JP7419273B2 - 組換えタンパク質を製造する方法 - Google Patents
組換えタンパク質を製造する方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP7419273B2 JP7419273B2 JP2020573229A JP2020573229A JP7419273B2 JP 7419273 B2 JP7419273 B2 JP 7419273B2 JP 2020573229 A JP2020573229 A JP 2020573229A JP 2020573229 A JP2020573229 A JP 2020573229A JP 7419273 B2 JP7419273 B2 JP 7419273B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- cells
- batch
- cell
- culture
- medium
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 57
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 title description 2
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 title description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 278
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 116
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 112
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims description 111
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 73
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 73
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims description 70
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims description 62
- 230000010412 perfusion Effects 0.000 claims description 47
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 claims description 38
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 29
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 claims description 26
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 claims description 21
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 claims description 20
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 19
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 18
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 15
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 15
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 15
- 238000010923 batch production Methods 0.000 claims description 15
- 239000007640 basal medium Substances 0.000 claims description 11
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 11
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 claims description 11
- 239000012526 feed medium Substances 0.000 claims description 10
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 claims description 9
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 claims description 9
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 claims description 9
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 claims description 9
- 238000011031 large-scale manufacturing process Methods 0.000 claims description 8
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 claims description 7
- 239000011707 mineral Substances 0.000 claims description 7
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 claims description 7
- 229920000768 polyamine Polymers 0.000 claims description 7
- 125000002791 glucosyl group Chemical group C1([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 claims description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 82
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 80
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 54
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 51
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 50
- 239000000306 component Substances 0.000 description 15
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 14
- 238000001542 size-exclusion chromatography Methods 0.000 description 14
- 238000011218 seed culture Methods 0.000 description 12
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 10
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 10
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 9
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 9
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 8
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 8
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 7
- 230000008569 process Effects 0.000 description 7
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 7
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 6
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 6
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 6
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 5
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 5
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 5
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 5
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 4
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 4
- 239000012737 fresh medium Substances 0.000 description 4
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 4
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 4
- 210000003292 kidney cell Anatomy 0.000 description 4
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 4
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 4
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 4
- -1 CD11a Proteins 0.000 description 3
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 description 3
- 241000699802 Cricetulus griseus Species 0.000 description 3
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 3
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 3
- 108010067060 Immunoglobulin Variable Region Proteins 0.000 description 3
- 102000017727 Immunoglobulin Variable Region Human genes 0.000 description 3
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M Lactate Chemical compound CC(O)C([O-])=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 125000002485 formyl group Chemical group [H]C(*)=O 0.000 description 3
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 3
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 3
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 3
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 3
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 3
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 3
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 3
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 3
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 3
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 3
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 3
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 3
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 2
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 2
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 description 2
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 description 2
- 102000017578 LAG3 Human genes 0.000 description 2
- 101150030213 Lag3 gene Proteins 0.000 description 2
- 108091093037 Peptide nucleic acid Proteins 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- 102000002262 Thromboplastin Human genes 0.000 description 2
- 108010000499 Thromboplastin Proteins 0.000 description 2
- GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J Trypan blue Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].C1=C(S([O-])(=O)=O)C=C2C=C(S([O-])(=O)=O)C(/N=N/C3=CC=C(C=C3C)C=3C=C(C(=CC=3)\N=N\C=3C(=CC4=CC(=CC(N)=C4C=3O)S([O-])(=O)=O)S([O-])(=O)=O)C)=C(O)C2=C1N GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J 0.000 description 2
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 2
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 238000000533 capillary isoelectric focusing Methods 0.000 description 2
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 2
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 2
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 2
- 102000052116 epidermal growth factor receptor activity proteins Human genes 0.000 description 2
- 108700015053 epidermal growth factor receptor activity proteins Proteins 0.000 description 2
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 2
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 2
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 2
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 2
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 2
- 238000012007 large scale cell culture Methods 0.000 description 2
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 2
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 2
- YOHYSYJDKVYCJI-UHFFFAOYSA-N n-[3-[[6-[3-(trifluoromethyl)anilino]pyrimidin-4-yl]amino]phenyl]cyclopropanecarboxamide Chemical compound FC(F)(F)C1=CC=CC(NC=2N=CN=C(NC=3C=C(NC(=O)C4CC4)C=CC=3)C=2)=C1 YOHYSYJDKVYCJI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 2
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 2
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 2
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 2
- 230000004481 post-translational protein modification Effects 0.000 description 2
- 238000010188 recombinant method Methods 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- 229960005267 tositumomab Drugs 0.000 description 2
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 2
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 2
- 102000003390 tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 2
- 238000004704 ultra performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 2
- ZFTFOHBYVDOAMH-XNOIKFDKSA-N (2r,3s,4s,5r)-5-[[(2r,3s,4s,5r)-5-[[(2r,3s,4s,5r)-3,4-dihydroxy-2,5-bis(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]oxymethyl]-3,4-dihydroxy-2-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]oxymethyl]-2-(hydroxymethyl)oxolane-2,3,4-triol Chemical class O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@](CO)(OC[C@@H]2[C@H]([C@H](O)[C@@](O)(CO)O2)O)O1 ZFTFOHBYVDOAMH-XNOIKFDKSA-N 0.000 description 1
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 1
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N 2-amino-2-deoxy-D-glucopyranose Chemical compound N[C@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N 0.000 description 1
- 102100022464 5'-nucleotidase Human genes 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical group CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 229920000856 Amylose Polymers 0.000 description 1
- 102100022005 B-lymphocyte antigen CD20 Human genes 0.000 description 1
- 108010074708 B7-H1 Antigen Proteins 0.000 description 1
- 238000011725 BALB/c mouse Methods 0.000 description 1
- 238000009010 Bradford assay Methods 0.000 description 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 102100032367 C-C motif chemokine 5 Human genes 0.000 description 1
- 102100031650 C-X-C chemokine receptor type 4 Human genes 0.000 description 1
- 108010036239 CD4-IgG(2) Proteins 0.000 description 1
- 101150013553 CD40 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100026251 Caenorhabditis elegans atf-2 gene Proteins 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000282552 Chlorocebus aethiops Species 0.000 description 1
- 108020004635 Complementary DNA Proteins 0.000 description 1
- 241000699800 Cricetinae Species 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 150000008574 D-amino acids Chemical class 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- 102100024746 Dihydrofolate reductase Human genes 0.000 description 1
- 229920002670 Fructan Polymers 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- PNNNRSAQSRJVSB-SLPGGIOYSA-N Fucose Natural products C[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-SLPGGIOYSA-N 0.000 description 1
- 102000002464 Galactosidases Human genes 0.000 description 1
- 108010093031 Galactosidases Proteins 0.000 description 1
- 101000678236 Homo sapiens 5'-nucleotidase Proteins 0.000 description 1
- 101000897405 Homo sapiens B-lymphocyte antigen CD20 Proteins 0.000 description 1
- 101000797762 Homo sapiens C-C motif chemokine 5 Proteins 0.000 description 1
- 101000922348 Homo sapiens C-X-C chemokine receptor type 4 Proteins 0.000 description 1
- 101000987586 Homo sapiens Eosinophil peroxidase Proteins 0.000 description 1
- 101000920686 Homo sapiens Erythropoietin Proteins 0.000 description 1
- 101001136592 Homo sapiens Prostate stem cell antigen Proteins 0.000 description 1
- 101001012157 Homo sapiens Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Proteins 0.000 description 1
- 101000831007 Homo sapiens T-cell immunoreceptor with Ig and ITIM domains Proteins 0.000 description 1
- 101000801234 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 18 Proteins 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 102000003781 Inhibitor of growth protein 1 Human genes 0.000 description 1
- 108090000191 Inhibitor of growth protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 102000006992 Interferon-alpha Human genes 0.000 description 1
- 108010047761 Interferon-alpha Proteins 0.000 description 1
- 102000003996 Interferon-beta Human genes 0.000 description 1
- 108090000467 Interferon-beta Proteins 0.000 description 1
- 108090001007 Interleukin-8 Proteins 0.000 description 1
- 102000004890 Interleukin-8 Human genes 0.000 description 1
- 150000008575 L-amino acids Chemical class 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-DHVFOXMCSA-N L-fucopyranose Chemical compound C[C@@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-DHVFOXMCSA-N 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 238000003231 Lowry assay Methods 0.000 description 1
- 238000009013 Lowry's assay Methods 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 101000822667 Mus musculus Something about silencing protein 10 Proteins 0.000 description 1
- BNQSTAOJRULKNX-UHFFFAOYSA-N N-(6-acetamidohexyl)acetamide Chemical compound CC(=O)NCCCCCCNC(C)=O BNQSTAOJRULKNX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 108090000526 Papain Proteins 0.000 description 1
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 description 1
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 102100025067 Potassium voltage-gated channel subfamily H member 4 Human genes 0.000 description 1
- 101710163352 Potassium voltage-gated channel subfamily H member 4 Proteins 0.000 description 1
- 102100024216 Programmed cell death 1 ligand 1 Human genes 0.000 description 1
- 101710089372 Programmed cell death protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 102100040678 Programmed cell death protein 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100036735 Prostate stem cell antigen Human genes 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 108010009736 Protein Hydrolysates Proteins 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N Raffinose Natural products O(C[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O[C@@]2(CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O1)[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N 0.000 description 1
- 241000700157 Rattus norvegicus Species 0.000 description 1
- 102100030086 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Human genes 0.000 description 1
- 102100029986 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-3 Human genes 0.000 description 1
- 101710100969 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-3 Proteins 0.000 description 1
- 102100029981 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-4 Human genes 0.000 description 1
- 101710100963 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-4 Proteins 0.000 description 1
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 1
- 208000006265 Renal cell carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 241000219061 Rheum Species 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 108010073771 Soybean Proteins Proteins 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 102100024834 T-cell immunoreceptor with Ig and ITIM domains Human genes 0.000 description 1
- 102100033728 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 18 Human genes 0.000 description 1
- 102100040245 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 5 Human genes 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N UNPD196149 Natural products OC1C(O)C(CO)OC1(CO)OC1C(O)C(O)C(O)C(COC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000006105 Uterine Cervical Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 244000000188 Vaccinium ovalifolium Species 0.000 description 1
- 108010019530 Vascular Endothelial Growth Factors Proteins 0.000 description 1
- 102000005789 Vascular Endothelial Growth Factors Human genes 0.000 description 1
- 229960000446 abciximab Drugs 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 230000021736 acetylation Effects 0.000 description 1
- 238000006640 acetylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 230000009435 amidation Effects 0.000 description 1
- 238000007112 amidation reaction Methods 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 1
- 230000036436 anti-hiv Effects 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N arabinose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N 0.000 description 1
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 229940120638 avastin Drugs 0.000 description 1
- MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N beta-D-galactosamine Natural products NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 1
- OHJMTUPIZMNBFR-UHFFFAOYSA-N biuret Chemical compound NC(=O)NC(N)=O OHJMTUPIZMNBFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 210000000069 breast epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000010804 cDNA synthesis Methods 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 239000013592 cell lysate Substances 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 201000010881 cervical cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 125000003636 chemical group Chemical group 0.000 description 1
- 210000000038 chest Anatomy 0.000 description 1
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 238000012136 culture method Methods 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000002939 deleterious effect Effects 0.000 description 1
- 238000001212 derivatisation Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 108020001096 dihydrofolate reductase Proteins 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003797 essential amino acid Substances 0.000 description 1
- 235000020776 essential amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- NBVXSUQYWXRMNV-UHFFFAOYSA-N fluoromethane Chemical compound FC NBVXSUQYWXRMNV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 229960002442 glucosamine Drugs 0.000 description 1
- 229930195712 glutamate Natural products 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 206010073071 hepatocellular carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229940022353 herceptin Drugs 0.000 description 1
- 102000044890 human EPO Human genes 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 150000002484 inorganic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 229910010272 inorganic material Inorganic materials 0.000 description 1
- 102000006495 integrins Human genes 0.000 description 1
- 108010044426 integrins Proteins 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- FZWBNHMXJMCXLU-BLAUPYHCSA-N isomaltotriose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O)O1 FZWBNHMXJMCXLU-BLAUPYHCSA-N 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 description 1
- 210000005229 liver cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000000464 low-speed centrifugation Methods 0.000 description 1
- 210000005265 lung cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 239000012533 medium component Substances 0.000 description 1
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 229950003063 mitumomab Drugs 0.000 description 1
- 235000013379 molasses Nutrition 0.000 description 1
- 238000001823 molecular biology technique Methods 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000002777 nucleoside Substances 0.000 description 1
- 125000003835 nucleoside group Chemical group 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 1
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 229950007283 oregovomab Drugs 0.000 description 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 1
- 238000006213 oxygenation reaction Methods 0.000 description 1
- 229940055729 papain Drugs 0.000 description 1
- 235000019834 papain Nutrition 0.000 description 1
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 125000002467 phosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])O[*] 0.000 description 1
- 150000004713 phosphodiesters Chemical class 0.000 description 1
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 239000003531 protein hydrolysate Substances 0.000 description 1
- 230000006337 proteolytic cleavage Effects 0.000 description 1
- 229940024999 proteolytic enzymes for treatment of wounds and ulcers Drugs 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N raffinose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N 0.000 description 1
- 229940116176 remicade Drugs 0.000 description 1
- 229940107685 reopro Drugs 0.000 description 1
- 238000013341 scale-up Methods 0.000 description 1
- 210000000717 sertoli cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000012679 serum free medium Substances 0.000 description 1
- 229940115586 simulect Drugs 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- MFBOGIVSZKQAPD-UHFFFAOYSA-M sodium butyrate Chemical compound [Na+].CCCC([O-])=O MFBOGIVSZKQAPD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 229940001941 soy protein Drugs 0.000 description 1
- 206010041823 squamous cell carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L sulfate group Chemical group S(=O)(=O)([O-])[O-] QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 230000000153 supplemental effect Effects 0.000 description 1
- 238000004114 suspension culture Methods 0.000 description 1
- 229940036185 synagis Drugs 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 150000003505 terpenes Chemical group 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 1
- 229960000575 trastuzumab Drugs 0.000 description 1
- 239000012137 tryptone Substances 0.000 description 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 1
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 1
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/0018—Culture media for cell or tissue culture
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/10—Immunoglobulins specific features characterized by their source of isolation or production
- C07K2317/14—Specific host cells or culture conditions, e.g. components, pH or temperature
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2500/00—Specific components of cell culture medium
- C12N2500/30—Organic components
- C12N2500/34—Sugars
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Description
不定冠詞「a」または「an」は、記載または列挙された任意の成分の「1つ以上」を指すと理解されるべきである。
用語「抗原結合フラグメント」に包含される結合フラグメントの例としては、例えば(i)Fabフラグメント(パパイン切断からのフラグメント)またはVL、VH、LCおよびCH1ドメインからなる類似の一価のフラグメント;(ii)F(ab’)2フラグメント(ペプシン切断からのフラグメント)またはヒンジ領域においてジスルフィド架橋によって連結されている2つのFabフラグメントを含む類似の二価のフラグメント;(iii)VHおよびCH1ドメインからなるFdフラグメント;(iv)抗体の単一のアームのVLおよびVHドメインからなるFvフラグメント;(v)VHドメインからなるdAbフラグメント(Ward et al., (1989) Nature 341:544-546);(vi)単離された相補性決定領域(CDR);および(vii)合成リンカーによって任意に結合されてい得る2つ以上の単離されたCDRの組合せが挙げられる。さらに、Fvフラグメントの2つのドメインであるVLおよびVHは別々の遺伝子によってコードされているが、これらはこれらをVLおよびVH領域が対となって一価の分子を形成している単一のタンパク質鎖(単鎖Fv(scFv)として知られている;例えば、Bird et al. (1988) Science 242:423-426;およびHuston et al. (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-5883を参照)とすることができる合成リンカーによって組換え法を用いて連結され得る。このような単鎖抗体もまた、抗体の「抗原結合部分」という用語に包含されることが意図される。これらの抗体フラグメントは当業者に公知の従来の技術を用いて取得され、フラグメントは無傷の抗体と同様の方法で有用性のためにスクリーニングされる。抗原結合部分は組換えDNA技術によって、または無傷の免疫グロブリンの酵素的切断もしくは化学的切断によって作製され得る。
ある実施形態では、本開示は、N-1大規模バイオリアクター細胞培養物の生細胞密度を増加させる新規の方法であって、目的の組換えポリペプチドを発現する宿主細胞を非灌流ベースの培養系で培養することを含み、生細胞密度が少なくとも5×106細胞/mLまで増加する、方法を提供する。
細胞培養およびポリペプチドの発現に感受性のある任意の哺乳類細胞または細胞型が、本発明に従って利用され得る。本発明に従って使用され得る哺乳類細胞の限定されない例としては、BALB/cマウス骨髄腫株(NSO/1、ECACC番号:85110503);ヒト網膜芽細胞(PER.C6(CruCell、Leiden、The Netherlands));SV40によって形質転換されたサル腎臓CV1株(COS-7、ATCC CRL 1651);ヒト胚性腎臓株(浮遊培養での増殖のためにサブクローニングされた293または293細胞、Graham et al., J. Gen Virol., 36:59 (1977));ベビーハムスター腎臓細胞(BHK、ATCC CCL 10);チャイニーズハムスター卵巣細胞±DHFR(CHO、Urlaub and Chasin, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 77:4216 (1980));マウスセルトリ細胞(TM4、Mather, Biol. Reprod., 23:243-251 (1980));サル腎臓細胞(CV1 ATCC CCL 70);アフリカミドリザル腎臓細胞(VERO-76、ATCC CRL-1 587);ヒト子宮頸がん細胞(HeLa、ATCC CCL 2);イヌ腎臓細胞(MDCK、ATCC CCL 34);buffaloラット肝細胞(BRL 3A、ATCC CRL 1442);ヒト肺細胞(W138、ATCC CCL 75);ヒト肝細胞(Hep G2、HB 8065);マウス乳腺腫瘍(MMT 060562、ATCC CCL5 1);TRI細胞(Mather et al., Annals N.Y. Acad. Sci., 383:44-68 (1982));MRC5細胞;FS4細胞;およびヒト肝細胞腫株(Hep G2)が含まれる。ある実施形態では、本発明はCHO細胞株の培養およびCHO細胞株からのポリペプチドおよびタンパク質の発現に使用される。
目的のポリペプチドを産生するための典型的な手法は、播種増殖のためのバッチ培養およびフェドバッチ培養産生段階を含む。バッチ播種培養プロセスは伝統的に、大規模産生培養物に特定の細胞密度の播種培養物を接種し、細胞を細胞増殖および生存率を助ける条件下で増殖させ、かつ細胞が特定の細胞密度に達したときに播種培養物を次の段階に移行させることを含む。フェドバッチ培養手法は、バッチ培養物に細胞増殖中に消費される栄養素および他の成分を補充するさらなる工程を含む。当業者は、本発明が細胞を培養する任意のシステム(限定されないが、バッチ、フェドバッチおよび灌流システムを含む)に利用され得ることを認識する。本発明の特定の好ましい実施形態では、細胞はバッチまたはフェドバッチシステムにおいて増殖される。
本発明は、本明細書に記載の他の培養工程に従って使用した場合に、N-1培養において宿主細胞の生細胞密度を増加させ、かつ/または非濃縮培地で培養された宿主細胞と比較して高播種密度での産生培養においてより多くの栄養素を提供する濃縮された合成培地処方物を提供する。細胞増殖または目的のポリペプチドの産生に有益な効果を有することが示されている本発明の濃縮培地処方物は、i)増加した量の炭素源、および/またはii)標準培養培地と比較して増加した栄養素を含む。さらに、炭素源は以下であり得る:カゼイン、乳酸塩、ブドウ糖、フルクトース、フルクタン、グルコース、ショ糖、乳糖、マルトース、酢酸塩、グリセロール、ソルビトール、マンニトール、サッカロース、キシロース、糖蜜、フコース、グルコサミン、デキストラン、脂肪、油、グリセロール、酢酸ナトリウム、アラビノース、大豆タンパク質、可溶性タンパク質、ラフィノース、アミロース、デンプン、トリプトン、酵母エキス、およびそれらの組合せ。栄養素はアミノ酸であり得る。濃縮培地は、非濃縮培地と比較して炭素源および/または栄養素とともにフィード培地により5%、少なくとも10%、少なくとも15%または少なくとも20%濃縮されている。当業者は、本発明の培地処方物が限定培地および非限定培地の両方を包含することを理解する。
目的のポリペプチドまたはタンパク質を発現する細胞が同定されると、細胞は当業者に周知の様々な方法のいずれかによって培養物中で増殖される。目的のポリペプチドまたはタンパク質を発現する細胞は通常、細胞の生存、増殖および生存率を助ける温度および培地中で増殖させることによって増殖する。最初の培養量は任意のサイズであり得るが、目的のポリペプチドまたはタンパク質の最終的な産生に使用される産生バイオリアクターの培養量よりも小さいことが多く、細胞は産生バイオリアクターに播種する前に体積を増加させたバイオリアクター内で数回継代されることが多い。細胞が特定の生細胞密度に達すると、細胞は生細胞の数をさらに増加させるためにバイオリアクター内で増殖される。これらのバイオリアクターは、N-1、N-2およびN-3などと呼ばれる。「N」は主要な産生培養のバイオリアクターを指し、「N-1」は主要な産生培養の前のバイオリアクターなどを意味する。
本発明のある実施形態では、増殖している細胞培養物の特定の条件がモニタリングされる。細胞培養条件のモニタリングは、細胞培養物が組換えポリペプチドまたはタンパク質を準最適レベルで産生しているか否か、または培養物が準最適な産生段階に入ろうとしているか否かを決定することを可能にする。
一般に、本発明に従って発現されたタンパク質またはポリペプチドを単離および/または精製することが典型的には望ましい。ある実施形態では、発現ポリペプチドまたはタンパク質は培地中に分泌され、したがって(例えば精製プロセスの最初の工程として)細胞および他の固形物が遠心分離または濾過などによって除去され得る。本明細書に記載された方法および組成物は細胞生存率の増加をもたらすため、本実施態様は本発明に従って使用される場合に特に有用である。結果として、培養プロセス中に死ぬ細胞は少なくなり、発現ポリペプチドまたはタンパク質の収量を潜在的に減少させ得るタンパク質分解酵素がより少ない量で培地中に放出される。
本発明の方法は、目的の任意の組換えポリペプチド(治療用抗体を含む)の大規模産生に使用され得る。本明細書において提供される方法によって産生され得る組換えポリペプチドの限定されない例としては、抗体(無傷の免疫グロブリンまたは抗体フラグメントを含む)、酵素(例えばガラクトシダーゼ)、タンパク質(例えば、ヒトエリスロポエチン、腫瘍壊死因子(TNF)またはインターフェロンアルファもしくはベータ)、細胞受容体(例えばEGFR)、または免疫原性もしくは抗原性タンパク質もしくはタンパク質フラグメント(例えば、ワクチンにおける使用のためのタンパク質)が挙げられる。本発明の範囲内の抗体には以下が含まれるが、これらに限定されない:トラスツズマブ(HERCEPTIN(登録商標))を含む抗HER2抗体(Carter et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 89:4285-4289 (1992);抗HER3抗体;抗HER4抗体;米国特許第5,725,856号);米国特許第5,736,137号(RITUXAN(登録商標))に記載されているような抗CD20抗体(キメラ抗CD20「C2B8」など)、米国特許第5,721,108B1号に記載されているような2H7抗体のキメラまたはヒト化バリアント、またはTositumomab(BEXXAR(登録商標));抗IL-8(St John et al., Chest, 103:932 (1993)、および国際公開第WO 95/23865号);ヒト化抗VEGF抗体huA4.6.1 AVASTIN(登録商標)などのヒト化および/または親和性成熟抗VEGF抗体を含む抗VEGF抗体(Kim et al., Growth Factors, 7:53-64 (1992)、国際公開第WO 96/30046号、および1998年10月15日に公開された第WO 98/45331号);抗PSCA抗体(WO01/40309);S2C6およびそのヒト化バリアントを含む抗CD40抗体(WO00/75348);抗CD11a(米国特許第5,622,700号、WO 98/23761、Steppe et al., Transplant Intl. 4:3-7 (1991)、およびHourmant et al., Transplantation 58:377-380 (1994));抗IgE(Presta et al., J. Immunol. 151:2623-2632 (1993)、国際公開第WO 95/19181号);抗CD18(1997年4月22日に発行された米国特許第5,622,700号、または1997年7月31日に公開されたWO 97/26912のとおり);抗IgE(E25、E26およびE27を含む;1998年2月3日に発行された米国特許第5,714,338号、または1992年2月25日に発行された米国特許第5,091,313号、1993年3月4日に公開されたWO 93/04173、または1998年6月30日に出願された国際出願第PCT/US98/13410号、米国特許第5,714,338号);抗Apo-2受容体抗体(1998年11月19日に公開されたWO 98/51793);cA2(REMICADE(登録商標))、CDP571およびMAK-195を含む抗TNF-α抗体(1997年9月30日に発行された米国特許第5,672,347号、Lorenz et al., J. Immunol. 156(4):1646-1653 (1996)、およびDhainaut et al., Crit. Care Med. 23(9):1461-1469 (1995)参照);抗組織因子(TF)(1994年11月9日に付与された欧州特許第0 420 937 B1号);抗ヒトα4β7インテグリン(1998年2月19日に公開されたWO 98/06248);抗EGFR(1996年12月19日に公開されたWO 96/40210に記載されているようなキメラ化またはヒト化225抗体);OKT3などの抗CD3抗体(1985年5月7日に発行された米国特許第4,515,893号);CHI-621(SIMULECT(登録商標))および(ZENAPAX(登録商標))などの抗CD25抗体または抗tac抗体(1997年12月2日に発行された米国特許第5,693,762号参照);cM-7412抗体などの抗CD4抗体(Choy et al., Arthritis Rheum 39(1):52-56 (1996));CAMPATH-1Hなどの抗CD52抗体(Riechmann et al., Nature 332:323-337 (1988));Graziano et al., J. Immunol. 155(10):4996-5002 (1995)に記載されているようなFcγRIに対するM22抗体などの抗Fc受容体抗体;hMN-14などの抗がん胎児抗原(CEA)抗体(Sharkey et al., Cancer Res. 55(23 Suppl): 5935s-5945s (1995);huBrE-3、hu-Mc3およびCHL6を含む乳房上皮細胞に対する抗体(Ceriani et al., Cancer Res. 55(23): 5852s-5856s (1995);およびRichman et al., Cancer Res. 55(23 Supp): 5916s-5920s (1995));C242などの結腸がん細胞に結合する抗体(Litton et al., Eur J. Immunol. 26(1):1-9 (1996));抗CD38抗体、例えばAT13/5(Ellis et al., J. Immunol. 155(2):925-937 (1995));Hu M195(Jurcic et al., Cancer Res 55(23 Suppl): 5908s-5910s (1995))およびCMA-676またはCDP771などの抗CD33抗体;LL2またはLymphoCideなどの抗CD22抗体(Juweid et al., Cancer Res 55(23 Suppl): 5899s-5907s (1995));17-1A(PANOREX(登録商標))などの抗EpCAM抗体;アブシキシマブまたはc7E3 Fab(REOPRO(登録商標))などの抗GpIIb/IIIa抗体;MEDI-493(SYNAGIS(登録商標))などの抗RSV抗体;PROTOVIR(登録商標)などの抗CMV抗体;PRO542などの抗HIV抗体;抗Hep B抗体OSTAVIR(登録商標)などの抗肝炎抗体;抗CA125抗体OvaRex;抗イディオタイプGD3エピトープ抗体BEC2;抗αvβ3抗体VITAXIN(登録商標);ch-G250などの抗ヒト腎細胞がん抗体;ING-1;抗ヒト17-1A抗体(3622W94);抗ヒト大腸腫瘍抗体(A33);GD3ガングリオシドに対する抗ヒト黒色腫抗体R24;抗ヒト扁平上皮がん(SF-25);Smart ID10などの抗ヒト白血球抗原(HLA)抗体;抗PD-1抗体;抗PD-L1抗体;抗LAG-3抗体;抗GITR抗体;抗TIGIT抗体;抗CXCR4抗体;抗CD73抗体;および抗HLA DR抗体Oncolym(Lym-1)。
3つの異なるモノクローナル抗体またはポリペプチドを産生する3つの異なるCHO細胞株を、これらの実験で使用した。使用した播種培地、基本培地およびフィード培地は既知組成であった。
バッチおよびフェドバッチN-1培養のために、細胞を初期体積80~100mlを含む250ml振盪フラスコまたは初期容量1000mlを含む2L振盪フラスコのいずれかにおいて増殖させた。投入距離25mmのオービタルシェーカーにおいて150rpmの振盪速度を用いた。インキュベーターの設定は36.5℃の一定温度であり、CO2は5%に調節された。バッチN-1培養のために、播種培地は濃縮されていないか、またはグルコース濃縮されているか、またはグルコース濃縮および栄養素濃縮されているかのいずれかであった。バッチN-1培養物にはフィードを添加しなかった。フェドバッチN-1培養のために、播種培地を3日目から毎日与えた。
フェドバッチ産生バイオリアクターを、初期作業体積3.3Lを含む5L Sartoriusバイオリアクターにおいて実施した。
生細胞密度(VCD)および細胞生存率を、Vi-Cell自動セルカウンター(Beckman Coulter)を用いてオフラインで測定した。また、グルコース、グルタミン、グルタミン酸、乳酸、およびアンモニウムをモニタリングするために、培養試料をCedex Bio HT(Roche)を用いてオフラインで分析した。バイオリアクター培養物のために、pH、pCO2、pO2をBioProfile pHOX(Nova Biomedical)を用いてオフラインで測定した。プロテインA UPLC法を用いてタンパク質力価を測定し、正規化した値として報告した。
細胞株A:N-1播種培養
細胞株Aのために、N-1培養物を、バッチ、グルコース濃縮を伴うバッチ、グルコース濃縮および栄養素濃縮を伴うバッチ、フェドバッチまたは灌流の様式で増殖させた。バッチN-1培養はわずか15×106細胞/mLのピークVCDに達し、培養期間の終了近くにおいて高い細胞生存率を維持できなかった(図1A)。対照的に、グルコース濃縮を伴うバッチN-1培養は、17×106細胞/mLのVCDに達し、>99%の細胞生存率を維持した(図1A)。同様に、フェドバッチN-1ならびにグルコース濃縮および栄養素濃縮を伴うバッチN-1はともに、6日目において>20×106細胞/mLまで増殖し、生存率は>99%で維持された(図1Aおよび1B)。灌流N-1培養における細胞は、6日目において44×106細胞/mLまで増殖し、生存率は>99%であった(図1Aおよび1B)。
細胞株Aのために、濃縮されたグルコースを伴うバッチ、濃縮されたグルコースおよび栄養素を伴うバッチ、フェドバッチまたは灌流培養において増殖させたシーズを用いて高密度フェドバッチ産生培養を開始した。
細胞株B:N-1播種培養
細胞株Bのために、N-1培養物を、バッチ、グルコース濃縮を伴うバッチ、グルコース濃縮および栄養素濃縮を伴うバッチ、フェドバッチまたは灌流の様式で増殖させた。バッチN-1培養はわずか24.5×106細胞/mLのピークVCDに達し、高い生存率を維持できなかった(図3Aおよび3B)。対照的に、グルコースのみが濃縮されたバッチN-1培養またはグルコースおよび栄養素がともに濃縮されたバッチN-1培養は、≧25.5×106生細胞/mLに達し、≧99%の細胞生存率を維持した(図3Aおよび3B)。同様に、フェドバッチN-1培養は5日目において≧30×106生細胞/mLまで増殖し、生存率は>99%で維持された(図3Aおよび3B)。灌流N-1培養における細胞は、5日目において41×106細胞/mLまで増殖し、生存率は≧99%であった(図3Aおよび3B)。
細胞株Bのために、バッチ、濃縮されたグルコースおよび栄養素を伴うバッチ、フェドバッチまたは灌流培養において増殖させたシーズを用いて高密度フェドバッチ産生培養を開始した。
細胞株C:N-1播種培養
細胞株Cのために、N-1培養物を、バッチ、グルコース濃縮を伴うバッチ、グルコース濃縮および栄養素濃縮を伴うバッチ、フェドバッチまたは灌流の様式で増殖させた。バッチN-1培養はわずか26×106細胞/mLのピークVCDに達し、高い生存率を維持できなかった(図5Aおよび5B)。対照的に、グルコースのみが濃縮されたバッチN-1培養またはグルコースおよび栄養素がともに濃縮されたバッチN-1培養は、≧30×106生細胞/mLに達し、≧99%の細胞生存率を維持した(図5Aおよび5B)。同様に、フェドバッチN-1培養は5日目において≧33×106生細胞/mLまで増殖し、生存率は≧99%で維持された(図5Aおよび5B)。灌流N-1培養における細胞は、5日目において62×106細胞/mLまで増殖し、生存率は≧99%であった(図5Aおよび5B)。
細胞株Cのために、フェドバッチまたは濃縮されたグルコースおよび栄養素培養物を伴うバッチにおいて増殖させたシーズを用いて高密度フェドバッチ産生培養を開始した。
細胞株Cのために、フェドバッチまたは灌流培養において増殖させたシーズを用いて高密度フェドバッチ産生培養を開始した。
3つの分子のための大規模製造プロセスを、1000Lスケール(細胞株Aの場合)のBristol-Myers SquibbのGMP施設または500Lスケール(細胞株BおよびCの場合)のスケールアップ施設のいずれかで行った。細胞株AおよびBのためのN-1播種培養はグルコースおよび栄養分を濃縮したバッチ培養を利用し、細胞株CのためのN-1播種はフェドバッチの様式で培養された。3つのプロセスはすべて頑強であり、1000Lまたは500Lまで拡張可能であることが示された。細胞密度、力価および産物の品質プロファイルは、実験室規模のバイオリアクターにおけるサテライト培養のものと一致している(図8~10)。細胞株Aについて、下流の精製能力を超える例外的に高い力価のために、産生培養物を10日目に回収した。細胞株Aの培養期間の短縮は、(2つの産生容器を用いて)新たな産生培養物を毎週接種することを可能とし、産生量を著しく増加させた。
Claims (15)
- 目的の組み換えポリペプチドの大規模産生のための方法であって、
ここで前記方法は、前記目的のポリペプチドを発現する宿主細胞をN-1段階における非灌流ベースの培養系で培養する工程であって、ここで前記宿主細胞を濃縮培地で培養して15×10 6 細胞/mLのN-1段階の生細胞密度を得る、工程、および前記N-1段階における非灌流ベースの培養系からの前記宿主細胞を、少なくとも1.5×10 6 細胞/mLの高播種密度でN産生培養系に接種する工程を含み、
ここで前記濃縮培地は、非濃縮培地と比較して増加した量の炭素源、ならびに/または非濃縮培地と比較して増加した量の、アミノ酸、脂質、ビタミン、ミネラルおよびポリアミンから選択される栄養素を含む、方法。 - 前記N-1段階における非灌流ベースの培養系がバッチ培養であり、且つ前記宿主細胞が濃縮培地で培養される、または
前記N-1段階における非灌流ベースの培養系がフェドバッチ培養であり、且つ前記宿主細胞がフィード培地の添加を伴う播種培地中で培養される、請求項1に記載の方法。 - N産生培養系がフェドバッチバイオリアクターである、請求項2に記載の方法。
- N-1段階の生細胞密度が少なくとも20×10 6 、少なくとも25×10 6 、または少なくとも30×10 6 生細胞/mLである、請求項1または2に記載の方法。
- 細胞生存率がN-1段階の最終日において少なくとも80%、少なくとも85%、または少なくとも90%である、請求項4に記載の方法。
- 濃縮基本培地がフィード培地によって非濃縮培地に対して少なくとも5%、少なくとも10%、少なくとも15%、少なくとも20%濃縮されている、請求項1~5のいずれかに記載の方法。
- 濃縮培地が増加した量の炭素源を含み、ここで炭素源がグルコースである、請求項1~6のいずれかに記載の方法。
- 濃縮培地が増加した量の栄養素を含み、ここで栄養素が、アミノ酸、脂質、ビタミン、ミネラルおよびポリアミンから選択される、請求項1~6のいずれかに記載の方法。
- 濃縮培地が、増加した量の炭素源ならびにアミノ酸、脂質、ビタミン、ミネラルおよびポリアミンから選択される栄養素を含む、請求項1~8のいずれかに記載の方法。
- 宿主細胞が哺乳類細胞である、請求項1~9のいずれかに記載の方法。
- 宿主細胞がCHO細胞である、請求項10に記載の方法。
- 目的のポリペプチドの力価が少なくとも100mg/L、少なくとも1g/L、少なくとも3g/L、少なくとも5g/L、または少なくとも10g/Lである、請求項1~11のいずれかに記載の方法。
- 宿主細胞がNフェドバッチ産生バイオリアクターのための基本培地または濃縮基本培地中で培養され、少なくとも1.5×106、少なくとも5×106、または少なくとも10×106生細胞/mLの生細胞密度が得られる、請求項1~11のいずれかに記載の方法。
- 目的の組み換えポリペプチドが抗体または抗原結合フラグメントである、請求項1~13のいずれかに記載の方法。
- 目的の組み換えポリペプチドを単離する工程をさらに含む、請求項1~14のいずれかに記載の方法。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2024001657A JP2024050590A (ja) | 2018-07-03 | 2024-01-10 | 組換えタンパク質を製造する方法 |
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201862693606P | 2018-07-03 | 2018-07-03 | |
US62/693,606 | 2018-07-03 | ||
PCT/US2019/040298 WO2020010080A1 (en) | 2018-07-03 | 2019-07-02 | Methods of producing recombinant proteins |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2024001657A Division JP2024050590A (ja) | 2018-07-03 | 2024-01-10 | 組換えタンパク質を製造する方法 |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2021529527A JP2021529527A (ja) | 2021-11-04 |
JPWO2020010080A5 JPWO2020010080A5 (ja) | 2022-07-08 |
JP7419273B2 true JP7419273B2 (ja) | 2024-01-22 |
Family
ID=67470657
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2020573229A Active JP7419273B2 (ja) | 2018-07-03 | 2019-07-02 | 組換えタンパク質を製造する方法 |
JP2024001657A Pending JP2024050590A (ja) | 2018-07-03 | 2024-01-10 | 組換えタンパク質を製造する方法 |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2024001657A Pending JP2024050590A (ja) | 2018-07-03 | 2024-01-10 | 組換えタンパク質を製造する方法 |
Country Status (18)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US20210253996A1 (ja) |
EP (2) | EP3818078B1 (ja) |
JP (2) | JP7419273B2 (ja) |
KR (1) | KR20210027427A (ja) |
CN (1) | CN112839954A (ja) |
AU (1) | AU2019299358A1 (ja) |
BR (1) | BR112020025623A2 (ja) |
CA (1) | CA3104684A1 (ja) |
DK (1) | DK3818078T3 (ja) |
EA (1) | EA202092904A1 (ja) |
FI (1) | FI3818078T3 (ja) |
IL (1) | IL279782A (ja) |
LT (1) | LT3818078T (ja) |
MX (1) | MX2020013633A (ja) |
PL (1) | PL3818078T3 (ja) |
PT (1) | PT3818078T (ja) |
SG (1) | SG11202012582QA (ja) |
WO (1) | WO2020010080A1 (ja) |
Families Citing this family (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2023242238A1 (en) * | 2022-06-15 | 2023-12-21 | UCB Biopharma SRL | Cell culture processes |
EP4339274A1 (en) | 2022-09-13 | 2024-03-20 | Sartorius Stedim Biotech GmbH | Method for operating a bioprocess installation for production of a bioproduct |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2015133980A (ja) | 2004-08-27 | 2015-07-27 | ファイザー・アイルランド・ファーマシューティカルズ | 抗アミロイドベータ抗体の製法 |
JP2016000030A (ja) | 2006-09-13 | 2016-01-07 | アッヴィ・インコーポレイテッド | 細胞培養の改善 |
JP2018076286A (ja) | 2011-02-07 | 2018-05-17 | セレニス セラピューティクス ホールディング エスアー | リポタンパク質複合体ならびにその製造および使用 |
Family Cites Families (23)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4515893A (en) | 1979-04-26 | 1985-05-07 | Ortho Pharmaceutical Corporation | Hybrid cell line for producing complement-fixing monoclonal antibody to human T cells |
US5672347A (en) | 1984-07-05 | 1997-09-30 | Genentech, Inc. | Tumor necrosis factor antagonists and their use |
IL85035A0 (en) | 1987-01-08 | 1988-06-30 | Int Genetic Eng | Polynucleotide molecule,a chimeric antibody with specificity for human b cell surface antigen,a process for the preparation and methods utilizing the same |
US5091313A (en) | 1988-08-05 | 1992-02-25 | Tanox Biosystems, Inc. | Antigenic epitopes of IgE present on B cell but not basophil surface |
US5720937A (en) | 1988-01-12 | 1998-02-24 | Genentech, Inc. | In vivo tumor detection assay |
ATE113846T1 (de) | 1988-06-21 | 1994-11-15 | Genentech Inc | Therapeutische zusammensetzungen für die behandlung von myocard-infarkten. |
US5530101A (en) | 1988-12-28 | 1996-06-25 | Protein Design Labs, Inc. | Humanized immunoglobulins |
JP3457962B2 (ja) | 1991-08-14 | 2003-10-20 | ジェネンテク,インコーポレイテッド | 特定Fcεレセプターのための免疫グロブリン変異体 |
JPH08500826A (ja) | 1992-08-21 | 1996-01-30 | ジェネンテク,インコーポレイテッド | Lfa−1仲介疾患を処置する方法 |
US5736137A (en) | 1992-11-13 | 1998-04-07 | Idec Pharmaceuticals Corporation | Therapeutic application of chimeric and radiolabeled antibodies to human B lymphocyte restricted differentiation antigen for treatment of B cell lymphoma |
DK0733207T3 (da) | 1993-12-10 | 1998-04-20 | Genentech Inc | Fremgangsmåder til diagnose af allergi og screening af anti-allergi-terapeutika |
WO1995019181A1 (en) | 1994-01-18 | 1995-07-20 | Genentech, Inc. | A METHOD OF TREATMENT OF PARASITIC INFECTION USING IgE ANTAGONISTS |
CA2181787A1 (en) | 1994-03-03 | 1995-09-08 | Claire M. Doerschuk | Anti-il-8 monoclonal antibodies for treatment of inflammatory disorders |
IL117645A (en) | 1995-03-30 | 2005-08-31 | Genentech Inc | Vascular endothelial cell growth factor antagonists for use as medicaments in the treatment of age-related macular degeneration |
EP0831880A4 (en) | 1995-06-07 | 2004-12-01 | Imclone Systems Inc | ANTIBODIES AND FRAGMENTS OF ANTIBODIES INHIBITING TUMOR GROWTH |
ES2183131T3 (es) | 1996-01-23 | 2003-03-16 | Genentech Inc | Anticuerpos anti-cd18 utilizados contra el ictus cerebral. |
US7147851B1 (en) | 1996-08-15 | 2006-12-12 | Millennium Pharmaceuticals, Inc. | Humanized immunoglobulin reactive with α4β7 integrin |
KR100532178B1 (ko) | 1996-11-27 | 2005-12-01 | 제넨테크, 인크. | 인간화 항-CD11a 항체 |
DE122005000026I1 (de) | 1997-04-07 | 2005-08-04 | Genentech Inc | Anti-VEGF Antik¦rper. |
CA2287911C (en) | 1997-05-15 | 2014-05-06 | Genentech, Inc. | Apo-2 receptor |
US6946129B1 (en) | 1999-06-08 | 2005-09-20 | Seattle Genetics, Inc. | Recombinant anti-CD40 antibody and uses thereof |
DE60039448D1 (de) | 1999-10-29 | 2008-08-21 | Genentech Inc | Gegen das prostata-stammzellantigen (psca) gerichtete antikörper und deren verwendung |
JP5731726B1 (ja) | 2014-06-26 | 2015-06-10 | 楽天株式会社 | 情報処理装置、情報処理方法及び情報処理プログラム |
-
2019
- 2019-07-02 JP JP2020573229A patent/JP7419273B2/ja active Active
- 2019-07-02 CN CN201980044908.3A patent/CN112839954A/zh active Pending
- 2019-07-02 AU AU2019299358A patent/AU2019299358A1/en active Pending
- 2019-07-02 WO PCT/US2019/040298 patent/WO2020010080A1/en unknown
- 2019-07-02 CA CA3104684A patent/CA3104684A1/en active Pending
- 2019-07-02 PL PL19745845.8T patent/PL3818078T3/pl unknown
- 2019-07-02 SG SG11202012582QA patent/SG11202012582QA/en unknown
- 2019-07-02 BR BR112020025623-4A patent/BR112020025623A2/pt unknown
- 2019-07-02 EP EP19745845.8A patent/EP3818078B1/en active Active
- 2019-07-02 LT LTEPPCT/US2019/040298T patent/LT3818078T/lt unknown
- 2019-07-02 DK DK19745845.8T patent/DK3818078T3/da active
- 2019-07-02 US US17/252,163 patent/US20210253996A1/en active Pending
- 2019-07-02 FI FIEP19745845.8T patent/FI3818078T3/fi active
- 2019-07-02 PT PT197458458T patent/PT3818078T/pt unknown
- 2019-07-02 KR KR1020217003056A patent/KR20210027427A/ko unknown
- 2019-07-02 MX MX2020013633A patent/MX2020013633A/es unknown
- 2019-07-02 EP EP24153543.4A patent/EP4368699A2/en active Pending
- 2019-07-02 EA EA202092904A patent/EA202092904A1/ru unknown
-
2020
- 2020-12-25 IL IL279782A patent/IL279782A/en unknown
-
2024
- 2024-01-10 JP JP2024001657A patent/JP2024050590A/ja active Pending
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2015133980A (ja) | 2004-08-27 | 2015-07-27 | ファイザー・アイルランド・ファーマシューティカルズ | 抗アミロイドベータ抗体の製法 |
JP2016000030A (ja) | 2006-09-13 | 2016-01-07 | アッヴィ・インコーポレイテッド | 細胞培養の改善 |
JP2018076286A (ja) | 2011-02-07 | 2018-05-17 | セレニス セラピューティクス ホールディング エスアー | リポタンパク質複合体ならびにその製造および使用 |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
Biotechnol. Bioeng.,2012年,vol.110, no.1,p.191-205 |
Biotechnol. Prog.,2013年,vol.29, no.1,p.222-229 |
Biotechnol. Prog.,2017年01月28日,vol.33, no.4,p.867-878 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
MX2020013633A (es) | 2021-03-25 |
JP2024050590A (ja) | 2024-04-10 |
EP4368699A2 (en) | 2024-05-15 |
DK3818078T3 (da) | 2024-05-21 |
CN112839954A (zh) | 2021-05-25 |
PT3818078T (pt) | 2024-04-18 |
AU2019299358A1 (en) | 2021-02-18 |
IL279782A (en) | 2021-03-01 |
EP3818078B1 (en) | 2024-02-28 |
EA202092904A1 (ru) | 2021-04-22 |
CA3104684A1 (en) | 2020-01-09 |
SG11202012582QA (en) | 2021-01-28 |
US20210253996A1 (en) | 2021-08-19 |
BR112020025623A2 (pt) | 2021-03-23 |
KR20210027427A (ko) | 2021-03-10 |
PL3818078T3 (pl) | 2024-04-29 |
JP2021529527A (ja) | 2021-11-04 |
FI3818078T3 (fi) | 2024-05-14 |
LT3818078T (lt) | 2024-04-25 |
EP3818078A1 (en) | 2021-05-12 |
WO2020010080A1 (en) | 2020-01-09 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP7323272B2 (ja) | ポリペプチド生成のための細胞培養組成物及び方法 | |
JP2024050590A (ja) | 組換えタンパク質を製造する方法 | |
US20220315887A1 (en) | Methods of improving protein productivity in fed-batch cell cultures | |
US8058027B2 (en) | Cell culture methods for producing recombinant proteins in the presence of reduced levels of one or more contaminants | |
JP2004532642A (ja) | 動物細胞の培養方法と動物細胞でのポリペプチド産生 | |
JP2023075125A (ja) | 細胞バンクの解凍復元を改善するためのpH調整 | |
US20090142805A1 (en) | High expression cell line that eliminates gene amplification | |
US11242510B2 (en) | Mammalian cells devoid of lactate dehydrogenase activity | |
WO2022066595A1 (en) | Methods for producing therapeutic proteins | |
WO2023015234A1 (en) | Cell culture methods for producing therapeutic proteins | |
JP6697442B2 (ja) | 真核細胞の比生産速度を増加させる方法 | |
CN115916814A (zh) | 细胞培养方法 | |
Hefzi et al. | DTU DTU Library |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20220630 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20220630 |
|
A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20230524 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20230530 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20230828 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20231027 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20231212 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20240110 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 7419273 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |