JP7191134B2 - Igf-1r抗体および癌処置のためのアドレッシングビヒクルとしてのその使用 - Google Patents
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Description
IGF-IRは、極めて高い親和性(Kd#1nM)でIGF1およびIGF2と結合するが、同様にインスリンとも100分の1~1000分の1の親和性で結合し得る。逆に、IGFは100分の1の親和性でしかインスリン受容体と結合しないが、IRは極めて高い親和性でインスリンと結合する。α-サブユニット上に存在するシステインに富む領域とβ-サブユニットのC末端部分にそれぞれ相同性の低い区域があるが、IGF-IRのチロシンキナーゼドメインとIRのチロシンキナーゼドメインとは極めて高い配列相同性を有している。α-サブユニットに見られる配列の差異はリガンドの結合区域に存在するため、それはIGFとインスリンのそれぞれに対するIGF-IRとIRの相対的親和性の基となっている。β-サブユニットのC末端部分における差異は、2つの受容体のシグナル伝達経路における相違をもたらし、IGF-IRは細胞分裂促進特性、分化作用および抗アポトーシス作用を媒介し、一方、IRの活性化は主として代謝経路のレベルでの作用に関与する。
従って、基質の利用度がIGF-IRの活性化に関連した最終的な生物学的作用を決定し得る。IRS-1が優勢である場合には、細胞は増殖し形質転換する傾向にある。Shcが優勢である場合には、細胞は分化する傾向にある。アポトーシスに対する保護作用に主として関与する経路は、ホスファチジル-イノシトール3-キナーゼ(PI3-キナーゼ)経路であると思われる。
この関心は、IGF-IRが、その細胞分裂促進性および抗アポトーシス性に加えて、形質転換された表現型の確立と維持に必要であると思われるという事実の発見に従ったものである。実際に、IGF-IRの過剰発現または構成的活性化が、多様な細胞において、ウシ胎仔血清を含まない培地で補助に依存することなく細胞を成長させ、ヌードマウスにおいて腫瘍を形成させるということが十分に確認されている。成長因子の多数の受容体を含む、過剰発現した遺伝子の多様な産物が細胞を形質転換し得ることから、このこと自体は固有の特性ではない。しかしながら、IGF-IRが形質転換において果たす主要な役割を明らかに立証した重要な発見は、IGF-IRをコードする遺伝子が不活性化されたIGF-IR-細胞が、ウシパピローマウイルスのE5タンパク質などの、通常は細胞を形質転換することができる様々な物質、EGFRまたはPDGFRの過剰発現、SV40のT抗原、活性化したras、又はこれら最後の2つの因子の組合せなどによる形質転換に全く不応であるということを立証している。
従って、漸増用量反応曲線のEC50は、その最大効果の50%が見られる化合物の濃度を表す。素量的用量反応曲線のEC50は、明示された暴露期間の後に集団の50%が応答を示す化合物の濃度を表す。濃度尺度は一般に、比較的小さな濃度変化で急激に増加するシグモイド曲線を描く。これはベストフィットラインの導出により数学的に決定できる。
i)配列番号52のIGF-1Rと結合し、かつ、
ii)配列番号52のIGF-1Rと、配列番号52の494番のヒスチジン以外のアミノ酸で、または491番のアスパラギン酸(ASP)で結合しない、好ましくは、配列番号52のIGF-1Rと、配列番号52の494番のヒスチジン以外のアミノ酸で、かつ、491番のアスパラギン酸(ASP)で結合しない
抗体を選択することを含んでなる方法に関する。
1)i)配列番号52のIGF-1Rと結合し、かつ、
ii)配列番号52のIGF-1Rと、配列番号52の494番のヒスチジン以外のアミノ酸で、または491番のアスパラギン酸(ASP)で結合しない、好ましくは、配列番号52のIGF-1Rと、配列番号52の494番のヒスチジン以外のアミノ酸で、かつ、491番のアスパラギン酸(ASP)で結合しない
抗体を選択すること、および次にこのような抗体から
2)そのIGF-1Rとの結合の後の内部移行のパーセンテージが少なくとも40%、好ましくは、少なくとも50%、少なくとも60%、少なくとも70%、または少なくとも80%である内部移行抗体、またはそのIGF-1R結合フラグメントを選択することを含んでなる方法に関する。
1)そのIGF-1Rとの結合の後の内部移行のパーセンテージが少なくとも40%、好ましくは、少なくとも50%、少なくとも60%、少なくとも70%、または少なくとも80%である内部移行抗体、またはそのIGF-1R結合フラグメントを選択すること、
2)および次にこのような抗体から
i)配列番号52のIGF-1Rと結合し、かつ、
ii)配列番号52のIGF-1Rと、配列番号52の494番のヒスチジン以外のアミノ酸で、または491番のアスパラギン酸(ASP)で結合しない、好ましくは、配列番号52のIGF-1Rと、配列番号52の494番のヒスチジン以外のアミノ酸で、かつ、491番のアスパラギン酸(ASP)で結合しない
抗体を選択すること
を含んでなる方法に関する。
・配列番号52の487番のアミノ酸~494番のアミノ酸のアミノ酸配列と同一の、または少なくとも80%の同一性を示すアミノ酸配列、
・配列番号52の488番のアミノ酸~495番のアミノ酸のアミノ酸配列と同一の、または少なくとも80%の同一性を示すアミノ酸配列、
・配列番号52の489番のアミノ酸~496番のアミノ酸のアミノ酸配列と同一の、または少なくとも80%の同一性を示すアミノ酸配列、
・配列番号52の490番のアミノ酸~497番のアミノ酸のアミノ酸配列と同一の、または少なくとも80%の同一性を示すアミノ酸配列、
・配列番号52の491番のアミノ酸~498番のアミノ酸のアミノ酸配列と同一の、または少なくとも80%の同一性を示すアミノ酸配列、
・配列番号52の492番のアミノ酸~499番のアミノ酸のアミノ酸配列と同一、または少なくとも80%の同一性を示すアミノ酸配列、
・配列番号52の493番のアミノ酸~500番のアミノ酸のアミノ酸配列と同一の、または少なくとも80%の同一性を示すアミノ酸配列
からなる群において選択されるアミノ酸配列を含んでなる、内部移行抗体、またはその内部移行IGF-1R結合フラグメントに関する。
・配列番号52の484番のアミノ酸~491番のアミノ酸のアミノ酸配列と同一の、または少なくとも80%の同一性を示すアミノ酸配列、
・配列番号52の485番のアミノ酸~492番のアミノ酸のアミノ酸配列と同一の、または少なくとも80%の同一性を示すアミノ酸配列、
・配列番号52の486番のアミノ酸~493番のアミノ酸のアミノ酸配列と同一の、または少なくとも80%の同一性を示すアミノ酸配列、
・配列番号52の487番のアミノ酸~494番のアミノ酸のアミノ酸配列と同一の、または少なくとも80%の同一性を示すアミノ酸配列、
・配列番号52の488番のアミノ酸~495番のアミノ酸のアミノ酸配列と同一の、または少なくとも80%の同一性を示すアミノ酸配列、
・配列番号52の489番のアミノ酸~496番のアミノ酸のアミノ酸配列と同一の、または少なくとも80%の同一性を示アミノ酸配列、
・配列番号52の490番のアミノ酸~497番のアミノ酸のアミノ酸配列と同一の、または少なくとも80%の同一性を示すアミノ酸配列
からなる群において選択されるアミノ酸配列を含んでなる、内部移行抗体、またはその内部移行IGF-1R結合フラグメントに関する。
・配列番号52の487番のアミノ酸~494番のアミノ酸のアミノ酸配列と同一の、または少なくとも80%の同一性を示すアミノ酸配列、
・配列番号52の488番のアミノ酸~495番のアミノ酸のアミノ酸配列と同一の、または少なくとも80%の同一性を示すアミノ酸配列、
・配列番号52の489番のアミノ酸~496番のアミノ酸のアミノ酸配列と同一の、または少なくとも80%の同一性を示すアミノ酸配列、
・配列番号52の490番のアミノ酸~497番のアミノ酸のアミノ酸配列と同一の、または少なくとも80%の同一性を示すアミノ酸配列、および
・配列番号52の491番のアミノ酸~498番のアミノ酸のアミノ酸配列と同一の、または少なくとも80%の同一性を示すアミノ酸配列
からなる群において選択されるアミノ酸配列を含んでなる、内部移行抗体、またはその内部移行IGF-1R結合フラグメントに関する。
i)配列番号2の配列のCDR-H2および配列番号3の配列のCDR-H3を有する3つの重鎖CDRと、配列番号5の配列のCDR-L2を有する3つの軽鎖CDRとを含んでなる抗体;
ii)IGF-1Rとの結合に関してi)の抗体と競合する抗体;および
iii)i)の抗体と同じIGF-1Rエピトープと結合する抗体
から選択される、抗体、またはその抗原結合フラグメントに関する。
a)対象とする腫瘍細胞を低温(4℃)または温かい(37℃)完全培養培地中、本発明の抗体で処理し、インキュベートすること;
b)工程a)の処理細胞および並行して非処理細胞を二次抗体で処理すること;
c)本発明の抗体と結合し得る二次標的抗体で処理した細胞および非処理の細胞のMFIを測定すること(表面に存在するIGF-1Rの量を代表する);および
d)Δを非処理細胞で得られたMFIから処理細胞で得られたMFIの減算として計算すること。
100×(MFI 4℃-MFI37℃)/MFI 4℃を求めることができる。
a)配列番号7、2および3の配列の3つの重鎖CDRと、配列番号9、5および11の配列の3つの軽鎖CDRとを含んでなる抗体;
b)配列番号7、2および3の配列の3つの重鎖CDRと、配列番号10、5および11の配列の3つの軽鎖CDRとを含んでなる抗体;
c)配列番号7、2および3の配列の3つの重鎖CDRと、配列番号9、5および12の配列の3つの軽鎖CDRとを含んでなる抗体;ならびに
d)配列番号8、2および3の配列の3つの重鎖CDRと、配列番号9、5および11の配列の3つの軽鎖CDRとを含んでなる抗体
から選択される。
a)配列番号13の配列または配列番号13と少なくとも80%の同一性を示す任意の配列の重鎖可変ドメインと、配列番号9、5および11の配列の3つの軽鎖CDRとを含んでなる抗体;
b)配列番号14の配列または配列番号14と少なくとも80%、85%、90%、95%または98%の同一性を示す任意の配列の重鎖可変ドメインと、配列番号10、5および11の配列の3つの軽鎖CDRとを含んでなる、またはからなる抗体;
c)配列番号15の配列または配列番号15と少なくとも80%、85%、90%、95%または98%の同一性を示す任意の配列の重鎖可変ドメインと、配列番号9、5および12の配列の3つの軽鎖CDRとを含んでなる、またはからなる抗体;
d)配列番号16の配列または配列番号16と少なくとも80%、85%、90%、95%または98%の同一性を示す任意の配列の重鎖可変ドメインと、配列番号9、5および11の配列の3つの軽鎖CDRとを含んでなる、またはからなる抗体;ならびに
e)配列番号17の配列または配列番号17と少なくとも80%、85%、90%、95%または98%の同一性を示す任意の配列の重鎖可変ドメインと、配列番号9、5および12の配列の3つの軽鎖CDRとを含んでなる、またはからなる抗体
から選択される。
a)配列番号18の配列または配列番号18と少なくとも80%、85%、90%、95%または98%の同一性を示す任意の配列の軽鎖可変ドメインと、配列番号7、2および3の配列の3つの重鎖CDRとを含んでなる抗体;
b)配列番号19の配列または配列番号19と少なくとも80%、85%、90%、95%または98%の同一性を示す任意の配列の軽鎖可変ドメインと、配列番号7、2および3の配列の3つの重鎖CDRとを含んでなる抗体;
c)配列番号20の配列または配列番号20と少なくとも80%、85%、90%、95%または98%の同一性を示す任意の配列の軽鎖可変ドメインと、配列番号7、2および3の配列の3つの重鎖CDRとを含んでなる抗体;
d)配列番号21の配列または配列番号21と少なくとも80%、85%、90%、95%または98%の同一性を示す任意の配列の軽鎖可変ドメインと、配列番号8、2および3の配列の3つの重鎖CDRとを含んでなる抗体;ならびに
e)配列番号22の配列または配列番号22と少なくとも80%、85%、90%、95%または98%の同一性を示す任意の配列の軽鎖可変ドメインと、配列番号7、2および3の配列の3つの重鎖CDRとを含んでなる抗体
から選択される。
a)配列番号13の配列または配列番号13と少なくとも80%、85%、90%、95%または98%の同一性を示す任意の配列の重鎖可変ドメインと、配列番号18の配列または配列番号18と少なくとも80%、85%、90%、95%または98%の同一性を示す任意の配列の軽鎖可変ドメインとを含んでなる抗体;
b)配列番号14の配列または配列番号14と少なくとも80%、85%、90%、95%または98%の同一性を示す任意の配列の重鎖可変ドメインと、配列番号19の配列または配列番号19と少なくとも80%、85%、90%、95%または98%の同一性を示す任意の配列の軽鎖可変ドメインとを含んでなる抗体;
c)配列番号15の配列または配列番号15と少なくとも、85%、90%、95%または98%の同一性を示す任意の配列の重鎖可変ドメインと、配列番号20の配列または配列番号20と少なくとも80%、85%、90%、95%または98%の同一性を示す任意の配列の軽鎖可変ドメインとを含んでなる抗体;
d)配列番号16の配列または配列番号16と少なくとも80%、85%、90%、95%または98%の同一性を示す任意の配列の重鎖可変ドメインと、配列番号21の配列または配列番号21と少なくとも80%、85%、90%、95%または98%の同一性を示す任意の配列の軽鎖可変ドメインとを含んでなる抗体;ならびに
e)配列番号17の配列または配列番号17と少なくとも80%、85%、90%、95%または98%の同一性を示す任意の配列の重鎖可変ドメインと、配列番号22の配列または配列番号22と少なくとも80%、85%、90%、95%または98%の同一性を示す任意の配列の軽鎖可変ドメインとを含んでなる抗体
から選択される抗体に関する。
a)配列番号23の配列または配列番号23と少なくとも80%、85%、90%、95%または98%の同一性を示す任意の配列の重鎖と、配列番号28の配列または配列番号28と少なくとも80%、85%、90%、95%または98%の同一性を示す任意の配列の軽鎖とを含んでなる、またはからなる抗体;
b)配列番号24の配列または配列番号24と少なくとも80%、85%、90%、95%または98%の同一性を示す任意の配列の重鎖と、配列番号29の配列または配列番号29と少なくとも80%、85%、90%、95%または98%の同一性を示す任意の配列の軽鎖とを含んでなる、またはからなる抗体;
c)配列番号25の配列または配列番号25と少なくとも80%、85%、90%、95%または98%の同一性を示す任意の配列の重鎖と、配列番号30の配列または配列番号30と少なくとも80%、85%、90%、95%または98%の同一性を示す任意の配列の軽鎖とを含んでなる、またはからなる抗体;
d)配列番号26の配列または配列番号26と少なくとも80%、85%、90%、95%または98%の同一性を示す任意の配列の重鎖と、配列番号31の配列または配列番号31と少なくとも80%、85%、90%、95%または98%の同一性を示す任意の配列の軽鎖とを含んでなる、またはからなる抗体;ならびに
e)配列番号27の配列または配列番号27と少なくとも80%、85%、90%、95%または98%の同一性を示す任意の配列の重鎖と、配列番号32の配列または配列番号32と少なくとも80%、85%、90%、95%または98%の同一性を示す任意の配列の軽鎖とを含んでなる、またはからなる抗体
から選択される。
i)それぞれ配列番号7、2および3の配列のCDR-H1、CDR-H2およびCDR-H3と、
ii)ヒト生殖細胞系IGHV1-46*01(配列番号46)に由来するFR1、FR2およびFR3と、
iii)ヒト生殖細胞系IGHJ4*01(配列番号48)に由来するFR4を有する重鎖可変ドメイン(VH)を含んでなる。
i)それぞれ配列番号9、5および11の配列のCDR-L1、CDR-L2およびCDR-L3と、
ii)ヒト生殖細胞系IGKV1-39*01(配列番号47)に由来するFR1、FR2およびFR3と、
iii)ヒト生殖細胞系IGKJ4*01(配列番号49)に由来するFR4を有する軽鎖可変ドメイン(VL)を含んでなる。
a)それぞれ配列番号7、2および3の配列のCDR-H1、CDR-H2およびCDR-H3と、ヒト生殖細胞系IGHV1-46*01(配列番号46)に由来するFR1、FR2およびFR3、ならびにヒト生殖細胞系IGHJ4*01(配列番号48)に由来するFR4とを有する重鎖と、b)それぞれ配列番号9、5および11の配列のCDR-L1、CDR-L2およびCDR-L3と、ヒト生殖細胞系IGKV1-39*01(配列番号47)に由来するFR1、FR2およびFR3、ならびにヒト生殖細胞系IGKJ4*01(配列番号49)に由来するFR4とを有する軽鎖
を含んでなる。
a)配列番号33の配列の重鎖可変ドメイン(VH)、ここで前記配列番号33の配列は、残基20、34、35、38、48、50、59、61、62、70、72、74、76、77、79、82および95から選択される少なくとも1つの復帰突然変異を含んでなる;と、
b)配列番号35の配列の軽鎖可変ドメイン(VL)、ここで前記配列番号35の配列は、残基22、53、55、65、71、72、77および87から選択される少なくとも1つの復帰突然変異を含んでなる
a)配列番号33の配列または配列番号33と少なくとも80%、85%、90%、95%もしくは98%の同一性を示す任意の配列の重鎖可変ドメインと、配列番号9、5および11の配列の3つの軽鎖CDRとを含んでなる抗体;
b)配列番号34の配列または配列番号34と少なくとも80%、85%、90%、95%もしくは98%の同一性を示す任意の配列の重鎖可変ドメインと、配列番号9、5および11の配列の3つの軽鎖CDRとを含んでなる抗体;ならびに
c)配列番号56、62、64、66、68、70、72、74、76、78および80から選択される配列または配列番号56、62、64、66、68、70、72、74、76、78 80と少なくとも80%、85%、90%、95%もしくは98%の同一性を有する任意の配列の重鎖可変ドメインと、配列番号9、5および11の配列の3つの軽鎖CDRとを含んでなる抗体
から選択される。
a)配列番号35の配列または配列番号35と少なくとも80%、85%、90%、95%もしくは98%の同一性を示す任意の配列の軽鎖可変ドメインと、配列番号7、2および3の配列の3つの重鎖CDRとを含んでなる抗体;ならびに
b)配列番号36の配列または配列番号36と少なくとも80%、85%、90%、95%もしくは98%の同一性を示す任意の配列の軽鎖可変ドメインと、配列番号7、2および3の配列の3つの重鎖CDRとを含んでなる抗体;ならびに
c)配列番号57および60から選択される配列または配列番号57もしくは60と少なくとも80%、85%、90%、95%もしくは98%の同一性を有する任意の配列の軽鎖可変ドメインと、配列番号7、2および3の配列の3つの重鎖CDRとを含んでなる抗体
から選択される。
a)配列番号37の配列または配列番号37と少なくとも80%、85%、90%、95%、または98%の同一性を示す任意の配列の重鎖と、配列番号39の配列または配列番号39と少なくとも80%、85%、90%、95%、または98%の同一性を示す任意の配列を含んでなる、またはからなる軽鎖とを含んでなる、またはからなる抗体;
b)配列番号38の配列または配列番号38と少なくとも80%、85%、90%、95%、または98%の同一性を示す任意の配列の重鎖と、配列番号40の配列または配列番号40と少なくとも80%、85%、90%、95%、または98%の同一性を示す任意の配列を含んでなる、またはからなる軽鎖とを含んでなる、またはからなる抗体;ならびに
c)配列番号56、62、64、66、68、70、72、74、76、78および80から選択される配列または配列番号56、62、64、66、68、70、72、74、76、78もしくは80と少なくとも80%、85%、90%、95%、もしくは98%の同一性を有する任意の配列の重鎖可変ドメインと、配列番号57 60から選択される配列または配列番号57もしくは60と少なくとも80%、85%、90%、95%、または98%の同一性を有する任意の配列の軽鎖可変ドメインとを含んでなる抗体
から選択される抗体に関する。より明確にするために、下表6aにヒト化抗体hz208F2の変異体1(Var.1)および変異体3(Var.3)に関するVHおよびVLの配列の非限定例を示す。それはまた、変異体2(Var.2)のコンセンサス配列も含んでなる。
a)配列番号56、62、64、66、68、70、72、74、76、78および80から選択される配列または配列番号56、62、64、66、68、70、72、74、76、78もしくは80と少なくとも80%、85%、90%、95%もしくは98%の同一性を有する任意の配列の重鎖可変ドメインと、配列番号9、5および11の配列の3つの軽鎖CDRとを含んでなる抗体;
b)配列番号57もしくは60から選択される配列または配列番号57もしくまたは60と少なくとも80%、85%、90%、95%もしくは98%の同一性を有する任意の配列の軽鎖可変ドメインと、配列番号7、2および3の配列の3つの重鎖CDとを含んでなる抗体;ならびに
c)配列番号57および60から選択される配列または配列番号57もしくは60と少なくとも80%、85%、90%、95%もしくは98%の同一性を有する任意の配列の軽鎖可変ドメインと、配列番号56、62、64、66、68、70、72、74、76、78および80から選択される配列または配列番号56、62、64、66、68、70、72、74、76、78もしくは80と少なくとも80%、85%、90%、95%もしくは98%の同一性を有する任意の配列の重鎖可変ドメインとを含んでなる抗体
から選択される。
a)配列番号58、63、65、67、69、71、73、75、77、79および81から選択される配列または配列番号58、63、65、67、69、71、73、75、77、79もしくは81と少なくとも80%、好ましくは85%、90%、95%もしくは98%の同一性を有する任意の配列の重鎖と、
b)配列番号59および61から選択される配列または配列番号59もしくは61と少なくとも80%、好ましくは85%、90%、95%または98%の同一性を有する任意の配列の軽鎖
とを含んでなる、またはからなる抗体から選択される抗体に関する。
a)配列番号56、62、64、66、68、70、72、74、76、78および80から選択される配列または配列番号56、62、64、66、68、70、72、74、76、78もしくは80と少なくとも80%、85%、90%、95%、もしくは98%の同一性を示す任意の配列の重鎖可変ドメインと、配列番号57の配列または配列番号57と少なくとも80%、85%、90%、95%、または98%の同一性を示す任意の配列の軽鎖可変ドメインとを含んでなる抗体;
b)配列番号56、64、68および78から選択される配列または配列番号56、64、68もしくは78と少なくとも80%、85%、90%、95%、または98%の同一性を示す任意の配列の重鎖可変ドメインと、配列番号60の配列または配列番号60と少なくとも80%の同一性を示す任意の配列の軽鎖可変ドメインとを含んでなる抗体
から選択される抗体に関する。
a)配列番号58の配列または配列番号58と少なくとも80%、85%、90%、95%、もしくは98%の同一性を示す任意の配列の重鎖と、配列番号59の配列または配列番号59と少なくとも80%、85%、90%、95%、もしくは98%の同一性を示す任意の配列を含んでなる、またはからなる軽鎖とを含んでなる、またはからなる抗体;
b)配列番号58の配列または配列番号58と少なくとも80%、85%、90%、95%、または98%の同一性を示す任意の配列の重鎖と、配列番号61の配列または配列番号61と少なくとも80%、85%、90%、95%、もしくは98%の同一性示す任意の配列の軽鎖とを含んでなる、またはからなる抗体;
c)配列番号63の配列または配列番号63と少なくとも80%、85%、90%、95%、もしくは98%の同一性を示す任意の配列の重鎖と、配列番号59の配列または配列番号59とを含んでなる、またはからなる少なくとも80%、85%、90%、95%、もしくは98%の同一性を示す任意の配列軽鎖とを含んでなる、またはからなる抗体;
d)配列番号65の配列または配列番号65と少なくとも80%、85%、90%、95%、もしくは98%の同一性を示す任意の配列の重鎖と、配列番号59の配列または配列番号59と少なくとも80%、85%、90%、95%、もしくは98%の同一性を示す任意の配列を含んでなる、またはからなる軽鎖とを含んでなる、またはからなる抗体;
e)配列番号65の配列または配列番号65と少なくとも80%、85%、90%、95%、もしくは98%の同一性を示す任意の配列の重鎖と、配列番号61の配列または配列番号61と少なくとも80%、85%、90%、95%、もしくは98%の同一性を示す任意の配列を含んでなる、またはからなる軽鎖とを含んでなる、またはからなる抗体;
f)配列番号67の配列または配列番号67と少なくとも80%、85%、90%、95%、もしくは98%の同一性を示す任意の配列の重鎖と、配列番号59の配列または配列番号59と少なくとも80%、85%、90%、95%、もしくは98%の同一性を示す任意の配列を含んでなる、またはからなる軽鎖を含んでなる、またはからなる抗体;
g)配列番号69の配列または配列番号69と少なくとも80%、85%、90%、95%、もしくは98%の同一性を示す任意の配列の重鎖と、配列番号59の配列または配列番号59と少なくとも80%、85%、90%、95%、もしくは%の同一性示す任意の配列を含んでなる、またはからなる軽鎖とを含んでなる、またはからなる抗体;
h)配列番号69の配列または配列番号69と少なくとも80%、85%、90%、95%、もしくは98%の同一性を示す任意の配列の重鎖と、配列番号61の配列または配列番号61と少なくとも80%、85%、90%、95%、もしくは98%の同一性を示す任意の配列を含んでなる、またはからなる軽鎖とを含んでなる、またはからなる抗体;
i)配列番号71の配列または配列番号71と少なくとも80%、85%、90%、95%、もしくは98%の同一性を示す任意の配列の重鎖と、配列番号59の配列または配列番号59と少なくとも80%、85%、90%、95%、もしくは98%の同一性を示す任意の配列を含んでなる、またはからなる軽鎖とを含んでなる、またはからなる抗体;
j)配列番号73の配列または配列番号73と少なくとも80%、85%、90%、95%、もしくは98%の同一性を示す任意の配列の重鎖と、配列番号59の配列または配列番号59少なくとも80%、85%、90%、95%、もしくは98%の同一性を示す任意の配列を含んでなる、またはからなる軽鎖とを含んでなる、またはからなる抗体;
k)配列番号75の配列または配列番号75と少なくとも80%、85%、90%、95%、もしくは98%の同一性を示す任意の配列の重鎖と、配列番号59の配列または配列番号59と少なくとも80%、85%、90%、95%、もしくは98%の同一性を示す任意の配列を含んでなる、またはからなる軽鎖とを含んでなる、またはからなる、抗体;
l)配列番号77の配列または配列番号77と少なくとも80%、85%、90%、95%、もしくは98%の同一性を示す任意の配列の重鎖と、配列番号59の配列または配列番号59と少なくとも80%、85%、90%、95%、または98%の同一性を示す任意の配列を含んでなる、またはからなる軽鎖とを含んでなる、またはからなる抗体;
m)配列番号79の配列または配列番号79と少なくとも80%、85%、90%、95%、もしくは98%の同一性を示す任意の配列の重鎖と、配列番号59の配列または配列番号59と少なくとも80%、85%、90%、95%、またもしくは98%の同一性を示す任意の配列を含んでなる、またはからなる軽鎖とを含んでなる、またはからなる抗体;
n)配列番号79の配列または配列番号79と少なくとも80%、85%、90%、95%、もしくは98%の同一性を示す任意の配列の重鎖と、配列番号61の配列または配列番号61と少なくとも80%、85%、90%、95%、もしくは98%の同一性を示す任意の配列を含んでなる、またはからなるとを含んでなる、またはからなる抗体;ならびに
o)配列番号81の配列または配列番号81と少なくとも80%、85%、90%、95%、もしくは98%の同一性を示す任意の配列の重鎖と、配列番号59の配列または配列番号59と少なくとも80%、85%、90%、95%、もしくは98%の同一性を示す任意の配列を含んでなる、またはからなる軽鎖とを含んでなる、またはからなる抗体
から選択される抗体に関する。
i)それぞれ2013年5月30日、2013年6月26日、2013年6月26日、2013年4月24日および2013年6月26日にCNCM、Collection Nationale de Culture de Microorganismes、パスツール研究所、25、rue du Docteur Roux、75724 パリ、フランスに寄託されたハイブリドーマI-4757、I-4773、I-4775、I-4736もしくはI-4774により産生された抗体、ii)IGF-1Rとの結合に関してi)の抗体と競合する抗体;およびiii)i)の抗体と同じIGF-1Rエピトープと結合する抗体から選択される抗体である。
a)培地中、本発明による宿主細胞に好適な培養条件での培養;および
b)このようにして産生された抗体の、またはその抗原結合フラグメントの培養培地からまたは前記培養細胞からの回収
を含んでなることを特徴とする。
化学合成により得られた、また対応する非天然アミノ酸を含有し得るポリペプチドも本発明に含まれる。
リンカーは、好ましい実施形態では、リンカーの切断が細胞内環境において抗体から細胞傷害性薬剤を放出するように、細胞内条件下で切断可能である。
--Ta--Ww--Yy--
を有していてよく、式中、
-T-は、延伸単位であり;
aは、0または1であり;
-W-は、アミノ酸単位であり;
wは独立に、1~12の範囲の整数であり;
-Y-は、スペーサー単位であり;
yは、0、1または2である。
天然にまたは化学的操作を介して抗体上に存在し得る有用な官能基としては、スルフヒドリル、アミノ、ヒドロキシル、炭水化物のアノマーヒドロキシル基、およびカルボキシルが含まれる。好適な官能基はスルフヒドリルおよびアミノである。スルフヒドリル基は、存在する場合、抗体の分子内ジスルフィド結合の還元により作製することができる。あるいは、スルフヒドリル基は、抗体のリシン部分のアミノ基と2-イミノチオランまたは他のスルフヒドリル生成試薬との反応により生成することもできる。特定の実施形態では、抗体は、組換え抗体であり、1以上のリシンを有するように操作される。より好ましくは、抗体は、1以上のシステインを有するように操作することができる(ThioMabs参照)。
ヒトIGF-1受容体(hIGF-1R)のヒト細胞外ドメイン(ECD)に対して生成したマウスモノクローナル抗体(Mab)を作製するために、5個体のBALB/cマウスを10μgのrhIGF-1Rタンパク質(R&D Systems、カタログ番号391-GR)で3回皮下免疫した。別途、一部の動物で、10μgのIGF-1Rマウス細胞外ドメイン(ECD)(R&D Systems、カタログ番号6630-GR/Fc)での3回の付加的免疫誘導も行った。初回の免疫誘導はフロイントの完全アジュバント(Sigma、セントルイス、MD、USA)の存在下で行った。以降の免疫誘導にはフロイントの不完全アジュバント(Sigma)を加えた。融合3日前に、免疫マウスに10μgのrhIGF-1Rタンパク質で追加免疫を行った。次に、脾細胞およびリンパ球をそれぞれ脾臓の灌流および近位リンパ節の細断により調製し、5個体の免疫マウスのうち1個体(総てのマウスの血清力価測定の後に選択)から採取し、SP2/0-Ag14骨髄腫細胞(ATCC、ロックヴィル、MD、USA)と融合させた。融合プロトコールはKohler and Milstein (Nature, 256:495-497, 1975)に記載されている。融合細胞に対してHAT選択を行う。一般に、特にマウス起源のモノクローナル抗体またはそれらの機能的フラグメントの調製には、特にマニュアル“Antibodies” (Harlow and Lane, Antibodies: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor NY, pp. 726, 1988)に記載されている技術を参照することができる。融合のおよそ10日後に、ハイブリッド細胞のコロニーをスクリーニングした。一次スクリーニングとして、ハイブリドーマの上清を、ヒト乳房MCF7腫瘍細胞(ATCC)および/または細胞表面にサルIGF-1Rを発現するCOS7細胞(アフリカミドリザル腎臓SV40形質転換)を用いたFACS分析によって、rhIGF-1R ECDタンパク質に対して生成したMabの分泌に関して評価した。より厳密には、フローサイトメトリーによる選択のために、105細胞(MCF7またはCOS7のいずれか)を96ウェルプレートの各ウェルの1%BSAおよび0.01%アジ化ナトリウムを含有するPBS(FACSバッファー)中に4℃で播種した。2000rpmで2分の遠心分離後に、バッファーを除去し、供試するハイブリドーマ上清を加えた。4℃で20分のインキュベーション後、細胞を2回洗浄し、FACSバッファー(#A11017、Molrcular Probs
Inc.、ユージーン、USA)で1/500希釈したAlexa 488コンジュゲートヤギ抗マウス抗体を加え、4℃で20分間インキュベートした。FACSバッファーでの最終洗浄後、各試験管に終濃度40μg/mlでヨウ化プロピジウムを加えた後に、FACS(Facscalibur、Becton-Dickinson)により細胞を分析した。細胞単独およびAlexa 488コンジュゲート二次抗体ともにインキュベートした細胞を含有するウェルを陰性対照として含めた。アイソタイプ対照を各実験で使用した(Sigma、ref M90351MG)。蛍光強度の平均値(MFI)を算出するために少なくとも5000細胞を評価した。
%残留IGF-1R=(MFIAb 37℃/MFIAb 4℃)×100。
室温で10分のインキュベーション時間後、1M硫酸を用いて反応を停止させ、450nmでの光学密度を測定する。
Biosciences)と呼ばれるin vitro生産系で生産した。
IGF-1Rに対する応答の多様性を検討するために、選択された抗体をBiacoreによりマッピングし、競合特性によるこれらの抗体のクラスタリングを行った。
1-可溶型のhIGF-1Rヘテロ四量体(2本のα鎖と、付加的なC末端10Hisタグ(R&D Systemsカタログ番号305-GR)とともに発現される2本のβ鎖の細胞外ドメイン)の溶液を1分間両フローセルに5μg/mlの濃度で注入する。
2-次に、hIGF-1R結合部位の飽和(または少なくとも飽和付近)を達成するために、供試する抗hIGF-1R抗体の溶液(従来50μg/ml)を、フローセル1にのみ60~90秒の間注入する。
3-潜在的競合因子として使用する第2の抗体の溶液を、同じ条件で両フローセルまたは第2のフローセルにのみ注入する。
4-最後に、第3の抗体の溶液を同じ条件で両フローセル注入してもよい。
5-その後、10mMグリシン、HCl pH1.5バッファーを30秒間注入することで表面を再生する。
一連の抗IGF-1R抗体の結合特性をヒトMCF-7乳腺癌細胞株(ATCC#HTB-22)にて漸増抗体濃度を用い、FACS分析により評価した。この目的で、細胞(1×106細胞/ml)を4℃にてFACSバッファー(PBS、0.1%BSA、0.01%NaN3)中、抗IGF-1R抗体とともに20分間インキュベートした。次に、それらの細胞を3回洗浄し、暗所、4℃にてさらに20分間、Alexa 488とカップリングした適当な二次抗体とともにインキュベートした後、FACSバッファー中で3回洗浄した。すぐに生細胞に抗IGF-1R抗体の結合がなされ、これを、ヨウ化プロピジウム(死細胞を染色する)を用いて確認した。各抗体で得られたシグナル強度の最大値をBmaxと呼び、蛍光強度の平均(MFI)で表した。モル濃度(M)で表される結合のEC50は、非直線回帰分析(GraphPad Prims 4.0)を用いて算出した。
生成された抗体のhIGF-1RとhIRに対する特異性を確認するために、hIGF-1RまたはhIRのいずれかを発現する安定なトランスフェクト体を、FACS分析により評価した。簡単に述べれば、漸増濃度のキメラmAbをFACSバッファー(PBS、0.1%BSA、0.01%NaN3)中、4℃で20分間、細胞とともにインキュベートした。次に、細胞を3回洗浄し、Alexa 488とカップリングした適当な二次抗体とともにインキュベートした後、暗所、4℃にてさらに20分間インキュベートし、その後、FACSバッファー中で3回洗浄した。すぐに生細胞に抗IGF-1R抗体の結合がなされ、これを、ヨウ化プロピジウム(死細胞を染色する)を用いて確認した。モル濃度(M)で表される結合EC50は、非直線回帰分析(GraphPad Prims
4.0)を用いて算出した。
規制毒性試験の第1の前提条件の1つは、選択された化合物を評価するために適切な動物種を特定することである。本明細書に記載の抗体系列はマウスIGF-1Rを認識できないので、毒性評価に最も可能性のある種は非ヒト霊長類(NHP)である。
抗体チロシンキナーゼ受容体と結合した際に促進作用を誘導し得ることはよく知られている。本発明者らはこのようなアゴニスト抗体を選択したくはなかったので、キメラ抗体を用いてhIGF-1Rリン酸化の評価を検討した。
選択された抗体の特性決定を行うために、IGF1により誘導されたリン酸化を阻害するそれらの能力を検討した。この目的で、MCF-7細胞を無血清培地で一晩インキュベートした。次に、細胞をマウス抗hIGF-1R Abとともに5分間インキュベートした後、37℃で2分間IGF-1を添加した。培地を排出し、細胞を4℃で90分間、10mM Tris HClバッファー(pH7.5)、15%NaCl(1M)、10%洗剤混合物(10mM Tris-HCl、10%Igepal溶解バッファー)(Sigma Chemical Co.)、5%デオキシコール酸ナトリウム(Sigma Chemical Co.)、1個のプロテアーゼ阻害剤カクテルコンプリートTM錠(Roche)、1%ホスファターゼ阻害剤カクテルSet II(Calbiochem)を含有する溶解バッファー(pH7.5)中で崩壊させた。これらの溶解液を4℃での遠心分離により明澄化し、100℃で5分間加熱し、-20℃で維持するか、またはそのまま4~12%SDS-PAGEゲルにロードした。一次抗体のインキュベーションを室温で2時間行った後、HRP結合二次抗体とのインキュベーションを室温で1時間行った。メンブランをTBST中で洗浄した後、タンパク質をECLで可視化した。ブロットを、Image Jソフトウエアを用いて定量した。GAPDHを用いてホスホタンパク質値を正規化した。IGF-1に応答したhIGF-1Rのリン酸化を100%の刺激と見なした。hIGF-1Rのリン酸化に対する抗hIGF-1R Abの効果を、IGF-1により誘導されたリン酸化の%として求めた。
MCF-7細胞を4℃で20分間、10μg/mlのキメラ抗体とともにインキュベートした。次に、細胞を洗浄し、4℃または37℃で4時間インキュベートした。細胞表面結合抗体の量を、FacsCaliburフローサイトメーター(Becton Dickinson)にて、二次抗体を用いて決定した。4時間のインキュベーション時間後に4℃で測定されたMFIと37℃で測定されたMFIとの間の差異として定義されるΔMFIは、内部移行されたAbの量に相当した。ΔMFIを図11Aおよび11Bならびに表12に示した。10μg/mlのAbの内部移行パーセンテージは、次:100*(4℃でのMFI-37℃でのMFI)/4℃でのMFIのように算出され、表11に示された。各キメラ抗体に関して計算されたΔMFIの最大値(図11Aおよび11B)は、群と内部移行の最大値の間の相関を示さなかった。
抗体の内部移行をさらに確認するため、細胞輸送後の抗体の細胞下分布を評価するために共焦点顕微鏡観察を行った。細胞を抗hIGF-1R Ab 37℃とともにインキュベートし、固定し、透過処理を施した。従って、細胞を、二次抗体Alexa-488をウサギ抗lLamp-1抗体(二次抗ウサギIgG Alexa 555を用いて可視化した)を用いて染色した。37℃でのインキュベーション前に、マウス208F2 AbはMCF-7細胞の膜上に局在し(図14A)、ImageJソフトウエアの共局在ハイライタープラグインを用いてリソソームマーカーlamp-1との共局在は見られなかった。細胞表面結合抗体は、15分のインキュベーション後に劇的に減少した。細胞表面結合抗体の減少と同時に、細胞内抗体が小胞に検出された。lamp-1との共局在はまれにしか見られなかった。30分のインキュベーション後に、細胞表面結合抗体はほとんど検出されなかった。しかしながら、リソソームでのAbの共局在は増加した。1時間のインキュベーション後には、細胞内Ab染色ならびにlamp-1との共局在数は低下した。細胞表面結合抗体のこの動態およびその細胞内蓄積は、FACSによる抗体表面減衰尺度の動態と相関していた。加えて、FACS試験ですでに記載したように、マウスAbの分解は、共焦点顕微鏡によれば、1時間のインキュベーション後に始まった。
抗体がリソソームに到達してそこで分解されることを確認するために、細胞をリソソーム機能の強力な阻害剤であるバフィロマイシンA1で処理したか、または非処理とした。
次に、細胞を4℃で10μg/mlの供試Abとともにインキュベートし、洗浄し、37℃で2時間インキュベートした。内部移行したAbは細胞透過処理後に二次抗マウスIgG-Alexa 488 Abを用いて検出された。バフィロマイシンA1の添加は細胞内Abの分解を防ぎ(図15)、このことはAbが効果的に内部移行され、リソソームで分解されたことを示す。
抗体はそれらの内部移行能に基づいて選択され、リソソームコンパートメントに入る前に初期エンドソームと共局在することが上記で示されたので、対象とするアプローチは、Ab-hIGF-1R結合の安定性がpH環境によって調節された抗体、優先的には、pH環境が酸性となった場合にIGF-1Rから優先的に解離される抗体を選択することからなった。実際に、初期エンドソームとリソソームの間の主要な違いはそれらの管腔pHであり、エンドソームコンパートメントではpHはおよそ6であり、リソソームコンパートメントではpHは約4.5である。
12.1 第1のヒト化型hz208F2 VH3/VL3(hz208F2 H026/L024とも呼称)の結合および内部移行の評価
c208F2 mAbの第1のヒト化型の結合をMCF-7、COS-7およびNIH
3T3 IR+細胞株で評価した。漸増濃度のm208F2、c208F2またはhz208F2 VH3VL3を各細胞株に4℃で20分間加えた。次に、細胞を洗浄し、供試mAbの結合を、対応する二次抗体を用いて可視化した。トランスフェクト細胞株上でのヒトIRの発現を確認するために、市販の抗hIR抗体クローンGRO5を用い、その認識特性を例示した(図19D)。
mAb 208F2をヒト化し、16のヒト化変異体(12.1に記載の第1の型と含む)の結合特性を評価した。ヒト化変異体の結合特性は、FACS分析により、ヒトMCF-7乳腺癌細胞株およびサル細胞株Cos-7にて、漸増抗体濃度を用いて評価した。
この目的で、細胞(1×106細胞/ml)を4℃で20分間、FACSバッファー(PBS、0.1%BSA、0.01%NaN3)中で、抗IGF-1Rヒト化抗体とともにインキュベートした。次に、これらの細胞を3回洗浄し、暗所、4℃にてさらに20分間、Alexa 488とカップリングした適当な二次抗体とともにインキュベートした後、FACSバッファー中で3回洗浄した。すぐに生細胞に抗IGF-1R抗体の結合がなされ、これを、ヨウ化プロピジウム(死細胞を染色する)を用いて確認した。モル濃度(M)で表される結合のEC50は、非直線回帰分析(GraphPad Prims 4.0)を用いて算出した。
MCF-7細胞を、4℃にて20分間、10μg/mlのヒト化抗体とともにインキュベートした。次に、細胞を洗浄し、4℃または37℃で4時間インキュベートした。細胞表面結合抗体の量を、FacsCaliburフローサイトメーター(Becton Dickinson)にて二次抗体を用いて決定した。4時間のインキュベーション時間後に4℃で測定されたMFIと37℃で測定されたMFIの間の差異として定義されるΔMFIは、内部移行されたAbの量に相当した。ΔMFIを表14cに示した。10μg/mlのAbにおける内部移行のパーセンテージは、次:100*(4℃でのMFI-37℃でのMFI)/4℃でのMFI。のように算出されたヒト化抗体hz208F2 H077/L018は、IGF-1Rの有意な内部移行を誘導することができる。
IHC試験を免疫複合体アプローチのための標的としてのhIGF-1Rをバリデートするために設定した。実際に、このようなアプローチに有用な標的は、正常細胞に比べて腫瘍細胞での有意な過剰発現を要する。免疫複合体アプローチのために適当な標的の別の特性は、多くの適応症において、有意なパーセンテージの患者集団でその過剰発現が優勢なことである。
染色分析に関しては、スライドを、Roche VentanaからのHTスキャナーを用いてスキャンし、IGF-1R染色を、Virtuosoソフトウエア(Roche Ventana)を用いて定量した。組織分析に関しては、アルゴリズムの統計精度を高めるために、腫瘍当たり4視野(FOV)で、可能であれば50を越える細胞を用いてスコアを取った。組織を、HER2膜アルゴリズムに従い、+++(3+とも記載される)、++~+++(2+~3+または++/+++とも記載される)、++(2+とも記載される)、+(1+とも記載される)とスコア化した。スコアはCAP/ASCO試験ガイドラインに従って、弱いもしくは不完全な膜染色またはサンプル中の10%未満の細胞における弱い、完全な膜染色を(+)と定義した。(++)のスコアは、不均一もしくは弱いが少なくとも10%の細胞における明確な周辺分布を伴う完全な膜染色、または30%以下の腫瘍細胞における強い完全な膜染色とされた。(+++)のスコアは、30%を越える(more that)浸潤性腫瘍細胞の均一な強い膜染色に相当する。腫瘍が(++)~(+++)のスコアを有した場合、それは分析された腫瘍組織の不均一性を表し、(-)はhIGF-1Rの発現が検出されなかったことを意味し、(c)は染色がもっぱら細胞質であることを意味する。細胞質染色は膜染色の不在を特徴とし、単離細胞となる。
AおよびB)。
スコア2+または3+を示す3スライドの腫瘍異種移植組織(それぞれMCF-7およびNCI-H23、NCI-H82)からなった。この後者の対照は、発現を較正するために各染色実施しに加える。
強い膜染色がこれら4つの対照で見られた。第1ヒト正常組織パネルにおいて(図22A)、1+を越えないIGF-1Rの若干の膜検出が消化管(食道、小腸、結腸および直腸)で見られた。他の総ての分析組織について、IGF-1Rの膜発現が見られた。第2の正常ヒト組織パネルでは(図22B)、1+を越えないIGF-1Rの若干の膜検出が腎臓構造に見られた。強い膜性染色(++)が上皮および尿路上皮に見られた。これらの両組織意外には、強い膜染色は見られなかった。この発現パターンは、hIGF-1RがADCまたはATCアプローチのための良好な標的であり得ることを強く示唆した。
組換え可溶性ヒト-IGF-1Rに対する抗体の結合の解離定数(KD)は、解離速度(koff)と会合速度(kon)の間の比により定義した。動態試験は、Biacore X100装置にて、マウス抗Tag Hisモノクローナル抗体により活性化したCM5センサーチップを用いて行った。12000RU前後の抗体を、アミンキット化学を用いてカルボキシメチルデキストランマトリックスに化学的にグラフトする。
c208F2抗体試験での可溶型のキメラh/m IGF-1R組換えタンパク質の結合は、Biacore X100装置にて、マウス抗ヒトIgG Fc モノクローナル抗体により活性化したCM5センサーチップを用いて実施した。10,500RUを越える抗Fc抗体を、アミンキット化学を用いて、両フローセルのカルボキシメチルデキストラン(carboxymethyldextan)に化学的にグラフトする。
1- 10μg/ml濃度のc208F2の溶液を第2のフローセルに60秒間注入した。
2- 供試したIGF-1R構築物は、ランニングバッファーで10倍希釈した培養培地の濃縮上清に相当する。1つの構築物を各サイクルにおいて120秒の遅延で120秒間注入した。
3- 両フローセルを10mMグリシン、HCl pH1.7バッファーの30秒の注入により再生した。
結晶学的データは、両残基がFnR3ドメインにおいて受容体表面に露出していることを示す。
Claims (15)
- 配列番号52のヒトインスリン様成長因子1受容体(IGF-1R)と結合し、かつ、そのIGF-1Rとの結合の後に内部移行され、かつ、配列番号82および/または配列番号92のIGF-1Rと結合しない、内部移行モノクローナル抗体、またはその内部移行IGF-1R結合フラグメントであって、
前記抗体が、
a)それぞれ、配列番号7、2および3の配列の3つの重鎖CDRである、CDR-H1、CDR-H2およびCDR-H3と、
それぞれ、配列番号10、5および11の配列の3つの軽鎖CDRであるCDR-L1、CDR-L2およびCDR-L3を含む、抗体;
b)それぞれ、配列番号7、2および3の配列の3つの重鎖CDRである、CDR-H1、CDR-H2およびCDR-H3と、
それぞれ、配列番号9、5および12の配列の3つの軽鎖CDRである、CDR-L1、CDR-L2およびCDR-L3を含む、抗体;
c)それぞれ、配列番号8、2および3の配列の3つの重鎖CDRである、CDR-H1、CDR-H2およびCDR-H3と、
それぞれ、配列番号9、5および11の配列の3つの軽鎖CDRである、CDR-L1、CDR-L2およびCDR-L3を含む、抗体、からなる群から選択され、
CDRは、IMGTによって定義される、内部移行モノクローナル抗体、またはその内部移行IGF-1R結合フラグメント。 - 前記内部移行抗体のエピトープが配列番号52の494番のヒスチジン残基および/または配列番号52の491番のアスパラギン酸残基を含んでなる、請求項1に記載の内部移行モノクローナル抗体、またはその内部移行IGF-1R結合フラグメント。
- 前記エピトープが少なくとも8アミノ酸のアミノ酸配列を含んでなる、請求項2に記載の内部移行モノクローナル抗体、またはその内部移行IGF-1R結合フラグメント。
- そのIGF-1Rとの結合の後の内部移行のパーセンテージが少なくとも40%である、請求項1~3のいずれか一項に記載の内部移行モノクローナル抗体、またはその内部移行IGF-1R結合フラグメント。
- キメラ抗体である、請求項1~4のいずれか一項に記載の内部移行モノクローナル抗体。
- 前記抗体が、
a)配列番号14の配列の重鎖可変ドメインと
配列番号19の配列の軽鎖可変ドメインとを含んでなる抗体;
b)配列番号15の配列の重鎖可変ドメインと
配列番号20の配列の軽鎖可変ドメインとを含んでなる抗体;
c)配列番号16の配列の重鎖可変ドメインと
配列番号21の配列の軽鎖可変ドメインとを含んでなる抗体;
d)配列番号17の配列の重鎖可変ドメインと
配列番号22の配列の軽鎖可変ドメインとを含んでなる抗体、から選択される、
請求項5に記載の内部移行モノクローナル抗体。 - 前記抗体が、
a)配列番号24の配列の重鎖と
配列番号29の配列の軽鎖を含んでなる、またはからなる抗体;
b)配列番号25の配列の重鎖と
配列番号30の配列の軽鎖を含んでなる、またはからなる抗体;
c)配列番号26の配列の重鎖と
配列番号31の配列の軽鎖を含んでなる、またはからなる抗体;
d)配列番号27の配列の重鎖と
配列番号32の配列の軽鎖を含んでなる、またはからなる抗体、から選択される、
請求項5または6に記載の内部移行モノクローナル抗体。 - ヒト化抗体である、請求項1~4のいずれか一項に記載の内部移行モノクローナル抗体。
- それぞれ、2013年6月26日、2013年6月26日、2013年6月26日、2013年4月24日に、CNCM、パスツール研究所、フランスに寄託されたハイブリドーマI-4773、I-4774、I-4775、およびI-4736からなる群から選択されたハイブリドーマにより産生された、請求項1~8のいずれか一項に記載の内部移行抗体。
- それぞれ、2013年6月26日、2013年6月26日、2013年6月26日、2013年4月24日に、CNCM、パスツール研究所、フランスに寄託されたハイブリドーマI-4773、I-4774、I-4775、およびI-4736からなる群から選択されたマウスハイブリドーマ。
- IGF-1R発現癌の処置において薬剤として使用するための、宿主標的部位に細胞傷害性薬剤を送達し、前記宿主標的部位がタンパク質IGF-1R細胞外ドメイン、好ましくは、ヒトタンパク質IGF-1R細胞外ドメイン(配列番号51)であり、より好ましくは、ヒトタンパク質IGF-1R細胞外ドメインN末端(配列番号52)であり、またはその任意の天然変異体配列に局在するエピトープからなる、請求項1~9のいずれか一項に記載の内部移行モノクローナル抗体、またはその内部移行抗原結合フラグメント。
- 細胞傷害性薬剤とコンジュゲートされた請求項1~9のいずれか一項に記載の内部移行モノクローナル抗体、またはその内部移行抗原結合フラグメントを含んでなる、抗体-薬物複合体。
- 請求項12に記載の抗体-薬物複合体と、少なくとも賦形剤および/または薬学上許容可能なビヒクルとを含んでなる、医薬組成物。
- IGF-1R発現癌の処置において薬剤として使用するための、請求項13に記載の医薬組成物。
- 対象のIGF-1R発現癌細胞に薬物または薬剤を送達するために、薬剤として使用するための、請求項13に記載の医薬組成物。
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Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2008079849A2 (en) | 2006-12-22 | 2008-07-03 | Genentech, Inc. | Antibodies to insulin-like growth factor receptor |
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Family Cites Families (20)
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US4970198A (en) | 1985-10-17 | 1990-11-13 | American Cyanamid Company | Antitumor antibiotics (LL-E33288 complex) |
US5079233A (en) | 1987-01-30 | 1992-01-07 | American Cyanamid Company | N-acyl derivatives of the LL-E33288 antitumor antibiotics, composition and methods for using the same |
US5606040A (en) | 1987-10-30 | 1997-02-25 | American Cyanamid Company | Antitumor and antibacterial substituted disulfide derivatives prepared from compounds possessing a methyl-trithio group |
US5530101A (en) | 1988-12-28 | 1996-06-25 | Protein Design Labs, Inc. | Humanized immunoglobulins |
IL162181A (en) | 1988-12-28 | 2006-04-10 | Pdl Biopharma Inc | A method of producing humanized immunoglubulin, and polynucleotides encoding the same |
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BIOSCIENCE TRENDS,2009年08月,VOL:3, NR:4,PAGE(S):131 - 138 |
CANCER LETTERS,2013年02月10日,VOL:335, NR:1,PAGE(S):153 - 159,http://dx.doi.org/10.1016/j.canlet.2013.02.009 |
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