JP7457822B2 - 抗cd3および抗cd123二重特異性抗体およびその使用 - Google Patents
抗cd3および抗cd123二重特異性抗体およびその使用 Download PDFInfo
- Publication number
- JP7457822B2 JP7457822B2 JP2022547913A JP2022547913A JP7457822B2 JP 7457822 B2 JP7457822 B2 JP 7457822B2 JP 2022547913 A JP2022547913 A JP 2022547913A JP 2022547913 A JP2022547913 A JP 2022547913A JP 7457822 B2 JP7457822 B2 JP 7457822B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- seq
- set forth
- antigen
- human
- binding portion
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 101000998120 Homo sapiens Interleukin-3 receptor subunit alpha Proteins 0.000 claims description 135
- 238000009739 binding Methods 0.000 claims description 104
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims description 103
- 102100033493 Interleukin-3 receptor subunit alpha Human genes 0.000 claims description 101
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 101
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 101
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 101
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 86
- 101100438942 Homo sapiens CD3E gene Proteins 0.000 claims description 35
- 102000052088 human IL3RA Human genes 0.000 claims description 34
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 23
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 claims description 18
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 claims description 18
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 16
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 14
- NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 1-methylethyl 11-methoxy-3,7,11-trimethyl-2,4-dodecadienoate Chemical compound COC(C)(C)CCCC(C)CC=CC(C)=CC(=O)OC(C)C NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- 208000031261 Acute myeloid leukaemia Diseases 0.000 claims description 8
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 7
- 208000016778 CD4+/CD56+ hematodermic neoplasm Diseases 0.000 claims description 6
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 74
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 53
- 102000017420 CD3 protein, epsilon/gamma/delta subunit Human genes 0.000 description 34
- 108050005493 CD3 protein, epsilon/gamma/delta subunit Proteins 0.000 description 34
- 101000946860 Homo sapiens T-cell surface glycoprotein CD3 epsilon chain Proteins 0.000 description 30
- 102100035794 T-cell surface glycoprotein CD3 epsilon chain Human genes 0.000 description 30
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 28
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 23
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 21
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 18
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 16
- 102000018071 Immunoglobulin Fc Fragments Human genes 0.000 description 15
- 108010091135 Immunoglobulin Fc Fragments Proteins 0.000 description 15
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 14
- 238000000034 method Methods 0.000 description 14
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 13
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 13
- 102100035360 Cerebellar degeneration-related antigen 1 Human genes 0.000 description 12
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 12
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 12
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 12
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 10
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 10
- 239000013068 control sample Substances 0.000 description 9
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 9
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 9
- 101100112922 Candida albicans CDR3 gene Proteins 0.000 description 8
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 8
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 8
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 8
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 8
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 8
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 description 7
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 7
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 7
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 7
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 7
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 7
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 7
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 6
- 108091008874 T cell receptors Proteins 0.000 description 6
- SCJNCDSAIRBRIA-DOFZRALJSA-N arachidonyl-2'-chloroethylamide Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCC(=O)NCCCl SCJNCDSAIRBRIA-DOFZRALJSA-N 0.000 description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 6
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 6
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 6
- 102000016266 T-Cell Antigen Receptors Human genes 0.000 description 5
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 5
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 5
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 5
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 5
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 4
- 102100025137 Early activation antigen CD69 Human genes 0.000 description 4
- 101000934374 Homo sapiens Early activation antigen CD69 Proteins 0.000 description 4
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 4
- 208000033776 Myeloid Acute Leukemia Diseases 0.000 description 4
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 4
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 4
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 4
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 4
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 4
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 3
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 3
- 102000018883 Interleukin-3 Receptor alpha Subunit Human genes 0.000 description 3
- 108010052781 Interleukin-3 Receptor alpha Subunit Proteins 0.000 description 3
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 3
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 3
- 230000006052 T cell proliferation Effects 0.000 description 3
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 3
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 3
- 230000010056 antibody-dependent cellular cytotoxicity Effects 0.000 description 3
- 238000011033 desalting Methods 0.000 description 3
- 230000006870 function Effects 0.000 description 3
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 3
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 3
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 210000005134 plasmacytoid dendritic cell Anatomy 0.000 description 3
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 3
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 3
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 3
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 3
- LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 1-Ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide Substances CCN=C=NCCCN(C)C LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 2-Aminoethan-1-ol Chemical compound NCCO HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 3-(dimethylamino)propyliminomethylidene-ethylazanium;chloride Chemical compound Cl.CCN=C=NCCCN(C)C FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000017815 Dendritic cell tumor Diseases 0.000 description 2
- 108010002386 Interleukin-3 Proteins 0.000 description 2
- 102000000646 Interleukin-3 Human genes 0.000 description 2
- 239000012515 MabSelect SuRe Substances 0.000 description 2
- 108090000412 Protein-Tyrosine Kinases Proteins 0.000 description 2
- 102000004022 Protein-Tyrosine Kinases Human genes 0.000 description 2
- 229940100514 Syk tyrosine kinase inhibitor Drugs 0.000 description 2
- 230000006044 T cell activation Effects 0.000 description 2
- 230000009824 affinity maturation Effects 0.000 description 2
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 2
- 210000004602 germ cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000000833 heterodimer Substances 0.000 description 2
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 229940076264 interleukin-3 Drugs 0.000 description 2
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 2
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 238000001823 molecular biology technique Methods 0.000 description 2
- 210000005087 mononuclear cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 2
- 238000001542 size-exclusion chromatography Methods 0.000 description 2
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 2
- 239000012536 storage buffer Substances 0.000 description 2
- 238000004114 suspension culture Methods 0.000 description 2
- 230000001360 synchronised effect Effects 0.000 description 2
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 241001515965 unidentified phage Species 0.000 description 2
- 238000011725 BALB/c mouse Methods 0.000 description 1
- 239000005711 Benzoic acid Substances 0.000 description 1
- 108010075254 C-Peptide Proteins 0.000 description 1
- BCZXFFBUYPCTSJ-UHFFFAOYSA-L Calcium propionate Chemical compound [Ca+2].CCC([O-])=O.CCC([O-])=O BCZXFFBUYPCTSJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000004278 EU approved seasoning Substances 0.000 description 1
- 108010087819 Fc receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000009109 Fc receptors Human genes 0.000 description 1
- 229920001917 Ficoll Polymers 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100031573 Hematopoietic progenitor cell antigen CD34 Human genes 0.000 description 1
- 101100438932 Homo sapiens CD3D gene Proteins 0.000 description 1
- 101000777663 Homo sapiens Hematopoietic progenitor cell antigen CD34 Proteins 0.000 description 1
- 101001033279 Homo sapiens Interleukin-3 Proteins 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 1
- 102000010790 Interleukin-3 Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010038452 Interleukin-3 Receptors Proteins 0.000 description 1
- PIWKPBJCKXDKJR-UHFFFAOYSA-N Isoflurane Chemical compound FC(F)OC(Cl)C(F)(F)F PIWKPBJCKXDKJR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 241000282567 Macaca fascicularis Species 0.000 description 1
- 101100438933 Macaca fascicularis CD3D gene Proteins 0.000 description 1
- 101100438943 Macaca fascicularis CD3E gene Proteins 0.000 description 1
- 108700018351 Major Histocompatibility Complex Proteins 0.000 description 1
- -1 N-hydroxysuccinimide (N-Hydroxysuccinimide) imide Chemical class 0.000 description 1
- 108090000526 Papain Proteins 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 238000010802 RNA extraction kit Methods 0.000 description 1
- 102000014400 SH2 domains Human genes 0.000 description 1
- 108050003452 SH2 domains Proteins 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000012505 Superdex™ Substances 0.000 description 1
- 108010083312 T-Cell Antigen Receptor-CD3 Complex Proteins 0.000 description 1
- 102100023935 Transmembrane glycoprotein NMB Human genes 0.000 description 1
- 102000007624 ZAP-70 Protein-Tyrosine Kinase Human genes 0.000 description 1
- 108010046882 ZAP-70 Protein-Tyrosine Kinase Proteins 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 description 1
- 229940125644 antibody drug Drugs 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000003651 basophil Anatomy 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 235000010233 benzoic acid Nutrition 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000008827 biological function Effects 0.000 description 1
- 238000010170 biological method Methods 0.000 description 1
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000009534 blood test Methods 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 238000010805 cDNA synthesis kit Methods 0.000 description 1
- 239000004330 calcium propionate Substances 0.000 description 1
- 235000010331 calcium propionate Nutrition 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000003915 cell function Effects 0.000 description 1
- 230000022534 cell killing Effects 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 239000013522 chelant Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000004040 coloring Methods 0.000 description 1
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 1
- 239000008358 core component Substances 0.000 description 1
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 102000003675 cytokine receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010057085 cytokine receptors Proteins 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 238000000432 density-gradient centrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 1
- 238000000375 direct analysis in real time Methods 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 1
- 238000012063 dual-affinity re-targeting Methods 0.000 description 1
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 1
- BEFDCLMNVWHSGT-UHFFFAOYSA-N ethenylcyclopentane Chemical compound C=CC1CCCC1 BEFDCLMNVWHSGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 235000011194 food seasoning agent Nutrition 0.000 description 1
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 1
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003394 haemopoietic effect Effects 0.000 description 1
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 1
- 210000003958 hematopoietic stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000011577 humanized mouse model Methods 0.000 description 1
- 239000003906 humectant Substances 0.000 description 1
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 238000011221 initial treatment Methods 0.000 description 1
- 230000031146 intracellular signal transduction Effects 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 229960002725 isoflurane Drugs 0.000 description 1
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 1
- 238000002898 library design Methods 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 239000012931 lyophilized formulation Substances 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 108010082117 matrigel Proteins 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000006996 mental state Effects 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 1
- 235000010446 mineral oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 1
- 229940126619 mouse monoclonal antibody Drugs 0.000 description 1
- 210000003643 myeloid progenitor cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000007857 nested PCR Methods 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 238000001543 one-way ANOVA Methods 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 1
- 229940055729 papain Drugs 0.000 description 1
- 235000019834 papain Nutrition 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 238000010837 poor prognosis Methods 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 230000004481 post-translational protein modification Effects 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 239000012460 protein solution Substances 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 1
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 239000004334 sorbic acid Substances 0.000 description 1
- 235000010199 sorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940075582 sorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 210000004988 splenocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 238000012353 t test Methods 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000012222 talc Nutrition 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000012096 transfection reagent Substances 0.000 description 1
- 108091007466 transmembrane glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001493 tyrosinyl group Chemical group [H]OC1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
- C07K16/2809—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily against the T-cell receptor (TcR)-CD3 complex
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2866—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against receptors for cytokines, lymphokines, interferons
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/545—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the dose, timing or administration schedule
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
- C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
- C07K2317/31—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency multispecific
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
- C07K2317/53—Hinge
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/55—Fab or Fab'
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
- C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/60—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments
- C07K2317/62—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments comprising only variable region components
- C07K2317/622—Single chain antibody (scFv)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/74—Inducing cell proliferation
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
- C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
Description
本出願は、2020年2月5日に出願された中国特許出願第202010080449.9号の優先権を主張するものであり、ここでその全体が参照により本明細書に組み込まれる。
配列番号1に記載のHCDR1(重鎖CDR1)、
配列番号2に記載のHCDR2(重鎖CDR2)、
配列番号3に記載のHCDR3(重鎖CDR3)、
配列番号4に記載のLCDR1(軽鎖CDR1)、
配列番号5に記載のLCDR2(軽鎖CDR2)、および
配列番号6に記載のLCDR3(軽鎖CDR3)を含み、
ここで、HCDRおよびLCDRはKabatに従って定義される。
配列番号7に記載のHCDR1(重鎖CDR1)、
配列番号8に記載のHCDR2(重鎖CDR2)、
配列番号9に記載のHCDR3(重鎖CDR3)、
配列番号4に記載のLCDR1(軽鎖CDR1)、
配列番号5に記載のLCDR2(軽鎖CDR2)、および
配列番号6に記載のLCDR3(軽鎖CDR3)を含み、
ここで、HCDRおよびLCDRはKabatに従って定義される。
第3の態様のいくつかの実施形態において、前記ヒトCD3Eに対する抗原結合部分は、
配列番号1に記載のHCDR1、
配列番号2に記載のHCDR2、
配列番号3に記載のHCDR3、
配列番号4に記載のLCDR1、
配列番号5に記載のLCDR2、および
配列番号6に記載のLCDR3を含み、
ここで、HCDRおよびLCDRはKabatに従って定義される。
配列番号7に記載のHCDR1、
配列番号8に記載のHCDR2、
配列番号9に記載のHCDR3、
配列番号4に記載のLCDR1、
配列番号5に記載のLCDR2、および
配列番号6に記載のLCDR3を含み、
ここで、HCDRおよびLCDRはKabatに従って定義される。
第3の態様のいくつかの実施形態において、前記二重特異性抗体は同一のヒンジ領域を備える重鎖定常領域を2種類含むIgG1抗体であり、前記ヒンジ領域のアミノ酸配列は配列番号10に記載される。
第3の態様のいくつかの実施形態において、前記二重特異性抗体は第1の重鎖定常領域および第2の重鎖定常領域を含むIgG1抗体であり、そのうち、前記第1の重鎖定常領域の354番目および366番目のアミノ酸はそれぞれCおよびWであり、前記第2の重鎖定常領域の349、366、368および407番目のアミノ酸はそれぞれC、S、AおよびVであり、抗体定常領域アミノ酸位置はEU numberingに従って決定される。
第3の態様のいくつかの実施形態において、前記二重特異性抗体は第1の重鎖定常領域および第2の重鎖定常領域を含むIgG1抗体であり、そのうち前記第1の重鎖定常領域および第2の重鎖定常領域の234、235および331番目のアミノ酸はそれぞれF、EおよびSであり、抗体定常領域アミノ酸位置はEU numberingに従って決定される。
上記のいずれかの態様のいくつかの実施形態において、前記ヒトCD3Eに対する抗原結合部分は一本鎖抗体(scfv)またはFab断片を含む。
上記のいずれかの態様のいくつかの実施形態において、前記ヒトCD123に対する抗原結合部分は一本鎖抗体(scfv)またはFab断片を含む。
前記第1のアームは、配列番号11に記載の重鎖可変領域のアミノ酸配列、配列番号31に記載の重鎖定常領域のアミノ酸配列、配列番号12に記載の軽鎖可変領域のアミノ酸配列、および配列番号32に記載の軽鎖定常領域のアミノ酸配列を含み、
前記第2のアームは、配列番号13に記載の重鎖可変領域のアミノ酸配列、配列番号30に記載の重鎖定常領域のアミノ酸配列、配列番号12に記載の軽鎖可変領域のアミノ酸配列、および配列番号32に記載の軽鎖定常領域のアミノ酸配列を含む。
第4の態様のいくつかの実施形態において、CD123陽性腫瘍を予防または治療するための医薬組成物を提供する。
配列番号1は、抗ヒトCD3Eモノクローナル抗体H3B8+L27E5の重鎖可変領域H3B8のHCDR1のアミノ酸配列である。
配列番号2は、抗ヒトCD3Eモノクローナル抗体H3B8+L27E5の重鎖可変領域H3B8のHCDR2のアミノ酸配列である。
配列番号3は、抗ヒトCD3Eモノクローナル抗体H3B8+L27E5の重鎖可変領域H3B8のHCDR3のアミノ酸配列である。
配列番号4は、軽鎖可変領域L27E5のLCDR1のアミノ酸配列である。
配列番号5は、軽鎖可変領域L27E5のLCDR2のアミノ酸配列である。
配列番号6は、軽鎖可変領域L27E5のLCDR3のアミノ酸配列である。
配列番号7は、抗ヒトCD123モノクローナル抗体H7A3-h2-m5+L27E5の重鎖可変領域H7A3-h2-m5のHCDR1のアミノ酸配列である。
配列番号8は、抗ヒトCD123モノクローナル抗体H7A3-h2-m5+L27E5の重鎖可変領域H7A3-h2-m5のHCDR2のアミノ酸配列である。
配列番号9は、抗ヒトCD123モノクローナル抗体H7A3-h2-m5+L27E5の重鎖可変領域H7A3-h2-m5のHCDR3のアミノ酸配列である。
配列番号10は、ヒンジ領域のアミノ酸配列である。
配列番号12は、ラットモノクローナル抗体WM03-C6のヒト化の軽鎖変異体L27E5のアミノ酸配列である。
配列番号13は、ヒト化バージョンH7A3-h2-m5のアミノ酸配列である。
配列番号14は、ヒト(Homo sapiens)CD3E細胞外領域(hCD3E)のアミノ酸配列である。
配列番号15は、ヒト(Homo sapiens)CD3D細胞外領域(hCD3D)のアミノ酸配列である。
配列番号16は、蟹喰猿(カニクイザル:Macaca fascicularis)CD3E細胞外領域(mfCD3E)のアミノ酸配列である。
配列番号17は、蟹喰猿(Macaca fascicularis)CD3D細胞外領域(mfCD3D)のアミノ酸配列である。
配列番号18は、マウス(Mus musculus)CD3E細胞外領域(mCD3E)のアミノ酸配列である。
配列番号19は、マウス(Mus musculus)CD3D細胞外領域(mCD3D)のアミノ酸配列である。
配列番号20は、ヒト(Homo sapiens)CD123サブタイプ1細胞外領域(hCD123-SP1)のアミノ酸配列である。
配列番号22は、マウス(Mus musculus)CD123サブタイプ1細胞外領域(mCD123-SP1)のアミノ酸配列である。
配列番号23は、Hisタグのアミノ酸配列である。
配列番号24は、マウス(Mus musculus)IgG2a抗体のFc断片(mFc)のアミノ酸配列である。
配列番号25は、ヘテロダイマーのヒトIgG1サブタイプのFc変異体FcKのアミノ酸配列である。
配列番号26は、ヘテロダイマーのヒトIgG1サブタイプのFc変異体FcHのアミノ酸配列である。
配列番号27は、ヒト(Homo sapiens)IgG1サブタイプ抗体重鎖定常領域のアミノ酸配列である。
配列番号28は、ヒトIgG1サブタイプ抗体重鎖定常領域変異体IgG1Hのアミノ酸配列である。
配列番号29は、ヒトIgG1サブタイプ抗体重鎖定常領域変異体IgG1Kのアミノ酸配列である。
配列番号30は、ヒトIgG1サブタイプ抗体重鎖定常領域変異体IgG1m3-Hのアミノ酸配列である。
配列番号32は、ヒト(Homo sapiens)κサブタイプ軽鎖定常領域のアミノ酸配列である。
配列番号33は、ヒト(Homo sapiens)λサブタイプ軽鎖定常領域のアミノ酸配列である。
配列番号34は、モノクローナル抗体WM03-C6の重鎖可変領域のアミノ酸配列である。
配列番号35は、モノクローナル抗体WM03-C6の軽鎖可変領域のアミノ酸配列である。
配列番号36は、抗ヒトCD123の一本鎖抗体S8F3のアミノ酸配列である。
配列番号37は、抗ヒトCD123の一本鎖抗体S8F3の重鎖可変領域S8F3VHのアミノ酸配列である。
配列番号38は、抗CD123抗体CSL362の重鎖アミノ酸配列である。
配列番号39は、抗CD123抗体CSL362の軽鎖アミノ酸配列である。
配列番号40は、Hole変異含有IgG1m3サブタイプのXmab14045の結合するCD123の重鎖のアミノ酸配列である。
配列番号41は、Knob変異含有IgG1m3サブタイプのXmab14045の結合するCD3EのscFv構造のアミノ酸配列である。
配列番号42は、Xmab14045の軽鎖のアミノ酸配列である。
以下の定義および方法は、本発明をより明確に定義し、本発明の実践において当業者を指導するために提供されるものである。特に断らない限り、本明細書に記載された全ての用語は、当業者によって一般的に理解される意味を有する。本明細書に引用される全ての特許文献、学術論文及びその他の公開出版物は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
配列番号1に記載のHCDR1、
配列番号2に記載のHCDR2、
配列番号3に記載のHCDR3、
配列番号4に記載のLCDR1、
配列番号5に記載のLCDR2、および
配列番号6に記載のLCDR3を含み、
ここで、HCDRおよびLCDRはKabatに従って定義される。
配列番号7に記載のHCDR1、
配列番号8に記載のHCDR2、
配列番号9に記載のHCDR3、
配列番号4に記載のLCDR1、
配列番号5に記載のLCDR2、および
配列番号6に記載のLCDR3を含み、
ここで、HCDRおよびLCDRはKabatに従って定義される。
第3の態様のいくつかの実施形態において、前記ヒトCD3Eに対する抗原結合部分は、
配列番号1に記載のHCDR1、
配列番号2に記載のHCDR2、
配列番号3に記載のHCDR3、
配列番号4に記載のLCDR1、
配列番号5に記載のLCDR2、および
配列番号6に記載のLCDR3を含み、
ここで、HCDRおよびLCDRはKabatに従って定義される。
配列番号7に記載のHCDR1、
配列番号8に記載のHCDR2、
配列番号9に記載のHCDR3、
配列番号4に記載のLCDR1、
配列番号5に記載のLCDR2、および
配列番号6に記載のLCDR3を含み、
ここで、HCDRおよびLCDRはKabatに従って定義される。
第3の態様のいくつかの具体実施形態において、前記ヒトCD3Eに対する抗原結合部分および前記ヒトCD123に対する抗原結合部分には、同一の軽鎖を含み、当該実施形態は、軽鎖および重鎖の正確な組み立てに有利であり、好ましい実施形態の1つでもある。
前記第1のアームは、配列番号11に記載の重鎖可変領域のアミノ酸配列、配列番号31に記載の重鎖定常領域のアミノ酸配列、配列番号12に記載の軽鎖可変領域のアミノ酸配列、および配列番号32に記載の軽鎖定常領域のアミノ酸配列を含み、
前記第2のアームは、配列番号13に記載の重鎖可変領域のアミノ酸配列、配列番号30に記載の重鎖定常領域のアミノ酸配列、配列番号12に記載の軽鎖可変領域のアミノ酸配列、および配列番号32に記載の軽鎖定常領域のアミノ酸配列を含む。
上記のいずれかの態様のいくつかの実施形態において、前記二重特異性抗体の軽鎖定常領域は、ヒトκサブタイプまたはヒトλサブタイプであり、ヒトκサブタイプであることが好ましい。
いくつかの実施形態において、前記医薬組成物は薬学的に許容される担体、賦形剤、希釈剤などをさらに含む。
いくつかの実施形態において、前記医薬組成物は、CD123陽性腫瘍、例えば、急性骨髄性白血病(AML)および芽球性形質細胞様樹状細胞腫瘍(BPDCN)を予防または治療するためのものである。
いくつかの実施形態において、医薬組成物は、潤滑剤(例えばタルク、ステアリン酸マグネシウムおよび鉱物油)、潤湿剤、乳化剤、懸濁化剤、防食剤(例えば安息香酸、ソルビン酸およびプロピオン酸カルシウム)、甘味剤および/または調味剤などをさらに含んでもよい。
いくつかの実施形態において、本発明に係る医薬組成物は、任意の生理学的に許容される投与方式で送達することができる。これら投与方式は、経口投与、胃腸外投与、経鼻投与、直腸投与、腹腔内投与、血管内注射、皮下投与、経皮投与、吸入投与などを含むが、これらに限らない。
いくつかの実施形態において、所望な純度のある試薬と、必要に応じて薬学的に許容される担体、賦形剤などを配合し、貯蔵(保存)のために凍結乾燥製剤または水溶液の形で治療用の医薬組成物を製剤化することができる。
第5の態様のいくつかの実施形態において、前記CD123陽性腫瘍は急性骨髄性白血病(AML)および芽球性形質細胞様樹状細胞腫瘍(BPDCN)からなる群から選ばれる。
第6の態様のいくつかの実施形態において、前記CD123陽性腫瘍は急性骨髄性白血病(AML)および芽球性形質細胞様樹状細胞腫瘍(BPDCN)からなる群から選ばれる。
CD3E×CD123二重特異性抗体の製造および同定の過程において、複数種類の異なる組換えタンパク質を用いる必要があり、ヒトCD3E細胞外領域(hCD3E、配列番号14)、ヒトCD3D細胞外領域(hCD3D、配列番号15)、サルCD3E細胞外領域(mfCD3E、配列番号16)、サルCD3D細胞外領域(mfCD3D、配列番号17)、マウスCD3E細胞外領域(mCD3E、配列番号18)、マウスCD3D細胞外領域(mCD3D、配列番号19)およびヒトCD123サブタイプ1細胞外領域(hCD123-SP1、配列番号20)、サルCD123サブタイプ1細胞外領域(mfCD123-SP1、配列番号21)、マウスCD123サブタイプ1細胞外領域(mCD123-SP1、配列番号22)を含む。これらの組換えタンパク質は、いずれも大量の翻訳後修飾(例えば、グリコシル化またはジスルフィド結合など)を有するため、哺乳類細胞発現系を用いることにより、組換えタンパク質の構造および機能をさらに維持するのに有利である。なお、精製を容易にするため、非抗体系の組換えタンパク質のC末端に、Hisタグ(配列番号23)またはマウス抗体IgG2aのFc断片(mFc、配列番号24)を加え、またはKIH(Knob-Into-Hole)技術に基づいてヘテロダイマーのヒトIgG1サブタイプのFc変異体(FcK、配列番号25またはFcH、配列番号26)を形成する。組換え抗体を製造する場合、抗体重鎖定常領域は、ヒトIgG1サブタイプ(配列番号27)または選択されたヒトIgG1サブタイプの各種の変異体であってもよく、例えばIgG1H(配列番号28)、IgG1K(配列番号29)、IgG1m3-H(配列番号30)またはIgG1m3-K(配列番号31)であり、軽鎖定常領域はヒトκサブタイプ(配列番号32)またはヒトλサブタイプ(配列番号33)である。
共通軽鎖に基づくCD3E×CD123二重特異性抗体を構築するために、特定の抗CD3Eモノクローナル抗体軽鎖可変領域を選択し、CD123抗原の体内親和性成熟を経たマウス重鎖可変領域に配合し、通常の分子生物学的手段を用いて一本鎖抗体(scFv)ライブラリを構築し、CD123に対する特異的抗体をスクリーニングするために使用する。
3.1 抗ヒトCD123マウス一本鎖抗体のスクリーニング
実施例1で製造された組換えhCD123-SP1-hisを抗原として、固相スクリーニング戦略(実験プロトコールは、バクテリオファージ展示:汎用実験マニュアル/(米)Clackson,T.、(米)Lowman,H.B.編集、馬嵐ら翻訳。化学工業出版社、2008.5を参照)を用いて実施例2で構築されたマウス一本鎖抗体を展示するバクテリオファージライブラリをスクリーニングし、結合、溶出、中和、感染、増幅の方式で合計3回スクリーニングを行い、最終的にヒトCD123に特異的に結合する一本鎖抗体S8F3(配列番号36)1株を得た。
Biacore X100を用いて表面プラズマ共鳴技術により抗CD123抗体の親和性を測定した。アミノコンジュゲーションキットキット(Amino Conjugation Kit)(BR-1000-50)、ヒト抗体捕獲キット(BR-1008-39)、CM5チップ(BR100012)およびpH7.4の10× HBS-EP(BR100669)などの関連試薬および消耗品は、すべてGE healthcareから購入した。キットに関する取扱説明書に従い、1-(3-ジメチルアミノプロピル)-3-エチルカルボジイミド塩酸塩(1-Ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl) carbodiimide hydrochloride:EDC)およびN-ヒドロキシスクシンイミド(N-Hydroxysuccinimide:NHS)を用いてカルボキシル化CM5チップ表面を活性化し、10mM、pH5.0の酢酸ナトリウムで抗ヒトIgG(Fc)抗体(捕獲抗体)を25μg/mLまで希釈させた後に、流速10μL/minで注射して約10000個の応答単位(RU)のカップリング量を実現した。捕獲抗体を注射した後、1Mエタノールアミンを注射して未反応基をブロックした。動力学的測定では、抗CD123抗体(S8F3VH+C6VKおよびCSL362)を0.5~1μg/mLまで希釈し、10μL/minで注射し、100RU程度の抗体が抗ヒトFc抗体に捕獲されるように確保した。その後hCD123-SP1-hisを一連の濃度勾配(例えば、2.47nM、7.4nM、22.2nM、66.7nM、200nM)に設定し、25℃、30μL/minで低濃度から高濃度まで注射し、結合時間は120sであり、解離時間は600~2400sであり、10μL/minで3MのMgCl2溶液を30s注射してチップ表面を再生した。Biacore X100評価ソフトウェアのバージョン2.0.1を用いて結合速度(Kon)および解離速度(Koff)を1:1結合モデルフィッティング結合と解離センサーマップから計算した。比率Koff/Konで解離平衡定数(KD)を計算した。フィッティング結果を表1に示す。
成長対数期のKG-1a(ヒト急性骨髄性白血病細胞、中国医学科学院基礎医学研究所細胞資源センターから購入)を取り、遠心後1%のBSAを含むPBS緩衝液で2×106個/mLまで再懸濁し、100μL/ウェルで96ウェルV底板に敷き、遠心後に上清を取り除いた。被検試料S8F3VH+C6VK、対照試料CSL362、およびHIgG非関連抗体(A01006、ヒトIgG対照(全分子、精製)、GenScript社)を、PBS緩衝液でそれぞれ5μg/mLおよび0.5μg/mLの最終濃度に調製し、細胞を含有するウェルに加え、4℃で1時間インキュベートした。その後200μLのPBS緩衝液で3回洗浄し、ヤギ抗ヒトIgG-FITC(中杉金橋、ZF-0308)二次抗体(100μL/ウェル)を加えて4℃、暗所で30分間インキュベートした。その後200μLのPBS緩衝液で3回洗浄し、PBS緩衝液100μLで再懸濁した後フローサイトメトリー(ACEA,Novocyte)でFITCチャネルを検出した。その結果、S8F3VH+C6VKはCD123陽性細胞KG-1aに特異的に結合できることが示された(図1)。
4.1 WM03-C6ヒト化設計
ラットのモノクローナル抗体WM03-C6に対してヒト化研究を行い、その免疫原性を低減させた。
実施例3.2を参照し、抗ヒトIgG(Fc)抗体をCM5チップ表面にカップリングし、抗CD3E抗体(WM03-C6およびH3B8+L27E5)を、0.5~1μg/mLまで希釈した。10μL/minで注射し、350~400RU程度の抗体が抗ヒトFcの抗体に捕獲されるように確保する。その後、hCD3E-hisを一連の濃度勾配(例えば、6.17nM、18.5nM、55.6nM、167nM、500nM)に設定し、25℃、30μL/minで低濃度から高濃度まで注射し、結合時間は120sであり、解離時間は600~1800sであり、10μL/minで3MのMgCl2を30s注射してチップ表面を再生した。Biacore X100評価ソフトウェアのバージョン2.0.1を用いて結合速度(Kon)および解離速度(Koff)を1:1結合モデルフィッティング結合と解離センサーマップから計算した。比率Koff/Konで解離平衡定数(KD)を計算した。フィッティング結果を表2に示す。
標的抗原に対する二重特異性抗体の特異性を高め、二重特異性抗体の投与過程における組織分布と殺傷効率を強めるために、S8F3重鎖可変領域に対してインビトロ親和性成熟を行った。通常の分子生物学的手段を用いてS8F3重鎖可変領域のCDR3に変異を導入することにより、S8F3VHに基づくCDR3変異ライブラリを構築した。設計した変異方案は、表3に示す通りであり、構築ライブラリ容量は1.7×10E8であり、正解率は86%である。
抗ヒトCD123マウスモノクローナル抗体重鎖H7A3のヒト化は古典的なフレームワーク移植戦略を採用した。実施例4を参照してH7A3の重鎖可変領域に対するCDR移植を行い、ヒト化バージョンH7A3VH-h2を得、同時に抗体の配座および親和性を確保するために、ヒト化抗体フレームワーク領域のいくつかの重要なアミノ酸(例えばI69、R71、T73、A75)に対して回復変異を行い、最終的にヒト化バージョンH7A3-h2-m5(配列番号13)を得た。ヒト化抗体のアミノ酸配列に基づいて抗体可変領域遺伝子を設計し合成し、真核発現ベクターにクローニングし、共通軽鎖L27E5を配合してヒトIgG1バージョン全抗体を発現させた。
CD3Eモノクローナル抗体の重鎖可変領域H3B8およびCD123モノクローナル抗体の重鎖可変領域H7A3-h2-m5をコードするヌクレオチド配列を、それぞれ適切な真核発現ベクターにクローニングし、共通軽鎖に基づくヘテロダイマーを構築した。すなわち、CD3E抗体の重鎖可変領域をコードするヌクレオチド配列を、Knob変異のIgG1定常領域IgG1m3-Kをコードするヌクレオチド配列が融合された真核発現ベクターにクローニングし、CD123抗体の重鎖可変領域をコードするヌクレオチド配列を、Hole変異のIgG1定常領域IgG1m3-Hをコードするヌクレオチド配列を含有する真核発現ベクターにクローニングし、共通軽鎖L27E5の可変領域VKをコードするヌクレオチド配列を、ヒト軽鎖定常領域CKをコードするヌクレオチド配列が融合された真核発現ベクターにクローニングした。同時に、候補分子と臨床で研究しているCD3E×CD123二重特異性抗体との生物学の活性を比較するために、特許WO2017210443を参照してと同一のFc構造に基づくXmab14045(配列番号40、配列番号41、配列番号42)を構築した。
実施例3.2および4.2を参照し、Biacore X100を用いて表面プラズマ共鳴技術により抗CD3Eモノクローナル抗体H3B8+L27E5、抗CD123モノクローナル抗体H7A3-h2-m5+L27E5、二重特異性抗体CD3×CD123(CD3×CD123 BsAb)、および対照抗体Xmab14045に対して親和性測定を行い、親和性フィッティング結果を表6および表7に示す。
通常ELISA方法を用いて二重特異性抗体CD3×CD123(CD3×CD123 BsAb)のCD3EとCD123との2種類の抗原の同時結合を検出した。CD123-SP1-mFc抗原を、96ウェルELISAプレート(3μg/mL、100μL/ウェル)で被覆し、4℃で一晩被覆した。ブロッキング液PBS-0.1%Tween20-3%牛乳を用いて37℃で1時間ブロッキングした後、それぞれ抗CD123モノクローナル抗体H7A3-h2-m5+L27E5、抗CD3Eモノクローナル抗体H3B8+L27E5および二重特異性抗体CD3×CD123(10μg/mL、100μL/ウェル)を、それぞれ重複で2つのウェルに加え、37℃で1時間インキュベートした。PBS-0.1%Tween20でELISAプレートを洗浄し、その後CD3E-his抗原(1μg/mL、100μL/ウェル)を加えて37℃で1時間インキュベートした。PBS-0.1%Tween20でELISAプレートを洗浄し、その後HRPマウス抗his IgG(cw0285M、北京康為世紀生物科技有限公司)を加えて37℃で1時間インキュベートした。PBS-0.1%Tween20でELISAプレートを洗浄し、OPD基質発色液を加えて5~10分間後1MのH2SO4で発色を停止し、マイクロプレートリーダーにより492nm/630nmの二波長における光学濃度値を測定した。ELISA分析結果、図3に示すように、二重特異性抗体CD3×CD123は、CD3EとCD123との2種類の抗原を同時に識別することができる。
10.1 二重特異性抗体が細胞表面CD3Eを識別する能力の同定
成長対数期のJurkat-Dual細胞(jktd-isnf、Invivogenから購入)を取って、遠心後1%のBSAを含むPBS緩衝液で2×106個/mLに再懸濁し、100μL/ウェルで96ウェルV底板に敷き、遠心後に上清を取り除いた。二重特異性抗体対照試料Xmab14045、抗CD3Eモノクローナル抗体H3B8+L27E5、HIgG非関連抗体(A01006、ヒトIgG対照(全分子、精製)、GenScript社)、および二重特異性抗体CD3×CD123(CD3×CD123 BsAb)をPBS緩衝液で希釈し、400nMを初期濃度とし、前の3つの濃度点に対して2倍希釈し、その後の5つの濃度点に対して3倍希釈し、合計8つの濃度点とし、細胞を含有するウェルに加え、4℃で1時間インキュベートした。その後200μLのPBS緩衝液で3回洗浄し、ヤギ抗ヒトIgG-FITC(中杉金橋、ZF-0308)を100μL/ウェルで加え、4℃、暗所で30分間インキュベートした。その後200μLのPBS緩衝液で3回洗浄し、PBS緩衝液100μLで再懸濁した後フローサイトメトリー(ACEA、Novocyte)でFITCチャネルを検出した。結果は、二重特異性抗体CD3×CD123がJurkat-Dual細胞表面のCD3Eとをよく結合できることが示されており、結合強度が対照試料Xmab14045よりも弱く、実施例9の親和性測定結果と同様である(図4)。
成長対数期のMV-4-11細胞を取って遠心後、1%BSAを含むPBS緩衝液で2×106個/mLに再懸濁し、100μL/ウェルで96ウェルV底板に敷き、遠心後に上清を取り除いた。PBS緩衝液で試料を希釈し、二重特異性抗体対照試料Xmab14045、抗CD123モノクローナル抗体H7A3-h2-m5+L27E5、二重特異性抗体CD3×CD123(CD3×CD123 BsAb)およびHIgG非関連抗体(A01006、ヒトIgG対照(全分子、精製)、GenScript社)を、それぞれ100nMの初期濃度から3倍段階希釈して合計9つの濃度点とし、細胞を含有する96ウェルプレートに加え、4℃で1時間インキュベートした。その後200μLのPBS緩衝液で3回洗浄し、ヤギ抗ヒトIgG-FITC(中杉金橋、ZF-0308)を100μL/ウェルで加え、4℃、暗所で30分間インキュベートした。その後200μLのPBS緩衝液で3回洗浄し、PBS緩衝液100μLで再懸濁した後フローサイトメトリー(ACEA、Novocyte)でFITCチャネルを検出した。結果は、二重特異性抗体CD3×CD123がCD123陽性細胞MV-4-11表面のCD123とをよく結合できることが示されており、KD値は7.08nMであり、Xmab14045(KD=6.07nM)と相当する(図5)。
成長対数期にあるMV-4-11細胞(CD123+細胞)を収集し、遠心後1640培地で2×106個/mLまで再懸濁し、50μL/ウェルで細胞プレートに敷き、遠心後に上清を取り除いた。成長対数期のJurkat-Dual細胞(Invivogenから購入)収集し、遠心後1640培地で2×106個/mLまで再懸濁し、50μL/ウェルで細胞プレートに加えて1:1の最終的なE:T割合を得た。その後、初期濃度6nMから4倍段階希釈してなる8つの濃度点の二重特異性抗体CD3×CD123(CD3×CD123 BsAb、50μL/ウェル)を加えた。二重特異性抗体対照試料Xmab14045、抗CD3Eモノクローナル抗体H3B8+L27E5、抗CD123モノクローナル抗体H7A3-h2-m5+L27E5、H3B8+L27E5とH7A3-h2-m5+L27E5との組み合せ(H3B8+L27E5 & H7A3-h2-m5+L27E5)、CD123陰性標的細胞(BAF3細胞)、およびHIgG非関連抗体(A01006、ヒトIgG対照(全分子、精製)、GenScript社)は対照群として設置され、それぞれ二重特異性抗体CD3×CD123の濃度と同一の濃度を使用した。20時間インキュベートした後、上清を取って、QUANTI-Luc(登録商標)取扱説明書(QUANTI-Luc、Invivogen、rep-qlc2)を参照しては異なる条件下で媒介された腫瘍細胞のJurkat-Dual細胞に対する特異的活性化を検出し分析した(図6のA~B)。
12.1 ヒト末梢血単核細胞(PBMC)の分離
正常なボランティアの血液(各50mL)を採取し、すべてのボランティアがインフォームドコンセントを締結した。
1.年齢が18歳を超え、
2.HIV、HBV感染がなく、
3.血液ルーチン検査は正常であり、
4.妊婦または授乳中の女性でない。
Ficoll密度勾配遠心法を用いてボランティア全血細胞からPBMCを分離して得、1640培地に培養した。
成長対数期のMV-4-11細胞(CD123+細胞)収集し、遠心後1640培地で1×106個/mLまで再懸濁し、50μL/ウェルで細胞プレートに敷いた。その後、初期濃度1nMから4倍段階希釈してなる8つの濃度点の二重特異性抗体CD3×CD123(CD3×CD123 BsAb、50μL/ウェル)を加えた。T細胞陰性選別キット取扱説明書(BD IMaq human T lymphocyte enrichment set-DM、BD、557874)に従ってPBMCから精製のT細胞(5×106個/mL、50μL/ウェル)を選別して得、最終的なET比(effector-target ratio)は5:1となった。同時に、標的細胞単独の対照(MV-4-11細胞)、効果細胞単独の対照(T)、培地単独の空白対照を設定し、そして培地を用いて体積が150μLになるまで補充した。20時間インキュベートした後、上清を取って、cytoTox96(登録商標)非放射性細胞毒性検出試薬取扱説明書(cytoTox96(登録商標) Non-Radioactive Cytotoxicity Assay、promega、G1780)に従って二重特異性抗体CD3×CD123で媒介されたT細胞の腫瘍細胞に対する殺傷率を検出し分析した。結果は、二重特異性抗体CD3×CD123がCD123陽性腫瘍細胞に対するT細胞の殺傷を特異的に媒介できることが示されており、CD123陰性腫瘍細胞(BAF3細胞)に対する殺傷効果が示されていなかった(図7)。
上記12.2項の実験において、上清を取った後の細胞をPBS緩衝液で2回洗浄し、抗ヒトCD3-APC(ebioscience社、17-0037-42)および抗ヒトCD69-PE(ebioscience社、11-0069-42)というフローサイトメトリー用抗体を加えて4℃、暗所で30分間インキュベートした後に、PBS緩衝液で2回洗浄し、PBS緩衝液100μLで再懸濁した後フローサイトメーター(ACEA NovoCyte)により検出し、二重特異性抗体CD3×CD123(CD3×CD123 BsAb)処理後のCD3陽性細胞群(MV-4-11細胞)における活性化マーカーCD69の発現の相違を比較した。結果は、二重特異性抗体CD3×CD123が、陽性腫瘍細胞の存在下で、T細胞表面CD69の発現を特異的に上方制御することができ、CD123陰性腫瘍細胞(BAF3細胞)がT細胞表面CD69の発現を上方制御できないことが示されている(図8)。
13.1 ヒト末梢血単核細胞(PBMC)の分離
実施例12.1を参照し選別してPBMCを得た。
T細胞陰性選別キット取扱説明書(BD IMaq human T lymphocyte enrichment set-DM、BD、557874)を参照し、PBMCから選別して精製のT細胞を得た。CFSE着色取扱説明書に従って精製のT細胞に対して(CFSE、eBioscience、65-0850-84)着色し、1640培地で2×106個/mLまで再懸濁し、50μL/ウェルで細胞培養プレートに加えた。成長対数期のMV-4-11(CD123+細胞)を収集し、遠心後1640培地で5×105個/mLまで再懸濁し、50μL/ウェルで細胞プレートに敷き、最終的なET比(effector-target ratio)は4:1となった。その後、初期濃度0.25nMから4倍段階希釈してなる8つの濃度点の二重特異性抗体CD3×CD123(CD3×CD123 BsAb、50μL/ウェル)、およびXmab14045を加えた。別途で、0.25nM濃度点の対照(群)としてそれぞれ抗CD3Eモノクローナル抗体H3B8+L27E5単独、抗CD123モノクローナル抗体H7A3-h2-m5+L27E5単独、およびH3B8+L27E5とH7A3-h2-m5+L27E5との組み合せ(H3B8+L27E5 & H7A3-h2-m5+L27E5)を設定した。なお、0.25nM濃度点の二重特異性抗体CD3×CD123がCD123陰性腫瘍細胞(BAF3細胞)の存在下で作用させる対照(群)をさらに設定した。5日間インキュベートした後、PBS緩衝液で2回洗浄し、抗ヒトCD3-APC(ebioscience、17-0037-42)というフローサイトメトリー用抗体を用いて4℃、暗所で30分間インキュベートした後に、PBS緩衝液で2回洗浄し、PBS緩衝液100μLで再懸濁した後、フローサイトメトリー(ACEA、Novocyte)でT細胞増殖の状況を検出した(図9A~B)。
42匹(32匹を群分け、10匹を予備し)20~24週齡の雌性hCD34+ヒト化マウス(澎立生物医薬技術(上海)有限公司から購入)を選択し、100μLの1×107個のMV-4-11細胞および100μLのMatrigelを均一に混合させた後に皮下注射によりマウスの背中の右側に接種し、接種前に3~4%イソフルランでマウス麻酔させた。腫瘍が平均で約50~80mm3程度まで増殖した際に、32匹の腫瘍担持マウスを末梢血中のhCD45+の割合および腫瘍体積に基づいて群ごとに8匹ずつ4群に無作為に分けた。群分け投与当日を0日目と定義した。試験は、二重特異性抗体CD3×CD123の0.01mg/kg群、0.1 mg/kg群、0.5mg/kg群および陰性対照群(IgG1m3、0.5mg/kg)という4群とし、群ごとに8匹であり、0日目、3日目、7日目、14日目および21日目に尾静脈注射投与し、合計5回投与した。相対腫瘍阻害率(TGI)に基づいて療効評価を行い、動物の体重変化および死亡状況に基づいて安全性の評価を行った。
Claims (12)
- ヒトCD3Eに対する抗原結合部分およびヒトCD123に対する抗原結合部分を含む、二重特異性抗体であって、
前記ヒトCD3Eに対する抗原結合部分は、
配列番号1に記載のHCDR1、
配列番号2に記載のHCDR2、
配列番号3に記載のHCDR3、
配列番号4に記載のLCDR1、
配列番号5に記載のLCDR2、および
配列番号6に記載のLCDR3を含み、
前記ヒトCD123に対する抗原結合部分は、
配列番号7に記載のHCDR1、
配列番号8に記載のHCDR2、
配列番号9に記載のHCDR3、
配列番号4に記載のLCDR1、
配列番号5に記載のLCDR2、および
配列番号6に記載のLCDR3を含み、
ここで、HCDRおよびLCDRはKabatに従って定義される、
二重特異性抗体。 - 請求項1に記載の二重特異性抗体であって、
前記ヒトCD3Eに対する抗原結合部分および前記ヒトCD123に対する抗原結合部分は、同一の軽鎖可変領域を含み、ならびに/あるいは
同一のヒンジ領域を備える重鎖定常領域を2種類含むIgG1抗体であり、前記ヒンジ領域のアミノ酸配列は配列番号10に記載される、二重特異性抗体。 - 請求項2に記載の二重特異性抗体であって、前記ヒトCD3Eに対する抗原結合部分および前記ヒトCD123に対する抗原結合部分は、同一の軽鎖を含む、二重特異性抗体。
- 請求項1~3のいずれか1項に記載の二重特異性抗体であって、第1の重鎖定常領域および第2の重鎖定常領域を含むIgG1抗体であり、そのうち
前記第1の重鎖定常領域の354番目および366番目のアミノ酸は、それぞれCおよびWであり、前記第2の重鎖定常領域の349、366、368および407番目のアミノ酸は、それぞれC、S、AおよびVであり、ならびに/あるいは
前記第1の重鎖定常領域および第2の重鎖定常領域の234、235および331番目のアミノ酸は、それぞれF、EおよびSであり、
抗体定常領域のアミノ酸位置は、EU numberingに従って決定される、
二重特異性抗体。 - 請求項1~4のいずれか1項に記載の二重特異性抗体であって、前記ヒトCD3Eに対する抗原結合部分は、配列番号11に記載の重鎖可変領域、および配列番号12に記載の軽鎖可変領域を含む、
二重特異性抗体。 - 請求項1~5のいずれか1項に記載の二重特異性抗体であって、前記ヒトCD123に対する抗原結合部分は、配列番号13に記載の重鎖可変領域、および配列番号12に記載の軽鎖可変領域を含む、
二重特異性抗体。 - 請求項1~6のいずれか1項に記載の二重特異性抗体であって、前記ヒトCD3Eに対する抗原結合部分および/または前記ヒトCD123に対する抗原結合部分は、一本鎖抗体(scfv)またはFab断片を含む、二重特異性抗体。
- 請求項7に記載の二重特異性抗体であって、
前記ヒトCD3Eに対する抗原結合部分はFab断片を含み、前記ヒトCD123に対する抗原結合部分はFab断片を含み、または
前記ヒトCD3Eに対する抗原結合部分はFab断片を含み、前記ヒトCD123に対する抗原結合部分は一本鎖抗体(scfv)を含み、または
前記ヒトCD3Eに対する抗原結合部分は一本鎖抗体(scfv)を含み、前記ヒトCD123に対する抗原結合部分はFab断片を含み、または
前記ヒトCD3Eに対する抗原結合部分は一本鎖抗体(scfv)を含み、前記ヒトCD123に対する抗原結合部分は一本鎖抗体(scfv)を含む、
二重特異性抗体。 - 請求項1に記載の二重特異性抗体であって、前記抗体は第1のアームおよび第2のアームを備え、そのうち前記第1のアームはヒトCD3Eに対する抗原結合部分を含み、前記第2のアームはヒトCD123に対する抗原結合部分を含み、そのうち、
前記第1のアームは、配列番号11に記載の重鎖可変領域のアミノ酸配列、配列番号31に記載の重鎖定常領域のアミノ酸配列、配列番号12に記載の軽鎖可変領域のアミノ酸配列、および配列番号32に記載の軽鎖定常領域のアミノ酸配列を含み、
前記第2のアームは、配列番号13に記載の重鎖可変領域のアミノ酸配列、配列番号30に記載の重鎖定常領域のアミノ酸配列、配列番号12に記載の軽鎖可変領域のアミノ酸配列、および配列番号32に記載の軽鎖定常領域のアミノ酸配列を含む、
二重特異性抗体。 - 請求項1~9のいずれか1項に記載の二重特異性抗体を含む、医薬組成物。
- 請求項1~9のいずれか1項に記載の二重特異性抗体を含み、CD123陽性腫瘍を予防または治療するために用いられる、医薬組成物。
- 請求項11に記載の医薬組成物であって、前記CD123陽性腫瘍は、急性骨髄性白血病(AML)および芽球性形質細胞様樹状細胞腫瘍(BPDCN)からなる群から選ばれる、医薬組成物。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202010080449.9 | 2020-02-05 | ||
CN202010080449.9A CN111171155B (zh) | 2020-02-05 | 2020-02-05 | 抗cd3和cd123双特异性抗体及其用途 |
PCT/CN2020/082151 WO2021155635A1 (zh) | 2020-02-05 | 2020-03-30 | 抗cd3和cd123双特异性抗体及其用途 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2023513200A JP2023513200A (ja) | 2023-03-30 |
JP7457822B2 true JP7457822B2 (ja) | 2024-03-28 |
Family
ID=70647663
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2022547913A Active JP7457822B2 (ja) | 2020-02-05 | 2020-03-30 | 抗cd3および抗cd123二重特異性抗体およびその使用 |
Country Status (6)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US20230071422A1 (ja) |
EP (1) | EP4101867A4 (ja) |
JP (1) | JP7457822B2 (ja) |
KR (1) | KR20220137723A (ja) |
CN (2) | CN111349163A (ja) |
WO (1) | WO2021155635A1 (ja) |
Families Citing this family (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2022104692A1 (en) * | 2020-11-20 | 2022-05-27 | Bliss Biopharmaceutical (Hangzhou) Co., Ltd. | Engineered antibody, antibody-drug conjugate, and use thereof |
CN112646033B (zh) * | 2020-12-16 | 2022-04-12 | 北京艺妙神州医药科技有限公司 | 靶向cd123的嵌合抗原受体及其用途 |
CN114933654A (zh) * | 2021-08-16 | 2022-08-23 | 上海优替济生生物医药有限公司 | 靶向cd123的抗体、嵌合抗原受体及其用途 |
WO2023125611A1 (zh) * | 2021-12-29 | 2023-07-06 | 四川汇宇制药股份有限公司 | 靶向cd3的抗体及多特异性抗体及其用途 |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN110172100A (zh) | 2019-05-06 | 2019-08-27 | 北京智仁美博生物科技有限公司 | 抗人cd3e抗体及其用途 |
CN110229232A (zh) | 2019-06-19 | 2019-09-13 | 北京智仁美博生物科技有限公司 | 双特异性抗体及其用途 |
JP2019531764A (ja) | 2016-09-21 | 2019-11-07 | アプティーボ リサーチ アンド デベロップメント エルエルシー | Cd123結合タンパク質並びに関連する組成物及び方法 |
JP2019531701A (ja) | 2016-07-18 | 2019-11-07 | サノフイSanofi | Cd3およびcd123に特異的に結合する二重特異性抗体様結合タンパク質 |
Family Cites Families (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20100209341A1 (en) * | 2009-02-18 | 2010-08-19 | Csl Limited | Treatment of chronic inflammatory conditions |
EP2839842A1 (en) * | 2013-08-23 | 2015-02-25 | MacroGenics, Inc. | Bi-specific monovalent diabodies that are capable of binding CD123 and CD3 and uses thereof |
MA40801A1 (fr) * | 2015-01-23 | 2018-07-31 | Sanofi Sa | Anticorps anti-cd3, anticorps anti-cd123 et anticorps bispécifiques se liant spécifiquement à cd3 et/ou cd123 |
WO2017210443A1 (en) | 2016-06-01 | 2017-12-07 | Xencor, Inc. | Bispecific antibodies that bind cd123 and cd3 |
CA3035254A1 (en) * | 2016-09-01 | 2018-03-08 | Immunomab, Inc. | Bispecific antibodies |
US20210269525A1 (en) * | 2018-06-29 | 2021-09-02 | Biocytogen Pharmaceuticals (Beijing) Co., Ltd. | ANTI-CD3e ANTIBODIES AND USES THEREOF |
-
2020
- 2020-02-05 CN CN202010229581.1A patent/CN111349163A/zh active Pending
- 2020-02-05 CN CN202010080449.9A patent/CN111171155B/zh active Active
- 2020-03-30 US US17/797,656 patent/US20230071422A1/en active Pending
- 2020-03-30 EP EP20918015.7A patent/EP4101867A4/en active Pending
- 2020-03-30 KR KR1020227030639A patent/KR20220137723A/ko unknown
- 2020-03-30 JP JP2022547913A patent/JP7457822B2/ja active Active
- 2020-03-30 WO PCT/CN2020/082151 patent/WO2021155635A1/zh unknown
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2019531701A (ja) | 2016-07-18 | 2019-11-07 | サノフイSanofi | Cd3およびcd123に特異的に結合する二重特異性抗体様結合タンパク質 |
JP2019531764A (ja) | 2016-09-21 | 2019-11-07 | アプティーボ リサーチ アンド デベロップメント エルエルシー | Cd123結合タンパク質並びに関連する組成物及び方法 |
CN110172100A (zh) | 2019-05-06 | 2019-08-27 | 北京智仁美博生物科技有限公司 | 抗人cd3e抗体及其用途 |
CN110229232A (zh) | 2019-06-19 | 2019-09-13 | 北京智仁美博生物科技有限公司 | 双特异性抗体及其用途 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN111171155B (zh) | 2021-02-19 |
JP2023513200A (ja) | 2023-03-30 |
WO2021155635A1 (zh) | 2021-08-12 |
CN111171155A (zh) | 2020-05-19 |
US20230071422A1 (en) | 2023-03-09 |
EP4101867A1 (en) | 2022-12-14 |
KR20220137723A (ko) | 2022-10-12 |
CN111349163A (zh) | 2020-06-30 |
EP4101867A4 (en) | 2024-04-03 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP7317272B2 (ja) | Tigit抗体、その抗原結合断片及びその医療用途 本願は、2019年9月29日に出願された出願番号cn201710908565.3に基づいたものであり、その優先権を主張する。その開示は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。 | |
CN113015749B (zh) | 靶向cd3的抗体、双特异性抗体及其用途 | |
JP7457822B2 (ja) | 抗cd3および抗cd123二重特異性抗体およびその使用 | |
JP2021527441A (ja) | Cldn18.2を標的とする抗体、二重特異性抗体、adc及びcarならびにその使用 | |
CN110462038A (zh) | 抗gprc5d抗体和包含所述抗体的分子 | |
CN111269315B (zh) | 针对bcma的单克隆抗体 | |
MX2010011955A (es) | Inmunoglobulinas de dominio variable doble y usos de las mismas. | |
CN114728065A (zh) | 针对cd3和bcma的抗体和自其制备的双特异性结合蛋白 | |
TWI769537B (zh) | 標靶bcma的抗體、雙專一性抗體及其用途 | |
CN110856446A (zh) | 抗pd-l1抗体及其用途 | |
US11912771B2 (en) | MAGE-A4 peptide-MHC antigen binding proteins | |
TW202132351A (zh) | 抗cd47/抗pd-l1抗體及其應用 | |
US20220340894A1 (en) | Rabbit-derived antigen binding protein nucleic acid libraries and methods of making the same | |
JP2024514855A (ja) | Dll3に対する結合分子及びその使用 | |
JP2023542209A (ja) | ヒトcd3イプシロンに結合する新規なヒト抗体 | |
KR20220167331A (ko) | 항-flt3 항체 및 조성물 | |
RU2800164C2 (ru) | Биспецифическое антитело против cd3e/bcma и его применение | |
WO2024012434A1 (en) | Antibody, antigen-binding fragment thereof, and pharmaceutical use thereof | |
TW202246340A (zh) | 抗ctla-4抗體及其應用 | |
TW202413405A (zh) | 抗體、其抗原結合片段及其藥物用途 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20220929 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20220929 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20230904 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20231129 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20240219 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20240315 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 7457822 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |