JP7169267B2 - 重症筋無力症を診断および治療するためのペプチドおよびその使用 - Google Patents
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Description
本出願は、2016年9月8日に出願された米国特許仮出願第62/384,896号に対する優先権を主張し、その開示は、参照によってその全体が全ての目的のために本明細書に組み入れられる。
重症筋無力症(MG)は、アセチルコリン受容体(AChR)への抗体媒介性の攻撃が原因の、シナプス後膜折りたたみ構造の破壊と神経筋接合部におけるAChR密度の減少とをもたらす慢性の神経筋自己免疫疾患である。AChRの喪失は、全身の筋脱力をもたらし、しばしば四肢においてもたらす。他の症状は、眼瞼下垂(垂れ下がった眼瞼)および複視(物が二重に見える)を含む。MGは、呼吸を制御する筋肉が侵されたときに致命的となり得る。MGは、5000万~2億人が罹患すると推定されており、毎年新たに300~3000万人が診断されている。
一局面において、本発明は、アミノ酸配列
と、SEQ ID NO:1に示されるアミノ酸配列に対する、X1、X2、X3、およびX4からなる群より選択される2つまたはそれ以上の位置におけるアミノ酸修飾とを含む、単離されたペプチドであって、X1、X2、X3、およびX4が、独立して選択されたアミノ酸であり、かつ、Z1およびZ2が、独立して選択されたアミノ酸を含む個別の長さのリンカー配列である、単離されたペプチドを提供する。
アミノ酸配列
と、
SEQ ID NO:1に示されるアミノ酸配列に対する、X 1 、X 2 、X 3 、およびX 4 からなる群より選択される2つまたはそれ以上の位置におけるアミノ酸修飾と
を含む、単離されたペプチドであって、X 1 、X 2 、X 3 、およびX 4 が、独立して選択されたアミノ酸であり、かつ、Z 1 およびZ 2 が、独立して選択されたアミノ酸を含む個別の長さのリンカー配列である、該単離されたペプチド。
[本発明1002]
SEQ ID NO:1に示されるアミノ酸配列に対する前記アミノ酸修飾がX 1 およびX 2 に存在する、本発明1001のペプチド。
[本発明1003]
X 1 がNであり、X 2 がAであり、Z 1 の長さが4個であり、かつ、Z 2 の長さが2個である(SEQ ID NO:2)、本発明1002のペプチド。
[本発明1004]
SEQ ID NO:1に示されるアミノ酸配列に対する前記アミノ酸修飾がX 1 およびX 3 に存在する、本発明1001のペプチド。
[本発明1005]
X 1 がNであり、X 3 がIであり、Z 1 の長さが4個であり、かつ、Z 2 の長さが2個である(SEQ ID NO:3)、本発明1004のペプチド。
[本発明1006]
SEQ ID NO:1に示されるアミノ酸配列に対する前記アミノ酸修飾がX 1 およびX 4 に存在する、本発明1001のペプチド。
[本発明1007]
X 1 がNであり、X 4 がDであり、Z 1 の長さが4個であり、かつ、Z 2 の長さが2個である(SEQ ID NO:4)、本発明1006のペプチド。
[本発明1008]
SEQ ID NO:1に示されるアミノ酸配列に対する前記アミノ酸修飾がX 3 およびX 4 に存在する、本発明1001のペプチド。
[本発明1009]
前記アミノ酸配列がSEQ ID NO:5ではない、本発明1008のペプチド。
[本発明1010]
SEQ ID NO:1に示されるアミノ酸配列に対する前記アミノ酸修飾がX 1 、X 3 、およびX 4 に存在する、本発明1001のペプチド。
[本発明1011]
X 1 がNであり、X 3 がIであり、X 4 がDであり、Z 1 の長さが4個であり、かつ、Z 2 の長さが2個である(SEQ ID NO:6)、本発明1010のペプチド。
[本発明1012]
SEQ ID NO:1に示されるアミノ酸配列に対する前記アミノ酸修飾がX 1 、X 2 、X 3 、およびX 4 に存在する、本発明1001のペプチド。
[本発明1013]
X 1 がNであり、X 2 がAであり、X 3 がIであり、X 4 がDであり、Z 1 の長さが4個であり、かつ、Z 2 の長さが2個である(SEQ ID NO:7)、本発明1012のペプチド。
[本発明1014]
アセチルコリン受容体(AChR)の主要免疫原性領域(MIR)に結合する抗体に結合する、本発明1001のペプチド。
[本発明1015]
インテイン-キチン結合ドメインタグをさらに含む、本発明1001のペプチド。
[本発明1016]
ヘキサヒスチジンタグをさらに含む、本発明1001のペプチド。
[本発明1017]
前記ペプチドにコンジュゲートされている抗体重鎖断片をさらに含む、本発明1001のペプチド。
[本発明1018]
前記抗体がヒト免疫グロブリンGである、本発明1017のペプチド。
[本発明1019]
前記重鎖断片のヒンジ領域が、前記ペプチドのC末端にコンジュゲートされている、本発明1017のペプチド。
[本発明1020]
本発明1001のペプチドまたは複数の該ペプチドを含む、組成物。
[本発明1021]
薬学的に許容される担体をさらに含む、本発明1020の組成物。
[本発明1022]
前記複数のペプチドが、少なくとも2、3、4、または5つの異なるペプチドを含む、本発明1020の組成物。
[本発明1023]
本発明1001のペプチドまたは複数の該ペプチドと固体支持体とを含む、キット。
[本発明1024]
前記固体支持体が、マルチウェルプレート、ELISAプレート、マイクロアレイ、チップ、ビーズ、多孔質ストリップ、またはニトロセルロースフィルターである、本発明1023のキット。
[本発明1025]
前記ビーズがキチンを含む、本発明1024のキット。
[本発明1026]
前記ペプチドまたは複数の該ペプチドが、前記固体支持体上に固定化されている、本発明1023のキット。
[本発明1027]
前記複数のペプチドが、アセチルコリン受容体(AChR)の主要免疫原性領域(MIR)に結合する同じ抗体または異なる抗体に結合する、本発明1023のキット。
[本発明1028]
使用説明書をさらに含む、本発明1023のキット。
[本発明1029]
本発明1001の単離されたペプチドをコードする、単離された核酸。
[本発明1030]
対象由来の生体試料中において、本発明1001のペプチドまたは複数の該ペプチドに結合する抗体の有無を検出する段階であって、該ペプチドまたは複数の該ペプチドに結合する抗体の存在によって、重症筋無力症(MG)の存在またはその重症度の増大が示される、該段階
を含む、該対象におけるMGを検出するためのまたはその重症度を判定するための方法。
[本発明1031]
前記抗体が、アセチルコリン受容体(AChR)の主要免疫原性領域(MIR)に結合する、本発明1030の方法。
[本発明1032]
前記ペプチドまたは複数の該ペプチドが、SEQ ID NO:2、3、4、6、および7からなる群より選択される、本発明1030の方法。
[本発明1033]
前記対象から前記試料を得る段階をさらに含む、本発明1030の方法。
[本発明1034]
前記試料が全血、血清、または血漿である、本発明1030の方法。
[本発明1035]
前記ペプチドまたは複数の該ペプチドが固体支持体に結合されている、本発明1030の方法。
[本発明1036]
前記固体支持体が、マルチウェルプレート、ELISAプレート、マイクロアレイ、チップ、ビーズ、多孔質ストリップ、またはニトロセルロースフィルターである、本発明1035の方法。
[本発明1037]
前記ビーズがキチンを含む、本発明1036の方法。
[本発明1038]
前記抗体が、ウェスタンブロット、ドットブロット、ELISA、ラジオイムノアッセイ法、免疫沈降、電気化学発光、免疫蛍光、FACS解析、またはマルチプレックスビーズアッセイ法によって検出される、本発明1030の方法。
[本発明1039]
前記試料を対照と比較する、本発明1030の方法。
[本発明1040]
前記対照が、MGを有していない対象から得られる、本発明1039の方法。
[本発明1041]
前記対照が、MGの症状を発症する前またはMGに対する治療を受けた後の前記対象から得られる、本発明1039の方法。
[本発明1042]
本発明1001のペプチドまたは複数の該ペプチドの治療有効量を対象に投与する段階であって、該ペプチドまたは複数の該ペプチドが、該対象において循環している抗体に結合して中和複合体を形成し、それによって重症筋無力症(MG)を予防または治療する、該段階
を含む、該対象におけるMGを予防または治療するための方法。
[本発明1043]
前記循環している抗体が、アセチルコリン受容体(AChR)の主要免疫原性領域(MIR)に結合する、本発明1042の方法。
[本発明1044]
前記ペプチドまたは複数の該ペプチドが、SEQ ID NO:2、3、4、6、および7からなる群より選択される、本発明1042の方法。
[本発明1045]
前記ペプチドまたは複数の該ペプチドが、AChRのMIRに結合する抗体を産生するメモリーB細胞を不活化するかまたはその数を低減させる、本発明1042の方法。
[本発明1046]
前記対象がMGの症状を示している、本発明1042の方法。
[本発明1047]
前記対象を治療することがMGの症状の減少をもたらす、本発明1046の方法。
[本発明1048]
前記対象から中和複合体を除去する段階をさらに含む、本発明1042の方法。
[本発明1049]
前記中和複合体が、親和性血漿フェレーシスによって除去される、本発明1048の方法。
[本発明1050]
前記ペプチドまたは複数の該ペプチドが、静脈内に、筋肉内に、またはそれらの組み合わせで投与される、本発明1042の方法。
本発明の他の目的、特徴、および利点は、以下の詳細な説明および図面から当業者に明らかとなろう。
I. 序論
ニコチン性アセチルコリン受容体(AChR)は、神経筋接合部のシナプス後膜襞の稜に高密度で発現される。AChRは、アセチルコリンに結合する細胞外ドメイン(ECD)を有する290 kDaの膜内在性タンパク質である。重症筋無力症(MG)は、神経筋接合部(NMJ)のタンパク質成分に指向される病原性抗体のB細胞指向型でT細胞調節性の産生によって発症する自己免疫疾患である。多くの場合、抗体の標的は、AChRである。抗AChR抗体のAChRへの結合は、シナプス後膜折りたたみ構造の免疫系破壊および同時に起こる受容体密度の喪失を開始する。
他に具体的な指示のない限り、本明細書において使用される全ての技術用語および科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者によって一般に理解されるものと同じ意味を有する。加えて、本明細書に記載の方法または材料と類似または等価な任意の方法または材料を本発明の実施において使用することができる。本発明の意図に関して、以下の用語が定義される。
(1)アラニン(A)、グリシン(G);
(2)アスパラギン酸(D)、グルタミン酸(E);
(3)アスパラギン(N)、グルタミン(Q);
(4)アルギニン(R)、リシン(K);
(5)イソロイシン(I)、ロイシン(L)、メチオニン(M)、バリン(V);
(6)フェニルアラニン(F)、チロシン(Y)、トリプトファン(W);
(7)セリン(S)、トレオニン(T);および
(8)システイン(C)、メチオニン(M)
(例えば、Creighton, Proteins, 1993を参照のこと)。
A. 単離されたペプチド
一局面において、本発明は、アミノ酸配列
を含む単離されたペプチドを提供する。いくつかの態様において、ペプチドは、SEQ ID NO:1に示されるアミノ酸配列に対する、X1、X2、X3、およびX4からなる群より選択される2つまたはそれ以上の位置におけるアミノ酸修飾をさらに含み、ここで、X1、X2、X3、およびX4は、独立して選択されたアミノ酸であり、かつ、Z1およびZ2は、独立して選択されたアミノ酸を含む個別の長さのリンカー配列である。例えば、アミノ酸修飾は、SEQ ID NO:1に示されるアミノ酸配列に関して、X1およびX2、X1およびX3、X1およびX4、X2およびX3、X2およびX4、X3およびX4、X1、X2、およびX3、X1、X2、およびX4、X1、X3、およびX4、X2、X3、およびX4、またはX1、X2、X3、およびX4において行うことができる。
別の局面において、本発明は、本明細書に記載の単離されたペプチドをコードする単離された核酸を提供する。いくつかの態様において、核酸は、SEQ ID NO:1、2、3、4、6、7、23、24、25、26、27、および30に示されるアミノ酸配列のいずれか1つに対して、少なくとも約80%の配列同一性(例えば、少なくとも約80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、または99%の配列同一性)を有するペプチドをコードする。いくつかの態様において、核酸は、SEQ ID NO:1、2、3、4、6、7、23、24、25、26、27、および30に示されるアミノ酸配列のいずれか1つに対して、少なくとも約90%の配列同一性(例えば、少なくとも約90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、または99%の配列同一性)を有するペプチドをコードする。いくつかの態様において、核酸は、SEQ ID NO:23、24、25、26、27、および30に示されるアミノ酸配列のいずれか1つに対して、少なくとも約95%の配列同一性(例えば、少なくとも約95%、96%、97%、98%、または99%の配列同一性)を有するペプチドをコードする。特定の態様において、リンカー配列(例えば、Z1リンカー配列、例えばGGGSおよび/またはZ2リンカー配列、例えばGS)は、配列同一性パーセントを決定するときに考慮されない。いくつかの場合には、核酸によってコードされるペプチドのアミノ酸配列は、SEQ ID NO:5ではない。他の場合には、核酸によってコードされるペプチドのアミノ酸配列は、SEQ ID NO:29ではない。
別の局面において、本発明は、本発明のペプチドまたは複数の該ペプチドを含む組成物を提供する。いくつかの態様において、組成物は、本明細書に記載の単離されたペプチドのいずれか1つを含む。他の態様において、組成物は、本明細書に提供されるペプチドのいずれかの2つまたはそれ以上を含む。例えば、組成物は、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10個、またはそれ以上の異なるペプチドを含んでよい。非限定例として、組成物は、SEQ ID NO:2、3、4、6、7、23、24、25、26、27に示されるアミノ酸配列を含むペプチド、またはそれらの組み合わせを含んでよい。いくつかの態様において、組成物は、本発明のペプチドをコードする1つまたは複数の核酸を含む。
別の局面において、本発明は、本発明のペプチドまたは複数の該ペプチドと固体支持体とを含むキットを提供する。キットは、対象における重症筋無力症を検出するためにまたはその重症度を判定するために有用である。キットはまた、対象における重症筋無力症を予防または治療するためにも有用である。
他の局面において、本発明は、対象における重症筋無力症(MG)を検出するためのまたはその重症度を判定するための方法を提供し、該方法は、対象由来の生体試料中において、本発明のペプチドまたは複数の該ペプチドに結合する抗体の有無を検出する段階であって、ペプチドまたは複数の該ペプチドに結合する抗体の存在によって、MGの存在またはその重症度の増大が示される、段階を含む。いくつかの態様において、複数のペプチドは、2個またはそれ以上(例えば、2、3、4、5、6、7、8、9、10個、またはそれ以上の)異なるペプチドを含む。いくつかの場合には、複数のペプチドは、SEQ ID NO: 2、3、4、6、7、23、24、25、26、27に示されるアミノ酸配列、またはそれらの組み合わせを含む。
別の局面において、本発明は、対象における重症筋無力症(MG)を予防または治療するための方法を提供し、該方法は、本発明のペプチドまたは複数の該ペプチドの治療有効量を対象に投与する段階であって、ペプチドまたは複数の該ペプチドが、対象において循環している抗体に結合して中和複合体を形成し、それによってMGを予防または治療する、段階を含む。特定の態様において、循環している抗体は、アセチルコリン受容体(AChR)の主要免疫原性領域(MIR)に結合する。いくつかの場合には、AChRは、ニコチン性AChRである。特定の場合には、ペプチドまたは複数の該ペプチドは、抗体結合部位に結合してそれをブロックする。
本発明は、具体的な実施例によってより詳細に記載される。以下の実施例は、例証の目的のためだけに提供され、決して本発明を限定することを意図していない。当業者は、本質的に同じ結果をもたらすように変更または改変することができる種々の重要でないパラメーターを容易に認識するだろう。
この実施例は、ニコチン性アセチルコリン受容体(AChR)の主要免疫原性領域(MIR)に対する抗体に結合するペプチドの作製を説明し、かつ、該ペプチドの一部が、ヒト重症筋無力症(MG)患者から得られる血清試料中の病原性抗MIR抗体に結合することができることを示す。
ニコチン性アセチルコリン受容体(AChR)の主要免疫原性領域(MIR)は、自己免疫重症筋無力症(MG)を有する患者における多くの病原性抗体(Ab)の標的である。この疾患は、シナプス後膜折りたたみ構造の破壊および同時に起こるAChR密度の喪失をもたらす(1、2)。シビレエイAChR(TAChR)の2D結晶アレイに結合したモノクローナルAb(mAb)35の単鎖Fvおよび/またはFab断片の電子顕微鏡写真は、MIRが2つのAChRαサブユニットの各々の細胞外領域の上部に存在することを明らかにしている(3)。このMIRは、シビレエイおよび/またはデンキウナギの電気器官AChRに対してラットで産生されたmAbの重複エピトープの一群からなる(4~6)。これらのmAbの多くは、ヒトを含む多くの異なる種のAChRと交差反応する(7、8)。抗TAChR mAbであるmAb 132Aの結合は、古典的な抗MIR指向mAbであるmAb 35によって競合的に阻害される(9)。シビレエイまたはデンキウナギの電気器官AChRに対して産生されたmAbの大部分がこの領域に指向され、互いの結合を相互に阻害するという理由で、MIRは、大きな関心をかき立てた(10、11)。加えて、これらのmAbのいくつかは、静脈内注射によって筋無力症症状をナイーブなラットに受動的に伝達させる際に特に有効であると考えられる。その領域はまた、折りたたまれ組み立てられたAChR中に存在しているという問題を提示するが、ウェスタンブロットにおいて特定のAChRサブユニットに結合するmAbによって検出されることはほとんどない。しかしながら、mAb 132Aは、ウェスタンブロットにおいてTAChRαサブユニットに結合し、その結果として、TAChRαサブユニットの3つの不連続セグメント:α(1~12)、α(65~79)、およびα(110~115)へのそのエピトープのマッピングにかなり有用であることが証明された(9)。TAChRのアンウィンの4Å 3Dモデルでのこれらのセグメントの位置決めは(12)、それらが互いに近接していることを示す(図1)。α(1~12)は、N末端のα-ヘリックスの一部であり、そして、それは、MIRの核セグメント(13)であるα(65~79)の隣に位置する。α(65~79)は、2つのコイル/β-ストランド脚部α(65~68)とα(75~79)との間に位置する、短いヘリックスα(69~74)からなる。α(65~79)は、β-ターンであるα(110~115)を覆っている(12)。α(1~12)およびα(65~79)は、エピトープ認識として機能すると考えられるが、一方で、α(110~115)は、α(1~12)/α(65~79)複合体を安定化させる構造アンカーとしての役割を果たすと考えられる(9)。
1. ヒト39MIRペプチド模倣体はmAb 198によって認識されるがmAb 35および132Aによっては認識されない
シビレエイ(SEQ ID NO:9)およびヒト(SEQ ID NO:8)39MIRは、それらのそれぞれのαサブユニットのα(1~12)、α(65~79)、およびα(110~115)セグメントをGSリンカーで連結することによって製造した。これらの2つのMIR模倣体を、キチンビーズ上でのペプチド回収を可能にするIChBDタグを有する融合タンパク質として、大腸菌において発現させた。これらの2つのペプチドは、互いに8つのアミノ酸だけ異なる(図2)。両方の模倣体をmAb 198で調べた。ヒト筋肉AChRで免疫化されたラットに由来したmAb 198は、哺乳動物ならびにシビレエイのMIRに結合するMIR指向mAbである(13,21)。それはまた、EAMGをラットに受動的に伝達させることができ、ウェスタンブロットにおいてネイティブな組み立てられたAChRとα-サブユニット断片の両方に結合する(22,23)。mAb 198は、ウェスタンブロットにおいてシビレエイおよびヒトのMIRペプチド模倣体に結合する(図3)。しかしながら、mAb 198は、ヒトMIR模倣体によりも約50倍強くシビレエイ模倣体に結合する(図3)。
シビレエイAChR MIR模倣体とヒトAChR MIR模倣体の間の個々のアミノ酸置換の効果を調査するために、各々アミノ酸がヒト配列からシビレエイ配列へ置換されている8つのペプチドを調製した。シビレエイMIRにおける単一のアミノ酸置換は、N10K(SEQ ID NO:11)、L12F(SEQ ID NO:12)、R66K(SEQ ID NO:13)、A70D(SEQ ID NO:14)、I75V(SEQ ID NO:15)、R79H(SEQ ID NO:16)、D111Q(SEQ ID NO:17)、およびK115H(SEQ ID NO:18)であった。配列アライメントを図4に示す。各々IChBDタグに結合したこれらのペプチドを、大腸菌抽出物由来のキチンビーズ上で回収し、図5に表示するウェスタンブロットでの5つのmAbにおいて染色のために、SDS-PAGEゲル上に流し、ニトロセルロースに転写した。結合に及ぼす効果を表1に示す。
アミノ酸のmAb結合への寄与を同定するためならびに発電器官mAb 132Aおよび35の結合を改善するために、ヒト39MIRペプチドを、類似のシビレエイ配列に対応するアミノ酸置換を4つの位置で誘導するよう点突然変異させて、K10N、D70A、V75I、およびQ111Dペプチド(それぞれ、SEQ ID NO:19、20、21、および22)をもたらした(図6)。ヒト39MIRの単一点突然変異させたペプチドの3つ(K10N(0.01)、V75I(0.03)、およびQ111D(0.06))は、mAb 35結合を回復させたが、シビレエイ39MIRペプチドと比較して非常に低いレベルであった。D70A突然変異させたヒト39MIRは、ヒト39MIRへのmAb 35結合を回復させることができなかった。これらの突然変異体ペプチドはいずれもmAb 132結合を回復させなかった。ヒト39MIRは、元々mAb 198によって認識された。しかしながら、K10N(13×)、V75I(40×)、およびQ111D(35.7×)突然変異は、ヒト39MIRへのその結合と比較してmAb 198結合を大きく改善させた。D70A突然変異体へのmAb 198結合は、ヒト39MIRへの結合と同等であった。まとめると、これらの単一点突然変異は、mAb結合の喪失の原因とならない。全ての突然変異のまたは突然変異のうちのいくつかの組み合わせがmAb結合の喪失の原因となる可能性がより高い。
シビレエイ39MIR、ヒト39MIR、K10N/V75I/Q111D三重突然変異体、およびK10N/D70A/V75I/Q111D四重突然変異体ペプチドのHisタグ化バリアントを発現させ、ヒトMG血清試料中の抗体への結合を調べた。ペプチドを膜上にドットブロットし、本発明者らのヒトMG血清ライブラリー中の抗体への結合を調べた。シビレエイ39MIRおよびヒト39MIRペプチドは、MG血清試料中のいずれの抗体にも結合しなかった。しかしながら、K10N//V75I/Q111DおよびK10N/D70A/V75I/Q111D Hisタグ化ペプチドの両方は、ヒト血清中の抗体に結合した。驚くべきことに、本発明者らの病原性mAbライブラリーへより高い親和性を有していた三重突然変異体(SEQ ID NO:26)は、1つのMG血清試料中の抗体に唯一結合したが、一方で、四重突然変異体ペプチド(SEQ ID NO:27)は、本発明者らのヒトMG血清試料の全てにおいて抗体に結合することができた。Hisタグ化ペプチドはいずれも正常ヒト血清試料中のいずれの抗体にも結合しなかった(図11)。三重突然変異体ペプチド(SEQ ID NO:26)は、mAb 35、mAb 132A、およびmAb 198に全体的に良好に結合したが、四重突然変異体ペプチド(SEQ ID NO:27)は、MG血清中の抗体との結合について良好であった。そのペプチドがMG血清試料中の病原性MIR指向mAbに結合することができることは、これらがMGの治療のための治療的潜在力を有することを示す。
この実施例は、重症筋無力症(MG)の予防または治療に好適な、本発明のペプチドおよび抗体Fcドメインを含む融合タンパク質の設計および作製を示す。
MG患者の血清中の抗アセチルコリン受容体(AChR)抗体(Ab)の70パーセントまたはそれ以上が、AChRの主要免疫原性領域(MIR)に指向される。図12Aに示す通り、シビレエイおよびヒトMIRペプチド(それぞれSEQ. ID NO:8および9)の対を組み合わせて、本発明のペプチド(SEQ ID NO:27)を設計した。このペプチドは、ラット由来の抗MIRモノクローナル抗体(mAb)ならびにMG患者血清中のAbのごく一部に結合する。
キメラシビレエイ-ヒトペプチド(SEQ ID NO:27)を抗体Fcドメインに融合してコンジュゲートを改変した(図12B)。図13中のウェスタンブロットは、シビレエイおよびヒトに基づくペプチド-Fcコンジュゲート(すなわち、抗体Fcドメインに融合されたSEQ ID NO;8および9のペプチドを含むコンジュゲート)が病原性mAb 132Aおよび198に結合しなかったが、一方で、キメラペプチド-Fcコンジュゲート(すなわち、抗体Fcドメインに融合されたSEQ ID NO:27のペプチドを含むコンジュゲート)が両方のmAbを認識してそれに結合したことを示す。このことは、キメラコンジュゲートがMG患者血清中の病原性Abに結合してそれを中和することができることを示す。
本明細書で開示される対象に従って提供される例示的な態様は、特許請求の範囲および以下の態様を含むが、これらに限定されない。
1. アミノ酸配列
と、
SEQ ID NO:1に示されるアミノ酸配列に対する、X1、X2、X3、およびX4からなる群より選択される2つまたはそれ以上の位置におけるアミノ酸修飾と
を含む、単離されたペプチドであって、X1、X2、X3、およびX4が、独立して選択されたアミノ酸であり、かつ、Z1およびZ2が、独立して選択されたアミノ酸を含む個別の長さのリンカー配列である、該単離されたペプチド。
2. SEQ ID NO:1に示されるアミノ酸配列に対する前記アミノ酸修飾がX1およびX2に存在する、態様1のペプチド。
3. X1がNであり、X2がAであり、Z1の長さが4個であり、かつ、Z2の長さが2個である(SEQ ID NO:2)、態様2のペプチド。
4. SEQ ID NO:1に示されるアミノ酸配列に対する前記アミノ酸修飾がX1およびX3に存在する、態様1のペプチド。
5. X1がNであり、X3がIであり、Z1の長さが4個であり、かつ、Z2の長さが2個である(SEQ ID NO:3)、態様4のペプチド。
6. SEQ ID NO:1に示されるアミノ酸配列に対する前記アミノ酸修飾がX1およびX4に存在する、態様1のペプチド。
7. X1がNであり、X4がDであり、Z1の長さが4個であり、かつ、Z2の長さが2個である(SEQ ID NO:4)、態様6のペプチド。
8. SEQ ID NO:1に示されるアミノ酸配列に対する前記アミノ酸修飾がX3およびX4に存在する、態様1のペプチド。
9. 前記アミノ酸配列がSEQ ID NO:5ではない、態様8のペプチド。
10. SEQ ID NO:1に示されるアミノ酸配列に対する前記アミノ酸修飾がX1、X3、およびX4に存在する、態様1のペプチド。
11. X1がNであり、X3がIであり、X4がDであり、Z1の長さが4個であり、かつ、Z2の長さが2個である(SEQ ID NO:6)、態様10のペプチド。
12. SEQ ID NO:1に示されるアミノ酸配列に対する前記アミノ酸修飾がX1、X2、X3、およびX4に存在する、態様1のペプチド。
13. X1がNであり、X2がAであり、X3がIであり、X4がDであり、Z1の長さが4個であり、かつ、Z2の長さが2個である(SEQ ID NO:7)、態様12のペプチド。
14. アセチルコリン受容体(AChR)の主要免疫原性領域(MIR)に結合する抗体に結合する、態様1~13のいずれかのペプチド。
15. インテイン-キチン結合ドメインタグをさらに含む、態様1~14のいずれかのペプチド。
16. ヘキサヒスチジンタグをさらに含む、態様1~15のいずれかのペプチド。
17. 前記ペプチドにコンジュゲートされている抗体重鎖断片をさらに含む、態様1~16のいずれかのペプチド。
18. 前記抗体がヒト免疫グロブリンGである、態様17のペプチド。
19. 前記重鎖断片のヒンジ領域が、前記ペプチドのC末端にコンジュゲートされている、態様17または18のペプチド。
20. 態様1~19のいずれかのペプチドまたは複数の該ペプチドを含む、組成物。
21. 薬学的に許容される担体をさらに含む、態様20の組成物。
22. 前記複数のペプチドが、少なくとも2、3、4、または5つの異なるペプチドを含む、態様20または21の組成物。
23. 態様1~19のいずれかのペプチドまたは複数の該ペプチドと固体支持体とを含む、キット。
24. 前記固体支持体が、マルチウェルプレート、ELISAプレート、マイクロアレイ、チップ、ビーズ、多孔質ストリップ、またはニトロセルロースフィルターである、態様23のキット。
25. 前記ビーズがキチンを含む、態様24のキット。
26. 前記ペプチドまたは複数の該ペプチドが、前記固体支持体上に固定化されている、態様23~25のいずれかのキット。
27. 前記複数のペプチドが、アセチルコリン受容体(AChR)の主要免疫原性領域(MIR)に結合する同じ抗体または異なる抗体に結合する、態様23~26のいずれかのキット。
28. 使用説明書をさらに含む、態様23~27のいずれかのキット。
29. 態様1~19のいずれかの単離されたペプチドをコードする、単離された核酸。
30. 対象由来の生体試料中において、態様1~19のいずれかのペプチドまたは複数の該ペプチドに結合する抗体の有無を検出する段階であって、該ペプチドまたは複数の該ペプチドに結合する抗体の存在によって、重症筋無力症(MG)の存在またはその重症度の増大が示される、該段階
を含む、該対象におけるMGを検出するためのまたはその重症度を判定するための方法。
31. 前記抗体が、アセチルコリン受容体(AChR)の主要免疫原性領域(MIR)に結合する、態様30の方法。
32. 前記ペプチドまたは複数の該ペプチドが、SEQ ID NO:2、3、4、6、および7からなる群より選択される、態様30または31の方法。
33. 前記対象から前記試料を得る段階をさらに含む、態様30~32のいずれかの方法。
34. 前記試料が全血、血清、または血漿である、態様30~33のいずれかの方法。
35. 前記ペプチドまたは複数の該ペプチドが固体支持体に結合されている、態様30~34のいずれかの方法。
36. 前記固体支持体が、マルチウェルプレート、ELISAプレート、マイクロアレイ、チップ、ビーズ、多孔質ストリップ、またはニトロセルロースフィルターである、態様35の方法。
37. 前記ビーズがキチンを含む、態様36の方法。
38. 前記抗体が、ウェスタンブロット、ドットブロット、ELISA、ラジオイムノアッセイ法、免疫沈降、電気化学発光、免疫蛍光、FACS解析、またはマルチプレックスビーズアッセイ法によって検出される、態様30~37のいずれかの方法。
39. 前記試料を対照と比較する、態様30~38のいずれかの方法。
40. 前記対照が、MGを有していない対象から得られる、態様39の方法。
41. 前記対照が、MGの症状を発症する前またはMGに対する治療を受けた後の前記対象から得られる、態様39の方法。
42. 態様1~19のいずれかのペプチドまたは複数の該ペプチドの治療有効量を対象に投与する段階であって、該ペプチドまたは複数の該ペプチドが、該対象において循環している抗体に結合して中和複合体を形成し、それによって重症筋無力症(MG)を予防または治療する、該段階
を含む、該対象におけるMGを予防または治療するための方法。
43. 前記循環している抗体が、アセチルコリン受容体(AChR)の主要免疫原性領域(MIR)に結合する、態様42の方法。
44. 前記ペプチドまたは複数の該ペプチドが、SEQ ID NO:2、3、4、6、および7からなる群より選択される、態様42または43の方法。
45. 前記ペプチドまたは複数の該ペプチドが、AChRのMIRに結合する抗体を産生するメモリーB細胞を不活化するかまたはその数を低減させる、態様42~44のいずれかの方法。
46. 前記対象がMGの症状を示している、態様42~45のいずれかの方法。
47. 前記対象を治療することがMGの症状の減少をもたらす、態様46の方法。
48. 前記対象から中和複合体を除去する段階をさらに含む、態様42~47のいずれかの方法。
49. 前記中和複合体が、親和性血漿フェレーシスによって除去される、態様48の方法。
50. 前記ペプチドまたは複数の該ペプチドが、静脈内に、筋肉内に、またはそれらの組み合わせで投与される、態様42~49のいずれかの方法。
Claims (21)
- SEQ ID NO:26またはSEQ ID NO:27の配列を含む、請求項1に記載のペプチド。
- アセチルコリン受容体(AChR)の主要免疫原性領域(MIR)に結合する抗体に結合する、請求項1または2に記載のペプチド。
- (a) インテイン-キチン結合ドメインタグ、または
(b) ヘキサヒスチジンタグ
をさらに含む、請求項1~3のいずれか一項に記載のペプチド。 - 前記ペプチドにコンジュゲートされている抗体重鎖断片をさらに含む、請求項1~4のいずれか一項に記載のペプチドであって、任意で、
(a) 前記抗体重鎖断片がFcドメインを含む;
(b) 前記抗体が、ヒト免疫グロブリンG、免疫グロブリンA、免疫グロブリンD、免疫グロブリンE、免疫グロブリンM、またはそれらの組み合わせである;および/または
(c) 前記重鎖断片のヒンジ領域が、前記ペプチドのC末端にコンジュゲートされている、
前記ペプチド。 - 請求項1~5のいずれか一項に記載のペプチドまたは複数の該ペプチドを含む、組成物。
- 薬学的に許容される担体をさらに含む、請求項6に記載の組成物。
- 請求項1~5のいずれか一項に記載のペプチドまたは複数の該ペプチドと固体支持体とを含む、キット。
- (a) 前記固体支持体が、マルチウェルプレート、ELISAプレート、マイクロアレイ、チップ、ビーズ、多孔質ストリップ、またはニトロセルロースフィルターである、任意で、前記ビーズがキチンを含む、
(b) 前記ペプチドまたは複数の該ペプチドが、前記固体支持体上に固定化されている、
(c) 前記複数のペプチドが、アセチルコリン受容体(AChR)の主要免疫原性領域(MIR)に結合する同じ抗体または異なる抗体に結合する、および/または
(d) 使用説明書をさらに含む、
請求項8に記載のキット。 - 請求項1~5のいずれか一項に記載の単離されたペプチドをコードする、単離された核酸。
- 対象由来の生体試料中において、請求項1~5のいずれか一項に記載のペプチドまたは複数の該ペプチドに結合する抗体の有無を検出するための方法であって、
(a) 該生体試料を該ペプチドまたは複数の該ペプチドと接触させる段階、および
(b) ウェスタンブロット、ドットブロット、ELISA、ラジオイムノアッセイ法、免疫沈降、電気化学発光、免疫蛍光、FACS解析、マルチプレックスビーズアッセイ法、またはそれらの組み合わせを用いて、結合抗体の有無を検出する段階
を含む、前記方法。 - (a) 前記抗体が、アセチルコリン受容体(AChR)の主要免疫原性領域(MIR)に結合する、
(b) 前記対象から前記試料を非外科的に得る段階をさらに含む、
(c) 前記試料が全血、血清、または血漿である、
(d) 前記ペプチドまたは複数の該ペプチドが固体支持体に結合されている、任意で、前記固体支持体が、マルチウェルプレート、ELISAプレート、マイクロアレイ、チップ、ビーズ、多孔質ストリップ、またはニトロセルロースフィルターである、さらに任意で、前記ビーズがキチンを含む、および/または
(e) 前記試料を対照と比較する、任意で、(i) 前記対照が、重症筋無力症(MG)を有していない対象から得られる、または、(ii) 前記対照が、MGの症状を発症する前またはMGに対する治療を受けた後の前記対象から得られる、
請求項11に記載の方法。 - 前記ペプチドが、SEQ ID NO:26またはSEQ ID NO:27の配列を含む、請求項13に記載の融合タンパク質。
- 任意で、
(a) 前記抗体が、ヒト免疫グロブリンG、免疫グロブリンA、免疫グロブリンD、免疫グロブリンE、免疫グロブリンM、またはそれらの組み合わせである;および/または
(b) 前記抗体重鎖断片が、前記ペプチドのC末端にコンジュゲートされている
請求項13または14に記載の融合タンパク質。 - 対象における重症筋無力症(MG)を予防または治療するための方法において使用するための、請求項1~5のいずれか一項に記載のペプチドまたは複数の該ペプチドであって、該方法が、
該ペプチドまたは複数の該ペプチドの治療有効量を対象に投与する段階であって、該ペプチドまたは複数の該ペプチドが、該対象において循環している抗体に結合して中和複合体を形成し、それによって重症筋無力症(MG)を予防または治療する、段階を含む、
前記ペプチドまたは複数の該ペプチド。 - (a) 前記循環している抗体が、アセチルコリン受容体(AChR)の主要免疫原性領域(MIR)に結合する、
(b) 前記ペプチドまたは複数の該ペプチドが、AChRのMIRに結合する抗体を産生するメモリーB細胞を不活化するかまたはその数を低減させる、
(c) 前記対象がMGの症状を示している、任意で、前記対象を治療することがMGの症状の減少をもたらす、
(d) 前記方法が、前記対象から中和複合体を除去する段階をさらに含む、任意で、前記中和複合体が、親和性血漿フェレーシスによって除去される、および/または
(e) 前記ペプチドまたは複数の該ペプチドが、静脈内に、筋肉内に、またはそれらの組み合わせで投与される、
請求項16に記載の使用のためのペプチドまたは複数の該ペプチド。 - 対象における重症筋無力症(MG)を予防または治療するための方法において使用するための、請求項6もしくは7に記載の組成物であって、該方法が、
該組成物の治療有効量を対象に投与する段階であって、該組成物中に含まれるペプチドまたは複数の該ペプチドが、該対象において循環している抗体に結合して中和複合体を形成し、それによって重症筋無力症(MG)を予防または治療する、段階を含む、
前記組成物。 - (a) 前記循環している抗体が、アセチルコリン受容体(AChR)の主要免疫原性領域(MIR)に結合する、
(b) 前記組成物が、AChRのMIRに結合する抗体を産生するメモリーB細胞を不活化するかまたはその数を低減させる、
(c) 前記対象がMGの症状を示している、任意で、前記対象を治療することがMGの症状の減少をもたらす、
(d) 前記方法が、前記対象から中和複合体を除去する段階をさらに含む、任意で、前記中和複合体が、親和性血漿フェレーシスによって除去される、および/または
(e) 前記組成物が、静脈内に、筋肉内に、またはそれらの組み合わせで投与される、
請求項18に記載の使用のための組成物。 - 対象における重症筋無力症(MG)を予防または治療するための方法において使用するための、請求項13~15のいずれか一項に記載の融合タンパク質であって、該方法が、
該融合タンパク質の治療有効量を対象に投与する段階であって、該融合タンパク質が、該対象において循環している抗体に結合して中和複合体を形成し、それによって重症筋無力症(MG)を予防または治療する、段階を含む、
前記融合タンパク質。 - (a) 前記循環している抗体が、アセチルコリン受容体(AChR)の主要免疫原性領域(MIR)に結合する、
(b) 前記融合タンパク質が、AChRのMIRに結合する抗体を産生するメモリーB細胞を不活化するかまたはその数を低減させる、
(c) 前記対象がMGの症状を示している、任意で、前記対象を治療することがMGの症状の減少をもたらす、
(d) 前記方法が、前記対象から中和複合体を除去する段階をさらに含む、任意で、前記中和複合体が、親和性血漿フェレーシスによって除去される、および/または
(e) 前記融合タンパク質が、静脈内に、筋肉内に、またはそれらの組み合わせで投与される、
請求項20に記載の使用のための融合タンパク質。
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Citations (3)
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---|---|---|---|---|
JP2003509045A (ja) | 1999-09-15 | 2003-03-11 | ジヤンセン・フアーマシユーチカ・ナームローゼ・フエンノートシヤツプ | ニコチン性アセチルコリン受容体:アルファ10サブユニット |
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