JP7488370B2 - 黒牛肝菌の菌株と応用 - Google Patents
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Description
本願は、出願番号が202110621298.8で、2021年6月3日に出願された中国特許に基づいて提出され、この中国特許出願の優先権を主張し、この中国特許出願の全ての内容は、参照により本出願に組み込まれる。
この菌株は、遺伝的に安定しており、活力が強く、後期にキノコ発生の速度が速くて、キノコ発生が整斉で、成長速度が速く、保存に耐えるなどの利点がある。子実体は、親本に比べて形態上で明らかな差異があり、生産量がより高くて、高い商業価値がある。また、YL1701-2に属する純粋な菌株であり、現在、黒牛肝菌の工場化栽培に使用されている菌株YL1701-2と比べて、FC0580菌株は、栽培形質がより安定しており、キノコ発生の過程で成長力がより強く、生産量がより高く、汚染防止能力がより強く、菌柄が酒瓶形状になり、牛肝菌の俗称「大足茸」の形態特徴に合致し、黒牛肝菌の工場での生産に適切な新品種であり、高い商業価値を持っている。
黒牛肝菌(Phlebopus portentosus)FC0580菌株の培養方法:本発明は、自家交雑の育種・選択方法により得られた。
YL1701-2菌株の子実体を培養し、胞子を収集する。
上記の手順で得られた胞子を培地に塗布し、トランスファー培養することにより、単核菌糸体を得る。うち、この培地は、M1培地を採用するのが適切しており、培地組成は、200gのジャガイモ(煮水)、20gのグルコース、2gの酵母ペースト、1gのMgSO4、1gのKH2PO4、16gの寒天を1000mLまでに定容する。
上記の手順で得られた単核菌糸のうち、親和性のある単核菌糸を対合し、対合に成功した菌糸体を培地に移して培養した後、キノコ発生の検証を行い、黒牛肝菌FC 0580菌株を選択・育成する。
本発明におけるFC0580菌株の基本状況及び子実体の形態特徴:
2.1 培地
FC0580菌種に最も適した培地はM1培地であり、調合方法は、200gのジャガイモ(煮水)、20gのグルコース、2gの酵母ペースト、1gのMgSO4、1gのKH2PO4、16gの寒天を1000mLまでに定容する。
菌種FC0580は、M1培地で20日間成長し、コロニーが濃い黄褐色で、菌糸が濃密で、成長が旺盛であり、菌核がなく、吐水し、1日の成長量が3.01mm/日に達し、親本の菌株YL1701-2と比べて0.48mm/日速い。
菌株FC0580の子実体形態は、親本の菌株YL1701-2と比較して、以下の共通点、相違点がある。
SSR分子を標識して鑑別する。
菌株FC0580、YL1701-2及びその他の6つの黒牛肝菌の菌株の菌糸体を収集し、DNAを抽出した後、本明細書に記載された21対のプライマーでDNAサンプルをPCR増幅し、プライマーを合成する際に、プライマーの順方向末端にFAMまたはHEX蛍光標識を付ける。PCR生成物はABI3730シーケンサを用いて遺伝子分類を行う。ソフトウェアGene mapper 4.1(Applied Biosystems Co.、Ltd.、USA)を用いて、プライマー対応関係のコア塩基反復数を参照して、正確な部位のデータを分析する。Popgene32を用いて対立遺伝子数、有効な対立遺伝子数、Shannon’s情報指数、期待ヘテロ接合度、観測ヘテロ接合度を計算する。NTSYSpc-2.10ソフトウェアを適用して遺伝的類似係数を計算し、非重み付けペア算術平均法(UPGMA)を用いてクラスタ分析を行う。UPGMAクラスタ分析結果を図1のように示す。
Claims (2)
- 黒牛肝菌の菌株であって、
黒牛肝菌(Phlebopus portentosus)FC0580は、2021年3月3日に中国微生物菌種保存管理委員会の一般微生物センターCGMCCに保存され、保存番号がCGMCC NO.21921であることを特徴とする、黒牛肝菌の菌株。 - 黒牛肝菌の生産における請求項1に記載の黒牛肝菌の菌株の使用方法。
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