JP7455442B1 - Ｎｈ２－ｍｉｌ－５３に基づくアフラトキシンｂ１の検出方法 - Google Patents
Ｎｈ２－ｍｉｌ－５３に基づくアフラトキシンｂ１の検出方法 Download PDFInfo
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Abstract
【課題】アフラトキシンを検出する技術分野に属し、ＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）に基づくアフラトキシンＢ１の検出方法を開示する。
【解決手段】ＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）は、ＡｌＣｌ３・６Ｈ２Ｏを超純水に溶解させ、撹拌しながらＮＨ２－ＢＤＣを加え、その後、撹拌しながら尿素水溶液を加え、１５０℃で５時間維持した後、室温まで自然冷却することによって、黄色固体を得る。本発明により調製されたＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）は、ＡＦＢ１に対して良好な感度と選択性を有し、静電紡糸ナノ繊維薄膜に蛍光プローブを担持させることにより、携帯可能なフレキシブル・センサーを調製する。フレキシブル・センサーをスマートフォンに成功的に組み合わせることにより、検出コストと時間を大幅に削減し、現場でのＡＦＢ１の定性認識と定量検出に有望な方法を提供する。
【選択図】なし
【解決手段】ＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）は、ＡｌＣｌ３・６Ｈ２Ｏを超純水に溶解させ、撹拌しながらＮＨ２－ＢＤＣを加え、その後、撹拌しながら尿素水溶液を加え、１５０℃で５時間維持した後、室温まで自然冷却することによって、黄色固体を得る。本発明により調製されたＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）は、ＡＦＢ１に対して良好な感度と選択性を有し、静電紡糸ナノ繊維薄膜に蛍光プローブを担持させることにより、携帯可能なフレキシブル・センサーを調製する。フレキシブル・センサーをスマートフォンに成功的に組み合わせることにより、検出コストと時間を大幅に削減し、現場でのＡＦＢ１の定性認識と定量検出に有望な方法を提供する。
【選択図】なし
Description
本発明は、アフラトキシンを検出する技術分野に属し、特に、ＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）に基づくアフラトキシンＢ１の検出方法に関する。
アフラトキシンＢ１（ＡＦＢ１）は最も有害で一般的なマイコトキシンであり、経済的で、鋭敏で、簡便で迅速なＡＦＢ１検出方法を確立する必要がある。
現在、ＡＦＢ１を検出する方法には、主に酵素結合免疫吸着測定法、高速液体クロマトグラフィー、メンブレンフロー免疫分析法、免疫分析クロマトグラフィーおよび電気化学的方法がある。クロマトグラフィーはＡＦＢ１の検出感度が高いが、コストが高く、サンプルの調製過程が複雑で、使用者に対する技術的要求も高い。免疫測定クロマトグラフィーには生体分子が組み込まれているため、この方法の堅牢性が低い。これらの方法には、装置が高価で、操作が複雑で時間がかかるなどの共通の欠点もある。これらの欠点は、発展途上国におけるこれらの方法の普及を制限する可能性がある。発光性有機金属骨格（ＬＭＯＦ）は新型化学センサーとして、その感度が高く、基質選択性が良好で、再現性が良好で、装置が簡便などの利点により注目を集めている。現在までに、ＭＯＦに基づくセンサーをＡＦＢ１の検出に用いた報告がいくつかある。しかし、これらのセンサーのセンシング機構は、一般的に「オフ」センシングと呼ばれる発光消光（すなわち蛍光消光）であり、それは、優れた感度、選択性および実用性などの発光「オン」原理に基づいて動作するセンサーの利点に欠けている。したがって、ＡＦＢ１検出のための堅牢で効率的なＭＯＦに基づく蛍光「オン」センサーを開発することはより意義があり、需要が高い。
[発明の概要]
[課題を解決するための手段]
[発明の概要]
[課題を解決するための手段]
本発明は、従来技術に存在する問題に鑑み、ＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）に基づくアフラトキシンＢ１の検出方法を提供することを目的とする。
本発明は、上記目的を達成するために、以下の技術解決策を採用する。
ＮＨ２－ＭＩＬ－５３の調製方法は、
（１）ＡｌＣｌ３・６Ｈ２Ｏを超純水に溶解し、撹拌しながらＮＨ２－ＢＤＣを加え、撹拌して「溶液１」を得るステップ、
（２）尿素を超純水に溶解させ、「溶液２」を得るステップ、
（３）「溶液２」を、継続して撹拌しながら「溶液１」にゆっくり加え、均一に撹拌し、１５０℃で５時間維持した後、室温まで自然冷却し、黄色固体を得るステップ、
（４）黄色固体を脱イオン水で３回洗浄して遠心分離し、黄色固体をＤＭＦに分散させ、懸濁液を室温の暗所で２４時間撹拌し、その後、遠心分離してＤＭＦを除去し、上記固体をメタノールに分散させ、室温の暗所で２４時間撹拌し、その後、遠心分離してメタノールを除去するステップ、および
（５）ステップ（４）で洗浄した後の生成物を５０℃で２４時間真空乾燥することによって、ＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）粉末を得るステップを含む。
（１）ＡｌＣｌ３・６Ｈ２Ｏを超純水に溶解し、撹拌しながらＮＨ２－ＢＤＣを加え、撹拌して「溶液１」を得るステップ、
（２）尿素を超純水に溶解させ、「溶液２」を得るステップ、
（３）「溶液２」を、継続して撹拌しながら「溶液１」にゆっくり加え、均一に撹拌し、１５０℃で５時間維持した後、室温まで自然冷却し、黄色固体を得るステップ、
（４）黄色固体を脱イオン水で３回洗浄して遠心分離し、黄色固体をＤＭＦに分散させ、懸濁液を室温の暗所で２４時間撹拌し、その後、遠心分離してＤＭＦを除去し、上記固体をメタノールに分散させ、室温の暗所で２４時間撹拌し、その後、遠心分離してメタノールを除去するステップ、および
（５）ステップ（４）で洗浄した後の生成物を５０℃で２４時間真空乾燥することによって、ＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）粉末を得るステップを含む。
上記のＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）は、アフラトキシンの検出に応用される。
アフラトキシンの検出方法は、上記のＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）を分散液に調製し、分散液に検出待ちのサンプル溶液を加え、室温でインキュベートした後、３３０ｎｍの励起下で、混合溶液の４３０ｎｍにおける蛍光強度を記録し、蛍光強度とアフラトキシン濃度の標準曲線を照合することによって、検出待ちのサンプルにおけるアフラトキシンの含量を計算して得るステップを含む。
上記のＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）は、アフラトキシンの検出用試薬調製に応用される。
ＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）を担持した静電紡糸ナノ繊維膜は、静電紡糸方法によって、上記のＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）をナノ繊維膜に調製する。
具体的な一実施形態において、前記ＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）を担持した静電紡糸ナノ繊維膜の調製方法は、
上記のＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）粉末およびポリアクリロニトリル（ＰＡＮ）を取ってＤＭＦに溶解し、９０℃で２時間激しく撹拌して、ＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）／ＰＡＮ溶液を得るステップと、ＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）／ＰＡＮ溶液を使い捨て針管に装填し、静電紡糸装置に入れて紡糸するステップとを含む。
上記のＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）粉末およびポリアクリロニトリル（ＰＡＮ）を取ってＤＭＦに溶解し、９０℃で２時間激しく撹拌して、ＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）／ＰＡＮ溶液を得るステップと、ＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）／ＰＡＮ溶液を使い捨て針管に装填し、静電紡糸装置に入れて紡糸するステップとを含む。
上記のＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）を担持した静電紡糸ナノ繊維膜は、アフラトキシンの検出に応用され、穀物または落花生におけるアフラトキシンの検出にも用いられる。
上記のＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）を担持した静電紡糸ナノ繊維膜を用いて、アフラトキシンを検出する方法は、ＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）を担持した静電紡糸ナノ繊維膜に検出待ちのサンプル溶液を滴下し、室温でインキュベートした後、ナノ繊維の蛍光写真を撮影し、色認識ソフトにより写真のＧとＢのデータを迅速に取得し、Ｇ／Ｂの値を計算し、それをＧ／Ｂとアフラトキシン濃度の関係曲線に代入し、この物質中のアフラトキシン濃度を計算して得るステップを含む。
具体的な一実施形態において、前記検出待ちのサンプル溶液は、粉砕したサンプルを取ってアセトニトリルと混合した後、上澄み液をほぼ乾燥するまで回転蒸発させ、ＰＢＳ溶液に分散して遠心分離し、０．２２μｍの濾過膜で濾過することによって、検出待ちのサンプル溶液を調製して得る。
本発明の技術的解決策の利点
本願は、ＡＦＢ１検出するための低濃度のアルミニウム有機金属骨格に基づく蛍光検出プラットフォームを提供する。具体的には、ＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）を蛍光プラットフォームとして用いる。ＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）は水溶液の中で呼吸作用と安定性を有する。アミノ基は、水素結合、酸塩基効果および配位結合などの様々な分子間の相互作用を介して、ＡＦＢ１と相互作用することができる。ＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）のＡＦＢ１に対する感度と選択性は、食品中のＡＦＢ１を迅速に検出する新しい方法を提供する。また、静電紡糸ナノ繊維薄膜に蛍光プローブを担持させることにより、携帯可能なフレキシブル・センサーを調製する。フレキシブル・センサーをスマートフォンに成功的に組み合わせることにより、検出コストと時間を大幅に削減し、現場でのＡＦＢ１の定性認識と定量検出に有望なの方法を提供する。
本願は、ＡＦＢ１検出するための低濃度のアルミニウム有機金属骨格に基づく蛍光検出プラットフォームを提供する。具体的には、ＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）を蛍光プラットフォームとして用いる。ＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）は水溶液の中で呼吸作用と安定性を有する。アミノ基は、水素結合、酸塩基効果および配位結合などの様々な分子間の相互作用を介して、ＡＦＢ１と相互作用することができる。ＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）のＡＦＢ１に対する感度と選択性は、食品中のＡＦＢ１を迅速に検出する新しい方法を提供する。また、静電紡糸ナノ繊維薄膜に蛍光プローブを担持させることにより、携帯可能なフレキシブル・センサーを調製する。フレキシブル・センサーをスマートフォンに成功的に組み合わせることにより、検出コストと時間を大幅に削減し、現場でのＡＦＢ１の定性認識と定量検出に有望なの方法を提供する。
本発明で使用される用語は、特に説明がない限り、一般に当業者により通常に理解される意味を有する。
以下、具体的な実施形態に組合わせて、データを参照しながら本発明をさらに詳細に説明する。以下の実施形態は、本発明を例示するためのものであって、本発明の範囲を任意の態様で限定するものではない。
本発明によるアフラトキシンＢ１の検出原理を図１に示す。ＡｌＣｌ３・６Ｈ２ＯとＮＨ２－ＢＤＣを用いて尿素溶液でＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）を調製し、調製されたＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）は、３３０ｎｍの励起波長で、４３０ｎｍにおける最も強い蛍光を発光する。調製されたＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）は、ＰＢＳ溶液に直接分散して分散液を調製し、分散液に検出待ちのサンプルを加える。検出待ちのサンプルにＡＦＢ１が含まれている場合、４３０ｎｍにおける蛍光強度を検出し、蛍光強度とＡＦＢ１濃度の標準曲線を照合することによって、検出待ちのサンプルにおけるＡＦＢ１濃度を得る。
または、調製されたＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）を静電紡糸方法により、ＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）を担持した静電紡糸ナノ繊維膜に調製し、ナノ繊維膜に検出待ちのサンプル溶液を滴下し、ナノ繊維の蛍光写真をスマートフォンで撮影する。色認識ＡＰＰによって、異なる色の写真をＲＧＢの３つの数値に変換し、Ｇ数値とＢ数値の比率を取って図を作成することができる。これらの写真のＧとＢデータは、色認識ＡＰＰによって迅速に取得し、Ｇ／Ｂの値を計算し、これをＧ／ＢとＡＦＢ１濃度の関係の線形曲線に代入することによって、この物質中のＡＦＢ１濃度を計算して得る。
実施例１
ＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）は、以下のステップによって調製される。
１．４４８ｇのＡｌＣｌ３・６Ｈ２Ｏを３０ｍＬの超純水に溶解させ、磁気で撹拌しながら１．０８８ｇのＮＨ２－ＢＤＣを加え、３０分間撹拌して「溶液１」を得る。別の容器に０．５７６ｇの尿素を１０ｍＬの超超純水に溶解させ、「溶液２」を得る。「溶液２」を室温で３０分間継続して撹拌しながら「溶液１」にゆっくり加える。混合物をポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）ライナーの反応釜に移し、１５０℃で５時間維持する。その後、それを室温まで自然冷却する。黄色固体を脱イオン水で３回洗浄し、遠心分離（１２０００ｒｐｍ、１０分間）により分離する。黄色固体を４０ｍＬのＤＭＦに分散させ、懸濁液を室温の暗所で２４時間撹拌する。その後、遠心分離によりＤＭＦを除去する。上記の固体を４０ｍＬのメタノールに分散し、室温の暗所で２４時間撹拌する。その後、遠心分離によりメタノールを除去する。最後に、生成物を５０℃で２４時間真空乾燥させ、ＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）粉末を得る。
ＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）は、以下のステップによって調製される。
１．４４８ｇのＡｌＣｌ３・６Ｈ２Ｏを３０ｍＬの超純水に溶解させ、磁気で撹拌しながら１．０８８ｇのＮＨ２－ＢＤＣを加え、３０分間撹拌して「溶液１」を得る。別の容器に０．５７６ｇの尿素を１０ｍＬの超超純水に溶解させ、「溶液２」を得る。「溶液２」を室温で３０分間継続して撹拌しながら「溶液１」にゆっくり加える。混合物をポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）ライナーの反応釜に移し、１５０℃で５時間維持する。その後、それを室温まで自然冷却する。黄色固体を脱イオン水で３回洗浄し、遠心分離（１２０００ｒｐｍ、１０分間）により分離する。黄色固体を４０ｍＬのＤＭＦに分散させ、懸濁液を室温の暗所で２４時間撹拌する。その後、遠心分離によりＤＭＦを除去する。上記の固体を４０ｍＬのメタノールに分散し、室温の暗所で２４時間撹拌する。その後、遠心分離によりメタノールを除去する。最後に、生成物を５０℃で２４時間真空乾燥させ、ＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）粉末を得る。
ＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａ１）の発光スペクトルの測定：ＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａ１）の発光スペクトルを３００～３６０ｎｍの励起下で、０．５５μｇ／ｍＬのＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａ１）溶液の蛍光スペクトルをそれぞれ記録した。結果は図２に示すとおりで、励起波長が３３０ｎｍである場合、４３０ｎｍにおける最も高いピークが見られ、したがって、ＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａ１）の最適な励起波長は３３０ｎｍである。
異なるｐＨ値、温度、紫外照射および保存時間がＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａ１）溶液の安定性に与える影響を検出し、具体的な測定方法は以下の通りである。
ｐＨ：ＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａ１）溶液を０．５５μｇ／ｍＬになるまで、異なるｐＨ溶液で希釈し、酵素マーカーを用いて３３０ｎｍの励起下で蛍光強度をテストし、ピーク４３０ｎｍにおける蛍光強度を記録した。
温度：０．５５μｇ／ｍＬのＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａ１）溶液を異なる温度に置いて、酵素マーカーを用いて３３０ｎｍの励起下で蛍光強度をテストし、ピーク４３０ｎｍにおける蛍光強度を記録した。
紫外照射：０．５５μｇ／ｍＬのＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａ１）溶液に紫外ランプを照射し、酵素マーカーを用いて３３０ｎｍの励起下で蛍光強度をテストし、ピーク４３０ｎｍにおける蛍光強度を記録した。
長期保存：０．５５μｇ／ｍＬのＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａ１）溶液を室温に置き、１、３、５、７、１５、３０日後の蛍光の安定性をテストし、酵素マーカーを用いて３３０ｎｍの励起下で蛍光強度をテストした。
ＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａ１）溶液の安定性は図３に示すとおりである。ＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａ１）溶液の蛍光強度を、異なるＰＨ、温度、紫外照射および長期保存する条件下で調べた結果、ＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａ１）溶液の蛍光強度は比較的安定していることが分かった。これは、ＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａ１）溶液が優れた光学特性を有しており、後続のＡＦＢ１の検出によりよく使用できることを示す。
ＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａ１）の励起、発光および紫外吸収スペクトルは、以下のステップによって測定される。
励起スペクトル：０．５５μｇ／ｍＬのＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａ１）溶液を９６ウェルの黒色酵素マーカー板に加え、４３０ｎｍにおける発光で励起スペクトルを記録した。
発光スペクトル：０．５５μｇ／ｍＬのＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａ１）溶液を９６ウェルの黒色酵素マーカー板に加え、３３０ｎｍの励起下で、発光スペクトルを記録した。
紫外吸収スペクトル：２ｍＬのＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａ１）溶液を取って石英キュベットに加え、紫外分光光度計に入れ、２００～６００ｎｍの波長範囲で、紫外吸収スペクトルを記録した。
結果は図４に示すように、ＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａ１）の光学特性を評価した。紫外吸収スペクトルは、２２０ｎｍと３３０ｎｍのところで２つの特徴的な吸収ピークを表した。２２０ｎｍにおける吸収ピークは、Ｃ＝Ｃ基のπ－π＊跳躍またはＣ＝Ｏ基のｎ－π＊跳躍によるものである。３３０ｎｍにおける特徴的な吸収ピークは、Ｃ＝Ｏ／Ｃ－Ｎ基のｎ－π＊跳躍によるもので、これは蛍光スペクトルの最適な励起波長と一致する。
ＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａ１）のＸＲＤパターンの測定方法：Ｘ線回折装置を用いて、ＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａ１）粉末のＸＲＤパターンを測定する。ＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａ１）粉末を研磨し、適量の粉末を取って溝付きのガラス板に入れ、装置に置いてテストした。結果は図５に示すように、調製されたＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａ１）ナノシートの前駆体の結晶化が良好であった。典型的なピークが８．８°、１０．４°、１５．０°、１７．５°、２０．０°および２６．４°にあり、材料が成功的に調製されたことも証明した。
フーリエ変換赤外スペクトルでＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａ１）とＮＨ２－ＢＤＣを検出する方法：フーリエ変換赤外スペクトル装置を使用して、ＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａ１）粉末とＮＨ２－ＢＤＣ粉末の赤外線スペクトルを測定する。適量の上記２種物質の粉末を装置に置いて、空気の背景干渉を除去した後、赤外スペクトルを記録した。結果は図６に示すように、３５０４ｃｍ－１と３３９０ｃｍ－１における、バンドはＮ－Ｈ結合の非対称伸縮振動に対応し、これは、ＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）ナノシートに水酸基が多く含まれており、これが水溶性に有意に有利であることを表している。また、１０００～１１００ｃｍ－１における新しいスペクトル・バンドはＡｌ－Ｏ結合の伸縮振動から由来し、これは、ＮＨ２－ＢＤＣにおけるＯ原子がＡｌ３＋と配位して有機金属骨格を形成していることをさらに表している。
ＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａ１）の熱重量分析（ＴＧＡ）を検出する方法：示差走査熱量計を用いてＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａ１）の熱重量分析（ＴＧＡ）をテストした。最大に０．５ｇのＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａ１）の粉末を取って小さなルツボに入れ、装置に置いて、温度範囲を３０～８００℃に設定し、その熱安定性をテストした。結果は図７に示すように、ＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａ１）の熱安定性を調べると、ＴＧＡデータから２８０℃まで熱に安定していることが明らかになった。
実施例２
ＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）を担持した静電紡糸ナノ繊維膜は、以下のステップによっての調製される。
ＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）を担持した静電紡糸ナノ繊維膜は、以下のステップによっての調製される。
実施例１の方法で調製されたＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）粉末を１０ｍｇおよびポリアクリロニトリル（ＰＡＮ）（Ｍｗ＝１５００００）を１ｇ取って９ｍＬのＤＭＦに溶解させ、９０℃で２時間激しく撹拌してＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）／ＰＡＮ溶液を得る。
上記のＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）／ＰＡＮ溶液を１０ｍＬの使い捨て針管に装填し、静電紡糸装置に入れ紡糸する。ＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）ナノ繊維膜は、ＹＦＳＰ－Ｔ静電紡糸装置を用いて調製し、シリンジポンプを使用して、高圧電圧が３０Ｋｖで、受信器の回転速度が０．１ｒｐｍ／分である条件で、溶液を０．００２ｍｍｓ－１の速度で針に入れる。
実施例３
アフラトキシンＢ１の検出におけるＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）の応用
実施例１で調製された５ｍｇのＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａ１）を、室温で１０ｍＬのＰＢＳ（０．０１Ｍ、ｐＨ＝７．４）に分散させ、５分間超音波処理した。希釈した後、０．５５μｇ／ｍＬのＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａ１）分散液を調製し、検出待ちのサンプルをＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａ１）分散液に加え、室温で５分間インキュベートした後、３３０ｎｍの励起下で、４３０ｎｍにおける混合溶液の蛍光強度を記録した。蛍光強度とＡＦＢ１濃度の標準曲線を照合することによって、検出待ちのサンプルにおけるアフラトキシンＢ１の含量を計算して得る。
アフラトキシンＢ１の検出におけるＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）の応用
実施例１で調製された５ｍｇのＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａ１）を、室温で１０ｍＬのＰＢＳ（０．０１Ｍ、ｐＨ＝７．４）に分散させ、５分間超音波処理した。希釈した後、０．５５μｇ／ｍＬのＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａ１）分散液を調製し、検出待ちのサンプルをＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａ１）分散液に加え、室温で５分間インキュベートした後、３３０ｎｍの励起下で、４３０ｎｍにおける混合溶液の蛍光強度を記録した。蛍光強度とＡＦＢ１濃度の標準曲線を照合することによって、検出待ちのサンプルにおけるアフラトキシンＢ１の含量を計算して得る。
ＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａ１）とＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａ１）＋ＡＦＢ１の紫外吸収スペクトルを検出する方法：２ｍＬのＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａ１）溶液とＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａ１）＋ＡＦＢ１の混合液をそれぞれ取って、石英キュベットに加え、紫外分光光度計に入れ、２００～６００ｎｍの波長範囲で、紫外吸収スペクトルを記録した。結果は図８に示すように、ＡＦＢｌの添加に従って、３３０ｎｍにおけるＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）の吸収ピークは３４０ｎｍに赤方偏移し、これは、ＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）とＡＦＢｌの間に強い相互作用が存在することをさらに確認した。
ＡＦＢ１の感度図と色変化を蛍光検出するステップは以下の通りである。異なる濃度のＡＦＢ１溶液を０．５５μｇ／ｍＬのＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）溶液に加え、均一に混合した後、室温で５分間インキュベートした。各溶液を９６ウェルの黒色酵素マーカー板に加え、３３０ｎｍの励起下でその蛍光を記録した。結果は図９に示すように、ＡＦＢ１濃度が増加するに伴い、ＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）の青色蛍光が励起され、青色光が強くなっていること、すなわち４３０ｎｍにおけるピークが増加し続けていることがわかる。図１０に示すように、ＡＦＢ１濃度の線形関係は、ＡＦＢ１の追加量が０である場合、４３０ｎｍにおけるピークをベース、すなわちＦ０とし、さらに他の濃度のピークをＦとして取る。Ｆ／Ｆ０を計算すると、この比はＡＦＢ１と線形関係があり、線形関係のＲ２＝０．９９は、線形関係が良好であり、データに意味があることを証明し、線形範囲は０～４０μＭで、検出限界は３．１ｐｐｂである。
実施例４
アフラトキシンＢ１の検出におけるＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）ナノ繊維膜の応用
ＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）ナノ繊維を直径が１ｃｍの円盤状に切断した。異なる濃度のＡＦＢ１溶液を１５μＬ滴下した。５分後に、３６５ｎｍの紫外ランプを照射下で、ナノ繊維の蛍光写真をスマートフォンで撮影した。これらの写真のＧとＢデータを色認識ＡＰＰで迅速に取得し、Ｇ／Ｂの値を計算し、それをＧ／ＢとＡＦＢ１濃度の関係の線形曲線（図１１のように、線形範囲は０～３０μＭで、検出限界は２９．２ｐｐｂ）に代入し、この物質におけるＡＦＢ１濃度を計算して得る。
アフラトキシンＢ１の検出におけるＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）ナノ繊維膜の応用
ＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）ナノ繊維を直径が１ｃｍの円盤状に切断した。異なる濃度のＡＦＢ１溶液を１５μＬ滴下した。５分後に、３６５ｎｍの紫外ランプを照射下で、ナノ繊維の蛍光写真をスマートフォンで撮影した。これらの写真のＧとＢデータを色認識ＡＰＰで迅速に取得し、Ｇ／Ｂの値を計算し、それをＧ／ＢとＡＦＢ１濃度の関係の線形曲線（図１１のように、線形範囲は０～３０μＭで、検出限界は２９．２ｐｐｂ）に代入し、この物質におけるＡＦＢ１濃度を計算して得る。
ＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）ナノ繊維によるＡＦＢ１の検出結果は、図１２に示すように、３６５ｎｍの紫外ランプの照射下で、色の変化を観察した。ＡＦＢ１の濃度が高くなるに伴い、青色の蛍光が強くなることが肉眼ではっきりと観察できた。
実施例５
ＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）の特異性
実施例１で調製された５ｍｇのＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａ１）を１０ｍＬのＰＢＳ（０．０１Ｍ、ｐＨ＝７．４）に分散させ、５分間超音波処理した。希釈した後、０．５５μｇ／ｍＬのＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａ１）分散液を調製し、蛍光実験に用いた。その後、９００μＬの分散液に１００μＭのＡＦＢ１溶液を５０μＬ加えることによって、ＡＦＢ１の最終濃度を５μＭにするか、９００μＬの分散液に妨害物質を加えることによって、オクラトキシン（ＯＴＡ）、ゼアラレノン（ＺＥＮ）の濃度が５μＭになり、他の妨害物質の濃度が２００μＭになる。前記妨害物質は、オクラトキシン（ＯＴＡ）、ゼアラレノン（ＺＥＮ）Ｎａ＋、Ｋ＋、Ｃａ２＋、Ｚｎ２＋、Ｍｇ２＋、Ｍｎ２＋、Ｈｇ２＋、Ｃｏ２＋、Ｆｅ３＋、Ａｌ３＋、Ｂａ２＋、アスコルビン酸（ＡＡ）、没食子酸（ＧＡ）、アスパラギン酸（Ａｓｐ）、トリプトファン（Ｔｒｙ）、Ｌ－リジン（Ｌｙｓ）、Ｌ－システイン（Ｃｙｓ）、Ｌ－グルタミン酸（Ｇｌｕ）、グルコース（ＧＬ）、ショ糖（ＳＲ）、乳糖（ＬＣ）、フルクトース（ＦＲ）およびＭＬ（マルトース）である。室温で５分間インキュベートした後、３３０ｎｍの励起下で、混合溶液の発光ピーク４３０ｎｍにおける蛍光強度を記録し、Ｆ／Ｆ０を計算して、図を作成した。Ｆ０はＡＦＢ１を添加していない場合、４３０ｎｍにおける蛍光強度を意味し、ＦはＡＦＢ１または他の物質を加えた後、４３０ｎｍにおける蛍光強度を意味する。統計的正確性を確保するため、すべてのテストは３回繰り返した。
ＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）の特異性
実施例１で調製された５ｍｇのＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａ１）を１０ｍＬのＰＢＳ（０．０１Ｍ、ｐＨ＝７．４）に分散させ、５分間超音波処理した。希釈した後、０．５５μｇ／ｍＬのＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａ１）分散液を調製し、蛍光実験に用いた。その後、９００μＬの分散液に１００μＭのＡＦＢ１溶液を５０μＬ加えることによって、ＡＦＢ１の最終濃度を５μＭにするか、９００μＬの分散液に妨害物質を加えることによって、オクラトキシン（ＯＴＡ）、ゼアラレノン（ＺＥＮ）の濃度が５μＭになり、他の妨害物質の濃度が２００μＭになる。前記妨害物質は、オクラトキシン（ＯＴＡ）、ゼアラレノン（ＺＥＮ）Ｎａ＋、Ｋ＋、Ｃａ２＋、Ｚｎ２＋、Ｍｇ２＋、Ｍｎ２＋、Ｈｇ２＋、Ｃｏ２＋、Ｆｅ３＋、Ａｌ３＋、Ｂａ２＋、アスコルビン酸（ＡＡ）、没食子酸（ＧＡ）、アスパラギン酸（Ａｓｐ）、トリプトファン（Ｔｒｙ）、Ｌ－リジン（Ｌｙｓ）、Ｌ－システイン（Ｃｙｓ）、Ｌ－グルタミン酸（Ｇｌｕ）、グルコース（ＧＬ）、ショ糖（ＳＲ）、乳糖（ＬＣ）、フルクトース（ＦＲ）およびＭＬ（マルトース）である。室温で５分間インキュベートした後、３３０ｎｍの励起下で、混合溶液の発光ピーク４３０ｎｍにおける蛍光強度を記録し、Ｆ／Ｆ０を計算して、図を作成した。Ｆ０はＡＦＢ１を添加していない場合、４３０ｎｍにおける蛍光強度を意味し、ＦはＡＦＢ１または他の物質を加えた後、４３０ｎｍにおける蛍光強度を意味する。統計的正確性を確保するため、すべてのテストは３回繰り返した。
結果は図１３に示すように、ＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）は、アフラトキシンＢ１、オクラトキシン（ＯＴＡ）、ゼアラレノン（ＺＥＮ）に高い反応を有し、その中でもＡＦＢ１に対して最も敏感に反応している。
ＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）の干渉防止特性
実施例１で調製された５ｍｇのＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａ１）を室温で１０ｍＬのＰＢＳ（０．０１Ｍ、ｐＨ＝７．４）に分散させ、５分間超音波処理した。希釈した後、０．５５μｇ／ｍＬのＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａ１）分散液を調製し、蛍光実験に用いた。その後、ＡＦＢ１の最終濃度が５μＭになるように、１００μＭのＡＦＢ１溶液を分散液に加えた。その後、ＡＦＢ１を含む溶液に妨害物質であるオクラトキシン（ＯＴＡ）、ゼアラレノン（ＺＥＮ）、Ｎａ＋、Ｋ＋、Ｃａ２＋、Ｚｎ２＋、Ｍｇ２＋、Ｍｎ２＋、Ｈｇ２＋、Ｃｏ２＋、Ｆｅ３＋、Ａｌ３＋、Ｂａ２＋、アスコルビン酸（ＡＡ）、没食子酸（ＧＡ）、アスパラギン酸（Ａｓｐ）、トリプトファン（Ｔｒｙ）、Ｌ－リジン（Ｌｙｓ）、Ｌ－システイン（Ｃｙｓ）、Ｌ－グルタミン酸（Ｇｌｕ）、グルコース（ＧＬ）、ショ糖（ＳＲ）、乳糖（ＬＣ）、フルクトース（ＦＲ）、ＭＬ（マルトース）を加え、ＡＦＢ１と妨害物が同時に存在する場合、ＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）の干渉防止特性を調べた。ここで、ＡＦＢ１の濃度は５μＭであり、ＯＴＡおよびＺＥＮの濃度も５μＭで、他の妨害物質の濃度は２５０μＭである。室温で５分間インキュベートした後、３３０ｎｍの励起下で、混合溶液の発光ピーク４３０ｎｍにおける蛍光強度を記録し、Ｆ／Ｆ０の値を計算し、図を作成した。Ｆ０は、ＡＦＢ１を添加していない場合、４３０ｎｍにおける蛍光強度を意味し、Ｆは、ＡＦＢ１または他の物質を加えた後、４３０ｎｍにおける蛍光強度を意味する。統計的正確性を確保するため、すべての試験を３回繰り返した。
実施例１で調製された５ｍｇのＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａ１）を室温で１０ｍＬのＰＢＳ（０．０１Ｍ、ｐＨ＝７．４）に分散させ、５分間超音波処理した。希釈した後、０．５５μｇ／ｍＬのＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａ１）分散液を調製し、蛍光実験に用いた。その後、ＡＦＢ１の最終濃度が５μＭになるように、１００μＭのＡＦＢ１溶液を分散液に加えた。その後、ＡＦＢ１を含む溶液に妨害物質であるオクラトキシン（ＯＴＡ）、ゼアラレノン（ＺＥＮ）、Ｎａ＋、Ｋ＋、Ｃａ２＋、Ｚｎ２＋、Ｍｇ２＋、Ｍｎ２＋、Ｈｇ２＋、Ｃｏ２＋、Ｆｅ３＋、Ａｌ３＋、Ｂａ２＋、アスコルビン酸（ＡＡ）、没食子酸（ＧＡ）、アスパラギン酸（Ａｓｐ）、トリプトファン（Ｔｒｙ）、Ｌ－リジン（Ｌｙｓ）、Ｌ－システイン（Ｃｙｓ）、Ｌ－グルタミン酸（Ｇｌｕ）、グルコース（ＧＬ）、ショ糖（ＳＲ）、乳糖（ＬＣ）、フルクトース（ＦＲ）、ＭＬ（マルトース）を加え、ＡＦＢ１と妨害物が同時に存在する場合、ＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）の干渉防止特性を調べた。ここで、ＡＦＢ１の濃度は５μＭであり、ＯＴＡおよびＺＥＮの濃度も５μＭで、他の妨害物質の濃度は２５０μＭである。室温で５分間インキュベートした後、３３０ｎｍの励起下で、混合溶液の発光ピーク４３０ｎｍにおける蛍光強度を記録し、Ｆ／Ｆ０の値を計算し、図を作成した。Ｆ０は、ＡＦＢ１を添加していない場合、４３０ｎｍにおける蛍光強度を意味し、Ｆは、ＡＦＢ１または他の物質を加えた後、４３０ｎｍにおける蛍光強度を意味する。統計的正確性を確保するため、すべての試験を３回繰り返した。
結果は図１４に示すように、ＡＦＢ１と干渉物が同時に存在する場合、ＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）の干渉防止特性が良好であることが分かる。
実施例６
実際のサンプル中のＡＦＢ１検出におけるＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）の応用例および安定性
検出待ちのサンプルの前処理：粉砕した米サンプル（２００ｇ）を取って４００ｍＬのアセトニトリルと２０分間混合し、その後、上澄み液をほぼ乾燥するまで回転蒸発させ、その後、１００ｍＬのＰＢＳ溶液に分散した。この混合物を遠心分離（１０、０００ｒｐｍ、１０分間）し、０．２２μｍの濾過膜で濾過し、検出待ちのサンプル溶液を得た。
実際のサンプル中のＡＦＢ１検出におけるＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）の応用例および安定性
検出待ちのサンプルの前処理：粉砕した米サンプル（２００ｇ）を取って４００ｍＬのアセトニトリルと２０分間混合し、その後、上澄み液をほぼ乾燥するまで回転蒸発させ、その後、１００ｍＬのＰＢＳ溶液に分散した。この混合物を遠心分離（１０、０００ｒｐｍ、１０分間）し、０．２２μｍの濾過膜で濾過し、検出待ちのサンプル溶液を得た。
検出待ちのサンプル溶液をＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａ１）の分散液に加え、室温で５分間インキュベートした後、３３０ｎｍの励起下で、混合溶液の４３０ｎｍにおける蛍光スペクトルを記録し、蛍光強度とＡＦＢ１濃度の標準曲線を照合することによって、検出待ちのサンプルにおけるアフラトキシンＢ１の含量を計算して得る。
または、検出待ちのサンプル溶液を、直径が１ｃｍの円盤状に切断したＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）ナノ繊維膜に滴下し、５分後にナノ繊維の蛍光写真をスマートフォンで撮影した。これらの写真のＧとＢのデータを色認識ＡＰＰで迅速に取得し、Ｇ／Ｂの値を計算し、それをＧ／ＢとＡＦＢ１濃度の関係の線形曲線に代入し、この物質中のＡＦＢ１濃度を計算して得る。
検出方法の安定性
上記の方法で米サンプルを処理し、ブランク米サンプル溶液の最終濃度が０．１、０．５、１、２．５、５μｍｏｌＬ－１になるようにＡＦＢ１を加え、上記の混合溶液をＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａ１）分散液に加え、室温で５分間インキュベートした後、３３０ｎｍの励起下で、混合溶液の４３０ｎｍにおける蛍光スペクトルを記録し、蛍光強度とＡＦＢ１濃度の標準曲線を照合することによって、検出待ちのサンプルにおけるアフラトキシンＢ１の含量を計算して得、ＡＦＢ１の回収率を計算し、結果は表１に示すとおりである。
上記の方法で米サンプルを処理し、ブランク米サンプル溶液の最終濃度が０．１、０．５、１、２．５、５μｍｏｌＬ－１になるようにＡＦＢ１を加え、上記の混合溶液をＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａ１）分散液に加え、室温で５分間インキュベートした後、３３０ｎｍの励起下で、混合溶液の４３０ｎｍにおける蛍光スペクトルを記録し、蛍光強度とＡＦＢ１濃度の標準曲線を照合することによって、検出待ちのサンプルにおけるアフラトキシンＢ１の含量を計算して得、ＡＦＢ１の回収率を計算し、結果は表１に示すとおりである。
表１から分かるように、本発明の方法は安定性がよく、実際試料中のＡＦＢ１の検出に使用できる。
上記の説明は、本発明のより好ましい実施例に過ぎず、本発明を他の形態を限定するものではなく、本分野に精通している当業者であれば、上記の開示された技術内容を用いて、均等な変化の等価な実施形態に変更または変形することができる。ただし、本発明の技術的解決策の内容を逸脱することなく、本発明の技術的実体に基づいて、上記の実施形態を単純に修正、等価変更および変形した場合、依然として本発明の技術的解決策の保護範囲内に属する。
Claims (2)
- ＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）を担持した静電紡糸ナノ繊維膜を用いて、アフラトキシンを検出する方法であって、
ＮＨ ２ －ＭＩＬ－５３（Ａｌ）を担持した静電紡糸ナノ繊維膜に検出待ちのサンプル溶液を滴下し、室温でインキュベートした後、ナノ繊維の蛍光写真を撮影し、色認識ソフトにより写真のＧとＢのデータを迅速に取得し、Ｇ／Ｂの値を計算し、それをＧ／Ｂとアフラトキシン濃度の関係曲線に代入し、この物質中のアフラトキシン濃度を計算して得るステップを含み、
前記ＮＨ ２ －ＭＩＬ－５３（Ａｌ）を担持した静電紡糸ナノ繊維膜の調製方法は、
ＮＨ ２ －ＭＩＬ－５３（Ａｌ）粉末およびポリアクリロニトリル（ＰＡＮ）を取ってＤＭＦに溶解し、９０℃で２時間激しく撹拌して、ＮＨ ２ －ＭＩＬ－５３（Ａｌ）／ＰＡＮ溶液を得るステップと、ＮＨ ２ －ＭＩＬ－５３（Ａｌ）／ＰＡＮ溶液を使い捨て針管に装填し、静電紡糸装置に入れて紡糸するステップとを含み、
前記ＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）粉末の調製方法は、
（１）ＡｌＣｌ３・６Ｈ２Ｏを超純水に溶解し、撹拌しながらＮＨ２－ＢＤＣを加え、撹拌して「溶液１」を得るステップ、
（２）尿素を超純水に溶解させ、「溶液２」を得るステップ、
（３）「溶液２」を、継続して撹拌しながら「溶液１」にゆっくり加え、均一に撹拌し、１５０℃で５時間維持した後、室温まで自然冷却し、黄色固体を得るステップ、
（４）黄色固体を脱イオン水で３回洗浄して遠心分離し、黄色固体をＤＭＦに分散させ、懸濁液を室温の暗所で２４時間撹拌し、その後、遠心分離してＤＭＦを除去し、上記固体をメタノールに分散させ、室温の暗所で２４時間撹拌し、その後、遠心分離してメタノールを除去するステップ、および
（５）ステップ（４）で洗浄した後の生成物を５０℃で２４時間真空乾燥することによって、ＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）粉末を得るステップを含むことを特徴とするＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）を担持した静電紡糸ナノ繊維膜を用いて、アフラトキシンを検出する方法。 - 前記検出待ちのサンプル溶液は、粉砕したサンプルを取ってアセトニトリルと混合した後、上澄み液をほぼ乾燥するまで回転蒸発させ、ＰＢＳ溶液に分散して遠心分離し、０．２２μｍの濾過膜で濾過することによって、検出待ちのサンプル溶液を調製して得ることを特徴とする請求項１に記載のＮＨ２－ＭＩＬ－５３（Ａｌ）を担持した静電紡糸ナノ繊維膜を用いて、アフラトキシンを検出する方法。
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|---|---|---|---|---|
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