JP7168196B2 - 腸管バリア機能向上剤 - Google Patents
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Description
エビスグサの種子の破砕物100gに精製水2000mLを加え、95~100℃で2時間抽出した後、濾液を濃縮し、凍結乾燥することでエビスグサ種子熱水抽出物7.0gを得た。
エビスグサの種子の破砕物100gに精製水1400mLとエタノール600mLを加え、常温で5日間抽出した後、濾液を濃縮乾固して、エビスグサ種子30%エタノール抽出物5.1gを得た。
エビスグサの種子の破砕物100gに精製水1000mLとエタノール1000mLを加え、常温で5日間抽出した後、濾液を濃縮乾固して、エビスグサ種子50%エタノール抽出物3.8gを得た。
エビスグサの種子の破砕物100gにエタノール2000mLを加え、常温で7日間抽出した後、濾液を濃縮乾固して、エビスグサ種子エタノール抽出物1.2gを得た。
処方 含有量(%)
1.エビスグサ種子熱水抽出物(製造例1) 0.05
2.ショ糖 50.00
3.コーンスターチ 49.95
[製造方法]成分1~3を、流動層造粒(噴霧液は水)により、顆粒剤を得た。
[用法]1日当り1包(1.5g)を摂取する。
処方 含有量(%)
1.エビスグサ種子熱水抽出物(製造例1) 0.01
2.ビフィズス菌末 10.00
3.乳酸菌末 5.00
4.ミルクオリゴ糖 50.00
5.難消化性デキストリン 33.99
6.プルラン 1.00
[製造方法]成分1~5を、流動槽造粒(噴霧液はプルランを水に溶解させる)により、顆粒剤を得た。
[用法]1日当り1包(1.5g)を摂取する。
処方 含有量(%)
1.エビスグサ種子30%エタノール抽出物(製造例2) 0.1
2.乳酸菌末 2.0
3.ミルクオリゴ糖 30.0
4.コーンスターチ 55.9
5.結晶セルロース 10.0
6.グリセリン脂肪酸エステル 2.0
[製造方法]成分1~5を混合し、10%の水を結合剤として加えて、押出し造粒後、乾燥する。成型した顆粒に成分6を加えて混合し、打錠する。1錠0.5gとする。
[用法]1日当り4錠を摂取する。
処方 含有量(%)
1.エビスグサ種子50%エタノール抽出物(製造例3) 0.01
2.ビフィズス菌末 10.00
3.コーンスターチ 25.00
4.結晶セルロース 64.99
[製造方法]成分1~4を混合し、散剤とする。
[用法]1日当り1包(3g)を摂取する。
処方 含有量(%)
1.エビスグサ種子エタノール抽出物(製造例4) 0.001
2.ミルクオリゴ糖 1.000
3.カラギーナン 2.000
4.ゼラチン 1.000
5.ショ糖 25.000
6.精製水 70.999
[製造方法]成分1~6を混合し、加熱しながら煮詰め、ゼリーの型に流し込み、冷却する。
[用法]1日当り1個(100g)を摂取する。
処方 含有量(%)
1.エビスグサ種子熱水抽出物(製造例1) 0.01
2.マルチトール 5.00
3.クエン酸 1.00
4.香料 0.50
5.精製水 93.49
[製造方法]成分1~4を成分5の一部に攪拌溶解する。成分5の残りを加えて混合し、90℃に加熱して30mLのガラス瓶に充填する。
[用法]1日当り1本(30mL)を摂取する。
腸管上皮細胞Caco-2を1%非必須アミノ酸、10%FBS含有DMEM中で14日間培養した後、エビスグサ種子熱水抽出物(製造例1)を添加した。蛍光免疫染色は、試料添加24時間後に細胞を4%paraformaldehydeで固定し、タイトジャンクション(TJP2、Bioss製)、DAPI(Roche製)で染色を行い、細胞数当たりの蛍光強度を比較した。遺伝子発現解析は、試料添加24時間後に抽出したRNAからcDNA溶液を調製し、SYBR Greenを用いたリアルタイムPCR法で遺伝子発現解析を行った。遺伝子発現は、ムチン(MUC2)、抗菌ペプチド(REG1A)、タイトジャンクション(TJP2)について解析した。その際、GAPDH(Glyceraldehyde-3-Phosphate Dehydrogenase)を内部標準として、目的遺伝子とGAPDHの比率から発現量を算出した。尚、遺伝子発現解析に使用したプライマーは次の通りである。
(配列番号1)CAATACCTGCACCTGCAAGAG
(配列番号2)CCGTCAAAGTCGTAGTACTTCC
REG1A用のプライマーセット
(配列番号3)GTTGATGCAGATCTCTATTGCC
(配列番号4)GACATTGAAGTCATCAGTGCC
TJP2用のプライマーセット
(配列番号5)AAAGCAGAGCGAACGAAGAG
(配列番号6)CGAAGATCTGACTCCCAAGC
GAPDH用のプライマーセット
(配列番号7)TGCACCACCAACTGCTTAGC
(配列番号8)TCTTCTGGGTGGCAGTGATG
腸管上皮細胞Caco-2を12ウェルトランスウェル上に播種し、1%非必須アミノ酸、10%FBS含有DMEM中で14日間培養した後、TNFαとエビスグサ種子熱水抽出物を添加し、72時間後にバリア機能の指標として、経上皮電気抵抗(TER)を測定した。遺伝子発現解析は、TNFαとエビスグサ種子熱水抽出物の添加24時間後に細胞を回収し、試験例1と同様の方法で、タイトジャンクション(TJP2)、炎症性サイトカイン(IL-6)について解析した。尚、遺伝子発現解析に使用したプライマーは次の通りである。
(配列番号5)AAAGCAGAGCGAACGAAGAG
(配列番号6)CGAAGATCTGACTCCCAAGC
IL-6用のプライマーセット
(配列番号9)ATGGCTGAAAAAGATGGATGCT
(配列番号10)GCTCTGGCTTGTTCCTCACTACTC
GAPDH用のプライマーセット
(配列番号7)TGCACCACCAACTGCTTAGC
(配列番号8)TCTTCTGGGTGGCAGTGATG
5週齢の雄性Balb/cマウスを、対照群、エビスグサ種子投与群の2群に分け、対照群には通常の粉末飼料を、エビスグサ種子群には、エビスグサ種子熱水抽出物を1.2%混合した粉末飼料を、14日間自由摂取させた。大腸組織からRNAを抽出し、試験例1と同様の方法で遺伝子発現解析を行った。遺伝子発現は、ムチン(MUC2)、抗菌ペプチド(REG1A)、タイトジャンクション(TJP2、CLDN4)について解析し、目的遺伝子と内部標準であるGAPDHの比率から発現量を算出した。尚、遺伝子発現解析に使用したプライマーは次の通りである。
(配列番号11)CACTCCCTCTTCACCTCCAG
(配列番号12)GCCCTGTTGTGGTCTTTGAG
REG1A用のプライマーセット
(配列番号13)GCAGTGGGTCTCTGTTTCTC
(配列番号14)CTTGTATCCTGTGTTTGAAGTCAG
TJP2用のプライマーセット
(配列番号15)AAGGAAAGATGGAAGGGATGG
(配列番号16)TGTCTTCAAAGTCACTGATGAG
CLDN4用のプライマーセット
(配列番号17)GTCATCAGCATCATCGTGGG
(配列番号18)CCACCATAGGGTTGTAGAAGTC
GAPDH用のプライマーセット
(配列番号19)GTCATCAGCATCATCGTGGG
(配列番号20)CCACCATAGGGTTGTAGAAGTC
炎症性腸疾患のモデルとしてDSS(デキストラン硫酸ナトリウム)誘発マウスを用いた。5週齢の雄性Balb/cマウスに、デキストラン硫酸ナトリウム(MP Biochemicals製)を水に溶解させ摂取させた。試験では、対照群、大腸炎群、大腸炎+エビスグサ種子群の3群を設けた。大腸炎+エビスグサ種子群には、エビスグサ種子熱水抽出物を1.2%混合した粉末飼料を、DSS投与5日前から自由摂取させた。DSS投与翌日から、1日1回、体重の測定と、便性状を目視によりスコア判定を行った。便性状のスコアは、下痢について0点(正常)1点(軟便)2点(下痢便)3点(水様便)とし、血便について0点(正常)1点(便に血が混じる)2点(肛門に血液が付着)3点(肛門から常に出血)とした。下痢と血便スコアの合計を個体当りの大腸炎スコアとして算出した。DSS投与9日目に、大腸組織の長さを計測し、大腸長とした。また、大腸組織の遺伝子発現解析は試験例1と同様の方法で行い、タイトジャンクション(TJP2、CLDN4)、炎症性サイトカイン(IL-6、TNFα)について解析し、目的遺伝子と内部標準であるGAPDHの比率から発現量を算出した。
(配列番号15)AAGGAAAGATGGAAGGGATGG
(配列番号16)TGTCTTCAAAGTCACTGATGAG
CLDN4用のプライマーセット
(配列番号17)GTCATCAGCATCATCGTGGG
(配列番号18)CCACCATAGGGTTGTAGAAGTC
IL-6用のプライマーセット
(配列番号21)ACTCCCAACAGACCTGTCTATACCA
(配列番号22)TCCACGATTTCCCAGAGAACA
TNFα用のプライマーセット
(配列番号23)GCCAGCCGATGGGTTGTA
(配列番号24)GGCAGCCTTGTCCCTTGA
GAPDH用のプライマーセット
(配列番号19)TGGAGAAACCTGCCAAGTATG
(配列番号20)CCCTCAGATGCCTGCTTCA
肌荒れに悩む男女22名に、処方例1のエビスグサ種子熱水抽出物を含有する顆粒剤を3ヶ月間摂取させた。その結果、肌の角質水分量、表皮水分保持能が上昇した。また、肌荒れ改善作用についてアンケート調査をおこなったところ、表10に示す様に極めて優れた肌荒れ改善作用が認められた。
Claims (2)
- エビスグサ種子を含有することを特徴とする、腸管上皮細胞のムチン産生促進剤(腸管バリア機能向上剤、内服用肌荒れ改善剤を除く)。
- エビスグサ種子を含有することを特徴とする、腸管上皮細胞の抗菌ペプチド産生促進剤(腸管バリア機能向上剤、内服用肌荒れ改善剤を除く)。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2018128700A JP7168196B2 (ja) | 2018-07-06 | 2018-07-06 | 腸管バリア機能向上剤 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2018128700A JP7168196B2 (ja) | 2018-07-06 | 2018-07-06 | 腸管バリア機能向上剤 |
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Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2020007255A JP2020007255A (ja) | 2020-01-16 |
JP7168196B2 true JP7168196B2 (ja) | 2022-11-09 |
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ID=69150632
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
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JP2018128700A Active JP7168196B2 (ja) | 2018-07-06 | 2018-07-06 | 腸管バリア機能向上剤 |
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Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2000128728A (ja) | 1998-10-20 | 2000-05-09 | Ichimaru Pharcos Co Ltd | 化粧料組成物 |
JP2008007473A (ja) | 2006-06-30 | 2008-01-17 | Suntory Ltd | 決明子抽出物 |
CN102125212A (zh) | 2011-01-23 | 2011-07-20 | 徐国元 | 一种保健减肥产品及其制备方法 |
JP3213508U (ja) | 2017-06-30 | 2017-11-16 | 株式会社kimitan house | 体質改善効果を高めた食物用生薬材料及びこれを入れた体質改善用主食材料と副食材料 |
-
2018
- 2018-07-06 JP JP2018128700A patent/JP7168196B2/ja active Active
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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JP2000128728A (ja) | 1998-10-20 | 2000-05-09 | Ichimaru Pharcos Co Ltd | 化粧料組成物 |
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JP3213508U (ja) | 2017-06-30 | 2017-11-16 | 株式会社kimitan house | 体質改善効果を高めた食物用生薬材料及びこれを入れた体質改善用主食材料と副食材料 |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
PLOS ONE,2015年09月16日,pp. 1-16,DOI:10.1371/journal.pone.0138078 |
腸内細菌学雑誌,2011年,第25巻,第4号,pp. 213-219 |
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---|---|
JP2020007255A (ja) | 2020-01-16 |
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