプログラム希設定時は通常標準試料混合液が試料
導入口４よシ導入される。移動相１の組成やカラム３等
の分析条件が適当に選択されれば導入された標準試料中
の成分はカラム３で個々の成分に分離される。

第１図中Ｓ１はタイムプログラム全設定するための分析
の開始であってこの時点でコンピュータ内臓時計はリセ
ットされ９時間０よシの時間のカウントアツプが始まる
。紫外多波長同時検出器５は分析中常時多波長でクロマ
トグラムを測定しているが、まず最初の成分が溶出する
とそのピーク成分の紫外吸収スペク）／Ｉ／が測定され
コンビエータに送られる（Ｓ２）。そしてＳ３では最大
吸収波長が決定され、８４で分光螢光光度計６の励起波
長がこの最大吸収波長に設定される。また、この波長は
タイムプログラムの第１行の励起波長として記憶される
８９，８５では紫外多波長同時検出器５のフローセル通
過後１分光螢光光度計６のフローセμを通過するまでの
遅れ時間を経過した後に螢光波長が走査される。螢光波
長は励起波長を短波長側の走査起点として長波長側へ波
長走査される。この螢光スペクトルデータよシ最大螢光
を与える波長が決定されＳ６タイムプログヲム第１行の
螢光波長が記憶されるＳ９゜この後は次の分離成分が溶
出すればＳ２〜Ｓ９が繰シ返されタイムプログラム各行
の励起・螢光波長が順時記憶される。

次にタイムプログラムの時間設定を説明する。

タイムプログラム第１行の時間はまず０が設定される。

プログラム第２行以降は直前のピーク溶出時刻と溶出中
のピークの溶出時刻を足して２で除した時刻が切換時刻
と設定されるＳ８゜また、螢光波長走査に時間を要する
場合には試料導入口４よシ標準試料を再度カラムに導入
し。

ピーク溶出位置でポンプを一時停止して螢光スペクト〃
を測定することも任意である。

（効果） 本発明によれば、液体クロマトグラフの検出器として接
続した分光螢光光度計のタイムプログラムを自動的に作
成する機能を有した液体クロマトグラフが得られ、この
タイムプログラム作成の時間短縮と、タイムプログラム
入力時の誤ｂｔ防ぐことができる。

【図面の簡単な説明】

第１図は本発明にかかる液体クロマトグラフのタイムプ
ログラム作成機能説明図、第２図は本発明の液体クロマ
トグラフの構成図である。 図中　２・・・ポンプ　　　　３−カラム５−・紫外多
波長同時検出器 ６−分光螢光光度計 第１０

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. フローセルを有する紫外多波長同時検出器、フローセル
   を有し螢光波長自動走査と励起・螢光波長自動設定機構
   を持ち前記紫外多波長同時検出器の下流側に直列に接続
   された分光螢光光度計、クロマトグラフィ分離成分の溶
   出時刻に応じて前記分光螢光光度計の励起・螢光波長を
   １分析中に変更するための時刻と波長のデータを記憶す
   るタイムプログラム、タイムプログラムに記憶された当
   該時刻に前記分光螢光光度計の励起・螢光波長自動設定
   機構に前記波長データを出力するコンピュータを備えた
   液体クロマトグラフにおいて、クロマトグラフィ分離さ
   れた特定成分溶出ピークの前記紫外多波長同時検出器の
   各波長における吸光度データを比較し、最大吸光度を与
   える波長を検知し、当該波長を前記分光螢光光度計の当
   該特定成分溶出ピークの検出用励起波長と決定して前記
   タイムプログラムに自動的に書き込み、かつ、紫外多波
   長同時検出器で得られるクロマトグラムをもとに特定成
   分溶出時刻を決定し、これより前記螢光光度計の励起・
   螢光波長切換時刻を算出し、当該時刻を前記タイムプロ
   グラムに自動的に書き込み、さらに前記螢光検出器の励
   起波長を前記決定された励起波長に設定し、該特定成分
   溶出ピークの螢光波長を走査し、得られた螢光スペクト
   ルより最大螢光値を与える螢光波長を前記タイムプログ
   ラムに自動的に書き込むことを特徴とする液体クロマト
   グラフ。